一种醋酸阿比特龙固体自微乳及其制备方法
阅读说明:本技术 一种醋酸阿比特龙固体自微乳及其制备方法 (Abiraterone acetate solid self-microemulsion and preparation method thereof ) 是由 韩静 张凯 韩阳 左卓 于 2021-07-05 设计创作,主要内容包括:本发明涉及药物制剂技术领域,尤其涉及一种含有醋酸阿比特龙的固体自微乳。所述醋酸阿比特龙固体自微乳由如下质量百分比的组分构成:醋酸阿比特龙0.25%-1.5%、油相5%-10%、表面活性剂25-30%、助表面活性剂12.5-15%、固体载体45-55%。本发明实现了液体药物固体化,并且通过单因素试验进行处方筛选和优化得到了无需防腐剂,易保存,易运输更稳定的自微乳,制备方法简单可控,重复性好。醋酸阿比特龙固体自微乳的乳化液的透射电镜图像显示期粒子呈规则的球状,分布均匀,粒径小于100nm。(The invention relates to the technical field of pharmaceutical preparations, in particular to a solid self-microemulsion containing abiraterone acetate. The abiraterone acetate solid self-microemulsion consists of the following components in percentage by mass: 0.25-1.5% of abiraterone acetate, 5-10% of oil phase, 25-30% of surfactant, 12.5-15% of cosurfactant and 45-55% of solid carrier. The invention realizes the solidification of the liquid medicine, obtains the self-microemulsion which does not need preservative, is easy to store, is easy to transport and is more stable by screening and optimizing the prescription through the single-factor test, and has simple and controllable preparation method and good repeatability. The transmission electron microscope image display period of the emulsion of the abiraterone acetate solid self-microemulsion has the advantages that the particles are regularly spherical, the distribution is uniform, and the particle size is less than 100 nm.)
技术领域
本发明涉及药物制剂
技术领域
,尤其涉及一种含有醋酸阿比特龙的固体自微乳。背景技术
醋酸阿比特龙(abiraterone acetate,AA)是雄激素合成酶CYP17A1抑制剂,临床上用于治疗转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC),属于是脂溶性药物,服用后很大部分会以原型或沉淀排出,使很多昂贵的药物未能发挥药效就被以晶体、沉淀或者原型排出。同时醋酸阿比特龙属于生物药剂学分类系统(BCS)中的第IV类药物,具有渗透性低、溶解性低的特点。其辛醇-水分配系数为5.12(LogP),芳族氮的pKa为5.19,几乎不溶于水(小于0.01mg/ml),且渗透性差,为BCS四类药物,口服吸收时的生物利用率极低。
