阅读说明：本技术 一种铁皮石斛多糖的提取纯化方法 (Extraction and purification method of dendrobium officinale polysaccharide ) 是由 邵平 千佩玉 潘杰峰 于 2020-04-25 设计创作，主要内容包括：一种铁皮石斛多糖的提取纯化方法,包括：(1)取铁皮石斛粉末充分分散于纯水中得到粗原料液；(2)粗原料液通过微滤膜去除不溶性杂质得到渗透液1和截留液1；(3)渗透液1通过大孔超滤膜进行超滤处理并收集渗透液2和截留液2；(4)截留液2中加入可食用碱金属无机盐的水溶液进行稀释后通过大孔超滤膜进行超滤处理得到渗透液3和截留液3；(5)渗透液2和渗透液3合并加入电渗析装置中脱盐,并收集淡室溶液和浓室溶液；(6)淡室溶液通过小孔超滤膜进行超滤处理,收集截留液4与渗透液4；(7)截留液4经冷冻干燥制得铁皮石斛多糖。本发明方法在提高铁皮石斛多糖的提取率的同时解决了铁皮石斛中有毒重金属富集的问题。(A method for extracting and purifying dendrobium officinale polysaccharide comprises the following steps: (1) fully dispersing dendrobium officinale powder in pure water to obtain a crude raw material liquid; (2) removing insoluble impurities from the crude raw material solution through a microfiltration membrane to obtain a penetrating fluid 1 and a trapped fluid 1; (3) the penetrating fluid 1 is subjected to ultrafiltration treatment by a macroporous ultrafiltration membrane, and a penetrating fluid 2 and a trapped fluid 2 are collected; (4) adding an aqueous solution of edible alkali metal inorganic salt into the trapped fluid 2, diluting, and performing ultrafiltration treatment by a macroporous ultrafiltration membrane to obtain a penetrating fluid 3 and a trapped fluid 3; (5) combining the penetrating fluid 2 and the penetrating fluid 3, adding the mixture into an electrodialysis device for desalting, and collecting a light chamber solution and a thick chamber solution; (6) performing ultrafiltration treatment on the solution in the dilute chamber through a small-pore ultrafiltration membrane, and collecting trapped fluid 4 and penetrating fluid 4; (7) and (4) freeze-drying the trapped fluid 4 to obtain the dendrobium officinale polysaccharide. The method provided by the invention improves the extraction rate of the dendrobium officinale polysaccharide and solves the problem of enrichment of toxic heavy metals in the dendrobium officinale.)

一种铁皮石斛多糖的提取纯化方法

(一)技术领域

本发明属于天然多糖提取纯化技术领域，涉及一种铁皮石斛多糖的提取纯化方法。

(二)背景技术

石斛在我国药用保健领域有悠久的历史，对铁皮石斛的进一步加工多为提取其主要的活性成分——水溶性石斛多糖，但是有研究表明铁皮石斛中含有部分溶解于盐溶液的多糖也具有抗氧化、抗肿瘤等功效，对于铁皮石斛中盐溶性多糖的忽视造成了资源浪费并导致其加工成本较高。膜分离技术作为成本较低的物理提纯方法，不引入杂质且操作条件温和，可有效减少加工过程对活性成分的影响，但是超滤提取只允许比超滤膜孔径小的分子通过，而部分多糖因为与金属离子发生分子间络合使分子量增加，所以传统的超滤提取往往使这部分石斛多糖在加工过程中被浪费，同时传统超滤技术也没有解决如何提取溶解于盐溶液的铁皮石斛多糖的问题。

另一方面，土壤、水源、等被污染通常会引起植物体内富集一些重金属，重金属很容易在人体内蓄积,并且会在人体内长时间滞留，而多糖对于金属离子良好的吸附性会造成多糖中重金属离子超标问题，严重影响多糖的品质及人体健康。但是现有的多糖提取技术都没有重视重金属超标的问题，目前所常用的重金属离子脱除技术多为用于废水处理(如沉淀法或吸附法)，这些方法可在一定程度上降低部分重金属离子的含量，但是用于去除与多糖络合的金属离子则存在一定难度，且容易产生废渣，不仅造成环境污染同时也造成资源浪费。

