本发明公开了一种兽用促黄体素释放激素A3冻干粉针剂的制备方法,包括如下步骤:将乳糖加入到注射用水中,再加入L-精氨酸、促黄体素释放激素A3、磷酸二氢钠、表面活性剂,溶解后用注射用水定容,调节pH后经过大孔吸附树脂处理,再经过滤除菌,配制成药液;预先将冻干机的冷凝器温度降至-45℃以下;药液灌装入安瓿瓶中,进料至冻干机;板层温度降至-40℃以下,冷冻2h;然后调节真空度至10Pa以下,温度再升高至0℃后,调节真空度至20Pa,保温8h;温度升高至35℃,保温3-5h,得到该兽用促黄体素释放激素A3冻干粉针剂;该方法缩短了冻干时间,生产成本较低,制得的冻干粉针剂的有效成分含量较高,产品质量稳定。