阅读说明：本技术 盐肤木总酚酸微丸在制备预防和/或治疗心血管疾病药物中的用途 (Application of rhus chinensis total phenolic acid pellets in preparation of medicines for preventing and/or treating cardiovascular diseases ) 是由 徐伟 叶淼 王晓颖 许文 禇克丹 林羽 于 2019-10-31 设计创作，主要内容包括：本发明提供了盐肤木总酚酸微丸在制备预防和/或治疗心血管疾病的药物中的用途。实验证明,发明制得的盐肤木总酚酸微丸可抑制心电图ST段的抬高和改善T波的变化,能显著降低心肌缺血阳性率和心律失常发生率,说明盐肤木总酚酸微丸对心血管疾病,特别是心律失常具有明显的预防保护作用。所以,盐肤木总酚酸微丸在制备预防和/或治疗心血管疾病,特别是心律失常的药物中具有非常好的应用前景。(The invention provides application of rhus chinensis total phenolic acid pellets in preparation of a medicine for preventing and/or treating cardiovascular diseases. Experiments prove that the prepared rhus chinensis total phenolic acid pellets can inhibit the elevation of an ST segment of an electrocardiogram and improve the change of T waves, can obviously reduce the myocardial ischemia positive rate and the arrhythmia incidence rate, and show that the rhus chinensis total phenolic acid pellets have obvious prevention and protection effects on cardiovascular diseases, particularly arrhythmia. Therefore, the rhus chinensis total phenolic acid pellets have good application prospect in preparing medicaments for preventing and/or treating cardiovascular diseases, particularly arrhythmia.)

盐肤木总酚酸微丸在制备预防和/或治疗心血管疾病药物中 的用途

技术领域

本发明属于药物制备领域，具体涉及盐肤木总酚酸微丸在制备预防和/或治疗心血管疾病，特别是心律失常的药物中的用途。

背景技术

冠心病(Coronary heart disease，CHD)是一种较为常见的心血管疾病，是冠状动脉粥样硬化性心脏病的简称，它的一个重要标志是动脉粥样硬化斑块，它会随时间的推移使冠状动脉发生慢性狭窄、痉挛或阻塞，从而导致心肌缺血、缺氧或梗死而引发心脏病。急性心肌缺血是心肌缺血的一种，是指由各种原因引起的心肌相对或绝对供血不足、心肌细胞缺氧。心肌缺血可由于心肌工作负荷或对血供需要增加引起，也可由冠脉狭窄或收缩导致血供减少引起，或两者兼有。心肌缺血主要表现为心电图ST段偏移，室壁运动异常等。

心律失常是最常见的复杂而又危险的心血管疾病或并发症，是造成心血管高病死率的原因之一，它可单独发病，亦可与其他心血管病伴发。心律失常临床表现为心悸、气促、胸闷、乏力、失眠、多梦等症状，目前治疗心律失常的药物有胺碘酮、利多卡因、地奥心血康胶囊等。

但是，目前治疗冠心病、心律失常等心血管疾病的药物大都存在一些副作用，而中药由于其相对较小的副作用而受到广泛的关注。近年来中医中药对治疗心血管疾病的研究日趋增多，人们应用中药预防和治疗心血管疾病取得了较好的效果，研发的相应中药制剂不断增多。比如应用漆树科盐肤木(Rhus chinensis Mill.)的干燥根茎经水提醇沉后制成的单味药糖浆剂，具有理气行血、活血化瘀等功效，临床上主要用于冠心病、心绞痛的治疗，其疗效确切。

然而，盐肤木根治疗冠心病的药效物质基础至今未明。迄今为止，国内外学者对盐肤木根的化学成分亦研究不足，因此，研究盐肤木根中的化学成分，寻找能够有效治疗心血管疾病(比如冠心病、急性心肌缺血、心律失常、缺氧或梗死而引发心脏病等)的药物，具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供盐肤木总酚酸微丸在制备预防和/或治疗心血管疾病，特别是心律失常的药物中的用途。

