一种虱目鱼胶原蛋白肽在皮肤真皮细胞中的应用
阅读说明：本技术 一种虱目鱼胶原蛋白肽在皮肤真皮细胞中的应用 (Application of phthiraptera fish collagen peptide in skin dermal cells ) 是由 林倩如 王颖 于 2021-08-03 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种虱目鱼胶原蛋白肽在皮肤真皮细胞中的应用,虱目鱼胶原蛋白肽用于促进成纤维细胞的形成。本发明采用上述的一种虱目鱼胶原蛋白肽在皮肤真皮细胞中的应用,诱导在真皮中以特定蛋白方式增加成纤维细胞密度,促进胶原蛋白纤维的形成。(The invention discloses application of a phthiraptera fish collagen peptide in skin dermal cells, wherein the phthiraptera fish collagen peptide is used for promoting the formation of fibroblasts. The application of the louse fish collagen peptide in skin dermal cells is adopted, so that the fibroblast density is increased in the dermis in a specific protein mode through induction, and the formation of collagen fibers is promoted.)
技术领域
本发明涉及胶原蛋白肽
技术领域
，尤其是涉及一种虱目鱼胶原蛋白肽在皮肤真皮细胞中的应用。背景技术
虱目鱼(Chanos chanos Forskal)，又称状元鱼、牛奶鱼、国圣鱼，一直是鲜美、营养的蛋白质来源，其鱼肉、鱼头、鱼皮、鱼骨甚至鱼鳞均具丰富的蛋白质、胶质、氨基酸、维生素、矿物质等，但目前利用率低。
虱目鱼Chanos Forskal属广盐性热带、亚热带鱼类，分布在太平洋和印的度洋地区，其产品鱼适合加工成罐头。由于虱目鱼生活适温为16-39℃，水温降至15℃时其活动能力变弱，低于9℃时数分钟内死亡。整个养殖过程水温宜在20-30℃，盐度12-30，pH7-8.5，溶解氧4mg/L以上，透明度30-1250px。水深1.5m以上，根据水质状况及时添换水，换水量前期10％，中后期可达20％-30％。另外，精养池配备增氧机，每3-5亩1台，在饲料中掺入一定量的维生素及益生菌，以满足遮目鱼生长的需要，增强遮目鱼的自身抵抗能力,定期施用微生物制剂、沸石粉净化水质，施用二氧化氯等对水质消毒，投喂药饵防治有关疾病。
皮肤是人体最大的器官，它保护身体的各种外部损伤。皮肤有两层，即表皮和真皮，分别由复层扁平上皮和结缔组织组成。真皮含有主要由成纤维细胞成纤维细胞产生的大量细胞外基质(ECM)成分，如胶原蛋白和糖胺聚糖(GAG)等。在脊椎动物的身体中，胶原蛋白是最丰富的蛋白质，约占总蛋白的30％。
在真皮中，胶原蛋白I型构成胶原蛋白纤维，然后进一步融入与其他类型纤维性或纤维相关胶原蛋白相关的胶原蛋白纤维。胶原蛋白纤维的粗细是一个重要的决定器官组织物理性质的因素，因为胶原蛋白纤维/纤维构成了脊椎动物身体的骨架。胶原蛋白纤维的粗细根据器官组织类型和生理状况的不同而不同，胶原蛋白的合成及降解率也决定胶原蛋白纤维的粗细。
摄取胶原蛋白肽可以改善蛋白质营养不良和关节病中的骨质密度较低的症状，摄取胶原蛋白肽的时间越长，毛发的厚度就越厚，胶原蛋白肽的摄入会使脆指甲等指甲病状得到改善。
发明内容
本发明的目的是提供一种虱目鱼胶原蛋白肽在皮肤真皮细胞中的应用，诱导在真皮中以特定蛋白方式增加成纤维细胞密度，促进胶原蛋白纤维的形成。
