治疗癌症的方法及组合疗法
阅读说明：本技术 治疗癌症的方法及组合疗法 (Methods and combination therapies for treating cancer ) 是由 C·H·博肖夫 R·切萨里 C·马萨塞斯 N·帕坦 P·A·李 S·L·温斯基 于 2018-12-17 设计创作，主要内容包括：本发明涉及通过向有此需要的患者施用组合疗法来治疗癌症的方法,该组合疗法包含MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂的组合、或MEK抑制剂和PARP抑制剂的组合、或MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂和PARP抑制剂的组合。(The present invention relates to methods of treating cancer by administering to a patient in need thereof a combination therapy comprising a MEK inhibitor and a PD-1 axis binding antagonist, or a MEK inhibitor and a PARP inhibitor, or a MEK inhibitor and a PD-1 axis binding antagonist and a PARP inhibitor.)
技术领域
本发明涉及用于治疗癌症的方法和组合疗法。特别是，本发明涉及通过施用组合疗法来治疗癌症的方法和组合疗法，该组合疗法包含MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂的组合、或MEK抑制剂和PARP抑制剂的组合、或MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂和PARP抑制剂的组合。还描述了本发明的组合的药学用途。
背景技术
PD-L1在许多癌症中过表达且常与不良预后相关(Okazaki T et al.,Intern.Immun.2007 19(7)：813)(Thompson RH et al.,Cancer Res 2006,66(7)：3381)。有趣的是，与正常组织和外周血中的T淋巴细胞相反，大多数肿瘤浸润性T淋巴细胞主要表达PD-1。肿瘤反应性T细胞上的PD-1可促成减弱的抗肿瘤免疫反应(Ahmadzadeh et al.,Blood 2009 1 14(8)：1537)。这可能是因为利用由表达PD-L1的肿瘤细胞与表达PD-1的T细胞相互作用所介导的PD-L1信号传导来导致T细胞活化减弱并回避免疫监视(Sharpe etal.,Nat Rev 2002,Keir ME et al.,2008 Annu.Rev.Immunol.26：677)。因此，抑制PD-L1/PD-1相互作用可能增强由CD8+T细胞介导的肿瘤灭杀。
透过其直接配体(例如PD-L1、PD-L2)抑制PD-1轴信号传导已被提出作为增强T细胞免疫力以用于治疗癌症的手段(例如肿瘤免疫性)。再者，通过抑制PD-L1与结合伴侣B7-1结合已观察到类似的T细胞免疫力增强。其他有利的治疗性处理方案可将PD-1受体/配体的相互作用的阻断与其他抗癌剂组合起来。仍然需要用于治疗、稳定、预防和/或延迟各种癌症发展的有利的疗法。
数种PD-1轴拮抗剂，包括PD-1抗体纳武单抗(nivolumab)(Opdivo)、派姆单抗(pembrolizumab)(Keytruda)和PD-L1抗体阿维单抗(avelumab)(Bavencio)、杜瓦单抗(durvalumab)(Imfinzi)和阿特珠单抗(azezolizumab)(Tecentriq)在近几年由美国食品和药物管理局(FDA)批准治疗癌症。
由丝裂原活化蛋白激酶激酶(亦称为MAP2K、MEK或MAPKK)为一种激酶，其使经丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)磷酸化。该MAPK信号传导途径在细胞增殖、存活、分化、运动和血管生成中起关键作用。已鉴定出四种不同的MAPK信号传导级联反应，其中之一涉及细胞外信号调节的激酶ERK1和ERK2及其上游分子MEK1和MEK2。(Akinleye,et al.,Journal ofHematology&Oncology 2013 6：27)。一直以来MEK1和MEK2的抑制剂为发现抗肿瘤药物之焦点，曲美替尼(trametinib)被FDA批准用于治疗BRAF突变体黑素瘤且许多其他MEK1/2抑制剂正在临床研究中进行研究。
聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)参与细胞中DNA修复的天然过程。抑制PARP已被证明是针对与双股DNA修复基因中的种系突变相关的肿瘤的有效治疗策略，此治疗策略通过诱导合成致死进行(Sonnenblick,A.,et al.,Nat Rev Clin Oncol,2015.12(1),27-4)。一种PARP抑制剂(PARPi)，奥拉帕尼(olaparib)，于2014年被FDA批准用于治疗种系BRCA突变(gBRCAm)的晚期卵巢癌。最近，PARP抑制剂尼拉帕尼和芦卡帕尼(rucaparib)也被FDA批准用于治疗卵巢癌。
目前仍需要寻找用于治疗癌症患者或癌症患者的特定群体的有利的组合疗法和可能的特定给药方案，以在与单一药剂治疗或双重药剂治疗相比较时可改善临床抗肿瘤活性，及可选择地改善组合安全谱。
以下描述的各实施方式可与任一项本文所描述的其他实施方式组合，该任一项其他实施方式与该与其组合的实施方式并无不符。此外，本文所描述的各实施方式设想在其范围内的本文所描述的化合物的药学上可接受的盐。因此，短语“或其药学上可接受的盐”隐含在本文所描述的所有化合物的描述中。在如下述的方式内的实施方式可与在相同方式或不同方式内的任何其他无不相符的实施方式组合。
在一个实施方式中，本发明提供包含独立为治疗有效量的MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂的组合疗法。
在一个实施方式中，本发明提供包含独立为治疗有效量的MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和PARP抑制剂的组合疗法。
在一个实施方式中，本发明提供用于治疗癌症的方法，该方法包含对有此需要的患者施用一定量的PARP抑制剂、一定量的PD-1轴结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂，其中所述量一起有效地治疗癌症。
在该实施方式的一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该患者的癌症为RAS突变体癌症。在一些实施方式中，该癌症为KRAS突变体癌症或KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该癌症为HRAS突变体癌症或HRAS相关癌症。在一些实施方式中，该癌症为NRAS突变体癌症或NRAS相关癌症。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该PD-1轴拮抗剂为选自纳武单抗和派姆单抗的抗PD-1抗体。在一些实施方式中，该PD-1轴拮抗剂为选自阿维单抗、杜瓦单抗和阿特珠单抗的抗PD-L1抗体。在一些实施方式中，该PD-1轴结合拮抗剂为阿维单抗。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该PARP抑制剂选自奥拉帕尼、尼拉帕尼、BGB-290和他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐。在一些实施方式中，该PARP抑制剂为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐。在一些实施方式中，该PARP抑制剂为甲苯磺酸他拉唑帕尼。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该MEK抑制剂选自：曲美替尼(trametinib)、可美替尼(cobimetinib)、瑞美替尼(refametinib)、西美替尼(selumetinib)、必尼美替尼(binimetinib)、PD0325901、PD184352、PD098059、U0126、CH4987655、CH5126755和GDC623或其药学上可接受的盐。在一些实施方式中，该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为胰腺癌。在一些实施方式中，该癌症为转移性胰腺癌，其中该患者已接受至少一个先前系列的用于癌症的化学疗法。在一些实施方式中，该化学疗法为FOLFIRINOX(亚叶酸、5-氟尿嘧啶、伊立替康(irinotecan)和奥沙利铂(oxaliplatin)的组合)、吉西他滨或吉西他滨与白蛋白-紫杉醇(nab-paclitaxel)的组合。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为非小细胞肺癌(NSCLC)。在一些实施方式中，该癌症为局部晚期或转移性NSCLC。在一些实施方式中，该患者已接受至少一个先前系列的用于局部晚期或转移性NSCLC的治疗。在一些实施方式中，该NSCLC为KRAS突变体癌症或KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该NSCLC癌症为KRAS突变体癌症。在一些实施方式中，该癌症为局部晚期或转移性NSCLC，其中该患者已接受至少一个先前系列的用于该局部晚期或转移性NSCLC的治疗且其中该NSCLC为KRAS突变体癌症。在一些实施方式中，先前治疗为基于铂的化学疗法、多西紫杉醇、PD-1轴拮抗剂、或化学疗法与PD-1轴拮抗剂的组合。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为KRAS突变体癌(包括，但不限于结肠直肠癌和胃癌)。
在另一实施方式中，本发明提供用于治疗癌症的方法，其包含对有此需要的患者施用一定量的PARP抑制剂、一定量的PD-1轴结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂，其中该PARP抑制剂为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐，该PD-1轴拮抗剂为阿维单抗且该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效地治疗癌症。
在该实施方式的一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该PARP抑制剂为他拉唑帕尼甲苯磺酸盐且该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为游离碱形式的必尼美替尼。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为必尼美替尼的药学上可接受的盐。
在该实施方式的一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐以约0.5mg QD、约0.75mg QD或约1.0mg QD的量口服施用。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，阿维单抗以每2周(Q2W)约800mg或每2周(Q2W)约10mg/kg的量静脉内施用。在一个实施方式中，阿维单抗在60分钟内静脉内施用。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该MEK抑制剂为游离碱形式的必尼美替尼。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为结晶型必尼美替尼，即，必尼美替尼的游离碱的结晶形式。在一个实施方式中，在至少一个28天的治疗周期中，必尼美替尼以(a)约30mg BID或约45mg每日二次(BID)的量每日口服施用，或(b)约30mgBID或约45mg BID的量每日口服施用共三周，接着一周不施用必尼美替尼。
在该实施方式的一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该患者的癌症为RAS突变体癌症。在一些实施方式中，该癌症为KRAS突变体癌症或KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该癌症为HRAS突变体癌症或HRAS相关癌症。在一些实施方式中，该癌症为NRAS突变体癌症或NRAS相关癌症。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为胰腺癌。在一些实施方式中，该癌症为转移性胰腺癌，其中该患者已接受至少一个先前系列的用于癌症的化学疗法。在一些实施方式中，该化学疗法为FOLFIRINOX(亚叶酸、5-氟尿嘧啶、伊立替康和奥沙利铂的组合)、吉西他滨或吉西他滨与白蛋白-紫杉醇的组合。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为非小细胞肺癌(NSCLC)。在一些实施方式中，该癌症为局部晚期或转移性NSCLC。在一些实施方式中，该患者已接受至少一个先前系列的用于局部晚期或转移性NSCLC的治疗。在一些实施方式中，该NSCLC为KRAS突变体癌症或KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该NSCLC癌症为KRAS突变体癌症。在一些实施方式中，该癌症为局部晚期或转移性NSCLC，其中该患者已接受至少一个先前系列的用于该局部晚期或转移性NSCLC的治疗，且其中该NSCLC为KRAS突变体癌症。在一些实施方式中，先前治疗为基于铂的化学疗法、多西紫杉醇、PD-1轴拮抗剂、或化学疗法与PD-1轴拮抗剂的组合。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为KRAS突变体癌，包括，但不限于结肠直肠癌和胃癌。
在另一实施方式中，本发明提供用于治疗癌症的方法，该方法包含对有此需要的患者施用一定量的PARP抑制剂、一定量的PD-1轴结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂，其中该PARP抑制剂为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐且以约0.5mg QD、约0.75mg QD或约1.0mgQD的量口服施用，该PD-1轴拮抗剂为阿维单抗且以约800mg Q2W或约10mg/kg Q2W的量静脉内施用，该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐且在至少一个28天的治疗周期中以(a)约30mg BID或约45mg BID的量口服施用，或(b)约30mg BID或约45mg BID的量口服施用共三周，接着一周不施用。
在该实施方式的一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该PARP为甲苯磺酸他拉唑帕尼，该MEK抑制剂为必尼美替尼且该PD-1轴结合拮抗剂为阿维单抗。
在该实施方式的一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该患者的癌症为RAS突变体癌症。在一些实施方式中，该癌症为KRAS突变体癌症或KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该癌症为HRAS突变体癌症或HRAS相关癌症。在一些实施方式中，该癌症为NRAS突变体癌症或NRAS相关癌症。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为胰腺癌。在一些实施方式中，该癌症为转移性胰腺癌，其中该患者已接受至少一个先前系列的用于癌症的化学疗法。在一些实施方式中，该化学疗法为FOLFIRINOX(亚叶酸、5-氟尿嘧啶、伊立替康和奥沙利铂的组合)、吉西他滨或吉西他滨与白蛋白-紫杉醇的组合。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为非小细胞肺癌(NSCLC)。在一些实施方式中，该癌症为局部晚期或转移性NSCLC。在一些实施方式中，该患者已接受至少一个先前系列的用于局部晚期或转移性NSCLC的治疗。在一些实施方式中，该NSCLC为KRAS突变体癌症或KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该NSCLC癌症为KRAS突变体癌症。在一些实施方式中，该癌症为局部晚期或转移性NSCLC，其中该患者已接受至少一个先前系列的用于该局部晚期或转移性NSCLC的治疗，且其中该NSCLC为KRAS突变体癌症。在一些实施方式中，先前治疗为基于铂的化学疗法、多西紫杉醇、PD-1轴拮抗剂、或化学疗法与PD-1轴拮抗剂的组合。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为KRAS突变体癌，包括，但不限于结肠直肠癌和胃癌。
在一个实施方式中，本发明提供用于治疗癌症的方法，其包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的为必尼美替尼的MEK抑制剂、为阿维单抗的PD-L1结合拮抗剂和为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐的PARP抑制剂。
在一个实施方式中，本发明提供用于治疗癌症的方法，其包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的下列药剂：MEK抑制剂，该MEK抑制剂为必尼美替尼，其中该必尼美替尼在至少一个28天的治疗周期中以(i)约30mg BID或约45mg每日二次(BID)的量每日口服施用，或(ii)约30mg BID或约45mg BID的量每日口服施用共三周，接着一周不施用必尼美替尼；PD-1轴结合拮抗剂，该PD-1轴结合拮抗剂为阿维单抗，其中该阿维单抗以每Q2W约800mg或约10mg/kg Q2W的量在60分钟内静脉内施用；和PARP抑制剂，该PARP抑制剂为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐且以约0.5mg QD、约0.75mg QD或约1.0mg QD的量口服施用。在一个实施方式中，该PARP抑制剂为甲苯磺酸他拉唑帕尼。
在一个实施方式中，本发明提供用于治疗癌症的方法，其包含对有此需要的患者施用一定量的PD-1轴结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂，其中该PD-1轴拮抗剂为阿维单抗，该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效地治疗癌症。
在该实施方式的一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，阿维单抗以约800mg Q2W或约10mg/kg Q2W的量静脉内施用，必尼美替尼或其药学上可接受的盐在至少一个28天的治疗周期中以(a)约30mg BID或约45mg BID的量口服施用，或(b)约30mg BID或约45mg BID的量口服施用共三周，接着一周不施用必尼美替尼。
