阅读说明：本技术 一种绣球菌菌丝体口服液的制作方法 (Preparation method of sparassis crispa mycelium oral liquid ) 是由 李航 单文琪 于 2019-09-30 设计创作，主要内容包括：本发明涉及食品加工技术领域,公开的一种绣球菌菌丝体口服液的制作方法,是通过发酵以及酶解的方法,将绣球菌菌丝体中各类大分子活性营养成分转化为人体更易吸收的小分子营养物的方法制作的,其具体步骤是绣球菌母种的制作、绣球菌液体菌种的制作、绣球菌菌丝发酵液的制作。本发明避免了存放时间短的缺陷,使得最终产品更易于存放,保证产品的安全性。还可以应用在美容产品以及医用营养食物及营养补充剂,以及其的生产加工领域。(The invention relates to the technical field of food processing, and discloses a preparation method of a sparassis crispa mycelium oral liquid, which is prepared by converting various macromolecular active nutrient components in sparassis crispa mycelium into small molecular nutrients which are easier to absorb by a human body through fermentation and enzymolysis methods. The invention avoids the defect of short storage time, so that the final product is easier to store, and the safety of the product is ensured. Can also be applied to the fields of beauty products, medical nutrition foods and nutrition supplements and the production and processing of the beauty products and the medical nutrition foods and the nutrition supplements.)

一种绣球菌菌丝体口服液的制作方法

技术领域

本发明涉及食品加工技术领域，尤其涉及一种绣球菌菌丝体口服液的制作方法。

背景技术

绣球菌，又名绣球菇，拉丁名为：Sparassis crispa，是非褶孔菌目，绣球菌科，绣球菌属，子实体中等至大型肉质，肉质由一个粗壮的柄上发生许多分枝，枝端形成无数曲折的瓣片，形似巨大的绣球而得名。绣球菌的资源蕴藏量比较稀少，被誉为“万菇之王”是世界上非常珍惜的名贵药食两用菌菇。

一、绣球菌含有大量β葡聚糖，绣球菌的最大特点是含有大量β葡聚糖。根据日本食品分析中心的分析，每100g绣球菌含有β-葡聚糖高达43.6g，比灵芝和姬松茸高出3~4倍。可以说，绣球菌所含的β-葡聚糖为菇类之最。葡聚糖是由葡萄糖单体聚合而成的多糖，分为α型和β型，α型葡聚糖如淀粉等，是机体能量的主要来源，不具备生物活性。β型葡聚糖是一种生物活性物质，经医学研究证实，具有免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗辐射、降血糖、降血脂、保肝等多种功能。研究还发现，大多数具有抗肿瘤活性的多糖都是带有β（1-6）糖苷键分支的β（1-3）D葡聚糖。有研究证明，来自真菌的β（1-3）D葡聚糖通常具有抑制的肿瘤作用。绣球菌中的葡聚糖70%以上是β（1-3）D葡聚糖，具有良好的抗肿瘤、免疫调节以及提高造血功能等功效。

二、绣球菌含有大量抗氧化物质，人体内的自由基会引起生物细胞氧化性损伤而导致机体老化，并破坏机体的抗病、防御能力、导致癌症和心血管疾病等慢性病。如今，天然食物的抗氧化能力已经受到人们的普遍重视，其中，超氧化物歧化酶SOD能有效清除体内的自由基，防止活性氧对机体的伤害，抗氧化、抗衰老的作用。据测定，绣球菌中超氧化物歧化酶的含量位居各种食用菌之首。

三、绣球菌含有大量维生素和矿物质，绣球菌含有维生素C、维生素E，其维生素E含量位居菌藻类食物前列，这些维生素具有抗氧化作用。绣球菌还含有麦角固醇，在阳光和紫外线照射下可转变为维生素D，能促进钙磷吸收，有利于骨骼形成，预防儿童佝偻病、成人骨质疏松症和骨质软化症。绣球菌含有相当高的钾元素，而钠的含量较低，这种高钾低钠食品有利尿作用，对高血压患者是十分有益。

基于绣球菌中超氧化物歧化酶的含量以及维生素E含量均位居菌藻类食物前列，在防止活性氧对机体的伤害，抗氧化、抗衰老等方面效果显著。为此急需要一种抗氧化、抗衰老的绣球菌的口服产品生产工艺。

