一种用于缺血性心肌病的中药组合物及其应用
阅读说明：本技术 一种用于缺血性心肌病的中药组合物及其应用 (Traditional Chinese medicine composition for ischemic cardiomyopathy and application thereof ) 是由 王�忠 王永炎 陈林 于 2021-08-25 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种用于缺血性心肌病的中药组合物,包括葛根1-25份、石韦1-25份、银杏叶1-20份、紫苏梗1-15份、木贼1-15份、虎杖1-15份、鸡骨草1-15份。所述中药组合物还可以包括葛根1-25份。本发明提供的中药组合物对心衰斑马鱼的心脏功能改善作用和对心肌损伤斑马鱼的心肌保护作用。(The invention relates to a traditional Chinese medicine composition for ischemic cardiomyopathy, which comprises 1-25 parts of kudzuvine root, 1-25 parts of pyrrosia lingua, 1-20 parts of ginkgo leaf, 1-15 parts of perilla stem, 1-15 parts of equisetum hiemale, 1-15 parts of giant knotweed rhizome and 1-15 parts of abrus cantoniensis hance. The traditional Chinese medicine composition can also comprise 1-25 parts of kudzu root. The traditional Chinese medicine composition provided by the invention has the effect of improving the heart function of heart failure zebra fish and has the effect of protecting the myocardium of the zebra fish with myocardial injury.)
技术领域
本发明属于中医药和医药学技术领域，具体涉及一种用于缺血性心肌病的中药组合物及其应用。
背景技术
缺血性心肌病(Ischemic cardiomyopathy，ICM)属于冠心病的一种特殊类型或晚期的阶段，是指由于各种原因导致的冠状动脉粥样硬化形成，心肌长期慢性缺血缺氧，出现心肌坏死，弥漫性心肌纤维化，导致心肌损害，心脏扩大，心脏收缩和舒张功能受到损伤，最终导致心律失常和心力衰竭的临床综合征。根据患者的不同表现，临床分为充血型缺血性心肌病和限制性缺血性心肌病。流行病学资料显示，全球ICM患病率为2600万，其中男性ICM发病率为195.3/10万人，女性ICM发病率为115.0/10万人。缺血性心肌病已经成为了心血管疾病的主要死亡原因之一，因此必须引起医务工作者和患者的高度重视。
缺血性心肌病的发病机制迄今尚未完全阐明，但是目前有研究表明炎症反应、氧化应激、线粒体功能障碍、钙超载、纤维化、内质网应激、细胞自噬与细胞凋亡、蛋白组学以及信号通路等众多因素参与其中，各因素相互作用，相互影响，共同促进ICM的发生发展。
缺血性心肌病预后差，内科治疗以改善心功能、缓解症状为主要目标。虽然现代医学采用了各种治疗手段，缺血性心肌病的治疗有了很大进展，但是由药物治疗带来的出血、肝功能损伤等副作用及经济压力给患者带来很大的负担。ICM的手术治疗限制性较多。
现有技术中已经出现了多种治疗缺血性心肌病的中药组合物。如公告号CN101461843B的中国发明专利(公告日2011年6月8日)，公开了一种用于缺血性疾病(包括缺血性心肌病)的药物组合物，包括以下重量份数的原料：黄芪5-15份、丹参2-8份、川芎1-5份、红花1-5份、地龙1-3份。公告号CN101357125B的中国发明专利(公告日2012年2月8日)，提供益母草碱在制备治疗心衰药物中的用途。公告号CN106727873B的中国发明专利(公告日2020年6月19日)，公开了一种用于预防和/或治疗缺血性心肌病的口服剂型药物组合物，其含有红芪或红芪多糖作为单独活性成分。