脂质制剂载药系统在1981年时以简单的油溶液形式进入到药学领域,随后,脂质制剂载药系统在市面上的产品多以自乳化制剂为主,自乳化载药系统可以作为一种有效的手段为了能提高难溶药物的生物利用度,自乳化配方突显了脂质在提高亲脂药物口服吸收方面的重要性。专利文献CN 110538150涉及一种醋酸阿比特龙自微乳,其包括:活性成分:醋酸阿比特龙;辅料:至少一种油相,至少一种乳化剂,和至少一种助乳化剂。该发明虽然提高了生物利用度,但其液体形态使其运输、保存与定量服用的效果得到限制,并且液体制剂沉重,容易渗漏,湿润条件容易细菌,服用时需要量杯,患者多为行动不便的老年男性故难以保证准确到达刻度线,携带也不方便。此外,该组合物为了长期保存还需加入防腐剂和抗氧剂。
发明内容
本发明针对现有技术中存在的不足,实现液体药物固体化,进而解决了液体制剂运输保存以及服用不方便的问题。与此同时,固体醋酸阿比特龙可以减少药物在胃内的析出,从而提高生物利用度。由此提供了一种醋酸阿比特龙固体自微乳及其制备方法。
为实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:
一种醋酸阿比特龙固体自微乳,由如下质量百分比的组分构成:
所述固体载体为Aerosil 200和/或交联PVP。
所述油相为单油酸甘油酯、吐温80、油酸乙酯、Labrafil M 1944CS中任意一种或以上的组合。
乳化剂为Labrasol或吐温80。
助乳化剂为乙醇。
更进一步地,它是由如下重量份的原料组成:
所述醋酸阿比特龙固体自微乳乳化液粒径为81.09nm,载药量为0.97%±0.05%。
醋酸阿比特龙固体自微乳的制备方法:
1)按上述比例将表面活性剂和助表面活性剂混合,得混合液,待用;
2)将醋酸阿比特龙加入至上述混合液中混匀,再加入油相得到醋酸阿比特龙液体自微乳;
3)将固体载体加入上述醋酸阿比特龙液体自微乳内,得到醋酸阿比特龙固体自微乳。
所述步骤1)中表面活性剂和助表面活性剂按质量比为2:1的比例混合。
本发明的有益效果为:
本发明固体自微乳解决醋酸阿比特龙不易吸收,同时通过特定体系使得其能够使活性物质充分发挥其活性并改善液体自微乳在胃中析出的缺点,进而获得固体自微乳解决使液体固体化,从而达到解决了液体制剂运输保存不便以及胃内析出是生物利用度降低的问题,所得醋酸阿比特龙固体自微乳质量研究显示:醋酸阿比特龙固体自微乳乳化液粒径为81.09nm,PDI 为0.204,粒径均匀。载药量为0.97%±0.05%,含量均匀度符合药典规定。DSC、PXRD、SEM图像显示醋酸阿比特龙在醋酸阿比特龙固体自微乳中以无定形状态存在,TEM图像显示其乳化液中的纳米颗粒呈球状分散在水中。醋酸阿比特龙固体自微乳在pH1.2和6.8介质中的溶出度分别为90.6%和82.5%。
同时本发明固体自微乳在高温、强光照射条件下性质稳定,加速稳定性试验结果显示3批次醋酸阿比特龙自微乳样品在加速试验条件下放置6 个月时性状发生转变同时药物含量降低7%-8%,而本发明醋酸阿比特龙固体自微乳在同样条件下各项考察指标均未发生明显变化,稳定性显著优于醋酸阿比特龙自微乳,并且本发明固体自微乳体系的选择更能够达到包封率高。
附图说明
图1为醋酸阿比特龙在油相和乳化剂中的溶解度效果图。
图2为本发明实施例提供的表面活性剂与助表面活性剂之比对制剂自乳化能力的影响效果图。
图3为本发明实施例提供的药物对制剂性质的影响图。
图4为本发明实施例提供的醋酸阿比特龙固体自微乳粒径分布图。