在该实施方式的一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该患者的癌症为RAS突变体癌症。在一些实施方式中，该癌症为KRAS突变体癌症或KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该癌症为HRAS突变体癌症或HRAS相关癌症。在一些实施方式中，该癌症为NRAS突变体癌症或NRAS相关癌症。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为胰腺癌。在一些实施方式中，该癌症为转移性胰腺癌，其中该患者已接受至少一个先前系列的用于该癌症的化学疗法。在一些实施方式中，该化学疗法为FOLFIRINOX(亚叶酸、5-氟尿嘧啶、伊立替康和奥沙利铂的组合)、吉西他滨或吉西他滨与白蛋白-紫杉醇的组合。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为非小细胞肺癌(NSCLC)。在一些实施方式中，该癌症为局部晚期或转移性NSCLC。在一些实施方式中，该患者已接受至少一个先前系列的用于该局部晚期或转移性NSCLC的治疗。在一些实施方式中，该NSCLC为KRAS突变体癌症或KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该NSCLC癌症为KRAS突变体癌症。在一些实施方式中，该癌症为局部晚期或转移性NSCLC，其中该患者已接受至少一个先前系列的用于该局部晚期或转移性NSCLC的治疗且其中该NSCLC为KRAS突变体癌症。在一些实施方式中，先前治疗为基于铂的化学疗法、多西紫杉醇、PD-1轴拮抗剂、或化学疗法与PD-1轴拮抗剂的组合。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为KRAS突变体癌，包括，但不限于结肠直肠癌和胃癌。
在另一实施方式中，本发明提供用于治疗癌症的方法，其包含对有此需要的患者施用一定量的PARP抑制剂和一定量的MEK抑制剂，其中该PARP抑制剂为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐，该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效地治疗癌症。
在该实施方式的一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐以约0.5mg QD、约0.75mg QD或约1.0mg QD的量口服施用，必尼美替尼或其药学上可接受的盐在至少一个28天的治疗周期中以(a)约30mg BID或约45mg BID的量口服施用，或(b)约30mg BID或约45mg BID的量口服施用共三周，接着一周不施用必尼美替尼。
在该实施方式的一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该患者的癌症为RAS突变体癌症。在一些实施方式中，该癌症为KRAS突变体癌症或KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该癌症为HRAS突变体癌症或HRAS相关癌症。在一些实施方式中，该癌症为NRAS突变体癌症或NRAS相关癌症。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为胰腺癌。在一些实施方式中，该癌症为转移性胰腺癌，其中该患者已接受至少一个先前系列的用于该癌症的化学疗法。在一些实施方式中，该化学疗法为FOLFIRINOX(亚叶酸、5-氟尿嘧啶、伊立替康和奥沙利铂的组合)、吉西他滨或吉西他滨与白蛋白-紫杉醇的组合。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为非小细胞肺癌(NSCLC)。在一些实施方式中，该癌症为局部晚期或转移性NSCLC。在一些实施方式中，该患者已接受至少一个先前系列的用于该局部晚期或转移性NSCLC的治疗。在一些实施方式中，该NSCLC为KRAS突变体癌症或KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该NSCLC癌症为KRAS突变体癌症。在一些实施方式中，该癌症为局部晚期或转移性NSCLC，其中该患者已接受至少一个先前系列的用于该局部晚期或转移性NSCLC的治疗且其中该NSCLC为KRAS突变体癌症。在一些实施方式中，先前治疗为基于铂的化学疗法、多西紫杉醇、PD-1轴拮抗剂、或化学疗法与PD-1轴拮抗剂的组合。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症为KRAS突变体癌，包括，但不限于结肠直肠癌和胃癌。
在本发明的所有前述实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症在PD-L1表达方面的肿瘤比例评分小于约1％、或等于或大于约1％、5％、10％、25％、50％、75％或80％。
在本发明的所有前述实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症的杂合性(LOH)评分损失约5％或更多、10％或更多、14％或更多、15％或更多、20％或更多、或25％或更多。
在该实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症在至少一个DDR基因中为DDR缺陷阳性。在一些实施方式中，该癌症在至少一个选自BRCA1、BRCA2、ATM、ATR、CHK2、PALB2、MRE11A、NMB RAD51C、MLH1、FANCA和FANC的DDR基因中为DDR缺陷阳性。
于本发明的所有前述实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该癌症的HRD评分为约20或更高、25或更高、30或更高、35或更高、40或更高、42或更高、45或更高、或50或更高。
在本发明的所有前述实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该方法提供的客观反应率为接受治疗的患者的至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％。
在本发明的所有前述实施方式的另一个方面中及与任何其他并无不符的方面的组合中，该方法提供的接受治疗的患者的总生存时间中位数为至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、或至少约11个月。
详细说明
通过参考以下本发明的优选实施方式的详细描述和包含在本文的实施例可更容易地理解本发明。应理解的是，本文所使用的术语仅用于描述特定的实施方式，而非意图用来限制。需进一步理解的是，除非本文中具体定义，否则本文使用的术语将具有其在该相关领域中已知的传统含义。
一般技术和定义
本文所描述或引用的技术和程序大致上为本领域的技术人员所充分理解且通常利用常规方法使用，诸如，例如描述于下列文献中的被广泛利用的方法：Sambrook et al.,Molecular Cloning：A Laboratory Manual 3d edition(2001)Cold Spring HarborLaboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y.；Current Protocols in MolecularBiology(F.M.Ausubel,et al.eds.,(2003))；Methods in Enzymology系列(AcademicPress,Inc.)：PCR 2：A Practical Approach(M.J.MacPherson,B.D.Hames andG.R.Taylor eds.(1995))、Harlow and Lane,eds.(1988)Antibodies,A LaboratoryManual,and Animal Cell Culture(R.I.Freshney,ed.(1987))；OligonucleotideSynthesis(M.J.Gait,ed.,1984)；Methods in Molecular Biology,Humana Press；CellBiology：A Laboratory Notebook(J.E.Cellis,ed.,1998)Academic Press；Animal CellCulture(R.I.Freshney,ed.,1987)；Introduction to Cell and Tissue Culture(J.P.Mather and P.E.Roberts,1998)Plenum Press；Cell and Tissue Culture：Laboratory Procedures(A.Doyle,J.B.Griffiths,and D.G.Newell,eds.,1993-8)J.Wiley and Sons；Handbook of Experimental Immunology(D.M.Weir andC.C.Blackwell,eds.)；Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells(J.M.Miller andM.P.Calos,eds.,1987)；PCR：The Polymerase Chain Reaction,(Mullis et al.,eds.,1994)；Current Protocols in Immunology(J.E.Coligan et al.,eds.,1991)；ShortProtocols in Molecular Biology(Wiley and Sons,1999)；Immunobiology(C.A.Janewayand P.Travers,1997)；Antibodies(P.Finch,1997)；Antibodies：A Practical Approach(D.Catty.,ed.,1RL Press,1988-1989)；Monoclonal Antibodies：A Practical Approach(P.Shepherd and C.Dean,eds.,Oxford University Press,2000)；Using Antibodies：ALaboratory Manual(E.Harlow and D.Lane(Cold Spring Harbor Laboratory Press,1999)；The Antibodies(M.Zanetti and J.D.Capra,eds.,Harwood AcademicPublishers,1995)；和Cancer：Principles and Practice of Oncology(V.T.DeVita etal.,eds.,J.B.Lippincott Company,1993)。
因此，本发明可更容易地理解，下文中具体定义某些技术和科学术语。除非本文件中另外具体定义，否则本文所使用的所有其他技术和科学术语具有本发明所属的领域中一般技术人员所通常理解的含义。
当用来修饰数值定义的参数(例如MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂、或PARP抑制剂的剂量，或使用本文所描述的组合疗法的治疗时间长度)时，“约”意指该参数可在用在该参数的陈述数值的至多上下10％变化。例如，约5mg/kg的剂量可在4.5mg/kg至5.5mg/kg之间变化。当用在一列参数的开头时，“约”意指用来修饰每个参数。例如约0.5mg、0.75mg或1.0mg意指约0.5mg、约0.75mg或约1.0mg。同样地，约5％或更多、10％或更多、15％或更多、20％或更多、25％或更多意指约5％或更多、约10％或更多、约15％或更多、约20％或更多、约25％或更多。
当“施用(Administration、administering)”、“治疗(treating、treatment)”应用于患者、个体、动物、人、实验受试者、细胞、组织、器官或生物流体时，其是指将外源药物、治疗剂、诊断剂或组合物与动物、人、实验受试者、细胞、组织、器官或生物流体接触。治疗细胞包括将试剂与细胞接触及将试剂与流体接触，其中该流体与该细胞接触。“施用”和“治疗”亦意指，例如通过试剂、诊断剂、结合化合物或另一细胞在体外和离体治疗细胞。术语“受试者”包括任何生物，优选为动物，更优选为哺乳动物(例如大鼠、小鼠、狗、猫和兔)且最优选为人。如临床环境中所使用的“治疗(treatment和treating)”旨在取得有益或期望的临床结果。为了本发明的目的，有益或期望的临床结果包括，但不限于下列的一项或多项：减少(或破坏)肿瘤细胞(neoplastic cell)或癌细胞(cancerous cell)的增殖、抑制肿瘤细胞转移、缩小或降低肿瘤尺寸、缓解疾病(例如癌症)、减少疾病(例如癌症)所导致的症状、提升患病(例如癌症)者的生活质量、减少治疗疾病(例如癌症)所需的其他药物的剂量、推迟疾病(例如癌症)的进展、治愈疾病(例如癌症)和/或延长患有疾病(例如癌症)的患者的存活。例如，治疗可为减轻疾病的一或数种症状或完全根除疾患(诸如癌症)。在本发明的含义内，术语“治疗”亦表示阻止、延迟疾病发作(即，临床表现疾病之前的时期)和/或降低疾病发展或恶化的风险。与未接受治疗的预期存活相比较，“治疗”亦可意指延长存活，例如与未接受如本文所描述的治疗的受试者相比较，总体存活(OS)增加和/或与未接受如本文所描述的治疗的受试者相比较，无进展存活(PFS)增加。术语“治疗”亦可指患有癌症的受试者的状况改善，例如受试者的一个或多个肿瘤的尺寸减小、受试者的一个或多个肿瘤的生长速率降低或无实质性变化、受试者体内转移减少及受试者的缓解期增加(例如与未接受治疗或接受不同治疗的患有相似癌症的受试者的一种多种度量相比较，或与同一受试者接受治疗前的一种或多种度量相比较)。用于评估患有癌症的受试者对治疗的反应的其他度量公开于下文中。
“抗体”为能够透过至少一个位于免疫球蛋白分子的可变区中的抗原识别位点与靶(诸如碳水化合物、多核苷酸、脂质、多肽，等)特异性结合的免疫球蛋白分子。如本文所使用，该术语不仅包含完整的多克隆或单克隆抗体，亦包含其抗原结合片段(诸如Fab、Fab'、F(ab')2)、Fv)、单链(scFv)和结构域抗体(包括，例如鲨鱼和骆驼科动物抗体)及包含抗体的融合蛋白，和包含抗原识别位点的免疫球蛋白分子的任何其他经修饰的构型。抗体包括任何类别的抗体，诸如IgG、IgA或IgM(或其亚类)且该抗体不需为任何特定类别。取决于免疫球蛋白的重链恒定区的抗体氨基酸序列，可将免疫球蛋白分为不同的类别。免疫球蛋白有五大类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，且其中数类可进一步被分为亚类(同种型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。对应于不同类别的免疫球蛋白的重链恒定区分别称为α、δ、ε、γ和μ。不同类别的免疫球蛋白的亚单位结构和三维构型为众所周知。
如本文所使用的术语抗体的“抗原结合片段”或“抗原结合部分”是指保留与指定抗原(例如PD-L1)特异性结合的能力的完整抗体的一个或多个片段。抗体的抗原结合功能可通过完整抗体的片段执行。包含在术语抗体的“抗原结合片段”内的结合片段的实例包括Fab；Fab'；F(ab')2；由VH和CH1结构域所组成的Fd片段；由抗体的单臂的VL和VH结构域所组成的Fv片段；单一结构域抗体(dAb)片段(Ward et al.,Nature 341：544-546,1989)和经分离的互补决定区(CDR)。
与靶(例如PD-L1蛋白质)的“优先结合”或“特异性结合”(本文可互换使用)的抗体、抗体缀合物或多肽为本领域所熟知的术语且用于测定该等特异性或优先结合的方法亦为本领域所熟知。若分子与特定细胞或物质的反应或结合较其与替代细胞或物质反应或结合更频繁、更快速、持续时间更长和/或亲和力更强，则该分子被称为表现出“特异性结合”或“优先结合”。若抗体与靶的结合较该抗体与其他物质的结合具有更强的亲和力、亲合力、更容易和/或持续时间更长，则该抗体“特异性结合”或“优先结合”该靶。例如特异性或优先结合PD-L1表位的抗体为相较于与其他PD-L1表位或非PD-L1表位结合，以较强的亲和力、亲合力、更容易和/或持续时间更长与该表位结合的抗体。通过阅读此定义亦可理解的是，例如特异性或优先结合第一靶的抗体(或部分或表位)可能或可能不与第二靶特异性结合或优先结合。因此，“特异性结合”或“优先结合”不一定需要(尽管其可包含)排他性结合。通常，但非必要，提及结合时意味着优先结合。
抗体的“可变区”是指抗体轻链的可变区或抗体重链的可变区(无论是单独或组合)。如本领域所已知，该重链和轻链的可变区各自由四个框架区(FR)组成，该四个框架区(FR)是通过三个亦称为高度可变区的互补决定区(CDR)连接。每条链中的CDR通过FR紧密靠在一起且通过来自另一条链的CDR促成抗体的抗原结合位点形成。用于测定CDR的技术至少有二种：(1)基于跨物种序列变异性的方法(即，Kabat et al.Sequences of Proteins ofImmunological Interest,(5th ed.,1991,National Institutes of Health,BethesdaMD))；(2)基于抗原-抗体复合物的晶体学研究的方法(Al-lazikani et al.,1997,J.Molec.Biol.273：927-948)。如本文所使用，CDR可指通过任一项方法或通过该二种方法的组合所定义的CDR。
可变结构域的“CDR”为可变区内的氨基酸残基，该可变区是根据Kabat定义、Chothia定义、Kabat和Chothia二者累积的定义、AbM定义、接触定义和/或构象定义、或本领域熟知的任何决定CDR的方法识别。抗体CDR可识别为最初由Kabat等人定义的高变区。参见，例如Kabat et al.,1992,Sequences of Proteins of Immunological Interest,5thed.,Public Health Service,NIH,Washington D.C。CDR的位置亦可识别为最初由Chothia等人描述的结构环结构。参见，例如Chothia et al.,Nature 342：877-883,1989。其他识别CDR的方法包括“AbM定义”(此为Kabat和Chothia之间的折衷且使用Oxford Molecular的AbM抗体建模软件(现为)推出)或基于观察到的抗原接触的CDR的“接触定义”(阐述于MacCallum et al.,J.Mol.Biol.,262：732-745,1996中)。在另一本文中称为CDR的“构象定义”的方法中，该CDR的位置可识别为对抗原结合具有焓贡献的残基。参见，例如Makabe et al.,Journal of Biological Chemistry,283：1156-1166,2008。还有其他CDR边界定义可能不严格遵循上述方法其中一者，但仍将与至少一部分的Kabat CDR重叠，尽管它们可能缩短或延长，这是鉴于预测或实验发现特定残基或残基群或甚至整个CDR并不会显著影响抗原结合。如本文所使用，CDR可指通过本领域已知的任何方法(包括方法的组合)定义的CDR。本文所使用的方法可利用根据这些方法的任一项者所定义的CDR。对任一项含有一个以上的CDR的指定的实施方式而言，该CDR可根据Kabat、Chothia、延伸的、AbM、接触和/或构象定义的任一项者定义。
“经分离的抗体”和“经分离的抗体片段”是指该纯化状态且在该等背景下意指该名称的分子基本上不含其他生物分子，诸如核酸、蛋白质、脂质、碳水化合物或其他物质，诸如细胞碎片和生长培养基。一般而言，术语“经分离的”并非意图指完全不存在此类物质或不存在水、缓冲剂或盐，除非它们以实质上干扰如本文所描述的结合化合物的实验或治疗用途的量存在。
如本文所使用的“单克隆抗体”或“mAb”或“Mab”是指基本上同质的抗体群，即，包含具有同一氨基酸序列(除了可能少量存在的可能的天然突变外)的群体的抗体分子。相反地，常规(多克隆)抗体制剂通常包括多种不同抗体，该多种不同抗体的可变结构域，特别是其CDR(其通常特异于不同表位)中具有不同氨基酸序列。修饰词“单克隆”表示该抗体是从基本上同质的抗体群获得的特性且不应被解释为需要通过任何特定方法产生抗体。例如欲根据本发明使用的单克隆抗体可通过最先由Kohler et al.(1975)Nature 256：495描述的杂交瘤方法制备，或可通过重组DNA方法制备(参见，例如美国专利案编号4,816,567)。该“单克隆抗体”亦可使用，例如Clackson et al.(1991)Nature 352：624-628和Marks etal.(1991)J.Mol.Biol.222：581-597中描述的技术从噬菌体抗体库分离。亦参见Presta(2005)J.Allergy Clin.Immunol.116：731。
