阅读说明：本技术 一种用于治疗老年痴呆的药物组合物及其用途 (Medicine composition for treating senile dementia and application thereof ) 是由 徐颖 刘海英 王程圆 李雅楠 王书惠 周洋 白吉祥 于 2020-08-05 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种含有特定质量比的(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺和羟基缬草烯酸的药物组合物。具体而言,该药物组合物以(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺和羟基缬草烯酸作为药物活性成分,且两种药物活性成分之间的质量比为15:3-7。该药物组合物在老年痴呆,特别是阿尔茨海默病的治疗中是特别有用的。(The invention discloses a pharmaceutical composition containing (1R,2R) -N- [ 5-fluoro-2- (trifluoromethoxy) phenyl ] -2- (4-sulfamoylphenyl) cyclopropanecarboxamide and hydroxy valerenic acid in a specific mass ratio. Specifically, the pharmaceutical composition takes (1R,2R) -N- [ 5-fluoro-2- (trifluoromethoxy) phenyl ] -2- (4-sulfamoylphenyl) cyclopropanecarboxamide and hydroxyvaleric acid as pharmaceutical active ingredients, and the mass ratio of the two pharmaceutical active ingredients is 15: 3-7. The pharmaceutical composition is particularly useful in the treatment of senile dementia, particularly alzheimer's disease.)

一种用于治疗老年痴呆的药物组合物及其用途

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种用于治疗老年痴呆的药物组合物及其用途。

背景技术

衰老(senescence)是伴随生命发生、发展过程中的一种活动，是机体从构成物质、组织结构到生理功能的丧失和退化过程。人体衰老过程中的生理变化主要体现在机体组织细胞和构成物质的丧失，机体代谢率的减缓，机体和器官功能减退。衰老过程是从受精卵到死亡之间持续发生的，只是到了一定的阶段衰老的特征才比较明显地显现出来。一般认为，人的年龄在45至59岁为老年前期或初老期，60岁至89岁为老年期，90岁以上为长寿期。

老年病(Senile Diseases)是指人在老年期所患的与衰老有关的，并且具有自身特点的疾病。老年人由于组织结构和生理机能的不断减退，对疾病的抗御能力和反应性也会出现不同程度的降低，因此老年人的疾病谱与年轻人不同，即使患有同一种疾病，老年人和年轻人的临床表现和疾病进展也不尽相同。一般而言，老年病分为三种类型，第一种是“老年人特有的疾病”，是指在老年人变老的过程中，伴随着机能衰退和障碍发生的疾病，这类疾病只有老年人才会得，并带有老年人的特征，如老年痴呆、老年性耳聋、老年性精神病等；第二种是“老年人常见的疾病”，其与老年人的病理性老化、机体免疫功能下降、长期劳损等因素有关，这类疾病既可在老年前期发生，也可能在老年期发生，例如高血压病、冠心病、糖尿病、恶性肿瘤等；第三种是“青中老年皆可发生的疾病”，这类疾病在各年龄层都有发生，但因老年人机能衰退，同样的病变，在老年人则有其特殊性，例如消化性溃疡在青、中、老年皆可发生，但老年人易发生癌变或发生并发症。

老年痴呆，又称老年性痴呆、老年痴呆症，是指发生于老年期的各种痴呆综合征，包括阿尔茨海默病、血管性痴呆、混合性痴呆等，其中以阿尔茨海默病为最典型的老年痴呆。阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)，是一种好发于70岁以上老年人的，临床上以记忆障碍、失语、失用、失认、视空间技能损害、执行功能障碍以及人格和行为改变等全面性痴呆表现为特征的进行性发展的神经系统退行性疾病。该病起病隐匿，病因迄今未明，一般认为与家族史、头部外伤、低教育水平、甲状腺病、母育龄过高或过低、病毒感染等因素有关。血管性痴呆是指由缺血性卒中、出血性卒中和造成记忆、认知和行为等脑区低灌注的脑血管疾病所致的严重认知功能障碍综合征。血管性痴呆并非老年人特有，但老年人确实是血管性痴呆的高发群体。混合性痴呆的病人同时具备上述两种痴呆的特点，例如起病隐匿，认知功能渐进性地减退，但病人同时又有高血压、高脂血症、糖尿病等多种疾病，在某一段时间里又多次发生脑血管意外，使智力衰退在缓慢进展的基础上，又出现阶梯式的下降，并出现神经系统的局灶性症状和体征，同时逐步丧失自知力。随着研究的深入，这些类型的老年痴呆之间的相似性越来越受到人们的重视，例如在病理改变上都出现脑内β-淀粉样蛋白沉积、神经元变性和死亡、神经纤维缠结等特征，行为上均表现为认知功能缺损、行动缓慢、动作失调等。

