阅读说明：本技术 酪氨酸激酶抑制剂联合长春碱类药物在制备预防或***疾病的药物中的用途 (Application of tyrosine kinase inhibitor and vinblastine drug in preparation of drugs for preventing or treating tumor diseases ) 是由 王路 于 2020-04-15 设计创作，主要内容包括：本发明涉及酪氨酸激酶抑制剂联合长春碱类药物在制备预防或治疗肿瘤疾病的药物中的用途。具体而言,本发明涉及酪氨酸激酶抑制剂式(I)所示化合物或其可药用盐、长春碱类药物联合在制备预防或治疗肿瘤疾病的药物中的用途。<Image he="388" wi="700" file="DDA0002451405970000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>(The invention relates to an application of a tyrosine kinase inhibitor and vinblastine combined medicine in preparing a medicine for preventing or treating tumor diseases. Specifically, the invention relates to an application of a tyrosine kinase inhibitor compound shown in formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a vinblastine medicament in preparation of a medicament for preventing or treating tumor diseases.)

酪氨酸激酶抑制剂联合长春碱类药物在制备预防或*** 疾病的药物中的用途

技术领域

本发明属于医药领域，涉及酪氨酸激酶抑制剂、长春碱类药物联合在制备预防或***疾病的药物中的用途。

背景技术

恶性肿瘤是危害人们生命健康的重大疾病。近年来，随着肿瘤生物学及相关学科的飞速发展，针对肿瘤细胞内异常信号系统靶点的特异性抗肿瘤药物是新药研发的焦点。同时，多种抗肿瘤药物联合用于***疾病也是科学研究的热点。

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，全世界每年约有200万的新增乳腺癌患者。乳腺癌是一类在分子水平上高度异质性的肿瘤，其在组织形态、免疫表型、生物学行为及治疗反应上存在着极大的差异。基于三种受体：***受体(ER)、孕酮受体(PR)和人表皮生长因子受体-2(Her2)的表达，将乳腺癌分为三种亚型。***受体阳性(ER+)乳腺癌是乳腺癌最常见的分子亚型，人群发病率约为65％～70％。在乳腺癌中预后最好，早期患者较多。与其他分子亚型乳腺癌相比，ER+乳腺癌的预后较好，但仍有约为15～30％的5年复发转移率。人表皮生长因子受体-2(HER2)分子是乳腺癌预后较差的独立因子，中国乳腺癌患者中约20％～30％存在HER2基因的扩增/过表达。HER2过表达是典型地与乳腺癌的侵袭性、转移性形式相关联，这些乳腺癌的侵袭性、转移性形式具有高复发率和/或与患者不良预后相关联。

受体酪氨酸激酶是一类参与信号转导的跨膜蛋白，在多种细胞中表达，调节细胞的生长、分化和新生血管生成。研究表明，超过50％的原癌基因和癌基因产物都具有酪氨酸激酶活性，它们的异常表达将导致肿瘤发生，另外还与肿瘤的侵袭和转移、肿瘤新生血管的生成、肿瘤的化疗抗性密切相关。目前已公开了一些酪氨酸激酶抑制剂，例如拉帕替尼(Lapatinib)、来那替尼(Neratinib)等。WO2011029265公开了一种有效的酪氨酸激酶抑制剂吡咯替尼及其制备方法，其结构如式I所示，

该化合物具有明显的药效优势。CN102933574A中描述了该化合物的二马来酸盐形式，其具有改善的理化性质、药代动力学性质以及生物利用度。

另外，已有大量文献公开曲妥珠单抗(trastuzumab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、T-DM1可选择性作用于人类表皮生长因子受体-2，抑制肿瘤细胞的生长。曲妥珠单抗临床上目前主要用于Her-2过度表达的转移性乳腺癌。

