一种马齿苋籽粕蛋白的提取方法
阅读说明：本技术 一种马齿苋籽粕蛋白的提取方法 (Method for extracting purslane seed meal protein ) 是由 杨成东 于 2018-05-30 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种马齿苋籽粕蛋白的提取方法,所述马齿苋籽粕蛋白的提取方法包括：(1) 预处理:将脱脂马齿苋籽粕干燥、过筛。(2)碱液浸提:将马齿苋籽粕与碱液混合,在恒温水浴锅中浸提,使蛋白质溶于碱液溶液中。(3)离心:用离心机离心,取上清液。(4)酸沉:用HCl调节上清液的pH,使蛋白质析出。(5)离心:再用离心机离心,取沉淀,将析出的蛋白质分离出来,并用蒸馏水水洗至中性,转移至培养皿中。(6)冷冻干燥:先将冷冻干燥机温度降到－50℃以下,放入样品,冷冻干燥,制得马齿苋籽粕粗蛋白的冻干粉。本发明所述马齿苋籽粕蛋白的持水性和起泡性低于大豆分离蛋白,持油性略高于大豆分离蛋白,乳化性和乳化稳定性远高于大豆分离蛋白,一种优质的蛋白资源。(The invention discloses an extraction method of purslane seed meal protein, which comprises the following steps: (1) and (4) pretreatment, namely drying and sieving the degreased purslane seed meal. (2) And (3) alkali liquor leaching, namely mixing the purslane seed meal with alkali liquor, and leaching in a constant-temperature water bath kettle to dissolve the protein in the alkali liquor. (3) Centrifuging, namely centrifuging by using a centrifuge and taking supernatant. (4) Acid precipitation, namely adjusting the pH of the supernatant with HCl to precipitate protein. (5) Centrifuging, collecting precipitate, separating protein, washing with distilled water to neutrality, and transferring to culture dish. (6) And (3) freeze drying, namely, firstly reducing the temperature of a freeze dryer to be below-50 ℃, adding the sample, and freeze drying to prepare the freeze-dried powder of the purslane seed meal crude protein. The purslane seed meal protein has lower water retention and foamability than soybean protein isolate, has slightly higher oil retention than the soybean protein isolate, has much higher emulsibility and emulsion stability than the soybean protein isolate, and is a high-quality protein resource.)
技术领域
本发明涉及生物提取技术领域，特别涉及一种马齿苋籽粕蛋白的提取方法。
背景技术
马齿苋为马齿苋科马齿苋属的一年生肉质草本植物 ，又名长寿菜等 ，其资源丰富 ，广泛分布于中欧 ，亚洲和地中海等地区 。在中国等地 ，马齿苋主要是做成蔬菜或酱汤或混入面食中食用。马齿苋是国家***认定的药食同源的野生植物之一，被营 养学家誉为 “2 1世纪最有发展前景的绿色食品 ”之一。 马齿苋中含有多种生物活性成分 ，王锦军等人的研究表明，马齿苋比其他的蔬菜具有更高的营养价值 ，其中含有 蛋白质，
