阅读说明：本技术 舒更葡糖钠有关物质及其制备方法、应用 (Sugammadex sodium related substance and preparation method and application thereof ) 是由 高宏 李发光 王倩倩 侯云泽 祁浩飞 刘群 杨光 霍翔宏 王�琦 王利春 王晶翼 于 2019-06-12 设计创作，主要内容包括：本发明提供了21种舒更葡糖钠有关物质及其制备方法、应用,本发明定向合成法不仅能制备得到这些杂质,而且纯度较高,可作为舒更葡糖钠的对照品或标准品,用于舒更葡糖钠的含量测定、杂质和有关物质的检测,是舒更葡糖钠质量控制的必需品。(The invention provides 21 sugammadex sodium related substances, a preparation method and application thereof, and the oriented synthesis method can be used for preparing the impurities, has high purity, can be used as a reference substance or a standard substance of the sugammadex sodium, is used for content determination of the sugammadex sodium and detection of the impurities and the related substances, and is a necessary product for quality control of the sugammadex sodium.)

舒更葡糖钠有关物质及其制备方法、应用

技术领域

本发明属于药物合成技术领域，具体涉及一种舒更葡糖钠有关物质及其制备方法。

背景技术

舒更葡糖钠(Sugammadex Sodium)最早由Organon Biosciences(欧加农公司)开发，该公司在2007年被先灵葆雅公司(Schering-Plough)收购，2009年先灵葆雅与默克(Merck)合并。目前舒更葡糖钠为默克拥有并销售。2008年，舒更葡糖钠在欧洲首次上市，随后分别在日本、美国等国上市，现已在75个国家上市销售。2016年，默克公司在中国提出上市。

舒更葡糖钠，化学名：6-全脱氧-6-全(2-羧基乙基)硫代-γ-环糊精钠盐，英文名：sugammadex，商品名：Bridion，是一种经过修饰的γ-环糊精，是20年来开发成功的首个也是唯一的选择性肌肉松弛拮抗剂(SRBA)，其通过全新且唯一的途径包裹氨基甾体类非去极化肌肉松弛药而阻断松弛作用，能快速可预见性的逆转罗库溴铵和维库溴铵导致的任何强度的肌肉松弛，且副作用较小，能让肌松药的使用接近理想状态，其逆转神经肌肉阻断作用比现有药物更快速，更有可预见性。适用于逆转罗库溴铵或维库溴铵导致的神经肌肉阻断作用，可逆转(常规逆转和立即逆转)成人罗库溴铵或维库溴铵导致的神经肌肉阻断作用、常规逆转儿童与青少年罗库溴铵导致的神经肌肉阻断。

舒更葡糖钠有关物质是指舒更葡糖钠在生产过程中带入的起始原料、中间体、聚合物、副反应产物以及贮藏过程中的降解产物等。

有关物质的存在直接关系到药品的质量和安全性，需要进行分离鉴定、来源分析、安全性研究和杂质限定确认等，其前提是需要得到有关物质，因此通过定向合成舒更葡糖钠有关物质，对舒更葡糖钠中间体、原料药及其制剂的质量进行有效控制具有重要的意义。

舒更葡糖钠有关物质结构及来源详见下表：

发明内容

本发明的目的是提供舒更葡糖钠的21个有关物质及其制备方法，为舒更葡糖钠原料药和制剂的质量控制提供基础。

本发明提供了舒更葡糖钠的杂质及其盐，其具有式I的结构：

其中，R^a选自卤素、-SH、-S-S-(CH₂)₂-C(O)OH、-S-CHR^b-C(O)OR^c、-N(CH₃)₂、-S-(CH₂)₂-C(O)OR^d和-S(O)OH；

R^b和R^c各自独立地选自H或C_1-3烷基，优选为H或甲基；

R^d为C_1-3烷基，优选为甲基或乙基；

优选所述的盐为钠盐。

根据本发明的一些实施例，舒更葡糖钠的杂质及其盐，其中所述的杂质选自：

本发明另一方面提供了舒更葡糖钠的杂质及其盐，其具有式II的结构：

其中Y选自-S-和-S-S-；

优选所述的盐为钠盐。

根据本发明的一些实施例，舒更葡糖钠的杂质及其盐，其中所述的杂质选自：

本发明的另一方面提供舒更葡糖钠的杂质及其盐，其具有式III的结构：

其中R^e和R^f均为-S(O)-(CH₂)₂-C(O)OR^c；

R^c选自H或C_1-3烷基，优选为H或甲基；

或R^e和R^f连接形成-S-(CH₂)₂-C(O)O-；

优选的所述的盐为钠盐。

根据本发明的一些实施例，所述的舒更葡糖钠的杂质及其盐，其中所述的杂质选自：

本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质1及其盐，其具有式1的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质1及其盐的制备方法，反应式如下：

其中X选自Cl、Br、I；

所述的制备方法具体为α-环糊精经羟基卤代后，再与3-巯基丙酸进行硫代反应，然后制备分离得杂质1；和/或，杂质1与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质1钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，羟基卤代反应是α-环糊精在含磷试剂、有机溶剂中与卤代试剂进行卤代反应得到六卤代α-环糊精；所述的卤代试剂选自碘、溴、四溴化碳、五溴化膦、五氯化磷、二氯亚砜、草酰氯、甲基磺酰氯中的一种或多种；所选含膦试剂选自1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦、三丁基膦、三环己基膦、三(二乙氨基)膦、三苯基膦或者三(对/间/邻甲基苯基)膦中的一种或多种，优选为三苯基膦；所述的有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种，优选有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，羟基卤代反应的温度为60～80℃；例如温度为60℃、65℃、70℃、75℃、78℃和80℃。

在本发明的一些实施方案中，α-环糊精、卤代试剂和含磷试剂的摩尔比为1：15～25：15～25，例如为1：20：20和1：20.5：20。

在本发明的一些实施方案中，硫代反应在含有含钠碱、3-巯基丙酸的有机溶剂中与六卤代α-环糊精进行反应。优选地，所述含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。优选地，有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种；更优选地，有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，硫代反应的反应温度为70-80℃，例如70℃、72℃、75℃、78℃和80℃。

在本发明的一些实施方案中，六卤代α-环糊精、3-巯基丙酸、含钠碱的摩尔比为1：10～20：30-40，优选为1：12～18：30～38，例如为1：16：35、1：15：35和1：17：38。

