重组人源化胶原蛋白的用途及其相关组合物和制备方法
阅读说明：本技术 重组人源化胶原蛋白的用途及其相关组合物和制备方法 (Application of recombinant humanized collagen, and related composition and preparation method thereof ) 是由 杨霞 何振瑞 陈传秀 王志强 岳海霞 高桂芝 樊艳勤 郝睿 杨岩 张彦 邢彦雪 于 2021-08-25 设计创作，主要内容包括：本发明涉及重组人源化胶原蛋白的用途及其相关组合物和制备方法。具体而言,本发明提供了该重组人源化胶原蛋白在制备用于预防和/或治疗过敏性皮肤疾病(特别是湿疹)的产品中的用途,同时本发明提供了含有该重组人源化胶原蛋白的组合物及其制备方法。本发明在实验中证明重组人源化胶原蛋白可以有效缓解湿疹所引起的皮肤红肿、红斑、水肿、瘙痒以及炎症反应,同时可以使皮肤恢复光泽,并且发现本发明的含有该重组人源化胶原蛋白的组合物相比单纯的重组人源化胶原蛋白水溶液可以更加快速的缓解湿疹症状。(The invention relates to application of recombinant humanized collagen, and a related composition and a preparation method thereof. Specifically, the invention provides application of the recombinant humanized collagen in preparing a product for preventing and/or treating allergic skin diseases (particularly eczema), and also provides a composition containing the recombinant humanized collagen and a preparation method thereof. Experiments prove that the recombinant humanized collagen can effectively relieve the skin red swelling, erythema, edema, pruritus and inflammatory reaction caused by eczema, and can restore the skin luster, and the composition containing the recombinant humanized collagen can more quickly relieve the eczema symptom compared with a simple recombinant humanized collagen aqueous solution.)
技术领域
本发明属于生物医药领域，涉及重组人源化胶原蛋白的用途及其相关组合物，以及该组合物的制备方法。
背景技术
婴幼儿湿疹为儿童常见疾病，儿童由于其自身免疫力低，肝肾功能偏弱，因此不轻易给药。而常用的肤乐霜、乐肤霜等产品或多或少都含有少量激素，长期使用会对儿童造成不良影响。且根据临床报道，在长期使用肤乐霜、乐肤霜等产品后，儿童皮肤会产生耐药性，从而使得效果越来越低。因此，需要开发更多的不含激素的产品，用于治疗皮肤湿疹，为患者提供更多的选择。
申请号为201811438582.6、发明名称为“多肽、其生产方法和用途”的专利申请以及申请号为201210482543.2、发明名称为“一种重组人源胶原蛋白及其生产方法”的专利申请记载了本发明的发明人在之前研究并生产的重组人源化胶原蛋白，但并未直接披露其在生物医药领域中的具体用途。
发明内容
发明要解决的问题
本发明拟应用申请号为201811438582.6和201210482543.2中所记载的重组人源化胶原蛋白作为原材料，评价其用于预防和/或治疗过敏性皮肤疾病(特别是湿疹)的有效性，同时提供含有上述重组人源化胶原蛋白的组合物，用于预防和/或治疗相关疾病，并提供该组合物的制备方法。
用于解决问题的方案
第一方面，本发明提供了重组人源化胶原蛋白在制备用于预防和/或治疗过敏性皮肤疾病的产品中的用途，所述重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复，其中n为大于等于1的整数；当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的或者间隔一个或多个氨基酸残基。
进一步地，在上述用途中，所述重组人源化胶原蛋白任选地包含以SEQ ID No.2所示的序列，其中当所述重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.2所示的序列时，所述以SEQID No.1所示的序列的n个重复和以SEQ ID No.2所示的序列之间是直接连接的或者间隔一个或多个氨基酸残基。
优选地，在上述用途中，所述n为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、20、24或32，其中当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的或者间隔一个或多个氨基酸残基。
进一步地，在上述用途中，所述过敏性皮肤疾病为湿疹。
优选地，在上述用途中，所述湿疹为婴幼儿湿疹。
进一步地，在上述用途中，所述湿疹具有下列症状中的至少一种：皮肤红肿、皮肤产生红斑、皮肤水肿、皮肤缺乏光泽、皮肤瘙痒和炎症免疫因子表达升高。
优选地，在上述用途中，所述炎症免疫因子包含IL-4。
第二方面，本发明提供了一种组合物，其包含A相、B相、C相和D相，其中，以质量百分比计，A相包含：乳化剂1.1％～5.5％，柔润剂10％～12％，增稠剂2％～3％，防晒油2.5％～3％；B相包含：防腐剂0.13％～0.75％，流变调节剂0.3％～0.5％，活性成分保护剂2％～3％，保湿剂3％～7％和余量的水；C相包含：增湿剂0.1％～0.2％，抗菌剂3％～4％；D相包含：重组人源化胶原蛋白0.05％～0.15％；所述重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复和任选的以SEQ ID No.2所示的序列，其中n为大于等于1的整数；当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的或者间隔一个或多个氨基酸残基；当所述重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.2所示的序列时，所述以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复和以SEQ ID No.2所示的序列之间是直接连接的或者间隔一个或多个氨基酸残基。
