一种咪唑类衍生物及其制备方法和在医药上的应用
阅读说明：本技术 一种咪唑类衍生物及其制备方法和在医药上的应用 (Imidazole derivative, preparation method and medical application thereof ) 是由 张晨 赵明亮 谷禾 余彦 李瑶 严庞科 于 2020-09-08 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶及其制备方法和医药上的应用。(The invention provides a compound shown in a general formula (I) or a stereoisomer, a deuterode, a solvate, a prodrug, a metabolite, a pharmaceutically acceptable salt or a eutectic crystal thereof, and a preparation method and medical application thereof.)
技术领域
本发明涉及医药领域，具体的说，是涉及咪唑类衍生物及其制备方法和在医药上的应用。
背景技术
肾上腺素能受体是一种G-蛋白耦联型受体，分为肾上腺素能α受体和β受体。α受体包括α1、α2受体，β受体包括β1、β2、β3受体。α2受体广泛分布于中枢与周围神经系统及其他器官组织(血管、肝脏、肾脏、胰腺、血小板等)。α2A,α2B,α2C是α2受体的三种亚型(Bylund等人，M o l.Pharmacol.,1992,42,1-5)，脑内的α2A主要集中在脑桥和延髓，参与交感神经信号从中枢向外周的传递。刺激突触前α2A可通过负反馈机制，调节肾上腺素的释放；刺激突触后α2A，可引起神经细胞膜的超极化。
右美托咪定是高选择性的α2受体激动剂，可产生镇静、镇痛、抗交感、利尿、抗寒战；可产生类似自然睡眠的镇静催眠作用，易于唤醒，且无呼吸抑制作用；右美托咪定可用于麻醉术前、术中和术后；常见不良反应为低血压和心动过缓，起效和苏醒相对较慢。
发明内容
为达到更好的治疗效果的目的，更好的满足市场需求，希望能开发出新一代高效的具有缩短镇静起效时间更快和/或苏醒时间更短的α2受体激动剂。本发明将提供一种新型结构的α2 受体激动剂，并发现具有此类结构的化合物具有良好的活性，并表现出苏醒时间更短的优点。
本发明提供一种通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中
R1各自独立的选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C3-6环烷基，所述的烷基、烯基、炔基、烷氧基或环烷基任选进一步被0至4个选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、C1-4烷基、C1-4烷氧基或C3-6环烷基的取代基所取代；
R2选自H、D或F；
R3、R4、R5各自独立的选自H或D，条件是R3、R4或R5中至少有一个选自D；
R6选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C3-6环烷基，所述的烷基、烯基、炔基、烷氧基或环烷基任选进一步被0 至4个选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、C1-4烷基、C1-4烷氧基或C3-6环烷基的取代基所取代；
R7、R8或R9各自独立的选自H、D或C1-6烷基，所述的烷基任选进一步被0至4个选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、C1-4烷基、C1-4烷氧基或C3-6环烷基的取代基所取代；
n选自0、1、2或3。
本发明的一些实施例涉及一种通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中
R1各自独立的选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C3-6环烷基，优选H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、 CF3、CD3、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C1-6烷氧基，更优选H、D、F、Cl、Br、I、OH、 NH2、氰基、CF3、CD3、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、乙烯基、丙烯基、烯丙基、乙炔基、丙炔基、炔丙基、甲氧基、乙氧基或丙氧基，所述的烷基、烯基、炔基、烷氧基或环烷基任选进一步被0至4个选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、C1-4烷基、C1-4烷氧基或C3-6环烷基的取代基所取代；
R2选自H、D或F；
R3、R4、R5各自独立的选自H或D，条件是R3、R4或R5中至少有一个选自D；