但是，迄今临床上缺血性心肌病的治疗需求还没有得到满足，对疗效好、副作用少的药物的需求仍然十分迫切。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明提供一种用于治疗缺血性心肌病的中药组合物。所述中药组合物组方思路新颖。初步实验显示该中药组合物对心肌损伤斑马鱼具有较明显的心肌保护作用，对心衰斑马鱼的心功能有改善作用，提示其能够用于治疗缺血性心肌病。
为此，本发明采用了如下的技术方案：
一种用于缺血性心肌病的中药组合物，按重量份计，包括：
石韦1-25份、银杏叶1-20份、紫苏梗1-15份、木贼1-15份、虎杖1-15份、鸡骨草1-15份。
优选地，所述用于缺血性心肌病的中药组合物，按重量份计，包括：
石韦10-20份、银杏叶10-15份、紫苏梗5-10份、木贼5-10份、虎杖5-10份、鸡骨草5-10份。
更优选地，所述用于缺血性心肌病的中药组合物，按重量份计，包括：
石韦18份、银杏叶15份、紫苏梗9份、木贼9份、虎杖9份、鸡骨草9份。
作为一个优选的实施方案，本发明所述用于缺血性心肌病的中药组合物由石韦、银杏叶、紫苏梗、木贼、虎杖、鸡骨草组成，各原料的重量份如前所定义。
本发明还提供一种用于缺血性心肌病的中药组合物，按重量份计，包括：
葛根1-25份、石韦1-25份、银杏叶1-20份、紫苏梗1-15份、木贼1-15份、虎杖1-15份、鸡骨草1-15份。
优选地，所述用于缺血性心肌病的中药组合物，按重量份计，包括：
葛根10-20份、石韦10-20份、银杏叶10-15份、紫苏梗5-10份、木贼5-10份、虎杖5-10份、鸡骨草5-10份。
更优选地，所述用于缺血性心肌病的中药组合物，按重量份计，包括：
葛根18份、石韦18份、银杏叶15份、紫苏梗9份、木贼9份、虎杖9份、鸡骨草9份。
作为一个优选的实施方案，本发明所述用于缺血性心肌病的中药组合物由葛根、石韦、银杏叶、紫苏梗、木贼、虎杖、鸡骨草组成，各原料的重量份如前所定义。
本发明还有一个目的在于提供一种药物，包括上述用于缺血性心肌病的中药组合物，还可以包括或不包括药学上可以接受的辅料。
优选地，所述药物是临床上可以接受的任意一种制剂。
更优选地，所述药物是口服制剂。
进一步优选地，所述口服制剂选自汤剂、散剂、胶囊剂、片剂、蜜丸剂、水蜜丸剂、水丸剂、浓缩丸剂、糊丸剂、蜡丸剂、颗粒剂、口服液和滴丸剂中的一种或多种。
本发明还有一个目的在于提供所述药物的制备方法，包括按照所述重量份准备各原料，按照本领域常规方法进行提取或者不进行提取，加入或不加入药学上可以接受的辅料，制备成临床上可以接受的制剂。
此外，本发明还提供上述中药组合物、上述药物或按照上述制备方法制备的药物在制备治疗缺血性心肌病的药物中的应用。
所述缺血性心肌病包括充血型缺血性心肌病和限制性缺血性心肌病。本发明所述药学上可以接受的辅料，包括但不限于(1)稀释剂，例
如淀粉、糖粉、糊精、乳糖、预胶化淀粉、微晶纤维、无机钙盐(如硫酸钙、磷酸氢钙、药用碳酸钙等)、甘露醇等、植物油、聚乙二醇等；(2)粘合剂，例如蒸馏水、乙醇、淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素和乙基纤维素、羟丙甲纤维素等；(3)崩解剂，例如干淀粉、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠等；(4)润滑剂，例如硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、氢化植物油、聚乙二醇类、月桂醇硫酸镁等；(5)溶剂，例如水、乙醇溶液等。
在本说明书中，各组分的“重量份”或“份”表示的是各成分之间的用量配比关系，而非实际的质量单位。根据实际情况，单位重量份或每份可以是任意质量，如1重量份或1份可以是1g、500g或1kg，甚至可以是15g、30g等。