进一步地，在上述组合物中，所述乳化剂包含M68乳化剂，A165乳化剂和鲸蜡硬脂醇中的至少一种；所述柔润剂包含液体石蜡；所述增稠剂包含聚二甲基硅氧烷；所述防晒油包含油橄榄果油；所述防腐剂包含羟苯甲酯，羟苯丙酯和苯氧乙醇中的至少一种；所述流变调节剂包含卡波姆；所述活性成分保护剂包含海藻糖；所述保湿剂包含甘油；所述增湿剂包含三乙醇胺；所述抗菌剂包含库拉索芦荟提取物。
第三方面，本发明提供了上述组合物的制备方法，其包括以下步骤：S1：将处方量的A相成分和B相成分分别在搅拌条件下加热并混合均匀；S2：将A相成分加入B相成分中保温搅拌，降温，得到第一混合物；S3：向第一混合物中加入处方量的C相成分，均质，得到第二混合物；S4：向第二混合物中加入处方量的D相成分，均质至体系均匀，即得。
第四方面，本发明提供了一种产品，其包含上述组合物和任选的药学或化妆品学上可接受的辅料。
发明的效果
通过上述技术方案的实施，本发明显示重组人源化胶原蛋白能够缓解湿疹所带来的皮肤红肿、红斑、水肿以及瘙痒等症状，并降低湿疹所带来的炎症反应，且含有重组人源化胶原蛋白的组合物能够更进一步加速湿疹症状的缓解，促进皮肤恢复光泽。
附图说明
图1为各组大鼠不同时期IL-4表达水平检测结果。
具体实施方式
以下对本发明的实施方式进行说明，但本发明不限定于此。本发明不限于以下说明的各构成，在发明请求保护的范围内可以进行各种变更，而适当组合不同实施方式、实施例中各自公开的技术手段而得到的实施方式、实施例也包含在本发明的技术范围中。
除非另有定义，本发明所用的技术和科学术语具有与本发明所属技术领域中的普通技术人员所通常理解的相同含义。
本说明书中，使用“数值A～数值B”或“数值A-数值B”表示的数值范围是指包含端点数值A、B的范围。
本说明书中，使用“可以”表示的含义包括了进行某种处理以及不进行某种处理两方面的含义。本说明书中，“任选的”或“任选地”是指接下来描述的事件或情况可发生或可不发生，并且该描述包括该事件发生的情况和该事件不发生的情况。
本说明书中，出现“％”时，表示质量百分含量，即g/100g，除非有其他特殊说明。
本说明书中，所提及的“一些具体/优选的实施方式”、“另一些具体/优选的实施方式”、“一些具体/优选的技术方案”、“另一些具体/优选的技术方案”等是指所描述的与该实施方式有关的特定要素(例如，特征、结构、性质和/或特性)包括在此处所述的至少一种实施方式中，并且可存在于其它实施方式中或者可不存在于其它实施方式中。另外，应理解，所述要素可以任何合适的方式组合在各种实施方式中。
本发明所述重组人源化胶原蛋白为申请号为201811438582.6、发明名称为“多肽、其生产方法和用途”的专利申请以及申请号为201210482543.2、发明名称为“一种重组人源胶原蛋白及其生产方法”的专利申请记载。其中申请号为201811438582.6的专利所记载的重组人源化胶原蛋白用于实施例中COL1组，申请号为201210482543.2的专利所记载的重组人源化胶原蛋白用于实施例中COL2组。
在一项实施方案中，本发明的重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列(由30个氨基酸组成，从N端到C端依次为GERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAP)的n个重复，其中n为大于等于1的整数，当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的或者间隔一个或多个氨基酸残基。
在一项优选的实施方案中，本发明的重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复，其中n为大于等于1的整数，当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的。
在一项更优选的实施方案中，本发明的重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复，n为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、20、24或32，优选16，其中当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的。
在一项更优选的实施方案中，本发明的重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的16个重复，各重复序列之间是直接连接的，即得以SEQ ID No.3所示的序列(全长480aa，从N端到C端依次为GERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAP)；本发明实施例中COL1组所用的重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.3所示的序列。
在一项实施方案中，本发明的重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复和以SEQ ID No.2所示的序列(由10个氨基酸组成，从N端到C端依次为GPPGPCCGGG)，其中n为大于等于1的整数，当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的或者间隔一个或多个氨基酸残基，所述以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复和以SEQ ID No.2所示的序列之间是直接连接的或者间隔一个或多个氨基酸残基。