专利CN102532332A公开了一种盐藻多糖的制备方法，该方法以褐藻为原料通过过滤和乙醇沉淀的方法制得粗三七多糖，并利用超滤技术纯化岩藻多糖，采取电渗析法对多糖溶液进行脱盐处理。但此法所制备的岩藻多糖含量较低，仅有35％左右，且专利中对于终产品多糖的纯度也并未明确描述。已公开专利106317243A公布了一种枸杞多糖的制备方法，该方法采用超滤和反渗透浓缩的方法提取枸杞多糖，并利用电渗析的方法进行脱盐，通过四级不同膜孔径的超滤和电渗析操作得到脱盐率为92％，纯度为65％的多糖。该方法提取多糖的得率较高，但多糖纯度较低且操作繁琐，同时专利中提出了枸杞多糖中微量元素指标(重金属离子Pb应小于0.5mg/Kg，As应小于0.3mg/Kg)，但该专利并未表明通过该方法制备的枸杞多糖中重金属离子含量。

美国专利US8097086公开了一种生产具有高果糖含量的糖浆的方法，该方法通过主要超滤、电渗析的方法部分地除去糖浆中山梨糖醇和盐离子，具有一定的优越性，但是该发明方法仅仅采用两种分离方法组合的方式提纯，提取步骤较为繁琐，同时该专利也没有解决超滤脱除的醇、酚的回收问题。美国专利US6372049公开了一种通过电化学处理、超滤、电渗析、离子交换技术制备精制糖浆的方法，该方法通过富含高分子组分和盐的扩散能力进行低效率超滤，会造成超滤膜的严重污染和资源的严重浪费。

为了改善提取纯化铁皮石斛多糖时面临的这些问题，对于天然多糖的纯化工艺方法需要进一步优化改进。

(三)

发明内容

本发明针对现有问题提供了一种操作简单、环保安全、高效、成本低、适合于工业化生产的铁皮石斛多糖的提取纯化方法，该方法在提高铁皮石斛多糖的提取率的同时解决了铁皮石斛中有毒重金属富集的问题。

本发明采取的技术方案如下：

一种铁皮石斛多糖的提取纯化方法，包括如下步骤：

(1)取铁皮石斛粉末充分分散于纯水中，得到粗原料液；

(2)步骤(1)得到的粗原料液通过微滤膜去除不溶性杂质，得到渗透液1和截留液1；

(3)步骤(2)收集的渗透液1通过截留分子量为100-800kDa的大孔超滤膜进行超滤处理并收集渗透液2和截留液2；

(4)步骤(3)收集的截留液2，加入0.5-1.5mol/L的可食用碱金属无机盐的水溶液进行稀释，充分搅拌溶解得到多糖粗原料液(该多糖粗原料液中还含有氨基酸、多酚和部分蛋白质)，通过截留分子量为100-800kDa的大孔超滤膜进行超滤处理，收集渗透液3和截留液3；

(5)将经步骤(3)和步骤(4)处理后得到的渗透液2和渗透液3合并加入电渗析装置中脱盐，并收集淡室溶液和浓室溶液；

(6)步骤(5)得到的淡室溶液通过截留分子量为3kDa-8kDa的超滤膜进行超滤处理，收集截留液4与渗透液4；该步骤可以去除淡室溶液中的寡糖、单糖、多酚、黄酮等物质；

(7)步骤(6)得到的截留液4，经冷冻干燥制得铁皮石斛多糖。

本发明步骤(1)中，所述粗原料液的浓度优选为10-30wt％。

本发明步骤(2)中，优选微滤膜处理条件为：操作温度25-50℃，跨膜压力0.3-0.6MPa，料液流速0.2-0.5L/min。由于微滤膜装置的设计原因，每次微滤必然产生一定体积的不进入后续处理步骤的截留液，其中含有的铁皮石斛多糖将造成浪费，因此优选将得到的截留液1用纯水稀释后再通过微滤膜处理，微滤膜重复处理次数为2次以上，然后合并渗透液1。这样操作可以最大限度地降低截留液中铁皮石斛多糖的残留量，有利于提高多糖提取率，但是考虑到经济性，优选微滤膜重复处理的次数为2-6次，最优选5次。所述的截留液1用纯水稀释时，优选截留液1与稀释用纯水的体积比为3:8-12。