本发明提供的所述用于缺血性心肌病的中药药组合中：
葛根，性甘、辛，凉，主入脾、胃经，发散而升，风药之性也。《本草正》言“葛根，用此者，用其凉散，虽善达诸阳经，而阳明为最；以其气轻，故善解表发汗。”在本方中有发散表邪解肌之效。银杏叶性甘、苦、涩、平，入心、肺经，《中国药典》记载其长于敛肺，平喘，活血化瘀，止痛。如两药合用，则起到驱邪解肌，行气活血之效。
鸡骨草，有清热解毒、疏肝止痛之功。
木贼，性甘，苦，平，归肺、肝经，《本草正义》记载其有“发汗，解肌”，“治疗肝胆木邪横逆诸病”之效，因此与葛根配伍加强驱邪解肌的功效，与鸡骨草二药合用共解肝经之郁滞，与银杏叶、虎杖配伍加强行气活血的功效。
石韦，性苦，微寒，归肺，膀胱经。石韦通过调节肺的功能，从而调节全身气机，进而使血液运行正常。
虎杖性苦、微寒，归肝、胆、肺经，有“破留血症结”之效与银杏叶配伍共起活血化瘀之效。
紫苏梗，性辛，甘，微温。主入肺、脾、胃经，主要有理气舒郁之功。与木贼、鸡骨草配伍，共奏疏肝行气之效；与银杏叶、虎杖配伍起行气活血之效。且紫苏梗性微温，制约了其他诸药的凉性，防止本方过于寒凉而伤胃。
上述诸药合用，共奏驱邪解肌，行气活血之功，切中缺血性心肌病的病机，标本同治。本发明所述的中药组合物对心力衰竭斑马鱼的心脏具有功能改善作用和对心肌损伤斑马鱼的心肌具有保护作用，因此，提示本发明所述的中药组合物可以保护心肌，改善心功能，从而治疗缺血性心肌病。
具体实施方式
以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的药材原料、试剂材料等，如无特殊说明，均为市售购买产品。
下述实施例所用的药材，均为市售饮片。
实施例1一种用于缺血性心肌病的中药组合物
本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1份＝100g)：
石韦18份、银杏叶15份、紫苏梗9份、木贼9份、虎杖9份、鸡骨草9份。
实施例2一种用于缺血性心肌病的中药组合物
本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1份＝10g)：
石韦16份、银杏叶10份、紫苏梗6份、木贼6份、虎杖6份、鸡骨草6份。
实施例3一种用于缺血性心肌病的中药组合物
本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1份＝1kg)：
石韦25份、银杏叶20份、紫苏梗15份、木贼15份、虎杖15份、鸡骨草15份。
实施例4一种用于缺血性心肌病的中药组合物
本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1份＝1kg)：
石韦10份、银杏叶10份、紫苏梗5份、木贼5份、虎杖5份、鸡骨草5份。
实施例5一种用于缺血性心肌病的中药组合物
本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1份＝1g)：
石韦20份、银杏叶15份、紫苏梗10份、木贼10份、虎杖10份、鸡骨草10份。
实施例6一种用于缺血性心肌病的中药组合物
本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1份＝100g)：
葛根18份、石韦18份、银杏叶15份、紫苏梗9份、木贼9份、虎杖9份、鸡骨草9份。
实施例7一种用于缺血性心肌病的中药组合物
本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1份＝500g)：
葛根16份、石韦16份、银杏叶10份、紫苏梗6份、木贼6份、虎杖6份、鸡骨草6份。
实施例8一种用于缺血性心肌病的中药组合物
本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1份＝1kg)：
葛根25份、石韦25份、银杏叶20份、紫苏梗15份、木贼15份、虎杖15份、鸡骨草15份。
实施例9一种用于缺血性心肌病的中药组合物
本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1份＝10g)：
