一种反式璎柏酸的制备方法
阅读说明：本技术 一种反式璎柏酸的制备方法 (Preparation method of trans-jade-like gem cypress acid ) 是由 倪林 张耀 谭泽斌 颜武华 徐会有 于 2021-09-28 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种反式璎柏酸的制备方法,包括以下步骤：步骤一,粉碎和混合；步骤二,乙酸乙酯加热回流提取；步骤三,二次提取；步骤四,减压浓缩；步骤五,洗脱处理；步骤六,浓缩重结晶；其中在上述步骤一中,取柏科植物体,经干燥粉碎后进行筛选,随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末,备用；其中在上述步骤二中,随后称取适当的步骤一中混合得到的混合粉末,并且加入一定量的乙酸乙酯得到混合料,随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时,过滤得一次提取液,本发明,可有效避免色素干扰,分离过程仅需1次柱色谱操作,所得反式璎柏酸产量大,纯度高,可进行大规模生产。(The invention discloses a preparation method of trans-jade-like gem hinokic acid, which comprises the following steps: step one, crushing and mixing; heating, refluxing and extracting ethyl acetate; step three, secondary extraction; step four, concentrating under reduced pressure; step five, elution treatment; step six, concentrating and recrystallizing; in the first step, cypress plant bodies are taken, dried and crushed, then screened, and then screened cypress plant body powder is uniformly mixed with equal amount of calcium carbonate powder to obtain mixed powder for later use; and in the second step, weighing appropriate mixed powder obtained by mixing in the first step, adding a certain amount of ethyl acetate to obtain a mixture, heating and boiling the obtained mixture for 2 hours, and filtering to obtain a primary extracting solution.)
技术领域
本发明涉及反式璎柏酸制备技术领域，具体为一种反式璎柏酸的制备方法。
背景技术
反式璎柏酸，英文名trans-communic acid，白色固体结晶，分子式为C20H30O2，分子量为302，为二萜类化合物。目前已有将反式璎柏酸以单体或提取物的形式添加至高端化妆品中，市场反应良好；文献也报道，该化合物具有良好的抗癌、抗菌、抗炎等多种功效。该成分广泛分布于柏科植物中，如地中海柏木（Cupressus sempervirens）果实、欧洲刺柏（Juniperus communis）等，现有工艺中，反式璎柏酸提取率较低，且分离方法较为繁琐，需要经过多次柱色谱、凝胶色谱、高效液相色谱等最终得到单体化合物，运用到生产中成本高、效率低。因此，寻找一种富含反式璎柏酸且植物资源丰富的植物体，优化提取物中制备高纯度反式璎柏酸的新方法成为当下亟需解决的关键问题。
