阅读说明：本技术 一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法 (Low-temperature amylase strain and production method of low-temperature amylase ) 是由 马露 陈康 曹杰 于 2020-06-12 设计创作，主要内容包括：本发明低温淀粉酶生产方法技术领域,具体的说是一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法,包括如下步骤：S1:于顶部入口处添加玉米粉、小麦粉、酵母膏、中蜂蜜、蛋白胨的混合物,然后再将盛放有中间气单孢菌的惰性气体罐上的加料管与发酵机的加料口连接,使得中间气单孢菌进入发酵机的内部,最后加入适量的去离子水,发酵时长为2-3d,温度为15-25℃；S2:发酵完后进行发酵液的取用时,将注射针管从发酵机的加料口插入,此时调节驱动橡胶圆环使得橡胶筒的底部上移,用注射针管吸出菌落；本发明大大减小了橡胶筒内溶液与空气的接触机会,从而可防止发酵液发生污染,且进行下一批的菌落的培养时,可直接从加料口注入原料,进而可实现持续化生产。(The invention relates to the technical field of low-temperature amylase production methods, in particular to a low-temperature amylase strain and a production method of low-temperature amylase, which comprise the following steps: s1, adding a mixture of corn flour, wheat flour, yeast extract, medium honey and peptone at a top inlet, connecting a feeding pipe on an inert gas tank containing the medium aeromonas with a feeding port of a fermentation machine to enable the medium aeromonas to enter the fermentation machine, and finally adding a proper amount of deionized water, wherein the fermentation time is 2-3d, and the temperature is 15-25 ℃; s2, when taking the fermentation liquor after fermentation, inserting an injection needle tube from a feed inlet of the fermentation machine, adjusting and driving the rubber ring to move the bottom of the rubber cylinder upwards, and sucking out bacterial colonies by using the injection needle tube; the invention greatly reduces the contact chance of the solution in the rubber cylinder and the air, thereby preventing the fermentation liquor from being polluted, and when the bacterial colony of the next batch is cultured, the raw material can be directly injected from the feed inlet, thereby realizing the continuous production.)

一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法

技术领域

本发明属于低温淀粉酶生产方法技术领域，具体的说是一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法。

背景技术

淀粉酶是能催化淀粉水解转化成葡萄糖、麦芽糖及其他低聚糖的一群酶的总称。低温淀粉酶是一个相对的概念，其最适作用温度相对于嗜温淀粉酶来说，最适反应温度比嗜温淀粉酶要低20-30℃，而且在0℃有一定的酶活。低温淀粉酶能在低温下有效发挥催化作用的特点，使其在生物工程领域及解决现代能源危机中有着广泛的应用前景。

目前针对于不同的生产方法对酶活性影响的研究也不胜枚举，专利号为CN1952115A的专利提出了一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶及其生产方法，其主要研究了金属离子和温度对酶活性的影响，以及在不同的温度和PH条件下的酶的热稳定性，从而得出适宜酶生张长的环境。现有技术中在进行低温淀粉酶的生产时，大多直接将原料直接加入发酵盒的内部，然后盖上密封盖，放置于一定温度的环境中，等待2-3天进行发酵，发酵好后，将菌落直接从发酵盒中倒出，再进行后续的低温淀粉酶的制备的操作，这种生产方法将会大大增加原料与空气的接触面积，从而导致发酵盒内空气过多，增加了原料被污染的几率，因而减小了发酵液制备成功的几率；且现有技术中的发酵盒在使用完后才能以后需要杀菌消毒以后才能继续进行下一批菌落的培养，而不能连续的进行菌落的培养，因而比较浪费生产时间。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，解决现有技术中原料与空气接触面积大，使得原料容易被污染以及现有技术中的发酵盒不能进行连续培养菌落问题，本发明提出的一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：本发明所述的一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法，该方法包括如下步骤：