长春碱类药物的细胞毒性是通过与微管蛋白的结合实现的，它们在微管蛋白二聚体上有共同的结合位点，可抑制微管聚合成，妨碍垂体微管的形成，从而使有丝***中期停止，进而阻止癌细胞***增殖。目前已经上市并用于临床的长春碱类药物主要有长春碱(Vinblastine，VLB)、长春新碱(Vincristine，VCR)、长春地辛(Vindesin，VDS)和长春瑞滨(Vinorelbine，NVB)。长春瑞滨于1989年由法国皮尔法伯(PierreFabre)公司最先研制，被批准用于治疗非小细胞肺癌和乳腺癌。其结构如式II所示，

目前已公开了一些式I所示化合物与其他药物联合治疗的研究。WO2018133838公开了式I所示化合物与卡培他滨联合在制备治疗癌症药物中的用途，并显示了良好的抑瘤效果。研究结果表明，式I所示化合物联合卡培他滨治疗乳腺癌患者，患者治疗获益明显。式I所示化合物联合卡培他滨治疗提高了患者的客观缓解率(ORR)，延长了患者的无进展生存期(PFS)和疾病进展时间(TTP)，改善了缓解持续时间(DoR)。患者疗效改善的同时，耐受性良好。式I所示化合物联合卡培他滨在临床上有着优异的治疗效果，基于其2期临床数据就被国家药品监督管理局优先审批上市。

本发明提供了一种新的酪氨酸激酶抑制剂与长春碱类药物联合在制备预防或***疾病的药物中的用途，并显示了良好的抑瘤效果。

发明内容

本发明一方面提供了酪氨酸激酶抑制剂与长春碱类药物联合在制备预防或***疾病的药物中的用途，其中，所述酪氨酸激酶抑制剂选自式(I)所示化合物(化合物I)或其可药用盐，

本发明另一方面提供了酪氨酸激酶抑制剂与单克隆抗体以及长春碱类药物联合在制备预防或***疾病的药物中的用途，其中，所述酪氨酸激酶抑制剂选自式(I)所示化合物或其可药用盐，

在某些实施方式中，本发明所述单克隆抗体选自曲妥珠单抗、帕妥珠单抗或T-DM1。

在某些实施方式中，本发明所述单克隆抗体的剂量范围选自4mg/kg至20mg/kg。

在某些实施方式中，本发明所述的长春碱类药物选自长春碱、长春新碱、长春地辛或长春瑞滨，优选长春瑞滨。

在某些实施方式中，本发明所述的长春碱类药物的剂量范围选自2-30mg/m²。

在某些实施方式中，本发明所述的长春碱类药物为长春瑞滨，长春瑞滨的剂量范围优选自10-30mg/m²，更优选25-30mg/m²。

在某些实施方式中，本发明所述肿瘤疾病选自HER2阳性或HER2突变肿瘤，特别是HER2阳性或HER2突变的乳腺肿瘤。

在某些实施方式中，本发明所述的乳腺肿瘤选自***肿瘤、男性乳腺肿瘤、乳腺恶性淋巴瘤、纤维上皮性肿瘤、上皮-肌上皮性肿瘤、导管内癌、小叶原位癌、***湿疹样乳腺癌、早期浸润性导管癌、早期浸润性小叶癌、***状癌、髓样癌、小管癌、腺样囊性癌、粘液腺癌、大汗腺样癌、鳞状细胞癌、浸润性小叶癌、浸润性导管癌、硬癌。

在某些实施方式中，本发明所述酪氨酸激酶抑制剂的剂量范围选自100-1000mg，例如可以是100mg、125mg、150mg、175mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg、600mg、700mg、750mg、800mg、900mg、1000mg。

本发明所述药物的可药用盐可以是盐酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、乙酸盐、草酸盐、丙二酸盐、戊酸盐、谷氨酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、硼酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、羟乙基磺酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、苯甲酸盐、双羟萘酸盐、水杨酸盐、香草酸盐、扁桃酸盐、琥珀酸盐、葡萄糖酸盐、乳糖酸盐或月桂基磺酸盐等。

