阅读说明：本技术 使用乳酸菌的天然产物酶及其制造方法 (Natural product enzyme using lactic acid bacteria and method for producing same ) 是由 姜承赞 于 2017-05-19 设计创作，主要内容包括：本发明涉及使用乳酸菌的天然产物酶及其制造方法,具体是,对人参、黄漆木、苏子、洋葱及海藻类等天然产物接种乳酸菌发酵的天然产物发酵酶及其制造方法。根据本发明的使用乳酸菌的天然产物酶生产方法的天然产物酶是,可以有效利用所述天然产物含有的天然生理活性成分和通过乳酸菌发酵追加生成的活性成分,因此对食品产业而言是非常有用的发明。(The invention relates to a natural product enzyme using lactic acid bacteria and a preparation method thereof, in particular to a natural product fermentation enzyme obtained by inoculating lactic acid bacteria to natural products such as ginseng, sumac, perilla, onion, seaweed and the like for fermentation and a preparation method thereof. The natural product enzyme produced by the method for producing a natural product enzyme using a lactic acid bacterium according to the present invention is an invention which is very useful for the food industry because it can effectively utilize natural physiologically active components contained in the natural product and active components additionally produced by fermentation of a lactic acid bacterium.)

使用乳酸菌的天然产物酶及其制造方法

技术领域

本发明涉及使用乳酸菌的天然产物酶及其制造方法，具体是，对人参、黄漆木、苏子、洋葱及海藻类等天然产物接种乳酸菌发酵的天然产物发酵酶及其制造方法。

背景技术

乳酸菌((lactic acid bacteria)为厌氧菌，是栖息在人和哺乳类的肠内，防止肠内被杂菌异常发酵的重要微生物。属于乳酸菌的主要菌包括乳酸杆菌、乳酸球菌、双歧杆菌等，从发酵乳、乳酸菌饮料、奶酪、大酱、泡菜等食品乃至药品，其应用范围广泛。乳酸菌停留在肠内，发挥整肠作用、抑制有害菌、生产维生素和增强免疫物质、抗癌效果、降低血液中胆固醇含量等多种生理活性效果。

人参是根的形状像人，故称人参，有神奇功效而又被称为神草，级别高，受人捧而被称为人衙，背着太阳面向阴地而称为鬼盖。曾经某人在自家屋后每天都能听到人叫的声音，便把出声的地方挖开后发现人形药草，把药草挖出以后再也没有听见人叫的声音，因而得名土精。人参具有特异的味道，味甜，微苦，性温。人参保护元气，用于体虚、倦怠、疲劳、食欲不振、呕吐、腹泄等，有助于肺功能，有生津作用，提高安神和肾功能。药理作用包括大脑皮层兴奋和抑制、平衡、抗疲劳、抗衰老、增强免疫、心收缩、促进性腺、抑制高血糖、促进蛋白质合成、保持稳态、抗癌、解毒作用等。呈细长的圆柱形状，但呈梭形，长有2～5个侧根，外侧面有细薄的黄褐色竖纹和细细的根迹。根头部有茎的残基长过的芦头。人参的叶子叫做人参叶，芦头叫做人参芦，种子叫做人参子。

黄漆木是在制造木工艺品时用来涂颜色或者加工表面时用使用，故称为黄漆木。高达15m，幼枝呈绿色，无毛。叶子错开，呈鸡蛋形状或椭圆形。叶缘笔直，但小树上分成3～5个，有锯齿。6～8月中旬开花，呈浅黄绿色，属于两性花，长在伞形花序上。花茎的长为3～5cm，小的花茎长度达5～10mm。花萼分成5个，花叶子和雄蕊各有5个，花瓣上有蜜腺。雌蕊柱头分成5个，核果呈椭圆形，9月末到11月份结黑色果实。8月至9月期间采用于黄漆的树的津液。黄漆为如上漆的传统工艺技术，采漆树汁液涂漆。黄漆木表皮上出现伤疤时流出黄色液体(津液)，将此集中起来上漆叫做黄漆。传统上，用作家具的涂料或金属、皮的涂料。历史上被类为送往中国的朝贡品，带给黄漆树生长的地区百姓较大困扰。甚至还有朝鲜时代将长出的黄漆木砍掉的历史记载。作为韩国的特有品种，分布在全罗南北道、庆尚南道和济州岛，在日本从本州南部分布到冲绳。过去视为独立品种，但除了日本品种的Dendropanaxmorbiferus H.Lev.(桑双柏)和汁液的颜色以外，从形态上难以看出差异。