R6选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C3-6环烷基，优选H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、 C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C1-6烷氧基，更优选H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、 CF3、CD3、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、乙烯基、丙烯基、烯丙基、乙炔基、丙炔基、炔丙基、甲氧基、乙氧基或丙氧基，所述的烷基、烯基、炔基、烷氧基或环烷基任选进一步被 0至4个选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、C1-4烷基、C1-4烷氧基或C3-6环烷基的取代基所取代；
R7、R8或R9各自独立的选自H、D或C1-6烷基，优选H，所述的烷基任选进一步被0至 4个选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、C1-4烷基、C1-4烷氧基或C3-6环烷基的取代基所取代；
n选自0、1、2或3。
本发明的一些实施例涉及一种通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中
R1各自独立的选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C3-6环烷基，所述的烷基、烯基、炔基、烷氧基或环烷基任选进一步被0至4个选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、C1-4烷基、C1-4烷氧基或C3-6环烷基的取代基所取代；
R2选自H、D或F；
R3、R4、R5各自独立的选自H或D，条件是R3、R4或R5中至少有一个选自D；
R6选自甲基或CD3；
R7、R8或R9各自独立的选自H或D，优选H；
n选自0、1、2或3。
本发明的一些实施例涉及一种通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中
R1各自独立的选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基或C1-4烷氧基，所述的烷基、烯基、炔基或烷氧基任选进一步被0至4个选自 H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、C1-4烷基或C1-4烷氧基的取代基所取代；
R2选自H、D或F；
R3、R4、R5各自独立的选自H或D，条件是R3、R4或R5中至少有一个选自D；
R6选自甲基或CD3；
R7、R8或R9各自独立的选自H或D，优选H；
n选自0、1、2或3。
本发明的一些实施例涉及一种通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中
R1各自独立的选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、乙烯基、丙烯基、烯丙基、乙炔基、丙炔基、炔丙基、甲氧基、乙氧基或丙氧基，所述的甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、乙烯基、丙烯基、烯丙基、乙炔基、丙炔基、炔丙基、甲氧基、乙氧基或丙氧基任选进一步被0至4个选自H、D、F、Cl、Br、I、 OH、NH2、氰基、CF3、C1-4烷基或C1-4烷氧基的取代基所取代；
R2选自H、D或F；
R3、R4、R5各自独立的选自H或D，条件是R3、R4或R5中至少有一个选自D；
R6选自甲基或CD3；
R7、R8或R9各自独立的选自H或D，优选H；
n选自0、1、2或3。
本发明的一些实施例涉及一种通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中
R1各自独立的选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、乙烯基、丙烯基、烯丙基、乙炔基、丙炔基、炔丙基、甲氧基、乙氧基或丙氧基，所述的甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、乙烯基、丙烯基、烯丙基、乙炔基、丙炔基、炔丙基、甲氧基、乙氧基或丙氧基任选进一步被0至4个选自H、D、F、Cl、Br、I、 OH、NH2、氰基、CF3、C1-4烷基或C1-4烷氧基的取代基所取代；
R2选自H、D或F；
R3、R4、R5选自D；
R6选自甲基或CD3；
R7、R8或R9各自独立的选自H或D，优选H；
n选自0、1、2或3。
本发明的一些实施例涉及一种通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中该化合物选自如下结构：
本发明的一些实施例涉及一种通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中，盐选自三氟乙酸盐或盐酸盐。
本发明提供一种药物组合物，包括本发明任一项所述的通式(I)化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，以及要学上可接受的载体。