在本发明的一些实施方案中，α-环糊精经羟基卤代后，经纯化后再与3-巯基丙酸进行硫代反应，和/或，硫代反应后经纯化后再进行制备分离。优选地，纯化包括良溶剂-不良溶剂析晶、打浆析晶。在良溶剂-不良溶剂析晶方法中，良溶剂选自醇类、醚类、酮类、腈类中的一种或多种。所述的醇类选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、1-丁醇、2-丁醇和叔丁醇。所述的醚类选自***、二异丙基醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氧六环、环戊基甲醚、苯甲醚和二甲氧基乙烷。腈类选自乙腈和丙腈。酮类选自丙酮、丁酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮和二乙基酮。不良溶剂选自无机溶剂(例如水)。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质2及其盐的制备方法，反应式如下：

其中X选自Cl、Br、I；

所述的制备方法具体为β-环糊精经羟基卤代后，再与3-巯基丙酸硫代反应，然后制备分离得杂质2；和/或，杂质2与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质2钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，羟基卤代反应是β-环糊精在含磷试剂、有机溶剂中与卤代试剂进行卤代反应得到七卤代β-环糊精；所述的卤代试剂选自碘、溴素、四溴化碳、五溴化膦、五氯化磷、二氯亚砜、草酰氯、甲基磺酰氯中的一种或多种；所选含膦试剂选自1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦、三丁基膦、三环己基膦、三(二乙氨基)膦、三苯基膦或者三(对/间/邻甲基苯基)膦中的一种或多种，优选为三苯基膦；所述的有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种，优选有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，羟基卤代反应的温度为60～80℃；例如温度为60℃、65℃、70℃、75℃、78℃、80℃。

在本发明的一些实施方案中β-环糊精、卤素和含磷试剂的摩尔比为1：15～25：15～25，例如为1：20：20和1：20.5：20。

在本发明的一些实施方案中，硫代反应在含有含钠碱、3-巯基丙酸的有机溶剂中与七卤代β-环糊精进行反应。优选地，所述含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。优选地，有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种；更优选地，有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，硫代反应的反应温度为70-80℃，例如70℃、72℃、75℃、78℃和80℃。

在本发明的一些实施方案中，七卤代β-环糊精、3-巯基丙酸、含钠碱的摩尔比为1：10～20：30-40，优选为1：12～18：30～38，例如为1：16：35、1：15：35和1：17：38。

在本发明的一些实施方案中，β-环糊精经羟基卤代后，经纯化后再与3-巯基丙酸进行硫代反应，和/或，硫代反应后经纯化后再进行制备分离。优选地，纯化包括良溶剂-不良溶剂析晶、打浆析晶。在良溶剂-不良溶剂析晶方法中，良溶剂选自醇类、醚类、酮类、腈类中的一种或多种。所述的醇类选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、1-丁醇、2-丁醇和叔丁醇。所述的醚类选自***、二异丙基醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氧六环、环戊基甲醚、苯甲醚和二甲氧基乙烷。腈类选自乙腈和丙腈。酮类选自丙酮、丁酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮和二乙基酮。不良溶剂选自无机溶剂(例如水)。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质3和4及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为舒更葡糖钠经氧化反应制备，然后制备分离得杂质3和4；和/或，杂质3和杂质4与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应对应得到杂质3钠盐和杂质4钠盐；优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，所述氧化反应优选舒更葡糖钠与过氧化氢水溶液进行氧化反应。更优选地，过氧化氢水溶液的体积浓度为30～60％，例如30％、35％、40％、45％、50％、60％。

在本发明的一些实施方案中，氧化反应的反应温度为0～5℃，例如0℃、1℃、2℃、3℃、4℃、5℃。

在本发明的一些实施方案中，舒更葡糖钠与过氧化氢的摩尔比为0.8～1.2：0.8～1.2，例如1：1、1：1.2、0.8：1.2。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质5及其盐，其具有式5的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质5及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为舒更葡糖钠在光照条件下氧化反应制备而得杂质5；和/或，杂质5与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质5钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，光照条件可为自然光照或置于光化学反应仪(例如上海比郎，BL-GHX-V型光化学反应仪)。置于光化学反应仪可缩短氧化反应的时间。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质6及其盐，其具有式6的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质6及其盐的制备方法，反应式如下：

所述的制备方法具体为八碘代γ-环糊精通过3-巯基丙酸取代反应，然后制备分离得杂质6；和/或，杂质6与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质6钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，取代反应在含有含钠碱、3-巯基丙酸的有机溶剂中与八碘代γ-环糊精进行反应。优选地，所述含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种，更优选为NaH。优选地，有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种；更优选地，有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，取代反应的反应温度为20～30℃，优选为25℃。

在本发明的一些实施方案中，取代反应中八碘代γ-环糊精、3-巯基丙酸、含钠碱的摩尔比为1：7：14。

在本发明的一些实施方案中，取代反应后经纯化后再进行制备分离。优选地，所述的纯化为打浆纯化；更优选地，打浆纯化的溶剂为醇类、有机酸类、无机溶剂(例如水)、醚类、酮类、腈类中的一种或多种。所述的醇类选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、1-丁醇、2-丁醇和叔丁醇。所述的醚类选自***、二异丙基醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氧六环、环戊基甲醚、苯甲醚和二甲氧基乙烷。腈类选自乙腈和丙腈。酮类选自丙酮、丁酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮和二乙基酮。有机酸类选自甲酸、乙酸。

在本发明的一些优选实施方案中，打浆纯化的溶剂为醇类、无机溶剂、有机酸类的混合溶剂；更优选为乙醇、水、乙酸的混合溶剂；更优选为体积比4～10：1～2：1～2的乙醇、水、乙酸的混合溶剂，例如体积比5：1：1或者4：1：1或者5：1：1.2、5：1.2：1.2或者5：1.2：1的乙醇、水、乙酸的混合溶剂。

在本发明的一些实施方案中，打浆纯化的温度为0～10℃，例如0℃、2℃、5℃、6℃、8℃、9℃和10℃。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质7及其盐，其具有式7的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质7及其盐的制备方法，反应式如下：

所述的制备方法具体为八碘代γ-环糊精在碱性条件下发生分子内成醚反应后，再与3-巯基丙酸发生取代反应，然后制备分离得杂质7；和/或，杂质7与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质7钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，分子内成醚反应是在含有含钠碱的有机溶剂中与八碘代γ-环糊精进行反应。优选地，所述含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种，更优选为NaH。优选地，有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种；更优选地，有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，分子内成醚反应的反应温度为0～5℃，例如0℃、1℃、2℃、3℃、4℃和5℃。

在本发明的一些实施方案中，分子内成醚反应中八碘代γ-环糊精、含钠碱的摩尔比为0.8～1.2：1.5～2.5，优选为1：2。

在本发明的一些实施方案中，取代反应在含有含钠碱、3-巯基丙酸的有机溶剂中与八碘代γ-环糊精的分子内成醚反应产物进行反应。优选地，所述含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种，更优选为NaH。优选地，有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种；更优选地，有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，取代反应的反应温度为40-45℃，例如40℃、42℃、45℃。

