阅读说明：本技术 一种ace2抗独特型卵黄抗体疫苗的制备方法 (Preparation method of ACE2 anti-idiotype yolk antibody vaccine ) 是由 黄威权 田超 赵锋 李丹 黄晓文 欧阳森 于 2020-07-27 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗的制备方法,包括：将ACE2蛋白溶液与弗氏不完全佐剂混合获得第一混合溶液；采用第一混合溶液制备抗ACE2抗体；将抗ACE2抗体稀释后,与弗氏不完全佐剂混合获得第二混合溶液；用第二混合溶液对产蛋鸡进行第一免疫；判断产蛋鸡是否为高免鸡；若为高免鸡,采集高免鸡蛋；获得第一卵黄溶液；去除第一卵黄溶液中的杂质蛋白,获得ACE2抗独特型卵黄抗体粗制品；对抗独特型卵黄抗体粗制品进行纯化,获得ACE2抗独特型卵黄抗体精制品,制成ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗。所述疫苗能诱导人体产生ACE2抗体,和ACE2结合,阻断新冠病毒进入人体细胞,起到对COVID-19的预防作用,具有分子量大,进入人体不易被分解,稳定性强、无毒副作用的技术效果。(The invention discloses a preparation method of an ACE2 anti-idiotype yolk antibody vaccine, which comprises the following steps: mixing an ACE2 protein solution with Freund's incomplete adjuvant to obtain a first mixed solution; preparing an anti-ACE 2 antibody by using the first mixed solution; diluting an anti-ACE 2 antibody, and mixing with Freund's incomplete adjuvant to obtain a second mixed solution; performing first immunization on the laying hens by using the second mixed solution; judging whether the laying hens are high-immunity chickens or not; if the chicken is high-immunity chicken, collecting high-immunity eggs; obtaining a first yolk solution; removing impurity protein in the first yolk solution to obtain crude product of ACE2 anti-idiotype yolk antibody; purifying the crude product of the anti-idiotype yolk antibody to obtain a refined product of the ACE2 anti-idiotype yolk antibody, and preparing the ACE2 anti-idiotype yolk antibody vaccine. The vaccine can induce a human body to generate an ACE2 antibody, is combined with ACE2, blocks new coronavirus from entering cells of the human body, plays a role in preventing COVID-19, and has the technical effects of large molecular weight, high stability and no toxic or side effect, and the vaccine is not easy to decompose when entering the human body.)

一种ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗的制备方法

技术领域

本发明涉及预防防疫技术领域，特别涉及一种ACE2抗独特型卵黄抗体 疫苗的制备方法。

背景技术

迄今，全世界仍没有一个新冠病毒疫苗面世，只有几个疫苗开始进行临 床研究，它们是以腺病毒为载体的重组疫苗、mRNA疫苗、灭活疫苗。目前 在研疫苗有几十个，疫苗种类除了以上提及的外还有DNA疫苗等。以上疫苗 都是针对新冠病毒的致病基因S1和S2基因而设计的，并未见针对病毒受体 ACE2而设计的疫苗。ACE2多克隆抗体的制备已有报道，但是只是用作检测， 至今未见ACE2抗独特型单克隆抗体疫苗和抗独特型卵黄抗体疫苗的报道。

腺病毒疫苗实际上是基因重组疫苗，是将新冠病毒的致病基因克隆、重 组改造后，转染到腺病毒，将腺病毒接种免疫人体，腺病毒在人体内扩增繁 殖的同时，表达毒性较小的新冠病毒致病抗原，后者刺激人体产生抗体，使 人对新冠病毒感染产生免疫保护能力。

mRNA疫苗是将新冠病毒致病相关的mRNA改造后免疫接种人体，mRNA在人体内复制并表达毒性较小的致病抗原，后者刺激人体产生抗体， 使人体对新冠病毒的感染产生免疫保护能力。

DNA疫苗是将病毒与致病相关的DNA克隆改造后，在体外扩增，然后 肌肉注射免疫人体，病毒的DNA在肌细胞内扩增，表达mRNA，再以mRNA 为模板，表达致病抗原，后者刺激人体产生抗体，使人体对新冠病毒的感染 产生免疫保护能力。

灭活疫苗是将病毒在体外扩增后，经化学或物理学途径将其灭活，然后 接种免疫人体，使人体产生免疫应答，从而获得对该病毒感染的免疫保护能 力。

但本申请发明人发现上述现有技术至少存在如下技术问题：

现有技术中的DNA疫苗、mRNA疫苗或基因重组疫苗(含腺病毒载体疫 苗)，它们最终都是表达产生毒性较小的致病抗原，这些抗原本身是小分子 多肽或蛋白质，因为它们分子量较小，进入人体后容易被分解失效，所以稳 定性差，体内存留时间短，效力相对较弱是它们的共同缺点。灭活疫苗主要 缺点是存在毒副作用，风险较大。因为灭活只是用化学或物理手段消除病毒 的生长能力，但并不能消除病毒的内毒素和外毒素，所以不能消除对人体毒 副作用的风险。

发明内容

本发明提供了一种ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗的制备用方法，解决了 现有技术中新冠疫苗分子量小，进入体不易被分解，稳定相差，体内存留时 间段，效力弱，有毒副作用的技术问题，达到了诱导人体产生ACE2抗体， 和ACE2结合，阻断新冠病毒进入人体细胞，起到对COVID-19的预防作用， 且分子量大，进入体不易被分解，体内留存时间长，稳定性强、效力强，无 毒副作用的技术效果。

为解决上述问题，本发明实施例提供了一种ACE2抗独特型卵黄抗体疫 苗的制备方法，所述制备方法包括：将ACE2蛋白溶液与弗氏不完全佐剂等 体积混合均匀，获得第一混合溶液；采用所述第一混合溶液制备抗ACE2抗 体；用PBS缓冲液将0.2mL所述抗ACE2抗体稀释成5mL后，与弗氏不完全 佐剂等体积混合，获得浓度为第一浓度的第二混合溶液；用所述第二混合溶 液肌肉注射产蛋鸡，对所述产蛋鸡按照第一预定条件进行第一预定次数的第 一免疫；判断所述产蛋鸡是否为高免鸡；若为高免鸡，最后一次进行所述第 一免疫后第三天开始采集高免鸡蛋，连续采集20天；其中，所述高免鸡蛋为 所述高免鸡生产的鸡蛋；对所述高免鸡蛋进行清洗、消毒、卵黄分离、卵黄 组织破碎后，获得第一卵黄溶液；用水稀释和酸化法去除所述第一卵黄溶液 中的杂质蛋白，获得ACE2抗独特型卵黄抗体粗制品；用酒精沉淀法对所述 抗独特型卵黄抗体粗制品进行纯化，获得ACE2抗独特型卵黄抗体精制品；将所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品制成ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗。

