本发明属于化学催化与酶催化交叉领域,涉及氨基酸脱氢酶突变体及其应用,具体涉及有机合成、枯草芽孢杆菌亮氨酸脱氢酶(leucine dehydrogenase from B.subtilis,BsLDH)的突变改造、底物α-酮酸及其衍生物的不对称还原氨化,以及手性非天然氨基酸的化学-酶法连续反应制备过程。本发明公开的突变体,能够催化多种α-酮酸类化合物的立体选择性还原氨化,合成结构多样的非天然氨基酸。该突变体基因经过重组、转化,在E.coli Rosseta(DE3)中表达,并将其与葡萄糖脱氢酶(GDH)组成辅酶循环体系用于催化α-酮酸及其衍生物得到手性非天然氨基酸。同时,本发明以甲基酮类化合物为起始原料,构建了立体选择性制备手性非天然氨基酸的化学酶法反应过程。

本发明公开了一种α,α-双取代手性氨基酸酯的制备方法,属于化学合成技术领域。本发明的方法以炔丙基酯化合物、芳胺为反应原料,以铜盐、手性配体和碱为催化体系,于有机溶剂中反应得到目标物α,α-双取代手性氨基酸酯化合物。本发明具有底物普适性好、产率高、对映选择性好、易于实现工业化生产等优点。除此之外,本发明在药物活性分子的合成、多肽或蛋白质的修饰或合成中有很大的应用潜力。

本发明涉及医药合成技术领域,尤其涉及一种外消旋o,o-EDDHA的制备方法。所述制备方法包括以下步骤：制备EDDHA钠盐溶液；在所述EDDHA钠盐溶液中加入酸度调节剂,调节体系pH,经过析晶提纯,干燥,得到所述外消旋o,o-EDDHA产品。本发明通过调控体系pH值对EDDHA钠盐溶液进行分步结晶的方法,得到纯度达到70％的外消旋o,o-EDDHA产品。

本发明提供一种C-((sp3))-C-((sp2))键的构建方法与β-芳基氨基酸的制备方法,涉及化学物质合成与过渡金属应用技术领域,包括将氨基酸β-C-((sp3))与酚羟基所在的环碳C-((sp2))直接偶联构建C-C键的方法。该过程将含有不活泼的β-C-((sp3))-H的氨基酸和特定结构的配体L-(1)与二价镍络合生成四配位的螯合物,再于碱性条件下与磺酸酚酯在钯催化下完成氨基酸不活泼β-C-((sp3))-H芳基化和质子转移等反应,实现C-((sp3))-C-((sp2))键的构建,最后经水解释放β-C芳基化氨基酸和配体L-(1)。本发明提供的C-((sp3))-C-((sp2))键的构建方法,操作简便、成本低、反应通用性强,产率和立体选择性高。本发明的合成方法为制备各类非天然的β-芳基氨基酸,且为具有生物活性的酚类化合物的氨基酸化/肽化修饰提供了一种新的方法,为新药的设计合成提供了一种新的途径和选择。

本发明公开了一种双芳基取代的非活化烯烃合成新型戊二酸类化合物的方法,属于有机合成技术领域。本发明合成方法将双芳基取代的非活化烯烃反应底物、光敏剂、还原剂、碱加入反应容器中,然后在CO-2氛围下加入攫氢试剂和溶剂,在可见光照射条件下,室温搅拌0.2～48h,反应完成后,对反应体系进行酸化淬灭处理,对反应产物进行分离纯化,制得新型戊二酸类产物。本发明合成方法具有反应条件温和、产物收率高、底物适用范围广、官能团兼容性较好等特点,并且二酸产物具有潜在应用价值,是一种环境友好和高效的合成复杂结构二酸化合物的策略。

本发明涉及医药合成技术领域,尤其涉及一种内消旋o,o-EDDHA的制备方法。所述制备方法包括以下步骤：制备EDDHA钠盐溶液；在所述EDDHA钠盐溶液中加入酸度调节剂,调节体系pH,经过三次析晶,干燥,得到所述内消旋o,o-EDDHA产品。本发明通过调控体系pH值对EDDHA钠盐溶液进行分步结晶的方法,得到纯度达到95％以上的内消旋o,o-EDDHA产品。