阅读说明：本技术 山苍子提取物作为青贮玉米防霉菌添加剂的应用 (Application of litsea cubeba extract as silage corn anti-mildew additive ) 是由 张福金 张欣昕 杨永青 刘广华 张尧 栗艳芳 连海飞 于 2020-05-09 设计创作，主要内容包括：本发明公开了山苍子提取物作为青贮玉米防霉菌添加剂的应用,所述山苍子提取物是采用索氏提取法从山苍子果中得到的提取物,所述山苍子提取物直接与青贮玉米混合。本发明通过在青贮玉米中添加山苍子提取物,能有效地抑制镰刀菌属、黄曲霉属、青霉属、根霉属这4个霉菌属类的霉菌,从而有效控制青贮玉米中霉菌的发生；山苍子提取物还能显著提高青贮玉米中蛋白含量、氨基酸总量和脂肪酸总量,提高青贮玉米营养品质,具有良好的应用前景。(The invention discloses application of a litsea cubeba extract as an anti-mold additive of silage corns. According to the invention, the litsea cubeba extract is added into the silage corn, so that 4 mildew species of fusarium, aspergillus flavus, penicillium and rhizopus can be effectively inhibited, and the generation of the mildew in the silage corn can be effectively controlled; the litsea cubeba extract can also obviously improve the protein content, the total amino acid content and the total fatty acid content in the silage corn, improves the nutritional quality of the silage corn and has good application prospect.)

山苍子提取物作为青贮玉米防霉菌添加剂的应用

技术领域

本发明涉及防霉添加剂技术领域，具体来说，涉及山苍子提取物作为青贮玉米防霉菌添加剂的应用。

背景技术

青贮玉米是重要的饲草产品，近年来，青贮玉米在生产、加工和使用等环节仍存在安全隐患问题，特别是霉菌问题最为突出。霉菌污染的危害主要有两个方面：一是破坏饲料的营养价值，使饲料物理性质和化学性质发生改变，比如引起变色、变味、结块，从而导致适口性下降；二是产毒霉菌可产生霉菌毒素，并通过食物链奶、蛋、肉影响人体健康。霉菌毒素主要是指霉菌在其所污染的食品中产生的有毒代谢产物。因此预防和控制青贮玉米发生霉变，是减少霉菌毒素污染，降低其危害的主要途径。

目前，我国青贮料霉菌抑制剂主要以化学和微生物产品为主，化学防霉剂主要有有机酸类(丙酸、山梨酸、苯甲酸等)、有机酸盐类(丙酸钙、山梨酸钾等)、有机酸酯类(富马酸二甲酯、对羟基苯甲酸酯)，这些化学试剂抑制霉菌的效果各异，但存在共同的问题是这些产品刺激性大、腐蚀性强、气味不良、且残留不易解决，造成产品安全性能不可靠，还可能在一定程度上存在对动物人体的毒害作用。微生物产品主要有乳酸菌、丙酸菌等，这些产品对提高青贮料品质方面具有重要意义，但在抑制霉菌方面，由于微生物菌剂对保存、使用条件严格，效果相对不稳定，对使用者操作水平也要求较高，在生产上适用性相对较弱。

发明内容

针对相关技术中的上述技术问题，本发明提出山苍子提取物作为青贮玉米防霉菌添加剂的应用，能够克服现有技术的上述不足。

为实现上述技术目的，本发明的技术方案是这样实现的：

山苍子提取物作为青贮玉米防霉菌添加剂的应用，所述山苍子提取物是采用索氏提取法从山苍子果中得到的提取物。

进一步地，所述山苍子提取物含有柠檬醛、香叶醇、芳樟醇。

进一步地，所述山苍子提取物的提取温度为105℃。

进一步地，所述山苍子提取物直接与青贮玉米混合。

进一步地，青贮玉米中所述山苍子提取物的体积分数≥0.3％。

山苍子，又名山鸡椒、山苍树、山姜子、木香子、木姜子，是樟科、木姜子属落叶灌木或小乔木，性味辛、微苦，有香气，无毒，是中国特有的香料植物资源之一。山苍子喜光或稍耐荫，浅根性，常生于荒山、荒地、灌丛中或疏林内、林缘及路边。萌芽性强，用种子繁殖。主要分布于中国长江以南各省区直至西藏。山苍子的花、叶、果肉可蒸提山苍子油，其中山苍子果中油含量最高，油内含柠檬醛约70％，山苍子油能合成高级香料。

本发明的有益效果：

本发明通过在青贮玉米中添加山苍子提取物，能有效地抑制镰刀菌属、黄曲霉属、青霉属、根霉属这4个霉菌属类的霉菌，从而有效控制青贮玉米中霉菌的发生；山苍子提取物还能显著提高青贮玉米中蛋白含量、氨基酸总量和脂肪酸总量，提高青贮玉米营养品质，具有良好的应用前景。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是根据本发明实施例所述的不同浓度的山苍子提取物对镰刀菌的抑制效果对比图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