为实现上述目的，本发明提供了一种虱目鱼胶原蛋白肽在皮肤真皮细胞中的应用，虱目鱼胶原蛋白肽用于促进成纤维细胞的形成。
优选的，虱目鱼胶原蛋白肽用于促进胶原蛋白纤维的形成。
优选的，虱目鱼胶原蛋白肽用于改善胶原蛋白纤维的直径和密度。
优选的，使用时，通过口服摄入，以0.15-0.32g虱目鱼胶原蛋白肽/kg的体重摄入。
优选的，使用时，通过口服摄入，以0.2g虱目鱼胶原蛋白肽/kg的体重摄入。
因此，本发明采用上述一种虱目鱼胶原蛋白肽在皮肤真皮细胞中的应用，诱导在真皮中以特定蛋白方式增加成纤维细胞密度，促进胶原蛋白纤维的形成。
糖胺聚糖由重复的双糖单位组成，并且除了玻尿酸(HA)之外在与核心蛋白一起构成共价键的蛋白聚糖组织中存在。硫酸皮肤素(DS)蛋白聚糖核心蛋白多糖位于胶原蛋白纤维的表面并调节它们的粗细。另一方面，HA具有高度亲水性，和大量的水一起形成凝胶，在抗外部机械应力方面发挥作用。HA比率方面的变化会影响胶原蛋白纤维的直径。
本发明的胶原蛋白肽通过提高胶原蛋白纤维的形成来抵抗外部的机械伤害，皮肤中的糖核心蛋白聚糖形式在胶原蛋白纤维表面存在，核心蛋白聚糖通过胶原蛋白纤维之间相互连接将力传送给其他的胶原蛋白纤维，从而实现胶原蛋白纤维性能的改善。
下面通过实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的技术方案作进一步说明。
将常规方法提取的虱目鱼胶原蛋白肽以0.16g/kg的比例饲喂幼猪，幼猪为50-55日长白与大白二元杂交健康仔猪60头，随机分为2组。每组的平均体重没有显著差异。试验组饲喂添加虱目鱼胶原蛋白肽的普通饲料，对照组饲喂普通饲料。饲喂60天后，测试皮肤状况，结果如下。
分别从对照组与试验组中猪的颈部皮肤的肩胛部位获得20*20*20mm皮肤样本，混合均匀后，取部分剪碎后置于培养基中正常培养，培养方法是公知常识，在此不再叙述。
(1)真皮中的成纤维细胞密度的计算
将在同一时期，同样条件培养的对照组、试验组细胞液取出5mL后离心，用适量PBS重悬，并于计数板上进行计数。
(2)胶原蛋白纤维检测
在试验组与对照组同期的96孔板去除培养液，于-20℃甲醇固定细胞过夜后PBS清洗1遍；然后用0.1％天狼星红室温染色1h，去除染液，用0.1％冰醋酸洗3遍，再于每孔加入0.1mol/L氢氧化钠200μL，室温作用1h，振荡混匀，于540nm测吸光度。
(3)糖胺聚糖含量检测
通过已糖醛酸的Carbazole法实现糖胺聚糖的定量测定。
对照组
试验组
成纤维细胞密度
27.1±0.2
41.7±0.3
胶原蛋白纤维含量
50.7±0.1
82.1±0.1
糖胺聚糖含量
70.2±0.4
76.9±0.1
结果发现，试验组的成纤维细胞密度明显增大，胶原蛋白含量也呈增加状态，糖胺聚糖有增长的态势。
成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损以及骨创伤的修复有着十分重要的作用。成纤维细胞摄取所需的氨基酸，如脯氨酸和赖氨酸等，在粗面内质网的核蛋白体上合成前α多肽链，多肽链输送到高尔基复合体后，组成前胶原分子。前胶原分子由分泌囊泡带到细胞表面，然后通过胞吐作用释放到细胞外。在前胶原肽酶催化下，将每一前α多肽链的尾段除去，成为原胶原分子。许多原胶原分子成行平行排列，结合成具有周期性横纹的胶原原纤维。
因此，本发明采用上述一种虱目鱼胶原蛋白肽在皮肤真皮细胞中的应用，诱导在真皮中以特定蛋白方式增加成纤维细胞密度，促进胶原蛋白纤维的形成。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其进行限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而这些修改或者等同替换亦不能使修改后的技术方案脱离本发明技术方案的精神和范围。
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