优选的，所述第一浓度为每毫升所述第二混合溶液中含100μg所述抗 ACE2抗体。

优选的，所述第一预定条件为每只所述产蛋鸡每次所述第一免疫注射 0.5mL所述第二混合溶液，每隔7-10天进行一次所述第一免疫；所述第一预 定次数为3-4次。

优选的，所述判断所述产蛋鸡是否为高免鸡，具体为：最后一次进行所 述第一免疫后当天，采集所述产蛋鸡生产的鸡蛋，判断所述鸡蛋的卵黄是否 含有ACE2抗独特型卵黄抗体；如果含有所述ACE2抗独特型卵黄抗体，判 断所述ACE2抗独特型卵黄抗体的效价是否大于等于10^-4；如果所述ACE2 抗独特型卵黄抗体的效价大于等于10^-4，则所述产蛋鸡为高免鸡。

优选的，所述采集高免鸡蛋还包括：若需继续采集所述高免鸡蛋，则对 所述高免鸡追加一次所述第一免疫；连续采集所述高免鸡蛋20天。

优选的，所述用水稀释和酸化法去除所述第一卵黄溶液中的杂质蛋白， 具体为：将第一体积的无菌蒸馏水加入到第二体积的所述第一卵黄溶液中搅 拌均匀，获得第二卵黄溶液；其中，所述第一体积等于15-35倍的所述第二体 积；用盐酸和氢氧化钠溶液将所述第二卵黄溶液的pH值调至5.2-6.0，使所述 第二卵黄溶液产生浑浊沉淀；在4-8℃条件下，将所述第二卵黄溶液静置14-18 小时后，取上部清液，获得第一清液；将底部浑浊液进行第一离心处理后， 取上部清液，获得第二清液；将所述第一清液、所述第二清液进行混合，获得第三清液；用0.4μm的微孔滤膜对所述第三清液进行过滤。

优选的，用酒精沉淀法对所述抗独特型卵黄抗体粗制品进行纯化，具体 为：将第三体积的所述卵黄抗体粗制品与第四体积的冷酒精混合，获得第三 混合溶液；其中，所述第四体积为50％-60％的所述第三体积；充分搅拌使所 述第三混合溶液产生沉淀；对所述第三混合溶液进行第二离心处理后，取沉 淀物，获得第一沉淀物；向第一沉淀物中加入无菌蒸馏水，搅拌均匀，获得 第四混合溶液；其中，所述第四混合溶液的体积等于第三体积；向所述第四 混合溶液中加入第五体积的冷酒精，获得第五混合溶液；其中，所述第五体 积为所述第三体积的25％-30％；充分搅拌使所述第五混合溶液产生沉淀；对 所述第五混合溶液进行所述第二离心处理后，取沉淀物，获得第二沉淀物； 向所述第二沉淀物中加入无菌蒸馏水，搅拌均匀，获得第六混合溶液；其中， 所述第六混合溶液的体积等于第三体积；向所述第六混合溶液中加入第六体 积的冷酒精，获得第七混合溶液；其中，所述第六体积为所述第三体积的 25％-30％；充分搅拌使所述第七混合溶液产生沉淀；对所述第七混合溶液进 行所述第二离心处理后，取沉淀物，获得第三沉淀物；向所述第三沉淀物中 加入无菌蒸馏水，使所述第三沉淀物溶解，获得第八混合溶液；对所述第八 混合溶液进行超滤除菌处理后，获得所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品。

优选的，所述ACE抗体为兔抗ACE2抗体，所述采用所述第一混合溶液 制备抗ACE2抗体，具体为：用所述第一混合溶液对M只家兔进行皮下注射， 对每只所述家兔进行3-4次第二免疫，其中，每次所述第二免疫注射4μg所述 ACE2蛋白，相邻两次所述第二免疫间隔1-2周；判断所述家兔是否为高免兔； 若为高免兔，最后一次对所述家兔进行所述第二免疫后5-7天，对所述高免兔 进行放血，获得第一血浆；对所述第一血浆进行离心处理后，取血清，获得 所述兔抗ACE2抗体；其中，M≥2，且为正整数。

优选的，所述抗ACE2抗体为鼠抗ACE2抗体，所述采用所述第一混合 溶液制备抗ACE2抗体，具体为：用所述第一混合溶液对N只小鼠进行皮下 注射，对每只所述小鼠进行3-4次第三免疫，其中，每次所述第三免疫注射2μg 所述ACE2蛋白，相邻两次所述第二免疫间隔1-2周；判断所述小鼠是否为高 小鼠；若为高小鼠，最后一次对所述小鼠进行所述第二免疫后5-7天，对所述 高小鼠进行放血，获得第二血浆；对所述第二血浆进行离心处理后，取血清， 获得所述鼠抗ACE2抗体；其中，M≥2，且为正整数。

优选的，所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品的效价为10^-4；所述ACE2 抗独特型卵黄抗体精制品的浓度为为8mg/mL。