苏子也称为紫苏、日本紫苏。原产地为印度的高地和中国中南部等地，据记载，韩国是在统一新罗时代将芝麻和苏子一起栽培，由此可见，韩国是自古以来已在全国范围内进行栽培。苏子是在低地带的住宅附近自然生长。高达60～90cm。茎为方形，直立，有长毛。叶子是对称的，呈鸡蛋状圆形，有尖头，底部是圆形。叶子的长为7～12cm，宽5～8cm，在锯齿，正面是绿色，背面发紫色。花是8～9月形成总状花序，白色，开出很多小嘴唇状的合瓣花。花萼的长为3～4mm，上方分成三个，下方分成两个。花冠的长为4～5mm，下唇瓣稍长，四个雄蕊中有两个较长。果实为分果，在花萼内，呈圆形，直径达2mm左右，表面有网纹。没有确定的品种，但根据果实的形态特性，可以分为几种，韩国基本都栽培褐色品种。作为油料作物栽培，叶子上有特异的味道，可以食用。从种子上榨出的油用途较多。此外，可以与涂料、清漆、油毡、印刷油墨、防水用具漆混合使用，也用作发油、肥皂等原料。也可以在白纸上涂油用作油纸。麻渣可以用作饲料和肥料。苏子中含有40％左右的干性油。叶子含0.4％左右的挥发性油，其主要成分为Penillaketone(紫苏酮)，有特殊味道。在韩国、中国、印度和日本等地栽培。

洋葱的原产地是根据推测在西亚或地中海沿岸，但尚未发现野生品种而不能确定。栽培历史非常悠久，根据公元前3000年左右的古埃及墓穴中壁画上的记载，给建造金字塔的工人吃过大蒜和洋葱，希腊是从公元前7～8世纪开始栽培。鳞茎根据品种有所差异，但基本都呈扁圆形或圆形，表面有薄薄的膜质(像薄纸一样半透明的)的紫色或褐色皮，内侧的鳞较厚，层层重叠，有辛辣味。叶子是空心的圆柱状，深绿色，花开时干燥，底部形成厚厚的鳞块。9月开白色花，叶子之间长出的花茎末端上形成伞形花序，数量较多，呈如球般的圆状。花茎为圆柱状，高达50～100cm，下边鼓起，其底下长出2～3片叶子。花被分成6个，分开的块呈如鸡蛋倒立般的披针状，水平展开。雄蕊是六个，其中三个雄蕊底的两侧有较细碎的凸块，有一个雌蕊。品种是分为鳞茎圆形的和扁圆形的、鳞茎皮红色的和黄色的以及白色的。根据味道，分为甜洋葱和辣洋葱。通常食用的洋葱品种是主要分为黄色洋葱、红色洋葱、白色洋葱和小洋葱四个品种。主要在6～7月份叶子倒下稍微发绿时收割，也有鳞茎长大之前拔出食用叶子的。洋葱主要用是食用鳞茎，从鳞茎上发出的独特味道源自二丙基二硫醚和烯丙硫醚等化合物。其从生理上可以促进消化液的分泌，具有兴奋、发汗和利尿作用。鳞茎上含有各种维生素和钙、磷酸等无机质，具有清除血液中有害物质的作用。鳞茎经常用于沙拉、汤和肉类料理，用作可种料理的香辛料。每100g叶子中含有维生素A 5,000IU，维生素C45mg，钙80mg，镁24mg，钾220mg。