国内外学者在反式璎柏酸的制备研究上做了大量的研究工作。赵勤实等从福建柏枝叶提取物中首次分离出反式璎柏酸，采用95%乙醇冷浸法浸泡-乙酸乙酯萃取-硅胶柱色谱洗脱-重结晶方法最终产率为0.76%，科植物的叶片在提取过程中有大量色素干扰。赵勤实等采用冷浸法可有效保证在提取初期减少色素干扰，但提取得率较低，需多次提取（≥3次），生产工艺时间长，且溶剂消耗大；国外学者前期采用溶剂法进行快速提取，后期需要多次柱色谱进行分离，以便可提高反式璎柏酸产品的纯度，但工艺复杂，成本高，规模化生产难度大，因此设计一种反式璎柏酸的制备方法是很有必要的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种反式璎柏酸的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种反式璎柏酸的制备方法，包括以下步骤：步骤一，粉碎和混合；步骤二，乙酸乙酯加热回流提取；步骤三，二次提取；步骤四，减压浓缩；步骤五，洗脱处理；步骤六，浓缩重结晶；
其中在上述步骤一中，取柏科植物体，经干燥粉碎后进行筛选，随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末，备用；
其中在上述步骤二中，随后称取适当的步骤一中混合得到的混合粉末，并且加入一定量的乙酸乙酯得到混合料，随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时，过滤得一次提取液；
其中在上述步骤三中，将步骤二中经过过滤得到的滤渣再加入步骤二中等量的乙酸乙酯，再次加热煮沸2小时，过滤得二次提取液，随后得到的二次提取液同步骤二中得到的一次提取液进行混合得到联合提取液；
其中在上述步骤四中，将步骤三中得到的联合提取液进行减压浓缩得到提取物浸膏；
其中在上述步骤五中，PRP大孔吸附树脂柱色谱洗脱：洗脱溶剂采用乙醇-水系统；先使用60%-65%乙醇洗脱，除去杂质，洗脱3-5个柱体积；然后使用75%-85%乙醇洗脱，洗脱5-6个柱体积，收集洗脱液，减压浓缩得高浓度反式璎柏酸浸膏；
其中在上述步骤六中，首先取步骤五中得到的高浓度反式璎柏酸浸膏，加入乙酸乙酯-丙酮的混合液，加热至浸膏完全溶解，形成过饱和溶液；自然冷却至室温，析出白色固体结晶，过滤，干燥即为高纯度反式璎柏酸。
优选的，所述步骤一中，选择的筛网目数为20目。
优选的，所述步骤一中，柏科植物体，尤指欧洲刺柏J.communis和福建柏F.hodginsii的根、枝、叶、果实以及它们的混合体。
优选的，所述步骤二中，混合粉末与乙酸乙酯的质量比为1∶5。
优选的，所述步骤二中，采用的称量设备的精度为0.1ml。
优选的，所述步骤六中，结晶溶剂选用乙酸乙酯-丙酮的混合液，体积比例范围为0.5-0.75。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：该一种反式璎柏酸的制备方法，无需多次柱色谱、凝胶色谱以及液相色谱分离，提取方法更为简单，成本低，效率高，产品得率可达0.18-0.27%，比原有最高产量0.15%提高了20%-80%，且该发明可有效避免色素干扰，分离过程仅需1次柱色谱操作，所得反式璎柏酸产量大，纯度高，可进行大规模生产。
附图说明
图1为本发明的方法流程图；
图2为反式璎柏酸的化学结构式图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1-2，本发明提供的一种实施例：
实施例1：
一种反式璎柏酸的制备方法，包括以下步骤：步骤一，粉碎和混合；步骤二，乙酸乙酯加热回流提取；步骤三，二次提取；步骤四，减压浓缩；步骤五，洗脱处理；步骤六，浓缩重结晶；
其中在上述步骤一中，取柏科植物体，经干燥粉碎后进行筛选，且选择的筛网目数为20目，随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末，备用，且柏科植物体为福建柏叶子；
其中在上述步骤二中，随后称取1000g步骤一中混合得到的混合粉末，并且加入10000ml的乙酸乙酯得到混合料，随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时，过滤得一次提取液，且采用的称量设备的精度为0.1ml；
其中在上述步骤三中，将步骤二中经过过滤得到的滤渣再加入10000ml的乙酸乙酯，再次加热煮沸2小时，过滤得二次提取液，随后得到的二次提取液同步骤二中得到的一次提取液进行混合得到联合提取液；
其中在上述步骤四中，将步骤三中得到的联合提取液进行减压浓缩得到52.2g的提取物浸膏；