本发明提供了一种盐肤木总酚酸微丸在制备预防和/或治疗心血管疾病的药物中的用途。

进一步地，所述心血管疾病包括冠心病、心肌缺血、心脏病。

进一步地，所述心肌缺血为急性心肌缺血。

进一步地，所述心血管疾病为心律失常。

进一步地，所述药物能够降低心电图ST段的变化、降低心律失常发生率。

进一步地，所述盐肤木总酚酸微丸的制备方法为：取盐肤木总酚酸，制成微丸。

进一步地，所述盐肤木总酚酸微丸的制备方法包括以下步骤：

(1)取盐肤木，加入有机溶剂，提取，然后过滤，取滤液；

(2)将步骤(1)所得滤液以大孔树脂为吸附填料进行洗脱纯化：先用水为洗脱剂，再用醇类溶剂为洗脱剂，收集醇类溶剂洗脱部位，浓缩，冷冻干燥，即得盐肤木总酚酸；

(3)将步骤(2)所得盐肤木总酚酸、成球促进剂、致孔剂、抗黏剂、润湿剂混合，在低温挤出滚圆机中制备成盐肤木总酚酸微丸。

进一步地，步骤(1)中，所述盐肤木为盐肤木块茎；所述有机溶剂为乙醇，优选为70％乙醇；所述盐肤木与有机溶剂的质量体积比为1：(10～30)g/mL；

和/或，所述提取温度为70～90℃，提取时间60～120分钟；优选地，所述盐肤木与乙醇的质量体积比为1：20g/mL；所述提取温度为80℃，提取时间90分钟。

进一步地，步骤(2)中，所述水的用量为4BV，所述醇类溶剂的用量为4BV，所述醇类溶剂为50％乙醇；

和/或，所述大孔树脂为SP825L大孔树脂，上样量为0.35g盐肤木/g大孔树脂，洗脱剂的流速为2BV·h^-1。

进一步地，步骤(3)中，所述成球促进剂为纤维素类成球促进剂，致孔剂为水溶性致孔剂，抗黏剂为无机非金属氧化物，润湿剂为醇类物质，优选地，所述成球促进剂为微晶纤维素，致孔剂为乳糖，抗黏剂为二氧化硅，润湿剂为60％乙醇；

所述低温挤出滚圆机的工艺条件为：挤出速度43r·min^-1，滚圆速度1800r·min^-1，滚圆时间4min。

进一步地，步骤(3)中，所述盐肤木总酚酸、成球促进剂、致孔剂、抗黏剂、润湿剂的质量体积比为45g：94.5g：10.5g：6.75g：110mL。

本发明中，微丸是直径小于2.5mm的球形或类球形固体剂型，可装入胶囊、压制成片剂，或制成其他制剂。

实验结果表明，发明制得的盐肤木总酚酸微丸可抑制心电图ST段的抬高和改善T波的变化，能显著降低心肌缺血阳性率和心律失常发生率，特别地，其降低心肌缺血大鼠的心律失常发生率的效果显著优于YFM总酚酸组。说明盐肤木总酚酸微丸对心血管疾病，特别是心律失常具有明显的预防保护作用。所以，盐肤木总酚酸微丸在制备预防和/或治疗心血管疾病，特别是心律失常的药物中具有非常好的应用前景。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的

具体实施方式

，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1为各组典型的心电图。

具体实施方式

本发明所用原料与设备均为已知产品，通过购买市售产品所得。

实施例1、盐肤木粗提物的制备

取盐肤木块茎(5g)，加入70％乙醇(100mL)，在80℃下提取90min，共提取两次，然后过滤，取滤液，浓缩干燥，即得盐肤木粗提物。

实施例2、盐肤木总酚酸的制备

取盐肤木块茎(5g)，加入70％乙醇(100mL)，在80℃下提取90min，共提取两次，然后过滤，取滤液。以SP825L大孔树脂(径高比为1:5)为吸附填料，将滤液以1BV·h^-1流速上样(上样量：0.35g生药/g干树脂)。然后先用4BV水为洗脱剂，以2BV·h^-1除杂洗脱，再用4BV50％乙醇为洗脱剂，以2BV·h^-1洗脱，收集50％乙醇洗脱部位，浓缩，冷冻干燥，即得盐肤木总酚酸。

实施例3、盐肤木总酚酸微丸的制备

处方组成：盐肤木总酚酸45g，微晶纤维素94.5g，乳糖10.5g，二氧化硅6.75g，60％乙醇(110±2)mL。

按上述处方组成称取各原料，采用Mini-250实验型低温挤出滚圆机，制备得到盐肤木总酚酸微丸，制备工艺为：挤出速度43r·min^-1，滚圆速度1800r·min^-1，滚圆时间4min。

以下通过实验例证明本发明的有益效果。

实验例1、盐肤木总酚酸对心肌缺血大鼠的治疗效果评价

1仪器与试药

1.1仪器

BL-420A生物机能实验系统(成都泰盟软件有限公司)，XS105电子分析天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)，台式冷冻离心机(美国贝克曼库尔特公司)，5418-Eppendorf离心机(德国艾本德股份有限公司)，HH-4数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司)，旋涡混合振荡器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)，多功能酶标仪(奥地利Infinite公司)，UV-1800紫外分光光度计(日本岛津)。