本发明实施例中的上述一个或多个技术方案，至少具有如下一种或多种 技术效果：

本发明实施例提供了一种ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗的制备方法，所 述制备方法包括：将ACE2蛋白溶液与弗氏不完全佐剂等体积混合均匀，获 得第一混合溶液；采用所述第一混合溶液制备抗ACE2抗体；用PBS缓冲液 将0.2mL所述抗ACE2抗体稀释成5mL后，与弗氏不完全佐剂等体积混合， 获得浓度为第一浓度的第二混合溶液；用所述第二混合溶液肌肉注射产蛋鸡， 对所述产蛋鸡按照第一预定条件进行第一预定次数的第一免疫；判断所述产 蛋鸡是否为高免鸡；若为高免鸡，最后一次进行所述第一免疫后第三天开始 采集高免鸡蛋，连续采集20天；其中，所述高免鸡蛋为所述高免鸡生产的鸡 蛋；对所述高免鸡蛋进行清洗、消毒、卵黄分离、卵黄组织破碎后，获得第 一卵黄溶液；用水稀释和酸化法去除所述第一卵黄溶液中的杂质蛋白，获得 ACE2抗独特型卵黄抗体粗制品；用酒精沉淀法对所述抗独特型卵黄抗体粗制 品进行纯化，获得ACE2抗独特型卵黄抗体精制品，将所述ACE2抗独特型 卵黄抗体精制品制成ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗。通过所述制备方法解决 了现有技术中新冠疫苗分子量小，进入体容易被分解失效，稳定性差，体内 存留时间段，效力弱，有毒副作用的技术问题，达到了诱导人体产生ACE2 抗体，和ACE2结合，阻断新冠病毒进入人体细胞，起到对COVID-19的预 防作用，且分子量大，进入体不易被分解，体内留存时间长，稳定性强、效 力强、无毒副作用的技术效果。

上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技 术手段，而可依照说明书的内容予以实施，并且为了让本发明的上述和其它 目的、特征和优点能够更明显易懂，以下特举本发明的

具体实施方式

。

附图说明

图1为本发明实施例中一种ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗的制备方法的 流程图；

图2为本发明实施例中一种ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗的鸡IgY标准 曲线。

具体实施方式

本发明实施例提供了一种ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗的制备方法，解 决了现有技术中新冠疫苗分子量小，进入体容易被分解失效，稳定性差，体 内存留时间段，效力弱，有毒副作用的技术问题，达到了诱导人体产生ACE2 抗体，和ACE2结合，阻断新冠病毒进入人体细胞，起到对COVID-19的预 防作用，且分子量大，进入体不易被分解，体内留存时间长，稳定性强、效 力强、无毒副作用的技术效果。

本发明实施例中的技术方案，总体结构如下：

一种ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗的制备方法，所述制备方法包括：将ACE2蛋白溶液与弗氏不完全佐剂等体积混合均匀，获得第一混合溶液；采用 所述第一混合溶液制备抗ACE2抗体；用PBS缓冲液将0.2mL所述抗ACE2 抗体稀释成5mL后，与弗氏不完全佐剂等体积混合，获得浓度为第一浓度的 第二混合溶液；用所述第二混合溶液肌肉注射产蛋鸡，对所述产蛋鸡按照第 一预定条件进行第一预定次数的第一免疫；判断所述产蛋鸡是否为高免鸡； 若为高免鸡，最后一次进行所述第一免疫后第三天开始采集高免鸡蛋，连续 采集20天；其中，所述高免鸡蛋为所述高免鸡生产的鸡蛋；对所述高免鸡蛋 进行清洗、消毒、卵黄分离、卵黄组织破碎后，获得第一卵黄溶液；用水稀 释和酸化法去除所述第一卵黄溶液中的杂质蛋白，获得ACE2抗独特型卵黄 抗体粗制品；用酒精沉淀法对所述抗独特型卵黄抗体粗制品进行纯化，获得 ACE2抗独特型卵黄抗体精制品；将所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品制成 ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗。通过上述制备方法解决了现有技术中新冠疫苗 分子量小，进入体容易被分解失效，稳定性差，体内存留时间段，效力弱， 有毒副作用的技术问题，达到了诱导人体产生ACE2抗体，和ACE2结合， 阻断新冠病毒进入人体细胞，起到对COVID-19的预防作用，且具有分子量 大，进入体内不易被分解，体内留存时间长，稳定性强、效力强、无毒副作 用的技术效果。

申请概述

新冠病毒之所以能感染人体是由两方面因素构成，一方面是病毒的致病 抗原，所述病毒的致病抗原由病毒刺突蛋白(spike protein)构成，所述病毒 刺突蛋白有两个亚基S1和S2，其中S1又含有受体结合域(receptor binding domain，RBD)，所述结合域负责识别人体细胞上的膜受体(血管紧张素转 化酶2，ACE2)并与之结合；S2含有膜融合所需的基本元件。另一方面是人 体细胞的膜受体(血管紧张素转化酶2，ACE2)，它是病毒进入人体细胞的 门户。RBD和ACE2结合后，产生膜融合，使病毒进入到人体细胞内，在细 胞内扩增繁殖，使人感染新冠病毒并发病。

本发明的目的是研制ACE2抗独特型卵黄抗体，从中筛选出β型抗独特 型卵黄抗体，制成抗独特型抗体疫苗，接种免疫人体，使人体产生ACE2抗 体，其与ACE2结合，封闭ACE2，阻断病毒进入人体细胞，使人体对病毒的 感染产生免疫保护能力。β型抗独特型抗体能模拟抗原的构型，是抗原的内影 像，可当作抗原使用，也可当抗原的疫苗使用。

β型抗独特型抗体疫苗，不含抗原的有毒成分，是一种无毒副作用、无污 染、安全有效的疫苗。抗体的分子量大，进入人体后不易被分解失效，稳定 性和效力较强。抗独特型卵黄抗体疫苗与哺乳动物抗独特型抗体疫苗(含单 克隆抗体)相比具有以下优势：①资源丰富、产量高成本低，可工业化生产； ②卵黄抗体耐酸耐碱耐高温，方便保存和运输；③使用途径更多样，注射、 口服、浸泡(用于鱼)均有效。

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发 明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述， 显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于 本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获 得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例一

本发明实施例提供了一种ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗的制备方法，请 参考附图1，所述制备方法包括步骤S100-S1000，具体为：

