阅读说明：本技术 芹菜素提取溶剂及其制备方法、以及芹菜素的提取方法 (Apigenin extraction solvent, preparation method thereof and apigenin extraction method ) 是由 吕庆云 刘琴 陈轩 王国珍 于 2020-06-19 设计创作，主要内容包括：本发明公开一种芹菜素提取溶剂及其制备方法、以及芹菜素的提取方法,所述芹菜素提取溶剂包括氯化胆碱、醇类物以及水,其中,所述醇类物包括乙醇或乙二醇。本发明提供的技术方案中,通过将常见试剂乙醇或乙二醇,与水、氯化胆碱混合制成的溶液作为芹菜素的提取溶剂,不仅制备简单、成本低,而且该提取溶剂环保安全,可生物降解,对环境和人体的危害小,此外,该提取溶剂可以有效增加芹菜素的溶解度,进而提高提取芹菜素的提取效率。(The invention discloses an apigenin extraction solvent, a preparation method thereof and an apigenin extraction method. In the technical scheme provided by the invention, the solution prepared by mixing common reagent ethanol or ethylene glycol, water and choline chloride is used as the extraction solvent of apigenin, so that the preparation is simple, the cost is low, the extraction solvent is environment-friendly and safe, is biodegradable, and has small harm to the environment and human bodies, and in addition, the solubility of the apigenin can be effectively increased by the extraction solvent, and the extraction efficiency of extracting the apigenin is further improved.)

芹菜素提取溶剂及其制备方法、以及芹菜素的提取方法

技术领域

本发明涉及提取方法技术领域，特别涉及一种芹菜素提取溶剂及其制备方法、以及芹菜素的提取方法。

背景技术

芹菜，属伞形科植物，品种繁多，在我国有着悠久的种植历史和大范围的种植面积，其富含芹菜素、蛋白质、碳水化合物、胡萝卜素、B族维生素、钙、磷、铁、钠等。

芹菜素(4'，5，7-三羟基黄酮)，又称为芹黄素、洋芹素，属于黄酮亚类。芹菜素具有清除自由基，提高自身免疫力，抗氧化，抗高血糖、高血压，抗炎、提高自身自身免疫，抗动脉粥样硬化，抑制癌细胞的功效。然而，芹菜素在水、乙醇等常见溶剂中溶解度较低，这就导致芹菜素的提取效果较差。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种芹菜素提取溶剂及其制备方法、以及芹菜素的提取方法，旨在提供一种可以提取芹菜素的提取溶剂。

为实现上述目的，本发明提出一种芹菜素提取溶剂，所述芹菜素提取溶剂包括氯化胆碱、醇类物以及水，其中，所述醇类物包括乙醇或乙二醇。

可选地，所述芹菜素提取溶剂包括氯化胆碱、乙醇以及水，且所述氯化胆碱和所述乙醇的摩尔比为1:15～25。

可选地，所述氯化胆碱和所述乙醇的摩尔比为1:25。

可选地，所述芹菜素提取溶剂中，水的体积百分含量为20～25％。

为实现上述目的，本发明提出一种如上文所述的芹菜素提取溶剂的制备方法，所述芹菜素提取溶剂的制备方法包括以下步骤：

将氯化胆碱和醇类物混合后，于60～70℃水浴条件下，搅拌混匀后，加入水并搅拌混匀。

此外，为实现上述目的，本发明还提出一种芹菜素的提取方法，所述芹菜素的提取方法包括以下步骤：

将芹菜叶烘干后，粉碎过筛，得芹菜粉；

向所述芹菜粉中加入提取溶剂，混合形成混合溶液，其中，所述提取溶剂为如上文所述的芹菜素提取溶剂；

对所述混合溶液进行超声提取，然后在30～40℃下水浴加热，得到提取混合物；

对所述提取混合物进行离心，获得提取液。

可选地，所述向所述芹菜粉中加入提取溶剂，混合形成混合溶液的步骤中，每克所述芹菜粉中加入35～45ml所述提取溶剂。

可选地，在所述对所述提取混合物进行离心，获得提取液的步骤之后，还包括：将所述提取液进行分离纯化后，干燥得到芹菜素。

本发明提供的技术方案中，通过将常见试剂乙醇或乙二醇与水、氯化胆碱混合制成的溶液作为芹菜素的提取溶剂，不仅制备简单、成本低，而且该提取溶剂环保安全，可生物降解，对环境和人体的危害小，此外，该提取溶剂可以有效增加芹菜素的溶解度，进而提高提取芹菜素的提取效率。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅为本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明提出的芹菜素的提取方法的一实施例的流程示意图。