1.2试药

地奥心血康胶囊(规格：100mg，成都地奥制药集团有限公司，批号：1801051)；硝苯地平(规格：10mg，华中药业股份有限公司，批号：20180304)；盐肤木粗提物(实施例1制得)；盐肤木总酚酸(实施例2制得)；盐肤木总酚酸微丸(实施例3制得，载药量：28.7％)；垂体后叶素注射液(规格：6U：2mL，上海上药第一生化药业有限公司，批号：1704201)；0.9％氯化钠注射液(规格：500mL：4.5g，福州海王福药制药有限公司，批号：161215A43)；乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒(96T)、肌酸激酶(CK)试剂盒(50T)(南京建成生物工程研究所)。

1.3动物

SPF级SD大鼠，雄性，体质量250±20g，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司，实验动物许可证号：SCXK(沪)2012-0002。

2实验方法

2.1动物分组与造模

SD大鼠适应性喂养5天，10％水合氯醛麻醉，测定大鼠心电图，筛选出56只肢体Ⅱ导联心电图正常(麻醉后S点不高于基线)的大鼠，将筛选出的大鼠随机分为7组：正常组、模型组、阳性药地奥心血康胶囊(12.26mg·mL^-1)、阳性药硝苯地平(1.23mg·mL^-1)、盐肤木粗提物(命名为YFM粗提物组，1.84g·mL^-1)、盐肤木总酚酸(命名为YFM总酚酸组，39mg·mL^-1)、盐肤木总酚酸微丸(命名为YFM微丸组，136mg·mL^-1)，每组8只。从第6天起，正常组和模型组灌胃给水10天，其余连续灌胃给药10天；给药(或水)体积为5mL·kg^-1。最后一次给药2h后，采用舌下静脉注射垂体后叶素(pit)1U·kg^-1的方法，建立急性心肌缺血模型，用BL-420A生物机能实验系统记录Ⅱ导联心电图。舌下静脉注射pit引起大鼠心肌缺血时，通过观察心电图ST段的变化通常可分为2期，第1期注射后5～30s T波升高，ST段抬高(＞0.1mV)；第2期注射后30s至数分钟，ST段下移，T波降低，平坦，双向或倒置，心率减慢，P-R及Q-T间期延长，出现第1期或第2期缺血性变化为阳性，否则为阴性。本实验模型组注射垂体后叶素后30s前ST段抬高超过0.1mV，30s后ST段下移，T波低平或者倒置，说明造模成功。

2.2指标检测

2.2.1心肌缺血大鼠心电图变化的测定

10％水合氯醛腹腔注射麻醉(0.3mL·100g^-1)，麻醉后固定在手术台板上，四肢皮下***注射用针头，用鳄鱼夹将针头连接肢导联，记录大鼠肢体Ⅱ导联心电图；以PP连线为基线，记录注射pit前及注射完pit后0、5、10、15、30s及1、5、10min的心电图ST段值，并分析比较各组注射pit前后ST段变化。

观察并记录心电图中室性心律失常发生率及心肌缺血阳性率。当心电图出现宽大或畸形的QRS波，无P波或P波倒置逆反，心律不齐等一项者记为心律失常。当出现下列指征一项者即为心肌缺血性阳性：J点升高1.5mV以上，T波降低50％以上，双向、倒置，ST段抬高0.1mV或压低0.5mV，心率不齐。观察并记录舌下静脉注射垂体后叶素前后ST段的波动情况及心率的改变。

2.2.2心肌缺血大鼠血清生化指标的检测

血清中的乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CK)是评价心肌损伤的重要指标，LDH和CK水平的高低可衡量心肌损伤的程度，急性心肌缺血缺氧使心肌细胞膜受到损伤，进而产生大量的氧自由基，使心肌损伤的标志物LDH和CK被大量释放入血，导致血清中的LDH、CK水平显著升高。

测定心电图后，大鼠腹主动脉取血5mL，室温放置2h，离心10min，(3500r·min^-1)，小心移取血清置EP管中，-80℃保存备用。测定时取出血清，快速解冻，严格按照试剂盒步骤进行操作，测定血清中LDH、CK的活性。

