具体实施方式

为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明的保护范围。

针对现有技术的不足，本方案提供一种治疗骨质疏松症的中药复方及制备方法。本方案中治疗骨质疏松症的中药复方的原料包括：黄芪、补骨脂、白术、龟甲、丹参、白芍、白芷和甘草。

本治疗骨质疏松症的中药复方由生黄芪、补骨脂、白术、龟甲、丹参、白芍、白芷、甘草等中药组成。该方中黄芪益气固表、行血通痹，补骨脂补肾壮阳、补脾健胃，共为君药；白芍养血柔肝，缓急止痛，龟甲滋阴潜阳、益肾强骨，白术健脾、益气、燥湿利水，共为臣药；丹参活血祛瘀，通经止痛，白芷散风除湿、通窍止痛，共为佐药；甘草为使，调和诸药。纵观全方具有补益肝肾、养血柔筋、通络止痛之效。临床适应于西医诊断为骨质疏松症，中医辨证为骨痿病之腰腿痛、压缩性骨折等病症。本中药复方是治疗治疗骨质疏松症患者的有效药物，疗效确切、安全、无毒副作用。

实施例1

本实施例提供一种治疗骨质疏松症的中药复方，所述中药复方包括如下重量份数的原料：

黄芪4份、补骨脂4份、白术2份、龟甲1份、丹参2份、白芍5份、白芷3份和甘草1份

实施例2

本实施例提供一种治疗骨质疏松症的中药复方，所述中药复方包括如下重量份数的原料：

黄芪6份、补骨脂6份、白术5份、龟甲2份、丹参5份、白芍2份、白芷1份和甘草3份。

实施例3

本实施例提供一种治疗骨质疏松症的中药复方，所述中药复方包括如下重量份数的原料：

黄芪5份、补骨脂5份、白术3份、龟甲1.5份、丹参3份、白芍3份、白芷2份和甘草1份。

实施例4

本实施例提供一种治疗骨质疏松症的中药复方的制备方法。请参考图1，所示为本发明实施例提供的一种治疗骨质疏松症的中药复方制备方法的流程图。由图1可见，所述方法包括如下步骤：

步骤S100：将黄芪、补骨脂、丹参、白芍、甘草进行碎断，备用；

步骤S200：将白术和白芷加水蒸馏，提取挥发油，备用，将蒸馏后的水溶液和药渣分别另置，备用；

步骤S300：将龟甲粉粹成中粉，加水煎煮1小时后加入碎断后的黄芪、补骨脂、丹参、白芍、甘草，以及上述白术和白芷的药渣，加水煎煮两次，每次1.5小时；

步骤S400：合并两次煎煮液，过滤，将得到的滤液与白术和白芷蒸馏后的水溶液合并，得到混合液，将以上混合液浓缩至相对密度为1.30(60℃)的浸膏；

步骤S500：将上述浸膏干燥后粉碎，得药物成品。

为了验证本发明的有益效果，下面通过药效学实验进行验证。

1、本中药复方对骨质疏松大鼠胫骨组织中OPG、RANKL表达的影响

实验动物：10月龄雌性大鼠，体质量(345±15)g，共36只。

分组：采用完全随机区组分组法将实验大鼠分为6组，分别为对照组、假手术组、模型组、实验组、骨疏康颗粒组和尼尔雌醇片组，每组各6只。

给药方法：造模1d后，待切口干燥后给药。实验组、骨疏康颗粒组、尼尔雌醇片组分别予以本治疗骨质疏松症的中药复方颗粒、骨疏康颗粒、尼尔雌醇片灌胃，其余组均予以0.9％氯化钠注射液灌胃。每天2次。

指标采集与检测：分别于治疗后第3、6周随机抽取6只大鼠，按照以下方法进行检测。1)尾静脉抽血后离心，采用ELISA法检测血清OPG、RANKL含量。2)脱颈处死大鼠后，取出左侧胫骨近端，采用免疫组织化学检测法检测胫骨OPG、RANKL表达情况，运用图像分析软件为IPP，比较400倍视野下平均IOD(视野下的阳性表达部位的累积光密度和视野下样品面积的比值)和阳性率(视野下的阳性表达的细胞核个数和视野下的细胞核总数的比值)。