在一项优选的实施方案中，本发明的重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复和以SEQ ID No.2所示的序列，其中n为大于等于1的整数，当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的或者间隔一个或多个氨基酸残基，所述以SEQID No.1所示的序列的n个重复和以SEQ ID No.2所示的序列之间间隔一个或多个氨基酸残基。
在一项更优选的实施方案中，本发明的重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复和以SEQ ID No.2所示的序列，n为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、20、24或32，优选16，其中当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的或者间隔一个或多个氨基酸残基；所述以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复和以SEQ ID No.2所示的序列之间间隔一个或多个氨基酸残基。
在一项更优选的实施方案中，本发明的重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的16个重复和以SEQ ID No.2所示的序列，各重复序列之间是直接连接的或者间隔2个氨基酸残基，所述以SEQ ID No.1所示的序列的16个重复和以SEQ ID No.2所示的序列之间间隔5个氨基酸残基，即得以SEQ ID No.4所示的序列(全长501aa，从N端到C端依次为GERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPRSGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPRSGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPRSGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPRSPEFGPPGPCCGGG)；本发明实施例中COL2组所用的重组人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.4所示的序列。
在一项实施方案中，本发明所述的过敏性皮肤疾病为湿疹。
在一项优选的实施方案中，本发明所述的过敏性皮肤疾病为婴幼儿湿疹。
在一项实施方案中，本发明的包含重组人源化胶原蛋白的组合物包含A相、B相、C相和D相，其中，以质量百分比计，A相包含：乳化剂1.1％～5.5％，柔润剂10％～12％，增稠剂2％～3％，防晒油2.5％～3％；B相包含：防腐剂0.13％～0.75％，流变调节剂0.3％～0.5％，活性成分保护剂2％～3％，保湿剂3％～7％和余量的水；C相包含：增湿剂0.1％～0.2％，抗菌剂3％～4％；D相包含：重组人源化胶原蛋白0.05％～0.15％；所述乳化剂包含M68乳化剂，A165乳化剂和鲸蜡硬脂醇中的至少一种；所述柔润剂包含液体石蜡；所述增稠剂包含聚二甲基硅氧烷；所述防晒油包含油橄榄果油；所述防腐剂包含羟苯甲酯，羟苯丙酯和苯氧乙醇中的至少一种；所述流变调节剂包含卡波姆；所述活性成分保护剂包含海藻糖；所述保湿剂包含甘油；所述增湿剂包含三乙醇胺；所述抗菌剂包含库拉索芦荟提取物。
除非另有说明，本发明中使用的仪器、试剂、材料、实验动物等均可通过常规商业手段获得。
实施例1：重组人源化胶原蛋白治疗湿疹
1.重组人源化胶原蛋白缓解湿疹产生的皮肤症状
1.1实验动物模型建立(参考《湿疹动物模型制备规范(草案)》，来进行实验模型设置)
将42只大鼠分为七组，分别为对照组、COL1低浓度组、COL1中浓度组、COL1高浓度组，COL2低浓度组、COL2中浓度组及COL2高浓度组，每组6只。将大鼠背部皮肤分为A、B两部分，其中A部为颈部附近、B部为背部，对其进行脱毛，A部脱毛面积大约为2cm×2cm，B部脱毛面积大约为4cm×4cm。配置浓度为7％的2,4-二硝基氯苯(DNCB)丙酮溶液，用移液器吸取100μL涂抹于A处，形成致敏反应。
1周后，在B处涂抹DNCB丙酮溶液200μL，进行激发。之后每5d激发一次，共激发6次后，模型建立成功。
结果：4组动物在A处给与DNCB丙酮溶液，大鼠出现剧烈瘙痒动作，打滚频繁，躁动。并且B处激发6次之后，B处皮肤出现红斑、水肿、抓痕(有皮肤抓破)，并且打滚剧烈，瘙痒动作明显。因此可以判定，动物模型建立成功。
1.2实验方法
在模型建立后，对照组每天给予生理盐水，COL1、COL2低浓度组、COL1、COL2中浓度组、COL1、COL2高浓度组，分别给与0.5mg/mL、1mg/mL、3mg/mL的含有重组人源化胶原蛋白的生理盐水溶液(该含有重组人源化胶原蛋白的生理盐水溶液为自行配置，用发明人团队自产的重组人源化胶原蛋白冻干粉，加入生理盐水进行溶解而形成)。一天1次，一次1mL。给药的时候，需用移液器缓慢滴注，每次滴注200μL。以便大鼠皮肤更好的吸收。给药共计9天，记录大鼠背部皮肤状况、瘙痒状况、以及皮肤光泽度。
1.3实验结果
具体大鼠情况记录如下：
从实验结果中可以得知，给予含有重组人源化胶原蛋白的生理盐水溶液，能够明显改善大鼠被刺激部位的红肿、红斑以及瘙痒现象，并且能够加速缓解湿疹所带来的各种症状。COL1和COL2组中两种重组人源化胶原蛋白在治疗湿疹的效果上比较接近。
2.重组人源化胶原蛋白降低湿疹产生的炎症反应
2.1实验动物模型建立(参考《湿疹动物模型制备规范(草案)》)
取60只大鼠进行模型建立，具体操作同1.1。
2.2实验方法
在模型建立后，对照组每天给与生理盐水，COL1、COL2低浓度组、COL1、COL2中浓度组、COL1、COL2高浓度组分别给与0.5mg/mL、1mg/mL、3mg/mL的含有重组人源化胶原蛋白的生理盐水溶液(该含有重组人源化胶原蛋白的生理盐水溶液为自行配置，用发明人团队自产的重组人源化胶原蛋白冻干粉，加入生理盐水进行溶解而形成)。一天1次，一次1mL。给药的时候，需用移液器缓慢滴注，每次滴注200μL。以便大鼠皮肤更好的吸收。
其中，第一天给药前，处死4只大鼠，取B处皮下组织，检测IL-4。其余56只，分为七组进行给药和喂养。
第五天，分别处死对照组、COL1、COL2低浓度组、COL1、COL2中浓度组、COL1、COL2高浓度组，各4只。取B处皮下组织，检测IL-4。
第九天，分别处死其余对照组、COL1、COL2低浓度组、COL1、COL2中浓度组、COL1、COL2高浓度组，各4只。取B处皮下组织，检测IL-4。