本发明目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。

需要说明的是，实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。此外，各个实施例之间的技术方案可以相互结合，但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础，当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时应当认为这种技术方案的结合不存在，也不在本发明要求的保护范围之内。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

芹菜素(4'，5，7-三羟基黄酮)，又称为芹黄素、洋芹素，属于黄酮亚类。芹菜素具有清除自由基，提高自身免疫力，抗氧化，抗高血糖、高血压，抗炎、提高自身自身免疫，抗动脉粥样硬化，抑制癌细胞的功效。

本发明提出一种芹菜素提取溶剂，所述芹菜素提取溶剂包括氯化胆碱、醇类物以及水，其中，所述醇类物包括乙醇或乙二醇。

从芹菜叶中提取芹菜素可以采用溶剂提取法，但芹菜素在常用的提取溶剂中的溶解度普遍较低，以水、甲醇、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、30％乙醇溶液、50％乙醇溶液、80％乙醇溶液、90％乙醇溶液为例，芹菜素在80％乙醇溶液中溶解度最佳，但即使以80％乙醇溶液作为芹菜素的提取试剂，获得的芹菜素的得率依然较差。本发明提供的技术方案中，氯化胆碱、乙醇、乙二醇均为市面上常见且价廉的试剂，通过将乙醇或乙二醇与水、氯化胆碱混合制成的溶液作为芹菜素的提取溶剂，不仅制备简单、成本低，而且该提取溶剂环保安全，可生物降解，对环境和人体的危害小，此外，该提取溶剂可以有效增加芹菜素的溶解度，进而提高提取芹菜素的提取效率，相较上述各种常见的提取溶剂，本提取试剂具有更高效的提取效率。

其中，当醇类物为乙二醇时，芹菜素提取溶剂可以为乙二醇、氯化胆碱以及水的混合液，且氯化胆碱与乙二醇的摩尔比可以为1:3～6，优选为1:6，混合液中，水的体积百分含量可以为20～25％，优选25％。当醇类物为乙醇时，芹菜素提取溶剂可以为氯化胆碱、乙醇以及水的混合液，且氯化胆碱和乙醇的摩尔比为1:15～25，优选为1:25，当氯化胆碱与乙醇按照1:15～25的摩尔比混合，并加水混合形成提取溶剂时，该提取溶剂对芹菜粉中芹菜素的提取效果较佳。

水是构成本发明提取溶剂的重要组分之一，在本提取溶剂中，水的体积百分含量为20～25％，优选为25％，该含水量下，提取溶剂具有较佳的提取效果。

需要说明的是，本提取溶剂中的乙醇为无水乙醇；水的体积百分含量是指每100ml芹菜素提取溶剂中含有20～25ml水。

为实现上述目的，本发明提出一种如上文所述的芹菜素提取溶剂的制备方法，所述芹菜素提取溶剂的制备方法包括以下步骤：

步骤S100，将氯化胆碱和醇类物混合后，于60～70℃水浴条件下，搅拌混匀后，加入水并搅拌混匀。

具体地，当醇类物为乙二醇时，步骤S100可以包括：将氯化胆碱和乙二醇按摩尔比1:6混合后，在60～70℃水浴条件下搅拌，然后向其中加入水并使水在其中的体积百分含量为20～25％，然后搅拌均匀，备用。当醇类物为乙醇时，步骤S100可以包括：将氯化胆碱和乙醇按摩尔比1:15～25混合后，在60～70℃水浴条件下搅拌，然后向其中加入水并使水在其中的体积百分含量为20～25％，然后搅拌均匀，备用。

