阅读说明：本技术 一种食用菌酶解液及其制备方法 (Edible fungus enzymatic hydrolysate and preparation method thereof ) 是由 贾凤娟 王文亮 弓志青 宋莎莎 张剑 于 2020-09-08 设计创作，主要内容包括：本发明属于食用菌提取物技术领域,具体涉及一种食用菌酶解液及其制备方法。本发明所述食用菌酶解液,以黑木耳为原料经纤维素酶解及水提制得,选用的所述黑木耳利用选定培养基质进行培养,并通过添加活性污泥颗粒的促进作用,有效促进了栽培基质中营养成分的吸收和目标物质的形成,不仅大幅提升了黑木耳的产量,更为有效提高了黑木耳中黑木耳多糖的含量,同时有效保证所得黑木耳产品的品质和性能。(The invention belongs to the technical field of edible fungus extracts, and particularly relates to an edible fungus enzymatic hydrolysate and a preparation method thereof. The edible fungus enzymatic hydrolysate is prepared by taking black fungus as a raw material and performing cellulose hydrolysis and water extraction on the black fungus, the selected black fungus is cultured by utilizing a selected culture medium, and the absorption of nutrient components and the formation of target substances in the culture medium are effectively promoted by adding the promoting effect of activated sludge particles, so that the yield of the black fungus is greatly increased, the content of black fungus polysaccharide in the black fungus is more effectively increased, and the quality and the performance of the obtained black fungus product are effectively ensured.)

一种食用菌酶解液及其制备方法

技术领域

本发明属于食用菌提取物技术领域，具体涉及一种食用菌酶解液及其 制备方法。

背景技术

食用菌是指子实体硕大、可供食用的蕈菌(大型真菌)，通称为蘑菇。 中国已知的食用菌有350多种，其中多属担子菌亚门，常见的食用菌有香 菇、草菇、蘑菇、黑木耳、银耳、猴头、竹荪、松口蘑(松茸)、口蘑、红 菇、灵芝、虫草、松露、白灵菇和牛肝菌等；少数属于子囊菌亚门，主要 有羊肚菌、马鞍菌、块菌等。上述真菌分别生长在不同的地区、不同的生 态环境中。

食用菌因为含有丰富的碳水化合物、蛋白质、多种氨基酸、甾体等多 种成分，并且具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、保肝等多种生物活性；同时， 食用菌味道鲜美，食用菌的副产物富含β-葡聚糖、几丁质、半纤维素、甘露 糖等膳食纤维，具有丰富的营养和较高的药用价值，而成为近年来被广泛 关注的食材，而受到人们的喜爱，更成为日常餐桌上的常见食材。

黑木耳是一种营养丰富的食用菌，它因生长于腐木之上，且其形似人 的耳朵，故名黑木耳。新鲜的黑木耳呈胶质片状、有弹性、半透明，侧生 在树木上，耳片直径5-10厘米，腹面平滑下凹，边缘略上卷，背面凸起， 并有极细的绒毛，呈黑褐色或茶褐色。干燥后收缩为角质状，硬而脆性， 背面暗灰色或灰白色；入水后膨胀，可恢复原状，柔软而半透明，表面附 有滑润的粘液。黑木耳富含铁、钙、磷和维生素B1等有益元素，且质地柔 软、味道鲜美、营养丰富、可素可荤，不但为菜肴大添风采，而且能养血 驻颜，祛病延年。黑木耳被现代营养学家盛赞为“素中之荤”，其营养价值 性可与食物相媲美，是我国传统的保健食品和出口商品。

黑木耳多糖是黑木耳的主要应用成分，据研究，黑木耳中的多糖成分 能够提高人体免疫力，增强人体的抗病能力，对人体组织细胞的损伤具有 保护作用；黑木耳多糖还能够降低实验小白鼠的血脂含量，对实验家兔、 豚鼠具有抗血栓的作用；黑木耳多糖能通过降低血管中胆固醇的含量，减 少脂色素的形成，维护人体细胞的正常功能，延缓衰老；黑木耳多糖还有 抗肿瘤细胞活性、抗突变、促进溃疡面愈合和祛除黑斑的作用；此外，黑 木耳多糖还具有增强超氧化物歧化酶活性的作用，能够清除人体内的自由 基。因此，如何栽培获得多糖成分含量高的黑木耳进而得到高性能的提取 物液进行下游产品加工，对于食用菌的发展具有积极的意义。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种食用菌酶解液，所述 食用菌酶解液具有多糖成分含量高及保健性能更优的优势；

