利用杜仲多糖制备纳米硒的方法及制得的纳米硒
阅读说明：本技术 利用杜仲多糖制备纳米硒的方法及制得的纳米硒 (Method for preparing nano-selenium by using eucommia polysaccharide and prepared nano-selenium ) 是由 黄胜威 吴丽芳 于 2021-06-28 设计创作，主要内容包括：本发明公开一种利用杜仲多糖制备纳米硒的方法,涉及纳米材料技术领域,本发明包括以下步骤：(1)以杜仲叶或杜仲皮为原料制备杜仲多糖粗提物；(2)将多糖粗提物用活性炭进行脱色,并采用大孔树脂进行纯化,然后干燥,得到杜仲多糖；(3)制备杜仲多糖纳米硒复合物溶液；(4)往杜仲多糖纳米硒复合物溶液中加入质量浓度为0.5‰-1‰的β-环糊精,室温搅拌后离心,沉淀物经冷冻干燥后,获得产物。本发明还提供采用上述方法制得的纳米硒。本发明的有益效果在于：本发明合成杜仲多糖包裹纳米硒,杜仲多糖纳米硒稳定性得以提高,再经β-环糊精负载,稳定性进一步加强。(The invention discloses a method for preparing nano-selenium by utilizing eucommia polysaccharide, relating to the technical field of nano materials and comprising the following steps: (1) preparing a eucommia polysaccharide crude extract by taking eucommia leaves or eucommia bark as a raw material; (2) decolorizing the polysaccharide crude extract with activated carbon, purifying with macroporous resin, and drying to obtain Eucommiae cortex polysaccharide; (3) preparing eucommia polysaccharide nano selenium compound solution; (4) adding beta-cyclodextrin with the mass concentration of 0.5-1 per mill into the eucommia polysaccharide nano selenium compound solution, stirring at room temperature, centrifuging, and freeze-drying the precipitate to obtain the product. The invention also provides the nano-selenium prepared by the method. The invention has the beneficial effects that: the synthesized eucommia polysaccharide wraps the nano-selenium, so that the stability of the eucommia polysaccharide nano-selenium is improved, and the stability is further enhanced by loading the eucommia polysaccharide nano-selenium through beta-cyclodextrin.)
技术领域