葛根10份、石韦10份、银杏叶10份、紫苏梗5份、木贼5份、虎杖5份、鸡骨草5份。
实施例10一种用于缺血性心肌病的中药组合物
本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1份＝10g)：
葛根20份、石韦20份、银杏叶15份、紫苏梗10份、木贼10份、虎杖10份、鸡骨草10份。
实施例11一种胶囊剂
取实施例1的中药组合物，混合后碾成细粉，过100目筛，装入胶囊，0.6g生药/粒，即得。
用量用法：每日三次，每次服用2-4粒，温水送服。
实施例12一种胶囊剂
取实施例6的中药组合物，混合后碾成细粉，过100目筛，装入胶囊，0.6g生药/粒，即得。
用量用法：每日三次，每次服用2-4粒，温水送服。
实施例13一种片剂
取实施例3的中药组合物，混合后碾成细粉，过80-100目筛，加糊精直接压制成片剂，0.4g生药/片，即得。
用量用法：每日三次，每次2-4片，温水送服。
实施例14一种片剂
取实施例7的中药组合物，混合后碾成细粉，过80-100目筛，加糊精直接压制成片剂，0.4g生药/片，即得。
用量用法：每日三次，每次2-4片，温水送服。
实施例15一种蜜丸剂
取实施例4的中药组合物，混合后碾成细粉，过60-100目筛，加入适当炼蜜后，按照常规方法制备成小蜜丸剂，5g/10丸，即得。
用量用法：每日三次，每次5克，温水送服。
实施例16一种蜜丸剂
取实施例8的中药组合物，混合后碾成细粉，过60-100目筛，加入适当炼蜜后，按照常规方法制备成小蜜丸剂，5g/10丸，即得。
用量用法：每日三次，每次5克，温水送服。
实施例17一种汤剂
按照如下质量称取各药材(1g＝1重量份)：
石韦18g、银杏叶15g、紫苏梗9g、木贼9g、虎杖9g、鸡骨草9g。
各味药材混合，加入5～10倍重量的水，加热至沸腾，煎煮20～30分钟，乘热过滤；药渣加入5～10倍重量的水，加热至沸腾，煎煮20～30分钟，乘热过滤，合并两次的药液，即得。分2～3次，1日内服完。
实施例18一种汤剂
按照如下质量称取各药材(1g＝1重量份)：
葛根18g、石韦18g、银杏叶15g、紫苏梗9g、木贼9g、虎杖9g、鸡骨草9g。
各味药材混合，加入5～10倍重量的水，加热至沸腾，煎煮20～30分钟，乘热过滤；药渣加入5～10倍重量的水，加热至沸腾，煎煮20～30分钟，乘热过滤，合并两次的药液，即得。分2～3次，1日内服完。
试验例1药效学实验
1.材料
1.1实验药物：
实施例12制备的胶囊内容物，棕色粉末，由中国中医科学院临床基础研究所提供，阴凉柜干燥保存。临用时将胶囊内容物用10％DMSO配制成100mg/mL母液，最终工作液中DMSO浓度为1％，现用现配。
实施例11制备的胶囊内容物，棕色粉末，由中国中医科学院临床基础研究所提供，阴凉柜干燥保存。临用时将胶囊内容物用10％DMSO配制成100mg/mL母液，最终工作液中DMSO浓度为1％，现用现配。
盐酸异丙肾上腺素，白色粉末，批号MZSVB-DI，购自日本TCI，阴凉柜避光保存。临用时用超纯水配制浓度为200mg/mL的母液，现用现配。
地高辛，白色粉末，批号为L1303078，购自阿拉丁，4℃保存。临用时用100％DMSO配制浓度为0.8mg/mL母液，最终工作液中DMSO浓度为1％，-20℃保存。
N-乙酰半胱氨酸(简称NAC)，白色粉末，批号为A105420，购自阿拉丁，临用时用超纯水配制成浓度为50mg/mL的母液备用，最终工作液中DMSO浓度为1％，现用现配。
1.2实验动物
野生型AB品系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为受精后2天(2dpf)，共780尾，每实验组为30尾。用于供试品对心肌损伤斑马鱼的最大耐受浓度测定。
野生型AB品系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为受精后2天(2dpf)，共225尾，每实验组为15尾。用于供试品对冠心病斑马鱼的心脏功能改善作用评价。
野生型AB品系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为受精后2天(2dpf)，共450尾，每实验组为30尾。用于供试品对心肌损伤斑马鱼的心肌保护作用评价。