S1:打开发酵机顶部的密封塞，于顶部入口处添加玉米粉、小麦粉、酵母膏、中蜂蜜、蛋白胨的混合物，然后再加入惰性气体，排出发酵机内部的氧气，然后再将盛放有中间气单孢菌的惰性气体罐上的加料管与发酵机的加料口连接，使得中间气单孢菌进入发酵机的内部，最后加入适量的去离子水，去离子水中富含Ca²⁺，发酵时长为2-3d，温度为15-25℃；

S2:发酵完后进行发酵液的取用时，先拔出密封塞，将经过杀菌消毒后的注射针管从发酵机的加料口***，此时调节驱动橡胶圆环使得橡胶筒的底部上移，通过环形可视窗观察发酵机内部液面情况，当注射针管能与发酵机内部发酵液接触时，用注射针管吸出菌落，塞上密封塞；

S3:将吸出的菌落诱导细胞在离心机中离心，取上清液将丝蛋白分离得到粗酶液；

S4:将S3所得的粗酶液中加入硫酸铵，再将粗酶液和硫酸铵的混合液冰浴搅拌，充分沉淀后，收集沉淀物；

S5:将沉淀物经硫酸缓冲液及凝胶柱处理层析分离，进行活性测定后收集活性部分，然后再经过脱盐、浓缩即可得低温淀粉酶成品；

其中S1中所述的发酵机包括发酵箱、橡胶筒、密封盖、驱动橡胶圆环和从动橡胶圆环；所述发酵箱的顶部设有密封盖；所述密封盖的中心位置处开设有加料口；所述加料口的内部设有橡胶膜片；所述橡胶膜片的边缘与加料口的内壁固连；所述橡胶膜片上设有开口；所述加料口的内部位于橡胶膜片的上方插设有密封塞；所述密封盖的底部边缘开设有第一环形凹槽；所述第一环形凹槽的断面为圆弧形结构；所述第一环形凹槽的内部设有从动橡胶圆环；所述第一环形凹槽的内壁固定设有用于支撑从动橡胶圆环的弧形支撑杆；所述弧形支撑杆设有若干组，若干组弧形支撑杆在第一环形凹槽的内壁均匀排列；所述第一环形凹槽的内壁和弧形支撑杆的内壁均固定设有弹性伸缩杆；所述弹性伸缩杆的自由端压紧在从动橡胶圆环的边缘，且弹性伸缩杆的自由端设有滚珠；所述发酵箱的内部设有橡胶筒；所述橡胶筒为底部为弧形结构的圆柱筒；所述橡胶筒的顶端穿过密封盖底部的第二环形凹槽并固定连接在从动橡胶圆环的边缘；所述第二环形凹槽与第一环形凹槽连通；所述密封盖的顶部位于第一环形凹槽的正上方设有若干组回形限位板；所述回形限位板的内部穿设有驱动橡胶圆环；所述驱动橡胶圆环的内部和从动橡胶圆环的内部均固定设有磁铁组；所述磁铁组中的磁铁绕驱动橡胶圆环和从动橡胶圆环断面的中心点呈等距环形排列，且所述磁铁组上相邻两组磁铁的内侧端的极性相反；所述磁铁组在驱动橡胶圆环上的排布方式与磁铁组在从动橡胶圆环上的排布方式相同；所述驱动橡胶圆环的断面直径大于从动橡胶圆环的断面直径；所述密封盖上位于加料口的外边缘设有环形可视窗；