本发明任一项所述的通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶在用于镇静作用或镇痛作用的药物中的应用。
本发明任一项所述的通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶在用于治疗谵妄、活动亢进型谵妄、失眠、注意缺陷多动障碍、苯并二氮杂或酒精或阿片样物质或烟草戒断、早泄、高血压、心动过速、不宁腿综合征、肌痉挛状态、热潮红、焦虑、创伤后应激障碍、疼痛、慢性骨盆痛综合征、爆发性癌症疼痛的药物中的应用。
合成方法
为了完成本发明的目的，本发明化合物可以由以下方案制备而得：
方案一：
X选自Cl、Br、I、OTs(对甲苯磺酰基)或苯磺酸酯基；
PG1选自胺基保护基，优选PG2选自硅基类保护基，优选叔丁基二甲基硅基(TBS)；
n、R1、R2、R3、R4、R5和R6与通式(I)所示化合物中取代基的定义相同；
通式(M-1)化合物通过常规的成酰氯反应转化为通式(M-2)化合物；通式(L-1)与通式(M-2) 化合物通过亲核取代反应得到通式(M-3)化合物；通式(M-3)化合物通过亲核加成反应得到通式 (M-4)化合物；通式(M-4)化合物与通式(L-2)化合物通过亲核取代得到通式式(M-5)化合物；通式(M-5)化合物脱保护基反应得到通式(M-6)化合物；通式(M-6)化合物通过氢化反应得到通式(I) 化合物。
除非有相反的陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
本发明所述基团和化合物中所涉及的碳、氢、氧、硫、氮或卤素均包括它们的同位素，及本发明所述基团和化合物中所涉及的碳、氢、氧、硫、氮或卤素任选进一步被一个或多个它们对应的同位素所替代，其中碳的同位素包括12C、13C和14C，氢的同位素包括氕(H)、氘(D，又称为重氢)、氚(T，又称为超重氢)，氧的同位素包括16O、17O和18O，硫的同位素包括32S、33S、34S和36S，氮的同位素包括14N和15N，氟的同位素19F，氯的同位素包括35Cl和37Cl，溴的同位素包括79Br和81Br。
“烷基”是指1至20个碳原子的直链或支链饱和脂肪族烃基，优选为1至8个碳原子的烷基，更优选为1至6个碳原子的烷基，进一步优选为1至4个碳原子的烷基。非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、新丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基及其各种支链异构体；所述的烷基可以任选进一步被0至6个选自H、D、F、 Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、烷基、烷氧基、环烷基、烯基、炔基、的取代基所取代，本文中出现的烷基，其定义与本定义一致。
“烯基”是指直链和支链的一价不饱和烃基，其具有至少1个，通常有1、2或3个碳碳双键，主链包括2至10个碳原子，进一步优选2至6个碳原子，更优选在主链上有2至4个碳原子，烯基实施例包括但不限于乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、1-甲基-1-丁烯基、2-甲基-1-丁烯基、2-甲基-3-丁烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、1-甲基-1-戊烯基、2-甲基-1-戊烯基、1-庚烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、1-辛烯基、3-辛烯基、1-壬烯基、 3-壬烯基、1-癸烯基、4-癸烯基、1,3-丁二烯、1,3-戊二烯、1,4-戊二烯和1,4-己二烯等；所述的烷基可以任选进一步被0至5个选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、烷基、烷氧基、环烷基、烯基、炔基、取代基所取代。本文中出现的烯基，其定义与本定义一致。
“炔基”是指直链和支链的一价不饱和烃基，其具有至少1个，通常有1、2或3个碳碳三键，主链包括2至10个碳原子，进一步优选2至6个碳原子，更优选在主链上有2至4个碳原子，炔基实施例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基、4-戊炔基、3-戊炔基、1-甲基-2-丁炔基、2-己炔基、3-己炔基、2-庚炔基、3-庚炔基、4-庚炔基、3-辛炔基、3-壬炔基和4-癸炔基等；所述的炔基可以任选进一步被0至5个选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、烷基、烷氧基、环烷基、烯基、炔基、的取代基所取代。本文中出现的炔基，其定义与本定义一致。
“烷氧基”是指-O-烷基。非限制性实施例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、正己氧基、环丙氧基和环丁氧基。所述的烷氧基可以任选进一步被0至5个选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、烷基、烷氧基、环烷基、烯基、炔基的取代基所取代。本文中出现的烷氧基，其定义与本定义一致。