以上斑马鱼均饲养于28℃的养鱼用水中(水质：每1L反渗透水中加入200mg速溶海盐，电导率为480～510μS/cm；pH为6.9～7.2；硬度为53.7～71.6mg/L(CaCO3)，实验动物使用许可证号为：SYXK(浙)2012-0171。饲养管理符合国际AAALAC认证的要求。
1.3仪器与试剂
解剖显微镜(SZX7，OLYMPUS，Japan)；心跳血流分析系统(Zebralab3.3(PB2084C))；电动聚焦连续变倍荧光显微镜(AZ100，Nikon，Japan)；6孔板(Nest，China)；12孔板(Nest，China)；精密电子天平(CP214，OHAUS，America)；二甲基亚砜(DMSO，Sigma，批号BCBT0803)；甲基纤维素(Sigma，批号079K0054V)；AO染料(Alorich，494-38-2)。
2.方法
2.1实验1：确定供试品的最大耐受浓度(MTC)
(1)浓度组别
实验1组 正常对照组
实验2组 模型对照组
实验3组 实施例12胶囊内容物125μg/mL
实验4组 实施例12胶囊内容物250μg/mL
实验5组 实施例12胶囊内容物500μg/mL
实验6组 实施例12胶囊内容物1000μg/mL
实验7组 实施例12胶囊内容物1500μg/mL
实验8组 实施例12胶囊内容物2000μg/mL
实验9组 实施例11胶囊内容物125μg/mL
实验10组 实施例11胶囊内容物250μg/mL
实验11组 实施例11胶囊内容物500μg/mL
实验12组 实施例11胶囊内容物1000μg/mL
实验13组 实施例11胶囊内容物1500μg/mL
实验14组 实施例11胶囊内容物2000μg/mL
(2)模型制作
用盐酸异丙肾上腺素处理2dpf野生型AB品系斑马鱼5h，建立斑马鱼心肌损伤模型。
(3)实验方法
随机选取780尾受精后2天(2dpf)野生型AB品系斑马鱼于六孔板中，每孔(即每实验组)均处理30尾斑马鱼。分别水溶给予实施例12胶囊内容物125、250、500、1000、1500和2000μg/mL浓度，实施例11胶囊内容物125、250、500、1000、1500和2000μg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL。除正常对照组外，其余实验组均水溶给予盐酸异丙肾上腺素诱导建立斑马鱼心肌损伤模型。实施例12胶囊内容物、实施例11胶囊内容物与盐酸异丙肾上腺素共同处理5h后，观察记录斑马鱼的表型和死亡情况，确定实施例12胶囊内容物、实施例11胶囊内容物对盐酸异丙肾上腺素诱导的心肌损伤斑马鱼的MTC。
(4)实验结果
详见表1。
结果显示：模型对照组斑马鱼有轻微的心包水肿和静脉窦淤血。
实施例12胶囊内容物在125至2000μg/mL浓度下，均未引起斑马鱼死亡。125、250、500和1000μg/mL浓度斑马鱼均有轻微的心包水肿和静脉窦淤血，与模型对照组斑马鱼相似；1500μg/mL浓度斑马鱼有静脉窦淤血和心率减慢，比模型对照组斑马鱼略严重；2000μg/mL浓度斑马鱼有心率减慢和体轴弯曲，比模型对照组斑马鱼严重。因此确定实施例12胶囊内容物对心肌损伤斑马鱼的MTC为1000μg/mL。
实施例11胶囊内容物在125至2000μg/mL浓度下，均未引起斑马鱼死亡。125、250和500μg/mL浓度斑马鱼均未见明显异常；1000μg/mL浓度斑马鱼有轻微的心包水肿和静脉窦淤血，与模型对照组斑马鱼相似；1500μg/mL浓度斑马鱼有静脉窦淤血，比模型对照组斑马鱼略严重；2000μg/mL浓度斑马鱼有静脉窦淤血和心率减慢，比模型对照组斑马鱼严重。因此确定实施例11胶囊内容物对心肌损伤斑马鱼的MTC为1000μg/mL。
表1.供试品处理斑马鱼“浓度-致死性”结果(n＝30)
2.2实验二：评价供试品的心脏功能改善作用
(1)浓度组别
实验1组 正常对照组
实验2组 模型对照组
实验3组 阳性对照组
实验4组 实施例12胶囊内容物111μg/mL
实验5组 实施例12胶囊内容物333μg/mL