本发明步骤(3)中，超滤膜的截留分子量会影响多糖提取率和多糖质量，优选大孔超滤膜的截留分子量为300-800kDa，最优选为500kDa，这样可获得较高的多糖提取率、较高的多糖纯度以及较低的重金属含量。作为优选，步骤(3)中，超滤处理条件为：操作温度25-50℃，跨膜压力0.3-0.6MPa，料液流速0.2-0.5L/min。由于超滤膜装置的设计原因，每次超滤必然产生一定体积的不进入后续处理步骤的截留液，其中含有的铁皮石斛多糖将造成浪费，因此优选将步骤(3)得到的截留液2用纯水稀释后再重复进行超滤膜处理，重复超滤次数为2-5次，这样操作可以最大限度地降低截留液2中铁皮石斛多糖的残留量，有利于提高多糖提取率。所述的截留液2用纯水稀释时，优选截留液2与稀释用纯水的体积比为3:8-12。但尽管如此，经步骤(3)超滤处理后，尚有部分多糖未能被提取，其中包括：部分不溶于水但溶解于盐溶液的也具有抗氧化、抗肿瘤等功效的多糖；以及部分因为与金属离子发生分子间络合使分子量增加从而无法通过超滤膜的多糖。为了提高多糖提取率，本发明对超滤处理后的截留液2进行步骤(4)的处理。

本发明步骤(4)，所加入的可食用碱金属无机盐优选为NaCl、Na₂SO₄、KCl、K₂SO₄中的一种或几种的混合，特别优选所述的可食用碱金属无机盐的水溶液为0.5-1.5M的NaCl水溶液或0.5-1M的Na₂SO₄水溶液，最优选0.5M的NaCl水溶液或Na₂SO₄水溶液。截留液2先用可食用碱金属无机盐水溶液稀释后再进行超滤，一方面有助于提高多糖的提取率，另一方面有助于减少后续膜处理中膜表面形成污染层造成多糖阻滞，因为料液浓度太大，更易在膜表面形成浓差极化现象。而在截留液中加入一定浓度的可食用碱金属无价盐，一方面有助于继续提取可溶解于盐溶液的多糖，增加多糖的提取率；另一方面，可食用碱金属无机盐使得二价或高价有害金属离子(如铜、砷、铅、汞、镉离子)与多糖的结合力降低，使部分与多糖络合的二价或高价金属离子转为游离态，同时原来与二价或高价有害金属离子络合的多糖分子量也因此降低从而易于通过超滤膜。所以，步骤(4)通过加入一定浓度的可食用无机盐使得有更多的二价或高价有害金属离子转为游离态便于后续电渗析去除，也使得有更多多糖能通过后续的超滤处理进入渗透液3，从而提高多糖提取率。与步骤(3)类似，步骤(4)中，优选大孔超滤膜的截留分子量为300-800kDa，最优选为500kDa。作为优选，步骤(4)中，超滤处理条件为：料液pH＝4-10(更优选6-7)，操作温度25-50℃(更优选30-35℃)，跨膜压力0.3-0.6MPa，料液流速0.2-0.5L/min。所述料液pH可通过加入盐酸或氢氧化钠来进行调节。同样由于超滤膜装置的设计原因，优选将步骤(4)得到的截留液3用无机盐水溶液稀释后再重复进行超滤膜处理，重复超滤次数为2-5次，这样操作可以最大限度地降低截留液3中铁皮石斛多糖的残留量，提高多糖提取率。所述的截留液2或3用无机盐水溶液稀释时，优选截留液2或3与无机盐水溶液的体积比为3:8-12，最优选为3:10。

本发明步骤(5)中，将渗透液2和渗透液3合并进行电渗析处理，由于电渗析是溶液中的带电粒子在电场力作用下发生跨膜迁移，所以在电渗析过程中单价离子和二价或高价离子存在竞争性传输，加入可食用无机离子有利于二价或高价重金属离子的分离，因此，通过该步电渗析处理，可以有效去除料液中的二价或高价重金属离子以及后期加入的无机盐(如NaCl、Na₂SO₄等)。