图5为本发明实施例提供的四种样品的DSC图。
图6为本发明实施例提供的四种样品的XRD扫描图。
图7为本发明实施例提供的四种样品的扫描电镜图。
图8为本发明实施例提供的醋酸阿比特龙固体自微乳乳化液的透射电镜图像。
图9为本发明实施例提供的pH1.2介质中的溶出曲线图。
图10为本发明实施例提供的pH6.8介质中的溶出曲线图。
具体实施方式
以下结合实例对本发明的具体实施方式做进一步说明,应当指出的是,此处所描述的具体实施方式只是为了说明和解释本发明,并不局限于本发明。
仪器与试药
仪器:
试药
实施例1醋酸阿比特龙固体自微乳的各成分的选择
1.1.溶解度测试
取多个10mL EP管,每个EP管中加入1g醋酸阿比特龙标准品,不同 EP管中分别加入5mL不同的油、乳化剂和助乳化剂后密封。将EP管固定于恒温水浴振荡器中,在水温37℃、60rpm的条件下振荡48h,之后放置于离心机中离心10min,转速设置为5000rpm。取出离心液用0.45μm的微孔滤膜过滤,再用乙腈稀释其体积5倍,进液相检测醋酸阿比特龙在不同的油和表面活性剂中的溶解度(参见图1)。
其中,色谱条件为:
色谱柱:Promosil C18(4.6mm×250mm,5μm)
检测器:UV 254nm
流速:1.2mL/min
流动相:磷酸盐缓冲液(0.01M KH2PO4,pH=3)-乙腈(25∶75,v/v)
进样量:10μL
柱温:35℃
上述不同的油为油酸甘油酯、辛癸酸甘油酯、大豆油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、Labrafac Lipophile 1349、Labrafil M 1944CS、Labrafil M 2125CS;不同乳化剂为吐温、Labrasol;不同助乳化剂乙醇、PEG400、1,2-丙二醇。
由图1所示,油相中单油酸甘油酯、油酸乙酯、Labrafil M 2125CS对醋酸阿比特龙的溶解度较大,分别为46.25mg/mL、45.63mg/mL、48.02 mg/mL;乳化剂Labrasol中醋酸阿比特龙的溶解度(40.36mg/mL)与吐温 80(35.54mg/mL)中没有显著差别;而乙醇中溶解度(43.02mg/mL)是助乳化剂中最大的。药物在辅料中较大的溶解度有利于自微乳制剂的稳定性,同时还能提高制剂的单位载药量。因此经本实验初步筛选确定处方中油相为单油酸甘油酯、油酸乙酯、Labrafil M 1944CS,乳化剂为Labrasol、吐温 80,助乳化剂为乙醇。
1.2.相分离实验
经过筛选得到药物溶解度大的油相、乳化剂、助乳化剂还需要进行配伍研究。
经过上述溶解度试验筛选得到了3种油相(即单油酸、甘油酯、油酸乙酯)、2种乳化剂(即LabrasoL、吐温80)、1种助乳化剂(即乙醇),将筛选的油相、乳化剂、助乳化剂三者按照10∶80∶10(w/w)的比例进行逐一配伍。逐一配伍后可得到6种不同的组合(参见表1)。取配伍后的自乳化浓缩液1mL用10mL的蒸馏水稀释,静置2h后观察(参见表1)。稀释液出现大量油滴漂浮、分层等明显相分离现象的组合应当弃去,保留稳定的配伍组合进行后续伪三元相图的研究。
表1配伍试验结果
由表1所示,6种组合中,单油酸甘油酯、Labrasol、乙醇组成的配伍液经水稀释后可以形成澄清透明的淡蓝色乳液,放置于室温下24h仍能保持稳定状态。其他的配伍组合在2h内均出现稳定性差、浑浊,液面有油滴等现象。因此,选择单油酸甘油酯、Labrasol、乙醇作为自微乳处方进行优化。
2.3伪三元相图的绘制