海藻类是产量比较大的食品，味道具有新鲜海味。蛋白质含量一般达到10％左右，含糖分物质含量达30～40％左右，属植物纤维质，不含热量。海藻类富含人的健康所需的多种无机盐类，同时含有蛋白质等人体所需营养元素。紫菜、裙带菜、海带等海藻类富含钾离子，从化学角色是极优秀的碱性保健食品。其中海苔即紫菜含有较优良的营养成分，比起其它食品，含有大量的蛋白质和碳水化合物。海藻类为植物性纤维质，因此可作为预防成人病的保健食品发挥效果。从海藻类上产生的离子是与体内酸性废物结合被***出去，是新陈代谢作用所需要素。海藻类的性质不仅对废物的直接***，对二次发生的排毒也发挥重大作用海藻类之所以作为保健食品具有突出功效，是因其含有较丰富的优质植物纤维即海藻酸。尤其帮助大肠蠕动，解决便秘问题。海藻类富含钾离子，有效预防骨质疏松症或骨软化症，防止衰老。海藻类中富含的碘成分促进食欲，预防甲状腺浮肿，使头发变柔。生紫菜有海的香味，与裙带菜或海带或其它海藻类大同小异地富含食用纤维质，促进大肠蠕动，使废物的***更加通畅。海藻灯富含氨基酸，作为高功效天然素材备受关注，海藻还富含低聚糖，作为理想的天然食品受到认可，富含矿物质和维生素等物质，据目前海内外专家对海藻类生理效用的积极研究结果，海藻类在减肥作用、通过整肠作用治疗便秘以及重金属和放射性物质的体外排出作用等方面发挥重要作用。被统称为褐藻糖胶的含硫多糖类根据报告，除了抗菌、抗氧化、抗病毒和抗癌作用之外，还可以有效预防动脉硬化、心肌梗塞、高血压、心绞痛、脑梗死等成人病的发生。

发明内容

技术问题

本发明要解决的技术问题是，为了进一步有效利用人参、黄漆木、苏子、洋葱和海藻类等天然产物的有用生理活性成分，提供将所述天然产物用乳酸菌发酵而制造的使用乳酸菌的天然产物酶及其制造方法。

技术方案

为解决上述的问题，本发明提供一种对100重量份的水混合由人参、黄漆木、苏子、洋葱和海藻类组成的组中选择的天然产物20～30重量份、葡萄糖3～5重量份以及浮酸菌0.1～0.5重量份，然后在常温下发酵10～20天的使用乳酸菌的天然产物酶的生产方法。

优选地，所述乳酸菌是将包含蛋白胨、酵母提取物及葡萄糖的培养基上接种植物乳杆菌(Lactobasillus plantarum)或肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)，在36℃的温度下预培养24小时后，将所述预培养液在同一个营养培养基上二次培养后获取的培养液。

优选地，所述生产方法之前还混合芹菜糖提取物5～10重量份。

本发明提供使用按所述生产方法获取的乳酸菌的天然产物酶。

有益效果

根据本发明的使用乳酸菌的天然产物酶生产方法的天然产物酶是，可以有效利用所述天然产物含有的天然生理活性成分和通过乳酸菌发酵补充生成的活性成分，因此对食品产业而言是非常有用的发明。

附图说明

图1是显示本发明的使用乳酸菌的天然产物酶的生产方法的顺序图。

最佳实施方式

本发明要提供对100重量份的水混合由人参、黄漆木、苏子、洋葱和海藻类组成的组中选择的天然产物20～30重量份、葡萄糖3～5重量份以及乳酸菌0.1～0.5重量份，然后在常温下发酵10～20天的使用乳酸菌的天然产物酶生产方法。