“嵌合抗体”是指一种抗体及这种抗体的片段，其中重链和/或轻链的一部分与源自特定物种(例如人)或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的对应序列相同或同源，而该链的其余部分与源自另一物种(例如小鼠)或属于另一抗体类别或亚类的抗体中的对应序列相同或同源，只要它们表现所需的生物活性。
“人抗体”是指仅包含人免疫球蛋白序列的抗体。若在小鼠、小鼠细胞或源自小鼠细胞的杂交瘤中产生，人抗体可能含有鼠碳水化合物链。类似地，“小鼠抗体”或“大鼠抗体”是分别指仅包含小鼠或大鼠免疫球蛋白序列的抗体。
“人源化抗体”是指含有来自非人(例如鼠)抗体及人抗体的序列的抗体形式。此种抗体含有源自非人免疫球蛋白的最小序列。一般而言，人源化抗体将包含可变结构域(至少一个且通常为二个)的基本上全部，其中全部或基本上全部的高度可变环对应于非人免疫球蛋白的高度可变环且全部或基本上全部的FR区为人免疫球蛋白序列的FR区。该人源化抗体亦可选择地将包含至少一部分的免疫球蛋白恒定区(Fc)，通常为人免疫球蛋白的恒定区(Fc)。当需要将人源化抗体与亲本啮齿动物抗体区分时，在该抗体株的名称添加前缀“hum”、“hu”或“h”。人源化形式的啮齿动物抗体通常将包含与亲本啮齿动物抗体相同的CDR序列，但可包括某些氨基酸取代以使该人源化抗体亲和力增加、稳定性增加或出于其他原因。
“经保守修饰的变体”或“保守取代”是指以其他具有相似特征(例如电荷、侧链大小、疏水性/亲水性、骨架构象和刚性，等)的氨基酸取代蛋白质中的氨基酸，从而可经常做改变而不会改变该蛋白质的生物活性或其他所需性质，诸如抗原亲和力和/或特异性。本领域的技术人员知晓，一般而言，在多肽的非必需区域中的单一氨基酸取代基本上不会改变生物活性(参见，例如Watson et al.(1987)Molecular Biology of the Gene,TheBenjamin/Cummings Pub.Co.,p.224(4th Ed.))。此外，结构上或功能上相似的氨基酸取代不太可能破坏生物活性。下列表1中列举示例性保守性取代。
表1.示例性保守性氨基酸取代
原始残基
保守性取代
Ala(A)
Gly；Ser
Arg(R)
Lys；His
Asn(N)
Gln；His
Asp(D)
Glu；Asn
Cys(C)
Ser；Ala
Gln(Q)
Asn
Glu(E)
Asp；Gln
Gly(G)
Ala
His(H)
Asn；Gln
Ile(I)
Leu；Val
Leu(L)
Ile；Val
Lys(K)
Arg；His
Met(M)
Leu；Ile；Tyr
Phe(F)
Tyr；Met；Leu
Pro(P)
Ala
Ser(S)
Thr
Thr(T)
Ser
Trp(W)
Tyr；Phe
Tyr(Y)
Trp；Phe
Val(V)
Ile；Leu
如本文所使用的术语“PD-1轴结合拮抗剂”是指抑制PD-1轴结合伴侣与一个或多个其结合伴侣的相互作用的分子，以除去由PD-1信号传导轴上的信号传导所导致的T细胞功能障碍，导致T细胞功能恢复或增强。如本文所使用的PD-1轴结合拮抗剂包括PD-1结合拮抗剂、PD-L1结合拮抗剂和PD-L2结合拮抗剂。在一个实施方式中，该PD-1轴结合拮抗剂为PD-L1结合拮抗剂。在一个实施方式中，该PD-L1结合拮抗剂为阿维单抗。
下列表2提供用于本发明的治疗方法、药物和用途的示例性PD-1轴结合拮抗剂的氨基酸序列的表。mAb7和mAb15的CDR下方划线。该mAB7亦称为RN888或PF-6801591。mAb7(又名RN888)和mAb15公开于国际专利公开号WO2016/092419中，其全部公开内容以引用方式被并入本文中。
表2
如本文所使用的术语“PD-1结合拮抗剂”是指减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-1与一种或多种其结合伴侣(诸如PD-L1、PD-L2)相互作用所导致的信号转导的分子。在一些实施方式中，该PD-1结合拮抗剂为抑制PD-1与其结合伴侣结合的分子。在一些实施方案中，该PD-1结合拮抗剂抑制PD-1与PD-L1和/或PD-L2结合。例如，该PD-1结合拮抗剂包括抗PD-1抗体、其抗原结合片段、免疫黏附素、融合蛋白、寡肽和其他减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-1与PD-L1和/或PD-L2相互作用所导致的信号转导的分子。在一个实施方式中，PD-1结合拮抗剂减少通过或透过表达在T淋巴细胞上的细胞表面蛋白介导的负性共刺激信号(其通过PD-1介导信号传导)，从而使功能失调的T细胞的功能失调减轻。在一些实施方式中，该PD-1结合拮抗剂为抗PD-1抗体。在一个特定方式中，PD-1结合拮抗剂为纳武单抗。在另一特定的方式中，PD-1结合拮抗剂为派姆单抗。在另一特定的方式中，PD-1结合拮抗剂为皮地珠单抗(pidilizumab)。
如本文所使用的术语“PD-L1结合拮抗剂”是指减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L1与一种或多种其结合伴侣(诸如PD-1、B7-1)相互作用所导致的信号转导的分子。在一些实施方式中，该PD-L1结合拮抗剂为抑制PD-L1与其结合伴侣结合的分子。在一特定的方式中，该PD-L1结合拮抗剂抑制PD-L1与PD-1和/或B7-1结合。在一些实施方式中，该PD-L1结合拮抗剂包括抗PD-L1抗体、其抗原结合片段、免疫黏附素、融合蛋白、寡肽和其他减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L1与一种或多种其结合伴侣(诸如PD-1、B7-1)相互作用所导致的信号转导的分子。在一个实施方式中，PD-L1结合拮抗剂减少通过或透过表达在T淋巴细胞上的细胞表面蛋白介导的负性共刺激信号(其通过PD-L1介导信号传导)，从而使功能失调的T细胞的功能失调减轻。在一些实施方式中，PD-L1结合拮抗剂为抗PD-L1抗体。在一特定的方式中，抗PD-L1抗体为阿维单抗。在另一特定的方式中，抗PD-L1抗体为阿特珠单抗。在另一特定的方式中，抗PD-L1抗体为杜瓦单抗。在另一特定的方式中，抗PD-L1抗体为BMS-936559(MDX-1105)。
如本文所使用的抗人PD-L1抗体是指特异性结合成熟人PD-L1的抗体。成熟人PD-L1分子由以下序列(SEQ ID NO：16)的氨基酸19-290所组成：
MRIFAVFIFMTYWHLLNAFTVTVPKDLYVVEYGSNMTIECKFPVEKQLDLAALIVYWEMEDKNIIQFVHGEEDLKVQHSSYRQRARLLKDQLSLGNAALQITDVKLQDAGVYRCMISYGGADYKRITVKVNAPYNKINQRILVVDPVTSEHELTCQAEGYPKAEVIWTSSDHQVLSGKTTTTNSKREEKLFNVTSTLRINTTTNEIFYCTFRRLDPEENHTAELVIPELPLAHPPNERTHLVILGAILLCLGVALTFIFRLRKGRMMDVKKCGIQDTNSKKQSDTHLEET(SEQ IDNO:16)。
下列表3提供用于本发明的治疗方法、药物和用途的抗PD-L1抗体阿维单抗的序列。阿维单抗在国际专利公开号WO2013/079174(其全部公开内容以引用方式被并入本文)中的公开名称为A09-246-2。
表3.抗人PD-L1单克隆抗体阿维单抗序列
如本文所使用的术语“PD-L2结合拮抗剂”是指减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L2与一种或多种其结合伴侣(诸如PD-1)相互作用所导致的信号转导的分子。在一些实施方式中，该PD-L2结合拮抗剂为抑制PD-L2与其结合伴侣结合的分子。在一特定的方式中，该PD-L2结合拮抗剂抑制PD-L2与PD-1结合。在一些实施方式中，该PD-L2结合拮抗剂包括抗PD-L2抗体、其抗原结合片段、免疫黏附素、融合蛋白、寡肽和其他减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L2与一种或多种其结合伴侣(诸如PD-1)相互作用所导致的信号转导的分子。在一个实施方式中，PD-L2结合拮抗剂减少通过或透过表达在T淋巴细胞上的细胞表面蛋白介导的负性共刺激信号(其通过PD-L2介导信号传导)，从而使功能失调的T细胞的功能失调减轻。在一些实施方式中，PD-L2结合拮抗剂为PD-L2免疫黏附素。
“MEK抑制剂”或MEKi为抑制由有丝***原活化的蛋白激酶激酶1(MEK1)或由有丝***原活化的蛋白激酶激酶2(MEK2)将胞外信号调节的激酶ERK1和ERK2磷酸化的功能的分子。在一些实施方式中，MEK抑制剂为小分子，其为分子量小于900道尔顿的有机化合物。在一些实施方式中，该MEK抑制剂为分子量大于900道尔顿的多肽。在一些实施方式中，该MEK抑制剂为抗体。MEK抑制剂的实施方式包括，但不限于曲美替尼(又名GSK1120212)、可美替尼(又名GDC-0973、XL518)、瑞美替尼(又名RDEA119、BAY869766)、司美替尼(又名AZD6244、ARRY-142886)、必尼美替尼(又名MEK162、ARRY-438162)、PD0325901、PD184352(CI-1040)、PD098059、U0126、CH4987655(又名RO4987655)、CH5126755(又名RO5126766)和GDC623，及任何其药学上可接受的盐，如C.J.Caunt et al,Nature ReviewsCancer,Volume 15,October 2015,pages 577-592(其全部公开内容以引用方式被并入本文)中所描述。
在一个实施方式中，该MEK抑制剂为必尼美替尼，其为6-(4-溴-2-氟苯胺基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺且具有以下结构。
必尼美替尼亦称为ARRY-162和MEK162。制备必尼美替尼及其药学上可接受的盐的方法描述于PCT公开号WO 03/077914(其全部公开内容以引用方式被并入本文)，实施例18(化合物29Ⅲ)中。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为游离碱形式的必尼美替尼。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为必尼美替尼的药学上可接受的盐。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为结晶型必尼美替尼。结晶型必尼美替尼及制备结晶型必尼美替尼的方法描述于PCT公开号WO2014/063024(其全部公开内容以引用方式被并入本文)中。
“PARP抑制剂”或“PARPi”为抑制聚(二磷酸腺苷[ADP]-核糖)聚合酶(PARP)修复DNA的单链断裂(SSB)的功能的分子。在一些实施方式中，该PARP抑制剂为小分子，其为分子量小于900道尔顿的有机化合物。在一些实施方式中，该PARP抑制剂为分子量大于900道尔顿的多肽。在一些实施方式中，该PARP抑制剂为抗体。在一些实施方式中，该PARP抑制剂选自：奥拉帕尼、尼拉帕尼、BGB-290、他拉唑帕尼或奥拉帕尼、尼拉帕尼、BGB-290或他拉唑帕尼的任何药学上可接受的盐。在一个实施方式中，该PARP抑制剂为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐，优选为其甲苯磺酸盐。在一个实施方式中，该PARP抑制剂为甲苯磺酸他拉唑帕尼。
他拉唑帕尼为一种有效的口服PARP抑制剂，其对包含损害脱氧核糖核酸(DNA)修复的基因突变(称为合成致死性效果)且通过将PARP蛋白困在DNA上而阻止DNA修复、复制和转录的人类癌细胞株具有细胞毒性。化合物他拉唑帕尼(其为“(8S,9R)-5-氟-8-(4-氟苯基)-9-(1-甲基-1-1H-1,2,4-***-5-基)-8,9-二氢-2H-吡啶并[4,3,2-de]酞嗪-3(7H)-酮”和“(8S,9R)-5-氟-8-(4-氟苯基)-9-(1-甲基-1-H-1,2,4-***-5-基)-2,7,8,9-四氢-3H-吡啶并[4,3,2-de]酞嗪-3酮”，亦称为“PF-06944076”、“MDV3800”和“BMN673”)为PARP抑制剂，其具有下列结构
他拉唑帕尼及其药学上可接受的盐(包括甲苯磺酸盐)公开于国际公开号WO2010/017055和WO 2012/054698中。制备他拉唑帕尼及其药学上可接受的盐(包括甲苯磺酸盐)的其他方法描述于国际公开号WO 2011/097602、WO 2015/069851和WO 2016/019125中。使用他拉唑帕尼及其药学上可接受的盐(包括甲苯磺酸盐)治疗癌症的其他方法公开于国际公开号WO2011/097334和WO2017/075091中。
作为单一药剂形式的他拉唑帕尼已被证实对患有DNA修复途径异常的多种类型实体瘤的患者具有效力及可接受的毒性谱。
如本文所使用的“DNA损伤反应缺陷阳性(DNA damage response dofectpositive)”或“DDR缺陷阳性”是指通过遗传分析测定时，个体或该个体中的癌组织被鉴定为在至少一个DDR基因中具有种系(germline)或体细胞基因改变(gene alternation)的状况。此处所使用的DDR基因是指包含在Pearl et al.,Nature Reviews Cancer 15,166-180(2015)(其全部公开内容以引用方式被并入本文)的补充数据表3中的那些基因的任一项。示例性的DDR基因包括，但不限于描述于下列表4中者。优选的DDR基因包括，但不限于BRCA1、BRCA2、ATM、ATR和FANC。示例性的遗传分析包括，但不限于DNA测序，FoundationOne基因分析测试(the FoundationOne genetic profiling assay)(Frampton et al,NatureBiotechnology,Vol 31,No.11,1023-1030,2013)。
表4：示例性DDR基因
如本文所使用的“杂合性缺失评分”或“LOH评分”是指个体的肿瘤组织中的基因组LOH百分比。基因组LOH百分比及其计算描述于Swisher等人(The Lancet Oncology,18(1)：75-87，January 2017)(其全部公开内容以引用方式被并入本文)中。示例性遗传分析包括，但不限于DNA测序和基于Foundation Medicine NGS的T5分析。
如本文所使用的“同源重组缺失评分”或“HRD评分”是指个体的肿瘤组织中杂合性缺失(“LOH”)、端粒等位基因失衡(“TAI”)和大规模状态转换(“LST”)的未加权数字总和。HRD评分，加上LOH，和LOH评分，及其计算描述于Timms et al,Breast Cancer Res 2014Dec5；16(6)：475,Telli et al Clin Cancer Res；22(15)；3764–73.2016(其全部公开内容以引用方式被并入本文)中。示例性遗传分析包括，但不限于DNA测序、Myriad的HRD或HRDPlus分析(Mirza et al N Engl J Med 2016 Dec 1；375(22)：2154-2164,2016)。
如本文所使用的术语“KRAS相关癌症”、“HRAS相关癌症”和“NRAS相关癌症”分别指与KRAS、HRAS或NRAS基因、KRAS、HRAS或NRAS蛋白或其表达、或活性、或含量失调相关、或具有KRAS、HRAS或NRAS基因、KRAS、HRAS或NRAS蛋白或其表达、或活性、或水平失调的癌症。
短语“KRAS、HRAS或NRAS基因、KRAS、HRAS或NRAS激酶、或其表达、或活性、或含量失调”是指野生型KRAS、HRAS或NRAS基因的遗传突变或遗传改变(例如种系突变、体细胞突变或重组突变)，例如点突变(例如野生型KRAS、HRAS或NRAS基因中的一个或多个核苷酸的置换、***和/或缺失)；野生型KRAS、HRAS或NRAS基因的染色体突变(例如野生型KRAS、HRAS或NRAS基因的倒置；分别导致KRAS、HRAS或NRAS融合蛋白表达的野生型KRAS、HRAS或NRAS基因转位；分别导致KRAS、HRAS或NRAS基因或基因片段不存在的KRAS、HRAS或NRAS基因缺失；分别导致KRAS、HRAS或NRAS蛋白质含量增加的KRAS、HRAS或NRAS基因复制(亦称为扩增)；导致与野生型KRAS、HRAS或NRAS蛋白质相比较具有至少一个氨基酸缺失的KRAS、HRAS或NRAS蛋白质表达的KRAS、HRAS或NRAS基因副本数变化；和扩增KRAS、HRAS或NRAS基因的三核苷酸重复子；KRAS、HRAS或NRAS mRNA的替换剪接形式；或由KRAS、HRAS或NRAS基因过表达所导致的自分泌活性。可引起KRAS、HRAS或NRAS失调的其他类型的基因突变或遗传修饰描述于例如Clancy,S.,Geneticmutation,Nature Education 1(1)：187,(2008)(其全部公开内容以引用方式被并入本文)中。例如KRAS、HRAS或NRAS基因、KRAS、HRAS或NRAS蛋白质、或其表达或活性、或含量失调可分别为野生型KRAS、HRAS或NRAS基因中的基因突变，该基因突变分别导致与由野生型KRAS、HRAS或NRAS基因编码的蛋白质分别比较时为组成型活性或活性增加(例如过度活跃)的KRAS、HRAS或NRAS蛋白质产生。另一实例为KRAS、HRAS或NRAS基因、KRAS、HRAS或NRAS蛋白质、或其表达或活性、或含量失调可为基因或染色体转位的结果，该基因或染色体转位导致分别含有KRAS、HRAS或NRAS的第一部分(其包括功能性激酶结构域)和伴侣蛋白的第二部分(即，分别不为KRAS、HRAS或NRAS)的融合蛋白表达。在一些实例中，KRAS、HRAS或NRAS基因、KRAS、HRAS或NRAS蛋白质、或表达或活性失调可分别为一个KRAS、HRAS或NRAS基因分别与另一KRAS、HRAS或NRAS RAF基因发生基因转位的结果。
如本文所使用的“KRAS突变体癌症”、“HRAS突变体癌症”或“NRAS突变体癌症”是指其中通过遗传分析测定时，该个体的癌症组织被鉴别为在该KRAS、HRAS和NRAS基因中分别具有至少一个种系或体细胞遗传突变的癌症，且其中这种突变导致过度活跃的突变的KRAS、HRAS和NRAS蛋白质，或这种突变的形式为在对应的染色体上的野生型或突变型KRAS、HRAS和NRAS基因的副本数分别增加。如本文中所使用的突变型KRAS、HRAS和NRAS蛋白质被认为是过度活跃，若其与GTP结合的结合常数Ki较该对应的野生型KRAS、HRAS、NRAS蛋白与GTP结合的结合常数Ki分别高出至少约10％、约20％、约30％、约50％、约100％、约150％、约200％、约300％、约500％、10倍、50倍或100倍。在一些实施方式中，该KRAS基因、HRAS基因或NRAS基因的遗传突变是在密码子12、13、59、61、117或146处。在一些实施方式中，该突变为密码子12、13或61处的点突变。在一些实施方式中，该遗传突变为密码子12、13或61处的错义突变。在一些实施方式中，该KRAS基因的遗传突变选自：非小细胞肺癌中的G12C、G12R、G12S、G12A、G12D、G12V、G13C、G13R、G13S、G13A、G13D、Q61K、Q61L、Q61R和Q61H。在一些实施方式中，该KRAS基因的遗传突变选自：胰腺癌中的G12D、G12V、G12R、G12A、G13D、Q61H和Q61L。在一些实施方式中，KRAS基因、HRAS基因和NRAS基因的突变的形式为在对应的染色体基因座上的KRAS、HRAS和NRAS基因副本数增加。示例性遗传分析包括，但不限于DNA测序和由管理机构核准的遗传分析测定。如本文所使用的术语“RAS突变体癌症”是指KRAS突变体癌症、HRAS突变体癌症或HRAS突变体癌症的癌症。
如本文所使用的“基因突变”或“基因改变”是指野生型基因的种系、体细胞或重组突变，包括点突变、染色体突变和副本数变化，其中点突变包括在基因中取代、***、删除核苷酸，染色体突变包括该染色体相关区域的倒置、缺失、复制和转位且副本数变化包括在相关基因座上的基因副本数增加或扩增三核苷酸重复子，如Clancy,S.,Genetic mutation,Nature Education 1(1)：187,(2008)(其全部公开内容以引用方式被并入本文)中所描述。
