本发明涉及生物制药技术领域,尤其是一种洛匹那韦中间体酶催化合成方法,包括以下步骤:1)化合物Ⅳ与三氟乙酸在溶剂中反应,制得化合物Ⅲ;然后向反应瓶中加入碳酸氢钠、水、溶剂和化合物Ⅲ,开启搅拌,降温至-5~5℃左右,向反应瓶内加入溴化钾和Tempo,滴加次10%氯酸钠溶液,TLC监控反应体系;反应完全后,加入硫代硫酸钠溶液,搅拌,水层用溶剂萃取,合并有机层,浓缩至干,重结晶,析晶后抽滤,干燥,得到化合物II;2)以化合物II为底物,在酮羰基还原酶、辅酶、酶循环氢供体、辅酶循环酶、助溶剂和缓冲液的存在下,进行生物催化反应生成洛匹那韦中间体,即化合物I。本发明的合成方法反应条件温和,对环境友好,实现了手性中间体的绿色合成。