“环烷基”是指饱和环状烷基，环上包括3至10个碳原子，优选为3至8个碳原子，进一步优选为3至6个碳原子，环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基等；所述的的环烷基可以任选进一步0至5个选自H、D、F、Cl、Br、I、OH、NH2、氰基、CF3、CD3、烷基、烷氧基、环烷基、烯基、炔基的取代基所取代。本文中出现的环烷基，其定义与本定义一致。
“任选”或“任选地”是指随后所描述的事件或环境可以但不必须发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。如：“任选被F取代的烷基”指烷基可以但不必须被F取代，说明包括烷基被F取代的情形和烷基不被F取代的情形。
“药学上可接受的盐”或“其药学上可接受的盐”指的是保持游离酸或游离碱的生物有效性和特性，且所述的游离酸通过与无毒的无机碱或有机碱，或所述的游离酸通过与无毒的无机酸或有机酸反应获得的那些盐。
“载体”指的是不会对生物体产生明显刺激且不会消除所给予化合物的生物活性和特性的载体或稀释剂。
“赋形剂”指的是加入到药物组合物中以进一步依赖于化合物给药的惰性物质。
“有效剂量”指引起组织、系统或受试者生理或医学反应的化合物的量，此量是所寻求的，包括在受治疗者身上施用时足以预防受治疗的疾患或病症的一种或几种症状发生或使其减轻至某种程度的化合物的量。
“IC50”指半数抑制浓度，指达到最大抑制效果一半时的浓度。
附图说明
图1为ICR小鼠给予化合物1后各时间点镇静评分
图2为ICR小鼠给予化合物2c后各时间点镇静评分
具体实施方式
以下通过具体实施例详细说明本发明的实施过程和产生的有益效果，旨在帮助阅读者更好地理解本发明的实质和特点，不作为对本案可实施范围的限定。
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或(和)质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ) 以10-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用(Bruker Avance III 400和Bruker Avance 300)核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)，氘代氯仿(CDCl3)，氘代甲醇(CD3OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
MS的测定用(Agilent 6120B(ESI)和Agilent 6120B(APCI))。
HPLC的测定使用安捷伦1260DAD高压液相色谱仪(Zorbax SB-C18 100×4.6mm)。
本发明的己知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买于泰坦科技、安耐吉化学、上海德默、成都科龙化工、韶远化学科技、百灵威科技等公司。
TBS是指叔丁基二甲基硅基。
实施例1：4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑的三氟乙酸盐(化合物1)
4-[1-[3-methyl-2-(trideuteriomethyl)phenyl]ethyl]-1H-imidazole,trifluoroacetate
第一步：2-溴-3-甲基-苯甲酰氯(1b)
2-bromo-3-methyl-benzoyl chloride
室温下，将2-溴-3-甲基-苯甲酸(1a)(5.00g，23.25mmol)溶于干燥二氯甲烷(60mL)中，氮气保护下，向其中加入草酰氯(8.60g，68.00mmol)后，室温反应3h。将反应液减压浓缩得到粗产物2-溴-3-甲基-苯甲酰氯(1b)(8.00g)，无需纯化，直接用于下一步。
第二步：4-(2-溴-3甲基-苯甲酰基)-2-[叔丁基(二甲基)硅基]-N,N-二甲基咪唑-1-磺酰胺(1c)
4-(2-bromo-3-methyl-benzoyl)-2-[tert-butyl(dimethyl)silyl]-N,N-dimethyl-imidazole-1-sulfona mide
氮气保护下，将N,N-二甲基咪唑-1-磺酰胺(1b`)(5.30g，30.00mmol)溶于干燥四氢呋喃 (60mL)中，降温至-78℃。将正丁基锂(13mL，2.50mol/L in hexane)逐滴加入反应液中，并在该温度下反应30min后，向其中加入叔丁基二甲基氯硅烷(5.00g，33.17mmol)的四氢呋喃(5mL) 溶液。缓慢升温至室温反应2h后，降温至-78℃。再次向反应液中滴加正丁基锂(13mL，2.50 mol/L in hexane)，反应30min后，向其中滴加2-溴-3-甲基-苯甲酰氯(1b)(8.00g)的四氢呋喃(10 mL)溶液。缓慢升温至室温后反应16h。加入饱和氯化铵水溶液(40mL)，乙酸乙酯50mL×2萃取；合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚：乙酸乙酯(v/v)＝15:1)得白色固体4-(2-溴-3甲基-苯甲酰基)-2-[叔丁基(二甲基)硅基]-N,N-二甲基咪唑-1-磺酰胺(1c)(5.00g，48％)。
LCMS m/z＝486，488[M+1]+.