发明内容

为克服现有技术的不足，本发明提供一种绣球菌菌丝体口服液的制作方法。还可以在美容产品以及医用营养食物及营养补充剂的生产加工领域等

为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案

一种绣球菌菌丝体口服液的制作方法，是通过发酵以及酶解的方法，将绣球菌菌丝体中各类大分子活性营养成分转化为人体更易吸收的小分子营养物的方法制作的，其具体步骤如下：

1）、绣球菌母种的制作，取绣球菌子实体肉厚，未完全伸展的部位，用无菌水冲洗干净，在无菌箱内，用手术刀挑取一小块组织移接在PDA斜面上；放置于25℃恒温培养箱培养11至13天，待新生菌丝生长旺盛，再将新生菌丝接种于PDA平板培养基上，25℃纯化培养，所得纯化菌丝在无菌条件下接种在PDA斜面试管中，放置于25℃恒温培养箱暗培养，待菌丝长满后，再放置于4℃冰箱内保存，即得到绣球菌母种；

2）、绣球菌液体菌种的制作：

a、称取马铃薯，去皮200g，葡萄糖20g，蛋白胨2g；

b、马铃薯切片，加水1L，煮沸20分钟，用纱布过滤得其汁备用；

c、马铃薯汁加入上述葡萄糖，蛋白胨，用纯净水定容至1L，得到液体菌种培养基；

d、将液体菌种培养基分装于250ml抽滤瓶中，装入量为100ml，瓶口用棉塞塞好，在0.1Mpa，121℃高压蒸汽灭菌30分钟；

e、在无菌条件下，经自然冷却至室温的液体培养基内，接入绣球菌母种菌块6--8块，于24℃--26℃条件下，静止培养24小时；待菌丝萌发后，再放置于电磁要床上培养，将温度控制在24℃--26℃条件下，培养7天；待培养液清澈透明，其中悬浮着大量菌丝球，即得到绣球菌液态菌种；

3）、绣球菌菌丝发酵液的制作:

a、绣球菌液体培养基的制作：称取淀粉750g，玉米粉500g，蛋白胨120g，葡萄糖1200g,纯净水50L，配制成绣球菌液体培养基；

b、绣球菌液体培养基灭菌：将上述液体培养基置于食用菌液体菌种发酵罐内，打开启动开关，当温度达到100℃时，排气阀微开，温度达到121℃时自动计时40分钟；其中空气滤芯要提前灭菌，此时安装上，打开气泵吹干滤芯；在灭菌过程中，为避免阀门处成为灭菌死角，需要在保压过程中每隔15分钟排料一次，共三次，每次排料3分钟；

c、液体培养基的降温：灭菌结束后将夹层进水阀门打开通水冷却；在火焰的保护下将过滤器进气管接在发酵罐进气阀上，当发酵罐压力降至0.1兆帕以下，进气系统气压高于罐内压0.02兆帕以上时，打开进气阀向罐内送气；打开进气阀时要慢慢地，防止料液倒流，造成污染；当罐内温度降至28℃以下时即可进行接种操作；

d、绣球菌液体菌种的接种：接种时需要两人配合操作；首先根据发酵罐接种口大小用粗铁丝做一个圆圈，铁丝圈上包裹上脱脂棉，并用95%酒精浸湿备用；再备一条湿毛巾，放在接种口旁边，待熄灭火用；接种方法：

（1）用75%酒精将接种口的外盖和周围擦拭两遍；

（2）打开排气阀，当罐内压力降至接近零时，迅速关闭排气阀并点燃火圈；

（3）在火焰的保护下，打开接种口盖，将摇瓶内的绣球菌液体菌种迅速倒入罐内，旋紧接种盖；

（4）罐内升压后用湿毛巾灭掉火圈，打开排气阀，调整罐内压力在0.02~0.04兆帕进入培养状态；

e、绣球菌菌丝发酵液的培养：在25℃恒温条件下培养24小时，须每隔两小时自接种口取样一次，观察菌种萌发和生长情况；发酵罐内培养5天后，此时菌液无杂菌污染，颜色纯正，无异味，只有一种菌丝的香味，菌球数量约占总体积的80%~90%,绣球菌菌丝发酵液即可发酵结束；