在本发明的一些实施方案中，八碘代γ-环糊精、3-巯基丙酸、含钠碱的摩尔比为1：10～15：20～28，例如1：12：24。

在本发明的一些实施方案中，取代反应后经纯化后再进行制备分离。优选地，所述的纯化为打浆纯化；更优选地，打浆纯化的溶剂为醇类、有机酸类、无机溶剂(例如水)、醚类、酮类、腈类中的一种或多种。所述的醇类选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、1-丁醇、2-丁醇和叔丁醇。所述的醚类选自***、二异丙基醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氧六环、环戊基甲醚、苯甲醚和二甲氧基乙烷。腈类选自乙腈和丙腈。酮类选自丙酮、丁酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮和二乙基酮。有机酸类选自甲酸、乙酸。

在本发明的一些优选实施方案中，打浆纯化的溶剂为醇类、无机溶剂和有机酸类的混合溶剂；更优选为乙醇、水、乙酸的混合溶剂；更优选为体积比4～10：1～2：1～2的乙醇、水、乙酸的混合溶剂，例如体积比5：1：1或者4：1：1或者5：1：1.2或者5：1.2：1.2或者5：1.2：1的乙醇、水、乙酸的混合溶剂。

在本发明的一些实施方案中，打浆纯化的温度为0～10℃，例如0℃、2℃、5℃、6℃、8℃、9℃和10℃。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质8及其盐，其具有式8的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质8及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为杂质6钠盐与硫脲生成异硫脲中间体，再水解、制备分离得杂质8；和/或，杂质8与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质8钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，杂质6钠盐与硫脲在反应温度为70～90℃下生成异硫脲中间体，优选反应温度为80℃。

在本发明的一些实施方案中，异硫脲中间体在碱性溶液(例如氢氧化钠溶液)中水解，优选水解温度为80～95℃，例如80℃、82℃、85℃、88℃、90℃、92℃和95℃。

在本发明的一些实施方案中，异硫脲中间体经水解后，经纯化后再进行制备分离得到杂质8。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质9及其盐，其具有式9的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质9及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为杂质8与3-巯基丙酸偶联反应，然后制备分离得到杂质9；和/或，杂质9与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质9钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，杂质8在含有含钠碱、有机溶剂中与3-巯基丙酸进行偶联反应。优选地，所述含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种，更优选为NaH。优选地，有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI、DMSO的一种或多种；更优选地，有机溶剂为DMSO。

在本发明的一些实施方案中，偶联反应的反应物温度为110～150℃，优选为110～125℃，例如110℃、112℃、115℃、118℃、120℃和125℃。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质10及其盐，其具有式10的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质10及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为杂质8在氧化剂条件下发生二聚氧化偶联反应，然后制备分离得到杂质10；和/或，杂质10与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质10钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，杂质8在碱性溶剂中与氧化剂发生二聚氧化偶联反应。优选地，氧化剂选自碘、溴。优选地，碱性溶剂为弱碱性溶剂，例如乙酸钠、甲酸钠。

在本发明的一些实施方案中，所述二聚氧化偶联反应的反应温度为0～5℃，例如0℃、1℃、2℃、3℃、4℃和5℃。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质11和12及其盐，其具有式11和式12的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质11和12及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为杂质6钠盐与2-巯基丙酸取代反应，然后制备分离得到杂质11和杂质12；和/或，杂质11与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质11钠盐，杂质12与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质12钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，杂质6钠盐与2-巯基丙酸在含有含钠碱的有机溶剂中进行取代反应。优选的，所述含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。优选地，有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种；更优选地，有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，取代反应的反应温度为60～80℃，优选为65～70℃，例如65℃、68℃和70℃。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质13及其盐，其具有式13的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质13及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为杂质6钠盐与巯基乙酸取代反应，然后制备分离得杂质13；和/或，杂质13与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质13钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，杂质6钠盐与巯基乙酸在含有含钠碱的有机溶剂中进行取代反应。优选的，所述含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。优选地，有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种；更优选地，有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，取代反应的反应温度为60～80℃，优选为65～70℃，例如65℃、68℃和70℃。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质14及其盐，其具有式14的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质14及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为杂质6与二甲胺进行取代反应，再制备分离得杂质14；和/或，杂质14与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质14钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，杂质6在DMF溶液中与二甲胺的四氢呋喃溶液发生取代反应。

在本发明的一些实施方案中，取代反应的反应温度为20-30℃，优选为25℃。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质15及其盐，其具有式15的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质15及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为γ-环糊精被溴代后，再与3-巯基丙酸取代反应，然后制备分离得杂质15；和/或，杂质15与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质15钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，溴代反应是γ-环糊精在含有还原剂的有机溶剂中与溴发生溴代反应得到八溴代γ-环糊精；其中，所述还原剂选自含磷试剂、还原性金属、硫醇试剂、碘化物中的一种或多种；优选地，所述的还原剂为红磷、1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦、三丁基膦、三环己基膦、三(二乙氨基)膦、三苯基膦或者三(对/间/邻甲基苯基)膦中的一种或多种；更优选为三苯基膦。

其中，所述的有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种；优选地，有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，溴代反应的温度为60～80℃；例如温度为60℃、65℃、70℃、75℃、78℃和80℃。

在本发明的一些实施方案中，γ-环糊精、溴和还原剂的摩尔比为1：15～25：15～25，例如为1：20：20和1：20.5：20。

在本发明的一些实施方案中，取代反应在含有含钠碱、3-巯基丙酸的有机溶剂中与八溴代γ-环糊精进行反应。优选地，所述含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种，更优选为NaH。优选地，有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种；更优选地，有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，取代反应的反应温度为20-30℃，优选为25℃。

在本发明的一些实施方案中，取代反应后经纯化后再进行制备分离。优选地，所述的纯化为打浆纯化；更优选地，打浆纯化的溶剂为醇类、有机酸类、无机溶剂(例如水)、醚类、酮类、腈类中的一种或多种。所述的醇类选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、1-丁醇、2-丁醇和叔丁醇。所述的醚类选自***、二异丙基醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氧六环、环戊基甲醚、苯甲醚和二甲氧基乙烷。腈类选自乙腈和丙腈。酮类选自丙酮、丁酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮和二乙基酮。有机酸类选自甲酸和乙酸。

