一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂及其制备方法和应用
阅读说明：本技术 一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂及其制备方法和应用 (External preparation for preventing and treating acne through conversion of natural plant biological enzyme and preparation method and application thereof ) 是由 蒋用 何正有 汤秀强 李佳 毕建军 高鑫 于 2020-12-28 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂及其制备方法和应用,属于化妆品技术领域；所述外用制剂按重量份计,包括：苦参10-20份、丹参10-20份、莼菜10-20份、积雪草10-20份、银杏5-15份、艾叶5-15份、马齿苋5-10份、山竹5-10份、黄芩5-10份、牡丹皮5-10份、甘草2-5份、麝香草2-5份和薄荷醇1-2份,本发明的配方科学,通过生物酶技术转换,提高植物生物利用度,获得疗效较高具有祛痘、杀菌消炎、控油调理肌肤、修复疤痕的植物配方,并且调配出依据皮肤生理特点适应不同肤质患者的使用制剂,在消除痤疮后皮肤无疤痕,无毒副作用,使用方便,能有效改善皮肤微循环,平衡油脂分泌,增强细胞新陈代谢,彻底清除皮肤内的垃圾和毒素,使皮肤炎症迅速消除。(The invention discloses an external preparation for preventing and treating acne through natural plant biological enzyme conversion, a preparation method and application thereof, belonging to the technical field of cosmetics; the external preparation comprises the following components in parts by weight: 10-20 parts of radix sophorae flavescentis, 10-20 parts of salvia miltiorrhiza, 10-20 parts of water shield, 10-20 parts of centella, 5-15 parts of ginkgo, 5-15 parts of folium artemisiae argyi, 5-10 parts of purslane, 5-10 parts of mangosteen, 5-10 parts of scutellaria baicalensis, 5-10 parts of moutan bark, 2-5 parts of liquorice, 2-5 parts of thyme and 1-2 parts of menthol. Completely remove garbage and toxin in the skin and quickly eliminate skin inflammation.)
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂及其制备方法和应用。
背景技术
痤疮是毛囊皮脂腺单位的一种慢性炎症性皮肤病，主要好发于青少年，主要因为体阳热偏盛，血热外涌，气血忧郁，临床表现以好发于面部的粉刺、丘疹、脓疱、结节等多形性皮损为特点。痤疮表面微生物群失调，细菌感染产生炎症，反复刺激皮肤缔组织增生，产生疤痕，使患者痒痛难忍，带来精神痛苦。很多国家都投入了大量的经费进行研究，推出各种治疗痤疮的药物，这些产品在治疗痤疮方面各有特色，有一定疗效。例如采用激素类药物比如乙烯雌酚、抗菌素如庆大霉素、大环内酯类抗生素、四环素等，这类治疗方法有一定的疗效，但副作用也比较大，治愈率低，愈后易复发，而且大多为化学制剂和激素类药物，使用后容易产生副作用。也有采用中药复配治疗的报道，但实际效果有限，皮肤利用度比较差，相对作用缓慢。