其中在上述步骤五中，步骤四中的提取物浸膏用乙酸乙酯溶解，与52g的PRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用65%乙醇溶液洗脱1L除去杂质，再用1.5L 80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液, 减压回收溶剂至干，得高浓度反式璎柏酸浸膏；
其中在上述步骤六中，乙酸乙酯-丙酮2:3混合加热溶剂，形成过饱和溶液，室温下放置自然冷却，析出白色针状结晶，过滤，干燥得反式璎柏酸1.92g。
实施例2：
一种反式璎柏酸的制备方法，包括以下步骤：步骤一，粉碎和混合；步骤二，乙酸乙酯加热回流提取；步骤三，二次提取；步骤四，减压浓缩；步骤五，洗脱处理；步骤六，浓缩重结晶；
其中在上述步骤一中，取柏科植物体，经干燥粉碎后进行筛选，且选择的筛网目数为20目，随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末，备用，且柏科植物体为欧洲刺柏叶子；
其中在上述步骤二中，随后称取1000g步骤一中混合得到的混合粉末，并且加入10000ml的乙酸乙酯得到混合料，随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时，过滤得一次提取液，且采用的称量设备的精度为0.1ml；
其中在上述步骤三中，将步骤二中经过过滤得到的滤渣再加入10000ml的乙酸乙酯，再次加热煮沸2小时，过滤得二次提取液，随后得到的二次提取液同步骤二中得到的一次提取液进行混合得到联合提取液；
其中在上述步骤四中，将步骤三中得到的联合提取液进行减压浓缩得到52.2g的提取物浸膏；
其中在上述步骤五中，步骤四中的提取物浸膏用乙酸乙酯溶解，与52g的PRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用65%乙醇溶液洗脱1 L除去杂质，再用1.5 L 80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液, 减压回收溶剂至干，得高浓度反式璎柏酸浸膏；
其中在上述步骤六中，乙酸乙酯-丙酮2:3混合加热溶剂，形成过饱和溶液，室温下放置自然冷却，析出白色针状结晶，过滤，干燥得反式璎柏酸2.32g。
实施例3：
一种反式璎柏酸的制备方法，包括以下步骤：步骤一，粉碎和混合；步骤二，乙酸乙酯加热回流提取；步骤三，二次提取；步骤四，减压浓缩；步骤五，洗脱处理；步骤六，浓缩重结晶；
其中在上述步骤一中，取柏科植物体，经干燥粉碎后进行筛选，且选择的筛网目数为20目，随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末，备用，且柏科植物体为欧洲刺柏根；
其中在上述步骤二中，随后称取1000g步骤一中混合得到的混合粉末，并且加入10000ml的乙酸乙酯得到混合料，随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时，过滤得一次提取液，且采用的称量设备的精度为0.1ml；
其中在上述步骤三中，将步骤二中经过过滤得到的滤渣再加入10000ml的乙酸乙酯，再次加热煮沸2小时，过滤得二次提取液，随后得到的二次提取液同步骤二中得到的一次提取液进行混合得到联合提取液；
其中在上述步骤四中，将步骤三中得到的联合提取液进行减压浓缩得到52.2g的提取物浸膏；
其中在上述步骤五中，步骤四中的提取物浸膏用乙酸乙酯溶解，与52g的PRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用65%乙醇溶液洗脱1 L除去杂质，再用1.5 L 80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液, 减压回收溶剂至干，得高浓度反式璎柏酸浸膏；
其中在上述步骤六中，乙酸乙酯-丙酮2:3混合加热溶剂，形成过饱和溶液，室温下放置自然冷却，析出白色针状结晶，过滤，干燥得反式璎柏酸2.71g。
实施例4：
一种反式璎柏酸的制备方法，包括以下步骤：步骤一，粉碎和混合；步骤二，乙酸乙酯加热回流提取；步骤三，二次提取；步骤四，减压浓缩；步骤五，洗脱处理；步骤六，浓缩重结晶；
其中在上述步骤一中，取柏科植物体，经干燥粉碎后进行筛选，且选择的筛网目数为20目，随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末，备用，且柏科植物体为福建柏枝叶；