在本发明的一些优选实施方案中，打浆纯化的溶剂为醇类、无机溶剂、有机酸类的混合溶剂；更优选为乙醇、水、乙酸的混合溶剂；更优选为体积比4～10：1～2：1～2的乙醇、水、乙酸的混合溶剂，例如体积比5：1：1或者4：1：1或者5：1：1.2或者5：1.2：1.2或者5：1.2：1的乙醇、水、乙酸的混合溶剂。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质16及其盐，其具有式16的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质16及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为通过杂质6和杂质8发生取代反应制备，然后制备分离得到杂质16；和/或，杂质16与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质16钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，杂质6与杂质8在碱和有机溶剂中进行取代反应。优选地，所述的有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种；优选地，有机溶剂为DMF。优选地，所述的碱为叔丁醇钾。

在本发明的一些实施方案中，取代反应的反应温度为60～80℃，优选为65～70℃，例如65℃、68℃和70℃。

根据本发明的一个方面，本发明提供一种舒更葡糖钠杂质17及其盐，其具有式17的结构式：

根据本发明的一些实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质17及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为舒更葡糖钠在酸性条件下经乙酯化反应得杂质17；和/或，杂质17与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质17钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，乙酯化反应的反应温度为70～75℃，例如70℃、71℃、72℃、73℃、74℃和75℃。

在本发明的一些实施方案中，舒更葡糖钠在乙酸中与乙醇发生乙酯化反应得杂质17。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质18及其盐，其具有式18的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质18及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为舒更葡糖钠在酸性条件下经甲酯化反应得杂质18；和/或，杂质18与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质18钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，甲酯化反应的反应温度为60-65℃，例如60℃、61℃、62℃、63℃、64℃和65℃。

在本发明的一些实施方案中，舒更葡糖钠在乙酸中与甲醇发生甲酯化反应得杂质18。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质19及其盐，其具有式19的结构式：

根据本发明的一个实施方案中，所述的盐为钠盐。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质19及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为杂质8在碱性条件下经氧化反应制备而得杂质19；和/或，杂质19与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质10钠盐，含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，碱性条件为pH大于7，优选pH为8～9。在本发明的一些优选实施方案中，加入氢氧化钠调节至碱性。

在本发明的一些实施方案中，氧化反应为在20～30℃下敞口反应。优选为25℃。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质20及其盐的制备方法，反应式如下：

具体为杂质6钠盐在碱性条件下经内酯化反应，然后制备分离得到杂质20；和/或，杂质20与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质20钠盐，优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，大环内酯化反应的反应温度为60～80℃，优选为65～75℃，例如65℃、68℃、70℃、72℃和75℃。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质21和22及其盐，其具有式21的结构式：

其中R₁-R₈中有两个取代基为I，其余为—S(CH₂)₂COOH；杂质21和杂质22中两个I取代基的相对位置不同。

根据本发明的一个实施方案中，所述的杂质21和杂质22的盐为钠盐，其具有式22的结构式：

其中R₁’-R₈’中有两个取代基为I，其余为—S(CH₂)₂COONa；杂质21钠盐和杂质22钠盐中两个I取代基的相对位置不同。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了一种舒更葡糖钠杂质21和22及其盐的制备方法，反应式如下：

其中R₁-R₈和R₁’-R₈’如上定义；

具体为八碘代γ-环糊精通过3-巯基丙酸取代反应，然后制备分离得到杂质21和杂质22；和/或，杂质21与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质21钠盐；杂质22与含钠碱或碳酸钠通过酸碱成盐反应得到杂质22钠盐；优选含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种。

在本发明的一些实施方案中，八碘代γ-环糊精在含钠碱和有机溶剂中与3-巯基丙酸发生取代反应。优选地，所述含钠碱选自NaH、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、氨基钠和氢氧化钠中的一种或多种，更优选为NaH。优选地，有机溶剂选自DMF、DMAC、NMP、DMI的一种或多种；更优选地，有机溶剂为DMF。

在本发明的一些实施方案中，取代反应的反应温度为20～30℃，优选为25℃。

在本发明的一些实施方案中，八碘代γ-环糊精、3-巯基丙酸和含钠碱的摩尔比为1：5.8～6.2：10～15，例如1：6：12和1：6：13。

在本发明的一些实施方案中，取代反应后经纯化后再进行制备分离。优选地，所述的纯化为打浆纯化；更优选地，打浆纯化的溶剂为醇类、有机酸类、无机溶剂(例如水)、醚类、酮类、腈类中的一种或多种。所述的醇类选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、1-丁醇、2-丁醇和叔丁醇。所述的醚类选自***、二异丙基醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氧六环、环戊基甲醚、苯甲醚和二甲氧基乙烷。腈类选自乙腈和丙腈。酮类选自丙酮、丁酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮和二乙基酮。有机酸类选自甲酸、乙酸。

在本发明的一些优选实施方案中，打浆纯化的溶剂为醇类、无机溶剂、有机酸类的混合溶剂；更优选为乙醇、水、乙酸的混合溶剂；更优选为体积比4～10：1～2：1～2的乙醇、水、乙酸的混合溶剂，例如体积比5：1：1或者4：1：1或者5：1：1.2或者5：1.2：1.2或者5：1.2：1的乙醇、水、乙酸的混合溶剂。

在本发明的一些实施方案中，打浆纯化的温度为0～10℃，例如0℃、2℃、5℃、6℃、8℃、9℃和10℃。

杂质1～22和杂质1-22钠盐作为杂质对照品在舒更葡糖钠的含量测定、杂质和有关物质的检测中的应用。

本发明的有益结果在于：在药物检测中，未知杂质的含量应控制在千分之一以内，考虑到这些杂质在药物中的含量很少，采用从药物中分离如柱层析等方法难以获得，而定向合成法不仅能制备得到这些杂质，而且纯度较高，可作为舒更葡糖钠的对照品或标准品，用于舒更葡糖钠的含量测定、杂质和有关物质的检测，是舒更葡糖钠质量控制的必需品。

附图说明

图1-图22分别为杂质1-杂质22的高分辨质谱。

图23为舒更葡糖钠杂质混合溶液的HPLC色谱图。

图24为舒更葡糖钠粗品溶液的HPLC色谱图。

具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再做进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实例。凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。