本发明涉及纳米材料
技术领域
，具体涉及一种利用杜仲多糖制备纳米硒的方法及制得的纳米硒。背景技术
硒(Se)是人和动物维持生命不可缺少的微量元素之一，具有抗氧化、调节免疫、促进动物生长、解毒、缓解应激等功效，在维持机体健康和疾病调节中起着至关重要的作用，被誉为“生命火种”、“抗癌之王”。进入人体的硒，主要作为结构或者活性组分参与形成硒蛋白。这些硒蛋白具有多重的生物功能，包括优良的抗氧化和抗炎症性能，以及诱导产生活性甲状腺激素。正因为硒蛋白与氧化应激以及炎症等因子诱导的多种疾病息息相关，人体内维持适度的硒含量，对提高自身免疫力，抵抗氧化应激以及炎症性疾病有着积极意义。目前我国13个省市的营养调查表明，成人硒摄入量仅为26.63微克/天，仅为推荐日摄入量的一半。因此，现阶段我国人民群众缺硒现象普遍存在，补硒已经刻不容缓，硒产业也成为引爆中国千亿级健康产业的新切入点和新爆炸点。
自然界中硒的存在形式主要有三种-无机硒，有机硒和纳米硒。与无机硒和有机硒相比，纳米硒因其优良的生物活性、良好的生物相容性以及较低的毒性，成为最安全有效的补硒方式，纳米硒的合成应用也成为目前硒产业研究的热点方向之一。纳米硒的制备方法包括理化合成法，微生物还原法和植物提取物合成法。其中，植物提取物因其富含天然多糖、蛋白质等组份，在无机硒被还原生成单质纳米硒的过程，可以包被在纳米硒的表面，起到稳定纳米硒和增强纳米硒生物活性的双重作用。公开号为CN109650350A的专利申请公开一种大规模制备多糖修饰纳米硒的方法及应用，其公开采用香菇多糖、壳聚糖等多糖制备纳米硒，采用香菇多糖修饰的纳米硒稳定性良好，但是香菇多糖修饰的纳米硒抗氧化性能较差。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于采用香菇多糖修饰的纳米硒稳定性良好，但是香菇多糖修饰的纳米硒抗氧化性能较差，提供一种粒径均一、结构稳定、且抗氧化性能佳的纳米硒的制备方法及制得的纳米硒。
本发明通过以下技术手段实现解决上述技术问题：
一种利用杜仲多糖制备纳米硒的方法，包括以下步骤：
(1)以杜仲叶或杜仲皮为原料制备杜仲多糖粗提物；
(2)将多糖粗提物用活性炭进行脱色，并采用大孔树脂进行纯化，然后干燥，得到杜仲多糖；
(3)制备质量浓度为1‰-2‰的杜仲多糖溶液，然后加入质量浓度为0.1-0.2％亚硒酸钠和0.8-1.6％维生素C，搅拌后，将反应混合液置于40-50℃水浴中静置反应4-8h，然后离心，沉淀用去离子水溶解，即获得杜仲多糖纳米硒复合物溶液；
(4)往步骤(3)的杜仲多糖纳米硒复合物溶液中加入质量浓度为0.5‰-1‰的β-环糊精，室温搅拌后离心，沉淀物经冷冻干燥后，获得产物。
有益效果：本发明合成杜仲多糖包裹纳米硒，杜仲多糖纳米硒稳定性得以提高，再经β-环糊精负载，稳定性进一步加强，制得的纳米硒粒径均一，结构稳定，且本发明合成的杜仲多糖纳米硒生物活性更强，杜仲多糖包裹的纳米硒其生物活性明显优于纳米硒和杜仲多糖，且优于香菇多糖制备的纳米硒。本发明中的纳米硒具有杜仲多糖和纳米硒的双重功效，具有良好抑菌消炎，抗氧化及提高免疫力等效果。
本发明采用我国名贵药用植物杜仲的提取物-杜仲多糖合成纳米硒，克服了传统理化方法合成纳米硒成本高，易团聚，合成过程中残留的化学药品可能造成污染和安全隐患等问题。
优选地，所述步骤(3)和步骤(4)中离心转速均为10000rpm-15000rpm，离心时间均为10-20min。
优选地，所述杜仲多糖粗提物的制备方法包括以下步骤：将杜仲叶或杜仲皮干燥后，粉碎，按照料液比1:15-40，加入闪式提取器中，设置电压100-220V，提取次数1-3次，提取时间30-60秒，提取结束后，合并滤液，减压浓缩、离心，收集上清液，向上清液中加入无水乙醇，乙醇终浓度为75-80％，4℃静置过夜后，离心，获得沉淀，即为杜仲多糖粗提物。