如本文所使用的术语“肿瘤比例评分”或“TPS”是指在样品的免疫组织化学测试中显示部分或完全的膜染色的活肿瘤细胞的百分比。如本文所使用，“PD-L1表达的肿瘤比例评分”是指在样品的PD-L1表达免疫组织化学测试中显示部分或完全的膜染色的活肿瘤细胞的百分比。示例性样品包括，但不限于生物样品、组织样品、经***固定的经石蜡包埋(FFPE)的人组织样品和经***固定的经石蜡包埋(FFPE)的人肿瘤组织样品。示例性PD-L1表达免疫组织化学测试包括，但不限于PD-L1 IHC 22C3 PharmDx(经FDA核准，Daco)、Ventana PD-L1 SP263分析及国际专利申请案PCT/EP2017/073712中描述的测试。
术语“癌症”、“癌性”或“恶性”是指或描述哺乳动物中特征通常为不受调节的细胞生长的生理状况。癌症的实例包括，但不限于癌瘤、淋巴瘤、白血病、母细胞瘤和肉瘤。这种癌症的更具体的实例包括鳞状细胞癌、骨髓瘤、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经胶质瘤、何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、急性髓性白血病(AML)、多发性骨髓瘤、胃肠(道)癌症、肾癌、卵巢癌、肝癌、淋巴母细胞白血病、淋巴细胞白血病、结肠直肠癌、子宫内膜癌、肾脏癌、***癌、甲状腺癌、黑色素瘤、软骨肉瘤、神经母细胞瘤、胰腺癌、多形性胶质母细胞瘤、子***、脑癌、胃癌、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌和头颈癌。在一个实施方式中，该癌症为肾细胞癌。在一个实施方式中，该癌症为胰脏导管腺癌(PDAC)。
如本文所使用的术语“组合疗法”是指包含在单一种或多种组合物中的治疗活性剂(即，组合伴侣)的任何给药方案：MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂的组合、或MEK抑制剂和PARP抑制剂的组合、或MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂及PARP抑制剂的组合，其中该治疗活性剂通过医疗护理人员规定的方式或根据如本文所定义的监管机构规定的方式一起或分开施用(各自或在其任何组合物中)。
在一个实施方式中，组合疗法包含MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂及PARP抑制剂的组合。
在一个实施方式中，组合疗法包含MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂的组合。
在一个实施方式中，组合疗法包含MEK抑制剂和PARP抑制剂的组合。
在一个实施方式中，组合疗法包含为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂、为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂和为甲苯磺酸他拉唑帕尼的PARP抑制剂的组合。
在一个实施方式中，组合疗法包含为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂和为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐的PARP抑制剂的组合。
在一个实施方式中，组合疗法包含为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂和为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂的组合。
欲根据本发明治疗的“患者”包括任何温血动物，诸如，但不限于人、猴或其他低等灵长类动物、马、狗、兔、天竺鼠或小鼠。例如该患者为人。那些医疗领域的技术人员能够轻易地识别罹患癌症及需要治疗的个体。
在一些实施方式中，该受试者已被鉴定或诊断为具有KRAS、HRAS或NRAS基因、KRAS、HRAS或NRAS蛋白质、或其表达或活性、或水平失调的癌症(例如KRAS、HRAS或NRAS相关癌症)(例如使用管理机构批准(例如FDA批准)的分析或试剂盒测定)。在一个实施方式中，该受试者具有呈KRAS、HRAS或NRAS基因、KRAS、HRAS或NRAS蛋白质、或其表达或活性、或水平失调阳性的肿瘤(例如使用管理机构批准的分析或试剂盒测定)。该受试者可为具有呈KRAS、HRAS或NRAS基因、KRAS、HRAS或NRAS蛋白质、或其表达、或活性、或水平失调阳性的肿瘤(例如使用管理机构批准(例如FDA批准)的分析或试剂盒鉴定为阳性)的受试者。该受试者可为其肿瘤具有KRAS、HRAS或NRAS基因、KRAS、HRAS或NRAS蛋白质、或其表达或活性、或水平失调的受试者(例如其中该肿瘤使用管理机构批准(例如FDA批准)的试剂盒或分析鉴定)。在一个实施方式中，该受试者被怀疑患有KRAS、HRAS或NRAS相关的癌症。在一个实施方式中，该受试者具有指示该受试者具有肿瘤的临床记录，该肿瘤具有KRAS、HRAS或NRAS基因、KRAS、HRAS或NRAS蛋白质、或其表达、或活性、或水平失调(且可选择地，该临床记录指示该受试者应使用本文提供的任何组合治疗)。在一些实施方式中，该受试者为儿科患者。在一个实施方式中，该受试者患有KRAS突变体癌症。在一个实施方式中，该受试者患有KRAS突变体非小细胞肺癌。在一个实施方式中，该受试者患有KRAS突变体胰脏导管腺癌。在一个实施方式中，该受试者患有KRAS突变体结肠直肠癌。在一个实施方式中，该受试者患有KRAS突变体胃癌。
如本文所使用的术语“儿科患者”是指在诊断或治疗时未满16岁的患者。术语“儿科”可进一步被分为各种亚群，包括：新生儿(从出生到生命的第一个月)；婴儿(1个月至2岁)；儿童(2岁至12岁)；和青少年(12岁至21岁(最多，但不包括二十二岁生日))。BerhmanRE,Kliegman R,Arvin AM,Nelson WE.Nelson Textbook of Pediatrics,15thEd.Philadelphia：W.B.Saunders Company,1996；Rudolph AM,et al.Rudolph’sPediatrics,21st Ed.New York：McGraw-Hill,2002；和Avery MD,First LR.PediatricMedicine,2nd Ed.Baltimore：Williams&Wilkins；1994。
术语“治疗方案(treatment regimen)”、“给药方案(dosing protocol)”和“给药方案(dosing regimen)”可互换使用以指施用本发明的组合中各种治疗剂的剂量和时间。
“改善(ameliorating)”意指与不施用治疗相比较，一种或多种症状减轻或改进。“改善”亦包括缩短或减少症状的持续时间。
如本文所使用的药物、化合物或医药组合物的“有效剂量”或“有效量”或“治疗有效量”为足以使任何一种或多种有益或期望的结果生效的量。在预防性用途方面，有益或期望的结果包括排除或降低疾病的风险、减轻严重性或延迟疾病开始，包括该疾病的生化、组织学和/或行为症状、其并发症和在疾病发展过程中出现的中间病理表型。在治疗用途方面，有益或期望的结果包括临床结果，诸如减少各种疾病或病况(诸如，例如癌症)的一种或多种症状的发生率或改善该一种或多种症状、降低治疗该疾病所需的其他药物的剂量、增强另一种药物的作用和/或推迟该疾病的进展。有效剂量可在一次或多次施用中施用。为了本发明的目的，药物、化合物或医药组合物的有效剂量为足以直接或间接完成预防性或治疗性治疗的量。如在临床背景中所理解，药物、化合物或医药组合物的有效剂量可与另一种药物、化合物或医药组合物一起达到。因此，在施用一种或多种治疗剂的背景下，若单一药剂与一种或多种其他药剂一起施用并可能取得或可取得期望的结果时，则该单一药剂被认为以有效量给予，此视为“有效量”。关于癌症的治疗，有效量是指具有下列效果的量(1)缩小该肿瘤的大小，(2)抑制(即，减缓至某种程度，优选为停止)肿瘤转移出现，(3)抑制肿瘤生长或肿瘤侵袭至一定程度(即，减缓至一定程度，优选为停止)，和/或(4)缓解一种或多种与该癌症相关的体征或症状至一定程度(或优选地，排除)。该剂量和施用方案的治疗或药学有效性亦可以它们诱导、增强、维持或延长对患有这些特定肿瘤的患者的疾病控制和/或总体存活的能力表征，该能力可通过疾病进展之前的延长时间来测量。
如本文所使用术语“Q2W”意指每二周一次。
如本文所使用的术语“BID”意指一天二次。
当“肿瘤”应用在被诊断为患有或被怀疑患有癌症的受试者时，其是指任何大小的恶性或潜在恶性的肿瘤或组织肿块，且包括原发性肿瘤和继发性肿瘤。实体瘤为通常不包含囊肿或液体区域的异常生长的组织或组织块。不同类型的实体瘤依据形成它们的细胞类型命名。实体瘤的实例有肉瘤、癌瘤和淋巴瘤。白血病(血液的癌症)通常不会形成实体瘤(National Cancer Institute，Dictionary of Cancer Terms)。
“肿瘤负担”亦称为“肿瘤负荷”，其是指分布在全身的肿瘤物质的总量。肿瘤负担是指全身的癌细胞的总数或肿瘤的总大小，包括***和骨髓。肿瘤负担可通过本领域已知的各种方法测定，诸如，例如通过在将肿瘤从受试者移除时测量肿瘤的尺寸(例如使用卡尺)，或当肿瘤仍在体内时使用成像技术，例如超声波、骨扫描、计算机断层扫描(CT)或磁共振成像(MRI)扫描来测定。
术语“肿瘤尺寸”是指肿瘤的总尺寸，其可依肿瘤的长度和宽度测量。肿瘤尺寸可通过本领域已知的各种方法测定，诸如，例如通过在将肿瘤从受试者移除时测量肿瘤的尺寸(例如使用卡尺)，或当肿瘤仍在体内时使用成像技术，例如骨扫描、超音波、CT或MRI来测定。
“个体反应(individual response)”或“反应”可使用任何指示对个体的益处的终点来评估，包括，但不限于：(1)抑制疾病进展(例如癌症进展)至一定程度，包括减缓或完全抑制；(2)肿瘤尺寸缩小；(3)抑制(即，减少、减慢或完全停止)癌细胞浸润到邻近的外周器官和/或组织；(4)抑制(即，减少、减慢或完全停止)转移；(5)缓解与该疾病或病症(例如癌症)相关的一种或多种症状至一定程度；(6)增加或延长生存期，包括总生存期和无进展生存期；和/或(7)降低治疗后的指定时间点的死亡率。
患者的“有效反应”或患者对使用药物的治疗的“反应性”和类似措辞是指赋予处于罹患疾病或病症(例如癌症)的风险或罹患疾病或病症(例如癌症)的患者临床或治疗益处。在一个实施方式中，这种益处包括下列任何一项或多项：延长生存期(包括总生存期和/或无进展生存期)；导致客观反应(包括完整反应或部分反应)；或改善癌症的体征或症状。
“客观反应”或“OR”是指可测量的反应，包括完全反应(CR)或部分反应(PR)。“客观反应率”(ORR)是指在最小的期间内减少预定量的肿瘤大小的患者的比例。通常，ORR是指完全反应(CR)率和部分反应(PR)率的和。
如本文所使用的“完全反应(complete response)”或“CR”意指对治疗反应时，所有癌症体征消失(例如所有靶病灶消失)。此并非总是意味着该癌症已被治愈。
如本文所使用的“部分反应(partial response)”或“PR”是指对治疗反应时，体内癌症的一个或多个肿瘤或病灶的大小减小或程度减轻。例如，在一些实施方式中，PR是指靶病灶的最长直径(SLD)的总和减少至少30％(以基线SLD为参考)。
“持续反应(sustained response)”是指停止治疗后对减少肿瘤生长的持续作用。例如，与药物施用阶段开始时的尺寸相比较，肿瘤尺寸可能为相同尺寸或更小。在一些实施方式中，该持续的反应的持续时间至少与治疗的持续时间一样，至少为治疗的持续时间的1.5x、2x、2.5x或3x长或更长的时间。
如本文所使用的“无进展存活(progression-free survival)”(PFS)是指治疗期间和治疗后的时间长度，在此期间所治疗的疾病(例如癌症)没有恶化。无进展生存期可能包括患者经历完全反应或部分反应的时间量，及患者经历稳定疾病的时间的量。
在一些实施方式中，所描述的治疗癌症的方法的抗癌效果(包括，但不限于如本文所使用的“客观反应”、“完全反应”、“部分反应”、“进行性疾病(progressive disease)”、“稳定疾病”、“无进展存活”、“反应持续时间”)由研究者在患有除了转移性去势抵抗性***癌(CRPC)以外的局部晚期或转移性实体瘤的患者中使用RECIST v1.1(Eisenhauer etal,Eur J of Cancer 2009；45(2)：228-47)定义及评估，和在患有转移性CRPC的患者中使用RECIST v1.1和PCWG3(Scher et al,J Clin Oncol 2016 Apr 20；34(12)：1402-18)定义及评估。Eisenhauer et al,Eur J of Cancer 2009；45(2)：228-47和Scher et al,J ClinOncol 2016 Apr 20；34(12)：1402-18的全部公开内容以引用方式被并入本文。
在一些实施方式中，该治疗的抗癌效果(包括，但不限于如本文所使用的“免疫相关的客观反应(irOR)”、“免疫相关的完全反应(irCR)”、“免疫相关的部分反应(irPR)”、“免疫相关的进行性疾病(irPD)”、“免疫相关的稳定疾病(irSD)”、“免疫相关的无进展存活(irPFS)”、“免疫相关的反应持续时间(irDR)”)通过用于除了患有转移性CRPC的患者以外的患有局部晚期或转移性实体瘤的患者的免疫相关的反应标准(irRECIST,Nishinoet.al.J Immunother Cancer 2014；2：17)定义及评估。Nishino et.al.J ImmunotherCancer 2014；2：17的全部公开内容以引用方式被并入本文。
如本文所使用的“总体存活”(OS)是指群组中在特定持续时间后可能存活的个体的百分比。
“延长存活”意指相对于未经治疗的患者(即，相对于未使用该药物治疗的患者)，增加在经治疗的患者的总体或无进展存活。
如本文所使用的“药物相关毒性”、“输注相关反应”和“免疫相关不良事件”(“irAE”)及其严重性或等级依国家癌症研究所的不良事件通用术语标准v 4.0(NCI CTCAEv 4.0)中的示例和定义。
如本文所使用的“与...组合”或“与...结合”是指将二、三或更多种化合物、组分或靶标药以单独剂量的形式同时、依次或间歇地施用，或以全部或部分的该基础化合物、组分或靶标药(例如基础化合物、组分或靶标药的全部二种、全部三种、三种中的任二种)的固定剂量组合物形式施用。应理解的是，固定剂量组合物内的任何化合物、组分或靶标药具有相同的剂量方案和递送途径。
如本文所使用的“低剂量”是指物质、药剂、化合物或组合物的量或剂量低于临床环境中通常使用的量或剂量。
当与实体瘤有关时，如本文所使用的术语“晚期”包括局部晚期(非转移性)疾病和转移性疾病。如本发明中所使用的局部晚期实体瘤(其治疗可能具治愈意图或可能不具治愈意图)和转移性疾病(其治疗不能具治愈意图)包括在“晚期实体瘤”的范围内。本领域的技术人员将能够识别和诊断患者的晚期实体瘤。
用于本发明目的的“反应持续时间”意指从因药物治疗所导致的肿瘤模型生长受抑制的记录开始到恢复与治疗前的生长速率相似的生长速率的时间。
术语“相加性(additive)”用于指二个化合物、组分或靶标药的组合的结果并未大于个别使用各化合物、组分或靶标药的总和。术语“相加性”是指该接受治疗的疾病状况或病症并未因个别使用各化合物、组分或靶标药而有所改善。
术语“协同作用”或“协同的”用来指二或更多个化合物、组分或靶标药的组合的结果大于各药剂加在一起的总和。术语“协同作用”或“协同的”是指该接受治疗的疾病状况或病症较个别使用各化合物、组分或靶标药有所改善。在该接受治疗的疾病状况或病症中的该种改善为“协同效果”。“协同量”或“协同有效量”为导致协同效果(如本文中所定义的“协同的”)的二种化合物、组分或靶标药的组合的量。测定二或更多种组分之间的协同相互作用，可通过对需要治疗的患者施用在不同w/w(重量/重量)比例范围内的组分和剂量来确定测量用在该效果的最优选范围及用在该效果的各组分的绝对剂量范围。然而，在体外模型或体内模型中观察协同作用可用于预测在人体和其他物种中，及如本文所描述的现存的体外模型或体内模型中的效果以用于测量协同效果且这种研究的结果亦可通过应用药物动力学/药效动力学方法用来预测人体和其他物种所需的有效剂量和血浆浓度比范围，及绝对剂量和血浆浓度。示例性的协同效果包括，但不限于与个别使用各化合物、组分或靶标药相比较，具有增强的效力、在相等或增加的效力水平下剂量降低、耐药性的发展减少或延迟、及同时增强或相等的治疗作用和减少不欲有的作用，如Jia Jiaet al NatureReviews,Drug Discovery,Volume 8,February 2009,page 111-128(其全部公开内容以引用方式被并入本文)中的描述。
在一些实施方式中，如本文所使用的“协同效果”是指二或三个组分或靶标药的组合(例如MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂的组合、MEK抑制剂和PARP抑制剂的组合、或MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂及PARP抑制剂的组合)所产生的效果(例如减缓增生性疾病，特别是癌症，或其症状的症状恶化)较仅添加每个各化合物、组分或靶标药的简单相加效果大。
“化学治疗剂”为可用于治疗癌症的化学化合物。化学治疗剂的实例包括烷化剂，诸如噻替派(thiotepa)和环磷酰胺烷基磺酸盐，诸如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和呢泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶(aziridine)，诸如苯佐替哌(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、美妥替哌(meturedopa)和乌瑞替哌(uredopa)；乙烯亚胺和甲基蜜胺(methylamelamine)，包括六甲蜜胺(altretamine)、三乙烯蜜胺(triethylenemelamine)，三乙烯基磷酰胺(trietylenephosphoramide)、三乙烯基硫代磷酰胺(triethiylenethiophosphoramide)和三羟甲基蜜胺(trimethylolomelamine)；多聚乙酰(acetogenin)(特别是布拉它辛(bullatacin)和布拉它辛酮(bullatacinone))；δ-9-四氢***酚(delta-9-tetrahydrocannabinol)(屈***酚(dronabinol)，)；β-拉帕醌(beta-lapachone)；拉帕醇(lapachol)；秋水仙素(colchicine)；桦木酸(betulinic acid)；喜树碱(camptothecin)(包括合成类似物拓扑替康(topotecan
化学治疗剂的其他实例包括用于调节、减少、阻断或抑制可促进癌症生长的激素的作用的抗激素剂，且通常为系统性或全身治疗的形式。它们本身可为激素。实例包括抗***和选择性***受体调节剂(SERM)，包括，例如他莫昔芬(tamoxifen)(包括
如本文所使用的“化学疗法”是指用于治疗癌症的如上述定义的化学治疗剂，或二、三或四种化学治疗剂的组合。当化学疗法由一种以上的化学治疗剂所组成时，该化学治疗剂可在同一天或同一治疗周期的不同日子施用于患者。
如本文所使用的“基于铂的化学疗法”是指其中至少一种化学治疗剂为铂的配位复合物的化学疗法。示例性的基于铂的化学疗法包括，但不限于顺铂、卡铂、奥沙利铂(oxaliplatin)、奈达铂(nedaplatin)、吉西他滨(gemcitabine)与顺铂的组合、卡铂与培美曲塞(pemetremed)的组合。
如本文所使用的“基于铂的双药”是指包含二种且不超过二种化学治疗剂的化学疗法，且其中至少一种化学治疗剂为铂的配位复合物。示例性的基于铂的双药包括，但不限于吉西他滨与顺铂的组合、卡铂与培美曲塞的组合。
如本文所使用的术语“细胞因子”一般是指由一种细胞群释出的蛋白质，该蛋白质作为细胞间介导剂作用在另一细胞上或对产生该蛋白质的细胞具有自分泌效果。这种细胞因子的实例包括淋巴因子、单核因子；介白素(“IL”)，诸如IL-1、IL-1a、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-15、IL-17A-F、IL-18至IL-29(诸如IL-23)、IL-31，包括rIL-2；肿瘤坏死因子，诸如TNF-a或TNF-β、TGF-1-3；和其他多肽因子，包括白血病抑制因子(“LIF”)、睫状神经营养因子(“CNTF”)、CNTF样细胞因子(“CLC”)、心肌营养素(cardiotrophin)(“CT”)和kit配体(“L”)。