其中在上述步骤二中，随后称取1000g步骤一中混合得到的混合粉末，并且加入10000ml的乙酸乙酯得到混合料，随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时，过滤得一次提取液，且采用的称量设备的精度为0.1ml；
其中在上述步骤三中，将步骤二中经过过滤得到的滤渣再加入10000ml的乙酸乙酯，再次加热煮沸2小时，过滤得二次提取液，随后得到的二次提取液同步骤二中得到的一次提取液进行混合得到联合提取液；
其中在上述步骤四中，将步骤三中得到的联合提取液进行减压浓缩得到52.2g的提取物浸膏；
其中在上述步骤五中，步骤四中的提取物浸膏用乙酸乙酯溶解，与52g的PRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用65%乙醇溶液洗脱1L除去杂质，再用1.5L 80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液, 减压回收溶剂至干，得高浓度反式璎柏酸浸膏；
其中在上述步骤六中，乙酸乙酯-丙酮2:3混合加热溶剂，形成过饱和溶液，室温下放置自然冷却，析出白色针状结晶，过滤，干燥得反式璎柏酸2.08g。
实施例5：
一种反式璎柏酸的制备方法，包括以下步骤：步骤一，粉碎和混合；步骤二，乙酸乙酯加热回流提取；步骤三，二次提取；步骤四，减压浓缩；步骤五，洗脱处理；步骤六，浓缩重结晶；
其中在上述步骤一中，取柏科植物体，经干燥粉碎后进行筛选，且选择的筛网目数为20目，随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末，备用，且柏科植物体为欧洲刺柏枝叶；
其中在上述步骤二中，随后称取1000g步骤一中混合得到的混合粉末，并且加入10000ml的乙酸乙酯得到混合料，随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时，过滤得一次提取液，且采用的称量设备的精度为0.1ml；
其中在上述步骤三中，将步骤二中经过过滤得到的滤渣再加入10000ml的乙酸乙酯，再次加热煮沸2小时，过滤得二次提取液，随后得到的二次提取液同步骤二中得到的一次提取液进行混合得到联合提取液；
其中在上述步骤四中，将步骤三中得到的联合提取液进行减压浓缩得到52.2g的提取物浸膏；
其中在上述步骤五中，步骤四中的提取物浸膏用乙酸乙酯溶解，与52g的PRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用65%乙醇溶液洗脱1 L除去杂质，再用1.5 L 80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液, 减压回收溶剂至干，得高浓度反式璎柏酸浸膏；
其中在上述步骤六中，乙酸乙酯-丙酮2:3混合加热溶剂，形成过饱和溶液，室温下放置自然冷却，析出白色针状结晶，过滤，干燥得反式璎柏酸2.46g
实施例6：
一种反式璎柏酸的制备方法，包括以下步骤：步骤一，粉碎和混合；步骤二，乙酸乙酯加热回流提取；步骤三，二次提取；步骤四，减压浓缩；步骤五，洗脱处理；步骤六，浓缩重结晶；
其中在上述步骤一中，取柏科植物体，经干燥粉碎后进行筛选，且选择的筛网目数为20目，随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末，备用，且柏科植物体为福建柏枝；
其中在上述步骤二中，随后称取1000g步骤一中混合得到的混合粉末，并且加入10000ml的乙酸乙酯得到混合料，随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时，过滤得一次提取液，且采用的称量设备的精度为0.1ml；
其中在上述步骤三中，将步骤二中经过过滤得到的滤渣再加入10000ml的乙酸乙酯，再次加热煮沸2小时，过滤得二次提取液，随后得到的二次提取液同步骤二中得到的一次提取液进行混合得到联合提取液；
其中在上述步骤四中，将步骤三中得到的联合提取液进行减压浓缩得到52.2g的提取物浸膏；
其中在上述步骤五中，步骤四中的提取物浸膏用乙酸乙酯溶解，与52g的PRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用65%乙醇溶液洗脱1 L除去杂质，再用1.5 L 80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液, 减压回收溶剂至干，得高浓度反式璎柏酸浸膏；