本发明所要解决的第二个技术问题在于提供上述食用菌酶解液的制备 方法。

为解决上述技术问题，本发明所述的一种食用菌酶解液的制备方法， 包括人工袋料栽培黑木耳的步骤，以及，对所得黑木耳进行酶解提取的步 骤，具体包括如下步骤：

(1)取木屑50-60重量份、麸皮10-20重量份、大豆分离蛋白5-12重 量份、啤酒糟碱解物8-20重量份、米渣5-15重量份、石灰0.5-2重量份、 石膏0.5-2重量份、蜂胶0.3-0.8重量份，混匀即得所需栽培基质，经高温 灭菌，自然冷却至室温，备用；

(2)在无菌环境下，取上述灭菌后的栽培基质加入5-20重量份活性污 泥颗粒混匀，随后加水充分混匀，装入筒状塑料层中，并将塑料层两端扎 口封闭，得到所需菌包，备用；

(3)利用定量注射器，将含有黑木耳菌种的菌液植入所述菌包内，制 得菌袋，在所述菌袋上均匀刺孔，并将所得菌袋置于培养室进行培养；并 将培养后的菌袋，置于吊袋式大棚内进行栽培种植，待黑木耳成熟采摘；

(4)取采摘的黑木耳去除表面杂质后烘干至恒重，加水制浆后备用；

(5)向上述黑木耳浆液中加入纤维素酶进行酶解处理，灭酶后经固液 分离，收集酶解液，即得。

具体的，所述步骤(1)中，所述啤酒糟碱解物为啤酒糟经NaOH溶液 于60-80℃进行碱解的产物。

具体的，所述步骤(1)中，所述米渣为大米制作淀粉糖工艺的下脚料。

具体的，所述步骤(2)中，所述活性污泥颗粒为好氧活性污泥颗粒。

具体的，所述步骤(2)中，控制所述栽培基质与水的质量比为40-50％： 50-60％。

具体的，所述步骤(3)中，所述含有黑木耳菌种的菌液的植入量占所 述栽培基质重量的5-10wt％。

具体的，所述步骤(3)中，控制所述培养室的温度为25±2°，湿度20-30％， 避光，同时采用通风系统，控制培养室内二氧化碳不超过3000ppm。

具体的，所述步骤(4)中，所述制浆步骤为加入黑木耳质量8-10倍量 的水进行打浆处理。

具体的，所述步骤(5)中，所述纤维素酶的加入量占所述黑木耳质量 的0.3-0.8wt％。

具体的，所述步骤(5)中，所述酶解步骤的温度为45-50℃，控制酶 解时间2-3h。

本发明还公开了由所述方法制备得到的食用菌酶解液。

本发明所述食用菌酶解液，以黑木耳为原料经纤维素酶解及水提制得， 选用的所述黑木耳利用选定培养基质进行培养，并通过添加活性污泥颗粒 的促进作用，使得栽培基质的营养成分得到充分的利用。本发明所述栽培 基质中，添加的啤酒糟经碱解处理后的碱解物，不仅营养含量丰富，且碱 解后的成分更适宜于木耳栽培，不仅有效提高了黑木耳的产量且更适宜于 提高其中木耳多糖的含量。本发明所述木耳栽培过程中，进一步添加活性污泥颗粒，有效促进了栽培基质中营养成分的吸收和目标物质的形成，不 仅大幅提升了黑木耳的产量，更为有效提高了黑木耳中黑木耳多糖的含量， 同时有效保证所得黑木耳产品的品质和性能。

具体实施方式

本发明下述实施例中：

所述啤酒糟碱解物为将啤酒糟加入5倍量的30wt％的NaOH溶液混匀 后，于70℃进行碱解2h，所得黑褐色膏状物经洗涤除去碱液，干燥，即可；

所述米渣为大米制作淀粉糖过程中产生的下脚料，其中，蛋白质干基 ≥60％，水分≤10％，总糖≤20％，脂肪≤12％，灰分≤5％。

实施例1

本实施例所述黑木耳酶解液的制备方法，包括如下步骤：

(1)取木屑50重量份、麸皮20重量份、大豆分离蛋白5重量份、啤 酒糟碱解物20重量份、米渣5重量份、石灰2重量份、石膏0.5重量份、 蜂胶0.8重量份，混匀即得所需栽培基质，经高温灭菌，自然冷却至室温， 备用；