目前，老年痴呆在临床上主要采取对症治疗、益智药或改善认知功能的药物作为治疗手段。由于老年痴呆的发病机制十分复杂，尽管医学界已经为寻找老年痴呆的有效治疗药物花费了巨大的时间和精力，但仍然尚无特效药物或方法能够逆转和阻止老年痴呆病情的恶化和进展。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种治疗老年痴呆的药物组合物及其用途。

本发明的发明人通过实验意外地发现，含有特定质量比的(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺和羟基缬草烯酸的药物组合物具有改善记忆功能障碍和空间认知障碍的作用，因而可以用于治疗(包括缓解和改善)老年痴呆，特别是阿尔茨海默病。

为此，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包含药物活性成分和药学上可接受的载体，其中所述药物活性成分是：a)(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺，和b)羟基缬草烯酸，并且药物活性成分a)和b)之间的质量比为15:3-7。

在本发明的一个实施方案中，所述药物组合物中的所述两种药物活性成分a)和b)之间的质量比为15:3。

在本发明的另一个实施方案中，所述药物组合物中的所述两种药物活性成分a)和b)之间的质量比为15:5。

在本发明的另一个实施方案中，所述药物组合物中的所述两种药物活性成分a)和b)之间的质量比为15:7。

本发明所使用的(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺具有以下结构式：

该化合物先前描述于专利文献WO2014/019023A1(中间体DF)中，并可根据该专利文献的说明书第95页描述的方法制备。专利文献WO2014/019023A1一般地涉及可用于α7烟碱乙酰胆碱受体(α7nAChR)的正调节的化合物及其在治疗或预防其中α7nAChR的正调节是有利的疾病中的用途，所述疾病例如认知缺陷、炎性疾病、神经性疼痛等。但是，该文献并未公开其任何中间体化合物具有任何医学用途。

羟基缬草烯酸(CAS NO:1619-16-5)可以是化学合成产物、从植物提取物例如缬草属(valeriana)植物提取物分离或采用其它方式制备得到。例如，本发明所述的羟基缬草烯酸可以从缬草属植物提取物分离，所述提取物可通过用石油醚、乙酸乙酯和/或含水醇(例如具有40–80v/v％之间的醇含量的含水醇)提取缬草属植物的根和/或根茎得到。目前，已知缬草属是最常用的用于治疗失眠症和焦虑的草药之一，但是关于羟基缬草烯酸的生物活性鲜有报道。

本发明所述的药物组合物还包括药学上可接受的载体。为了制备所述药物组合物，可以采用本领域内通常使用的任何药学上可接受的载体。

例如，为了制备用于口服给药的固体剂型，可以使用本领域已知的固体载体，如乳糖、微晶纤维素、蔗糖、环糊精、甘露醇、***胶、羧甲基淀粉钠、玉米淀粉、马铃薯淀粉、滑石粉、硬脂酸镁、明胶等。另外，可使用任何其它通常用于矫味、着色、防腐等目的的载体，只要它们和活性成分或已使用的成分相容即可。

再如，为了制备用于口服给药的液体剂型，可以使用本领域已知的液体载体，如水、乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇以及植物油如花生油、芝麻油、大豆油、橄榄油等。

为了制备胃肠外给药的剂型，可以使用本领域已知的无菌载体，如注射用水、注射用油如大豆油、花生油、蓖麻油、其它注射用溶剂如乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、油酸乙酯、二甲基乙酰胺等。如果需要，还可以使用各种添加剂如润湿剂、增溶剂、乳化剂、助悬剂、缓冲剂、抗氧剂、抑菌剂、等渗调节剂等。对于注射用无菌粉末，还可以使用填充剂与保护剂如乳糖、海藻糖、甘露醇、甘氨酸和人血清白蛋白等。

本发明所述的药物组合物可以通过任何适当的给药途径如口服、肺部、局部(包括口腔和舌下)、透皮、脑池内、腹腔内和胃肠外途径给药。优选地，本发明所述的药物组合物通过口服途径给药。应理解，优选的给药途径取决于待治疗的患者的一般情况、年龄、性别、体重、待治疗疾病的严重程度等因素，并由主治医师根据经验判断。

本发明所述的药物组合物可根据本领域的常规制剂技术制成具体的剂型，如口服给药的剂型(例如片剂、粉末剂、颗粒剂、丸剂、锭剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂、混悬剂、糖浆剂或酏剂)、胃肠外给药的剂型(例如无菌的可注射溶液、分散液、混悬液、乳液和在使用前重新溶解于无菌的可注射溶液或分散液的注射用无菌粉末)。