具体实施方式

下面详述本发明。

本发明的发明人为了有效利用人参、黄漆木、苏子、洋葱和海藻类等天然产物的有效生理活性成分，重复进行研究结果发现，将所述天然产物用乳酸菌发酵以后制造天然产物酶时，可以进一步有效采用生理活性成分，从而完成了本发明。

本发明提供一种对100重量份的水混合由人参、黄漆木、苏子、洋葱和海藻类组成的组中选择的天然产物20～30重量份、葡萄糖3～5重量份以及乳酸菌0.1～0.5重量份，在常温下发酵10～20天的使用乳酸菌的天然产物酶的生产方法。

所述的人参、黄漆木、苏子、洋葱和海藻类等天然产物是可以切碎使用，但制成粉状后使用为宜。所述天然产物可以混合一种以上使用。

所述乳酸菌是将包含蛋白胨、酵母提取物及葡萄糖的培养基上接种植物乳杆菌或肠膜明串珠菌，在36℃的温度下预培养24小时后，将所述预培养液在同一个营养培养基上二次培养以后获取的培养液为宜。

所述生产方法是将乳酸菌接种发酵之前，对天然产物还混合芹菜糖提取物(apiosextract)5～10重量份为宜。

所述芹菜糖是豆科多年生藤本植物及其块茎，学名为香芋(Apios americana)。其块茎可以食用，也称为菜豆(potato bean)、美洲花生(hopniss)、Indian potato(大马勃)、hodoimo、America-hodoimo、American groundnut。

所述芹菜糖提取物是将芹菜糖泡在水里加热提取。优选实施例是，放入重量达芹菜糖10倍的水，在100℃温度下加热三个小时以后将滤液可以用作芹菜糖提取物。

添加芹菜糖提取物，可以显著增加乳酸菌发酵效率。

所述发酵是一般在常温下进行10～20天左右，发酵完的即将发酵物称为“酶”。就是说，本发明的使用乳酸菌的天然产物酶是可以理解为采用乳酸菌的天然产物发酵物。

因此本发明提供用所述生产方法获取的使用乳酸菌的天然产物酶。

本发明的天然产物酶可以用作将此作为有效成分含有的保健功能食品或化妆品组合物使用。

优选实施例是，本发明的保健功能食品可以广泛应用于对改进有关氧化应激的各种疾病有效的食品及饮料等食物。

含本发明的有效成分的食品包括各种食品类、饮料、口香糖、茶、维生素复合剂、保健食品类等，可以以粉末、颗粒、片剂、胶囊或饮料形态使用。

本发明的有效成分通常在整个食品重量中添加量为0.01至15重量份，保健饮料组合物是以100ml为准，以0.02至10g，优选地以0.3至1g比率添加。

本发明的保健功能食品是将所述化合物作为以指示比率必需添加的成分含有之外，还可以添加食品学上允许的食品辅助添加剂如天然碳水化合物及各种香味剂等成分。

所述天然碳水化合物是包括如葡萄糖、果糖等单糖类、麦芽糖、蔗糖等二糖类以及糊精、环糊精等多糖类，还有普通的糖以及木糖醇、山梨醇、赤藓糖醇等糖醇。

所述香味剂是可以使用索马甜、甜菊醇糖苷、甘草甜素、糖精、阿斯巴甜等。所述香味剂的比率是对本发明的保健功效食品每100ml，通常约使用1至20g，优选地使用5至12g。

此外，本发明的保健功效食品可以含有各种营养剂、维生素、矿物、合成风味剂及天然风味剂等风味剂、着色剂和增味剂、果胶酸及其盐、海藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、酒精、用于碳酸饮料的碳酸剂等。

此外，本发明的保健功能食品还可以含有用来制造天然水果汁和果汁饮料及蔬菜饮料等的果肉。这些成分可以独立或者组合使用。所述添加剂的比率是通常对本发明的所述活性分馏物每100重量份，在0.01至约20重量份范围内选用。