中压液相制备分离方法：

仪器：Biotage lsolera One；

检测波长：200nm；

制备柱：Flash球型AQ C18(20-35um，330g)；

流动相：A相0.1％甲酸溶液，B相乙腈；

流速：25ml/min；

洗脱条件：

时间(min)	0	35	36	42	43
						A(％)	82	72	20	20	82
B(％)	18	28	80	80	18

高分辨质谱：

仪器型号：ABSciex TripleTOF 5600+；

测试条件：电离方式：ESI+；扫描范围：600～5000Da。

实施例1：舒更葡糖钠杂质1的制备

向反应瓶中加入三苯基膦(54.02g，20.0eq)和DMF(125ml)，开启搅拌，控制温度为0～5℃，然后将碘(53.62g，20.5eq)分批加入，随后将干燥后的α-环糊精(10.52g，1.0eq)分批加入，将反应温度升至70℃，恒温反应16小时。反应结束后冷却至温度20～30℃，然后滴加甲醇钠-甲醇溶液(51.4ml,5mol/L)，并调节反应液pH＝8～9，搅拌下，将淬灭后的反应液缓慢倒入纯化水(500ml)中，析出大量棕红色固体，抽滤，滤饼用水(300ml)淋洗，抽干。接着滤饼用丙酮(300ml)打浆，抽滤，然后将滤饼溶于DMF(300ml)中，滴加丙酮(1200ml)，搅拌析晶3小时，抽滤，滤饼于温度35℃下，鼓风干燥3.5小时，得六碘代α-环糊精14.67g，收率83.0％。

向反应瓶中加入DMF(50ml)和3-巯基丙酸(2.12g，16.0eq)，开启搅拌，控制温度为0～10℃，分批加入NaH(1.71g，35.0eq)，加毕，搅拌15分钟。随后滴加六碘代α-环糊精(2.03g，1.0eq)的DMF(10ml)溶液，将反应温度升至70～80℃，保温反应4小时，反应结束后冷却至20～30℃，然后滴加纯化水(10ml)搅拌1小时，过滤，滤饼用甲醇(20ml)打浆，抽滤，滤饼于35℃下鼓风干燥，得粗品(1.83g，黄色固体)。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，冻干得到舒更葡糖钠杂质1(740mg，白色粉末)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.00(6H，s)，3.99(6H，t，J＝7.8Hz)，3.89(6H，t，J＝9.2Hz)，3.59-3.45(12H，m)，3.15(6H，d，J＝11.7Hz)，2.95(6H，dd，J＝13.5Hz，7.3Hz)，2.83(12H，t，J＝7.5Hz)，2.51-2.42(12H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 1501.3148[M+H]⁺理论值：1501.3139。

实施例2：舒更葡糖钠杂质2的制备

向反应瓶中加入三苯基膦(46.41g，20.0eq)和DMF(125ml)，开启搅拌，控制温度为0～5℃，然后将碘(46.15g,20.5eq)分批加入，随后将干燥后的β-环糊精(10.32g，1.0eq)分批加入，将反应温度升至70℃，恒温反应16小时。反应结束后冷却至控温20～30℃，然后滴加甲醇钠甲醇溶液(5mol/L,44.0mL)，并调节反应液pH＝8-9。搅拌下将淬灭后的反应液缓慢倒入纯化水(500mL)中，析出大量棕红色固体。抽滤，滤饼用水(300ml)淋洗，抽干。接着滤饼用丙酮(300ml)打浆，抽滤，然后将滤饼溶于DMF(100ml)中，滴加丙酮(400ml)，搅拌析晶。抽滤，滤饼于35℃下，鼓风干燥，得七碘代β-环糊精(14.32g，黄色粉末)，收率80.8％。

向反应瓶中加入DMF(250ml)和3-巯基丙酸(8.76g，16.0eq)，开启搅拌，控制温度为0～10℃，分批加入NaH(6.89g，34.0eq)，加毕，搅拌15分钟。随后滴加七碘代β-环糊精(9.93g，1.0eq)的DMF(30ml)溶液，将反应温度升至70～80℃，保温反应2小时，反应结束后冷却至20～30℃，然后滴加纯化水(30mL)，过滤，滤饼用甲醇(50ml)打浆，抽滤，滤饼于温度35℃下鼓风干燥7小时，得粗品(4.32g，黄色固体)。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，得到舒更葡糖钠杂质2(311mg，白色粉末)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.15(7H，d，J＝3.5Hz)，4.07(7H，t，J＝6.9Hz)，3.97(7H，t，J＝9.4Hz)，3.66-3.61(14H，m)，3.19(7H，d，J＝11.7Hz)，3.02(7H，dd，J＝13.7Hz，6.9Hz)，2.89(14H，t，J＝7.4Hz)，2.58-2.50(14H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 1751.3648[M+H]⁺理论值：1751.3650。

实施例3：舒更葡糖钠杂质3和4的制备

向反应瓶中加入舒更葡糖钠(10.30g，1.0eq)和纯化水(30ml)，开启搅拌，控制温度0～5℃，向上述体系滴加30％的过氧化氢(4.75mmol，1.0eq)的水溶液。滴毕，控温0～5℃搅拌30分钟。反应液真空冷冻除水，得粗品10.36g。粗品经中压液相制备分离，收集10min柱分液，冻干得到舒更葡糖钠杂质3(438mg，白色粉末)；收集11min柱分液，冻干得到舒更葡糖钠杂质4(562mg，白色粉末)。

舒更葡糖钠杂质3结构确证：

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：5.21-5.15(8H，m)，4.37-4.35(1H，m)，4.06(7H，m)，3.95-3.90(8H，m)，3.71-3.61(16H，m)，3.47-3.35(2H，m)，3.15-3.12(8H，m)，3.01-2.99(8H，m)，2.88-2.85(14H，m)，2.67-2.65(2H，t，J＝7.5Hz)，2.51-2.47(14H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 2017.3996[M+H]⁺理论值：2017.4111。

舒更葡糖钠杂质4结构确证：

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：5.07-4.97(8H，m)，4.18(1H，t)，4.04-3.96(7H，m)，3.87-3.78(8H，m)，3.55-3.37(18H，m)，3.19-2.90(16H，m)，2.83-2.79(14H，m)，2.62-2.58(2H，m)，2.50-2.41(14H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 2017.4081[M+H]⁺理论值：2017.4111。

实施例4：舒更葡糖钠杂质5的制备

取舒更葡糖钠(10.15g)，加入100ml纯化水溶清，然后放入光化学反应仪(上海比郎，BL-GHX-V)中，进行光破坏反应，反应结束后冻干，然后经中压液相制备分离，收集相应组分，冻干得到舒更葡糖钠杂质5(318mg)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.14-5.06(8H，m)，4.40-3.35(1H，m)，4.24-4.19(1H，m)，4.08-4.01(6H，m)，3.92-3.83(8H，m)，3.63-3.41(20H，m)，3.21-2.93(16H，m)，2.85-2.81(12H，m)，2.63-2.60(4H，m)，2.48-2.42(12H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 2055.3900[M+Na]⁺理论值：2055.3879。