统计学方法：采用SPSS 19.0进行统计分析，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，组间差异性比较采用单因素方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

各组大鼠胫骨OPG表达比较与对照组比较，模型组胫骨OPG表达均下降，差异有统计学意义；经治疗后，实验组、骨疏康颗粒组、尼尔雌醇片组胫骨OPG表达均较模型组增加，差异有统计学意义；治疗第6周各治疗组胫骨OPG较本组治疗第3周时增加，差异有统计学意义，具体见表1。

表1：各组大鼠胫骨OPG表达比较(x±s，ng/L)

各组大鼠胫骨RANKL表达比较与对照组比较，模型组胫骨RANKL表达均升高，差异有统计学意义；经治疗后，实验组、骨疏康颗粒组、尼尔雌醇片组胫骨RANKL表达均较模型组下降，差异有统计学意义；治疗第6周各治疗组胫骨RANKL较本组治疗第3周时下降，差异有统计学意义，详细见表2。

表2：各组大鼠胫骨RANKL表达比较(x±s，ng/L)

本药效学实验建立骨质疏松大鼠模型，随机分为对照组、假手术组、模型组、实验组、骨疏康颗粒组和尼尔雌醇片组，每组各6只，予相应药物灌胃，对照组、假手术组、模型组予以等剂量0.9％氯化钠注射液灌胃。分别于给药后第3、6周每组随机抽取2只处死，取患处组织标本，采用染色后视野下阳性表达部位的累积光密度和视野下样品面积的比值法测定大鼠骨组织中OPG、RANKL的含量，对所得数据进行统计学分析。结果显示实验组大鼠在第3、6周末患处骨组织标本中OPG、RANKL表达均高于其他组(P＜0.05)。可见，本复方制剂可促进骨质疏松骨组织中OPG、RANKL的表达，改善骨质疏松。

2、本中药复方对对骨质疏松大鼠血清MTL、GAS表达的影响

实验动物：10月龄雌性大鼠，体质量(345±15)g，共36只。

分组：采用完全随机区组分组法将实验大鼠分为6组，分别为对照组、假手术组、模型组、实验组、骨疏康颗粒组和尼尔雌醇片组，每组各6只。

给药方法：实验大鼠造模成功术后第1天，每只每天按照75mg/kg的标准将本申请提供的复方制剂分2次灌胃。对照组、假手术组和模型组分别予等剂量0.9％氯化钠注射液，每天2次灌胃。骨疏康颗粒组和尼尔雌醇片组分别用骨疏康颗粒1.12g、尼尔雌醇片0.21mg，于相应体积的0.9％氯化钠注射液中溶解，每天2次灌胃，灌胃剂量根据人与动物剂量换算公式进行剂量换算。灌胃时间为13周。

观察指标：于给药结束后第1天，采用麻醉后股动脉取血法取血1ml，所取全血静置1h后，经2000rmp离心10min后取血清，采用ELISA法检测血清中MTL、GAS，进行比较。

各组大鼠血清MTL、GAS含量比较:与假手术组比较，模型组大鼠血清中MTL、GAS含量较假手术下降，差异有统计学意义，说明造模成功。经治疗后，实验组MTL、GAS含量较模型组增高，但仍低于假手术组。骨疏康颗粒组\尼尔雌醇片组与模型组比较，差异无统计学意义，详细见表3。

表3：各组大鼠血清MTL、GAS含量比较(x±s，ng/L)

本药效学实验建立36只骨质疏松大鼠模型，将其随机分为对照组、假手术组、模型组、实验组、骨疏康颗粒组和尼尔雌醇片组，每组各6只。实验组予以强骨颗粒灌胃；对照组、假手术组和模型组分别予等剂量0.9％氯化钠注射液灌胃，骨疏康颗粒组和尼尔雌醇片组分别给予等剂量的骨疏康颗粒和尼尔雌醇片灌胃。灌胃13周后，采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清MTL、GAS的含量。结果显示大鼠MTL、GAS含量，模型组与假手术组比较，实验组与模型组比较，差异均有统计学意义，但骨疏康颗粒组、尼尔雌醇片组与模型组比较，差异无统计学意义。可见，强骨颗粒可促进骨质疏松大鼠血清MTL、GAS的表达，改善骨质疏松。

为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明的保护范围。