如本文所使用的术语“趋化因子”是指具有选择性诱导趋化性和活化白血球的能力的可溶性因子(例如细胞因子)。该趋化因子亦触发血管生成、发炎、伤口愈合和肿瘤发生的过程。示例性趋化因子包括IL-8(小鼠角质形成细胞趋化物(chemoattractant)(KC)的人同源物)。
短语“药学上可接受的”表示该物质或组合物必须与包含配制剂的其他成分和/或接受该物质或组合物治疗的哺乳动物为化学和/或毒理学上相容。一些实施方式关于本文所描述的化合物的药学上可接受的盐。术语“药学上可接受的盐”是指不会对被施用该化合物配制剂的生物体造成显著刺激且不会消除该化合物的生物活性和性质的化合物配制剂。在某些情况下，药学上可接受的盐类通过将本文所描述的化合物与酸类(诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸，等)反应获得。在一些情况下，药学上可接受的盐类通过将本文所描述的具有酸性基团的化合物与碱反应以形成盐而获得，诸如铵盐、碱金属盐(诸如钠盐或钾盐)、碱土金属盐(诸如钙盐或镁盐)、有机碱的盐，诸如二环己胺、N-甲基-D-葡萄糖胺、三(羟甲基)甲胺和具有氨基酸(诸如精胺酸、赖氨酸，等)的盐类，或通过先前确定的其他方法获得。
亦可形成酸和碱的半盐，例如半硫酸盐和半钙盐。
关于合适的盐的综述，参见Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties,Selection,and Use by Stahl and Wermuth(Wiley-VCH,2002)。用于制造本文所描述的化合物的药学上可接受的盐的方法为本领域的技术人员所已知。
本文所使用的术语“溶剂化物”用于描述包含本文所描述的化合物及一种或多种药学上可接受的溶剂分子(例如水和乙醇)的分子复合物。
本文所描述的化合物亦可以非溶剂化和溶剂化的形式存在。因此，一些实施方式关于本文所描述的化合物的水合物和溶剂化物。
本文所描述的含有一个或多个不对称的碳原子的化合物可以二或更多种立体异构体形式存在。当本文所描述的化合物含有烯基或亚烯基时，可能存有几何顺式/反式(或Z/E)异构体。当结构异构体可经由低能垒相互转化时，可发生互变异构体异构性(“互变异构性”)。本文所描述的含有，例如亚胺基、酮基或肟基的化合物可为质子互变异构形式，或者含有芳族部分的化合物可为所谓的价互变异构性。单一化合物可表现出一种以上的异构性类型。
本文所描述的实施方式的化合物包括所有立体异构体(例如顺式和反式异构体)和本文所描述的化合物的所有光学异构体(例如R和S镜像异构体)，以及这种异构体的外消旋、非对映异构体和其他混合物。尽管所有立体异构体都包含在本发明申请专利的范围内，本领域的技术人员将识别可能优选的特定的立体异构体。
在一些实施方式中，本文所描述的化合物可以数种互变异构形式存在，包括烯醇和亚胺形式，及酮和烯胺形式和几何异构体及其混合物。所有这种互变异构形式均包括在本发明的实施方式的范围内。互变异构体在溶液中以互变异构体组的混合物形式存在。在固体形式中，通常有一种互变异构体占大部分。尽管可能仅描述一种互变异构体，但本发明的实施方式包括本发明化合物的所有互变异构体。
本发明的实施方式的范围内包括本文所描述的化合物的所有立体异构体、几何异构体和互变异构形式，包括表现出一种以上的异构体类型的化合物，及其一种或多种异构体类型的混合物。本发明的实施方式的范围亦包括酸加成盐或碱盐，其中该抗衡离子为光学活性(例如d乳酸盐或l-赖氨酸)、或外消旋的(例如dl-酒石酸盐或dl-精胺酸)。
本发明的实施方式亦包括本文所描述的化合物的阻转异构体。阻转异构体是指可被分开为旋转受限的异构体的化合物。
顺式/反式异构体可通过本领域的技术人员熟知的常规技术，例如色层分析法和分级结晶分开。
用于制备/分离个别镜像异构体的常规技术包括从合适的光学纯前体手性合成或使用，例如手性高压液相色层分析法(HPLC)解析该外消旋体(或盐或衍生物的外消旋体)。
或者，该外消旋体(或外消旋前体)可与合适的光学活性化合物(例如醇)反应，或者，在其中本文所描述的化合物含有酸性或碱性部分的情况中，该外消旋体(或外消旋前体)可与碱或酸(诸如1-苯乙胺或酒石酸)反应。所产生的非对映异构体混合物可通过色层分析法和/或分级结晶分开，且该非对映异构体的一或二者可由技术人员所熟知的方法转化为对应的纯对映异构体。
除非另外定义，否则本文所使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属的领域中的一般技术人员所通常理解者相同的含义。在冲突的情况中，以本专利说明书，包括定义为主。在本专利说明书和申请专利范围的全文中，词语“包含(comprise)”或其变体，诸如“包含(comprises或comprising)”将被理解为暗示包含所指明的整数或整数群组，但不排除任何其他整数或整数群组。除非上下文另有要求，否则单数术语应包括复数，复数术语应包括单数。除非另有说明，否则如本文所使用的单数形式“一(a、an)”和“该(the)”包括复数指称。例如“一种”赋形剂包括一种或多种赋形剂。应理解的是，本文所描述的本发明的方式和变化包括“由......组成”和/或“基本上由......组成”的方式和变化。
本文中描述示例性方法和材料，虽然亦可使用与本文所描述者类似或相等的方法和材料来实行或测试本发明。该材料、方法和实施例仅用于说明，而非意图用于限制。
方法、用途和药物
由其他人先前进行的研究证明KRAS和NRAS突变体肿瘤在体外对MEK抑制剂和PARP抑制剂的组合高度敏感，且KRAS突变体肿瘤在体内对该组合具高度敏感性。Sun et al.,Sci.Transl.Med.9,eaal5148(2017年5月)。现亦已证明PD-L1表达与肺腺癌中的KRAS突变相关且该PD-L1诱导的肺腺癌细胞中的CD3+T细胞凋亡及介导的免疫逃逸可通过抗PD-1抗体派姆单抗逆转。Chen et al.,Cancer Immunol Immunother 66：1175-1187(April2017)。此外，亦已证明MEK抑制剂和PD-L1抗体的组合导致协同和持久的肿瘤消退，即使单独的任一项药剂仅为适度有效。Ebert et al.,Immunity 44,609-621(March 2016)。
根据本发明，在一个实施方式中，第一化合物或组分(例如MEK抑制剂)的量与第二化合物或组分(例如PD-1轴结合拮抗剂)的量及可选择的第三化合物或组分(例如PARP抑制剂)的量组合使用，其中所述量一起能有效治疗癌症。该加在一起有效的量将一定程度地缓解所治疗的病症的一种或多种症状。
根据本发明，本发明的组合疗法的各个组合伴侣的治疗有效量可同时、分开或依次以任何顺序施用。在一个实施方式中，治疗增殖性疾病(包括癌症)的方法可包含施用MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂的组合、或MEK抑制剂和PARP抑制剂的组合、或MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂和PARP抑制剂的组合，其中该个别组合伴侣以联合治疗有效量(例如以协同有效量)同时或以任何顺序依次施用，例如以对应于本文所描述的量的每日或间歇剂量施用。本发明的组合疗法的个别组合伴侣可在疗法过程中的不同时间分开施用，或以分割或单一组合形式同时施用。在一个实施方式中，该PARP抑制剂可在每日基础上每天施用一次或每天施用二次，该MEK抑制剂可在每日基础上每天施用一次或每天施用二次，且该PD-1轴结合拮抗剂可在每周基础上施用。因此，应理解的是，本发明包含所有这种同时或交替治疗的方案，且术语“施用”亦据此解释。
如本文所使用的术语“联合治疗有效量”是指当本文所描述的组合物的治疗剂以令它们显示相互作用(例如联合治疗效果，例如协同效果)的时间间隔同时或分开施用患者(例如以时间上交错的方式，例如顺序特异性方式)时。此种情况，尤其是，可通过追踪血液水平并证明该组合成分至少在某些期间存在于待治疗的人的血液中来测定。
在一个实施方式中，治疗增殖性疾病(包括癌症)的方法可包含施用为游离或药学上可接受的盐形式的MEK抑制剂及施用PD-1轴结合拮抗剂，该施用方式为，例如以每日或对应于本文所描述的量同时或以任何顺序依次施用联合治疗有效量(例如为协同有效量)。在一个实施方式中，治疗增殖性疾病的方法可包含施用为游离或药学上可接受的盐形式的MEK抑制剂、施用PD-1轴结合拮抗剂及施用游离或药学上可接受的盐形式的PARP抑制剂，该施用方式为，例如以每日或对应于本文所描述的量的间歇剂量同时或以任何顺序依次施用联合治疗有效量(例如为协同有效量)。
本发明的组合物的化合物或组分的施用可通过能够将化合物或组分递送至作用部位的任何方法来生效。这些方法包括口服途径、十二指肠内途径、肠胃道外注射(包括静脉内、皮下、肌肉内、血管内或输注)、局部和直肠施用。
在一个实施方式中，本文提供治疗具有增殖性疾病的受试者的方法，其包含对该受试者施用能对抗增殖性疾病的联合治疗有效量的如本文所描述的组合疗法。在一个实施方式中，该增殖性疾病为癌症。在一个实施方式中，该癌症选自鳞状细胞癌、骨髓瘤、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经胶质瘤、何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、急性髓性白血病(AML)、多发性骨髓瘤、胃肠(道)癌症、肾癌(包括肾细胞癌)、卵巢癌、肝癌、淋巴母细胞白血病、淋巴细胞白血病、结肠直肠癌、子宫内膜癌、肾脏癌、***癌、甲状腺癌、黑色素瘤、软骨肉瘤、神经母细胞瘤、胰腺癌(包括胰脏导管腺癌(PDA))、多形性胶质母细胞瘤、子***、脑癌、胃癌、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌和头颈癌。在一个实施方式中，该癌症为胰腺癌。在一个实施方式中，该癌症为胰脏导管腺癌(PDA)。在一个实施方式中，该癌症为非小细胞肺癌。在一个实施方式中，该癌症为结肠直肠癌。在一个实施方式中，该癌症为胃癌。在一个实施方式中，该癌症为***癌。在一个实施方式中，该癌症为RAS突变体癌症。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体癌症。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体非小细胞肺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体胰脏导管腺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体结肠直肠癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体胃癌。在一个实施方式中，该癌症为HRAS突变体癌症。在一个实施方式中，该癌症为NRAS突变体癌症。在一个实施方式中，该癌症在至少一个选自下列群组的DDR基因中为DDR缺陷阳性：BRCA1、BRCA2、ATM、ATR和FANC。在一些实施方式中，该受试者事先以至少一种先前治疗进行治疗，例如至少一种以另一种抗癌治疗进行的治疗，例如一线或二线全身抗癌疗法(例如以一种或多种细胞毒性剂治疗)、切除肿瘤或放射疗法。在一个实施方式中，该先前治疗为基于铂的化学疗法、多西紫杉醇、PD-1轴拮抗剂、或化学疗法与PD-1轴拮抗剂的组合。在一个实施方式中，该先前治疗为化学疗法，其中该化学疗法为FOLFIRINOX、吉西他滨或吉西他滨与nab-紫杉醇的组合。在一个实施方式中，该组合疗法包含为必尼美替尼的MEK抑制剂、为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂和为他拉唑帕尼的PARP抑制剂。在一个实施方式中，组合疗法包含为必尼美替尼的MEK抑制剂和为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。
在一个实施方式中，本文提供治疗有此需要的患者的癌症的方法，该方法包含：(a)测定该患者的癌症为KRAS相关癌症；(b)施用该患者治疗有效量的如本文所描述的组合疗法。在一些实施方式中，该患者通过使用经管理机构核准(例如经FDA核准)的用于鉴定患者或来自患者的活组织检查样品中的KRAS基因失调、KRAS激酶或其任一项的表达或活性的测试或分析，或透过执行本文所描述的分析的任何非限制性实例而被确定为患有KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该测试或分析以试剂盒提供。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体非小细胞肺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体胰脏导管腺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体结肠直肠癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体胃癌。在一个实施方式中，该组合疗法包含为必尼美替尼的MEK抑制剂、为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂和为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐的PARP抑制剂。在一个实施方式中，组合疗法包含为必尼美替尼的MEK抑制剂和为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。
在一个实施方式中，本发明提供用于治疗癌症的方法，其包含对有此需要的患者施用独立为治疗有效量的PARP抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和MEK抑制剂。
在一个实施方式中，本发明提供用于治疗癌症的方法，其包含对有此需要的患者施用独立为治疗有效量的PARP抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和MEK抑制剂，其中该PARP抑制剂为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐以约0.5mg QD、约0.75mg QD或约1.0mg QD的量口服施用。在一个实施方式中，该PD-1轴拮抗剂为阿维单抗。在一个实施方式中，阿维单抗每2周(Q2W)在60分钟内静脉内施用约800mg的量或每2周(Q2W)施用约10mg/kg的量。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为游离碱形式的必尼美替尼。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为结晶型必尼美替尼。在一个实施方式中，在至少一个28天的治疗周期中必尼美替尼以(i)约30mg BID或约45mg每日二次(BID)的量每日口服施用，或(ii)约30mg BID或约45mg BID的量口服每日施用共三周，接着休息一周不施用必尼美替尼。在一个实施方式中，所述量一起可在癌症的治疗中获得协同效果。
在一个实施方式中，用于治疗癌症的方法包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的(a)为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐的PARP抑制剂，(b)为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂，和(c)为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。在一个实施方式中，用于治疗癌症的方法包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的(a)为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐的PARP抑制剂，其中他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐以约0.5mg QD、约0.75mg QD或约1.0mg QD的量口服施用，(b)为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂，和(c)为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。在一个实施方式中，所述量一起可在癌症的治疗中获得协同效果。
在一个实施方式中，用于治疗癌症的方法包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的(a)为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐的PARP抑制剂，(b)为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂，其中在至少一个28天的治疗周期中必尼美替尼以(i)约30mg BID或约45mg每日二次(BID)的量口服每日施用，或(ii)约30mg BID或约45mg BID的量口服每日施用共三周，接着休息一周不施用必尼美替尼，和(c)为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。在一个实施方式中，所述量一起可在癌症的治疗中获得协同效果。
在一个实施方式中，用于治疗癌症的方法包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的(a)为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐的PARP抑制剂，(b)为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂，和(c)为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂，其中阿维单抗以每Q2W约800mg或约10mg/kg Q2W的量在60分钟内静脉内施用。在一个实施方式中，所述量一起可在癌症的治疗中获得协同效果。
在一个实施方式中，用于治疗癌症的方法包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的(a)为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐的PARP抑制剂，其中他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐以约0.5mg QD、约0.75mg QD或约1.0mg QD的量口服施用，(b)为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂，其中在至少一个28天的治疗周期中必尼美替尼以(i)约30mg BID或约45mg每日二次(BID)的量口服每日施用，或(ii)约30mg BID或约45mg BID的量口服每日施用共三周，接着休息一周不施用必尼美替尼，和(c)为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂，其中阿维单抗以每Q2W约800mg或约10mg/kgQ2W的量在60分钟内静脉内施用。在一个实施方式中，所述量一起可在癌症的治疗中获得协同效果。
在一个实施方式中，本发明提供用于治疗癌症的方法，其包含对有此需要的患者施用独立为治疗有效量的PD-1轴结合拮抗剂和MEK抑制剂。
在一个实施方式中，本发明提供用于治疗癌症的方法，其包含对有此需要的患者施用独立为治疗有效量的PD-1轴结合拮抗剂量和MEK抑制剂量。在一个实施方式中，该PD-1轴拮抗剂为阿维单抗。在一个实施方式中，阿维单抗以每2周(Q2W)约800mg或每2周(Q2W)约10mg/kg Q2W的量在60分钟内静脉内施用。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为结晶型必尼美替尼。在一个实施方式中，在至少一个28天的治疗周期中必尼美替尼以(i)约30mg BID或约45mg每日二次(BID)的量口服每日施用，或(ii)约30mg BID或约45mg BID的量口服每日施用共三周，接着息一周不施用必尼美替尼。在一个实施方式中，所述量一起可在癌症的治疗中获得协同效果。