实验6组 实施例12胶囊内容物1000μg/mL
实验7组 实施例11胶囊内容物111μg/mL
实验9组 实施例11胶囊内容物333μg/mL
实验10组 实施例11胶囊内容物1000μg/mL
(2)浓度确定依据
根据实验一结果，实施例12胶囊内容物对冠心病斑马鱼的MTC为1000μg/mL。因此本实验最终选取111μg/mL(1/9MTC)、333μg/mL(1/3MTC)和1000μg/mL(MTC)这三个浓度进行心脏功能改善作用评价。
实施例11胶囊内容物对冠心病斑马鱼的MTC为1000μg/mL。根据项目建议书方案，最终选取111μg/mL(1/9MTC)、333μg/mL(1/3MTC)和1000μg/mL(MTC)这三个浓度进行心脏功能改善作用评价实验。
(3)模型制作
用盐酸异丙肾上腺素处理2dpf野生型AB品系斑马鱼1h，建立斑马鱼心衰模型。
(4)实验方法
随机选取225尾受精后2天(2dpf)野生型AB品系斑马鱼于12孔板中，每孔均处理15尾斑马鱼。分别水溶给予实施例12胶囊内容物111、333和1000μg/mL浓度，实施例11胶囊内容物111、333和1000μg/mL浓度，阳性对照药地高辛0.8μg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为1.5mL。实施例12胶囊内容物、实施例11胶囊内容物处理4h后，除正常对照组外，其余实验组均水溶给予盐酸异丙肾上腺素诱导建立斑马鱼心衰模型。实施例12胶囊内容物、实施例11胶囊内容物与盐酸异丙肾上腺素共同处理1h后，每实验组随机取10尾斑马鱼置于心跳血流分析系统下录制斑马鱼血流视频，分析统计斑马鱼心输出量(O)和血流速度(S)，计算心输出量改善作用和血流速度增加作用，以统计学分析结果评价实施例12胶囊内容物、实施例11胶囊内容物对心衰斑马鱼心脏功能的改善作用。心输出量改善作用和血流速度增加作用计算公式如下：
1)对心搏输出量的影响；
2)对血流速度的影响；
用方差分析和Dunnett’s T-检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异，提供具有代表性的实验图谱。
(5)实验结果
结果显示：模型对照组斑马鱼心输出量(0.12nL/s)与正常对照组(0.33nL/s)比较p<0.001，模型对照组斑马鱼血流速度(329μm/s)与正常对照组(799μm/s)比较p<0.001，表明模型建立成功。阳性对照药地高辛0.8μg/mL浓度组斑马鱼心输出量为0.18nL/s，血流速度为476μm/s，对斑马鱼心输出量、血流速度增加作用分别为28.6％和31.3％，与模型对照组比较，p均<0.01，表明地高辛对心衰斑马鱼的心输出量和血流速度均有改善作用。
实施例12胶囊内容物在111和333和1000μg/mL浓度下，斑马鱼心输出量分别为0.18、0.21和0.20nL/s，心输出量改善作用分别为28.6％、42.9％和38.1％，与模型对照组比较，p<0.05&p<0.001&p<0.01；斑马鱼血流速度分别为414、494和448μm/s，血流速度增加作用分别为18.1％、35.1％和25.3％，与模型对照组比较，p>0.05&p<0.001&p<0.05，表明在本实验浓度条件下，实施例12胶囊内容物对心衰斑马鱼的心输出量和血流速度均有改善作用。
实施例11胶囊内容物在111和333和1000μg/mL浓度下，斑马鱼心输出量分别为0.18、0.15和0.16nL/s，心输出量改善作用分别为27.9％、14.3％和19.0％，与模型对照组比较，p<0.05&p>0.05&p>0.05；斑马鱼血流速度分别为493、407和349μm/s，血流速度增加作用分别为34.9％、16.6％和4.3％，与模型对照组比较，p<0.001&p>0.05&p>0.05，表明在111μg/mL浓度下，实施例11胶囊内容物对心衰斑马鱼的心输出量和血流速度均有改善作用。
详见表2。
表2.各实验组斑马鱼心脏功能改善实验结果(n＝10)
与模型对照组比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001