本发明步骤(5)中，所述电渗析装置包括直流电源、与所述电源正极连接的阳极板、与所述直流电源负极连接的阴极板和置于所述阳极板与所述阴极板之间的膜堆，所述的膜堆分别与阳极板和阴极板之间构成阳极室和阴极室，所述膜堆由阳离子交换膜、阴离子交换膜依次间隔排列组装而成，且最外层的膜均为阳离子交换膜，相邻两张膜之间由一张隔板隔开，相邻的一组阳离子交换膜、阴离子交换膜、阳离子交换膜构成一个两隔室(浓室/淡室)的电渗析单元，所述膜堆中的电渗析单元至少为一个；所述的阳极室和阴极室分别通过管道连接极液罐形成回路(即可利用循环泵使极液罐中的极液流入阳极室和阴极室，然后使阳极室和阴极室里的料液又流回极液罐)，所述的淡室和浓室分别通过管道连接淡液罐和浓液罐形成各自的回路。对于本发明，在电渗析开始前，极液罐、淡液罐、浓液罐中分别注入极液(优选3wt.％的硫酸钠溶液)、渗透液2和渗透液3的混合液、纯水。本领域技术人员可以根据实际情况对膜进行筛选并设置合适的电渗析操作条件。一般来说，电渗析装置的膜的筛选是根据膜堆电阻和电流效率，以较低的电阻和较高的电流效率为宜，这意味着较低的工艺成本；而电渗析条件根据料液性质和膜电阻决定，在极限电流密度内选择相应的电压电流。对于本发明而言，对于阳离子交换膜和阴离子交换膜的选择无特殊要求，根据实际情况选择常规的市售阳离子交换膜和阴离子交换膜即可。本发明对于电渗析条件也无特殊要求，比如，电渗析的操作条件可设置为：室温，电压5-30V，料液流速为10-40L/h，电渗析操作一般在电导率值趋于稳定时停止操作，时长通常不超过1h，电导率不超过2mS/cm，以确保加入的盐被脱除。

本发明步骤(6)中，优选超滤膜的截留分子量为3-5kDa，更优选5kDa，该截留分子量可以更好地去除寡糖、单糖、多酚、黄酮等物质。作为优选，步骤(6)中，超滤处理条件为：温度25-50℃，跨膜压力0.3-0.6MPa，料液流速0.2-0.5L/min。并且，为了尽可能地去除寡糖、单糖、多酚、黄酮等物质，优选将得到的截留液3用纯水稀释后再次进行超滤膜处理，超滤膜总处理次数为2次以上，但是考虑到经济性，优选超滤膜总处理次数为2-6次，最优选3次。所述的截留液3用纯水稀释时，优选截留液3与稀释用纯水的体积比为3:8-12。

本发明步骤(7)中，也可先对截留液4进行浓缩后再进行冷冻干燥。对于浓缩的方式没有特殊要求，比如纳滤、旋蒸等方式均能实现本发明的浓缩目的，但是考虑到工业化生产的要求，优选采用纳滤浓缩。本发明对于纳滤浓缩采用的纳滤膜和操作参数没有特别要求，能实现浓缩目的即可。比如本发明的

具体实施方式

中，采用的截留分子量(mwco)为3kDa-83kDa的纳滤膜，操作条件为：室温，跨膜压力0.3-0.6MPa，料液流速0.2-0.5L/min。

本发明的优点和产生的有益效果：

(1)本发明提供的铁皮石斛多糖的提取纯化方法，采用超滤技术提取铁皮石斛中的水溶性多糖后，在截留液中加入一定质量浓度的无机盐继续提取并配合电渗析操作，一方面提高了多糖得率，另一方面有效去除了多糖中的重金属离子，通过本发明方法制备的多糖具有高纯度、低重金属含量的特点。

(2)本发明基于超滤、电渗析两种膜技术制备铁皮石斛多糖的方法，具有环保、安全、高效可连续操作、低成本等特点，适用于工业化生产。

(四)附图说明

图1是制备石斛多糖的常规工艺路线。

图2是本发明采用的制备石斛多糖的工艺路线。

图3是本发明实施例采用的电渗析装置的原理示意图，其中淡液罐、浓液罐、极液罐、循环泵等未示出。

图4是实施例1的电渗析过程中提取物中金属离子的含量随时间变化曲线。

图5是实施例1的电渗析过程中浓室和淡室的电导率随时间变化曲线。

(五)具体实施方式

下面以具体实施例对本发明的技术方案做进一步说明，但本发明的保护范围不限于此。

实施例1

①、取200g铁皮石斛粉末充分溶解于1000mL纯水中得到铁皮石斛原料液；

②、铁皮石斛原料液通过孔径为0.1μm的微滤膜去除不溶性杂质(微滤条件为温度：25℃，跨膜压力：0.3MPa，溶液流速0.4L/min)，共进行五次微滤，每次微滤的截留液都用1000mL纯水稀释后再进行下一次微滤。合并五次微滤的渗透液共5000mL；

