具体实施方式

鉴于现有技术的缺陷，本案发明人经长期研究和大量实践，得以提出本发明的技术方案，下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明实施例的一个方面提供了一种A型肉毒毒素在制备用于治疗脱发的方法中的药物的用途，所述药物包括作为活性成分的A型肉毒毒素以及佐剂，所述佐剂包括蔗糖、右旋糖苷及明胶，所述的方法包括：将所述药物以生理盐水稀释后，并选定头部肌肉组织的20-40个区域作为注射位点进行注射。

进一步的，所述注射位点的数目为20-40。

本发明中，所述注射位点集中于患者的明显脱发部位，可依据病情调整，明显改善头皮微环境，减少头皮油腻感。进一步的，所述注射位点至少选自额肌、颞肌、枕肌、耳周肌中的任一者。所述注射位点如图1所示，脱发好发于额顶叶，额叶和顶叶的滑车上动脉和眶上动脉是颈内动脉较小的分支，它覆盖着腱膜，与覆盖肌肉的颞枕区相比，腱膜的血管相对较少。故选择靠近额顶叶的数块肌肉为注射位点。

进一步的，所述盐水稀释的药物组合物中A型肉毒毒素的浓度为2.5-5.0U/0.1ml。浓度相对越高，效果更佳。

进一步的，所述盐水稀释的药物组合物中佐剂的浓度为12.5-50μg/0.1ml。

进一步的，所述蔗糖、右旋糖苷、明胶的比例为1∶2～5∶2～5。

进一步的，所述盐水稀释的药物组合物配置4h内使用。

进一步的，所述肉毒毒素的每个位点的注射计量单位为2.5-5U。

进一步的，所述盐水为生理盐水，其中氯化钠的浓度为0.9wt％。

进一步的，所述A型肉毒毒素用于提高前列腺素E2受体表达。

进一步的，所述A型肉毒毒素用于提高血管内皮生长因子表达。

进一步的，所述A型肉毒毒素用于抑制神经末梢释放乙酰胆碱。

现有研究中，脱发依据毛囊的完整性可分为瘢痕性脱发及非瘢痕性脱发。非瘢痕性脱发其毛囊保存完整，包括静止期脱发、雄激素性脱发、斑秃等。雄激素性脱发的特点是毛发生长期缩短和毛囊小型化，毛发未得到充分生长而变得细软，甚至有时无法穿过头皮。雄激素性脱发是脱发中最常见的类型，影响约40％的人群，遗传和雄激素是目前已知的主要致病因素，但具体的发病机制尚未明确，可能也与炎症反应、细胞因子等因素相关。

本发明中，雄激素性脱发可能与雄激素受体基因、WNT10A基因、β-catenin基因等相关。本发明中A型肉毒毒素可通过激活主要毛囊生长期相关诱导信号通路来实现促进毛发生长的作用。通过对局部注射肉毒毒素可能可以维持/激活Wnt/β-catenin信号通路，并通过磷酸化GSK3β水平调节Wnt/β-catenin信号通路，而其上游的PKA/PKB也可以介导这种改变。同时，引起前列腺素E2受体(PGE2)、血管内皮生长因子(VGEF)表达增多，其对小动脉有缓慢的舒张作用，可增加局部血供促进毛囊生长，延长毛发生长期，并加快静止期毛囊向生长期转换。

此外，肉毒毒素可以抑制神经末梢释放乙酰胆碱，而毛囊角化细胞运动受大剂量烟碱乙酰胆碱受体刺激的抑制。通过副交感效应抑制乙酰胆碱释放，间接增加角化细胞的移行，可减少毛囊阻塞，抑制汗腺分泌，减少头皮油腻感，促进头发生长。脱发人群中异常的雄激素水平也可增加毛囊皮脂腺角化细胞上的乙酰胆碱数量，通过抑制乙酰胆碱的释放，肉毒毒素能够减少乙酰胆碱刺激增加角化细胞运动。而减少的毛囊阻塞和头皮血流的增多，提高了头皮氧流量，高氧环境可以显著抑制睾酮向二氢睾酮(DHT)转换，改善DHT/雌二醇失衡，抑制毛囊小型化的发生，从而改善脱发问题。其中，A型肉毒毒素治疗脱发的机制如图2所示。

本发明中，肉毒杆菌毒素的注射使肌肉松弛，减少了肌肉和穿孔血管的压力，从而潜在地增加了血液供应和经皮pO2，同时佐剂(蔗糖、右旋糖苷及明胶)可作为营养成分促进毛囊的发育和生长。

