阅读说明：本技术 一种腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法 (Method for extracting ademetionine fermentation liquor by breaking cell wall ) 是由 金丹甜 付静 李明青 吴东奇 游云龙 于 2020-08-14 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法。该腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法包括将酿酒酵母在发酵罐中培养30-80h,期间补加葡萄糖及L-蛋氨酸,直接将发酵液用于后提取；将酵母发酵液通入陶瓷膜中；经过浓缩后；菌浓浓度在30％～60％；将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液无色透明,将有机溶剂添加至陶瓷膜中,循环20-50min,继续浓缩取清液得抽提液；其中,有机溶剂与含固量比为1:1.3～1.8。本发明具有步骤简单,对设备的要求偏低,大大节约人力、物力、生产周期等生产成本,且提取收率高,有效提高了产品利润的效果。(The invention discloses a method for extracting adenosine methionine fermentation liquor by breaking cell walls. The method for extracting the adenosine methionine fermentation liquor by breaking the wall comprises the steps of culturing saccharomyces cerevisiae in a fermentation tank for 30-80 hours, supplementing glucose and L-methionine during the culture period, and directly using the fermentation liquor for post-extraction; introducing yeast fermentation liquor into the ceramic membrane; after concentration; the concentration of the bacteria is 30-60%; adding water into the high-bacteria-concentration feed liquid, continuously concentrating until the dialysate is colorless and transparent, adding an organic solvent into the ceramic membrane, circulating for 20-50min, and continuously concentrating to obtain a clear liquid to obtain an extract; wherein the ratio of the organic solvent to the solid content is 1: 1.3-1.8. The method has the advantages of simple steps, low requirement on equipment, great saving of production cost such as manpower, material resources and production period, high extraction yield and effective improvement of product profit.)

一种腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，特别涉及一种腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法。

背景技术

腺苷蛋氨酸(S-Adenosyl-L-methionine,SAM)于1953年发现，是甲硫氨酸的一种有机四价硫形式的磺酰化合物。它广泛存在于各种生物体，是人体内的一种重要的生理活性物质。在生物学上，SAM是一碳、三碳和五碳基团的供体，具转甲基、转氨丙基和转硫等多种生理作用。

其化学名称为“±-5’-[(R*)-[(R*)-3-氨基-3-羧丙基]甲磺基]-5‘-脱氧腺苷1,4-丁二磺酸盐”

英文名±-5'-[(R*)-[(R*)-3-amino-3-carboxypropyl]methylsulfonio]-5'-deoxyadenosine inner salt,1,4-butanedisulfonate

化学结构

目前，国内对于1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸的需求量大，但是产能不足，基于目前现有技术的这种情况下，需要研究发明一种对腺苷蛋氨酸发酵液高收率、操作简单的提取方式。

发明内容

根据本发明的一个方面，提供了一种腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法，包括如下步骤：

S1，将酿酒酵母在发酵罐中培养30-80h，期间补加葡萄糖及L-蛋氨酸，直接将发酵液用于后提取；

S2，将酵母发酵液通入陶瓷膜中；经过浓缩后；菌浓浓度在30％～60％；

S3，将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液无色透明，将有机溶剂添加至陶瓷膜中，循环20-50min，继续浓缩取清液得抽提液；其中，有机溶剂与含固量比为1:1.3～1.8。

在一些实施方式中，其步骤S1中酿酒酵母为Saccharomyces cerevisiae(ATCC11909)。

在一些实施方式中，其步骤S2中陶瓷膜的孔径为8-100nm。

在一些实施方式中，其步骤S3中无色的标准为标准比色液Y-3以下。

在一些实施方式中，其步骤S3中溶剂为酯类溶剂及酮类溶剂。

在一些实施方式中，其步骤S3中含固量为发酵液总体积与发酵液菌浓之积。

在一些实施方式中，步骤S3中，将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液无色透明，将有机溶剂添加至陶瓷膜中，循环20-25min，继续浓缩取清液得抽提液；其中，有机溶剂与含固量比为1:1.3～1.5。

在一些实施方式中，其步骤S3中酯类溶剂及酮类溶剂为乙酸乙酯、丙酮或丁酮。

以上，本发明的腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法，其有益效果是，对腺苷蛋氨酸产生菌的发酵液进行陶瓷膜过滤得高菌浓发酵液；向其中添加有机溶媒溶液中循环、过滤收集滤液。此发明方法步骤简单，对设备的要求偏低，大大节约人力、物力、生产周期等生产成本，且提取收率高，有效提高了产品利润。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明作进一步详细的说明。