③、将步骤②中渗透液5000mL通过500kDa的超滤膜进行死端超滤提取其中的多糖(超滤条件为温度：25℃、跨膜压力：0.3MPa，溶液流速0.4L/min)，所得截留液加入1000mL纯水后重复超滤，重复超滤3次，收集到截留液300mL和渗透液7700mL；

④、通过超滤膜收集到的截留液300mL加入体积为1000mL 0.5mol/L的NaCl水溶液(混合液pH为7)，充分搅拌，然后通过500kDa的超滤膜进行死端超滤，所得截留液再次加入1000mL上述盐溶液重复超滤，重复超滤3次，收集截留液和渗透液。

⑤、合并步骤④和步骤③所得的渗透液。得到的渗透液中含有多糖、寡糖、单糖、重金属盐及加入的氯化钠。将该渗透液加入电渗析装置的淡液罐中，浓液罐中加入纯水，极液罐中加入3％无水硫酸钠水溶液(装置示意图见图3)，电渗析装置的膜堆由5组电渗析单元组成，阳离子交换膜型号为TRJCM，购自北京廷润膜技术开发股份有限公司，阴离子交换膜型号为TRJAM，购自北京廷润膜技术开发股份有限公司，膜有效面积为6.4×10^-3m ²，阳极和阴极均为表面涂有金属钌的电极。开启循环泵使料液开始循环并通电进行电渗析，操作条件为电压：20V，料液流速：40L/h，在电导率趋于稳定时，停止操作，操作时间：45min，并收集淡室溶液。在电渗析过程中，每隔5min取淡室溶液样品进行冷冻干燥，采用ICP-MS对冻干物中的重金属含量进行测定，结果如图4所示。在电渗析过程中，每隔5min取淡室溶液和浓室溶液样品测定电导率，结果如图5所示。同时，经过测定，经电渗析脱盐处理后的淡室溶液中NaCl的浓度在24.3mg/L，远低于人体血液中钠盐含量。

⑥、步骤⑤得到的淡室溶液通过截留分子量为5kDa的超滤膜超滤三遍(超滤条件为温度：25℃、跨膜压力：0.3MPa，溶液流速0.4L/min)去除寡糖、单糖、多酚、黄酮等物质，每次超滤的截留液都用1000mL纯水稀释后再进行下一次超滤。

⑦、上述步骤⑥所得截留液通过实验型冷冻干燥机干燥多糖，得到重金属离子含量(铅含量+铜含量+镉含量)为2.96mg·Kg^-1、多糖纯度为87.13％的铁皮石斛多糖83.9g，多糖中铅含量由电渗析前的22.6mg/Kg降至0.31mg/Kg，铜含量由8.57mg/Kg降至0.63mg/kg，镉含量由4.91mg/Kg降至2.02mg/Kg。

对比例1：

步骤①～②同实施例1；

③五次微滤得到的5000mL渗透液通过500kDa的PES平板膜进行死端超滤提取其中的多糖(超滤条件为温度：25℃、跨膜压力：0.3MPa，溶液流速0.4L/min)，所得截留液加入1000mL纯水后重复超滤，重复超滤6次，收集合并到渗透液。

④通过超滤膜收集到的渗透液加入电渗析装置的淡液罐中(电渗析装置同实施例1)，电渗析装置的膜堆由5组电渗析单元组成，阳离子交换膜型号为TRJCM，购自北京廷润膜技术开发股份有限公司，阴离子交换膜型号为TRJAM，购自北京廷润膜技术开发股份有限公司，膜有效面积为6.4×10^-3m²，阳极和阴极均为表面涂有金属钌的电极。极液罐：3％无水硫酸钠水溶液，浓液罐：纯水。开启循环泵使料液开始循环并通电进行电渗析，操作条件为电压：20V，料液流速：40L/h，在电导率趋于平稳时停止操作，操作时间：15min，并收集淡室溶液。

⑤所得淡室溶液通过5kDa的PES平板膜超滤三遍(超滤条件为温度：25℃、跨膜压力：0.3MPa，溶液流速0.4L/min)去除寡糖、单糖、多酚、黄酮等物质，每次超滤的截留液都用1000mL纯水稀释后再进行下一次超滤，收集截留液与渗透液。

⑥步骤⑤所得截留液通过实验型冷冻干燥机干燥，得到重金属离子含量为5.10mg·Kg^-1、多糖纯度为78.11％的铁皮石斛多糖78.12g，多糖中铅含量为1.13mg/Kg，铜含量为1.70mg/kg，镉含量为2.27mg/Kg。

实施例2-4

改变步骤④中NaCl水溶液的浓度为1mol/L(实施例2)、1.5mol/L(实施例3)、2mol/L(实施例4)，其他操作同实施例1，得到铁皮石斛多糖，所得铁皮石斛多糖的质量、纯度和重金属含量见下表1：

表1

^a步骤④加入的氯化钠水溶液浓度，^b电渗析结束后淡室溶液中NaCl浓度.