实施例5：舒更葡糖钠杂质6的制备

步骤1：向反应瓶中加入八碘代γ-环糊精(10.13g，1.0eq)和DMF(30ml)，开启搅拌，控制温度为0～5℃。

步骤2：向另一反应瓶中加入DMF(300ml)和3-巯基丙酸(3.45g，7.0eq)，开启搅拌，控制温度为5～15℃，分批加入NaH(2.98g，74.4mmol，14.0eq)，加毕，搅拌15分钟。

步骤3：控制温度为0～5℃，将步骤2的反应液缓慢滴加至上述步骤1的溶液中，滴毕，将反应温度缓慢升至室温，继续搅拌2小时，抽滤。在0～10℃温度下，滤饼分批加入到乙醇(250ml)/水(50ml)/乙酸(50ml)的混合溶液中，搅拌1小时，抽滤，滤饼用乙醇(100ml)淋洗，抽干，然后滤饼于温度35℃，鼓风干燥，得粗品(6.14g，类白色粉末)。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，冻干得到舒更葡糖钠杂质6(322mg，白色粉末)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.08-5.04(8H，m)，4.02-3.98(8H，m)，3.89-3.81(8H，m)，3.55-3.47(16H，m)，3.36-3.31(1H，m)，3.18-3.11(7H，m)，3.05-3.00(1H，m)，2.97-2.92(7H，m)，2.86-2.82(14H，m)，2.49-2.45(14H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 2023.3167[M+H]⁺理论值：2023.3196。

实施例6：舒更葡糖钠杂质7的制备

步骤1：向反应瓶中加入八碘代γ-环糊精(15.62g，1.0eq)和DMF(300ml)，开启搅拌，控制温度为0～5℃，然后加入氢化钠(0.57g,2.0eq)，加毕，控制温度为0～5℃，搅拌1小时，直接用于下一步。

步骤2：向另一反应瓶中加入DMF(300ml)和3-巯基丙酸(9.13g，12.0eq)，开启搅拌，控制温度为5～15℃，分批加入NaH(6.89g，24.0eq)，加毕，搅拌15分钟。

步骤3：在0～5℃温度下，将步骤2的反应液缓慢滴加至步骤1的反应液中，滴毕，反应温度升至40-45℃，保温反应2小时，反应结束后冷却，抽滤。然后在0～10℃温度下，滤饼分批加入到乙醇(250ml)/水(50ml)/乙酸(50ml)的混合溶液中，搅拌1小时，抽滤，滤饼用乙醇(100ml)淋洗，抽干，滤饼于35℃温度下，鼓风干燥，得粗品(8.42g，类白色粉末)。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，得到舒更葡糖钠杂质7(621mg，白色粉末)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.11-5.03(8H，m)，4.08-4.02(9H，m)，3.95-3.87(9H，m)，3.61-3.48(16H，m)，3.23-3.15(7H，m)，3.03-2.99(7H，m)，2.93-2.86(14H，m)，2.57-2.52(14H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 1895.4074[M+H]⁺理论值：1895.4073。

实施例7：舒更葡糖钠杂质8的制备

向反应瓶中加入DMF(30ml)、舒更葡糖钠杂质6钠盐(2.18g)和硫脲(0.8g)，开启搅拌，滴毕，反应温度缓慢升至80℃，继续搅拌3小时，反应结束后降至室温。然后滴加乙醇(100ml)，搅拌1小时，抽滤，滤饼湿重6.21g，滤饼直接用于下一步。

向反应瓶中加入NaOH水溶液(50ml，1g NaOH溶于50ml纯化水配制)和上一步滤饼(6.21g)，开启搅拌，反应温度缓慢升至90℃，继续搅拌7小时，反应结束后降至室温。然后加入硅藻土后过滤，滤液滴入到乙醇(150ml)中，搅拌1小时，抽滤，滤饼于35℃下，鼓风干燥，得粗品(2.94g，淡黄色固体)。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，得到舒更葡糖钠杂质8(478mg，白色粉末)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.04-5.00(8H，m)，4.02(8H，m)，3.88-3.79(8H，m)，3.54-3.43(16H，m)，3.15-3.11(8H，m)，2.95-2.92(8H，m)，2.84-2.81(14H，m)，2.43-2.44(14H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 1929.3953[M+H]⁺理论值：1929.3950。

实施例8：舒更葡糖钠杂质9的制备

向反应瓶中加入DMSO(20ml)和NaH(0.50g)，开启搅拌，室温下滴加3-巯基丙酸(0.52g)，搅拌15min后，加入舒更葡糖钠杂质8(0.52g)，于温度120℃下反应12小时。反应结束后降温，滴加乙醇(80ml)析晶，搅拌，抽滤，自然晾干得粗品(1.16g，白色固体)。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，冻干得舒更葡糖钠杂质9(88mg)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.05(8H，m)，4.05(8H，m)，3.89-3.84(8H，m)，3.58-3.48(16H，m)，3.23-3.20(8H，m)，3.03-2.99(8H，m)，2.93-2.89(16H，m)，2.67-2.53(16H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 2033.3758[M+H]⁺理论值：2033.3882。

实施例9：舒更葡糖钠杂质10的制备

向反应瓶中加入舒更葡糖钠杂质8(1.14g)、乙酸钠(1.14g)和纯化水(30ml)，开启搅拌，控制温度为0～5℃，然后滴加0.2ml碘水(30mg碘溶于100ml纯化水中)，滴毕，室温搅拌3小时，反应结束后真空冷冻除水，得粗品(0.91g，白色固体)。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，冻干得到舒更葡糖钠杂质10(490mg，白色粉末)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.30-5.10(16H，m)，4.13-3.94(32H，m)，3.71-3.59(32H，m)，3.25-3.10(16H，m)，3.07-2.85(44H，m)，2.68-2.53(28H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 1928.3822[M+2H]²⁺理论值：1928.3872。

实施例10：舒更葡糖钠杂质11和12的制备

向反应瓶中加入DMF(3ml)和NaH(0.40g)，开启搅拌，向反应瓶中滴加2-巯基丙酸(0.54g)的DMF(1ml)溶液，搅拌15min后，滴加舒更葡糖钠杂质6钠盐(0.50g)的DMF(3ml)溶液，于温度65～70℃反应20小时。反应结束后抽滤，滤饼用甲醇(50ml)泡洗，抽滤得粗品(1.92g，白色固体)。粗品经中压液相制备分离，收集18min柱分液，冻干得到舒更葡糖钠杂质11(110mg，白色粉末)；收集20min柱分液，冻干得到舒更葡糖钠杂质12(99mg，白色粉末)。

舒更葡糖钠杂质11结构确证：

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：5.24-5.14(8H，m)，4.05-3.99(8H，m)，3.93-3.89(8H，m)，3.71-3.52(17H，m)，3.12-3.08(8H，m)，3.00-2.95(8H，m)，2.85-2.82(14H，m)，2.49-2.45(14H，m)，1.39(3H，d，J＝7.1Hz)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 2001.4056[M+H]⁺