本发明还提供了一种本发明的药物组合物在制备用于治疗老年痴呆的药物中的用途。优选的，所述老年痴呆的类型为阿尔茨海默病。

本发明所述的含有特定比例的(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺和羟基缬草烯酸的药物组合物特别适合用于治疗老年痴呆，特别是阿尔茨海默病。

为了使本发明的实质和精神得到进一步理解，下面结合具体实施例对本发明的优选实施方案及其效果进行描述。但是，应当理解，这些描述只是用于进一步说明本发明的特征和优点，而绝非对本发明的权利要求构成任何限制。

具体实施方式

实施例1

药物组合物1

称取150mg(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺和30mg羟基缬草烯酸，在研钵中充分混合均匀，即得粉末剂(散剂)形式的本发明的药物组合物1。

实施例2

药物组合物2

称取150mg(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺和50mg羟基缬草烯酸，在研钵中充分混合均匀，即得粉末剂(散剂)形式的本发明的药物组合物2。

实施例3

药物组合物3

称取150mg(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺和70mg羟基缬草烯酸，在研钵中充分混合均匀，在研钵中充分混合均匀，即得粉末剂(散剂)形式的本发明的药物组合物3。

实验例1本发明的药物组合物对β淀粉样蛋白诱导的PC12细胞阿尔茨海默病体外模型的保护作用

本实验的目的是观察本发明的药物组合物对β淀粉样蛋白_1-42(Aβ42)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC 12)细胞损伤的改善作用。

1、实验材料

PC 12细胞系

2、实验物质

β淀粉样蛋白_1-42(Aβ42)、3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基-2-H-四唑鎓溴化物(MTT)、(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺(以下简称化合物A)、羟基缬草烯酸(以下简称化合物B)。

3、实验方法

(1)β淀粉样蛋白_1-42(Aβ42)诱导的PC 12细胞损伤模型的建立

将PC12细胞在37℃、5％CO₂的培养箱中培养于含有5％马血清、10％胎牛血清、2.0mmol/L谷氨酰胺、100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的DMEM培养基中。2天后，将细胞以5000个细胞/孔的密度接种于预先由多聚赖氨酸包被的96孔培养板中，然后放回培养箱中继续培养。继续培养1天后，建立Aβ42诱导的损伤模型：将2μL的浓度为500μmol/mL的Aβ42加入到含有PC12细胞的96孔板的每个孔(每孔含100μL的培养液)中，使得每孔Aβ42的终浓度为10μmol/mL。另设空白对照组，添加不含Aβ42的等量培养基。

(2)给药方法

将96孔板分为5组，每组18个孔，然后按照以下给药方案施加药物：

空白对照组：向每个孔中加入20μL的上述DMEM培养基。

模型组：向每个孔中加入20μL的上述DMEM培养基。

化合物A组：向每个孔中加入20μL的含有1.5×10^-6mg/mL化合物A的上述DMEM培养基。

化合物B组：向每个孔中加入20μL的含有0.5×10^-6mg/mL化合物B的上述DMEM培养基。

药物组合物组：向每个孔中加入20μL的含有1.5×10^-6mg/mL化合物A和0.5×10^{- 6}mol/mL化合物B的上述DMEM培养基。

然后，将96孔板放回培养箱继续培养1天。

(3)MTT测定法

向96孔板的每孔中加入10μL的MTT(溶解于PBS中，浓度为5mg/mL)，置于37℃、5％CO₂的培养箱中培养2小时，然后弃去培养基，加入100μL的DMSO，于37℃振荡30分钟，待紫色结晶完全溶解后，用酶标仪测定波长为570纳米处的吸光度值(OD 570)，并用给药组的OD值占对照组OD值的百分比反映细胞的生存率。各给药组的相对于空白对照组的细胞生存率(％)的计算方法如下：

相对于空白对照组的细胞生存率(％)＝[其他组的OD 570值/空白对照组的OD570值]×100％。

4、实验结果

本实验的结果如下表1所示。

表1本发明的药物组合物对Aβ42诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC 12)细胞损伤模型的改善作用

注：结果表示为均值±标准差，**表示与模型组比较，p<0.01。

5、协同作用的评估

以“治疗率(％)”参数作为对象，评估本发明的药物组合物中的活性成分化合物A和化合物B在对Aβ42诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC 12)细胞损伤模型的改善作用方面的协同指数。