2.3统计学处理

采用SPSS21软件对数据进行统计分析，数据以

表示，各组间比较采用单因素方差分析，以LSD法进行数据两两比较，当P﹤0.05时，判定有显著性差异。

3实验结果

3.1心肌缺血大鼠心电图ST段变化

模型组大鼠注射垂体后叶素后的前30s ST段明显抬高，ST段值抬高超过0.1mV，与正常组比较具有显著性差异(P＜0.01)，说明造模成功，造模后通过实时监测观察得到各组大鼠典型心电图见图1。通过统计分析，由表1可以看出，舌下静脉注射pit进行造模前各组ST段无显著性差异，说明灌胃给药对正常大鼠的心电图无影响。观察注射pit后5、10、15s的心电图发现，各给药组的ST段虽有抬高，但与模型组相比第一期ST段抬高的幅度有所降低，其ST段抬高值均小于0.1mV，与模型组相比，除YFM粗提物外，各组均有显著性差异(P＜0.05或0.01)。

从表1可发现YFM粗提物ST段最大变化量为0.080mV，YFM总酚酸组ST段最大变化量为0.062mV，YFM微丸组ST段最大变化量为0.059mV。说明而盐肤木粗提物对于减轻pit致急性心肌缺血的有一定的作用，而盐肤木总酚酸和盐肤木总酚酸微丸对急性心肌缺血的大鼠具有明显的保护作用；其中盐肤木总酚酸微丸的保护作用最显著，可快速降低急性心肌缺血大鼠ST段的变化。

表1急性心肌缺血大鼠心电图ST段变化测定结果(

n＝8)

注a：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

3.2心肌缺血大鼠心率变化

结果如表2所示。舌下静脉注射pit后，各组(正常组除外)大鼠的心率在10min内均随着时间的延长而逐步减慢，模型组在各时间点的心率减慢尤为显著，与正常组相比具有显著性差异(P＜0.01)；各给药组心率虽有减慢但与正常组相比无显著性差异(P＞0.05)。注射pit 5s时，模型组心率降低幅度较大，与正常组比较有显著性差异(P＜0.01)；10s时，除YFM粗提物外，各给药组心率均有所下降，但其下降的幅度小于模型组，心率显著高于模型组(P＜0.05或0.01)。说明各给药组均能降低心肌缺血大鼠的心律失常发生率，其中，YFM微丸组降低心肌缺血大鼠的心律失常发生率的效果显著优于YFM总酚酸组(P＜0.05)，其效果与阳性药物组最接近。

表2急性心肌缺血大鼠心率测定结果(

n＝8)

注：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；

YFM微丸与YFM总酚酸比较，#P＜0.05。

3.3心肌缺血大鼠血清生化指标结果

结果如表3所示。与正常组相比，舌下静脉注射pit模型组大鼠血清中LDH和CK的活性水平升高较为明显，具有显著性差异(P＜0.01)。与模型组相比，各给药组血清中LDH和CK的活性水平均有所降低，具有显著性差异(P＜0.01)。而且YFM总酚酸与YFM粗提物对LDH和CK的活性水平的降低效果优于YFM微丸，说明YFM总酚酸与YFM粗提物对心肌缺血大鼠血清中LDH和CK生化指标的调控效果优于YFM微丸。

表3注射pit致急性心肌缺血大鼠血清生化指标测定结果(n＝8)

组别	剂量/g·kg<sup>-1</sup>	LDH/U·mL<sup>-1</sup>	CK/U·L<sup>-1</sup>
				正常组	—	6194.42±1347.27**	2.61±0.32**
模型组	—	9871.87±2324.99	9.08±1.44
				地奥心血康胶囊	0.0613	7003.24±1220.02**	3.62±1.07**
硝苯地平	0.00613	5075.10±2551.07**	3.30±1.09**
				YFM粗提物	9.2	5712.58±1706.16**	3.40±0.76**
YFM总酚酸	0.195	4631.41±1063.14**	4.30±1.03**
				YFM微丸	0.68	5866.71±1471.00**	4.45±1.16**

注a：与模型组比较，*P＜0.05，

注b：与模型组比较，**P＜0.01。

综上，发明制得的盐肤木总酚酸微丸可抑制心电图ST段的抬高和改善T波的变化，能显著降低心肌缺血阳性率和心律失常发生率，特别地，其降低心肌缺血大鼠的心律失常发生率的效果显著优于YFM总酚酸组。说明盐肤木总酚酸微丸对心血管疾病，特别是心律失常具有明显的预防保护作用。所以，盐肤木总酚酸微丸在制备预防和/或治疗心血管疾病，特别是心律失常的药物中具有非常好的应用前景。