实施例5

步骤①-③同实施例1；

④通过超滤膜收集到的截留液300mL加入体积为1000mL 0.5mol/L的Na2SO4水溶液，并充分搅拌，然后然后通过500kDa的超滤膜进行死端超滤，所得截留液再次加入1000mL上述盐溶液重复超滤，重复超滤3次，收集截留液和渗透液。

⑤合并步骤④所得和步骤③的渗透液，得到的渗透液中含有多糖、寡糖、单糖、重金属盐及加入的氯化钠。将该溶液加入电渗析装置的淡液罐中(装置示意图见图3)，在浓液罐中加入纯水，在极液罐中加入3％硫酸钠水溶液。电渗析装置的膜堆由5组电渗析单元组成，所述的阳离子交换膜采用CEM-Type II，所述的阴离子交换膜采用AEM-Type II，购自于日本富士胶片株式会社，每张膜的有效面积为6.4×10^-3m²。阳极和阴极均为表面涂有金属钌的电极。开启循环泵使料液开始循环并通电进行电渗析，操作条件为电压：20V，料液流速：40L/h，操作时间：45min，并收集淡室溶液。

⑥步骤⑤得到的淡室溶液通过截留分子量为5kDa的超滤膜循环超滤三遍(超滤条件为温度：25℃、跨膜压力：0.3MPa，溶液流速0.4L/min)去除寡糖、单糖、多酚、黄酮等物质，每次超滤的截留液都用1000mL纯水稀释后再进行下一次超滤。

⑦步骤⑥所得截留液通过实验型冷冻干燥机干燥，得到重金属离子含量为2.19mg·Kg^-1、多糖纯度为87.13％的铁皮石斛多糖82.4g，多糖中铅含量为0.28mg/Kg，铜含量为0.68mg/kg，镉含量为1.32mg/Kg。

实施例6

步骤④中改成加入1000mL 1mol/L的Na₂SO₄水溶液，其他操作同实施例5，最后得到重金属离子含量为1.97mg·Kg^-1、多糖纯度为81.6％的铁皮石斛多糖76.7g，其中铅含量为0.36mg/Kg，铜含量为0.77mg/kg，镉含量为1.28mg/Kg。

实施例7-11

分别改变步骤④中的超滤操作温度为30℃(实施例7)、35℃(实施例8)、40℃(实施例9)、45℃(实施例10)、50℃(实施例11)，其他操作同实施例1，得到铁皮石斛多糖，所得铁皮石斛多糖的质量、纯度和重金属含量见下表2：

表2

实施例12-17

分别用盐酸或NaOH调节步骤④中的超滤料液的pH值为4(实施例12)、5(实施例13)、6(实施例14)、8(实施例15)、9(实施例16)、10(实施例17)，其他操作同实施例1，得到铁皮石斛多糖，所得铁皮石斛多糖的质量、纯度和重金属含量见下表3：

表3

	pH	多糖质量/g	多糖纯度/％	重金属含量/mg·Kg<sup>-1</sup>
					实施例12	4	78.6	79.6	3.14
实施例13	5	82.11	86.9	3.03
					实施例14	6	84.1	88.3	2.99
实施例1	7	83.9	87.13	2.96
					实施例15	8	82.6	80.9	4.5
实施例16	9	81.9	74.7	4.98
					实施例17	10	74.6	64.3	7.8

实施例18-19

步骤③和④中超滤膜的截留分子量均改为300kDa(实施例18)或800kDa(实施例19)，其他操作同实施例1，得到铁皮石斛多糖，所得铁皮石斛多糖的质量、纯度和重金属含量见下表4：

表4

实施例20-21

步骤⑥中超滤膜的截留分子量改为3kDa(实施例20)、8kDa(实施例21)，其他操作同实施例1，得到铁皮石斛多糖，所得铁皮石斛多糖的质量、纯度和重金属含量见下表5：

表5：