另一优选实施例是，本发明的有效成分可以作为用作具有抗氧化作用的功能性化妆品的组合物。

本发明的化妆品组合物的有效成分是对组合物总重量中包含0.01至50重量份，优选地，可以包含0.1至20重量份，更优选地包含1至10重量份。在此含量范围内，可以适当保证其剂型的稳定性，可以预期抗氧化效果。

本发明的化妆品组合物的有效成分在组合物的总重量中含量可以达到0.01至50重量份，优选地，含0.1至20重量份，更优选地可以含1至10重量份。在此含量范围内，可以保证适当的剂型稳定性，可以预期抗氧化、防皮肤衰老以及促进皮肤再生等效果。

本发明的所述组合物是除了本发明的有效成分以外，在不阻碍本发明的有效活性的范围内，还可以添加具有抗氧化、防止皮肤衰老及促进皮肤再生效果的公知的天然产物提取物或其它成分。

所述组合物是可以将通常在化妆品组合物中添加的成分如脂肪物质、有机溶剂、溶解剂、浓缩剂、胶化剂、软化剂、抗氧化剂、悬浮剂、稳定剂、发泡剂(foaming agent)、芳香剂、表面活性剂、水、离子型或非离子型乳化剂、填充剂、金属离子封锁剂及螯合剂、保鲜剂、维生素、隔离剂、保湿剂、必需油、染料、颜料、亲水性或亲油性活性剂等化妆品学或皮肤科学领域通常使用的辅助剂或截体包含成型为特定剂型。

本发明的化妆品组合物是可以制成本领域通常制造的任何剂型，例如，可以制成溶液、悬浮液、乳剂、糊剂、胶、霜、乳液、粉、面膜、香皂、含表面活性剂洁面乳、油和喷剂等剂型，但并不限于此。更加具体是，可以制成柔肤水、营养乳液、营养霜、按摩霜、精华液、眼霜、粉底霜、乳剂粉底、蜡基粉底液、洁面霜、洗面奶、洗面水、面膜、喷剂、饼、粉、唇彩、口红、眼影、洗发水和护发素等剂型。

本发明的剂型为糊剂、霜或胶，则作为载体成分可以使用动物油、植物油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅胶、膨润土、硅石、滑石粉或氧化锌等。

本发明的剂型为粉或喷剂，则作为载体成分可以使用乳糖、滑石粉、硅石、氢氧化铝、硅酸钙或聚合物粉末，尤其喷剂还可以包括氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚等推进剂。

本发明的剂型为溶液或乳液，则作为载体成分可以使用溶剂、增溶剂或乳化剂，例如水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、丙二醇、1，3-丁二醇油、甘油脂肪醇、聚乙二醇或山梨醇的脂肪酸酯。

本发明的剂型为悬浮液，则作为载体成分可以使用水、乙醇或丙二醇等液态稀释剂、乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇酯和聚氧乙烯山梨醇酐酯等悬浮液、微晶纤维素、aluminum meta hydroxide(偏氢氧化铝)、膨润土、琼脂或黄蓍胶等。

本发明的剂型为含表面活性剂的洁面液，则作为载体成分可以使用脂肪醇硫酸盐、脂肪醇***硫酸盐、磺基琥珀酸单酯、羟乙磺酸盐、咪唑啉衍生物、牛磺酸甲酯、肌氨酸、脂肪酸***硫酸盐、椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物或乙氧基甘油脂肪酸酯等。

下面通过具体实施例进一步详细说明本发明。以下实施例仅用以叙述本发明优选实施例的一个具体实施例，并不是对本发明进行限制。

[实施例]

实施例1

制备在1L蒸馏水中包含5g蛋白胨、2.5g酵母提取物和5g葡萄糖的培养基以后，接种植物乳杆菌，在36℃温度下预培养24小时。将所述预培养液在营养培养基上二次培养后制成乳酸菌培养液。然后将800L水、200kg人参、30kg葡萄糖、1L乳酸菌培养液倒入发酵槽并混合后，在常温下发酵20天左右之后制成乳酸菌酶。