综上，一种提高植物生物利用度，能有效改善皮肤微循环，无毒副作用的天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂有待研究。
发明内容
本发明旨在提供一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂及其制备方法和应用，解决现在技术的不足，在消除痤疮后皮肤无疤痕，无毒副作用，使用方便，能有效改善皮肤微循环，平衡油脂分泌，增强细胞新陈代谢，彻底清除皮肤内的垃圾和毒素，使皮肤炎症迅速消除。
本发明提供了一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂，按重量份计，包括：苦参10-20份、丹参10-20份、莼菜10-20份、积雪草10-20份、银杏5-15份、艾叶5-15份、马齿苋5-10份、山竹5-10份、黄芩5-10份、牡丹皮5-10份、甘草2-5份、麝香草2-5份和薄荷醇1-2份。
上述配方在用药组方上达到防治结合的优点，并且疗效超过现有技术中的配方。在本发明提供的防治痤疮的药物中，共有13味中药材，其中提取的苦参碱及活性物质有显著而广泛的抗菌消炎及杀灭螨虫作用，并对多种皮肤真菌也有抑制作用。丹参的提取物总丹参酮对金黄色葡萄球菌和其耐药菌株有较强的抑菌作用，并对葡萄球菌、大肠杆菌、变性杆菌有抑制作用。莼菜性味甘寒，能清热排毒、增强肌肤免疫力。山竹内含多种氧杂恩酮类化合物，其生物活性具有抗氧化、抗发炎、抗菌的作用。麝香草能消炎杀菌，散血消肿，对于各种炎症都有着不错的辅助治疗功效。积雪草具有清热解毒，利湿消肿、滋补、消炎、镇定的作用。能刺激深层皮肤细胞更替，促进真皮层中胶原蛋白形成，使纤维蛋白再生。黄芩提取物有抑制急性炎症反应，抑制炎症渗出肿胀、毛细血管通透性增加，抑制炎性介质产生释放。抑制组胺释放减轻炎性介质扩张血管，增加血管壁通透性，白细胞的趋化作用。抗菌作用比黄连好，不产生抗药性。甘草，清热解毒，消炎抑菌作用。上述药物的组合及配方是根据中医辩病施治与辩证论治相结合的原则，并按中医的配伍组方要求，针对引起痤疮发病的主要因素，有内分泌因素、皮脂的作用、毛囊内微生物等因素来选用以上药物，并进行科学组方，充分发挥各原料的药效，达到最好的防治痤疮效果。
进一步的，还包括微生物菌种，所述微生物菌种为革兰氏阳性菌种，优选的，所述革兰氏阳性菌种包括根霉菌、黑曲霉、毛霉菌、红曲霉、乳酸杆菌、青霉菌和酵母菌中的一种，优选的，所述革兰氏阳性菌种为毛霉菌，更为优选的，所述毛霉菌为鲁氏毛霉菌。在严格的控制酶切条件下，上述微生物菌种能够有效得到2-10个单糖支链的三萜类和皂苷类活性物质。
天然植物含有大量的有效成分，主要包括三萜类、皂苷类、黄铜、生物碱类，挥发油以及多炔类化合物。很多三萜类和皂苷类化合物都是皂苷元和糖类链接而成，组成皂苷的糖常见的有葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸等。
很多植物内含三萜类和皂苷类活性物质，这些成分帮助肌肤进行舒缓和镇定，进而避免滋生痘痘。同时透过肌肤能够促进受损真皮层肌肤胶原蛋白的再生，促进肌肤内部的血液循环，帮助痘印颜色淡化。很多植物三萜类和皂苷类物质有比较大的糖链，而糖链的大小会影响到皮肤对有效物质的吸收和生物利用度。本发明通过筛选获得有糖苷剪切酶的微生物菌种，控制酶切条件，通过酶进行侧链的糖支链的酶切，获得2-10糖的短支链三萜类和皂苷类物质。本发明发现将2-10糖的短支链三萜类和皂苷类物质用于防治痤疮的外用剂型，可以提高皮肤的生物利用度，在较低的剂量就可以获得较佳的疗效。
进一步的，天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将原料粉碎，将粉碎后的原料添加到磷酸二氢钠缓冲液中，制得反应液，然后将所述微生物菌体添加到反应液里面，进行酶转化反应，制得酶转化液，将酶转化液低温干燥获得活性干粉；
(2)将所述活性干粉与乙醇溶液混合配制成水醇溶液，常温下超声波处理，然后浸渍回流循环提取，制得浸渍液；
(3)将所述浸渍液加热，回流循环，即刻冷却过滤，低温干燥成粉末，将所述粉末混合水和甘油，即得天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂。