其中在上述步骤六中，乙酸乙酯-丙酮2:3混合加热溶剂，形成过饱和溶液，室温下放置自然冷却，析出白色针状结晶，过滤，干燥得反式璎柏酸2.16g。
实施例7：
一种反式璎柏酸的制备方法，包括以下步骤：步骤一，粉碎和混合；步骤二，乙酸乙酯加热回流提取；步骤三，二次提取；步骤四，减压浓缩；步骤五，洗脱处理；步骤六，浓缩重结晶；
其中在上述步骤一中，取柏科植物体，经干燥粉碎后进行筛选，且选择的筛网目数为20目，随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末，备用，且柏科植物体为福建柏叶子；
其中在上述步骤二中，随后称取1000g步骤一中混合得到的混合粉末，并且加入10000ml的乙酸乙酯得到混合料，随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时，过滤得一次提取液，且采用的称量设备的精度为0.1ml；
其中在上述步骤三中，将步骤二中经过过滤得到的滤渣再加入10000ml的乙酸乙酯，再次加热煮沸2小时，过滤得二次提取液，随后得到的二次提取液同步骤二中得到的一次提取液进行混合得到联合提取液；
其中在上述步骤四中，将步骤三中得到的联合提取液进行减压浓缩得到54.6g的提取物浸膏；
其中在上述步骤五中，步骤四中的提取物浸膏用乙酸乙酯溶解，与55g的PRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用60%乙醇溶液洗脱1L除去杂质，再用1.5L 75%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液, 减压回收溶剂至干，得高浓度反式璎柏酸浸膏；
其中在上述步骤六中，乙酸乙酯-丙酮1:2混合加热溶剂，形成过饱和溶液，室温下放置自然冷却，析出白色针状结晶，过滤，干燥得反式璎柏酸1.76g。
实施例8：
一种反式璎柏酸的制备方法，包括以下步骤：步骤一，粉碎和混合；步骤二，乙酸乙酯加热回流提取；步骤三，二次提取；步骤四，减压浓缩；步骤五，洗脱处理；步骤六，浓缩重结晶；
其中在上述步骤一中，取柏科植物体，经干燥粉碎后进行筛选，且选择的筛网目数为20目，随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末，备用，且柏科植物体为欧洲刺柏叶子；
其中在上述步骤二中，随后称取1000g步骤一中混合得到的混合粉末，并且加入10000ml的乙酸乙酯得到混合料，随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时，过滤得一次提取液，且采用的称量设备的精度为0.1ml；
其中在上述步骤三中，将步骤二中经过过滤得到的滤渣再加入10000ml的乙酸乙酯，再次加热煮沸2小时，过滤得二次提取液，随后得到的二次提取液同步骤二中得到的一次提取液进行混合得到联合提取液；
其中在上述步骤四中，将步骤三中得到的联合提取液进行减压浓缩得到54.6g的提取物浸膏；
其中在上述步骤五中，步骤四中的提取物浸膏用乙酸乙酯溶解，与55g的PRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用60%乙醇溶液洗脱1L除去杂质，再用1.5L 75%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液, 减压回收溶剂至干，得高浓度反式璎柏酸浸膏；
其中在上述步骤六中，乙酸乙酯-丙酮1:2混合加热溶剂，形成过饱和溶液，室温下放置自然冷却，析出白色针状结晶，过滤，干燥得反式璎柏酸2.01g。
实施例9：
一种反式璎柏酸的制备方法，包括以下步骤：步骤一，粉碎和混合；步骤二，乙酸乙酯加热回流提取；步骤三，二次提取；步骤四，减压浓缩；步骤五，洗脱处理；步骤六，浓缩重结晶；
其中在上述步骤一中，取柏科植物体，经干燥粉碎后进行筛选，且选择的筛网目数为20目，随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末，备用，且柏科植物体为欧洲刺柏叶子；
其中在上述步骤二中，随后称取1000g步骤一中混合得到的混合粉末，并且加入10000ml的乙酸乙酯得到混合料，随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时，过滤得一次提取液，且采用的称量设备的精度为0.1ml；