实施例1腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法

步骤如下：

S1，将酿酒酵母在发酵罐中培养30h，期间补加葡萄糖及L-蛋氨酸，直接将发酵液用于后提取；

S2，将20％菌浓腺苷蛋氨酸发酵液200L通入10nm孔径陶瓷膜中；经过浓缩后；菌浓浓度为30％；

S3，将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液Y2，将乙酸乙酯按1:1.3共30.7L添加至高菌浓料液中，循环20min；继续浓缩取清液得提取液；

S4，提取率为83％。

实施例2腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法

步骤如下：

S1，将酿酒酵母在发酵罐中培养50h，期间补加葡萄糖及L-蛋氨酸，直接将发酵液用于后提取；

S2，将18％菌浓腺苷蛋氨酸发酵液200L通入50nm孔径陶瓷膜中；经过浓缩后；菌浓浓度为60％；

S3，将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液Y3，将乙酸丁酯按1:1.8共20L添加至高菌浓料液中，循环50min，继续浓缩取清液得提取液；

S4，提取率为80％。

实施例3腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法

步骤如下：

S1，将酿酒酵母在发酵罐中培养40h，期间补加葡萄糖及L-蛋氨酸，直接将发酵液用于后提取；

S2，将20％菌浓腺苷蛋氨酸发酵液200L通入50nm孔径陶瓷膜中；经过浓缩后；菌浓浓度为45％；

S3，将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液Y2，将丙酮按1:1.8共22.2L添加至高菌浓料液中，循环40min，继续浓缩取清液得提取液；

(4)提取率为85％。

实施例4腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法

步骤如下：

S1，将酿酒酵母在发酵罐中培养66h，期间补加葡萄糖及L-蛋氨酸，直接将发酵液用于后提取；

S2，将24％菌浓腺苷蛋氨酸发酵液200L通入100nm孔径陶瓷膜中；经过浓缩后；菌浓浓度为57％；

S3，将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液Y3，将丁酮按1:1.3共36.9L添加至高菌浓料液中，循环50min，继续浓缩取清液得提取液；

S4，提取率为87％。

实施例5腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法

步骤如下：

S1，将酿酒酵母在发酵罐中培养80h，期间补加葡萄糖及L-蛋氨酸，直接将发酵液用于后提取；

S2，将15％菌浓腺苷蛋氨酸发酵液200L通入50nm孔径陶瓷膜中；经过浓缩后；菌浓浓度为61％；

S3，将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液Y2，将乙酸丁酯按1:1.8共16.7L添加至高菌浓料液中，循环30min，继续浓缩取清液得提取液；

S4，提取率为81％。

实施例6腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法

步骤如下：

S1，将酿酒酵母在发酵罐中培养30h，期间补加葡萄糖及L-蛋氨酸，直接将发酵液用于后提取；

S2，将22％菌浓腺苷蛋氨酸发酵液200L通入10nm孔径陶瓷膜中；经过浓缩后；菌浓浓度为35％；

S3，将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液Y3，将丙酮按1:1.3共33.8L添加至高菌浓料液中，循环35min，继续浓缩取清液得提取液；

S4，提取率为83％以上。

实施例7腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法

步骤如下：

S1，将酿酒酵母在发酵罐中培养30h，期间补加葡萄糖及L-蛋氨酸，直接将发酵液用于后提取；

S2，将22％菌浓腺苷蛋氨酸发酵液200L通入10nm孔径陶瓷膜中；经过浓缩后；菌浓浓度为35％；

S3，将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液Y3，将丙酮按1:1.3共33.8L添加至高菌浓料液中，循环35min，继续浓缩取清液得提取液；

S4，提取率为83％以上。

本申请的腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法，腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法包括将酿酒酵母在发酵罐中培养30-80h，期间补加葡萄糖及L-蛋氨酸，直接将发酵液用于后提取；将酵母发酵液通入陶瓷膜中；经过浓缩后；菌浓浓度在30％～60％；将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液无色透明，将有机溶剂添加至陶瓷膜中，循环20-50min，继续浓缩取清液得抽提液；其中，有机溶剂与含固量比为1:1.3～1.8。此发明方法步骤简单，对设备的要求偏低，大大节约人力、物力、生产周期等生产成本，且提取收率高，有效提高了产品利润。

所述的仅是本发明的一些实施方式。

对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。