收集自然阴干的山苍子果，粉碎成粉末后，过40目筛，待用。取10g粉末包入纸包置于500mL三角瓶中，加入250mL乙酸乙酯，浸泡16h，将三角瓶内容物全部转移至索氏提取装置，设置提取温度(105℃)和时间(8h)，提取液过滤，减压蒸馏除去溶剂，得山苍子提取物(山苍子油)，称重并收集。山苍子提取物提取率为3.52％。将提取的山苍子提取物，利用GC-MS分析其主要成分。

气相色谱条件：HP-5MS色谱柱，载气为高纯度氦气(99.999％)，流速20mL/min，升温程序；进样量1μL，从50℃开始，保持1min，5℃/min升至260℃，保持5min。

质谱条件：电子轰击(EI)离子源，离子源温度230℃，四级杆温度150℃，电子能量70e，扫描范围：50-600amu。

GC-MS分析结果显示：山苍子提取物主要成分有(Z)－柠檬醛(20.12％)、(E)－柠檬醛(27.64％)、柠檬醛(13.57％)、香叶醇(3.68％)、芳樟醇(0.95％)，由此可见，山苍子提取物的主要成分是柠檬醛。

实施例2

乳化剂配制：20mL吐温80、60mL无菌蒸馏水、10mL聚乙二醇和10mL95％的乙醇摇匀，备用。

山苍子提取物稀释液的配制：在上述方法配制的乳化剂中分别加入不同体积的实施例1得到的山苍子提取物，制备不同浓度的山苍子提取物稀释液，山苍子提取物稀释液中山苍子提取物的体积分数分别是0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％、0.12％、0.14％、0.16％、0.2％、0.25％、0.3％、0.35％。

从青贮玉米中分离获得镰刀菌属、黄曲霉属、青霉属、根霉属4株霉菌，取镰刀菌、黄曲霉菌、青霉菌、根霉菌4株纯化菌分别制成浓度为10⁶cfu/mL的菌悬液和孢子悬液后，分别取1mL在马铃薯-葡萄糖琼脂培养基上平板，在25℃下培养120h，无菌条件下，将打孔器在火焰上反复灼烧三次，待冷却后分别在准备好的含菌平板单个菌落边缘打孔，打孔器直径8mm，将菌落移至灭菌的新的马铃薯-葡萄糖琼脂培养基，在距离菌碟3cm处，放置分别蘸取不同浓度的山苍子提取物稀释液的滤纸片，滤纸片直径1cm，在25℃下培养120h后，观察霉菌生长和抑菌圈的大小，同时做体积分数为0.15％的丙酸作为化学添加剂对照，不加任何药剂做空白对照。

结果如表1所示：0.15％丙酸处理的滤纸片，镰刀菌、黄曲霉、青霉、根霉均未生长，山苍子提取物对镰刀菌、黄曲霉、青霉、根霉的最小抑制浓度分别为0.14％、0.3％、0.25％和0.04％。所以，添加0.3％的山苍子提取物，可很好地抑制镰刀菌、黄曲霉、青霉、根霉的生长。不同浓度的山苍子提取物对镰刀菌的抑制效果如图1所示。

表1山苍子提取物的抑菌效果

表1中“-”表示无菌生长，呈阴性，“+”表示有菌生长，呈阳性，“±”表示呈阳性。

实施例3

取青贮玉米原料分为4组，每组650g，其中两组分别添加不同体积的实施例1得到的山苍子提取物，使得山苍子提取物的体积分数分别为0.14％和0.3％，混匀后分别装填在1L青贮罐中，密封，其余两组分别为空白添加(不加任何药剂)和化学添加剂(体积分数为0.15％的丙酸)添加组，分别装填在1L青贮罐中，密封，青贮发酵45天后，每个处理3个重复，测定青贮玉米的干物质、蛋白、粗纤维、酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维、氨基酸和脂肪酸等营养成分。结果如表2所示：添加0.3％的山仓子提取物的处理，其蛋白、脂肪酸和氨基酸的含量分别比CK组增加0.56％、0.86％和3.52％；添加0.3％的山仓子提取物的处理，其蛋白、脂肪酸和氨基酸的含量与化学添加剂组差异显著，其脂肪酸和氨基酸的含量与空白组差异显著，说明添加山苍子提取物能显著提高青贮玉米中蛋白、脂肪酸和氨基酸的含量，但对干物质、粗纤维、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维的作用不明显。

表2山苍子提取物对青贮玉米营养品质的作用

表2中a、b、c分别表示在0.05水平上的显著差异性。

综上所述，借助于本发明的上述技术方案，通过在青贮玉米中添加山苍子提取物，能有效地抑制镰刀菌属、黄曲霉属、青霉属、根霉属这4个霉菌属类的霉菌，山苍子提取物对镰刀菌属、黄曲霉属、青霉属、根霉属的最小抑制浓度分别为0.14％、0.3％、0.25％和0.04％。与空白相比，添加0.3％的山苍子提取物分别能提高青贮玉米中蛋白含量0.56％、氨基酸总量3.52％和脂肪酸总量0.86％，本发明不仅能有效控制青贮玉米中霉菌的发生，还能提高青贮玉米营养品质，具有良好的应用前景。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。