工作时，先将驱动橡胶圆环向内侧进行翻转，此时驱动橡胶圆环上的磁铁组吸引从动橡胶圆环上的磁铁组并使得从动橡胶圆环向外侧进行翻转，从而将橡胶筒的边缘卷绕在从动橡胶圆环上，当不断的向内侧翻转驱动橡胶圆环，从动橡胶圆环也会不断的向外侧进行翻转，从而将橡胶筒的边缘不断的卷绕，橡胶筒的底部不断上移的同时位于橡胶筒内部的气体不断的被排出，此时打开发酵箱顶部的密封塞，于顶部加料口处添加玉米粉、小麦粉、酵母膏、中蜂蜜、蛋白胨的混合物，边加料的同时边将驱动橡胶圆环向外侧不断的进行翻转，此时从动橡胶圆环在驱动橡胶圆环的作用下向内侧进行翻转，从而将缠绕在从动橡胶圆环上的橡胶筒进行释放，提高橡胶筒的容纳空间，当加料完成后，再加入惰性气体，排出发酵机内部的氧气，然后再将盛放有中间气单孢菌的惰性气体罐上的加料管与发酵机的加料口连接，使得中间气单孢菌进入发酵机的内部，再加入适量的去离子水，最后再塞上密封塞即可进行发酵，在加料的同时可从环形可视窗观察橡胶筒的液面；当发酵完成需要进行发酵液的取用时，此时可将经过杀菌消毒后的注射针管从发酵箱顶部的加料口***直接进行抽取，如果注射针管不能够与橡胶筒内部的液面相接触，此时可向内侧卷绕驱动橡胶圆环，从而使得从动橡胶圆环将橡胶筒进行卷绕，使得橡胶筒内的液面上移，即可继续抽取发酵液，使用方便，不仅使得发酵液的制备量可控，同时该发明可反复利用进行发酵液的制备，同时该发明减少了发酵液与空气的接触机会，进而避免发酵液被感染。

优选的，所述密封盖上位于环形可视窗和第二环形凹槽之间设有环形通槽；所述环形通槽的内部插设有环形板；所述环形通槽的内壁粘设有环形橡胶垫；所述环形板上设有的环形凸起位于环形橡胶垫内壁的环形滑轨内；所述环形板的顶端伸出环形通槽的上端口；所述环形板的底端通过压缩弹簧与扇形刮板的内侧壁固连；所述压缩弹簧将扇形刮板压紧在橡胶筒的内壁；所述扇形刮板设有若干组，若干组扇形刮板之间通过橡胶刮板固连；所述扇形刮板的顶端通过铰支座活动铰接在密封盖的底部；工作时，当橡胶筒在从动橡胶圆环上进行卷绕时，扇形刮板和橡胶刮板可将橡胶筒内壁的溶液刮下，且可来回转动环形板，环形板通过压缩弹簧带动扇形刮板来回摆动，从而可将橡胶筒内壁的发酵液抖落下去。

优选的，所述发酵箱的顶部边缘开设有收集槽；位于所述从动橡胶圆环下方的弹性伸缩杆的活动杆部分固定设有刮料板；工作时，当橡胶筒在从动橡胶圆环上进行卷绕时，位于弹性伸缩杆上的刮料板可将橡胶筒内壁的发酵液刮下并落入收集槽的内部进行收集。

优选的，所述发酵箱的侧壁固定设有打气筒；所述打气筒的内部活动设有活塞板；所述活塞板的外侧端面与推杆的一端固连；所述打气筒的内侧端通过弹簧管与橡胶筒内部的气腔连通；所述橡胶筒的内壁均匀的开设有微孔；所述微孔与气腔连通；所述打气筒通过抽液管与收集槽的底部连通；所述抽液管的内部设有单向阀；工作时，当推杆向外侧进行拉动时，此时收集槽内部收集的发酵液经抽液管进入打气筒的内部，当推杆向打气筒的内侧进行推动时，此时打气筒内部的气体以及从收集槽内抽取的发酵液经弹簧管进入橡胶筒内部的气腔内，然后经橡胶筒上的微孔喷出，从而不仅可以将收集槽内的发酵液重新回收到橡胶筒的内部，且可向橡胶筒的内部泵入气体，起到搅动发酵液的作用，使得发酵液的混合更加的均匀，从而使得菌落的培养更加的均匀。