其中在上述步骤三中，将步骤二中经过过滤得到的滤渣再加入10000ml的乙酸乙酯，再次加热煮沸2小时，过滤得二次提取液，随后得到的二次提取液同步骤二中得到的一次提取液进行混合得到联合提取液；
其中在上述步骤四中，将步骤三中得到的联合提取液进行减压浓缩得到63.1g的提取物浸膏；
其中在上述步骤五中，步骤四中的提取物浸膏用乙酸乙酯溶解，与63g的PRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用60%乙醇溶液洗脱1L除去杂质，再用1.5L 75%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液, 减压回收溶剂至干，得高浓度反式璎柏酸浸膏；
其中在上述步骤六中，乙酸乙酯-丙酮3:4混合加热溶剂，形成过饱和溶液，室温下放置自然冷却，析出白色针状结晶，过滤，干燥得反式璎柏酸2.11g。
实施例10：
一种反式璎柏酸的制备方法，包括以下步骤：步骤一，粉碎和混合；步骤二，乙酸乙酯加热回流提取；步骤三，二次提取；步骤四，减压浓缩；步骤五，洗脱处理；步骤六，浓缩重结晶；
其中在上述步骤一中，取柏科植物体，经干燥粉碎后进行筛选，且选择的筛网目数为20目，随后将筛选得到的柏科植物体粉料与等量碳酸钙粉末均匀混合得到混合粉末，备用，且柏科植物体为欧洲刺柏根；
其中在上述步骤二中，随后称取1000g步骤一中混合得到的混合粉末，并且加入10000ml的乙酸乙酯得到混合料，随后将得到的混合料进行加热煮沸2小时，过滤得一次提取液，且采用的称量设备的精度为0.1ml；
其中在上述步骤三中，将步骤二中经过过滤得到的滤渣再加入10000ml的乙酸乙酯，再次加热煮沸2小时，过滤得二次提取液，随后得到的二次提取液同步骤二中得到的一次提取液进行混合得到联合提取液；
其中在上述步骤四中，将步骤三中得到的联合提取液进行减压浓缩得到63.1g的提取物浸膏；
其中在上述步骤五中，步骤四中的提取物浸膏用乙酸乙酯溶解，与63g的PRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用60%乙醇溶液洗脱1L除去杂质，再用1.5L 75%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液, 减压回收溶剂至干，得高浓度反式璎柏酸浸膏；
其中在上述步骤六中，乙酸乙酯-丙酮3:4混合加热溶剂，形成过饱和溶液，室温下放置自然冷却，析出白色针状结晶，过滤，干燥得反式璎柏酸2.52g。
将上述实施例所得反式璎柏酸时的产率和纯度分别进行计算，所得结果如下表：
上述实施例1中得到的反式璎柏酸光谱学特征为：ESI-MS m/z：303[M+H]+；1H-NMR(400 MHz, CDCl3):δ6.33(1H,dd, J =17.2,10.4Hz, H-14), 5.41 (1H,t, J = 6.8Hz,H-12), 5.04(1H,d,J =17.2Hz,H-15a),4.88(1H, d,J=10.8Hz，H-15b)，4.84(1H，s，H-17a)，4.46(1H，s，H-17b)，1.75(3H,s,H-16)，1.25(3H,s,H-18),0.65(3H,s,H-20)；
13C-NMR(100MHz,CDCl3):δ183.8(C-19),148.0(C-8),141.7(C-14), 134.1 (C-12), 133.6 (C-13),110.1(C-15), 107.8 (C-17), 56.5(C-9), 56.4(C-5),44.3(C-4),40.5(C-10),39.4(C-1),38.6(C-7),38.0(C-3),29.2(C-18), 26.0 (C-6), 23.4(C-11),20.0(C-2), 13.0(C-20),12.0(C-16)。
基于上述，本发明的优点在于，该发明为植物体经粉碎-等量碳酸钙粉末混合-乙酸乙酯加热回流提取-PRP大孔吸附树脂洗脱-重结晶，过滤，干燥，得白色固体结晶即为反式璎柏酸，可有效避免色素干扰，分离过程仅需1次柱色谱操作，所得反式璎柏酸产量大，纯度高，可进行大规模生产。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。