在某些实施方式中，所述式I所示化合物的可药用盐为马来酸盐，优选二马来酸盐。

本发明所述联合的给药途径选自经口给药、胃肠外给药、经皮给药，所述胃肠外给药包括但不限于静脉注射、皮下注射、肌肉注射。

本发明进一步涉及酪氨酸激酶抑制剂与长春碱类药物联合在制备预防或治疗HER2阳性乳腺肿瘤的药物中的用途，其中酪氨酸激酶抑制剂的给药频次可以是一日一次、一日二次、一日三次、一周一次、二周一次、三周一次或一月一次；长春碱类药物的给药频次可以是一日一次、一周一次、二周一次、三周一次或一月一次。

在某些实施方式中，酪氨酸激酶抑制剂的给药频次是一日一次，长春碱类药物的给药频次是一周一次。

在某些实施方式中，酪氨酸激酶抑制剂联合单克隆抗体以及长春碱类药物在制备预防或治疗HER2阳性乳腺肿瘤的药物中的用途，其中酪氨酸激酶抑制剂的给药频次可以是一日一次、一日二次、一日三次、一周一次、二周一次、三周一次或一月一次；单克隆抗体的给药频次可以是一周一次、二周一次、三周一次或一月一次；长春碱类药物的给药频次可以是一日一次、一周一次、二周一次、三周一次或一月一次。

在某些实施方式中，酪氨酸激酶抑制剂的给药频次是一日一次，单克隆抗体的给药频次是一周一次、三周一次，长春碱类药物的给药频次是一周一次。

本发明所述的方案中，所述的联合任选的还包含其他组分，所述其他组分包括但不限于其他抗肿瘤药等。

本发明提供了一种***疾病的方法，包括向患者施用本发明所述的式(I)所示化合物或其可药用盐和长春碱类药物。

本发明还提供了一种***疾病的方法，包括向患者施用本发明所述的式(I)所示化合物或其可药用盐、单克隆抗体以及长春碱类药物。

在某些实施方式中，所述肿瘤疾病选自HER2阳性或HER2突变肿瘤，特别是HER2阳性或HER2突变的乳腺肿瘤。

本发明还提供了一种降低式(I)所示化合物或其可药用盐的用量的方法，包括向患者施用本发明所述的式(I)所示化合物或其可药用盐和长春碱类药物。

本发明还提供了一种降低式(I)所示化合物或其可药用盐的用量的方法，包括向患者施用本发明所述的式(I)所示化合物或其可药用盐、单克隆抗体以及长春碱类药物。

本发明还涉及一种包含式I所示化合物或其可药用盐与长春碱类药物以及一种或多种药用载体、赋形剂、稀释剂的药物组合物。

本发明还涉及一种包含式I所示化合物或其可药用盐、单克隆抗体与长春碱类药物，以及一种或多种药用载体、赋形剂、稀释剂的药物组合物。

所述药物组合物可以制成药学上可接受的任一剂型。例如，可以配制为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂、注射剂(包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液)、栓剂、吸入剂或喷雾剂。

本发明所述的药物组合物，可以单独给药，或者与一种或多种治疗剂联合使用。

待组合的各成分(例如，式I所示化合物或其可药用盐、单克隆抗体、长春碱类药物以及任选的其他任意组分药物)可同时给药或依次顺序地分开用药。此外，待组合的各成分还可以以同一制剂形式或以分开的不同制剂的形式联合给药。

本发明还提供了一种药物包装盒，其中包装有本发明所述的酪氨酸激酶抑制剂与长春碱类药物，或者酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体以及长春碱类药物，其中酪氨酸激酶抑制剂选自式I所示化合物或其可药用盐。