其中，搅拌的形式有多种，可以人力搅拌、机械搅拌或者磁力搅拌等，本实施例采用磁力搅拌的方式，搅拌均匀且可以同时进行水浴加热，确保温度环境。

此外，为实现上述目的，本发明还提出一种芹菜素的提取方法，图1为本发明芹菜素的提取方法的一实施例。

参阅图1，在本实施例中，所述芹菜素的提取方法包括以下步骤：

步骤S10，将芹菜叶烘干后，粉碎过筛，得芹菜粉。

本实施例选取芹菜叶并烘干，然后粉碎过筛，获得芹菜粉，粉状物与提取溶剂混合时，分散性更好，从而可以提高芹菜素的溶解度，进而提高提取效率。

为避免烘干过程造成芹菜素的流失，烘干温度不宜过高，本实施例烘干的温度为45～55℃，且优选为50℃，如此，既能快速烘干，又不会造成过大的营养损失。

进一步地，在选取芹菜叶时，可以选取新鲜的芹菜叶，并洗净切碎，以便于后续粉碎，提高粉碎效率和效果。

步骤S20，向所述芹菜粉中加入提取溶剂，混合形成混合溶液，其中，所述提取溶剂为如上文所述的芹菜素提取溶剂。

本实施例将芹菜粉和提取溶剂混合，其中提取溶剂配置为如上文所述的芹菜素提取溶剂，其中，芹菜粉和提取溶剂的料液比为1:35～45，即每克芹菜粉中可以加入35～45ml提取溶剂，以使得芹菜素得以被充分提取的同时，避免溶剂浪费。

由于本方法中提取溶剂具有上述芹菜素提取溶剂所有实施例的全部技术方案，因此至少具有上述实施例的技术方案所带来的所有有益效果，在此不再一一赘述。

步骤S30，对所述混合溶液进行超声提取，然后在30～40℃下水浴加热，得到提取混合物。

本实施例对混合溶液进行超声提取后，水浴加热以使得芹菜素充分溶出，从而提高芹菜素的提取效率。而且，为了进一步提高芹菜素的溶出度，还可以对超声的温度、时间以及水浴的时间进行优化，具体地，可以将混合溶液置于超声仪中，在40～50℃下超声提取20～30min，然后放入恒温水浴锅中，在30～40℃下水浴加热20～30min。

步骤S40，对所述提取混合物进行离心，获得提取液。

提取混合物中除残留的提取溶剂外，还包括未溶解的芹菜叶残渣等固体杂质。本实施例对提取混合物进行离心处理，并收集上清液，即含有芹菜素的提取液。具体地，可以在转速2000～4000r/min下离心20～30min。进一步地，还可以对收集到的上清液做进一步处理，以获得纯化的芹菜素。具体地，步骤S40之后还可以包括：

步骤S50，将所述提取液进行分离纯化后，干燥得到芹菜素。

具体地，可以利用大孔树脂对提取液进行层析处理，然后将纯化产物冷冻干燥，从而获得芹菜素干品。

以下结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步详细说明，应当理解，以下实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1

(1)芹菜素提取溶剂的制备：将氯化胆碱和乙醇按摩尔比1:25混合后，在65℃水浴条件下搅拌20min，然后向其中加入水并使水在其中的体积百分含量为25％，然后搅拌10min，备用。

(2)提取芹菜素：取芹菜叶，洗净、切碎后，送入50℃烘箱烘干后，粉碎过60目筛，制成芹菜粉。按照每克芹菜粉中加入40ml芹菜素提取溶剂的比例，向芹菜粉中加入芹菜素提取溶剂，并在40℃下超声提取20min，然后在40℃下水浴加热30min，形成提取混合物。在3000r/min转速下，将提取混合物离心30min，收集上清液，即获得提取液。对提取液进行分离纯化后，经干燥制得芹菜素。

实施例2

(1)芹菜素提取溶剂的制备：将氯化胆碱和乙醇按摩尔比1:20混合后，在60℃水浴条件下搅拌20min，然后向其中加入水并使水在其中的体积百分含量为25％，然后搅拌10min，备用。

(2)提取芹菜素：取芹菜叶，洗净、切碎后，送入50℃烘箱烘干后，粉碎过60目筛，制成芹菜粉。按照每克芹菜粉中加入40ml芹菜素提取溶剂的比例，向芹菜粉中加入芹菜素提取溶剂，并在40℃下超声提取20min，然后在40℃下水浴加热30min，形成提取混合物。在3000r/min转速下，将提取混合物离心30min，收集上清液，即获得提取液。对提取液进行分离纯化后，经干燥制得芹菜素。