优选地，采用活性炭脱色包括以下步骤：将杜仲多糖粗提物溶于磷酸缓冲液，添加活性炭，于50-70℃脱色1-2h，收集滤液，即为脱色处理的杜仲多糖粗提物。
优选地，将杜仲多糖粗提物溶于磷酸缓冲液中，调整多糖粗提物的质量浓度为1-3g/L，然后，加入杜仲多糖粗提物质量0.4-0.8％的活性炭。
优选地，将脱色处理的杜仲多糖粗提物上样至大孔树脂，然后用60％-75％乙醇溶液洗脱，收集滤出液，冷冻干燥，即获得杜仲多糖。
有益效果：与杜仲多糖粗提物、脱色处理的杜仲多糖粗提物相比，添加等量的亚硒酸钠，提取物添加量相同，杜仲多糖粗提物经活性炭脱色和大孔树脂纯化后，合成杜仲多糖纳米硒的量越多。
本发明通过闪式提取器提取杜仲植物多糖，随后经活性炭脱色和大孔树脂吸附纯化，制备高纯度杜仲多糖。
优选地，所述步骤(3)中上样速度为1-2mL/min，所述洗脱速度为1-2mL/min。
优选地，所述大孔树脂为D-101、DM-130、AB-8、NKA-9、HPD 600中的一种。
优选地，将获得的杜仲多糖溶于1L去离子水中，制备质量浓度多糖1‰-2‰的杜仲植物多糖溶液，随后，依次加入1-2g亚硒酸钠和8-16g维生素C。
本发明还提供采用上述方法制得的纳米硒。
本发明的优点在于：本发明合成杜仲多糖包裹纳米硒，杜仲多糖纳米硒稳定性得以提高，再经β-环糊精负载，稳定性进一步加强，且本发明合成的杜仲多糖纳米硒生物活性更强，杜仲多糖包裹的纳米硒其生物活性明显优于纳米硒和杜仲多糖，且优于香菇多糖制备的纳米硒。本发明中的纳米硒具有杜仲多糖和纳米硒的双重功效，具有良好抑菌消炎，抗氧化及提高免疫力等效果。
本发明采用我国名贵药用植物杜仲的提取物-杜仲多糖合成纳米硒，克服了传统理化方法合成纳米硒成本高，易团聚，合成过程中残留的化学药品可能造成污染和安全隐患等问题。
与杜仲多糖粗提物、脱色处理的杜仲多糖粗提物相比，添加等量的亚硒酸钠，提取物添加量相同，杜仲多糖粗提物经活性炭脱色和大孔树脂纯化后，合成杜仲多糖纳米硒的量越多。
附图说明
图1为本发明实施例1中杜仲多糖纳米硒的扫描电镜图。
图2为本发明实施例1中杜仲多糖纳米硒的粒径分布。
图3为本发明实施例1中杜仲多糖纳米硒的EDX能谱分析结果。
图4为本发明实施例1中杜仲多糖纳米硒与杜仲多糖以及化学合成纳米硒的抗氧化能力比较结果图。
图5为本发明不同方式合成的纳米硒的抗氧化性能比较结果图。
图6为本发明不同方式合成的纳米硒稳定性比较结果图。图中A为对比例1，图中B为对比例2，图中C为实施例1。
图7为本发明杜仲多糖纯化前后合成纳米硒的性能比较结果图。图中A为对比例3，B为对比例4，C为对比例5。
图8为不同添加量的活性炭处理对杜仲多糖粗提物纯化效果测定结果图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
下述实施例中所用的试验材料和试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例中未注明具体技术或条件者，均可以按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。
实施例1
利用杜仲多糖制备纳米硒的方法，具体包括以下步骤：
1)杜仲植物多糖粗提物制备：采摘后的杜仲叶，50℃烘干36小时，粉碎后，过60目筛备用。取一定量水，按照料液比1:15的比例配比，加入至闪式提取器中。设定提取时间30秒，电压100V，提取次数1次。提取结束后，合并滤液，减压浓缩处理。随后，4000rpm离心5分钟，收集上清液。向上清液中加入无水乙醇，使得乙醇终浓度为75％，4℃静置过夜，10000rpm离心10分钟，所得沉淀即为杜仲多糖粗提物。