使用水滴定法绘建油、水和混合表面活性剂的伪三元相图。将油相和混合表面活性剂的用量按1∶9,2∶8,3∶7,4∶6,5∶5,6∶4,7∶3,8∶ 2,9∶1的比例(v/v)配置,二者先混合均匀,再往其中逐滴加入去离子水,边滴加边搅拌,同时用电导率仪实时监测液体的电导率。初始时形成的是油包水(W/O)型纳米乳,此时液体的黏度较低,电导率最小;随着加入水量的不断增多,液体黏度开始变大,电导率数值也随之增大;继续往体系中滴加去离子水,可以发现液体由黏转变为稀,电导率升高到最大值,此时是水包油(O/W)型纳米乳形成的临界点,记录临界点的加水量。收集各点数据绘制伪三元相图,将各点连成线可以得到两个区域:自乳化区与非乳化区。
2.4固体载体的选择
本次实验选取了5种材料作为备选载体,它们分别是Aerosil 200、交联PVP、微粉硅胶、交联CMC-Na和玉米淀粉。吸附载体主要考察其对L-SEDDS 的吸附能力与解吸附能力。
称取上述五种载体材料各1g置于五个小烧杯中,往载体粉末中逐滴加入事先制得的液体自微乳液,边加边搅拌,此操作持续至粉末出现较差流动性。取出一定量粉末放置于白色A4纸上,若轻压粉末纸上出现油痕则表明吸附量达到饱和状态。记录各载体材料饱和状态时液体滴加量,由此判断材料的液体吸附能力,具体方式为:
取一定量吸附饱和的载体材料放置于烧杯中,加入其吸附液体量的10倍体积的去离子水,搅拌均匀并静置30min,观察稀释液的外观变化。之后取少量稀释液按照液相方法检测醋酸阿比特龙含量。通过计算可得到各载体材料的解吸附能力,以解吸附率表示(参见表2)。
载体材料的吸附与解吸附能力由表2可以看出,Aerosil 200的液体吸附性能最佳,1g的Aerosil 200可以吸收2.956g的自微乳液;吸附量第二的为交联聚维酮,1g能够吸收1.262g自微乳液,这也与Aerosil 200的吸附能力相差甚远,其余材料的吸附能力不佳,1g材料平均只能吸附0.3-0.4 g的自微乳液。在解吸附能力上,Aerosil 200同样非常优异,92.6%的解吸附率与交联聚维酮(93.4%)的解吸附率相差不大。加水稀释后的饱和Aerosil 200粉末在30min内可以形成澄清透亮的淡蓝色乳液,表明Aerosil 200中吸附的自微乳液遇水形成了粒径较小的微乳液。Aerosil 200是一种比表面积为200m2/g的二氧化硅粉末,经气相法制得,加水稀释后可以形成粒径为10-100nm的胶体溶液[48]。鉴于Aerosil200较好的吸附与解吸附能力,选定其作为固体自微乳的固相载体。
表2载体材料的性能测试
实施例2醋酸阿比特龙固体自微乳体系内各成分比例优化
本实验对油相用量、表面活性剂与助表面活性剂比例/Km、药物加入量等进行筛选,以粒径,外观和稳定性为指标获得最优体系。
2.1油相用量
固定表面活性剂与助表面活性剂的比例为2∶1(v/v),加入空白液体自微乳制剂(油相、乳化剂和助乳化剂)总质量10%、15%、20%、25%、 30%的油相,三者混合均匀制成空白自微乳制剂。取1g空白制剂加入10mL 去离子水稀释,48h内观察稀释液稳定性,取少量稀释液测定粒径及其分布(参见表3)。
表3油相用量对制剂性质的影响
空白液体自微乳制剂中油相用量的增大导致了自乳化稀释液的粒径也随之变大,同时乳液外观由澄清透明的淡蓝色逐渐转变为浑浊的乳白色,室温下的稳定性也开始降低。其由于油相比重增大而乳化剂比重减少导致溶液的自乳化能力下降。由表3可知,当油相用量自10%增至20%,乳化液粒径缓慢增大,多分散系数PDI无明显变化;而当油相用量增至30%,粒径剧增至250.83nm,分散度也显著增大,同时乳化液稳定时间降至12h 以下。空白液体自微乳制剂中油相比重增大,乳化剂比例相应减小,这可以避免大量的表面活性剂对胃肠道产生刺激性和毒性,从而提高制剂的安全性。综合考虑,选择20%的油相用量作为较优处方,以便获得粒径较小、稳定时间较长且安全性更高的制剂。
2.2表面活性剂与助表面活性剂比例/Km