E P A ，多种维生素和矿物质，并具有较高的β-胡萝卜素 ，抗坏血酸和α-亚 麻酸 。
马齿苋籽粕中不但是优质的 ω- 3脂肪酸资源，也是一种蛋白资源。其豆粕中氨基酸种类较丰富 ，A baza等人的研究表明 ，添加20 ％ 的马齿苋豆粕于兔子饲料中 ，其生命特征可以达到最佳值 。本文以大豆分离蛋白作为对照品。目前关于马齿苋中总生物碱、多糖、酚类化合物 、脂肪酸 、总黄酮等有报道 ，而鲜见关于马齿苋籽粕蛋 白的功能性质研究 。本研究探讨了马齿苋籽粕蛋白的功能性质。
发明内容
基于以上目的，本发明提供一种马齿苋籽粕蛋白的提取方法，所其制备方法包括：
( 1) 预处理: 将脱脂马齿苋籽粕干燥、过 80 目筛。
( 2) 碱液浸提: 将马齿苋籽粕与 NaOH 溶液按液 料比 25∶ 1( mL∶ g) 混合，在 50 ℃ 恒温水浴锅中浸提 20 min，使蛋白质溶于 NaOH 溶液中。
( 3) 离心: 用离心机以 3000 r /min 的转速离心 20 min，取上清液。
( 4) 酸沉: 用 0.1 mol /L 的 HCl 调节上清液的 pH 至等电点 4.0，使蛋白质析出。
( 5) 离心: 再用离心机以 3 000 r /min 的转速离心 20 min，取沉淀，将析出的蛋白质分离出来，并用蒸馏 水水洗至中性，转移至培养皿中。
( 6) 冷冻干燥: 先将冷冻干燥机温度降到 － 50 ℃ 以下，放入预先在 － 20℃ 冷冻 12 h 的样品( 保证没 有液态水存在) ，冷冻干燥 12 h，反复 2 次，制得马齿苋籽粕粗蛋白的冻干粉。
马齿苋籽产油率 17. 68% ，其籽粕产量在 82% ～ 90%，而籽粕中蛋白质含量为10. 00% 。本研究采 用碱溶酸沉法提取马齿苋籽粕蛋白，马 马齿苋籽粕蛋白的持水性和起泡性低于大豆分 离蛋白 ，持油性略高于大豆分离蛋白，乳化性和乳化稳定性远高于大豆分离蛋白。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
( 1) 预处理: 将脱脂马齿苋籽粕干燥、过 80 目筛。
( 2) 碱液浸提: 将马齿苋籽粕与 NaOH 溶液按液 料比 25∶ 1( mL∶ g) 混合，在 50 ℃ 恒温水浴锅中浸提 20 min，使蛋白质溶于 NaOH 溶液中。
( 3) 离心: 用离心机以 3 000 r /min 的转速离心 20 min，取上清液。
( 4) 酸沉: 用 0. 1 mol /L 的 HCl 调节上清液的 pH 至等电点 4. 0，使蛋白质析出。
( 5) 离心: 再用离心机以 3 000 r /min 的转速离心 20 min，取沉淀，将析出的蛋白质分离出来，并用蒸馏 水水洗至中性，转移至培养皿中。
( 6) 冷冻干燥: 先将冷冻干燥机温度降到 － 50 ℃ 以下，放入预先在 － 20℃ 冷冻 12 h 的样品( 保证没 有液态水存在) ，冷冻干燥 12 h，反复 2 次，制得马齿苋籽粕粗蛋白的冻干粉。
实施例2
( 1) 预处理: 将脱脂马齿苋籽粕干燥、过 80 目筛。
( 2) 碱液浸提: 将马齿苋籽粕与 NaOH 溶液按液 料比 20∶ 1( mL∶ g) 混合，在45 ℃ 恒温水浴锅中浸提30 min，使蛋白质溶于 NaOH 溶液中。
( 3) 离心: 用离心机以 3 000 r /min 的转速离心 20 min，取上清液。
( 4) 酸沉: 用 0. 1 mol /L 的 HCl 调节上清液的 pH 至等电点 4. 0，使蛋白质析出。
( 5) 离心: 再用离心机以 3 000 r /min 的转速离心 20 min，取沉淀，将析出的蛋白质分离出来，并用蒸馏 水水洗至中性，转移至培养皿中。
( 6) 冷冻干燥: 先将冷冻干燥机温度降到 － 50 ℃ 以下，放入预先在 － 20℃ 冷冻 12 h 的样品( 保证没 有液态水存在) ，冷冻干燥 12 h，反复 2 次，制得马齿苋籽粕粗蛋白的冻干粉。
马齿苋籽粕蛋白最优提取工艺为: 液料比 25∶ 1( mL∶ g) ，碱液pH值12 ，浸 提温 度50 ℃ ，浸 提时间20 min，提取率 56. 04% ，马齿苋籽粕蛋白含量( 以蛋白质含量计) 为 58. 53% ，马齿苋籽粕蛋白的等电点 pI = 4. 0。