第三步：4-[1-(2-溴-3-甲基-苯基)-1-羟基-乙基]-2-[叔丁基(二甲基)硅基]-N,N-二甲基咪唑-1- 磺酰胺(1d)
4-[1-(2-bromo-3-methyl-phenyl)-1-hydroxy-ethyl]-2-[tert-butyl(dimethyl)silyl]-N,N-dimethyl-i midazole-1-sulfonamide
氮气保护下，将4-(2-溴-3甲基-苯甲酰基)-2-[叔丁基(二甲基)硅基]-N,N-二甲基咪唑-1-磺酰胺(1c)(3.67g,7.54mmol)和干燥四氢呋喃(20mL)加入反应瓶中，降温至0℃，向反应瓶中滴加甲基溴化镁(20mL,1.00mol/L in THF)，升温至室温，并在该温度下反应2h。加入饱和氯化铵水溶液(20mL)，乙酸乙酯20ml×2萃取；合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚：乙酸乙酯(v/v)＝15:1)得到白色固体4-[1-(2-溴-3-甲基- 苯基)-1-羟基-乙基]-2-[叔丁基(二甲基)硅基]-N,N-二甲基咪唑-1-磺酰胺(1d)(3.32g，88％)。
LCMS m/z(ESI)＝502，504[M+1]+。
第四步：2-[叔丁基(二甲基)硅基]-4-[1-羟基-1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-N,N-二甲基咪唑-1-磺酰胺(1e)
2-[tert-butyl(dimethyl)silyl]-4-[1-hydroxy-1-[3-methyl-2-(trideuteriomethyl)phenyl]ethyl]-N,N- dimethyl-imidazole-1-sulfonamide
氮气保护下，将4-[1-(2-溴-3-甲基-苯基)-1-羟基-乙基]-2-[叔丁基(二甲基)硅基]-N,N二甲基咪唑-1-磺酰胺(1d)(1.00g，1.99mmol)和干燥四氢呋喃(20mL)加入反应瓶中，降温至-78℃，向反应瓶中滴加正丁基锂(2mL，2.50mol/L in hexane)，该温度下反应30min后，向反应瓶中滴加氘代碘甲烷(0.58g，4.00mmol)的四氢呋喃(1mL)溶液，滴加完全后，缓慢升温至室温，反应16h。加入饱和氯化铵水溶液(10mL)，乙酸乙酯20ml×2萃取；合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚：乙酸乙酯(v/v)＝15:1)得到白色固体2-[叔丁基(二甲基)硅基]-4-[1-羟基-1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-N,N-二甲基咪唑-1-磺酰胺(1e)(0.80g，90％)。
LCMS m/z＝441[M+1]+
第五步：4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙烯基]-1H-咪唑(1f)
4-[1-[3-methyl-2-(trideuteriomethyl)phenyl]vinyl]-1H-imidazole
室温下，将2-[叔丁基(二甲基)硅基]-4-[1-羟基-1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-N,N- 二甲基咪唑-1-磺酰胺(1e)(0.80g，1.82mmol)溶于乙醇(10mL)后，向其中加入氢氧化钠(1.20 g，30.00mmol)的水(10mL)溶液。升温至90℃，反应24h。反应液减压浓缩，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷：甲醇(v/v)＝30:1)得到白色固体4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基] 乙烯基]-1H-咪唑(1f)(0.24g，70％)。
LCMS m/z＝202[M+1]+.
第六步：4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑的三氟乙酸盐(化合物1)
4-[1-[3-methyl-2-(trideuteriomethyl)phenyl]ethyl]-1H-imidazole,trifluoroacetate
室温下，将4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙烯基]-1H-咪唑(1f)(25mg，0.12mmol) 溶于甲醇(1mL)中，将10％钯碳(15mg)加至反应液中，氢气置换3次，于该温度下反应5h。将反应液垫硅藻土过滤，滤液减压浓缩至干，粗品经Pre-HPLC纯化(仪器及制备柱：采用 WATERS 2767制备液相，制备柱型号是Xselect C18，5μm,内径*长度＝19mm*150mm)。制备方法：粗品用二甲亚砜溶解，并用0.45μm滤膜过滤，制备成样品液。流动相体系：乙腈/水(含 0.1％TFA)。梯度洗脱方法：乙腈由5％梯度洗脱50％(洗脱时间15min)，冻干后得到4-[1-[3- 甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑的三氟乙酸盐(化合物1)(15mg，38％)。
LCMS m/z＝204[M+1]+.
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.76(d,1H),7.34(t,1H),7.08-7.03(m,2H),6.82(dd,1H), 4.56(q,1H),2.31(s,3H),1.61(d,3H).
实施例2：4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑(化合物2)
4-[1-[3-methyl-2-(trideuteriomethyl)phenyl]ethyl]-1H-imidazole
将4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙烯基]-1H-咪唑(1f)(400mg，1.99mmol)溶于甲醇(40mL)中，然后将10％钯碳(300mg)加至反应液中，氢气置换3次，于该温度下反应5h。将反应液垫硅藻土过滤，滤液减压浓缩至干，得游离态4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑(化合物2)(300mg，74％)。
LCMS m/z＝204[M+1]+.