4）、绣球菌口服液的制作：

a、酶解工艺：将绣球菌菌丝发酵液添加纤维素酶，蛋白酶和果胶酶进行共同酶解，控制温度在45-55℃，pH6.5-7,酶解时间1.5小时；

b、均质浓缩工艺：将酶解后的绣球菌菌丝发酵液采用胶体磨和均质机处理，调整胶体磨定子与转子的间隙为10-50微米，对发酵液中菌丝体进行破碎，胶体磨流量为1-5吨/小时；

c、高压均质机处理，调整高压均质机压力20-60MPa，高压均质流量为0.5-3吨/小时，显微镜镜检菌丝体破壁率为100％；均质处理后进行浓缩处理使固形物含量达到30-55％；

d、绣球菌口服液的灌装灭菌：将处理后的绣球菌菌丝发酵液先进行灌装，灌装完毕后在135℃的温度下，灭菌20秒，即得口服液。

由于采用如上所述的技术方案，本发明具有如下优越性：

本发明解决绣球菌营养口服液在市场上的空白，通过发酵技术的优化，以及酶解技术的更新，得到一款适合大众营养补充的新型口服液产品，在生产工艺上不断创新，为消费者提供更加健康的易于吸收的营养补充剂。

本发明属于纯发酵型，避免了各类食品添加剂的加入，同时经过深层发酵后期的酶解，将绣球菌菌丝体中各类大分子活性营养成分转化为人体更易吸收的小分子营养物，该绣球菌口服液在制作过程中严格按照无菌操作规程，制作工艺最后经过瞬时高温灭菌，使得产品更加安全健康。本发明优越性如下：

1、本发明通过对绣球菌生物发酵过程的研究，以及发酵过程中各项物理、生物指标的记录，用以制作天然发酵型营养口服液，在制作过程中无需添加任何化学药品，严格按照无菌操作要求，得到一款安全健康的食用菌口服液。

2、本发明在制作过程中采用酶解的提纯工艺，从而使食用菌细胞内的营养物质充分释放，更易于人体吸收，针对特定人群起到一定的营养补充及保健功效。

3、本发明在制作工艺后期采用瞬间高温灭活的方法，避免了存放时间短的缺陷，使得最终产品更易于存放，保证产品的安全性。

本发明还可以应用在美容产品以及医用营养食物及营养补充剂，以及其的生产加工领域等。

具体实施方式

一种绣球菌菌丝体口服液的制作方法，是通过发酵以及酶解的方法，将绣球菌菌丝体中各类大分子活性营养成分转化为人体更易吸收的小分子营养物的方法制作的，其具体步骤如下：

1）、绣球菌母种的制作：

取绣球菌子实体肉厚，未完全伸展的部位，用无菌水冲洗干净，在无菌箱内，用手术刀挑取一小块组织移接在PDA斜面上。至于25℃恒温培养箱培养12天左右，待新生菌丝生长旺盛，再将新生菌丝接种于PDA平板培养基上，25℃纯化培养，所得纯化菌丝可在无菌条件下接种在PDA斜面试管中，置于25℃恒温暗培养，待菌丝长满后，可放置于4℃冰箱内保存，即得到绣球菌母种；

2）、绣球菌液体菌种的制作：

a称取马铃薯，去皮200g，葡萄糖20g，蛋白胨2g；

b马铃薯切片，加水1L，煮沸20分钟，用纱布过滤得其汁备用；

c马铃薯汁加入上述葡萄糖，蛋白胨，用纯净水定容至1L，得到液体菌种培养基；

d将液体菌种培养基分装于250ml抽滤瓶中，装入量为100ml，瓶口用棉塞塞好，在0.1Mpa，121℃高压蒸汽灭菌30分钟；

e在无菌条件下，经自然冷却至室温的液体培养基内，接入绣球菌母种菌块6--8块，于24℃--26℃条件下，静止培养24小时；待菌丝萌发后，再放置于电磁要床上培养，将温度控制在24℃--26℃条件下，培养7天；待培养液清澈透明，其中悬浮着大量菌丝球，即得到绣球菌液态菌种；