优选的，所述发酵箱的底部壁内固定设有气缸；所述气缸的顶端固定设有的滑块与活动板底部的滑轨滑动连接；所述活动板的上表面设有的三棱锥状凸起卡设在橡胶筒底部的三棱锥状卡槽内；工作时，当推杆向打气筒的内侧推动时，此时气体经弹簧管进入气腔的内部，气腔一侧先膨胀，从而使得橡胶筒的底部发生摆动，由于活动板的上表面设有的三棱锥状凸起卡设在橡胶筒底部的三棱锥状卡槽内，橡胶筒的摆动带动活动板的来回摆动，从而起到震荡橡胶筒内部发酵液的作用，进而使得发酵液的混合更加的均匀，避免菌落发生大面积团簇。

优选的，所述气缸的底部通过出气管与打气筒的内部连通；所述出气管与打气筒连接的一端靠近打气筒的外侧端；工作时，当将橡胶筒卷绕在从动橡胶圆环上时，此时位于气腔内部的气体将会挤压进入打气筒的内部，进而通过出气管进入气缸的内部，气缸上移进而通过活动板将橡胶筒的底部向上托起，可减小从动橡胶圆环所承受的重力，从而更加便于橡胶筒的卷绕。

本发明的有益效果如下：

1.本发明所述的一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法，通过设置驱动橡胶圆环和从动橡胶圆环，通过驱动橡胶圆环的翻动来控制从动橡胶圆环的翻转，进而实现橡胶筒的卷绕与展开，使得橡胶筒内部容积可控，进而可控制培养量，且橡胶筒底部距离发酵箱端口的距离可控，便于将菌落用注射针管抽取出来；同时本发明在最初加料时，橡胶筒的底部离发酵箱的端口距离很近，橡胶筒内部容积很小，因而空气量特别少，同时加料从加料口加入，取料通过注射针管从加料口取出，加料口的内部设有橡胶膜片，进而大大减小了橡胶筒内溶液与空气的接触机会，从而可防止发酵液发生污染，且进行下一批的菌落的培养时，可直接从加料口注入原料，进而可实现持续化生产，节约培养时间。

2.本发明所述的一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法，通过设置刮料板，当橡胶筒在从动橡胶圆环上进行卷绕时，位于弹性伸缩杆上的刮料板可将橡胶筒内壁的发酵液刮下并落入收集槽的内部进行收集。

3.本发明所述的一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法，通过设置打气筒，进而通过推动推杆可将收集槽内的发酵液以及气体泵入橡胶筒的内部，从而不仅可以将收集槽内的发酵液重新回收到橡胶筒的内部，且可向橡胶筒的内部泵入气体，起到搅动发酵液的作用，使得发酵液的混合更加的均匀，从而使得菌落的培养更加的均匀。

附图说明

下面结合附图对本发明作进一步说明。

图1是本发明的生产方法流程图；

图2是本发明的内部结构示意图；

图3是图2中A处局部放大图；

图4是图2中B处局部放大图；

图5是扇形刮板和橡胶刮板的连接示意图；

图中：发酵箱1、橡胶筒2、密封盖3、收集槽4、微孔5、环形板6、密封塞7、回形限位板8、磁铁组9、驱动橡胶圆环10、橡胶膜片11、加料口12、环形通槽13、扇形刮板14、抽液管15、打气筒16、活塞板17、推杆18、出气管19、第二环形凹槽20、气腔21、刮料板22、弧形支撑杆23、第一环形凹槽24、从动橡胶圆环25、弹性伸缩杆26、活动板27、三棱锥状凸起28、滑块29、气缸30、橡胶刮板33。

具体实施方式

为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。

如图1至图5所示，本发明所述的一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法，该方法包括如下步骤：