进一步的，所述微生物菌体的制备方法为：将鲁氏毛霉菌CAA09-2采用PDA培养基，在26-30℃条件下，80-100rpm转速条件下进行菌体繁殖培养，当菌体处于对数生长对数期时，离心收集菌体。
进一步的，步骤(1)中，所述原料和磷酸二氢钠缓冲液的体积比为1:8-12；
优选的，磷酸二氢钠缓冲液的浓度为0.1-0.5mol/L，pH为6.0；
优选的，所述原料和微生物菌体的质量比为100:0.5-5，优选的，所述原料和微生物菌体的质量比为100:1-3；
优选的，所述反应液的pH为5.5-6.0，酶转化反应的温度为28-40℃，酶转化反应时间为20-30h。
进一步的，步骤(2)中，所述活性干粉与乙醇溶液的体积比为1:10；乙醇溶液的质量分数为50-80％，优选的，乙醇溶液的质量分数为60-75％；
优选的，所述水醇溶液使用硼酸调节pH，pH为5.5-6.5；
优选的，超声波处理时间为30-60min；
优选的，超声波频率为20-40千赫兹；
优选的，所述浸渍回流循环提取为浸渍提取法和回流提取法交替循环使用，单次浸渍提取或回流提取的时间不限，保持总提取时间为每天3-6小时，连续提取5-8天；
优选的，回流提取的时间为3-6h；
优选的，步骤(2)活性干粉中2-10糖的短支链三萜类和皂苷类物质的质量分数为5％-15％。
本发明的制备方法是利用超声波和水醇浸渍法结合原理，选择亲水、亲脂性强的水醇溶液，利用超声波增加有效物质的透出率，采用浸渍法和回流法循环交替进行的方法，综合提取有效成份，克服了传统中药采用煎剂、水剂、单纯有机溶剂提取中药有效成份单一，提取成份不完全，剂型不稳定，有毒副作用，使用不方便等缺点。本发明是在现有提取中药技术中对传统工艺进行了改进，从配方上以中药的药理功效组方克服了传统中药配方的缺陷，减少用药，节约成本等。从提取中药技术上改进了单一的水提醇沉淀法和醇提水沉淀法，配制一种适宜水醇溶液综合提取有效成份，增加植物有效物质的提取率，增强药物的稳定性，提高了药效。
进一步的，步骤(3)中，将所述浸渍液加热至85-90℃，回流循环3-6h；粉末、甘油和水的质量比为1-2:2-5:50。
进一步的，所述的天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂在制备防治痤疮皮肤病的外用剂型上的应用。所述外用剂型为外用膏霜剂型，外用面膜贴或外用二元喷雾。
进一步的，本方案还可以配制膏体，油相包括橄榄油乳化剂4-6份、乳木果油2-4份、荷荷巴油2-4份、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物2份，水相包括水80份、甘油5-8份、提取干粉5份、1，3-丁二醇2份、卡波姆1份、三乙醇胺1份、1，2-己二醇一份。将水相溶解后，加热到85℃，保温30分钟，油相加热到85℃，缓慢混入水相，充分搅拌乳化，冷却装瓶。膏霜涂抹于患处，每日3次，15天为一疗程。
本发明治疗痤疮的药物的制备方法流程为选材一配方—粉碎—菌体培养—生物酶转化—浸渍—回流—过滤—浓缩—干粉成品。将所得的液体低温浓缩至干粉，保藏作为制备水剂或者膏霜添加成分使用，低温干燥时间依据现有技术调整即可。将干粉溶解于液体制备成水剂或者制作成膏体，本发明的防治痤疮皮肤病的外用剂型的使用方法为：使用时，用手将涂擦患处的药液或者膏体进行均匀涂抹痤疮处，每日2-3次，15天为一疗程。
本发明的有益效果：
1)本发明的配方科学，通过生物酶技术转换，提高植物生物利用度，获得疗效较高具有祛痘、杀菌消炎、控油调理肌肤、修复疤痕的植物配方；
2)本发明调配出依据皮肤生理特点适应不同肤质患者的使用制剂，在消除痤疮后皮肤无疤痕，无毒副作用，使用方便；
3)本发明能有效改善皮肤微循环，平衡油脂分泌，增强细胞新陈代谢，彻底清除皮肤内的垃圾和毒素，使皮肤炎症迅速消除。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明的技术效果进行具体描述。有必要在此指出的是以下实施例只是用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员根据上述发明内容所做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
实施例1