本发明所述的“联合”是一种给药方式，是指一定时间期限内给予至少一种剂量的式I所示化合物或其可药用盐和至少一种剂量的长春碱类药物，或者至少一种剂量的式I所示化合物或其可药用盐、至少一种剂量的单克隆抗体以及至少一种剂量的长春碱类药物。其中给予的药物都显示药理学作用。所述的时间期限可以是一个给药周期内，优选4周内，3周内，2周内，1周内，或24小时以内，更优选12小时以内。可以同时或依次给予式I所示化合物或其可药用盐、单克隆抗体以及长春碱类药物。这种期限包括这样的治疗，其中通过相同给药途径或不同给药途径给予式I所示化合物或其可药用盐、单克隆抗体以及长春碱类药物。本发明所述联合的给药方式选自同时给药、独立地配制并共给药或独立地配制并相继给药。

本发明将酪氨酸激酶抑制剂式I所示化合物或其可药用盐与长春碱类药物联合给药，以及酪氨酸激酶抑制剂式I所示化合物或其可药用盐与单克隆抗体和长春碱类药物联合给药用于HER2+乳腺肿瘤，从而增强了抗肿瘤活性，以及改善了肿瘤疾病的治疗效果。

附图说明

图1为实施例1实验小鼠的肿瘤体积变化情况；

图2为实施例1实验小鼠的体重变化情况。

具体实施方式

实施例1：化合物I、曲妥珠单抗以及长春瑞滨两药或三药联合给药与各自单独给药对乳腺癌(HER2+)BALB/c裸小鼠的药效作用研究。

1.受试药物

药物名称：化合物I的二马来酸盐，根据CN102933574A公开的方法制备；曲妥珠单抗

购自Genentech(Roche)公司；酒石酸长春瑞滨由江苏豪森药业股份有限公司提供。

配制方法：化合物I的二马来酸盐用0.1％Tween-80(w/v)配制；曲妥珠单抗先用原研厂家提供的溶剂复溶，然后用生理盐水稀释；酒石酸长春瑞滨用生理盐水稀释。

2.实验动物

BALB/c裸小鼠，5周龄，雌性，购自上海灵畅生物科技有限公司。实验动物使用许可证号：SCXK(沪)2018-0003；动物合格证号：2013001838317；饲养环境：SPF级。

3.实验步骤

裸小鼠皮下接种人乳腺癌BT-474细胞(人乳腺癌BT-474细胞购自中国科学院细胞库。BT-474细胞用10-cm培养皿贴壁培养，培养条件为DMEM培养基中加10％胎牛血清以及青、链霉素，于37℃、含5％CO2空气的培养箱中培养。一周2-3次传代,当细胞呈指数生长期时，胰酶消化、收集细胞，计数，接种)，待肿瘤生长至100-150mm3后，根据肿瘤体积将动物分组(D0)。小鼠静脉注射(IV),或灌胃(i.g.)给药，每天1次(QD)、每7天(Q7D)、或每周2次(BIW)；给药体积10mL/kg；溶剂组给予相同体积的“溶剂”；具体给药剂量和给药方案见表1。吡咯替尼以盐计算，长春瑞滨以游离碱计算。每周测2次肿瘤体积，称小鼠体重，记录数据。

本实验动物的使用及福利遵照“国际实验动物评估和认可委员会(AAALAC)”的规定执行。每天监测动物的健康状况及死亡情况，例行检查包括观察受试物和药物对动物日常行为表现的影响如行为活动，体重变化，外观体征等。