S1:打开发酵机顶部的密封塞，于顶部入口处添加玉米粉、小麦粉、酵母膏、中蜂蜜、蛋白胨的混合物，然后再加入惰性气体，排出发酵机内部的氧气，然后再将盛放有中间气单孢菌的惰性气体罐上的加料管与发酵机的加料口连接，使得中间气单孢菌进入发酵机的内部，最后加入适量的去离子水，去离子水中富含Ca²⁺，发酵时长为2-3d，温度为15-25℃，其中Ca²⁺可起到将酶活性进行激活的作用，；

S2:发酵完后进行发酵液的取用时，先拔出密封塞，将经过杀菌消毒后的注射针管从发酵机的加料口***，此时调节驱动橡胶圆环使得橡胶筒的底部上移，通过环形可视窗观察发酵机内部液面情况，当注射针管能与发酵机内部发酵液接触时，用注射针管吸出菌落，塞上密封塞；

S3:将吸出的菌落诱导细胞在离心机中离心，取上清液将丝蛋白分离得到粗酶液；

S4:将S3所得的粗酶液中加入硫酸铵，再将粗酶液和硫酸铵的混合液冰浴搅拌，充分沉淀后，收集沉淀物；

S5:将沉淀物经硫酸缓冲液及凝胶柱处理层析分离，进行活性测定后收集活性部分，然后再经过脱盐、浓缩即可得低温淀粉酶成品；

其中S1中所述的发酵机包括发酵箱1、橡胶筒2、密封盖3、驱动橡胶圆环10和从动橡胶圆环25；所述发酵箱1的顶部设有密封盖3；所述密封盖3的中心位置处开设有加料口12；所述加料口12的内部设有橡胶膜片11；所述橡胶膜片11的边缘与加料口12的内壁固连；所述橡胶膜片11上设有开口；所述加料口12的内部位于橡胶膜片11的上方插设有密封塞7；所述密封盖3的底部边缘开设有第一环形凹槽24；所述第一环形凹槽24的断面为圆弧形结构；所述第一环形凹槽24的内部设有从动橡胶圆环25；所述第一环形凹槽24的内壁固定设有用于支撑从动橡胶圆环25的弧形支撑杆23；所述弧形支撑杆23设有若干组，若干组弧形支撑杆23在第一环形凹槽24的内壁均匀排列；所述第一环形凹槽24的内壁和弧形支撑杆23的内壁均固定设有弹性伸缩杆26；所述弹性伸缩杆26的自由端压紧在从动橡胶圆环25的边缘，且弹性伸缩杆26的自由端设有滚珠；所述发酵箱1的内部设有橡胶筒2；所述橡胶筒2为底部为弧形结构的圆柱筒；所述橡胶筒2的顶端穿过密封盖3底部的第二环形凹槽20并固定连接在从动橡胶圆环25的边缘；所述第二环形凹槽20与第一环形凹槽24连通；所述密封盖3的顶部位于第一环形凹槽24的正上方设有若干组回形限位板8；所述回形限位板8的内部穿设有驱动橡胶圆环10；所述驱动橡胶圆环10的内部和从动橡胶圆环25的内部均固定设有磁铁组9；所述磁铁组9中的磁铁绕驱动橡胶圆环10和从动橡胶圆环25断面的中心点呈等距环形排列，且所述磁铁组9上相邻两组磁铁的内侧端的极性相反；所述磁铁组9在驱动橡胶圆环10上的排布方式与磁铁组9在从动橡胶圆环25上的排布方式相同；所述驱动橡胶圆环10的断面直径大于从动橡胶圆环25的断面直径；所述密封盖3上位于加料口12的外边缘设有环形可视窗；