一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂材料，按重量份计包括：苦参20份、丹参15份、莼菜15份、积雪草10份、银杏5份、艾叶5份、马齿苋5份、山竹5份、黄芩5份、牡丹皮5份、甘草3份、麝香草2份和薄荷醇1份。
制备方法：
(1)将鲁氏毛霉菌CAA09-2采用PDA培养基，在28℃条件下，80rpm转速条件下进行菌体繁殖培养，当菌体处于对数生长对数期时，离心收集菌体；
(2)将原料粉碎成80目粉粒，将粉碎后的原料按体积比为1:10添加到0.1mol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH为6.0)中，制得反应液，然后将所述微生物菌添加到反应液里面，进行酶转化反应，制得酶转化液，将酶转化液低温干燥获得活性干粉；原料和微生物菌体的质量比为100:1；反应液的pH为5.5，酶转化反应的温度为28℃，酶转化反应时间为24h；
(3)将活性干粉与质量分数为60％的乙醇溶液按体积比为1:10混合配制成水醇溶液，使用硼酸调节pH使得pH为5.5，常温下20千赫兹的超声波处理30min，然后浸渍回流循环提取，制得浸渍液；所述浸渍回流循环提取为浸渍提取法和回流提取法交替循环使用，单次浸渍提取或回流提取的时间不限，保持总提取时间为每天3小时，连续提取8天；
(4)将所述浸渍液加热至85℃，回流循环6h，即刻冷却过滤，低温干燥成粉末，将粉末、甘油和水按质量比1:2:50混合，即得天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂材料，步骤(2)酶转化物活性干粉中2-10糖的短支链三萜类和皂苷类物质的质量分数为12％。
实施例2
一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂材料，按重量份计包括：苦参10份、丹参10份、莼菜10份、积雪草15份、银杏10份、艾叶10份、马齿苋7份、山竹7份、黄芩7份、牡丹皮7份、甘草2份、麝香草3份和薄荷醇1份。
制备方法：
(1)将鲁氏毛霉菌CAA09-2采用PDA培养基，在28℃条件下，100rpm转速条件下进行菌体繁殖培养，当菌体处于对数生长对数期时，离心收集菌体；
(2)将原料粉碎成80目粉粒，将粉碎后的原料按体积比为1:10添加到0.1mol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH为6.0)中，制得反应液，然后将所述微生物菌添加到反应液里面，进行酶转化反应，制得酶转化液，将酶转化液低温干燥获得活性干粉；原料和微生物菌体的质量比为100:3；反应液的pH为6.0，酶转化反应的温度为40℃，酶转化反应时间为24h；
(3)将活性干粉与质量分数为75％的乙醇溶液按体积比为1:10混合配制成水醇溶液，使用硼酸调节pH使得pH为5.5，常温下40千赫兹的超声波处理30min，然后浸渍回流循环提取，制得浸渍液；所述浸渍回流循环提取为浸渍提取法和回流提取法交替循环使用，单次浸渍提取或回流提取的时间不限，保持总提取时间为每天6小时，连续提取5天；
(4)将所述浸渍液加热至90℃，回流循环3h，即刻冷却过滤，低温干燥成粉末，将粉末、甘油和水按质量比2:5:50混合，即得天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂材料，步骤(2)酶转化物活性干粉中2-10糖的短支链三萜类和皂苷类物质的质量分数为10％。
实施例3
一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂材料，按重量份计包括：苦参15份、丹参20份、莼菜20份、积雪草20份、银杏5份、艾叶15份、马齿苋10份、山竹10份、黄芩10份、牡丹皮10份、甘草5份、麝香草5份和薄荷醇2份。
制备方法：
(1)将鲁氏毛霉菌CAA09-2采用PDA培养基，在28℃条件下，90rpm转速条件下进行菌体繁殖培养，当菌体处于对数生长对数期时，离心收集菌体；
(2)将原料粉碎成80目粉粒，将粉碎后的原料按体积比为1:10添加到0.1mol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH为6.0)中，制得反应液，然后将所述微生物菌添加到反应液里面，进行酶转化反应，制得酶转化液，将酶转化液低温干燥获得活性干粉；原料和微生物菌体的质量比为100:2；反应液的pH为6.0，酶转化反应的温度为34℃，酶转化反应时间为24h；
