复杂序列壳二糖的制备方法
阅读说明：本技术 复杂序列壳二糖的制备方法 (Preparation method of chitobiose with complex sequence ) 是由 于华华 郝文桐 李克成 李荣锋 马玉珍 邢荣娥 刘松 李鹏程 于 2020-12-11 设计创作，主要内容包括：本发明属于海洋生物工程技术领域,具体涉及一种复杂序列壳二糖的制备方法。具有特定脱乙酰基模式的几丁质脱乙酰酶与几丁二糖于缓冲体系内进行酶反应,而后脱盐、浓缩冻干,即得复杂序列壳二糖；其中,具有特定脱乙酰基模式的几丁质脱乙酰酶为通过重组表达获得的NodB或VcCOD。本发明使用具有单点脱乙酰模式的几丁质脱乙酰酶对几丁二糖进行温和的酶解反应,避免了副产物的产生和对环境的污染,该方法简便快速。(The invention belongs to the technical field of marine bioengineering, and particularly relates to a preparation method of chitobiose with a complex sequence. Performing enzyme reaction on chitin deacetylase with a specific deacetylation mode and chitobiose in a buffer system, desalting, concentrating and freeze-drying to obtain chitobiose with a complex sequence; wherein the chitin deacetylase with a specific deacetylation pattern is NodB or VcCOD obtained by recombinant expression. The invention uses chitin deacetylase with single-point deacetylation mode to carry out mild enzymolysis reaction on the chitobiose, thereby avoiding the generation of byproducts and the pollution to the environment.)
技术领域
本发明属于海洋生物工程技术领域，具体涉及一种复杂序列壳二糖的制备方法。
背景技术
壳寡糖，是一种由D-氨基葡萄糖(GlcN)和N-乙酰-D氨基葡萄糖(GlcNAc)通过β-1,4糖苷键连接而成的线性寡糖。壳寡糖被发现具有多种生理活性，如抗肿瘤，抗菌，抗炎，抗氧化，促生长，调节血糖血脂，活化肠道菌群等。壳寡糖的活性与其结构密切相关，如聚合度DP、乙酰度DA、乙酰化模式PA等。目前壳寡糖的活性研究一般采用的都是混合物，很难知道具体是哪个或哪些分子在发挥作用，进而很难研究其生物机制。而且壳寡糖的生物活性不仅仅依赖于其聚合度和乙酰度，还受其序列的影响。目前已有报道证明同一聚合度，不同的异构体对促进血管生成的作用不同。因此壳寡糖的研究不再仅仅局限于聚合度和乙酰度，得到确定序列的壳寡糖对研究壳寡糖的生物活性机制十分必要。目前几丁二糖和壳二糖可以分离纯化得到，复杂序列壳二糖只能通过化学合成方法获知其活性，但糖链合成需要进行大量的羟基、氨基保护和脱保护反应，步骤非常复杂，产率很低。