步骤S100：将ACE2蛋白溶液与弗氏不完全佐剂等体积混合均匀，获得 第一混合溶液；

步骤S200：采用所述第一混合溶液制备抗ACE2抗体；

具体而言，所述ACE2蛋白为人体ACE2蛋白，购自北京义翘神州科技 股份有限公司。采用弗氏不完全佐剂与所述ACE2蛋白溶液等体积混合，充 分搅拌后获得所述第一混合溶液。采用所述第一混合溶液制备抗ACE2抗体， 所述抗ACE2抗体有两种，分别为兔抗ACE2抗体和鼠抗ACE2抗体。其中 用小鼠制备所得的所述抗ACE2抗体为鼠抗ACE2抗体，用家兔制备的所述 抗ACE2抗体为兔抗ACE2抗体。获得所述所述抗ACE抗体后，应将其分装 后在-20℃下恒温保存。

当所述抗ACE抗体为兔抗ACE2抗体时，步骤S200包括步骤S210-S240：

步骤S210：用所述第一混合溶液对M只家兔进行皮下注射，对每只所述 家兔进行3-4次第二免疫，其中，每次所述第二免疫注射4μg所述ACE2蛋白， 相邻两次所述第二免疫间隔1-2周；

步骤S220：判断所述家兔是否为高免兔；

步骤S230：若为高免兔，最后一次对所述家兔进行所述第二免疫后5-7 天，对所述高免兔进行放血，获得第一血浆；

步骤S240：对所述第一血浆进行离心处理后，取血清，获得所述兔抗ACE2 抗体；

其中，M≥2，且为正整数。

具体而言，采用所述第一混合溶液，通过皮下注射的方式对M只所述家 兔进行所述第二免疫，每次所述第二免疫注射向每只所述家兔体内4μg所述 ACE2蛋白，每只家兔共进行3-4次所述第二免疫，相邻两次免疫之间间隔1-2 周。优选的，对每只所述家兔进行3次所述第二免疫。

最后一次对M只所述家兔进行所述第二免疫后，判断所述家兔是否为高 免兔，若不是高免兔，则舍弃所述家兔。若为高免兔，最后一次对所述家兔 进行所述第二免疫后的5-7天，对所述高免兔进行放血，取所述高免兔的血浆， 获得所述第一血浆。然后对所述第一血浆进行离心处理，收集血清，即获得 所述兔抗ACE2抗体。

为了判断所述家兔是否为高免兔，所述步骤S220包括步骤S221-步骤 S224。

步骤S221：最后一次对所述家兔进行所述第二免疫后当天，取所述家兔 的血液，获得第三血浆；

步骤S222：对所述第三血浆进行离心处理，获得第一血清；

步骤S223：用ELISA检测法对所述第一血清中的所述兔抗ACE抗体的 效价进行检测，获得第一效价值；

步骤S224：当所述第一效价值大于10^-4时，所述家兔为高免兔。

具体而言，最后一次对M只所述家兔进行所述第二免疫后当天，抽取所 述家兔部分血液，获得第三血浆。然后，对所述第三血浆尽心离心处理后， 取其血清获得所述第一血清，其中，所述第一血清中含有所述兔抗ACE抗体。 最后，用ELISA检测法对所述抗ACE抗体的效价进行检测，获得第一效价值。 当所述第一效价值大于10^-4时，所述家兔是高免兔；否则，所述家兔不是高 免兔。

当所述抗ACE抗体为鼠抗ACE2抗体时，步骤S200包括步骤 S210’-S240’。

步骤S210’：用所述第一混合溶液对N只小鼠进行皮下注射，对每只所述 小鼠进行3-4次第三免疫，其中，每次所述第三免疫注射2μg所述ACE2蛋白， 相邻两次所述第三免疫间隔1-2周；

步骤S220’：判断所述小鼠是否为高小鼠；

步骤S230’：若为高小鼠，最后一次对所述小鼠进行所述第三免疫后5-7 天，对所述高小鼠进行放血，获得第二血浆；

步骤S240’：对所述第二血浆进行离心处理后，取血清，获得所述鼠抗 ACE2抗体；

其中，M≥2，且为正整数。

具体而言，采用所述第一混合溶液，通过腹腔注射的方式对N只所述小 鼠进行所述第三免疫，每次所述第三免疫注射向每只所述小鼠体内2μg所述ACE2蛋白，每只小鼠共进行3-4次所述第二免疫，相邻两次免疫之间间隔1-2 周。优选的，对每只所述家兔进行3次所述第二免疫。

最后一次对N只所述小鼠进行完所述第三免疫后，判断所述小鼠是否为 高免鼠，若不是高免鼠，则舍弃所述小鼠。若为高免鼠，则最后一次对所述 小鼠进行所述第二免疫后的5-7天，对所述高免鼠进行放血，取所述高免鼠的 血浆，即所述第二血浆。然后对所述第二血浆进行离心处理，收集血清，即 获得所述鼠抗ACE2抗体。

其中，判断所述小鼠是否为高免鼠的步骤包括步骤S221’-S224’，即步骤 S220’包括步骤S221’-S224’。

步骤S221’：最后一次对所述小鼠进行所述第三免疫后当天，取所述小鼠 的血液，获得第四血浆；

步骤S222’：对所述第四血浆进行离心处理，获得第二血清；

步骤S223’：用ELISA检测法对所述第二血清中所述鼠抗ACE抗体的效 价进行检测，获得第二效价值；

步骤S224’：当所述第二效价值大于10^-4时，所述小鼠为高免鼠。

具体而言，最后一次对N只所述小鼠进行所述第三免疫后当天，抽取所 述小鼠部分血液，获得第四血浆。然后，对所述第四血浆尽心离心处理后， 取其血清获得所述第二血清，其中，所述第二血清中含有所述鼠抗ACE抗体。 最后，用ELISA检测法对所述鼠抗ACE抗体的效价进行检测，获得第二效价 值。当所述第二效价值大于10^-4时，所述小鼠是高免鼠；否则，所述家兔不 是高免鼠。

步骤300：用PBS缓冲液将0.2mL所述抗ACE2抗体稀释成5mL后，与 弗氏不完全佐剂等体积混合，获得浓度为第一浓度的第二混合溶液；

进一步的，所述第一浓度为每毫升所述第二混合溶液中含100μg所述抗ACE2抗体。

具体而言，用PBS缓冲液((phosphate buffer saline，磷酸缓冲盐溶液) 将0.2mL所述抗ACE2抗体稀释为5mL后，与5mL弗氏不完全佐剂进行混 合，获得所述第二混合溶液。所述第二混合溶液中所述抗ACE2抗体的浓度 为所述第一浓度，所述第一浓度为100μg/mL，即每毫升所述第一混合溶液中 含100μg的所述抗ACE2抗体。

