本发明属于生物技术领域,具体涉及一种猪BRS3基因CDs序列全长分段克隆的方法,本发明将BRS3基因进行分段,通过分段克隆和基因拼接法获得猪BRS3基因序列,弥补了BRS3基因在猪上研究的空白。本发明又通过以克隆的各片段混合DNA为模板,成功扩增获得猪BRS3全长CDs序列片段,并构建到克隆载体上,为BRS3基因的过表达和干扰序列筛选等以BRS3基因CDs序列为基础的研究与应用提供一种有效的方法。

本发明提供了一种SLC26A4基因突变体及其应用。提供了一种基因突变,与野生型SLC26A4基因相比,具有c.128delG突变和/或c.1001+5G>C突变。该基因突变是可检测的,通过检测该基因突变在生物样品中是否存在,可以有效地检测生物样品是否患非综合征型耳聋。通过检测该基因突变,扩展和完善了遗传性听力损失疾病的检测和研究,为该疾病的诊断或治疗提供了新的检测位点以及新的检测方法和途径。

本发明提供了一种靶向casc5基因的sgRNA及其应用,所述靶向casc5基因的sgRNA包括SEQ ID No.1所示的核酸序列。本发明还提供了一种casc5基因编辑系统、一种重组细胞及其构建方法和一种小头症动物模型的构建方法,通过基因编辑及筛选,得到的敲除了casc5基因的突变纯合子斑马鱼具有典型的头部较小、发育迟缓的表型,与人类的casc5基因缺失导致的小头症疾病的症状吻合,并且在mRNA水平上检测不到casc5基因的表达,可以应用于小头症药物筛选及相关的研究中,应用价值极其广泛。

本发明涉及非同源双链寡聚核苷酸片段在基因敲除系统中的应用。基于现有基因敲除系统的靶基因敲除效率不高,且脱靶位点难以准确定位,本发明首次将非同源双链寡聚核苷酸片段与基因敲除系统相结合用于基因敲除,非同源双链寡聚核苷酸片段能够激发细胞的非同源末端连接修复,引入更多插入或缺失,同时非同源双链寡聚核苷酸片段可插入切割断点处,可作为标记物监测脱靶位点,有助于增强靶基因的敲除效率的同时准确监测脱靶效应。

本发明涉及一种lncRNA分子及其用途。本发明在耐紫杉醇的卵巢癌细胞中鉴定出lncRNA(TCONS-00013523)新的转录本全长序列,并命名为PRALR-α,进一步构建敲除和过表达PRALR-α的细胞系,发现敲除和过表达PRALR-α分别能增加和降低卵巢癌细胞对紫杉醇(PTX)的敏感性,说明PRALR-α和卵巢癌细胞紫杉醇耐药密切相关。通过该研究可为卵巢癌紫杉醇化疗的治疗提供新的思路和方法,合成针对PRALR-α特异性靶点的分子靶向药物；还可利用PRALR-α过表达载体或细胞系筛选治疗紫杉醇耐药卵巢癌的候选药物；同时有助于深入研究卵巢癌耐药性产生的分子机制。

本发明涉及生物医药领域,具体而言,涉及一种细胞因子联合嵌合抗原受体的融合蛋白及其应用。该融合蛋白包括依次串联的嵌合抗原受体、2A肽、IL-7、2A肽、CCL3；所述嵌合抗原受体包含scFv区,铰链区,跨膜域和胞内信号传导区。本发明在CAR载体构建时加入了两个细胞因子IL-7和CCL-3,两个细胞因子可以增强CAR T细胞的抗凋亡作用和降低其免疫抑制效应,进而帮助CAR T细胞增强抗肿瘤效应。

本发明涉及生物医药领域,提供了一种抗LAP单克隆抗体或其抗原结合片段,包括重链可变区HCDR1、HCDR2、HCDR3和轻链可变区LCDR1、LCDR2、LCDR3。本发明提供的抗LAP单克隆抗体从源头抑制TGFβ1的释放,删除抑制性T细胞,提高肿瘤免疫响应,可与多种免疫治疗药物联合应用,可扩展到更多类型的癌症、自身免疫性疾病以及纤维化疾病,临床需求巨大,市场潜力巨大；癌症选自包括非小细胞肺癌、结直肠癌、胰腺癌、肾癌、胃癌、肝癌、卵巢癌、乳腺癌、黑色素瘤或神经胶质瘤；纤维化疾病包括肺纤维化或肝纤维化；自身免疫疾病选自系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、多发性硬化症、皮肌炎、多肌炎、血管炎或干燥症。

本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种提高抗体产量的信号肽；所述信号肽氨基酸序列为：MNFGLSWVFLVLVLKGVQC或MVFTPQILGLMLFWISASRG,分别来自抗体1G11的重链和轻链,信号肽用于提高目的蛋白的分泌性表达,信号肽为抗体的分泌性表达,本发明中,将信号肽进行PCR扩增不同的基因片段,并进行凝胶回收,在通过限制内切酶进行载体的鉴定,可以提高目的基因,特别是抗体分泌的产生量。