实验指标为考察药物对肿瘤生长的影响，具体指标为T/C％或抑瘤率TGI(％)。

每周2次用游标卡尺测量肿瘤直径,肿瘤体积(V)计算公式为：

肿瘤体积(V)计算公式为：

V＝1/2×a×b2，其中a、b分别表示长、宽。

T/C(％)＝(T-T₀)/(C-C0)×100％，其中T、C为实验结束时的肿瘤体积；T0、C0为实验开始时的肿瘤体积。

抑瘤率(TGI)(％)＝100-T/C(％)。

当肿瘤出现消退时，抑瘤率(TGI)(％)＝100-(T-T0)/T0×100

如果肿瘤比起始体积缩小，即T<T0或C<C0时，即定义为肿瘤部分消退(PR)；如果肿瘤完全消失，即定义为肿瘤完全消退(CR)。

实验结束、达到实验终点、或肿瘤体积达到1500mm³，CO2麻醉处死动物，随后解剖取瘤并拍照。

表1：实验方案

注：曲妥珠单抗:首剂加倍；BIW：每周2次；IV：静脉注射；i.g.,灌胃；QD：每天1次。加黑、划线部分为药物给药频率，其他部分为溶剂给药频率。BIW溶剂：生理盐水；QD溶剂：0.1％Tween 80；Q7D溶剂：生理盐水。

结果如表2所示，长春瑞滨单用能够抑制HER2阳性人乳腺癌BT-474裸小鼠皮下移植瘤的生长，而式I化合物单用和曲妥珠单抗单用均未见明显抑制人乳腺癌裸BT-474小鼠皮下移植瘤的生长。式I化合物和长春瑞滨联用抗肿瘤效果非常显著，联合给药具有协同作用，肿瘤抑制率为96％，有2/6肿瘤部分消退。式I化合物、曲妥珠单抗和长春瑞滨联用抗肿瘤作用非常显著，肿瘤抑制率为141％，有6/6肿瘤部分消退。式I化合物、曲妥珠单抗和长春瑞滨联用抗肿瘤作用显著强于式I化合物和长春瑞滨合联用，或者式I化合物和曲妥珠单抗联用(P<0.05)，而且毒性没有明显增加。所有荷瘤小鼠均没有出现明显的体重下降情况，表明荷瘤小鼠对该剂量下药物单用或联用的耐受性良好。

实施例2：化合物I与卡培他滨联合给药与各自单独给药对乳腺癌(HER2+)BALB/c裸小鼠的药效作用研究。

1.受试药物

药物名称：化合物I的二马来酸盐，根据CN102933574A公开的方法制备；卡培他滨 由江苏恒瑞医药股份有限公司提供。

配制方法：化合物I的二马来酸盐用蒸馏水配成所需浓度；卡培他滨用柠檬酸缓冲液配制。

2.实验动物

BALB/c A-nude裸小鼠，6-7周，雌性，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。合格证号：SCXK(沪)2007－0005。饲养环境：SPF级。

3.实验步骤

裸小鼠皮下接种人乳腺癌BT-474细胞，待肿瘤生长至100-200mm³后，将动物随机分组(d0)。给药剂量和给药方案见表3。每周测2－3次瘤体积，称鼠重，记录数据。肿瘤体积(V)计算公式为：

V＝1/2×a×b²其中a、b分别表示长、宽。

T/C(％)＝(T-T₀)/(C-C₀)×100其中T、C为实验结束时的肿瘤体积；T₀、C₀为实验开始时的肿瘤体积。

表3.化合物I与卡培他滨联用对人乳腺癌BT-474裸小鼠移植瘤的疗效

D0：第一次给药时间；P值指与对照相比。对照组n＝10，治疗组n＝6。

结果如表3所示，式(I)化合物(5mg/kg)与卡培他滨(359mg/kg)联用相比卡培他滨单药具有显著抗肿瘤效果，肿瘤抑制率为94％，有1/6肿瘤部分消退。

实施例1中式(I)化合物(1.5mg/kg)与长春瑞滨(7mg/kg)联用的抗肿瘤效果与式(I)化合物(5mg/kg)与卡培他滨(359mg/kg)联用的抗肿瘤效果非常相近，但式(I)化合物(1.5mg/kg)与长春瑞滨(7mg/kg)联用可显著降低式(I)化合物的用量，降低了毒副作用的风险。