实施例3

(1)芹菜素提取溶剂的制备：将氯化胆碱和乙醇按摩尔比1:15混合后，在70℃水浴条件下搅拌20min，然后向其中加入水并使水在其中的体积百分含量为25％，然后搅拌10min，备用。

(2)提取芹菜素：取芹菜叶，洗净、切碎后，送入50℃烘箱烘干后，粉碎过60目筛，制成芹菜粉。按照每克芹菜粉中加入35ml芹菜素提取溶剂的比例，向芹菜粉中加入芹菜素提取溶剂，并在40℃下超声提取20min，然后在40℃下水浴加热30min，形成提取混合物。在3000r/min转速下，将提取混合物离心30min，收集上清液，即获得提取液。对提取液进行分离纯化后，经干燥制得芹菜素。

实施例4

(1)芹菜素提取溶剂的制备：将氯化胆碱和乙二醇按摩尔比1:6混合后，在65℃水浴条件下搅拌20min，然后向其中加入水并使水在其中的体积百分含量为25％，然后搅拌10min，备用。

(2)提取芹菜素：取芹菜叶，洗净、切碎后，送入50℃烘箱烘干后，粉碎过60目筛，制成芹菜粉。按照每克芹菜粉中加入40ml芹菜素提取溶剂的比例，向芹菜粉中加入芹菜素提取溶剂，并在40℃下超声提取20min，然后在40℃下水浴加热30min，形成提取混合物。在3000r/min转速下，将提取混合物离心30min，收集上清液，即获得提取液。对提取液进行分离纯化后，经干燥制得芹菜素。

实施例5

除将步骤(1)中水的体积百分含量改为20％外，其他步骤与实施例1相同。

实施例6

除将步骤(1)中水的体积百分含量改为24％外，其他步骤与实施例1相同。

实施例7

除将步骤(2)中水浴温度改为30℃外，其他步骤与实施例1相同。

实施例8

除将步骤(2)中水浴温度改为35℃外，其他步骤与实施例1相同。

对比例1

除将步骤(1)中“将氯化胆碱和乙醇按摩尔比1:25混合后”改为“将氯化胆碱和1,2-丙二醇按摩尔比1:4混合后”外，其他步骤与实施例1相同。

对比例2

除将步骤(1)中“将氯化胆碱和乙醇按摩尔比1:25混合后”改为“将氯化胆碱和1,3-丁二醇按摩尔比1:2混合后”外，其他步骤与实施例1相同。

对比例3

除将芹菜素提取溶剂改为80(v/v)％乙醇外，其他步骤与实施例1相同。

对比例4

除将步骤(1)中氯化胆碱和乙醇的摩尔比改为1:30外，其他步骤与实施例1相同。

对比例5

除将步骤(1)中水的体积百分含量改为5％外，其他步骤与实施例1相同。

利用芹菜素分子在336nm处具有的紫外吸收带，对芹菜素含量进行紫外定量。方法为：取各实施例和各对比例步骤(2)中制得的提取液，过0.22um滤膜后稀释60倍，然后采用紫外分光光度计，在336nm波长下测稀释液的吸光值，平行试验3次，记录平均值于表1中。

表1各实施例和对比例提取液的吸光度对比

	吸光度	得率(mg/g)		吸光度	得率(mg/g)
						实施例1	0.530	17.062	实施例8	0.515	16.577
实施例2	0.475	15.285	对比例1	0.396	12.733
						实施例3	0.456	14.671	对比例2	0.383	12.313
实施例4	0.443	14.251	对比例3	0.432	13.896
						实施例5	0.509	16.383	对比例4	0.436	14.025
实施例6	0.521	16.771	对比例5	0.391	12.572
						实施例7	0.508	16.351

从上表1可以看出，相较对比例，各实施例制得的提取液在336nm波长下表现出了更高的吸光度，说明各实施例提取液中含有的芹菜素更多，也即，本发明提供的芹菜素提取溶剂具有更高的提取效率。

以上仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包括在本发明的专利保护范围内。