(3)将活性干粉与质量分数为65％的乙醇溶液按体积比为1:10混合配制成水醇溶液，使用硼酸调节pH使得pH为5.5，常温下30千赫兹的超声波处理30min，然后浸渍回流循环提取，制得浸渍液；所述浸渍回流循环提取为浸渍提取法和回流提取法交替循环使用，单次浸渍提取或回流提取的时间不限，保持总提取时间为每天5小时，连续提取6天；
(4)将所述浸渍液加热至87℃，回流循环4h，即刻冷却过滤，低温干燥成粉末，将粉末、甘油和水按质量比1:5:50混合，即得天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂，步骤(2)酶转化物活性干粉中2-10糖的短支链三萜类和皂苷类物质的质量分数为12％。
实施例4
一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂材料的外用膏霜剂型，提取干粉如同实施例1中步骤(3)制得的粉末一样，配制膏体，油相包括橄榄油乳化剂4-6份、乳木果油2-4份、荷荷巴油2-4份、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物2份，水相包括水80份、甘油5-8份、酶转化干粉提取物5份、1，3-丁二醇2份、卡波姆1份、三乙醇胺1份、1，2-己二醇一份。将水相溶解后，加热到85度，保温30分钟，油相加热到85度，缓慢混入水相，充分搅拌乳化，冷却装瓶。膏霜涂抹于患处，每日3次，14天为一疗程。
实施例5
一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂材料的外用面膜贴。干粉如同实施例1中步骤(3)制得的粉末一样，配制液体。包括水85份、透明质酸0.2份、甘油3-5份、尿囊素1-2份、酶转化干粉提取物3份、1，3-丁二醇3份、1，2-己二醇2份、卡波姆0.5份、三乙醇胺0.5份、黄原胶1份、氢化蓖麻油1份。将干粉溶解在液体里面，充分乳化搅拌均匀。加热到85度，保温30分钟，冷却后灌装。面膜敷于脸部及其患处，每日一次，14天为一疗程。
实施例6
一种天然植物生物酶转化防治痤疮外用制剂材料的外用二元喷雾。干粉如同实施例1中步骤(3)制得的粉末一样，配制液体。包括水85份、透明质酸0.2份、甘油3-5份、尿囊素1-2份、酶转化干粉提取物3份、1，3-丁二醇2份、1，2-己二醇2份、氢化蓖麻油1份。将干粉溶解在液体里面，充分搅拌均匀。加热到85度，保温30分钟，冷却后灌装。喷雾喷洒于脸部及其患处，每日两到三次，14天为一疗程。
本发明进行相关祛痘产品的临床效果验证，研究对象均为寻常痤疮的患者，共60例，其中男20例，女40例，患者年龄范围为18-30岁，研究的患者均符合《中国痤疮治疗指南》中相关诊断标准，皮损为毛囊性丘疹、黑头粉刺、脓疱、结节、囊肿和瘢痕，伴有皮脂溢出。研究患者中排除过敏反应者，排除妊娠期或哺乳期者；排除机体多项重要器官严重功能障碍者。观察本组患者治疗后7d、14d、28d临床疗效，参考《中国痤疮治疗指南》进行综合评价：①痊愈：皮损全部消退，仅存在少量色素沉着及轻微疤痕；②显效：皮损缓解程度≥70％，各项临床症状显著改善；③有效：皮损缓解程度超过≥30％，各项临床症状有明显好转趋势，但未消退；④无效：皮损缓解程度＜30％，各项临床症状未见改善或存在明显加剧趋势。采用本专利技术获得的祛痘膏霜试验结果统计表1如下：
本组患者治疗涂抹祛痘膏霜后7d，14d，28d疗效统计对比：
上述实验例为实施例1制得产品，对照例产品的制备方法相较于实施例1没有微生物菌体酶转化步骤，其他组分和制备方法与实施例1相同。从表1可知本发明提高植物生物利用度，获得疗效较高具有祛痘、杀菌消炎、控油调理肌肤、修复疤痕的植物配方，在消除痤疮后皮肤无疤痕，无毒副作用，使用方便，能有效改善皮肤微循环，平衡油脂分泌，增强细胞新陈代谢，彻底清除皮肤内的垃圾和毒素，使皮肤炎症迅速消除；祛痘效率提高近10％以上。
以上实施例仅为本发明的优选实施例而已，仅用于说明本发明的技术方案而非限制，本领域技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的保护范围当中。
- 上一篇：一种医用注射器针头装配设备
- 下一篇：一种含有谷维素的药物组合物及其制备方法和应用