具体而言，协同指数采用金正均q值法获得，其中q值由以下公式计算得到：

q＝P_A+B/(P_A+P_B-P_A×P_B)。

上式中，P_A、P_B和P_A+B分别为化合物A组、化合物B组和药物组合物组(即化合物A和化合物B联用)的治疗率。在本实验中，治疗率用采用以下公式来计算：

治疗率＝[(药物组的相对于空白对照组的细胞生存率-模型组的相对于空白对照组的细胞生存率)/模型组的相对于空白对照组的细胞生存率]×100％。

根据计算所得到的q值，可以判断化合物A和化合物B两种药物联合使用时是否会产生协同作用。q<1时，说明两种药物联用后产生拮抗作用；q＝1时，说明两种药物联用后产生相加作用；q>1时，说明两种药物联用后产生协同作用。

经计算，化合物A和化合物B两种药物联合使用时的协同指数(q)为1.88。

以上结果说明，对于(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺、羟基缬草烯酸而言，无论是单独使用还是组合使用，对于Aβ42诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC 12)细胞损伤均具有一定的直接保护作用。特别地，当将化合物A和化合物B联合使用(特别是以15:3的特定的重量配比)时，可以显著提高这种保护作用，并产生明显的协同作用。

实验例2本发明的药物组合物对实验性阿尔茨海默病大鼠的治疗效果的研究

本实验的目的是观察本发明的药物组合物对实验性阿尔茨海默病大鼠的体内治疗作用。

1、实验动物

健康雄性SD大鼠，体重200±20g。将动物在22℃、50％相对湿度和12小时光照-12小时黑暗条件下适应两天。动物可自由进食和饮水。

2、实验物质

(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺(以下简称化合物A)、羟基缬草烯酸(以下简称化合物B)、鹅蒿蕈氨酸(ibotenic acid，IBO)。

3、实验方法

大鼠阿尔茨海默病模型建立：采用基底前脑注射鹅蒿蕈氨酸诱发大鼠阿尔茨海默病模型。造模成功后，将实验动物随机分组，每组20只动物。各实验组的给药方案总结如下：

正常对照组：选用未经建模的SD大鼠，给予正常食物和饮用水，持续90天。

模型组：选用鹅蒿蕈氨酸诱发的阿尔茨海默病模型SD大鼠，给予正常食物和饮用水，持续90天。

化合物A组：除给予正常食物和饮用水外，还灌胃给予大鼠(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺，剂量为150mg/kg/日，每日一次，持续90天。

化合物B组：除给予正常食物和饮用水外，还灌胃给予大鼠羟基缬草烯酸，剂量为50mg/kg/日，每日一次，持续90天。

药物组合物组：除给予正常食物和饮用水外，还灌胃给予大鼠(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺(剂量为150mg/kg/日)和羟基缬草烯酸(剂量为50mg/kg/日)，每日一次，持续90天。

在给药90天后，将各组实验动物放置于避暗箱系统的明箱内。避暗箱是利用大鼠具有趋暗避明的习性而设计的装置，一半是明室，一半是暗室，中间通过小洞相连，对记忆过程特别是记忆再现具有较高的灵敏度。当大鼠进入暗箱后，进行电刺激1秒，然后取出动物。7天后重复上述实验，记录大鼠由明箱进入暗箱的时间以及次数、数量。

4、实验结果

本实验的结果如表3所示。

表3本发明的药物组合物对阿尔茨海默病模型SD大鼠的记忆功能障碍的改善作用

(n＝20，结果表示为组内平均值±标准差，**表示与模型组比较，p<0.01)

此外，在给药90天后，还将各组实验动物进行Morris水迷宫行为学实验。该实验连续进行7天，其中第1-6天进行大鼠训练，第7天进行行为学实验。本实验的结果如表4所示。

表4本发明的药物组合物对阿尔茨海默病模型SD大鼠的空间认知障碍的改善作用

(n＝20，结果表示为组内平均值±标准差，**表示与模型组比较，p<0.01)

由表3-4的结果可知，对于(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺、羟基缬草烯酸而言，无论是单独使用还是组合使用，对于阿尔茨海默病模型SD大鼠的记忆功能障碍和空间认知障碍具有一定的改善作用。但是，申请人意外地发现，当将(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺和羟基缬草烯酸以15:5的特定的质量比组合使用时，与单独使用的两种化合物相比，具有显著更好的改善作用。以上结果提示本发明的含有特定质量比的(1R,2R)-N-[5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基]-2-(4-氨磺酰基苯基)环丙烷甲酰胺和羟基缬草烯酸的药物组合物具有改善记忆功能障碍和空间认知障碍的作用，因而可以用于治疗(包括缓解和改善)老年痴呆，特别是阿尔茨海默病。

以上所述仅是本发明的优选实施方式。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和原理的前提下，还可以做出若干改进、修饰和等同替换等，这些改进、修饰和等同替换后的技术方案也应视为落在本发明的保护范围之内。