(2)在无菌环境下，取上述灭菌后的栽培基质加入5重量份好氧活性 污泥颗粒混匀，并按照50wt％：50wt％的质量比取所述栽培基质加水充分 混匀，装入筒状塑料层(直径15cm、长度25cm)中，并将塑料层两端扎 口封闭，得到所需菌包，备用；

(3)利用定量注射器，取占所述栽培基质重量10wt％含有黑木耳菌种 的菌液(市售产品)注射植入所述菌包内，制得菌袋，同时利用6mm铁钉 在所述菌袋上均匀刺孔，并将所得菌袋置于培养室进行催耳培育；所述培 养室内，控制其温度为25±2°，湿度20-30％，避光通风，同时采用通风系 统，控制培养室内二氧化碳不超过3000ppm；

将培养出耳后的菌袋，置于吊袋式大棚内进行栽培种植：将培养后的 菌包，通过捆绑或竖向悬挂，置于吊袋式大棚内，大棚外层采用塑料膜覆 盖，同时在塑料膜外层覆盖遮阳网以控制大棚内的温度；并利用大棚内部 顶端的喷雾设施控制大棚内黑木耳种植前期的湿度为70±5％左右，后期湿 度为85-90％，待黑木耳成熟采摘；

(4)取上述采摘的黑木耳以清水洗净并自然晾干，取处理后的黑木耳 100g加入占所述木耳质量10倍量的水进行打浆处理，得到黑木耳浆液；

(5)向上述黑木耳浆液中加入占所述黑木耳固体质量0.5wt％的纤维 素酶，于45℃进行酶解处理2h，酶解完成后升温至90-100℃，保持20-30min 灭酶；将灭酶后的木耳固液混合物转移至离心机中，固液分离，收集所得 黑木耳酶解液，即得。

实施例2

本实施例所述黑木耳酶解液的制备方法，包括如下步骤：

(1)取木屑60重量份、麸皮10重量份、大豆分离蛋白12重量份、 啤酒糟碱解物8重量份、米渣15重量份、石灰0.5重量份、石膏2重量份、 蜂胶0.3重量份，混匀即得所需栽培基质，经高温灭菌，自然冷却至室温， 备用；

(2)在无菌环境下，取上述灭菌后的栽培基质加入20重量份好氧活 性污泥颗粒混匀，并按照50wt％：50wt％的质量比取所述栽培基质加水充 分混匀，装入筒状塑料层(直径15cm、长度25cm)中，并将塑料层两端 扎口封闭，得到所需菌包，备用；

(3)利用定量注射器，取占所述栽培基质重量10wt％含有黑木耳菌种 的菌液(市售产品)注射植入所述菌包内，制得菌袋，同时利用6mm铁钉 在所述菌袋上均匀刺孔，并将所得菌袋置于培养室进行催耳培育；所述培 养室内，控制其温度为25±2°，湿度20-30％，避光通风，同时采用通风系 统，控制培养室内二氧化碳不超过3000ppm；

将培养出耳后的菌袋，置于吊袋式大棚内进行栽培种植：将培养后的 菌包，通过捆绑或竖向悬挂，置于吊袋式大棚内，大棚外层采用塑料膜覆 盖，同时在塑料膜外层覆盖遮阳网以控制大棚内的温度；并利用大棚内部 顶端的喷雾设施控制大棚内黑木耳种植前期的湿度为70±5％左右，后期湿 度为85-90％，待黑木耳成熟采摘；

(4)取上述采摘的黑木耳以清水洗净并自然晾干，取处理后的黑木耳 100g加入占所述木耳质量10倍量的水进行打浆处理，得到黑木耳浆液；

(5)向上述黑木耳浆液中加入占所述黑木耳固体质量0.5wt％的纤维 素酶，于45℃进行酶解处理2h，酶解完成后升温至90-100℃，保持20-30min 灭酶；将灭酶后的木耳固液混合物转移至离心机中，固液分离，收集所得 黑木耳酶解液，即得。