理论值：2001.4162。

舒更葡糖钠杂质12结构确证：

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：5.04(8H，m)，4.01(8H，m)，3.85-3.82(8H，m)，3.56-3.45(17H，m)，3.13-3.09(8H，m)，2.97-2.92(8H，m)，2.84-2.81(14H，m)，2.48-2.44(14H，m)，1.39(3H，d，J＝7.1Hz)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 2001.4046[M+H]⁺

理论值：2001.4162。

实施例11：舒更葡糖钠杂质13的制备

向封管中加入DMF(3ml)和NaH(0.39g)，搅拌，再向反应瓶中滴加巯基乙酸(0.46g)的DMF(1ml)溶液，搅拌15min后，滴加舒更葡糖钠杂质6钠盐(0.49g)的DMF(2.5ml)溶液，于反应温度为65～70℃反应4小时，反应结束后抽滤，滤饼用纯化水(8ml)溶清，滴加乙醇，有油状物析出，油状物经中压液相制备分离，收集相应组分，得到舒更葡糖钠杂质13(150mg，白色粉末)。

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：4.90(8H，m)，3.90(8H，m)，3.74-3.69(8H，m)，3.43-3.29(18H，m)，3.08-3.05(8H，m)，2.87-2.84(8H，m)，2.78-2.74(14H，m)，2.42-2.38(14H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 1987.3961[M+H]⁺

理论值：1987.4005。

实施例12：舒更葡糖钠杂质14的制备

向反应瓶中加入DMF(3ml)和舒更葡糖钠杂质6(0.51g)，搅拌溶清。再向反应瓶中加入二甲胺的四氢呋喃溶液(2.0M，5ml)。室温反应2天后，再加入二甲胺的四氢呋喃溶液(2.0M，3ml)。室温继续反应4天，反应体系减压浓缩后，经中压液相制备分离得到舒更葡糖钠杂质14(250mg，白色粉末)。

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：4.92-4.89(8H，m)，3.98-3.84(8H，m)，3.81-3.69(8H，m)，3.45-3.32(16H，m)，3.14-3.02(8H，m)，2.96-2.84(8H，m)，2.79-2.76(14H，m)，2.43-2.39(14H，m)，2.20(6H，s)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 1940.4528[M+H]⁺

理论值：1940.4652。

实施例13：舒更葡糖钠杂质15的制备

步骤1：

向反应瓶中加入三苯基膦(80.00g，20.0eq)和DMF(240ml)，搅拌。控制温度为-15℃～-5℃，将液溴(50.68g，20.5eq)滴入到反应瓶中，加毕，将干燥后的γ-环糊精(20.45g，1.0eq)分批加入，加毕，反应温度升至70℃，恒温反应4小时。反应结束后冷却，并控制温度为-10℃～-5℃，然后滴加甲醇钠甲醇溶液(60.3mL，5mol/L)，且调节反应液pH＝8-9。搅拌3小时后，将淬灭后的反应液缓慢倒入冰水(1000mL)中，大量棕红色固体析出，抽滤，滤饼用丙酮(500ml)打浆，抽滤，滤饼室温晾干得八溴代γ-环糊精26.37g。

步骤2：

向反应瓶中加入DMF(150ml)和NaH(5.33g)，搅拌，控制温度为0～10℃，滴加3-巯基丙酸(7.10g)的DMF(40ml)溶液，制得3-巯基丙酸钠溶液，待用。

另取一反应瓶，加入DMF(185ml)和八溴代γ-环糊精(15.51g)，搅拌溶清，控制温度为0～10℃。将3-巯基丙酸钠溶液缓慢滴入到反应瓶中，室温反应18小时，反应结束后抽滤，滤饼分批加入到乙酸(50ml)/冰水(50ml)的混合溶液中，搅拌1小时，滴加乙醇(300ml)逼晶搅拌。抽滤，滤饼于45℃温度下真空干燥，得粗品(14.02g，类白色粉末)。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，冻干得到舒更葡糖钠杂质15(0.88g，白色粉末)。

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：5.15-5.11(8H，m)，4.03(8H，m)，3.96-3.79(10H，m)，3.61-3.56(16H，m)，3.14-3.10(7H，m)，2.98-2.93(7H，m)，2.85-2.83(14H，m)，2.49-2.45(14H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 1975.3302[M+H]⁺

理论值：1975.3335。

实施例14：舒更葡糖钠杂质16的制备

向反应瓶中加入DMF(5ml)、叔丁醇钾(0.52g)和舒更葡糖钠杂质8(1.14g)，开启搅拌，反应温度升至温到80℃。再向反应瓶中滴加舒更葡糖钠杂质6(0.54g)的DMF(3ml)溶液，体系保温于温度65～70℃反应20小时。反应体系反应结束后抽滤，得粗品(1.32g，白色固体)。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，得到舒更葡糖钠杂质16(90mg，白色粉末)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.11-5.03(8H，m)，4.08-4.02(9H，m)，3.95-3.87(9H，m)，3.61-3.48(16H，m)，3.23-3.15(7H，m)，3.03-2.99(7H，m)，2.93-2.86(14H，m)，2.57-2.52(14H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 1934.3756[M+2Na]²⁺

理论值：1934.3831。

实施例15：舒更葡糖钠杂质17的制备

向反应瓶中依次加入乙酸(5ml)、乙醇(5ml)和舒更葡糖钠(2.02g)，开启搅拌，升温至70～75℃，继续搅拌2小时。反应结束后降温，抽滤，滤饼室温晾干，得粗品(1.84g，白色固体)。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，得到舒更葡糖钠杂质17(205mg)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.22-5.14(8H，m)，4.25-4.21(2H，m)，4.02-3.87(16H，m)，3.68-3.59(16H，m)，3.22-3.12(8H，m)，3.02-2.97(8H，m)，2.88-2.84(16H，m)，2.51-2.47(16H，m)，1.36-1.33(3H，t，J＝7.1Hz)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 2029.4503[M+H]⁺

理论值：2029.4475。

实施例16：舒更葡糖钠杂质18的制备

向反应瓶中依次加入乙酸(10ml)、甲醇(10ml)和舒更葡糖钠(5.15g)，开启搅拌，升温至65℃，继续搅拌48小时。反应结束后降温，抽滤，用丙酮(30ml)淋洗，滤饼室温晾干，得粗品(5.22g，白色固体)。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，冻干得到舒更葡糖钠杂质18(406mg)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：4.98(8H，d，J＝3.3Hz)，3.99-3.95(8H，m)，3.79(8H，t，J＝9.4Hz)，3.51-3.41(16H，m)，3.29(3H，s)，3.12-3.09(8H，m)，2.94-2.89(8H，m)，2.83-2.79(16H，m)，2.45-2.42(16H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 2015.4251[M+H]⁺