工作时，先将驱动橡胶圆环10向内侧进行翻转，此时驱动橡胶圆环10上的磁铁组9吸引从动橡胶圆环25上的磁铁组9并使得从动橡胶圆环25向外侧进行翻转，从而将橡胶筒2的边缘卷绕在从动橡胶圆环25上，当不断的向内侧翻转驱动橡胶圆环10，从动橡胶圆环25也会不断的向外侧进行翻转，从而将橡胶筒2的边缘不断的卷绕，橡胶筒2的底部不断上移的同时位于橡胶筒2内部的气体不断的被排出，此时打开发酵箱1顶部的密封塞7，于顶部加料口12处添加玉米粉、小麦粉、酵母膏、中蜂蜜、蛋白胨的混合物，边加料的同时边将驱动橡胶圆环10向外侧不断的进行翻转，此时从动橡胶圆环25在驱动橡胶圆环10的作用下向内侧进行翻转，从而将缠绕在从动橡胶圆环25上的橡胶筒2进行释放，提高橡胶筒2的容纳空间，当加料完成后，再加入惰性气体，排出发酵机内部的氧气，然后再将盛放有中间气单孢菌的惰性气体罐上的加料管与发酵机的加料口12连接，使得中间气单孢菌进入发酵机的内部，再加入适量的去离子水，最后再塞上密封塞7即可进行发酵，在加料的同时可从环形可视窗观察橡胶筒2的液面；当发酵完成需要进行发酵液的取用时，此时可将经过杀菌消毒后的注射针管从发酵箱1顶部的加料口12***直接进行抽取，如果注射针管不能够与橡胶筒2内部的液面相接触，此时可向内侧卷绕驱动橡胶圆环10，从而使得从动橡胶圆环25将橡胶筒2进行卷绕，使得橡胶筒2内的液面上移，即可继续抽取发酵液，使用方便，不仅使得发酵液的制备量可控，同时该发明可反复利用进行发酵液的制备，同时该发明减少了发酵液与空气的接触机会，进而避免发酵液被感染。

作为本发明的一种实施方式，所述密封盖3上位于环形可视窗和第二环形凹槽20之间设有环形通槽13；所述环形通槽13的内部插设有环形板6；所述环形通槽13的内壁粘设有环形橡胶垫；所述环形板6上设有的环形凸起位于环形橡胶垫内壁的环形滑轨内；所述环形板6的顶端伸出环形通槽13的上端口；所述环形板6的底端通过压缩弹簧与扇形刮板14的内侧壁固连；所述压缩弹簧将扇形刮板14压紧在橡胶筒2的内壁；所述扇形刮板14设有若干组，若干组扇形刮板14之间通过橡胶刮板33固连；所述扇形刮板14的顶端通过铰支座活动铰接在密封盖3的底部；工作时，当橡胶筒2在从动橡胶圆环25上进行卷绕时，扇形刮板14和橡胶刮板33可将橡胶筒2内壁的溶液刮下，且可来回转动环形板6，环形板6通过压缩弹簧带动扇形刮板14来回摆动，从而可将橡胶筒2内壁的发酵液抖落下去。

作为本发明的一种实施方式，所述发酵箱1的顶部边缘开设有收集槽4；位于所述从动橡胶圆环25下方的弹性伸缩杆26的活动杆部分固定设有刮料板22；工作时，当橡胶筒2在从动橡胶圆环25上进行卷绕时，位于弹性伸缩杆26上的刮料板22可将橡胶筒2内壁的发酵液刮下并落入收集槽4的内部进行收集。

作为本发明的一种实施方式，所述发酵箱1的侧壁固定设有打气筒16；所述打气筒16的内部活动设有活塞板17；所述活塞板17的外侧端面与推杆18的一端固连；所述打气筒16的内侧端通过弹簧管与橡胶筒2内部的气腔21连通；所述橡胶筒2的内壁均匀的开设有微孔5；所述微孔5与气腔21连通；所述打气筒16通过抽液管15与收集槽4的底部连通；所述抽液管15的内部设有单向阀；工作时，当推杆18向外侧进行拉动时，此时收集槽4内部收集的发酵液经抽液管15进入打气筒16的内部，当推杆18向打气筒16的内侧进行推动时，此时打气筒16内部的气体以及从收集槽4内抽取的发酵液经弹簧管进入橡胶筒2内部的气腔21内，然后经橡胶筒2上的微孔5喷出，从而不仅可以将收集槽4内的发酵液重新回收到橡胶筒2的内部，且可向橡胶筒2的内部泵入气体，起到搅动发酵液的作用，使得发酵液的混合更加的均匀，从而使得菌落的培养更加的均匀。