步骤400：用所述第二混合溶液肌肉注射产蛋鸡，对所述产蛋鸡按照第一 预定条件进行第一预定次数的第一免疫；

进一步的，所述第一预定条件为每只所述产蛋鸡每次所述第一免疫注射 0.5mL所述第二混合溶液，每隔7-10天进行一次所述第一免疫；所述第一预 定次数为3-4次。

具体而言，每次所述第一免疫向每只所述产蛋鸡体内肌肉注射0.5mL所 述第二溶液，即每次向所述产蛋鸡体内注射50μg的所述抗ACE2抗体。对每 只所述产蛋鸡进行3-4次所述第一免疫，相邻两次所述第一免疫之间间隔7-10 天。

步骤500：判断所述产蛋鸡是否为高免鸡；

为了判断所述产蛋鸡是否为高免鸡，所述步骤S500包括步骤S510-S530。

步骤S510：最后一次进行所述第一免疫后当天，采集所述产蛋鸡生产的 鸡蛋，判断所述鸡蛋的卵黄是否含有ACE2抗独特型卵黄抗体；

步骤S520：如果含有所述ACE2抗独特型卵黄抗体，判断所述ACE2抗 独特型卵黄抗体的效价是否大于等于10^-4；

步骤S530：如果所述ACE2抗独特型卵黄抗体的效价大于等于10^-4，则 所述产蛋鸡为高免鸡。

具体而言，在最后一次对所述产蛋鸡进行所述第一免疫后当天，采集每 只所述产蛋鸡生产的鸡蛋，并进行标号。然后用ELISA(enzyme linked immunosorbent assay，酶联免疫吸附试验)法检测所述鸡蛋的卵黄内是否有ACE2抗独特型卵黄抗体以及所述ACE2抗独特型卵黄抗体的效价，如果含有 所述ACE2抗独特型卵黄抗体，则判断所述ACE2抗独特型卵黄抗体的效价 是否大于等于10^-4，如果大于10^-4，则判定生产所述鸡蛋的所述产蛋鸡为高免 鸡；否则，所述产蛋鸡不是高免鸡，予以舍弃。达到从所述产蛋鸡中筛选出 高免鸡的技术效果。

步骤600：若为高免鸡，最后一次进行所述第一免疫后第三天开始采集高 免鸡蛋，连续采集20天；其中，所述高免鸡蛋为所述高免鸡生产的鸡蛋；

进一步的，所述采集高免鸡蛋还包括：若需继续采集所述高免鸡蛋，则 对所述高免鸡追加一次所述第一免疫；连续采集所述高免鸡蛋20天。

具体而言，从最后一次进行所述第一免疫后的第三天开始，采集所述高 免鸡生产的鸡蛋，连续采集20天，采集到的鸡蛋为所述高免鸡蛋。20天后， 如果还需要所述高免鸡蛋，需要对所述高免鸡追加一次所述第一免疫，然后 继续对所述高免鸡采集20天所述高免鸡蛋。也就是说，每隔20天对所述高 免鸡追加一次所述第一免疫，直至所述高免鸡被淘汰。

步骤700：对所述高免鸡蛋进行清洗、消毒、卵黄分离、卵黄组织破碎后， 获得第一卵黄溶液；

具体而言，首先用自来水对所述高免鸡蛋进行清洗，然后放入70％的酒 精中浸泡10min进行消毒杀菌，接着将所述高免鸡蛋从酒精中捞出传入清洁 间晾干，自此完成所述高免鸡蛋的消毒杀菌工作。

将消毒杀菌后的所述高免蛋进行卵黄分离，然后用破壁机或高压均质机 (60Pa)对将分离出的蛋黄进行破碎，获得所述第一卵黄溶液。如果所述第 一卵黄溶液不马上用于下一步骤，可在-20℃下恒温保存6个月。

步骤S800：用水稀释和酸化法去除所述第一卵黄溶液中的杂质蛋白，获 得ACE2抗独特型卵黄抗体粗制品；

为了用水稀释和酸化法去除所述第一卵黄溶液中的杂质蛋白，步骤S800 包括步骤S810-S860。

步骤S810：将第一体积的无菌蒸馏水加入到第二体积的所述第一卵黄溶 液中搅拌均匀，获得第二卵黄溶液；其中，所述第一体积等于15-35倍的所述 第二体积；

步骤S820：用盐酸和氢氧化钠溶液将所述第二卵黄溶液的pH值调至 5.2-6.0，使所述第二卵黄溶液产生浑浊沉淀；

步骤S830：在4-8℃条件下，将所述第二卵黄溶液静置14-18小时后，取 上部清液，获得第一清液；

步骤S840：将底部浑浊液进行第一离心处理后，取上部清液，获得第二 清液；

步骤S850：将所述第一清液、所述第二清液进行混合，获得第三清液；

步骤S860：用0.4μm的微孔滤膜对所述第三清液进行过滤。

具体而言，在所述第一卵黄溶液中加入无菌蒸馏水，形成所述第二卵黄 溶液，其中，所述无菌蒸馏水的体积为所述第一卵黄液体积的15-35倍。用盐 酸和氢氧化钠溶液对所述第二卵黄溶液的pH值进行调节，使所述第二卵黄溶 液产生浑浊沉淀，此时所述第二卵黄溶液的pH值为5.2-6.0，其中沉淀物即为 杂质蛋白。然后，将所述第二卵黄溶液在4-8℃条件下静置14-18小时，使杂 质蛋白继续沉淀。取所述第二卵黄溶液内的上部清液，获得所述第一清液。 接着对所述第二卵黄液底部的浑浊液体进行第一离心处理，其中，所述第一离心处理的转速为3500-4000r/min，离心半径为8cm，离心时间为20-40分钟。 本申请实施例中所用的蒸馏水均为无菌蒸馏水。