理论值：2015.4318。

实施例17：舒更葡糖钠杂质19的制备

向反应瓶中加入纯化水(10ml)和舒更葡糖钠杂质8(1.0克)，用氢氧化钠水溶液调节pH＝8-9，溶清，开启搅拌，敞口搅拌7天。然后滴加乙醇(30mL)，过滤，滤饼用乙醇(10ml)打浆，抽滤，滤饼鼓风干燥7小时，得粗品(4.32g，黄色固体)收率：44.5％。粗品经中压液相制备分离，收集相应组分，冻干得到舒更葡糖钠杂质19(311mg)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.14-5.05(8H，m)，4.13-4.05(8H，m)，3.91-3.86(8H，m)，3.61-3.56(16H，m)，3.14-3.10(8H，m)，3.00-2.98(8H，m)，2.87-2.84(14H，m)，2.53-2.45(14H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 1961.3833[M+H]⁺

理论值：1961.3849。

实施例18：舒更葡糖钠杂质20的制备

向反应瓶中加入舒更葡糖钠杂质6钠盐(461mg)和纯化水(2ml)，搅拌溶清，加入氢氧化钠(138mg)，室温搅拌7小时后，再升温至70℃反应7小时。反应结束后冻干，粗品经中压液相制备分离，冻干得到舒更葡糖钠杂质20(155mg，白色粉末)。

¹H-NMR(400MHz,D₂O)：5.14-5.05(8H，m)，4.13-4.05(8H，m)，3.91-3.86(8H，m)，3.61-3.56(16H，m)，3.14-3.10(8H，m)，3.00-2.98(8H，m)，2.87-2.84(14H，m)，2.53-2.45(14H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 1917.3858[M+H]⁺

理论值：1917.3893。

实施例19：舒更葡糖钠杂质21和22的制备

步骤1：向反应瓶中加入八碘代γ-环糊精(10.13g，1.0eq)和DMF(30ml)，开启搅拌，降低温度至0～5℃，待用。

步骤2：向另一反应瓶中加入DMF(300ml)和3-巯基丙酸(2.96g，6.0eq)，开启搅拌，控温为5～15℃，分批加入NaH(2.23g，12.0eq)，加毕，搅拌15分钟。

步骤3：在0～5℃下，将步骤2的反应液缓慢滴加至步骤1的溶液中，滴毕，体系缓慢升至室温，继续搅拌2小时，反应体系抽滤。在0～10℃，滤饼分批加入到乙醇(250ml)/水(50ml)/乙酸(50ml)的混合溶液中。搅拌1小时，抽滤，滤饼用乙醇(100ml)淋洗，抽干。滤饼于35℃下，鼓风干燥，得粗品(5.14g，类白色粉末)。粗品经中压液相制备分离，收集26min柱分液，冻干得到舒更葡糖钠杂质21(49mg，白色粉末)；收集27min柱分液，冻干得到舒更葡糖钠杂质22(51mg，白色粉末)。

舒更葡糖钠杂质21结构确证：

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：5.17-5.11(8H，m)，4.04(8H，m)，3.92-3.87(8H，m)，3.61-3.58(16H，m)，3.15-3.12(8H，m)，2.98-2.95(8H，m)，2.87-2.84(12H，m)，2.50-2.47(12H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 2045.2091[M+H]⁺

理论值：2045.2231。

舒更葡糖钠杂质22结构确证：

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：5.08-5.03(8H，m)，4.02-4.00(8H，m)，3.86-3.81(8H，m)，3.55-3.48(16H，m)，3.14-3.11(8H，m)，2.97-2.92(8H，m)，2.85-2.82(12H，m)，2.49-2.45(12H，m)。

高分辨质谱(ESI+)：m/z 2062.2574[M+NH₄]⁺

理论值：2062.2496。

试验例1：

舒更葡糖钠杂质混合溶液：用流动相A溶解舒更葡糖钠及杂质1～22得到混合溶液，其中，所述混合溶液中舒更葡糖钠的浓度为5mg/ml，杂质1～22的浓度分别为5μg/ml。

将所述舒更葡糖钠杂质混合溶液注入液相色谱仪，其中，色谱条件为：

色谱柱：C₁₈色谱柱(YMC ODS-AQ 150×4.6mm，3μm)；

流动相A：配置20mmol/L的磷酸二氢钾溶液，并用磷酸将pH值调节为2.3；

流动相B：乙腈；

紫外检测波长：200nm；

流速：0.8ml/min；

柱温：40℃；

梯度洗脱程序：

时间(分钟)	流动相A(％)	流动相B(％)
			0	82	18
10	82	18
			40	80	20
50	75	25
			65	50	50
70	25	75
			80	25	75
80.1	82	18
			90	82	18

所述的色谱图如图23所示。

试验例2：

舒更葡糖钠粗品的制备：在氮气氛和冰浴下，将氢化钠(7.16kg，60％)加至干燥的DMF(317L)中。在0～10℃下缓慢滴加三对甲苯基膦(1.74kg)-3-巯基丙酸(9.52kg)-DMF(12.2L)混合溶液，加毕升温至65～75℃搅拌下反应，再缓慢滴加全碘代γ-环糊精(12.16kg)-三对甲苯基膦(0.46kg)-DMF(63.4L)混合溶液，继续搅拌下反应约4h。将反应液降至0～10℃，加入水(60.9L)，升温至55～70℃搅拌下反应约2h。将反应液冷却至室温，抽滤，将滤饼加水(97.4L)溶解，硅藻土过滤，再向滤液中加入乙醇(244L)，抽滤，得到舒更葡糖钠粗品(10.96kg，收率90％，纯度92.53％)。

舒更葡糖钠粗品溶液：用流动相A溶解舒更葡糖钠粗品。

将所述舒更葡糖钠粗品溶液注入液相色谱仪，其中，色谱条件为：

色谱柱：C₁₈色谱柱(YMC ODS-AQ 150×4.6mm，3μm)；

流动相A：配置20mmol/L的磷酸二氢钾溶液，并用磷酸将pH值调节为2.5；

流动相B：乙腈；

紫外检测波长：200nm；

流速：0.8ml/min；

柱温：40℃；

梯度洗脱程序：

舒更葡糖钠粗品的HPLC色谱图如图24所示。

结合图23和图24可知，杂质1-22或杂质1-22钠盐可作为舒更葡糖钠杂质对照品在舒更葡糖钠的含量测定、杂质和有关物质的检测中的应用。