阅读说明：本技术 Boc-氨基酸的析晶方法 (Crystallization method of Boc-amino acid ) 是由 杨兆钰 崔倩倩 宋广慧 于 2020-12-30 设计创作，主要内容包括：本发明属于药物化学技术领域,具体涉及一种Boc-氨基酸的析晶方法。包括以下步骤：(1)游离氨基酸与二碳酸二叔丁酯反应后,经过后处理,得到Boc保护的氨基酸的反应溶液,减压蒸除溶剂至干,得到无色或浅黄色透明油状物；(2)向所得油状物中加入晶种,常温静置一段时间后,油状物固化变为白色,然后加入弱极性溶剂进行打浆；(3)打浆一段时间后,过滤,洗涤,减压干燥,得产品。该方法能够使常规方法无法得到结晶的Boc-氨基酸析出结晶,从而产品纯度得到提升,同时使得产品具有一定的稳定性,能够较长期的保存而不分解。(The invention belongs to the technical field of medicinal chemistry, and particularly relates to a crystallization method of Boc-amino acid. The method comprises the following steps: (1) reacting free amino acid with di-tert-butyl dicarbonate, performing post-treatment to obtain a reaction solution of Boc-protected amino acid, and evaporating under reduced pressure to remove the solvent until the solvent is dried to obtain colorless or light yellow transparent oily matter; (2) adding seed crystals into the obtained oily matter, standing at normal temperature for a period of time, solidifying the oily matter to be white, and then adding a weak polar solvent for pulping; (3) pulping for a period of time, filtering, washing, and drying under reduced pressure to obtain the product. The method can ensure that the Boc-amino acid which cannot be crystallized by the conventional method is separated out and crystallized, thereby improving the purity of the product, simultaneously ensuring that the product has certain stability and can be stored for a long time without decomposition.)

Boc-氨基酸的析晶方法

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种Boc-氨基酸的析晶方法。

背景技术

叔丁氧羰基(Boc)是目前有机合成特别是多肽合成中广为采用的氨基保护基，尤其是在固相合成中，氨基的保护多用Boc。Boc-氨基酸具有以下的优点：

1、Boc-氨基酸大多数均能得到结晶，能够较长期的保存而不分解；

2、Boc易于酸解除去，但又具有一定的稳定性；

3、Boc-氨基酸酸解时产生的是叔丁基阳离子再分解为异丁烯，它一般不会带来副反应；

4、Boc-氨基酸对碱水解、肼解和许多亲核试剂稳定；

5、Boc-氨基酸对催化氢解稳定。

然而到目前为止，仍有少数Boc-氨基酸无法得到结晶，如N-Boc-L-苯甘氨酸和N-Boc-L-苯丙氨酸，从而不能够较长期的保存，进而限制这些物质的使用。文献Green Chem.,2009,11,1139–1145，是将得到的油状物直接投入下一步反应。而专利CN1793110A则是将N-Boc-L-苯丙氨酸转变成二环己基胺盐，这些处理方法或者影响了产品质量，或者增加了操作步骤，均不利于工业化大生产的实现。

发明内容

本发明的目的是提供一种Boc-氨基酸的析晶方法，该方法能够使常规方法无法得到结晶的Boc-氨基酸析出结晶，从而产品纯度得到提升，同时使得产品具有一定的稳定性，能够较长期的保存而不分解。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：