实施例3

本实施例所述黑木耳酶解液的制备方法，包括如下步骤：

(1)取木屑55重量份、麸皮15重量份、大豆分离蛋白8重量份、啤 酒糟碱解物15重量份、米渣10重量份、石灰1重量份、石膏1重量份、 蜂胶0.5重量份，混匀即得所需栽培基质，经高温灭菌，自然冷却至室温， 备用；

(2)在无菌环境下，取上述灭菌后的栽培基质加入12重量份好氧活 性污泥颗粒混匀，并按照50wt％：50wt％的质量比取所述栽培基质加水充 分混匀，装入筒状塑料层(直径15cm、长度25cm)中，并将塑料层两端 扎口封闭，得到所需菌包，备用；

(3)利用定量注射器，取占所述栽培基质重量10wt％含有黑木耳菌种 的菌液(市售产品)注射植入所述菌包内，制得菌袋，同时利用6mm铁钉 在所述菌袋上均匀刺孔，并将所得菌袋置于培养室进行催耳培育；所述培 养室内，控制其温度为25±2°，湿度20-30％，避光通风，同时采用通风系 统，控制培养室内二氧化碳不超过3000ppm；

将培养出耳后的菌袋，置于吊袋式大棚内进行栽培种植：将培养后的 菌包，通过捆绑或竖向悬挂，置于吊袋式大棚内，大棚外层采用塑料膜覆 盖，同时在塑料膜外层覆盖遮阳网以控制大棚内的温度；并利用大棚内部 顶端的喷雾设施控制大棚内黑木耳种植前期的湿度为70±5％左右，后期湿 度为85-90％，待黑木耳成熟采摘；

(4)取上述采摘的黑木耳以清水洗净并自然晾干，取处理后的黑木耳 100g加入占所述木耳质量10倍量的水进行打浆处理，得到黑木耳浆液；

(5)向上述黑木耳浆液中加入占所述黑木耳固体质量0.5wt％的纤维 素酶，于45℃进行酶解处理2h，酶解完成后升温至90-100℃，保持20-30min 灭酶；将灭酶后的木耳固液混合物转移至离心机中，固液分离，收集所得 黑木耳酶解液，即得。

对比例1

本对比例所述黑木耳酶解液的制备方法同实施例3，其区别仅在于， 在黑木耳栽培中不同的不添加所述活性污泥颗粒，而在接种所述黑木耳菌 液时一并接入EM菌液；所述EM菌液为将EM原露接种至适宜培养基(葡 萄糖5％、蛋白胨2％、谷氨酰胺0.2％、水溶性维生素0.2％，调pH7.0) 中进行常温发酵所得。

对比例2

本对比例所述黑木耳酶解液的制备方法同实施例3，其区别仅在于， 以羧甲基纤维素替代所述啤酒糟碱解物。

对比例3

本对比例所述黑木耳酶解液的制备方法同实施例3，其区别仅在于， 以啤酒糟替代所述啤酒糟碱解物。

实验例

1、黑木耳性能比较

分别对上述实施例1-3和对比例1-3中栽培所得的黑木耳进行产品形 态检测，结果见下表1。

表1黑木耳生长及产品性能检测结果

从上表数据可知，本发明所述黑木耳利用选定培养基质并通过添加活 性污泥颗粒的促进作用，使得栽培基质的营养成分得到充分的利用，大幅 提升了黑木耳的产量，同时有效保证所得黑木耳产品的品质和性能。

2、黑木耳多糖含量

分别收集上述实施例1-3及对比例1-3中制得的黑木耳酶解液，并对 所述酶解液中含有的黑木耳多糖的含量进行测定(即每100g黑木耳中提取 得到的多糖含量)，测试结果见下表2。

具体测定方法参照中国专利CN108641011A中公开苯酚-硫酸比色法 进行黑木耳多糖含量的测定。

表2酶解液中多糖含量

编号	酶解液多糖含量/g
		实施例1	7.68
实施例2	7.79
		实施例3	7.84
对比例1	7.13
		对比例2	6.03
对比例3	6.59

从上表数据可以看出，本发明所述黑木耳利用选定培养基质并通过添 加活性污泥颗粒的促进作用，使得栽培基质的营养成分得到充分的利用， 有效提高了黑木耳中黑木耳多糖的含量。

显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方 式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可 以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予 以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保 护范围之中。