本发明中，局部注射药物的制备包括：

(1)将100u的A型肉毒毒素以0.9％氯化钠溶液溶解成2～4mL；

(2)依据患者脱发情况将A型肉毒毒素注射于额顶叶脱发严重部位，每个位点2.5-5U，注射位点在20-40个，依据患者不同病情做相应调整。

本发明中，患者疗效判断的标准为：痊愈为皮损处全部新发生长或基本都有终毛生长，分布较密，毛发粗细，色黑类似正常头发；显效为终发覆盖区域大于1/2秃发区，且有较多毳毛变成终毛，可见稀疏终毛，呈黑素；有效为新发生长大于10％，包括细、短、色淡的毳毛生长，但生长缓慢，未完全恢复，色泽黑或浅棕色；无效则为与治疗前无明显改善。

本发明中，纳入研究的患者的准入标准包括：

(1)男性患者；

(2)依据临床表现和毛发检查诊断雄激素性脱发明确；

(3)Norwood Hamilton分级2-4级(如图3所示)；

(4)近6个月未进行治疗；

(5)患者依从性高，配合定期随访及拍照。

本发明中，纳入研究的患者需排除有以下任一项的患者：

(1)注射部位存在合并症，如感染、斑秃等；

(2)近期有使用与肉毒毒素有相互作用的药物，如氨基糖苷类抗生素、克林霉素、多粘菌素、硫酸镁、奎尼丁等药物；

(3)患者合并有周围神经病变，如Eaton-Lambert综合征、肌萎缩侧索硬化、重症肌无力等；

(4)存在恶性肿瘤尚未治疗的患者；

(5)患者依从性差，不能配合随访。

下面结合若干优选实施例及附图对本发明的技术方案做进一步详细说明，本实施例在以发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

以下实施例选取7名年龄在48-65岁之间的雄激素性脱发患者，Norwood Hamilton分级在2-4级，排除先天性秃发和头发毛囊萎缩无生长功能者，近6月内未接受治疗，予A型肉毒毒素局部注射。注射后24小时避免碰水，注意清洁卫生。

经过3月治疗后，6名患者诉头皮油腻感较强明显改善。其中，痊愈1名，有效3名，显效2名，无效1名。

所有治疗患者在治疗后均无明显不良反应，从实验中可以得出A型肉毒毒素是治疗脱发的有效选择之一。

实施例1

患者1，男性，年龄61岁，将药物(其中A型肉毒毒素100u)以0.9％氯化钠溶液溶解成4mL，位于额顶叶脱发处20个位点注射(注射位点如图4所示)，药物注射3个月后，患者l的治疗前后的图片如图5a-5b所示。可以看出，经过治疗后，患者自诉头皮油腻感的得到明显改善，发量也明显增多。

实施例2

患者2，男性，年龄48岁，将药物(其中A型肉毒毒素100u)以0.9％氯化钠溶液溶解成4mL，位于额顶叶脱发处30个位点注射(注射位点如图6所示)，药物注射3个月后，患者2的治疗前后的图片如图7a-7b所示。可以看出，经过治疗后，患者自诉头皮油腻感的得到明显改善，发量也明显增多。

实施例3

患者3，男性，年龄65岁，将药物(其中A型肉毒毒素1u)以0.9％氯化钠溶液稀释注射后，患者3的经皮DO2发生了变化，提高了一个百分点(如图8a-8b所示)。

此外，本案发明人还参照前述实施例，以本说明书述及的其它原料、工艺操作、工艺条件进行了试验，并均获得了较为理想的结果。

本发明的各方面、实施例、特征及实例应视为在所有方面为说明性的且不打算限制本发明，本发明的范围仅由权利要求书界定。在不背离所主张的本发明的精神及范围的情况下，所属领域的技术人员将明了其它实施例、修改及使用。

在本发明案中标题及章节的使用不意味着限制本发明；每一章节可应用于本发明的任何方面、实施例或特征。

在本发明案通篇中，在将组合物描述为具有、包含或包括特定组份之处或者在将过程描述为具有、包含或包括特定过程步骤之处，预期本发明教示的组合物也基本上由所叙述组份组成或由所叙述组份组成，且本发明教示的过程也基本上由所叙述过程步骤组成或由所叙述过程步骤组组成。

应理解，各步骤的次序或执行特定动作的次序并非十分重要，只要本发明教示保持可操作即可。此外，可同时进行两个或两个以上步骤或动作。

尽管已参考说明性实施例描述了本发明，但所属领域的技术人员将理解，在不背离本发明的精神及范围的情况下可做出各种其它改变、省略及/或添加且可用实质等效物替代所述实施例的元件。另外，可在不背离本发明的范围的情况下做出许多修改以使特定情形或材料适应本发明的教示。因此，本文并不打算将本发明限制于用于执行本发明的所揭示特定实施例，而是打算使本发明将包含归属于所附权利要求书的范围内的所有实施例。此外，除非具体陈述，否则术语第一、第二等的任何使用不表示任何次序或重要性，而是使用术语第一、第二等来区分一个元素与另一元素。