所述的Boc-氨基酸的析晶方法，包括以下步骤：

(1)游离氨基酸与二碳酸二叔丁酯反应后，经过后处理，得到Boc保护的氨基酸的反应溶液，减压蒸除溶剂至干，得到无色或浅黄色透明油状物；

(2)向所得油状物中加入晶种，常温静置一段时间后，油状物固化变为白色，然后加入弱极性溶剂进行打浆；

(3)打浆一段时间后，过滤，洗涤，减压干燥，得产品。

其中：

步骤(1)中，所述的游离氨基酸为L-苯甘氨酸或L-苯丙氨酸中的一种。本发明所述的方法尤其适用L-苯甘氨酸或L-苯丙氨酸的制备上。

步骤(2)中，所述的晶种的纯度为95.0％-100.0％，优选98.5％-100.0％。

步骤(2)中，所述的晶种的加入量为油状物重量的0.2％-2％。

步骤(2)中，所述的常温静置时间为10-50小时，优选15-24小时。

步骤(2)中，所述的弱极性溶剂为饱和脂肪烃类或醚类溶剂中的一种，优选正己烷、环己烷或乙醚中的一种或几种。

步骤(2)中，所述的加入弱极性溶剂的体积为油状物重量的5-10倍。

步骤(3)中，所述的打浆时间为0.5-5小时，优选1-3小时。

步骤(3)中，所述的减压干燥具体为：在60℃下减压干燥10-30小时。

与现有技术相比，本发明的有益效果如下：

(1)本发明将油状物转变为固体，提高了产品的纯度。

(2)本发明将油状物转变为固体，提高了产品的稳定性。

(3)本发明将油状物转变为固体，有利于产品的运输和储存。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受实施例的限制。

实施例中采用的原料除特殊说明外，均为市售原料。

实施例1

250ml四口瓶中，将L-苯甘氨酸4.53g(30mmol)溶入到二氧六环60ml、水30ml中，降温至2.5±2.5℃，加入1NNaOH溶液30ml，搅拌10分钟后加入BOC酸酐7.2g(33mmol)，升温至室温，继续搅拌6小时。反应结束，加入13％硫酸氢钾稀溶液调反应液pH＝2.0，加入乙酸乙酯50ml，分液，水相用30ml×2乙酸乙酯提取，合并有机相，50ml纯化水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，减压蒸除溶剂至干，得无色透明粘稠油状物。

称重，向此油状物中加入0.5％重量的N-Boc-L-苯甘氨酸晶种(HPLC纯度99.3％)，常温静置24小时，油状物完全固化变为白色固体，加入10倍量体积/重量的乙醚，室温打浆2小时，过滤。60℃下减压干燥15小时得产品。(收率88.7％，HPLC纯度99.1％)。

熔点：88-90℃。

比旋度[α]²⁰ _D：+144.1°(C＝1，EtOH)。

实施例2

向N-Boc-L-苯甘氨酸油状物中加入1.0％重量的N-Boc-L-苯甘氨酸晶种(HPLC纯度99.5％)，常温静置15小时，油状物即完全固化变为白色固体，加入10倍量体积/重量的正己烷，室温打浆2小时，过滤。60℃下减压干燥15小时得产品。(收率87.5％，HPLC纯度99.3％)。

熔点：88-90℃。

比旋度[α]²⁰ _D：+144.2°(C＝1，EtOH)。

通过析晶，产品质量得到很大提升，效果如下：

表1析晶前后的产品质量对比

	析晶前(HPLC)	析晶后(HPLC)
			N-Boc-L-苯甘氨酸	93.2％	99.3％
N-Boc-L-苯丙氨酸	92.8％	99.2％

按照现行中国药典2010版贮存方法，室温下放置一个月，稳定性数据如下：

表2析晶前后的产品稳定性对比

实施例3

250ml四口瓶中，将L-苯丙氨酸4.96g(30mmol)溶入到丙酮60ml、水30ml中，搅拌下加入45mmol的三乙胺，控制温度在25℃下加入BOC酸酐7.2g(33mmol)，继续搅拌4小时，减压蒸去丙酮。用乙醚20ml×3洗涤水层，用稀盐酸调水层pH＝3.0后，加入乙酸乙酯50ml，分液，水相用60ml×2乙酸乙酯提取，合并有机相，30ml×2饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，减压蒸除溶剂至干，得无色透明粘稠油状物。称重，向此油状物中加入0.5％重量的N-Boc-L-苯丙氨酸晶种(HPLC纯度99.1％)，常温静置27小时，油状物完全固化变为白色固体，加入10倍量体积/重量的乙醚，室温打浆2小时，过滤。60℃下减压干燥15小时得产品。(收率90.5％，HPLC纯度99.2％)。

熔点：84-86℃。

比旋度[α]²⁰ _D：+25.0°(C＝1，EtOH)。

实施例4

向N-Boc-L-苯丙氨酸油状物中加入1.0％重量的N-Boc-L-苯丙氨酸晶种(HPLC纯度99.3％)，常温静置18小时，油状物完全固化变为白色固体，加入10倍量体积/重量的环己烷，室温打浆2小时，过滤。60℃下减压干燥15小时得产品。(收率89.8％，HPLC纯度99.1％)。

熔点：84-86℃。

比旋度[α]²⁰ _D：+25.1°(C＝1，EtOH)。