2.3实验3：评价供试品的心肌保护作用
(1)浓度组别
实验1组 正常对照组
实验2组 模型对照组
实验3组 阳性对照组
实验4组 实施例12胶囊内容物111μg/mL
实验5组 实施例12胶囊内容物333μg/mL
实验6组 实施例12胶囊内容物1000μg/mL
实验7组 实施例11胶囊内容物111μg/mL
实验8组 实施例11胶囊内容物333μg/mL
实验9组 实施例11胶囊内容物1000μg/mL
(2)浓度确定依据
依据实验一结果，实施例12胶囊内容物粉末对冠心病斑马鱼的MTC为1000μg/mL。因此本实验最终选取111μg/mL(1/9MTC)、333μg/mL(1/3MTC)和1000μg/mL(MTC)这三个浓度进行心肌保护作用评价。
实施例11胶囊内容物对冠心病斑马鱼的MTC为1000μg/mL。因此本实验最终选取111μg/mL(1/9MTC)、333μg/mL(1/3MTC)和1000μg/mL(MTC)这三个浓度进行心肌保护作用评价。
(3)模型制作
用盐酸异丙肾上腺素处理2dpf野生型AB品系斑马鱼5h，建立斑马鱼心肌损伤模型。
(4)实验方法
随机选取450尾受精后2天(2dpf)野生型AB品系斑马鱼于六孔板中，每孔均处理30尾斑马鱼。用盐酸异丙肾上腺素诱导斑马鱼心肌损伤模型。模型斑马鱼分别水溶给予实施例12胶囊内容物111、333和1000μg/mL浓度，实施例11胶囊内容物111、333和1000μg/mL浓度，阳性对照药N-乙酰半胱氨酸125μg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL。实施例12胶囊内容物、实施例11胶囊内容物与盐酸异丙肾上腺素共同处理5h后，用吖啶橙(简称AO)进行染色，染色后拍照并采集数据，分析统计斑马鱼心脏凋亡细胞荧光强度(S)并计算心肌凋亡抑制率，以统计学分析结果评价实施例12胶囊内容物、实施例11胶囊内容物对心肌损伤斑马鱼的心肌保护作用。心肌保护作用计算公式如下：
用方差分析和Dunnett’s T-检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异，提供具有代表性的实验图谱。
(5)实验结果
结果显示：模型对照组斑马鱼的心肌凋亡细胞荧光强度(511206像素)与正常对照组(369846像素)比较p<0.001，表明模型建立成功。阳性对照药N-乙酰半胱氨酸斑马鱼心肌凋亡细胞荧光强度为403264像素，对斑马鱼心肌凋亡抑制率为76％，与模型对照组比较p<0.01，表明N-乙酰半胱氨酸对心肌损伤斑马鱼具有较明显的心肌保护作用。
实施例12胶囊内容物111、333和1000μg/mL浓度组斑马鱼的心肌凋亡细胞荧光强度分别为289677、341650和294153像素，对斑马鱼心肌细胞凋亡抑制率分别为157％、120％和154％，与模型对照组比较，p均<0.001，表明在本实验浓度条件下，实施例12胶囊内容物对心肌损伤斑马鱼具有明显的心肌保护作用。
实施例11胶囊内容物111、333和1000μg/mL浓度组斑马鱼的心肌凋亡细胞荧光强度分别为358636、289761和307264像素，对斑马鱼心肌细胞凋亡抑制率分别为108％、157％和144％，与模型对照组比较，各浓度组p均<0.001，表明在本实验浓度条件下，实施例11胶囊内容物对心肌损伤斑马鱼具有明显的心肌保护作用。
详见表3。
表3.各实验组斑马鱼的心肌保护作用
与模型对照组比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001
上述实验结果也证明本发明提供两种中药组合物对于心肌保护以及改善心功能起到了关键和不可替代的作用。
总之，本发明提供了一种可以用于缺血性心肌病的中药组合物。
该组合物包括石韦、银杏叶、紫苏梗、木贼、虎杖、鸡骨草，还可以包括葛根。本发明所述组合物通过诸药合用，共奏驱邪解肌，行气活血之功，切中缺血性心肌病的病机，标本同治。药理实验证明本发明的中药组合物对心肌损伤的斑马鱼的心肌具有极为显著的保护作用，对于心衰斑马鱼有改善心功能的作用。本发明为缺血性心肌病患者以及医生提供了新的临床治疗选择。