2)杜仲植物多糖粗提物的活性炭脱色：将1)中制备的杜仲多糖粗提物，溶于磷酸缓冲溶液(pH 5.0)中，使得多糖质量浓度为1g/L。添加相当于粗多糖质量0.4％的活性炭，脱色温度50℃，脱色时间1小时，抽滤，收集滤液，即为脱色处理的杜仲植物多糖粗提物。
3)杜仲植物多糖粗提物的纯化：2)中制备的杜仲植物多糖粗提物，以1.0mL/分钟的速度，上样至大孔树脂(D-101)中，采用60％乙醇溶液，以1.0mL/分钟的流速洗脱，收集滤出液，冷冻干燥，即得纯化的杜仲植物多糖冻干粉，计算多糖得率。
4)杜仲多糖纳米硒复合物的合成：取3)中制备的杜仲植物多糖冻干粉溶于1L去离子水中，制备质量浓度多糖1‰的杜仲植物多糖溶液。随后，依次加入1g亚硒酸钠和8g维生素C(Vc)，搅拌均匀后，将反应混合液置于40℃水浴中静置反应4小时，10000rpm离心10分钟，所得沉淀用去离子水溶解，即为杜仲多糖纳米硒复合物溶液。
5)杜仲多糖纳米硒复合物的进一步功能化：向4)中获得的杜仲多糖纳米硒复合物溶液中加入质量浓度为0.5‰的β-环糊精，室温下搅拌2小时，10000rpm离心10分钟，所得沉淀物经冷冻干燥后得到即得到β-环糊精功能化的杜仲多糖纳米硒复合物。
实验结果：采用本实施例中的条件，杜仲多糖的的得率为1.94％。
实施例2
利用杜仲多糖制备纳米硒的方法，具体包括以下步骤：
1)杜仲植物多糖粗提物制备：采摘后的杜仲叶，60℃烘干40小时，粉碎后，过60目筛备用。取一定量水，按照料液比1:30的比例配比，加入至闪式提取器中。设定提取时间40秒，电压160V，提取次数2次。提取结束后，合并滤液，减压浓缩处理。随后，4500rpm离心10分钟，收集上清液。向上清液中加入无水乙醇，使得乙醇终浓度为75％，4℃静置过夜，15000rpm离心20分钟，所得沉淀即为杜仲多糖粗提物。
2)杜仲植物多糖粗提物的活性炭脱色：将1)中制备的杜仲多糖粗提物，溶于磷酸缓冲溶液(pH 5.0)中，使得多糖质量浓度为2g/L。添加相当于粗多糖质量0.5％的活性炭，脱色温度60℃，脱色时间2小时，抽滤，收集滤液，即为脱色处理的杜仲植物多糖粗提物。
3)杜仲植物多糖粗提物的纯化：2)中制备的杜仲植物多糖粗提物，以1.0mL/分钟的速度，上样至大孔树脂(AB-8)中，采用75％乙醇溶液，以1.0mL/分钟的流速洗脱，收集滤出液，冷冻干燥，即得纯化的杜仲植物多糖冻干粉，计算多糖得率。
4)杜仲多糖纳米硒复合物的合成：取3)中制备的杜仲植物多糖冻干粉溶于1L去离子水中，制备质量浓度多糖1.5‰的杜仲植物多糖溶液。随后，依次加入1.5g亚硒酸钠和12g维生素C(Vc)，搅拌均匀后，将反应混合液置于45℃水浴中静置反应8小时，15000rpm离心20分钟，所得沉淀用去离子水溶解，即为杜仲多糖纳米硒复合物溶液。
5)杜仲多糖纳米硒复合物的进一步功能化：向4)中获得的杜仲多糖纳米硒复合物溶液中加入质量浓度为0.8‰的β-环糊精，室温下搅拌4小时，15000rpm离心20分钟，所得沉淀物经冷冻干燥后得到即得到β-环糊精功能化的杜仲多糖纳米硒复合物。
实验结果：采用本实施例中的条件，杜仲多糖的的得率为3.26％。
实施例3
利用杜仲多糖制备纳米硒的方法，具体包括以下步骤：
1)杜仲植物多糖粗提物制备：采摘后的杜仲叶，70℃烘干48小时，粉碎后，过60目筛备用。取一定量水，按照料液比1:40的比例配比，加入至闪式提取器中。设定提取时间60秒，电压220V，提取次数3次。提取结束后，合并滤液，减压浓缩处理。随后，5000rpm离心5分钟，收集上清液。向上清液中加入无水乙醇，使得乙醇终浓度为80％，4℃静置过夜，15000rpm离心10分钟，所得沉淀即为杜仲多糖粗提物。