对所述底部浑浊液进行所述第一离心处理后，取上部清液，获得第二清 液。将所述第一清液、所述第二清液混合后，获得所述第三清液。然后采用 0.4μm的微孔滤波对所述第三清液进行微孔过滤，取过滤后的滤液，所述滤液 即为ACE抗独特型卵黄抗体粗制品。所述微孔过滤的目的是进一步去除所述 第三清液中的脂蛋白和脂肪。

步骤S900：用酒精沉淀法对所述ACE抗独特型卵黄抗体粗制品进行纯 化，获得ACE2抗独特型卵黄抗体精制品。

为了用酒精沉淀法对所述抗独特型卵黄抗体粗制品进行纯化，步骤900 包括S910-S9130

步骤S910：将第三体积的所述卵黄抗体粗制品与第四体积的冷酒精混合， 获得第三混合溶液；其中，所述第四体积为50％-60％的所述第三体积；

步骤S920：充分搅拌使所述第三混合溶液产生沉淀；

步骤S930：对所述第三混合溶液进行第二离心处理后，取沉淀物，获得 第一沉淀物；

步骤S940：向第一沉淀物中加入无菌蒸馏水，搅拌均匀，获得第四混合 溶液；其中，所述第四混合溶液的体积等于第三体积；

步骤S950：向所述第四混合溶液中加入第五体积的冷酒精，获得第五混 合溶液；其中，所述第五体积为所述第三体积的25％-30％；

步骤S960：充分搅拌使所述第五混合溶液产生沉淀；

步骤S970：对所述第五混合溶液进行所述第二离心处理后，取沉淀物， 获得第二沉淀物；

步骤S980：向所述第二沉淀物中加入无菌蒸馏水，搅拌均匀，获得第六 混合溶液；其中，所述第六混合溶液的体积等于第三体积；

步骤S990：向所述第六混合溶液中加入第六体积的冷酒精，获得第七混 合溶液；其中，所述第六体积为所述第三体积的25％-30％；

步骤S9100：充分搅拌使所述第七混合溶液产生沉淀；

步骤S9110：对所述第七混合溶液进行所述第二离心处理后，取沉淀物， 获得第三沉淀物；

步骤S9120：向所述第三沉淀物中加入无菌蒸馏水，使所述第三沉淀物溶 解，获得第八混合溶液；

步骤S9130：对所述第八混合溶液进行超滤除菌处理后，获得所述ACE2 抗独特型卵黄抗体精制品。

具体而言，对所述抗独特型卵黄抗体粗制品进行纯化的过程包括三次沉 淀和一次超滤除菌处理，第一次沉淀为步骤S910-步骤S930，第二次沉淀为 S940-S970，第三次沉淀为步骤S980-S9110。其中，第二离心处理的转速为 4000r/min，离心半径为8cm，离心时间为20-40min。

一次超滤除菌处理为步骤S9120-S9130，向所述第三沉淀物中加入无菌蒸 馏水，使所述第三沉淀物溶解，获得第八混合溶液；最后对所述第八混合溶 液进行超滤除菌处理后，获得所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品。所述所 述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品可作制备新冠病毒疫苗使用。

经过试验检测知，所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品的效价为10^-4，浓 度为8mg/mL。

S1000：将所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品制成ACE2抗独特型卵黄 抗体疫苗。

具体而言，最后，将所述所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品制备成疫 苗，供用户直接接种。

通过本实施例中制得的ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗能诱导人体产生 ACE2抗体，和ACE2结合，阻断新冠病毒进入人体细胞，起到对COVID-19 的预防作用，并且该疫苗具有分子量大，进入体不易被分解，体内留存时间 长，稳定性强、效力强、无毒副作用的技术效果。

实施例二

为了检测所述抗ACE抗体的效价和特异性，本实施例对所述抗ACE抗 体进行了效价检测和特异性检测。

1、效价检测

本实施例采用ELISA法对所述兔抗ACE2抗体和小鼠抗ACE2抗体进行 效价检测。

(1)采用ELISA法对所述兔抗ACE2抗体进行效价检测，包括步骤 T110-T190，具体为：

步骤T110：用包被缓冲液将所述ACE2蛋白稀释为10μg/mL，将稀释后 的所述ACE2蛋白溶液加入8个反应孔内，常温下静置1小时；

步骤T120：弃去8个所述反应孔内的所述蛋白溶液，用PBS清洗三次8 个所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T130：将所述兔抗ACE2抗体分别稀释10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、 10⁷、10⁸倍，然后分别添加到8个所述反应孔内，即每个所述反应孔内添加一 种浓度的所述兔抗ACE2抗体，每个所述反应空内添加100μL；

步骤T140：常温下静置30分钟后，弃去8个所述反应孔内的稀释后的所 述兔抗ACE2抗体，并用PBS清洗三次8个所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T150：采用抗体稀释液按照1:1000对HRP标记的羊抗兔IgG抗体 进行稀释，获得所述羊抗兔IgG抗体溶液；

步骤T160：向8个所述反应孔内添加所述羊抗兔IgG抗体溶液，每个所 述反应孔内添加100μL；

步骤T170：常温静置30分钟后，弃去8个所述反应孔内的溶液，并用 PBS清洗三次8个所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T180：向8个所述反应孔内添加反应底物OPD，常温避光显色10-15 分钟后，向8个所述反应孔内添加终止液；

步骤T190：测定各个所述反应孔内的A_492nm值，如果所述反应孔的OA_492nm值大于等于对照孔2.1倍时，则判定所述反应孔为阳性反应。

(2)采用ELISA法对上所述鼠抗ACE2抗体进行效价检测，具体为：

将步骤T130中的所述兔抗ACE2抗体换成所述鼠抗ACE2抗体，将步骤 T150中的羊抗兔IgG抗体换成羊抗鼠IgG抗体。按照步骤T110-T190，按照 与所述兔抗ACE2抗体进效价检测相同的方法，对所述鼠抗ACE2抗体进行 效价检测。