固定最佳的油相用量为固体自微乳体系中空白液体自微乳制剂的X%,则混合表面活性剂用量为1-X%。采用1.3所述三元相图法考察Km为1、 1.5、2、3时制剂的自乳化能力。伪三元相图中,自乳化区域越大表明制剂的乳化能力越强,应当选择乳化能力较强的Km值作为优化后的固体自微乳体系(参见图2)。
Km分别为1、1.5、2、3的自微乳制剂的自乳化能力如图2所示(灰色阴影部分区域表示微乳区域)。当Km为1时,微乳区域的面积最小,自乳化能力最差;当Km增大至1.5时,微乳区域也随之扩大;Km继续增大至2时,微乳区域基本已达到最大,其面积与Km为3时相差较小。选择 Km为2作为制剂的优化固体自微乳体系。
2.3药物加入量
上述试验结果作为空白固体自微乳体系最优的辅料组成,再加入空白液体自微乳制剂0.5%、1%、1.5%、2%、3%的醋酸阿比特龙制成载药制剂。具体步骤为:先将定量的醋酸阿比特龙与表面活性剂混合液混匀,超声辅助加快药物的溶解,之后加入油相,摇匀即可。取1g载药制剂加入10mL 去离子水稀释,取少量稀释液测定粒径。取1mL稀释液检测药物含量,经过计算可得不同药量载药制剂的药物包封率(EE%),具体计算公式如下:
药物加入量对载药制剂性质的影响结果如图3所示。研究观察到药量的增加导致了稀释液的粒径逐渐增大而包封率开始出现下降趋势,这与一些相关研究结果类似。事实上,药物加入量自0.5%增加至2.0%的过程中粒径仅仅由75.4nm增大到84.7nm,同时包封率由99.3%下降至96.8%,差异并不显著。当药物加入量扩大至3.0%时,稀释液粒径陡增而包封率突降,这一变化指示了2.0%-3.0%为加药量的临界区域。考虑到醋酸阿比特龙的较低生物利用度导致了临床应用的高剂量,应当选择加药量较大同时包载效果较好的处方,因此2.0%可视作最佳的药物加入量。
2.4固体载体的用量
固体自微乳粉末颗粒的流动性取决于单位制剂中固体载体的加入比例。依次考察液体自微乳与固体载体加入比例(v/v)为1∶2、1:1.5、1∶1、1.5∶ 1、2∶1时粉末的流动性,粉末的流动性可以通过测定它的休止角和压缩度进行评价(参见表5),具体为:
粉末的休止角可以用休止角测试计测定:将100g固体粉末装载于漏斗中,打开漏斗阀门让粉体自然流出落于接收器平面上,接收器平面与粉末圆锥体母线的夹角为休止角θ。一般认为,θ在30度以下时粉末流动性能较好,且θ值越小流动性越佳。
粉末的压缩度可以用振实密度测试仪测定:称取50g固体粉末装填在 100mL量筒中测得其松散体积V0,以一定的频率和幅度进行振动,直至量筒内粉末体积基本恒定时读数,此数值表示为振实体积VF,V0/VF表示豪斯那比,粉末的流动性与V0/VF的数值大小成反比。
测得不同载体加入比例下醋酸阿比特龙固体粉末的流动性变化如表5所示。粉末的流动性随载体加入量的减少而逐渐变差。当液体自微乳与载体加入量比例为1∶1时,休止角为29.3°,V0/VF值为1.14,粉末仍然表现出较好的流动性,制剂也具有较高的载药量,因此选择载体加入量为 40%-60%作为固体自微乳体系。
表5固体自微乳粉末流动性测试结果(n=3)
由上述获得醋酸阿比特龙固体自微乳的成分体系。
实施例3
室温下,称取0.263g乙醇和0.534g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯(Labrasol)于小烧杯中混合,得表面活性剂混合液。
再将10.2mg的醋酸阿比特龙加入至上述获得表面活性剂混合液中混匀,超声辅助加快药物的溶解,待药物完全溶解之后加入0.207g的单油酸甘油酯,摇匀即可得醋酸阿比特龙液体自微乳。
取1.5g醋酸阿比特龙液体自微乳与1.5g交联PVP混匀吸附后,得3g 醋酸阿比特龙固体自微乳。
实施例4