2)杜仲植物多糖粗提物的活性炭脱色：将1)中制备的杜仲多糖粗提物，溶于磷酸缓冲溶液(pH 5.0)中，使得多糖质量浓度为3g/L。添加相当于粗多糖质0.8％，的活性炭，脱色温度70℃，脱色时间1小时，抽滤，收集滤液，即为脱色处理的杜仲植物多糖粗提物。
3)杜仲植物多糖粗提物的纯化：2)中制备的杜仲植物多糖粗提物，以1.0-2.0mL/分钟的速度，上样至大孔树脂NKA-9中，采用60％乙醇溶液，以1.5mL分钟的流速洗脱，收集滤出液，冷冻干燥，即得纯化的杜仲植物多糖冻干粉，计算多糖得率。
4)杜仲多糖纳米硒复合物的合成：取3)中制备的杜仲植物多糖冻干粉溶于1L去离子水中，制备质量浓度多糖0.1％的杜仲植物多糖溶液。随后，依次加入2g亚硒酸钠和16g维生素C(Vc)，搅拌均匀后，将反应混合液置于50℃水浴中静置反6小时，10000rpm离心20分钟，所得沉淀用去离子水溶解，即为杜仲多糖纳米硒复合物溶液。
5)杜仲多糖纳米硒复合物的进一步功能化：向4)中获得的杜仲多糖纳米硒复合物溶液中加入质量浓度为1‰的β-环糊精，室温下搅拌4小时，15000rpm离心20分钟，所得沉淀物经冷冻干燥后得到即得到β-环糊精功能化的杜仲多糖纳米硒复合物。
实验结果：采用本实施例中的条件，杜仲多糖的的得率为2.21％。
实施例4
本实施例与实施例1的区别之处在于：将杜仲叶替换成杜仲皮。
实施例5
本实施例与实施例1的区别之处在于：调整活性炭的添加量为0.6％。
对比例1
采用化学合成法合成纳米硒。将浓度为25mM的半胱氨酸在磁力搅拌器的作用下，逐滴滴加到10mL 1M Na2SeO的溶液中，然后利用蒸馏水定容到25ml，室温下反应30min，10000rpm离心20分钟，得到的红色沉淀即为化学法制备的纳米硒。
对比例2
本对比例与实施例1的区别之处在于：将步骤4)中的杜仲多糖纳米硒复合物溶液进行冷冻干燥。
对比例3
1)杜仲植物多糖粗提物制备：采摘后的杜仲叶，50℃烘干36小时，粉碎后，过60目筛备用。取一定量水，按照料液比1:15的比例配比，加入至闪式提取器中。设定提取时间30秒，电压100V，提取次数1次。提取结束后，合并滤液，减压浓缩处理。随后，4000rpm离心5分钟，收集上清液。向上清液中加入无水乙醇，使得乙醇终浓度为75％，4℃静置过夜，10000rpm离心10分钟，所得沉淀即为杜仲多糖粗提物。
2)杜仲多糖纳米硒复合物的合成：取1)中制备的杜仲多糖粗提物溶于1L去离子水中，制备质量浓度多糖1‰的杜仲植物多糖溶液。随后，依次加入1g亚硒酸钠和8g维生素C(Vc)，搅拌均匀后，将反应混合液置于40℃水浴中静置反应4小时，10000rpm离心10分钟，所得沉淀用去离子水溶解，即为杜仲多糖纳米硒复合物溶液。
3)杜仲多糖纳米硒复合物的进一步功能化：向2)中获得的杜仲多糖纳米硒复合物溶液中加入质量浓度为0.5‰的β-环糊精，室温下搅拌2小时，10000rpm离心10分钟，所得沉淀物经冷冻干燥后得到即得到β-环糊精功能化的杜仲多糖纳米硒复合物。
对比例4
1)杜仲植物多糖粗提物制备：采摘后的杜仲叶，50℃烘干36小时，粉碎后，过60目筛备用。取一定量水，按照料液比1:15的比例配比，加入至闪式提取器中。设定提取时间30秒，电压100V，提取次数1次。提取结束后，合并滤液，减压浓缩处理。随后，4000rpm离心5分钟，收集上清液。向上清液中加入无水乙醇，使得乙醇终浓度为75％，4℃静置过夜，10000rpm离心10分钟，所得沉淀即为杜仲多糖粗提物。
2)杜仲植物多糖粗提物的活性炭脱色：1)中制备的杜仲多糖粗提物，溶于磷酸缓冲溶液(pH 5.0)中，使得多糖质量浓度为1g/L。添加相当于粗多糖质量0.4％的活性炭，脱色温度50℃，脱色时间1小时，抽滤，收集滤液，冷冻干燥，即为脱色处理的杜仲植物多糖粗提物。