作为本发明的一种实施方式，所述发酵箱1的底部壁内固定设有气缸30；所述气缸30的顶端固定设有的滑块29与活动板27底部的滑轨滑动连接；所述活动板27的上表面设有的三棱锥状凸起28卡设在橡胶筒2底部的三棱锥状卡槽内；工作时，当推杆18向打气筒16的内侧推动时，此时气体经弹簧管进入气腔21的内部，气腔21一侧先膨胀，从而使得橡胶筒2的底部发生摆动，由于活动板27的上表面设有的三棱锥状凸起28卡设在橡胶筒2底部的三棱锥状卡槽内，橡胶筒2的摆动带动活动板27的来回摆动，从而起到震荡橡胶筒2内部发酵液的作用，进而使得发酵液的混合更加的均匀，避免菌落发生大面积团簇。

作为本发明的一种实施方式，所述气缸30的底部通过出气管19与打气筒16的内部连通；所述出气管19与打气筒16连接的一端靠近打气筒16的外侧端；工作时，当将橡胶筒2卷绕在从动橡胶圆环25上时，此时位于气腔21内部的气体将会挤压进入打气筒16的内部，进而通过出气管19进入气缸30的内部，气缸30上移进而通过活动板27将橡胶筒2的底部向上托起，可减小从动橡胶圆环25所承受的重力，从而更加便于橡胶筒2的卷绕。

本发明具体工作流程如下：

工作时，先将驱动橡胶圆环10向内侧进行翻转，此时驱动橡胶圆环10上的磁铁组9吸引从动橡胶圆环25上的磁铁组9并使得从动橡胶圆环25向外侧进行翻转，从而将橡胶筒2的边缘卷绕在从动橡胶圆环25上，当不断的向内侧翻转驱动橡胶圆环10，从动橡胶圆环25也会不断的向外侧进行翻转，从而将橡胶筒2的边缘不断的卷绕，橡胶筒2的底部不断上移的同时位于橡胶筒2内部的气体不断的被排出，此时打开发酵箱1顶部的密封塞7，于顶部加料口12处添加玉米粉、小麦粉、酵母膏、中蜂蜜、蛋白胨的混合物，边加料的同时边将驱动橡胶圆环10向外侧不断的进行翻转，此时从动橡胶圆环25在驱动橡胶圆环10的作用下向内侧进行翻转，从而将缠绕在从动橡胶圆环25上的橡胶筒2进行释放，提高橡胶筒2的容纳空间，当加料完成后，再加入惰性气体，排出发酵机内部的氧气，然后再将盛放有中间气单孢菌的惰性气体罐上的加料管与发酵机的加料口12连接，使得中间气单孢菌进入发酵机的内部，再加入适量的去离子水，最后再塞上密封塞7即可进行发酵，在加料的同时可从环形可视窗观察橡胶筒2的液面；当发酵完成需要进行发酵液的取用时，此时可将经过杀菌消毒后的注射针管从发酵箱1顶部的加料口12***直接进行抽取，如果注射针管不能够与橡胶筒2内部的液面相接触，此时可向内侧卷绕驱动橡胶圆环10，从而使得从动橡胶圆环25将橡胶筒2进行卷绕，使得橡胶筒2内的液面上移，即可继续抽取发酵液，使用方便，不仅使得发酵液的制备量可控，同时该发明可反复利用进行发酵液的制备，同时该发明减少了发酵液与空气的接触机会，进而避免发酵液被感染。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。