室温下,称取0.265g乙醇和0.536gLabrasol于小烧杯中混合,得表面活性剂混合液。
再将15.3mg的醋酸阿比特龙加入至上述获得混合表面活性剂混合液中混匀,超声辅助加快药物的溶解,待药物完全溶解之后加入0.217g的单油酸甘油酯,摇匀即可得醋酸阿比特龙液体自微乳。
取1.5g醋酸阿比特龙液体自微乳与1.5g交联Aerosil200混匀吸附后,得3g醋酸阿比特龙固体自微乳。
实施例5醋酸阿比特龙固体自微乳的质量评价
1)粒径与多分散系数
取1g S-SEDDS醋酸阿比特龙固体自微乳粉末(按质量百分比组成为:醋酸阿比特龙1%、油相辛葵酸甘油酯9.8%、表面活性剂Labrasol26.15%、助表面活性剂乙醇13.05%、固体载体Aerosil 50%)加其20倍体积量的水稀释乳化完全后静置10min,用滴管吸取少量上层乳液通过动态激光散射粒度仪来分析醋酸阿比特龙固体自微乳乳化液中微粒的平均粒径及其分散度,平行测定三次(参见图4)。
如图4所示,粒径的均值为81.09nm,多分散指数(PDI)为0.204,说明微粒分散度小,粒径均匀。
2)载药量与含量均匀度测定
称取质量为M(约1g)的上述实施例3醋酸阿比特固体自微乳粉末,加入V(20ml)体积的去离子水混合均匀,轻轻搅拌使之乳化后放置一段时间,待不溶性载体沉积后吸取上层清液,检测醋酸阿比特龙的浓度C。制剂载药量(W%)计算公式如下所示:
W%=(C×V)/0.01M×100%
依照2015版中国药典中规定方法(通则0941)测定醋酸阿比特固体自微乳粉末的含量均匀度。取实施例4制备的固体自微乳3批次(批号为 20190405、20190501、20190603)样品,每批次抽取100mg样品各10份作为供试品。测定每份供试品中AA的相对含量x,药物标示量计作100。计算同一批次供试品x的平均值X和标准偏差S以及X-100的绝对值A。若测得2.2S+A≤L(L=15),则可以认为该批次样品符合规定(参见表6)。
表6含量均匀度测定结果(n=3)
通过公式计算,醋酸阿比特龙固体自微乳的载药量为0.97%±0.05%。
三个批次供试品所测得的A+2.2S值分别为3.95、5.89、6.12,均小于 15。可以认为三批样品的含量均匀度合格。
3)药物分子状态的研究与形态学评价
为了观察液体自微乳吸附到固相载体上对药物晶体结构产生的影响,本实验对原料药醋酸阿比特龙(AA)、固相载体Aerosil 200、物理混合物(PM)和实施例的醋酸阿比特龙固体自微乳进行了差示扫描量热(DSC)分析、粉末X射线衍射(PXRD)分析(参见5-8)。
使用差示扫描量热仪获取各样品的DSC分析图,将约5mg的样品放入带盖铝锅中,以不加样空白铝锅为参比。在氮气流量20mL/min吹送保护下,将铝锅从35℃加热至200℃,恒定升温速率为10℃/min。使用X射线衍射仪进行粉末衍射分析,以Cu为靶元素,扫描范围2θ为5°-60°,扫描速度5°/min,扫描步长为0.02°。
为了使制剂的微观形态实现可视化,分别对原料药醋酸阿比特龙、固相载体Aerosil 200、物理混合物(PM)和醋酸阿比特龙固体自微乳(S-SEDDS)进行了扫描电镜(SEM)分析,同时对醋酸阿比特龙固体自微乳乳化液进行了透射电镜(TEM)分析。
使用扫描电镜观察各样品的形态特征:将样品粉末均匀涂布在载物盘的导电胶上,除去残余样品粉末后喷金处理约2min,然后在电压15KV下进行扫描观察。使用透射电镜观察乳化液中微粒的形态特征:将S-SEDDS 粉末加水稀释一定倍数至液体呈现淡蓝色乳光,取少量乳化液滴在碳膜涂覆的铜网上,除去铜网边缘残余液体,然后使用2%磷钨酸溶液对样品进行负染色,待样品干燥后取铜网在加压电压为200KV下进行透射观察。