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.55(d,1H),6.99-6.97(m,2H)，6.93-6.88(m,1H)，6.67(t,1H), 4.37(q,1H),2.28(s,3H),1.53(d,3H).
实施例3：4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑的盐酸盐-P1(化合物2b)
4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑的盐酸盐-P2(化合物2c)
第一步：4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑-P1(2P1)
4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑-P2(2P2)
将4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑(化合物2)(250mg，1.23mmol)送SFC 手性拆分。(仪器及制备柱：采用MGII preparative SFC(SFC-14)仪器；色谱柱型号是Whelk O1(S,S),250×30mm I.D.,5μm)。制备方法：化合物经12毫升甲醇和3mL二氯甲烷混合溶液溶解，制备成样品液。流动相体系：超临界二氧化碳和异丙醇(0.1％氨水)；梯度洗脱方法：35％的异丙醇(0.1％氨水)；洗脱液流速：70mL/min；色谱柱压力:100磅；色谱柱温度:38℃；检测波长：220nm；保留时间：2P1保留时间4.99min；2P2保留时间7.15min)。最后分别在40摄氏度以下减压浓缩分别得到4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑-P1(2P1)(80mg， 32％)，4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑-P2(2P2)(100mg，40％)。
第二步：4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑的盐酸盐-P1(化合物2b)
室温下，将4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑-P1(2P1)(80mg，0.39mmol)，加入到盛有水(20mL)的茄形瓶中。在搅拌条件下，用1M的稀盐酸调节PH值至3-4，体系变为澄清。然后冻干得到4-[(1S or R)-1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑的盐酸盐-P1 (化合物2b)(90mg，95％)。
LCMS m/z＝204[M+1]+.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.32(s,2H),8.99(d,1H),7.47(t,1H),7.08–7.00(m,2H), 6.82(dd,1H),4.50(q,1H),2.26(s,3H),1.52(d,3H).
第三步：4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑的盐酸盐-P2(化合物2c)
室温下，将4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑-P2(2P2)(100mg，0.49mmol)，加入到盛有水(25mL)的茄形瓶中。在搅拌条件下，用1M的稀盐酸调节PH值至3-4，体系变为澄清。然后冻干得到4-[1-[3-甲基-2-(三氘代甲基)苯基]乙基]-1H-咪唑的盐酸盐-P2(化合物2c) (105mg，89％)。
LCMS m/z＝204[M+1]+.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.35(s,2H),8.99(d,1H),7.47(t,1H),7.09–7.00(m,2H), 6.83(dd,1H),4.50(q,1H),2.26(s,3H),1.52(d,3H).
化合物2b和化合物2c绝对构型没有确定，其结构为上面式化合物2b-a和化合物2b-b之一,且两者互为对映异构体，即，当化合物2b结构为式化合物2b-a的结构时，化合物2c绝结构为式化合物2b-b的结构；当化合物2b结构为式化合物2b-b的结构时，化合物2c绝结构为式化合物2b-a的结构。
生物测试例
1.镇静药效评估测试
ICR小鼠，雌雄各半，6-8周龄，18-20g，共12只。动物到达饲养间后，适应期不少于3天。实验前一天，禁食，饮用水换成20％的葡萄糖溶液。