在一个实施方式中，用于治疗癌症的方法包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的(a)为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂，和(b)为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。在一个实施方式中，用于治疗癌症的方法包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的(a)为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂，和(b)为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。在一个实施方式中，所述量一起可在癌症的治疗中获得协同效果。
在一个实施方式中，用于治疗癌症的方法包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的(b)为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂，其中在至少一个28天的治疗周期中必尼美替尼以(i)约30mg BID或约45mg每日二次(BID)的量口服每日施用，或(ii)约30mg BID或约45mg BID的量口服每日施用共三周，接着休息一周不施用必尼美替尼，和(c)为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。在一个实施方式中，所述量一起可在癌症的治疗中获得协同效果。
在一个实施方式中，用于治疗癌症的方法包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的(a)为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂，和(b)为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂，其中阿维单抗以约800mg Q2W或约10mg/kg Q2W的量在60分钟内静脉内施用。
在一个实施方式中，用于治疗癌症的方法包含对有此需要的患者施用组合疗法，该组合疗法包含独立为治疗有效量的(a)为必尼美替尼或其药学上可接受的盐的MEK抑制剂，其中在至少一个28天的治疗周期中必尼美替尼以(i)约30mg BID或约45mg每日二次(BID)的量口服每日施用，或(ii)约30mg BID或约45mg BID的量口服每日施用共三周，接着休息一周不施用必尼美替尼，和(b)为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂，其中阿维单抗以约800mg Q2W或约10mg/kg Q2W的量在60分钟内静脉内施用。在一个实施方式中，所述量一起可在癌症的治疗中获得协同效果。
在一个实施方式中，本发明关于用于治疗癌症的方法，该方法包含对有此需要的患者施用能有效治疗癌症的一定量的MEK抑制剂、一定量的PD-1轴结合拮抗剂和/或一定量的PARP抑制剂。在另一实施方式中，本发明关于用于治疗癌症的MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和/或PARP抑制剂的组合。在另一实施方式中，本发明关于用于治疗癌症的方法，该方法包含对有此需要的患者施用一定量的MEK抑制剂、一定量的PD-1轴结合拮抗剂和/或一定量的PARP抑制剂，其中所述量一起可在癌症的治疗中获得协同效果。在另一实施方式中，本发明关于用于治疗癌症的MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和/或PARP抑制剂的组合，其中该组合为协同性。在一个实施方式中，本发明的方法或用途关于靶标治疗剂的协同组合，特别是MEK抑制剂与PD-1轴结合拮抗剂和/或PARP抑制剂的组合。于本段落的所有实施方式的一方式中，该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐，该PARP抑制剂为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐，且优选为其甲苯磺酸盐，该PD-1轴结合拮抗剂为阿维单抗。
本领域的技术人员将能够根据已知方法，考虑诸如年龄、重量、一般健康、施用的化合物、施用途径、需要治疗的癌症的性质和进展，及是否存有其他药物等因素决定施用患者本发明的组合中所使用的各化合物的适当量、剂量或服用量。
本发明的方法的实行可透过各种施用或给药方案实现。本发明的组合的化合物可间歇、同时或依次施用。在一个实施方式中，本发明的组合的化合物可在并存的给药方案中施用。
该施用或给药方案可依需要重复进行以达成期望的癌细胞缩小或减少。如本文所使用的“连续给药方案”为不中断剂量的施用或给药方案，例如没有治疗休息日。重复21或28天的治疗周期且在治疗周期之间不中断剂量为连续给药方案的实例。在一个实施方式中，本发明的组合的化合物可在连续的给药时间表中施用。在一个实施方式中，本发明的组合的化合物可在连续给药方案中同时施用。
在一个实施方式中，该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为结晶型必尼美替尼。在一个实施方式中，必尼美替尼口服施用。在一个实施方式中，必尼美替尼配制成片剂。在一个实施方式中，必尼美替尼的片剂配制剂包含15mg的必尼美替尼或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，必尼美替尼的片剂配制剂包含15mg结晶型必尼美替尼。在一个实施方式中，结晶型必尼美替尼每天口服施用二次。在一个实施方式中，结晶型必尼美替尼每天口服施用二次，其中该结晶型必尼美替尼的第二剂量在必尼美替尼的第一剂量后约12小时施用。在一个实施方式中，30mg的结晶型必尼美替尼每天口服施用二次。在一个实施方式中，45mg的结晶型必尼美替尼每天口服施用二次。
在一个实施方式中，45mg的结晶型必尼美替尼每天口服施用二次，直到观察到不利的影响，之后每天施用二次30mg的结晶型必尼美替尼。在一个实施方式中，若导致剂量减少的不利影响改善至基线并保持稳定长达，例如14天，或长达三周，或长达四周，则已被减少剂量至每日二次30mg的患者的剂量可再次逐步上升至每日二次45mg，只要无其他可阻止药物再次逐步上升的与必尼美替尼相关的其他伴随毒性。
在一个实施方式中，该PARP抑制剂为他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐，优选为其甲苯磺酸盐，且每天施用一次以包含28天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间，持续重复该28天周期。
在一个实施方式中，他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐，优选为其甲苯磺酸盐每天施用一次以包含21天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间，持续重复该21天周期。
在一个实施方式中，他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐(优选为其甲苯磺酸盐)以每天一次约0.1mg至约2mg，优选为每天一次约0.25mg至约1.5mg，且更优选为每天一次约0.5至约0.01mg的日剂量口服施用。在一个实施方式中，他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐，优选为其甲苯磺酸盐以每天一次约0.5mg、0.75mg或1.0mg的日剂量施用。本文所提供的剂量是指他拉唑帕尼的游离碱形式的剂量，或以施用的他拉唑帕尼盐形式的游离碱当量计算。例如他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐的剂量或量，诸如0.5、0.75mg或1.0mg是指游离碱当量。该剂量方案可经调整以提供最优选的治疗反应。例如，该剂量可依该治疗情况的紧急状况指示按比例减少或增加。
在一些实施方式中，该PD-1轴结合拮抗剂为阿维单抗且将在整个治疗过程中在约14天(±2天)或约21天(±2天)或约30天(±2天)的间隔下静脉内施用约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20mg/kg的剂量。在一些实施方式中，阿维单抗在整个治疗过程中在约14天(±2天)或约21天(±2天)或约30天(±2天)的间隔下施用约80、150、160、200、240、250、300、320、350、400、450、480、500、550、560、600、640、650、700、720、750、800、850、880、900、950、960、1000、1040、1050、1100、1120、1150、1200、1250、1280、1300、1350、1360、1400、1440、1500、1520、1550或1600mg(优选800mg、1200mg或1600mg)的平坦剂量。于某些实施方式中，受试者将经由静脉内(IV)输注被施用包含本文所描述的任一项PD-1轴结合拮抗剂的药物。在一个实施方式中，阿维单抗每二周在60分钟内以静脉内输注方式施用10mg/kg的量。在一个实施方式中，在静脉内输注阿维单抗之前预先给予该患者对乙酰胺基酚和抗组织胺药物。在一个实施方式中，在前4次输注阿维单抗之前预先给予该患者乙酰胺基酚和抗组织胺药物，随后依需要进行。于某些实施方式中，该受试者将经由皮下(SC)输注被施用包含本文所描述的任一项PD-1轴结合拮抗剂的药物。
在一个实施方式中，如本文所描述的包含MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和PARP抑制剂的组合疗法的任一项给药方案，该PARP抑制剂的治疗有效量与MEK抑制剂的第一治疗有效剂量一起采用。如本文所使用的短语“与...一起采用”意指施用PARP抑制剂和MEK抑制剂之间经过的时间不超过5分钟、或不超过10分钟、或不超过15分钟、或不超过20分钟、或不超过25分钟、或不超过30分钟。
在一个实施方式中，如本文所描述的组合疗法的任一项给药方案，该MEK抑制剂的第二治疗有效剂量在施用该MEK抑制剂的第一剂量后约12小时施用。如本文所使用的短语“在施用MEK抑制剂的第一剂量后约12小时”意指MEK抑制剂的第二剂量在施用该MEK抑制剂的第一剂量后10至14小时施用。
于如本文所描述的组合疗法的任一项给药方案的一个实施方式中，施用该PD-1轴结合拮抗剂的当天，该PD-1轴结合拮抗剂在施用治疗有效量的PARP抑制剂(若该组合疗法包含MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和PARP抑制剂)和MEK抑制剂的第一治疗有效剂量(其中该MEK抑制剂每日施用二次)的后者后至少30分钟施用。如本文所使用的短语“至少30分钟后”意指该PD-1轴结合拮抗剂在施用PARP抑制剂(若为该组合疗法的一部分)和MEK抑制剂的第一剂量的后者后至少30分钟、或至少35分钟、或至少40分钟、或至少45分钟、或至少50分钟、或至少55分钟、或至少60分钟、或至少65分钟、或至少70分钟、或至少75分钟、或至少80分钟、或至少85分钟、或至少90分钟施用。
于如本文所描述的组合疗法的任一项给药方案的一个实施方式中，施用该PD-1轴结合拮抗剂的当天，该PD-1轴结合拮抗剂在施用治疗有效量的PARP抑制剂(若该组合疗法包含MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和PARP抑制剂)和MEK抑制剂的第一治疗有效剂量之前至少30分钟施用。如本文所使用的短语“至少30分钟前”意指该PD-1轴结合拮抗剂在施用PARP抑制剂(若为组合疗法的一部分)和第一MEK抑制剂的剂量前至少30分钟、或至少35分钟、或至少40分钟、或至少45分钟、或至少50分钟、或至少55分钟、或至少60分钟、或至少65分钟、或至少70分钟、或至少75分钟、或至少80分钟、或至少85分钟、或至少90分钟施用。
在一个实施方式中，如本文所描述的组合疗法进一步包含在施用该PD-1轴结合拮抗剂之前施用一种或多种术前药物。在一个实施方式中，该一种或多种术前药物在施用该PARP抑制剂(若该组合疗法包含MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和PARP抑制剂)和MEK抑制剂后不短于1小时施用。在一个实施方式中，该一种或多种术前药物在施用该PD-1轴结合拮抗剂之前30至60分钟施用。在一个实施方式中，该一种或多种术前药物在施用该PD-1轴结合拮抗剂之前30分钟施用。在一个实施方式中，该一种或多种术前药物选自下列一项或多项：H1拮抗剂(例如抗组织胺剂，诸如苯海拉明(diphenhydramine))和对乙酰胺基酚。
在一个实施方式中，本文提供选择用于被鉴定或诊断为患有KRAS相关癌症的患者的治疗的方法(例如体外方法)。一些实施方式可进一步包括将所选择的治疗施用被鉴定或诊断为患有KRAS相关癌症的患者。例如，该所选择的治疗可包括施用治疗有效量的组合疗法。一些实施方式可进一步包括在从该患者获得的样品上进行分析以确定该患者是否具有KRAS基因、KRAS激酶、或彼的任一项者的表达或活性或水平失调，及鉴定和诊断该被测定具有KRAS基因、KRAS激酶、或其任一项的表达或活性或水平失调的患者患有KRAS相关癌症的步骤。在一些实施方式中，透过使用管理机构批准的(例如FDA批准的)用于鉴定患者或从患者获得的样品中的KRAS基因、KRAS激酶、或其任一项的表达或活性或水平失调的试剂盒，该患者已被鉴定或诊断为患有KRAS相关癌症。在一些实施方式中，该KRAS相关癌症为本文所描述或本领域已知的癌症。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体非小细胞肺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体胰脏导管腺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体结肠直肠癌或KRAS突变体胃癌。在一个实施方式中，该分析为体外分析，例如利用下一代测序、免疫组织化学或分离FISH分析的分析。在一些实施方式中，该分析为管理机构批准的(例如FDA批准的)试剂盒。
术语“管理机构”为国家负责批准该国药剂的医疗用途的机构。例如管理机构的非限制性实例为美国食品和药物管理局(FDA)。
本发明亦提供治疗患者的方法，该方法包括对从患者获得的样品进行分析以测定该患者是否患有KRAS相关癌症(例如具有KRAS突变体的癌症)并对该被测定患有KRAS相关癌症(例如具有KRAS激酶突变的癌症)的患者施用治疗有效量的组合疗法。在一些实施方式中，该KRAS相关癌症为本文所描述或本领域已知的癌症。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体非小细胞肺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体胰脏导管腺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体结肠直肠癌或KRAS突变体胃癌。在一些实施方式中，该分析为体外分析，例如利用下一代测序、免疫组织化学或分离FISH分析的分析。在一些实施方式中，该分析为管理机构批准(例如FDA批准)的试剂盒。在一些实施方式中，该患者先前接受至少一种先前治疗的治疗，例如至少一种以另一种抗癌治疗进行的治疗，例如一线或二线全身抗癌疗法(例如以一种或多种细胞毒性剂治疗)、切除肿瘤或放射疗法。在一个实施方式中，该先前治疗为基于铂的化学疗法、多西紫杉醇、PD-1轴拮抗剂、或化学疗法与PD-1轴拮抗剂的组合。在一个实施方式中，该先前治疗为化学疗法，其中该化学疗法为FOLFIRINOX、吉西他滨或吉西他滨与nab-紫杉醇的组合。在一个实施方式中，该组合疗法包含为必尼美替尼的MEK抑制剂、为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂和为他拉唑帕尼的PARP抑制剂。在一个实施方式中，该组合疗法包含为必尼美替尼的MEK抑制剂和为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。
在一个实施方式中，本文提供治疗患有KRAS相关癌症(例如具有KRAS突变的癌症)的受试者的方法，该方法包含对该受试者施用治疗有效量的本文所描述的组合疗法，其中该受试者在以本文所描述的组合疗法治疗之前以至少一种先前治疗进行治疗。在一个实施方式中，该患者已接受，例如至少一种以另一种抗癌治疗进行的治疗，例如一线或二线全身抗癌疗法(例如以一种或多种细胞毒性剂治疗)、切除肿瘤或放射疗法。在一个实施方式中，该先前治疗为基于铂的化学疗法、多西紫杉醇、PD-1轴拮抗剂、或化学疗法与PD-1轴拮抗剂的组合。在一个实施方式中，该先前治疗为化学疗法，其中该化学疗法为FOLFIRINOX、吉西他滨或吉西他滨与nab-紫杉醇的组合。在一些实施方式中，该KRAS相关癌症为本文所描述或本领域已知的癌症。在一些实施方式中，该癌症为KRAS突变体非小细胞肺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体胰脏导管腺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体结肠直肠癌或KRAS突变体胃癌。在一个实施方式中，该组合疗法包含为必尼美替尼的MEK抑制剂、为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂和为他拉唑帕尼的PARP抑制剂。在一个实施方式中，该组合疗法包含为必尼美替尼的MEK抑制剂和为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。
癌症或癌症相关疾病的改善可以完全或部分反应表征。“完全反应”或“CR”是指缺乏临床可检测的疾病，而任何先前异常的放射学研究、骨髓和脑脊液(CSF)或异常单克隆蛋白质测量正常化。“部分反应”是指在没有新病变的情况下，所有可测量的肿瘤负荷(即，存在于受试者中的恶性细胞的数量，或测得的肿瘤块的体积或异常单克隆蛋白质的量)减少至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。
治疗可通过下列各来评估：疾病进展受抑制、肿瘤生长受抑制、原发性肿瘤减少、肿瘤相关症状缓解、肿瘤分泌因子受抑制(包括如本文所鉴定的检查点蛋白的表达水平)、原发性或继发性肿瘤出现延迟、原发性或继发性肿瘤发展减缓、原发性或继发性肿瘤发生率降低、疾病继发效应的严重性减缓或减轻、肿瘤生长被遏止和肿瘤消退、肿瘤进展时间(TTP)改善、肿瘤反应时间(TTR)延长、反应持续时间(DR)增加、无进展存活(PFS)增加、总体生存率(OS)增加、客观反应率(ORR)，等。如本文所使用的OS是指从治疗开始到任何原因死亡的时间。如本文所使用的TTP是指从治疗开始到肿瘤进展的时间；TTP不包含死亡。对具有确认的客观反应(CR或PR)的患者而言，如本文所使用的TTR的定义为从随机化的日期或研究治疗的第一剂量的日期到客观肿瘤反应的第一个记录的时间。如本文所使用的DR意指从肿瘤反应到疾病进展记录的时间。如本文所使用的PFS意指从治疗开始直至肿瘤进展或死亡的时间。如本文所使用的ORR意指在最短的期间内其肿瘤大小减少预定义的量的患者比例，其中反应持续时间通常测量从初始反应时间到记录的肿瘤进展。在极端的情况下，完全抑制在本文中称为预防或化学预防。