对所述兔抗ACE2抗体和鼠抗ACE2抗体进行效价检测的结果如表1所 示：

表1兔抗ACE2抗体和小鼠抗ACE2抗体效价检测结果

由表1知，本实施例中的所述兔抗ACE2抗体的效价为10^-5，所述鼠抗 ACE2抗体的效价为10^-5，具有较高效价，可用于ACE独特型卵黄抗体的制 备。

2、特异性检测

本实施例中采用ELISA检测法分别对所述兔抗ACE2抗体和所述鼠抗 ACE2抗体的特异性进行检测。

(1)对所述兔抗ACE2抗体的特异性进行检测，具体为：

步骤T210：用包被缓冲液分别将所述将S1+S2蛋白溶液、RBD蛋白溶液、 ACE2蛋白溶液稀释为10μg/mL；

步骤T220：将稀释后的所述将S1+S2蛋白溶液、RBD蛋白溶液、ACE2 蛋白溶液分别加入到3个反应孔内，每个所述反应孔100μL，即每种蛋白溶 液包被一个所述反应孔；

步骤T330：常温下静置1小时后，弃去所有所述反应孔内的液体，用PBS 清洗三次所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T340：向每个所述反应孔内添加稀释1000倍后的所述兔抗ACE2 抗体，每个所述反应孔100μL；其中，使用抗体稀释液对所述兔抗ACE2抗体 进行稀释；

步骤T350：常温静置30分钟后，弃去所有所述反应孔内的液体，并用PBS清洗三次所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T360：将HRP标记的羊抗兔IgG抗体稀释1000倍后，加入到各个 所述反应孔内，每个所述反应孔100μL；

步骤T370：常温下静置30分钟后，弃去所有所述反应孔内的液体，并用 PBS清洗三次所有所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T380：向各个所述反应孔内添加反应底物OPD，常温避光显色10-15 分钟后，向各个所述反应孔内添加终止液；

步骤T390：测定各个所述反应孔内的A_492nm值，如果所述反应孔的OA_492nm值大于等于对照孔2.1倍时，则判定所述反应孔为阳性反应。

(2)对所述鼠抗ACE2抗体的特异性进行检测，具体为：

将步骤T340中的所述兔抗ACE2抗体更换为所述鼠抗ACE2抗体，将步 骤T360中的羊抗兔IgG抗体更换为羊抗鼠IgG抗体。按照步骤T310-T390， 按照与所述兔抗ACE2抗体进特异性检测相同的方法，对所述鼠抗ACE2抗 体进行特异性检测。

对所述兔抗ACE2抗体和所述鼠抗ACE2抗体进行特异性检测的结果如 表2所示：

表2兔抗ACE2抗体和小鼠抗ACE2抗体特异性检测结果

由表2知，本实施例中所述兔抗ACE2抗体只和ACE2蛋白发生免疫反 应，所述鼠抗ACE2抗体只和ACE2蛋白发生免疫反应，所述兔抗ACE2抗 体和所述鼠抗ACE2抗体都不和RBD蛋白、S1+S2蛋白发生免疫反应，说明 所述兔抗ACE2抗体和所述鼠抗ACE2抗体都是ACE2特异性抗体。

实施例三

为了检测所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品的效价、特异性和浓度， 本实施例对所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品进行了效价检测、特异性和 浓度检测。

由于家兔体内的血量比小鼠多，所以本实施例中的所述ACE2抗独特型 卵黄抗体精制品是采用所述兔抗ACE2抗体制得的，即步骤S200的所述抗 ACE2抗体为兔抗ACE2抗体。然而，步骤200中制得的所述鼠抗ACE2抗体 仅作检测用。

1、效价检测

本实施例采用ELISA检测法检测所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品的 效价，具体检测步骤为：

步骤T410：用包被缓冲液将所述抗ACE2抗体稀释1000倍后，加入到8 个反应孔内，每个所述反应孔内添加100μL；

步骤T420：常温下静置1小时后，弃去8个所述反应孔内的液体，用PBS 清洗三次8个所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T430：用PBS将所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品分别稀释10¹、 10²、10³、10⁴、10^5、10⁶、10⁷、10⁸倍，然后分别添加到8个所述反应孔内， 即每个所述反应孔内添加一种浓度的所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品， 每个所述反应孔内添加100μL；

步骤T440：常温下静置30分钟后，弃去8个所述反应孔内的溶液，并用 PBS清洗三次8个所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T450：采用抗体稀释液按照1:1000对HRP标记的羊抗鸡IgY抗体 进行稀释后，获得羊抗鸡IgY抗体溶液；

步骤T460：向8个所述反应孔内添加所述羊抗鸡IgY抗体溶液，每孔 100μL；

步骤T470：常温静置30分钟后，弃去8个所述反应孔内的溶液，并用 PBS清洗三次8个所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T480：向8个所述反应孔内添加反应底物OPD，常温避光显色10-15 分钟后，向8个所述反应孔内添加终止液；

步骤T490：测定各个所述反应孔内的A₄₉₂nm值，如果所述反应孔的OA₄₉₂ nm值大于等于对照孔2.1倍时，则判定所述反应孔为阳性反应。

对所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品进行效价检测的结果如表3所示：

表3 ACE2抗独特型卵黄抗体精制品效价检测结果

由表3知，本实施例中的所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品的效价为 10^-4，具有较高效价。

2、特异性检测

本实施例中采用ELISA检测法对所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品 的特异性进行检测，具体为：

步骤T510：用包被缓冲液分别将所述鼠抗S1+S2抗体、鼠抗RBD抗体、 鼠抗ACE2抗体稀释1000倍；

步骤T520：将稀释后的所述鼠抗ACE2抗体、所述鼠抗RBD抗体、所 述鼠抗ACE2抗体分别加入到反应孔内，每个所述反应孔100μL，即每种抗 体溶液包被一个所述反应孔；

步骤T530：常温下静置1小时后，弃去所有所述反应孔内的液体，用PBS 清洗三次所有所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T540：向每个所述反应孔内添加稀释1000倍后的所述ACE2抗独特 型卵黄抗体精制品，每个所述反应孔100μL；其中，使用抗体稀释液对所述 ACE2抗独特型卵黄抗体精制品进行稀释；