之后，用荧光定量PCR检测方法，检测各部分皮下组织的IL-4相对值。
2.3实验结果
实验结果如图1所示，IL-4的相对值，在试验当天处死的空白实验模型中是最高的，之后在5d的时候，明显看到，给予含有重组人源化胶原蛋白的生理盐水溶液的大鼠，IL-4值明显降低，而9d的时候，相对于对照组，给予含有重组人源化胶原蛋白的生理盐水溶液的大鼠，IL-4降低的更多，证明含有重组人源化胶原蛋白的生理盐水溶液能够显著地降低湿疹所带来的炎症反应，并且和浓度呈正相关。COL1和COL2组中两种重组人源化胶原蛋白在降低IL-4的表达中结果比较接近。
3.含有重组人源化胶原蛋白的组合物的相关研究
3.1制备处方(以质量百分比计)
3.2制备方法
(1)在油相锅中，将A组分原料加入，搅拌加热至80±2℃；
(2)在水相锅中，将B组分原料加热至80±2℃，混合均匀；
(3)将A组分加入B组分中搅拌，均质数分钟，80±2℃保温搅拌15min，降温；
(4)T＝40℃时加入C组分原料，均质数分钟，测pH；
(5)加入D组分(0.22μm滤膜过滤)，均质数分钟，使体系均匀；
(6)将半成品送检，检验合格后灌装包装，成品检验，检验合格后入库。
3.3药效学实验
取18只Wistar大鼠进行模型建立，具体操作同1.1。
动物模型建立后，将大鼠分为3组，分别为对照组、COL1给药组和COL2给药组，其中对照组每天给予1mL生理盐水，而给药组每天涂抹1g上述组合物，大约含1mg重组人源化胶原蛋白，并记录老鼠皮肤状况。
具体结果如下表所示，从表中可以看出，在涂抹了含有重组人源化胶原蛋白的组合物后，明显能够减轻B处的红肿程度，减少红斑及水肿的情况，并且恢复速度相比上述1.中单独给予含有重组人源化胶原蛋白的生理盐水溶液更快，同时利用重组人源化胶原蛋白对皮肤的修护作用，能够更快的恢复皮肤光泽。另外COL1和COL2组中两种重组人源化胶原蛋白制备成制剂后，效果几乎相同。
序列表
<110> 山西锦波生物医药股份有限公司
<120> 重组人源化胶原蛋白的用途及其相关组合物和制备方法
<130> 6C39-2173479I
<160> 4
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly
1 5 10 15
Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro
20 25 30
<210> 2
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
Gly Pro Pro Gly Pro Cys Cys Gly Gly Gly
1 5 10
<210> 3
<211> 480
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly
1 5 10 15
Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu
20 25 30
Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro
35 40 45
Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly
50 55 60
Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu
65 70 75 80
Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro
85 90 95
Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly
100 105 110
Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe
115 120 125
Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala
130 135 140
Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly
145 150 155 160
Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu
165 170 175
Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala
180 185 190
Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly
195 200 205
Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro
210 215 220
Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro
225 230 235 240
Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly
245 250 255
Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu
260 265 270
Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro
275 280 285
Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly
290 295 300
Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu
305 310 315 320
Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro
325 330 335
Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly
340 345 350
Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe
355 360 365
Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala
370 375 380
Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly
385 390 395 400
Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu
405 410 415
Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala
420 425 430
Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly
435 440 445
Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro
450 455 460
Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro
465 470 475 480
<210> 4
<211> 501
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly
1 5 10 15
Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu
20 25 30
Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro
35 40 45
Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly
50 55 60
Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu
65 70 75 80
Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro
85 90 95
Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly
100 105 110
Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Arg Ser Gly Glu Arg Gly Ala Pro
115 120 125
Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly
130 135 140
Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe
145 150 155 160
Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala
165 170 175
Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly
180 185 190
Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu
195 200 205
Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala
210 215 220
Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly
225 230 235 240
Ala Pro Arg Ser Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala
245 250 255
Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly
260 265 270
Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro
275 280 285
Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro
290 295 300
Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly
305 310 315 320
Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu
325 330 335
Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro
340 345 350
Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Arg Ser Gly Glu
355 360 365
Arg Gly Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro
370 375 380
Gly Glu Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly
385 390 395 400
Ala Pro Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu
405 410 415
Lys Gly Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro
420 425 430
Gly Phe Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly
435 440 445
Pro Ala Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Glu Arg Gly Ala Pro Gly Phe
450 455 460
Arg Gly Pro Ala Gly Pro Asn Gly Ile Pro Gly Glu Lys Gly Pro Ala
465 470 475 480
Gly Glu Arg Gly Ala Pro Arg Ser Pro Glu Phe Gly Pro Pro Gly Pro
485 490 495
Cys Cys Gly Gly Gly
500
- 上一篇：一种医用注射器针头装配设备
- 下一篇：一种量子点增强型肿瘤灭活疫苗及制备方法和应用