因此，本文提供用于达到一个或多个与使用本文所描述的组合疗法治疗癌症相关的临床终点的方法。在一个实施方式中，本文所描述的患者可显示阳性肿瘤反应，诸如以本文所描述的组合疗法治疗后肿瘤生长受抑制或肿瘤尺寸减小。于某些实施方式中，本文所描述的患者可在施用有效量的本文所描述的组合疗法后达到实体瘤反应评估标准(例如RECIST 1.1)中的完全反应、部分反应或稳定疾病。于某些实施方式中，本文所描述的患者可显示存活增加且无肿瘤进展。在一些实施方式中，本文所描述的患者可显示疾病进展受抑制、肿瘤生长受抑制、原发性肿瘤减少、肿瘤相关症状缓解、肿瘤分泌因子受抑制(包括肿瘤分泌的激素，诸如促成类癌症候群者)、原发性或继发性肿瘤出现延迟、原发性或继发性肿瘤发展减缓、原发性或继发性肿瘤发生率降低、疾病继发效应的严重性减缓或减轻、肿瘤生长被遏止和消退、肿瘤反应时间减少(TTR)、反应持续时间(DR)增加、无进展存活(PFS)增加、肿瘤进展时间(TTP)和/或总体生存率(OS)增加，等。在一个实施方式中，组合疗法包含MEK抑制剂(为必尼美替尼)、PD-1轴结合拮抗剂(为阿维单抗)及PARP抑制剂(为他拉唑帕尼)。在一实施方式中，组合疗法包含为必尼美替尼的MEK抑制剂及为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。
在另一实施方式中，提供用于在患有如本文所描述的癌症的患者中减少肿瘤反应时间(TTR)、增加反应持续时间(DR)、增加无进展存活(PFS)的方法，该方法包含施用有效量的如本文所描述的组合疗法。在一个实施方式中，提供用于减少患有如本文所描述的癌症的患者的肿瘤反应时间(TTR)的方法，该方法包含施用有效量的如本文所描述的组合疗法。在一个实施方式中，提供用于增加患有如本文所描述的癌症的患者的无进展存活(PFS)的方法，该方法包含施用有效量的如本文所描述的组合疗法。在一个实施方式中，提供用于增加患有如本文所描述的癌症的患者的无进展存活(PFS)的方法，该方法包含施用有效量的如本文所描述的组合疗法。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体癌症。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体非小细胞肺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体胰脏导管腺癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体结肠直肠癌。在一个实施方式中，该癌症为KRAS突变体胃癌。在一个实施方式中，该组合疗法包含为必尼美替尼的MEK抑制剂、为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂和为他拉唑帕尼的PARP抑制剂。在一个实施方式中，该组合疗法包含为必尼美替尼的MEK抑制剂和为阿维单抗的PD-1轴结合拮抗剂。
于本文所描述的任何方法或用途的一些实施方式中，用于使用来自患者的样品测定该患者是否患有KRAS相关癌症的分析可包括，例如下一代测序、免疫组织化学、荧光显微术、分离FISH分析、Southern印迹、Western印迹、FACS分析、Northern印迹和基于PCR的扩增(例如RT-PCR和定量性实时RT-PCR)。如本领域所周知者，该分析通常，例如使用至少一种经标记的核酸探针或至少一种经标记的抗体或其抗原结合片段进行。分析可利用本领域已知的其他用于检测KRAS基因、KRAS激酶、或其任一项的表达或活性或水平失调的检测方法进行(参见，例如本文所引用的参考文献)。在一个实施方式中，该样品为来自患者的生物样品或活组织检查样品(例如经石蜡包埋的活组织检查样品)。在一些实施方式中，该患者为被怀疑具有与KRAS相关的癌症的患者、具有一种或多种与KRAS相关的癌症的症状的患者和/或具有增加的与发展KRAS相关的癌症的风险的患者。
在一个实施方式中，根据本发明的治疗癌症的方法亦包括手术或放射疗法。手术的非限制性实例包括，例如开放手术或微创手术。手术可包括，例如移除整个肿瘤、肿瘤减积或移除导致受试者疼痛或压力的肿瘤。用于在患有癌症的受试者上进行开放手术和微创手术的方法为本领域所已知。放射疗法的非限制性实例包括外部放射光束疗法(例如使用千伏特X射线或兆伏特X射线的外部光束疗法)或内部放射疗法。内部放射疗法(亦称为近距离放射疗法(brachytherapy))可包括使用，例如低剂量内部放射疗法或高剂量内部放射疗法。低剂量内部放射疗法包括，例如将小放射性小丸(亦称为种子)***受试者的癌组织中或癌组织附近。高剂量内部放射疗法包括，例如将细管(例如导管)或植入物***受试者的癌组织中或癌组织附近，并使用辐射机将高剂量的辐射递送至该细管或植入物。用于在患有癌症的受试者上进行放射疗法的方法为本领域所已知。
已建立的测试模型可能证明本文所描述的组合疗法导致本文先前描述的有益效果。本领域的技术人员完全能够选择相关的测试模型来证明这种有益效果。本文所描述的组合疗法的药理学活性可，例如在，例如描述于下文中的临床研究或测试程序中证明。
合适的临床研究为，例如在患有增殖性疾病的患者中的开放标记，剂量递增研究。这种研究可证明，特别是本文所描述的组合疗法的治疗剂的协同作用。该对增殖性疾病的有益作用可透过这些研究的结果直接测定。特别是，这种研究可适合用于将使用该MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂或PARP抑制剂的任一项者的单一疗法的效果相对在该包含MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和PARP抑制剂的三重组合疗法的效果相比较，或用于将使用该MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和PARP抑制剂的任二者的双重疗法的效果相对于使用该MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂或PARP抑制剂的任一项者的单一疗法的效果相比较。
在一个实施方式中，其中该组合疗法为包含MEK抑制剂、PD-1轴结合拮抗剂和PARP抑制剂的三重疗法，该MEK抑制剂的剂量被递增直到达到最大耐受剂量，且该PD-1轴结合拮抗剂和该PARP抑制剂各自以固定剂量施用。或者，该MEK抑制剂和PARP抑制剂可以固定剂量施用且该PD-1轴结合拮抗剂的剂量可被递增直到达到最大耐受剂量。或者，该MEK抑制剂和该PD-1轴结合拮抗剂的剂量可各自以固定剂量施用且该PARP抑制剂的剂量可被递增直到达到最大耐受剂量。
在一个实施方式中，其中该组合疗法为包含MEK抑制剂和PD-1轴结合拮抗剂的双重疗法，该MEK抑制剂的剂量被递增直到达到最大耐受剂量，且该PD-1轴结合拮抗剂以固定剂量施用。或者，该MEK抑制剂可以固定剂量施用且该PD-1轴结合拮抗剂的剂量可被递增直到达到最大耐受剂量。
该治疗的效力可在，例如6、12、18或24周后在这种研究中通过，例如每6周评估症状评分测定。
本发明的方法或组合的化合物可在施用前配制。优选地，该配制剂将适合该特定的施用方式。这些化合物可与本领域中已知的药学上可接受的载体一起配制并以本领域已知的多种剂型施用。在制造本发明的医药组合物时，该活性成分通常将与药学上可接受的载体混合，或以载体稀释或包封在载体中。这种载体包括，但不限于固体稀释剂或填充剂、赋形剂、无菌水性介质和各种非毒性有机溶剂。剂量单位形式或医药组合物包括包装在适于细分为单独剂量的容器中的片剂、胶囊(诸如明胶胶囊)、丸剂、粉末、颗粒、水性和非水性口服溶液和悬浮液、含片(lozenge)、药片(troche)、硬糖、喷雾剂、乳膏、油膏、栓剂、胶状物、凝胶、糊剂、乳液、软膏、注射液、酏剂、糖浆和肠胃外溶液。
肠胃道外配制剂包括药学上可接受的水性或非水性溶液、分散液、悬浮液、乳测和用于制备其无菌粉末。载体的实例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇)、植物油和可注射的有机酯，诸如油酸乙酯。流动性可通过使用涂层(诸如卵磷脂)、表面活性剂或保持适当的粒度来维持。示例性肠胃道外施用形式包括本发明的化合物在无菌水溶液(例如丙二醇水溶液或右旋糖溶液)中的溶液或悬浮液。若需要时，这种剂型可经适当地缓冲。
另外，润滑剂，诸如硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠和滑石通常可用于压片目的。类似类型的固体组合物亦可用于软和硬填充明胶胶囊中。因此，优选的材料包括乳糖(lactose)或乳糖(milk sugar)和高分子量聚乙二醇。当需要含水悬浮液或酏剂以用于口服施用时，其中的活性化合物可与各种甜味剂或调味剂、着色剂或染料，及若需要时，乳化剂或悬浮剂，加上稀释剂，诸如水、乙醇、丙二醇、甘油或其组合混合。
用于制备具有特定量的活性化合物的各种医药组合物的方法为本领域的技术人员已知或清楚明白的。例如，参见Remington's Pharmaceutical Sciences,MackPublishing Company,Easter,Pa.,15th Edition(1975)。
在一个实施方式中，该MEK抑制剂经配制成用于口服施用。在一个实施方式中，该MEK抑制剂经配制成片剂或胶囊。在一个实施方式中，该MEK抑制剂经配制成片剂。在一个实施方式中，该片剂为经涂层的片剂。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为必尼美替尼或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为游离碱形式的必尼美替尼。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为必尼美替尼的药学上可接受的盐。在一个实施方式中，该MEK抑制剂为结晶型必尼美替尼。制备必尼美替尼的口服配制剂的方法描述于PCT公开号WO 2014/063024中。在一个实施方式中，必尼美替尼的片剂配制剂包含15mg的必尼美替尼。在一个实施方式中，必尼美替尼的片剂配制剂包含15mg结晶型必尼美替尼。在一个实施方式中，必尼美替尼的片剂配制剂包含45mg的必尼美替尼。在一个实施方式中，必尼美替尼的片剂配制剂包含45mg结晶型必尼美替尼。
本发明还涉及包含本发明的组合物的治疗剂和用于施用该治疗剂的书面说明书的试剂盒。在一个实施方式中，该书面说明书详述并限定该治疗剂的施用模式，例如用于同时或依序施用本发明的治疗剂。在一个实施方式中，该书面说明书详述并限定该治疗剂的施用模式，例如通过具体指定这种治疗剂的各治疗剂在28天周期内的施用天数。
虽然已经参考各种应用、方法、试剂盒和组合物来描述所公开的教导内容，应理解的是，在不脱离本文的教导内容和下文中的本发明的申请专利范围下可进行各种变化和修饰。提供前述实例用于将所公开的教导内容说明地更好，且不意图限制本文所呈现的教导内容的范围。虽然本发明的教导内容已就这些示例性实施方式描述，本领域的技术人员将轻易地理解这些示例性实施方式可能有许多变化和修饰，而无需过多实验。所有这种变化和修饰都在目前的教导内容的范围内。
本文引用的所有参考数据(包括专利案、专利申请案、论文、教科书，等，及其中引用的参考文献)在它们尚未被纳入的程度下，其全部内容以引用方式并入本文。当该并入的文献和类似材料的一项或多项与本申请案不同或互相矛盾(包括，但不限于定义的术语、术语用法、所描述的技术，等)时，以本申请案为准。
前述内容和实施例详细描述本发明的某些特定实施方式并描述本发明者设想的最优选模式。然而，应理解的是，无论前述内容如何详细地出现在文本中，本发明可以多种方式实行且本发明应根据所附的权利要求书及其任何同等解释。
实施例
实施例1：用于治疗癌症的必尼美替尼和阿维单抗的组合(加上或不加上他拉唑帕尼)的临床研究。
此为在患有局部晚期或转移性KRAS突变体NSCLC和胰脏导管腺癌(PDAC)和其他KRAS突变体实体瘤的成年患者中进行的必尼美替尼与阿维单抗的组合，加上或不加上他拉唑帕尼的第1/2期、开放标记、多中心研究。如该实施例中所使用，术语“他拉唑帕尼”是指他拉唑帕尼或其任何药学上可接受的盐，包括，但不限于甲苯磺酸他拉唑帕尼。
必尼美替尼与阿维单抗的组合的第1b期：
在患有KRAS突变体NSCLC和PDAC的患者中进行的该研究的第1/2期部分中评估必尼美替尼加阿维单抗的组合的安全性和初步抗肿瘤活性。
研究开始时，入选患有KRAS突变体NSCLC和PDAC的患者的二个群组并依表5所示，在28天的周期中口服施用45mg BID或30mg BID的必尼美替尼与固定剂量的800mg IV Q2W的阿维单抗组合施用来进行治疗并在周期1的期间评估DLT。
表5.阿维单抗和必尼美替尼剂量水平
若观察到DLT，则可以降低必尼美替尼剂量，或者若新出现的安全性数据表明连续BID给药是不可耐受的，则可探索用于必尼美替尼的替代施用方案(施用3周和停止1周)。
第1b期必尼美替尼与阿维单抗和他拉唑帕尼组合：
第1期剂量探索部分将鉴定在三重组合中的必尼美替尼和他拉唑帕尼的建议的第2期剂量(RP2D)。患有局部晚期或转移性KRAS突变体NSCLC和PDAC的患者可依表6所示，在28天的治疗周期中通过一天二次(BID)口服施用2种不同剂量(30或45mg)的必尼美替尼和每天口服施用(QD)3种不同剂量的他拉唑帕尼(0.5mg、0.75mg或1.0mg)和固定剂量的阿维单抗(800mg Q2W)来进行治疗并将评估剂量限制毒性(DLT)。
表6.阿维单抗、必尼美替尼和他拉唑帕尼剂量水平
该DLT评估期为28天(即，周期1)且经修饰的毒性概率间隔(mTPI)法将用来定义该组合的RP2D。若新出现的安全性数据表明连续BID给药是不可耐受的，则亦可探索用于必尼美替尼的替代给药方案(施用3周和停药1周)。此外，若该三重组合是不可耐受的，则可评估他拉唑帕尼加上必尼美替尼的组合，包括使用表6中的相关给药方案。
第2期设计
一旦第1b期完成且已确定双重组合(必尼美替尼与阿维单抗组合)和三重组合(必尼美替尼与阿维单抗和他拉唑帕尼组合)的R2PD，将开始第2期部分以评估各组合的R2PD的安全性和抗肿瘤活性。KRAS突变体NSCLC和mPDAC群组的患者将以1：1的比例随机分配在双重组合和三重组合中。此外，患有其他KRAS突变体晚期实体瘤的患者将入选接受该三重组合治疗。
肿瘤反应、安全性和生物标记物的评估
在该研究中，必尼美替尼与阿维单抗组合，加上或不加上他拉唑帕尼在患者中的总体反应率(ORR)将根据实体瘤中的反应评估标准版本1.1(RECIST v1.1)进行评估。
安全性、总体存活(OS)和其他肿瘤活性数据，诸如肿瘤反应时间(TTR)、反应持续时间(DR)和无进展存活(PFS)将使用RECIST v1.1评估。
评估该组合的抗肿瘤活性与PD-L1表达、DDR基因改变、PI3K/mTOR途径活化标记物(诸如PIK3CA突变和PTEN缺失)的相关性。
亦评估外周血和肿瘤组织中可能与必尼美替尼和阿维单抗加上或不加上他拉唑帕尼的作用机制或对其抗性相关的潜在预测性和/或药效动力学生物标记物，包括，但不限于与该免疫反应相关的生物标记物。
序列表
<110> Pfizer Inc.
Merck Patent GMBH
Array BioPharma Inc.
<120> 治疗癌症的方法及组合疗法
<130> PC72409A
<150> 62/607,190
<151> 2017-12-18
<160> 24
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 444
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 1
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Asn Ile Tyr Pro Gly Ser Ser Leu Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Ser Thr Gly Thr Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln
340 345 350
Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415
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<223> 合成构建体
<400> 3
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Trp Asp Ser
20 25 30
Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Thr Ser Tyr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn
85 90 95
Asp Tyr Phe Tyr Pro His Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile
100 105 110
Lys Arg Gly Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser
115 120 125
Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn
130 135 140
Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala
145 150 155 160
Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys
165 170 175
Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp
180 185 190
Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu
195 200 205
Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215 220
<210> 4
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 4
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Asn Ile Tyr Pro Gly Ser Ser Leu Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Ser Thr Gly Thr Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 5
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 5
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Asn Ile Trp Pro Gly Ser Ser Leu Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Leu Thr Gly Thr Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 6
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 6
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Trp Asp Ser
20 25 30
Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Thr Ser Tyr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn
85 90 95
Asp Tyr Phe Tyr Pro His Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 7
<211> 432
<212> PRT
<213> 智人
<400> 7
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Trp Gln Pro Gly Arg Ser
1 5 10 15
Leu Arg Leu Asp Cys Lys Ala Ser Gly Ile Thr Phe Ser Asn Ser Gly
20 25 30
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
35 40 45