步骤T550：采用抗体稀释液按照1:1000对HRP标记的羊抗鸡IgY抗体 进行稀释后，获得羊抗鸡IgY抗体溶液；

步骤T560：向所有所述反应孔内添加所述羊抗鸡IgY抗体溶液，每孔 100μL；

步骤T570：常温静置30分钟后，弃去所有所述反应孔内的溶液，并用 PBS清洗三次所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T580：向所有所述反应孔内添加反应底物OPD，常温避光显色10-15 分钟后，向所述反应孔内添加终止液；

步骤T590：测定各个所述反应孔内的A₄₉₂nm值，如果所述反应孔的 OA₄₉₂nm值大于等于对照孔2.1倍时，则判定所述反应孔为阳性反应。

对所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品进行特异性检测的结果如表3所 示：

表4 ACE2抗独特型卵黄抗体特异性检测结果

由表4知，本实施例中所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品只和鼠抗 ACE2抗体发生免疫反应，不和所述鼠抗RBD抗体、所述鼠抗ACE2发生免 疫反应，说明所述ACE2抗独特型卵黄抗体是抗ACE2特异型抗体。

3、浓度检测

本实施例采用ELISA检测法对所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品的浓 度进行检测，具体为：

步骤T610：用包被缓冲液分别将IgY标准品和所述ACE2抗独特型卵黄 抗体精制品分别稀释2¹、2²、2³、2⁴、2⁵、2⁶倍；

步骤T620：将稀释后的所述IgY标准品和所述ACE2抗独特型卵黄抗体 精制品分别加入12个反应孔，每孔100μL，每个所述反应孔内一种浓度的液 体；

步骤T630：在常温下静置1h后，弃去所有所述反应孔内的溶液，用PBS 清洗三次，每次清洗3分钟；

步骤T640：将加HRP标记的羊抗鸡IgY抗体稀释1000倍后，添加到各 个所述反应孔内，每孔100μL；

步骤T650：常温静置30分钟后，弃去所有所述反应孔内的溶液，并用PBS清洗三次所有所述反应孔，每次清洗3分钟；

步骤T660：向所有所述反应孔内添加反应底物OPD，常温避光显色10-15 分钟后，向所有所述反应孔内添加终止液；

步骤T670：测定各个所述反应孔内的A₄₉₂nm值，如果所述反应孔的 OA₄₉₂nm值大于等于对照孔2.1倍时，则判定所述反应孔为阳性反应。

对所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品进行浓度检测的结果如表5所示：

表5 ACE2抗独特型卵黄抗体浓度

根据测定的标准品A_492nm值，用CurveExpert软件绘制标准曲线，所述标 准曲线如附图2所示。

根据所述标准曲线，计算本发明制备的新冠病毒抗独特型卵黄抗体精制 品的浓度，所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品浓度为8mg/mL。

实施例四

本实施例还提供了所述ACE2抗独特型卵黄抗体精制品诱导家兔产生 ACE2抗体(Ab3)的试验，具体为：

取家兔10只，分别分成两组，实验组家兔5只，对照组家兔5只。实验 组每只家兔皮下注射ACE2抗独特型卵黄抗体和弗氏不完全佐剂的混合液 0.5mL(含所述ACE2抗独特型卵黄抗体30～40μg)。隔一周免疫一次，共免 疫3～4次。对照组用PBS取代所述ACE2抗独特型卵黄抗体，免疫方法和次 数同实验组。在第3次免疫后第5～7天放血取血清。用ELISA检测实验组与 对照组ACE2抗体的免疫反应强度，并进行统计学处理，了解实验与对照组 抗体的免疫反应强度(A值)是否存在显著性差异。检测结果如表6所示：

表6 ACE2抗独特型卵黄抗体诱导产蛋鸡和家兔产生ACE2抗体(Ab3)

由表6知，所述ACE2抗独特型卵黄抗体能诱导家兔产生ACE2抗体 (Ab3)，家兔血清中ACE2抗体(Ab3)的ELISA反应A值为1.894±0.366， 对照组为1.194±0.155，两者差别非常显著。说明所述ACE2抗独特型卵黄抗 体是ACE2β型抗独特型卵黄抗体，可作ACE2疫苗使用。

本发明实施例中的上述一个或多个技术方案，至少具有如下一种或多种 技术效果：

本发明实施例提供了一种ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗的制备方法，所 述制备方法包括：将ACE2蛋白溶液与弗氏不完全佐剂等体积混合均匀，获 得第一混合溶液；采用所述第一混合溶液制备抗ACE2抗体；用PBS缓冲液 将0.2mL所述抗ACE2抗体稀释成5mL后，与弗氏不完全佐剂等体积混合， 获得浓度为第一浓度的第二混合溶液；用所述第二混合溶液肌肉注射产蛋鸡， 对所述产蛋鸡按照第一预定条件进行第一预定次数的第一免疫；判断所述产 蛋鸡是否为高免鸡；若为高免鸡，最后一次进行所述第一免疫后第三天开始 采集高免鸡蛋，连续采集20天；其中，所述高免鸡蛋为所述高免鸡生产的鸡 蛋；对所述高免鸡蛋进行清洗、消毒、卵黄分离、卵黄组织破碎后，获得第 一卵黄溶液；用水稀释和酸化法去除所述第一卵黄溶液中的杂质蛋白，获得 ACE2抗独特型卵黄抗体粗制品；用酒精沉淀法对所述抗独特型卵黄抗体粗制 品进行纯化，获得ACE2抗独特型卵黄抗体精制品；将所述ACE2抗独特型 卵黄抗体精制品制成ACE2抗独特型卵黄抗体疫苗。通过上述制备方法解决 了现有技术中新冠疫苗分子量小，进入体容易被分解失效，稳定性差，体内 存留时间段，效力弱，有毒副作用的技术问题，达到了诱导人体产生ACE2 抗体，和ACE2结合，阻断新冠病毒进入人体细胞，起到对COVID-19的预 防作用，且分子量大，进入体不易被分解，体内留存时间长，稳定性强、效 力强、无毒副作用的技术效果。

尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了 基本创造性概念，则可对这些实施例做出另外的变更和修改。所以，所附权 利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。

显然，本领域的技术人员可以对本发明实施例进行各种改动和变型而不 脱离本发明实施例的精神和范围。这样，倘若本发明实施例的这些修改和变 型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些 改动和变型在内。