热分析可以提供与熔化、再结晶、分解和比热容变化有关的信息,这些信息决定了化合物的物理化学性质。热分析结果如图5所示,醋酸阿比特龙的DSC曲线在温度为146.44℃时出现了尖锐的吸热峰,表明原料药粉末处于结晶状态,这与文献报道的熔点(146℃)基本一致。固相载体Aerosil 200在原料药熔点附近没有特定的吸热峰。物理混合物在140℃-150℃之间出现了一个相对平滑的峰,说明原料药晶体依旧存在。醋酸阿比特龙固体自微乳在原料药熔点处的吸热峰完全消失,表明醋酸阿比特龙完全溶解在醋酸阿比特龙液体自微乳中并吸附到固体载体中,以无定形状态存在。同时,为了进一步研究制剂中醋酸阿比特龙的结晶度,对上述样品又进行了 PXRD分析,图谱如图6所示。醋酸阿比特龙原料药的衍射图在多处出现了较强的晶体衍射特征峰。物理混合物衍射图中两处位置的晶体衍射特征峰仍然存在,峰强有所降低,进一步验证了物理混合物中存在醋酸阿比特龙晶体。相比之下,采用固相载体吸附法制备的醋酸阿比特龙固体自微乳衍射图中,无明显晶体衍射峰,这也说明晶态的原料药制备成醋酸阿比特龙固体自微乳后已转变为非晶态。
在本研究中,使用扫描电镜观察了四种样品的表面微观结构。图7显示了各种固体样品的形貌。醋酸阿比特龙作为原料药具有不规则的晶体结构;固体载体Aerosil 200由非常细的颗粒组成了松散集合体,粒径在50μm 附近,同时可以观察到组成的集合体具有粗糙多孔的表面;固特混合物的扫描图中仍然能看到醋酸阿比特龙晶体的存在;但在醋酸阿比特龙固体自微乳中未观察到明显的结晶,表明醋酸阿比特龙溶于液体脂质后吸附在固体载体上。
如图8所示,醋酸阿比特龙固体自微乳乳化液的透射电镜图像显示微乳液中的粒子呈规则的球状,分布均匀,粒径小于100nm。
4)溶出度测定
体外溶出度采用中国药典2015版第二法(浆法)进行测定。分别将10 mg醋酸阿比特龙原料药以及含有10mg醋酸阿比特龙原料药的液体和含有10mg醋酸阿比特龙原料药的按照实施例的醋酸阿比特龙固体自微乳制备体系制备的醋酸阿比特龙固体自微乳分别填充到大小为00型的硬明胶胶囊中作为体外溶出度的考察对象。两种溶出介质分别是pH 1.2的盐酸溶液和pH 6.8的磷酸盐缓冲液,介质体积均500mL。调整参数控制水浴温度为 37℃,搅拌浆速度为100rpm。将载药的明胶胶囊投入溶出杯后开始计时,于2、5、10、20、40、60、120min后取样,每次取样5mL并补充等量的新鲜介质。取样液过滤后检测醋酸阿比特龙含量,计算各时间点的溶出度,即可绘制溶出度-时间曲线图(参见9和10)。
本研究考察了醋酸阿比特龙原料药、醋酸阿比特龙液体自微乳(L-SEDDS)和醋酸阿比特龙固体自微乳(S-SEDDS)在pH 1.2与pH 6.8 介质中2h内的溶出度,结果如图9和图10所示。醋酸阿比特龙原料药在不同pH条件下的累积溶出度存在巨大差异,pH 1.2中约为36.7%,而在pH 6.8中则接近于0,这一现象说明醋酸阿比特龙的溶出效果对pH环境具有一定的依赖性。将药物制成自乳化制剂后,其溶出度得到明显改善,在两种不同介质中都能达到80%以上,其中醋酸阿比特龙液体自微乳在pH 1.2 环境下溶出度最大,可达96.1%;其次醋酸阿比特龙固体自微乳在pH 1.2 环境中的溶出度(90.6%),醋酸阿比特龙固体自微乳在pH 6.8介质中的溶出度也可达82.5%。虽然醋酸阿比特龙固体自微乳在两种介质中溶出度略低于醋酸阿比特龙液体自微乳,但它们的总体行为相似,初始的前20min溶出较快,之后溶出速度逐渐放缓,约1h后进入稳定期。醋酸阿比特龙固体自微乳溶出度相对降低的原因可能是部分药物被吸附在固体载体上而未能释放到溶出介质中。自微乳具备很好的药物增溶作用,能够提升药在溶解状态下被胃肠道吸收的几率,借此提高生物利用度并改善药效。
实施例6
1)影响因素试验
高温试验:
分别取液体自微乳(按质量百分比即组成为:醋酸阿比特龙2%、油相辛葵酸甘油酯19.6%、表面活性剂Labrasol 52.3%、助表面活性剂乙醇26.1%)和固体自微乳(组成为:醋酸阿比特龙1%、油相辛葵酸甘油酯9.8%、表面活性剂Labrasol 26.15%、助表面活性剂乙醇13.05%、固体载体Aerosil 20050%)10g置于30mL扁形称量瓶中,将称量瓶转移至恒温干燥箱中,样品在温度60℃下静置10天,在开始后的第5、10天取样,查看供试品性状是否发生变化,并依照本文上述章节中方法测定醋酸阿比特龙液体自微乳药物含量、澄清度、乳化粒径以及醋酸阿比特龙固体自微乳药物含量、溶出度、乳化粒径等指标(参见表7和8)。
高湿试验:
将上述液体和固体自乳化制剂10g分别置于30mL扁形称量瓶中,将称量瓶转移至药品稳定性试验箱中静置10天,同时控制试验箱内温湿度保持在25℃±0.5℃、90%±3%相对湿度,在开始后的第5、10天取样,查看供试品性状是否发生变化,并依照上述章节中方法测定醋酸阿比特龙固体自微乳药物含量、澄清度、乳化粒径以及醋酸阿比特龙液体自微乳药物含量、溶出度、乳化粒径等指标。
强光照射试验:
将上述液体和固体自乳化制剂10g分别置于30mL扁形称量瓶中,将称量瓶转移至药品稳定性试验箱中静置10天,同时控制试验箱内照度保持在4500lx±300lx,在开始后的第5、10天取样,查看供试品性状是否发生变化,并依照上述章节中方法测定醋酸阿比特龙液体自微乳药物含量、澄清度、乳化粒径以及醋酸阿比特龙固体自微乳药物含量、溶出度、乳化粒径等指标。
实验结果:
样品在高温、高湿、强光照射下试验结果如表所示。结果表明,醋酸阿比特龙液自微乳在各影响因素条件下放置10天,样品性状、药物含量、溶液澄清度、乳化液粒径等考察项目均未出现明显变化,样品性质稳定。醋酸阿比特龙固体自微乳在同样条件下放置10天,样品性状、含量、溶出度、乳化粒径等考察项目未发生明显变化,高湿条件下增失重考察项变大 5.74%,说明样品易吸潮,应当密封储存。
表7醋酸阿比特龙液体自微乳影响因素试验结果
表8醋酸阿比特龙固体自微乳影响因素试验结果
2)加速稳定性试验
取在不同时间制备的3组液体自乳化制剂(组成为:醋酸阿比特龙2%、油相19.6%、表面活性剂52.3%、助表面活性剂26.1%)和不同时间制备固体自乳化制剂(组成为:醋酸阿比特龙1%、辛葵酸甘油酯9.8%、表面活性剂Labrasol 26.15%、助表面活性剂乙醇13.05%、固体载体Aerosil 200 50%)约10g分别转移至30mL扁形具塞称量瓶中(液体和固体自乳化制剂制备的不同时间批号分别为20190513、20190515、20190517)。将装有样品的称量瓶转移至药品稳定性试验箱中静置6个月,控制试验箱内温湿度条件为40℃±0.5℃、75%±3%RH,在第1、2、3、6月底取样,查看供试品性状是否发生变化,并依照上述章节中方法测定醋酸阿比特龙液体自微乳药物含量、澄清度、乳化粒径以及阿比特龙固体自微乳药物含量、溶出度、乳化粒径等指标(参见表9)。
表9阿比特龙液体自微乳加速稳定性试验结果
表10阿比特龙固体自微乳加速稳定性试验结果
试验结果表明,阿比特龙液体自微乳在加速试验条件下放置6个月时3 批次样品性状由淡黄色粘稠液体转变为黄色粘稠液体,可能是脂质变性所致,3批样品中药物含量降低7%-8%,澄清度和乳化粒径未发生明显变化。阿比特龙固体自微乳在同样条件下放置6个月,3批次样品的各个考察项目均未出现明显变化,表明此条件下阿比特龙固体自微乳稳定性强于阿比特龙液体自微乳。
本发明得到的醋酸阿比特龙固体自微乳兼具液体自微乳乳化能力好和固体制剂稳定性佳的优点,无需添加防腐剂,只需干燥条件就可以长期储存,节约了成本,得到的固体自微乳可进一步制备为片、胶囊、颗粒等制剂,为自微乳口服给药剂型提供更多选择。