3）、绣球菌菌丝发酵液的制作:

a绣球菌液体培养基的制作：称取淀粉750g，玉米粉500g，蛋白胨120g，葡萄糖1200g,纯净水50L，配制成绣球菌液体培养基。

b绣球菌液体培养基灭菌：将上述液体培养基置于食用菌液体菌种发酵罐内，打开启动开关，当温度达到100℃时，排气阀微开，温度达到121℃时自动计时40分钟。空气滤芯要提前灭菌，此时安装上，打开气泵吹干滤芯。在灭菌过程中，为避免阀门处成为灭菌死角，需要在保压过程中每隔15分钟排料一次，共三次，每次排料3分钟。

c液体培养基的降温：灭菌结束后将夹层进水阀门打开通水冷却。在火焰的保护下将过滤器进气管接在发酵罐进气阀上，当发酵罐压力降至0.1兆帕以下，进气系统气压高于罐内压0.02兆帕以上时，打开进气阀向罐内送气。打开进气阀时要慢慢地，防止料液倒流，造成污染。罐内温度降至28℃以下时即可进行接种操作。

d绣球菌液体菌种的接种：接种时需要两人配合操作。首先根据发酵罐接种口大小用粗铁丝做一个圆圈，铁丝圈上包裹上脱脂棉，并用95%酒精浸湿备用。再备一条湿毛巾，放在接种口旁边（待熄灭火用）。接种方法：1，用75%酒精将接种口的外盖和周围擦拭两遍。2，打开排气阀，当罐内压力降至接近零时，迅速关闭排气阀并点燃火圈。3，在火焰的保护下，打开接种口盖，将摇瓶内的绣球菌液体菌种迅速倒入罐内，旋紧接种盖。4，罐内升压后用湿毛巾灭掉火圈，打开排气阀，调整罐内压力在0.02~0.04兆帕进入培养状态。

e绣球菌菌丝发酵液的培养：在25℃恒温条件下培养24小时，可每隔两小时自接种口取样一次，观察菌种萌发和生长情况。发酵罐内培养5天后，此时菌液无杂菌污染，颜色纯正，无异味，只有一种菌丝的香味，菌球数量约占总体积的80%~90%,绣球菌菌丝发酵液即可发酵结束。

4）、绣球菌口服液的制作：

a、绣球菌口服液的酶解：将绣球菌菌丝发酵液添加纤维素酶，蛋白酶和果胶酶进行共同酶解，控制温度在45-55℃，pH6.5-7,酶解时间1.5小时。

b、绣球菌口服液的均质浓缩：将酶解后的绣球菌菌丝发酵液采用胶体磨和均质机处理，调整胶体磨定子与转子的间隙为10-50微米，对发酵液中菌丝体进行破碎，胶体磨流量为1-5吨/小时；c、再经高压均质机处理，调整高压均质机压力20-60MPa，高压均质流量为0.5-3吨/小时，显微镜镜检菌丝体破壁率为100％；均质处理后进行浓缩处理使固形物含量达到30-55％。

d、绣球菌口服液的灌装灭菌：将处理后的绣球菌菌丝发酵液先进行灌装，灌装完毕后在135℃的温度下，灭菌20秒，即得口服液。

本发明属于纯发酵型，是将绣球菌菌丝体中各类大分子活性营养成分转化为人体更易吸收的小分子营养物的方法，绣球菌菌丝体在纤维素酶与果胶酶的作用下将其细胞壁酶解破碎，使细胞内营养物质充分释放，同时经过纤维素酶、果胶酶与蛋白酶的多重作用将细胞内的各类大分子营养物质酶解成小分子营养物质，如蛋白酶将大分子蛋白质酶解成小分子的多肽及氨基酸，后期我们通过高压均质机的使用，使口服液在挤研，强冲击与失压膨胀的三重作用下使得料液更加细化，更利于人体吸收，提高人体吸收率，同时有效的减少了口服液的分层改善口服液外观，色泽更加清澈，香味更浓，口感更醇。本发明避免了各类食品添加剂的加入，同时经过深层发酵后期的酶解，将绣球菌菌丝体中各类大分子活性营养成分转化为人体更易吸收的小分子营养物，该绣球菌口服液在制作过程中严格按照无菌操作规程，制作工艺最后经过瞬时高温灭菌，使得产品更加安全健康。

本发明还可以应用在美容产品以及医用营养食物及营养补充剂，以及其的生产加工领域等。