实施例2

除了使用黄漆木粉末来取代人参粉末之外，均以与实施例1同样的方法制造出乳酸菌酶。

实施例3

除了使用苏子粉末来取代人参粉末之外，均以与实施例1同样的方法制造出乳酸菌酶。

实施例4

除了使用洋葱粉末来取代人参粉末之外，均以与实施例1同样的方法制造出乳酸菌酶。

实施例5

除了使用干孔石莼来取代人参粉末之外，均以与实施例1同样的方法制造出乳酸菌酶。

实施例6

除了还添加50L芹菜糖热水提取物发酵以外，均以与实施例1同样的方法制造乳酸菌酶。

实施例7

除了使用黄漆木粉末来取代人参粉末之外，均以与实施例6同样的方法制造出乳酸菌酶。

实施例8

除了使用苏子粉末来取代人参粉末之外，均以与实施例6同样的方法制造出乳酸菌酶。

实施例9

除了使用洋葱粉末来取代人参粉末之外，均以与实施例6同样的方法制造出乳酸菌酶。

实施例10

除了使用干孔石莼来取代人参粉末之外，均以与实施例6同样的方法制造出乳酸菌酶。

实验例

实施例1至实施例10的乳酸菌酶的乳酸菌活菌数是按照食品公典试验法Ⅰ.3.微生物试验法中乳酸菌数的测定方法测定，其结果见下表1(单位CFU/ml)。

[表1]

试样	发酵5天	发酵10天	发酵15天	发酵20天	发酵25天
						实施例1	2.1×10<sup>3</sup>	4.2×10<sup>4</sup>	7.1×10<sup>5</sup>	1.7×10<sup>7</sup>	4.0×10<sup>7</sup>
实施例2	1.5×10<sup>3</sup>	9.7×10<sup>3</sup>	1.4×10<sup>6</sup>	2.0×10<sup>8</sup>	3.5×10<sup>8</sup>
						实施例3	8.5×10<sup>2</sup>	4.3×10<sup>4</sup>	6.0×10<sup>5</sup>	3.4×10<sup>7</sup>	5.2×10<sup>7</sup>
实施例4	3.3×10<sup>3</sup>	5.1×10<sup>4</sup>	7.7×10<sup>5</sup>	4.2×10<sup>7</sup>	7.1×10<sup>7</sup>
						实施例5	4.2×10<sup>3</sup>	7.4×10<sup>4</sup>	5.6×10<sup>5</sup>	3.6×10<sup>7</sup>	5.5×10<sup>7</sup>
实施例6	3.5×10<sup>3</sup>	8.4×10<sup>4</sup>	4.2×10<sup>6</sup>	2.1×10<sup>8</sup>	4.6×10<sup>8</sup>
						实施例7	2.2×10<sup>3</sup>	2.0×10<sup>4</sup>	6.1×10<sup>6</sup>	9.1×10<sup>8</sup>	1.3×10<sup>9</sup>
实施例8	2.9×10<sup>3</sup>	6.9×10<sup>4</sup>	3.5×10<sup>6</sup>	1.9×10<sup>8</sup>	5.5×10<sup>8</sup>
						实施例9	5.1×10<sup>3</sup>	9.0×10<sup>4</sup>	8.9×10<sup>6</sup>	3.3×10<sup>8</sup>	8.7×10<sup>8</sup>
实施例10	6.7×10<sup>3</sup>	1.3×10<sup>5</sup>	6.6×10<sup>6</sup>	3.1×10<sup>8</sup>	5.4×10<sup>8</sup>

如上述表1所示，实施例1至实施例5是随着发酵时间的增加，乳酸菌数增加，尤其实施例6至实施例10是乳酸菌的增殖速度更加显著。

工业应用

本发明是可以应用于对人参、黄漆木、苏子、洋葱及海藻类等天然产物接种乳酸菌发酵的天然产物发酵酶及其制造方法领域。