3)杜仲多糖纳米硒复合物的合成：取2)中制备的杜仲植物多糖粗提物溶于1L去离子水中，制备质量浓度多糖1‰的杜仲植物多糖溶液。随后，依次加入1g亚硒酸钠和8g维生素C(Vc)，搅拌均匀后，将反应混合液置于40℃水浴中静置反应4小时，10000rpm离心10分钟，所得沉淀用去离子水溶解，即为杜仲多糖纳米硒复合物溶液。
4)杜仲多糖纳米硒复合物的进一步功能化：向3)中获得的杜仲多糖纳米硒复合物溶液中加入质量浓度为0.5‰的β-环糊精，室温下搅拌2小时，10000rpm离心10分钟，所得沉淀物经冷冻干燥后得到即得到β-环糊精功能化的杜仲多糖纳米硒复合物。
对比例5
本对比例采用壳聚糖制备纳米硒，在实施例1的基础上将杜仲多糖替换成同等含量的壳聚糖(购自北京索莱宝科技有限公司)。
对比例6
本对比例采用香菇多糖制备纳米硒，在实施例1的基础上将杜仲多糖替换成同等含量的香菇多糖(购自长沙合健生物科技有限公司)。
对比例7
本对比例与实施例1的区别之处在于：调整活性炭的添加量为0.2％。
对比例8
本对比例与实施例1的区别之处在于：调整活性炭的添加量为0.3％。
实验数据与分析：
采用马尔文激光粒度测试仪(DLS)检测杜仲多糖纳米硒复合物的粒径。采用扫描电子显微镜观察杜仲多糖纳米硒复合物的大小及分散情况。采用能谱仪(EDS)表征杜仲多糖纳米硒样品里的元素含量。采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)表征杜仲多糖纳米硒样品里的官能团组成。参照国标GB/T39100-2020，采用DPPH自由基清除能力试验评估杜仲多糖纳米硒的抗氧化能力。这里需要说明的是，激光粒度仪、扫描电子显微镜、能谱仪的测定方法均为现有技术。
实施例1中杜仲多糖纳米硒如图1所示，粒径范围为20-50nm。采用扫描电子显微镜及能谱仪(SEM-EDX)，如图2和图3所示，观察到粒径为20-50nm的纳米颗粒，EDX能谱显示出Se的特征峰，表明制备的纳米颗粒为纳米硒颗粒。
马尔文激光粒度测试仪(DLS)检测杜仲多糖纳米硒复合物的粒径结果表明，实施例2中合成的杜仲多糖纳米硒粒径30-50nm。
马尔文激光粒度测试仪(DLS)检测杜仲多糖纳米硒复合物的粒径结果表明，实施例3中合成的杜仲多糖纳米硒粒径50-80nm。
如图4所示，由于杜仲多糖与纳米硒协的同作用，不同浓度下，实施例1合成的杜仲多糖纳米硒DPPH自由基清除能力明显高于实施例1中的单纯的杜仲多糖的清除效果，且高于对比例1中的化学法合成的纳米硒。其中图4中横坐标表示杜仲多糖、杜仲多糖纳米硒、对比例1中化学合成纳米硒的浓度。
如图5所示，多糖纳米硒浓度为1mg/mL时，杜仲多糖纳米硒的抗氧化性能优于壳聚糖纳米硒和香菇多糖纳米硒。
图6为不同方式合成的纳米硒稳定性比较。图中A为对比例1，图中B为对比例2，图中C为实施例1。可以看出，纳米硒水溶液在静置1天后，A、B底部均有颗粒状沉淀，为纳米硒团聚形成。C中无纳米硒团聚，杜仲多糖纳米硒均匀分布于溶液中，说明负载β-环糊精后稳定性得到显著提高。
图7为杜仲多糖纯化前后合成纳米硒的性能比较。图中A为对比例3，采用杜仲多糖粗提物合成纳米硒，B为对比例4，采用经活性炭脱色的杜仲多糖粗提物合成纳米硒，C为对比例5，采用经活性炭脱色和大孔树脂纯化的杜仲多糖，A、B、C中提取物添加量均为1g/L，亚硒酸钠添加量均为2mM。颜色越深，表示合成的杜仲多糖纳米硒的量越多。
图8为不同添加量的活性炭处理对杜仲多糖粗提物纯化效果的影响，未经纯化处理的杜仲多糖初提物中的多糖含量和杂质含量均设定为100％。当活性炭添加量为0.5％时，多糖得率越高，但当活性炭添加量增加后，多糖得率下降。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
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