Val Arg Trp Tyr Asp Gly Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Thr Asn Asp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
100 105 110
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
115 120 125
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Asp Tyr Phe
130 135 140
Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly
145 150 155 160
Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu
165 170 175
Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Thr Tyr Thr
180 185 190
Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Arg Val Glu
195 200 205
Ser Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly
210 215 220
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
225 230 235 240
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Trp Val Asp Val Ser Gln Glu
245 250 255
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Tyr Asp Gly Val Glu Val His
260 265 270
Asn Ala Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
275 280 285
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
290 295 300
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys
305 310 315 320
Thr Ile Ser Lys Ala Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
325 330 335
Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
340 345 350
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
355 360 365
Asn Gly Gln Pro Glu Lys Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
370 375 380
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser
385 390 395 400
Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
405 410 415
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
420 425 430
<210> 8
<211> 208
<212> PRT
<213> 智人
<400> 8
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr
35 40 45
Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu
65 70 75 80
Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Trp Pro Arg Thr
85 90 95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser
100 105 110
Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Ser Gly Thr Ala Ser
115 120 125
Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Val Gln Trp
130 135 140
Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr
145 150 155 160
Glu Gln Asp Ser Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu
165 170 175
Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr
180 185 190
His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
195 200 205
<210> 9
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 9
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Val Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ser Ser Thr Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Lys Ser Leu Gln Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
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Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 10
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 10
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Tyr Ser Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35 40 45
Arg Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg
85 90 95
Asp Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
115 120 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
130 135 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145 150 155 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
165 170 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
180 185 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
195 200 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 11
<211> 432
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 11
Leu Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Glu Leu Tyr Ile Ile Glu His Gly
1 5 10 15
Ser Asn Val Thr Leu Glu Cys Asn Phe Asp Thr Gly Ser His Val Asn
20 25 30
Leu Gly Ala Ile Thr Ala Ser Leu Gln Lys Val Glu Asn Asp Thr Ser
35 40 45
Pro His Arg Glu Arg Ala Thr Leu Leu Glu Glu Gln Leu Pro Leu Gly
50 55 60
Lys Ala Ser Phe His Ile Pro Gln Val Gln Val Arg Asp Glu Gly Gln
65 70 75 80
Tyr Gln Cys Ile Ile Ile Tyr Gly Val Ala Trp Asp Tyr Lys Tyr Leu
85 90 95
Thr Leu Lys Val Lys Ala Ser Tyr Arg Lys Ile Asn Thr His Ile Leu
100 105 110
Lys Val Pro Glu Thr Asp Glu Val Glu Leu Thr Cys Gln Ala Thr Gly
115 120 125
Tyr Pro Leu Ala Glu Val Ser Trp Pro Asn Val Ser Val Pro Ala Asn
130 135 140
Thr Ser His Ser Arg Thr Pro Glu Gly Leu Tyr Gln Val Thr Ser Val
145 150 155 160
Leu Arg Leu Lys Pro Pro Pro Gly Arg Asn Phe Ser Cys Val Phe Trp
165 170 175
Asn Thr His Val Arg Glu Leu Thr Leu Ala Ser Ile Asp Leu Gln Ser
180 185 190
Gln Met Glu Pro Arg Thr His Pro Thr Trp Glu Pro Lys Ser Cys Asp
195 200 205
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
210 215 220
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
225 230 235 240
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Trp Val Asp Val Ser His Glu Asp
245 250 255
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
260 265 270
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Trp
275 280 285
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
290 295 300
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
305 310 315 320
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
325 330 335
Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
340 345 350
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
355 360 365
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
370 375 380
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
385 390 395 400
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
405 410 415
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
420 425 430
<210> 12
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 12
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser
20 25 30
Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 13
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 13
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 14
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 14
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
35 40 45
Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Lys Gly Arg
50 55 60
Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met
65 70 75 80
Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ile
85 90 95
Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 15
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 15
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 16
<211> 290
<212> PRT
<213> 智人
<400> 16
Met Arg Ile Phe Ala Val Phe Ile Phe Met Thr Tyr Trp His Leu Leu
1 5 10 15
Asn Ala Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr
20 25 30
Gly Ser Asn Met Thr Ile Glu Cys Lys Phe Pro Val Glu Lys Gln Leu
35 40 45
Asp Leu Ala Ala Leu Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp Lys Asn Ile
50 55 60
Ile Gln Phe Val His Gly Glu Glu Asp Leu Lys Val Gln His Ser Ser
65 70 75 80
Tyr Arg Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys Asp Gln Leu Ser Leu Gly Asn
85 90 95
Ala Ala Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Tyr
100 105 110
Arg Cys Met Ile Ser Tyr Gly Gly Ala Asp Tyr Lys Arg Ile Thr Val
115 120 125
Lys Val Asn Ala Pro Tyr Asn Lys Ile Asn Gln Arg Ile Leu Val Val
130 135 140
Asp Pro Val Thr Ser Glu His Glu Leu Thr Cys Gln Ala Glu Gly Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Ala Glu Val Ile Trp Thr Ser Ser Asp His Gln Val Leu Ser
165 170 175
Gly Lys Thr Thr Thr Thr Asn Ser Lys Arg Glu Glu Lys Leu Phe Asn
180 185 190
Val Thr Ser Thr Leu Arg Ile Asn Thr Thr Thr Asn Glu Ile Phe Tyr
195 200 205
Cys Thr Phe Arg Arg Leu Asp Pro Glu Glu Asn His Thr Ala Glu Leu
210 215 220
Val Ile Pro Glu Leu Pro Leu Ala His Pro Pro Asn Glu Arg Thr His
225 230 235 240
Leu Val Ile Leu Gly Ala Ile Leu Leu Cys Leu Gly Val Ala Leu Thr
245 250 255
Phe Ile Phe Arg Leu Arg Lys Gly Arg Met Met Asp Val Lys Lys Cys
260 265 270
Gly Ile Gln Asp Thr Asn Ser Lys Lys Gln Ser Asp Thr His Leu Glu
275 280 285
Glu Thr
290
<210> 17
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 17
Ser Tyr Ile Met Met
1 5
<210> 18
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 18
Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr
1 5 10
<210> 19
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 19
Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr
1 5 10
<210> 20
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 20
Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 21
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 21
Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 22
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 22
Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Arg Val
1 5 10
<210> 23
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 23
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Thr Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 24
<211> 216
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 24
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
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