试验当天，动物称重，随机分成3组，每组4只，雌雄各半。分别为生理盐水组，盐酸美托咪定(以游离碱0.1mg/kg计算重量)组和化合物1(以游离碱0.3mg/kg计算重量)组。尾静脉注射给药，给药体积为10ml/kg。给药结束后，在设定时间点，将动物转移到开阔场地，进行镇静行为学评分[1]-[3]，评分项目和顺序见表1。评分结束后将动物转移到笼内。
表1动物镇静行为评分表
每只动物的行为学评分求总分，统计平均数和标准差(Mean±SD),统计学水平设在 0.05。使用Graphpad Prism软件，Kruskal-Wallis非参数检验进行统计分析。P<0.05被认为具有统计学差异。评分结果见表2和图1。
表2.ICR小鼠给药后各时间点镇静评分(Mean±SD)
****P＜0.0001
图1为ICR小鼠给药后各时间点镇静评分
溶媒对照组小鼠镇静行为学评分与文献报道一致。给药后5min、1h、2h，与溶媒对照组小鼠相比，盐酸美托咪定0.1mpk，化合物1 0.3mpk镇静行为学评分显著降低；给药后5h，化合物1 0.3mpk组小鼠镇静评分恢复与溶媒组相同，盐酸美托咪定0.1mpk组小鼠镇静评分仍显著低于溶媒组。
结论：化合物1能显著降低小鼠镇静行为评分，与达到相当镇静程度的盐酸美托咪定相比，恢复更迅速。
2.化合物2c镇静药效评估测试
ICR小鼠，雌雄各半，6-8周龄，18-20g，共16只。动物到达饲养间后，适应期不少于3天。实验前一天，禁食，饮用水换成20％的葡萄糖溶液。
试验当天，动物称重，随机分成4组，每组4只，雌雄各半。分别为生理盐水组，盐酸右美托咪定(以0.3mg/kg计算重量)组和化合物2c(以等摩尔于盐酸右美托咪定0.1mg/kg、0.03mg/kg计算重量)组。尾静脉注射给药，给药体积为10ml/kg。给药结束后，在设定时间点，将动物转移到开阔场地，进行镇静行为学评分[1]-[3]，评分项目和顺序见表1。评分结束后将动物转移到笼内。
每只动物的行为学评分求总分，统计平均数和标准差(Mean±SD),统计学水平设在 0.05。使用Graphpad Prism软件，Kruskal-Wallis非参数检验进行统计分析。P<0.05被认为具有统计学差异。
溶媒对照组小鼠镇静行为学评分与文献报道一致。
评分结果见表4和图2。
表4.ICR小鼠给予化合物2c后各时间点镇静评分(Mean±SD)
****P＜0.0001,*P＜0.05，VS生理盐水
与溶媒对照组小鼠相比，化合物2c 0.03mpk在给药后5min，镇静行为学评分显著降低， 1h部分恢复，2h恢复与溶媒组相同。化合物2c 0.1mpk、盐酸右美托咪定0.03mpk，在给药后 5min、1h，镇静行为学评分显著降低；给药后2h，化合物2c 0.1mpk组小鼠镇静评分有一定程度的恢复；给药后5h，化合物2c 0.1mpk组小鼠镇静评分恢复与溶媒组相同，盐酸右美托咪定 0.03mpk组小鼠镇静评分仍显著低于溶媒组。
结论：化合物2c能显著降低小鼠镇静行为评分，与达到相当镇静程度的盐酸右美托咪定相比，恢复更迅速。
3.化合物2b与化合物2c体外对肾上腺素能α2A受体的结合测试
在人重组CHO-K1细胞中，通过与放射性配体([3H]Rauwolscine)的竞争结合，分别测试化合物2b和化合物2c对肾上腺素能α2A受体的结合能力。化合物2b和化合物2c的测试浓度为1×10-12M,1×10-11M,1×10-10M,1×10-9M,1×10-8M,1×10-7M，通过竞争结合，检测游离的放射性配体，计算结合抑制率，通过MathIQTM(ID Business Solutions Ltd.,UK)计算IC50，Cheng and Prusoff方程计算Ki值[4]-[6]。结果见表4.
表4.化合物2c对肾上腺素能α2A受体的结合能力
结论：化合物2b与化合物2c对肾上腺素能α2A受体有结合作用。
4.小鼠药代动力学测试
实验目的：本试验通过单剂量静脉给予受试物于ICR小鼠，测定小鼠血浆受试物的浓度，评价受试物在小鼠体内药代特征。
试验动物：雄性ICR小鼠，20g左右，10～12周龄，12只/化合物。购于成都达硕实验动物有限公司。
试验方法：试验当天，12只ICR小鼠按体重随机分组。给药前1天禁食不禁水12～14h，给药后4h给食。
*剂量以游离碱计；
取样
于给药前及给药后异氟烷麻醉经眼眶取血0.06ml，置于EDTAK2离心管中。5000rpm，4℃离心10min，收集血浆。
采集血浆时间点：0,5min,15min,30min,1,2,3,4,6,8h；
分析检测前，所有样品存于-80℃。用LC-MS/MS对样品进行检测。结果见表5.
表5.盐酸右美托咪定、化合物2c小鼠PK数据
结论：与盐酸右美托咪定相比，化合物2c的半衰期更短，清除率更高，镇静恢复更迅速。
参考文献
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