阅读说明：本技术 用于治疗nash和用于预防nash诱导的hcc的方法 (Methods for treating NASH and for preventing NASH-induced HCC ) 是由 M·A·费布瑞奥 J·曼德尔 于 2018-06-08 设计创作，主要内容包括：本发明涉及治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的方法和预防NASH诱导的肝细胞癌(HCC)的方法,所述方法包括施用单独的O-(3-哌啶-1-基-2-羟基-1-丙基)-烟酰胺肟(BGP15)或其与白细胞介素-6受体跨信号转导应答的抑制剂、特别是gp130Fc的组合。(The present invention relates to methods of treating non-alcoholic steatohepatitis (NASH) and methods of preventing NASH-induced hepatocellular carcinoma (HCC) comprising administering O- (3-piperidin-1-yl-2-hydroxy-1-propyl) -nicotinamide oxime (BGP15) alone or in combination with an inhibitor of interleukin-6 receptor cross-signaling responses, particularly gp130 Fc.)

用于治疗NASH和用于预防NASH诱导的HCC的方法

发明领域

本发明涉及治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的方法和预防NASH诱导的肝细胞癌(HCC)的方法，所述方法包括施用单独的O-(3-哌啶-1-基-2-羟基-1-丙基)-烟酰胺肟(nicotinic amidoxime)(BGP15)或其与白细胞介素-6受体跨信号转导应答的抑制剂(特别是gp130Fc)的组合。

发明背景

肝细胞癌(HCC)是全世界最常见且致命的癌症之一。在发达国家中，过去三十年HCC的发病率已经增至三倍，并且已经成为癌症相关死亡上升最快的原因(El-Serag等人,2014)，其最初被认为是丙型肝炎病毒(HCV)出现的结果。然而，值得注意的是，在发达国家中，HCC显著增加的仅50％可能与HCV有关。高达50％的新HCC是“无病毒”的患者(El-Serag,2011)，其中该疾病的病因学直到最近仍然不清楚(Starley等人,2010)。大多数“无病毒”的HCC患者呈现出肥胖症、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)(Cohen等人,2011)。据估计在发达国家中，至少25％的人群患有NAFLD(Lazo等人,2013)，他们中高达8％显示出一定程度的NASH(Clark等人,2003)。

需要可以治疗NASH和预防NASH患者发展为HCC的药物。

式I的化合物，

O-(3-哌啶-1-基-2-羟基-1-丙基)-烟酰胺肟，也称为BGP15，是本领域最熟知用于治疗糖尿病(Literáti-Nagy等人,2014)。WO2013024311和Gehrig等人(2012)描述了BGP15用于治疗肌肉萎缩的用途，主要是通过减少骨骼肌纤维化而治疗。WO2005123049描述了BGP15对于线粒体生成的影响以及其在肌肉再生中的可能用途。WO9713504描述了BGP15用于神经变性病症、肌病和各种线粒体来源的疾病的用途。

Nagy等人(2010)描述了在肝细胞中BGP15如何预防AIF线粒体向核易位和线粒体去极化。WO2005123049公开了BGP15可以增加各种组织中线粒体的数量。

也已知BGP15用于治疗后天性肌病(acquired muscle myopathy)和横纹肌溶解(WO2013003593)、外伤性脑损伤(Eroglu等人,2014)、周围神经病(Bardos等人,2003)和心房颤动及心力衰竭(Sapra等人,2014)。Wu等人(2015)描述BGP15如何增加***中的mtDNA含量。Halmosi等人(2001)和Szabados等人(2000)显示了BGP15如何通过其PARP-抑制作用保护心脏细胞免于活性氧物质(ROS)诱导的线粒体失活。Farkas等人(2002)讨论了BGP15的与其抗-PARP活性有关的对皮肤线粒体的影响。

具体实施方式

图1A描绘了通过对喂食Chow或HFD饮食的野生型小鼠和用BGP15处理或未处理的在HFD饮食下MUP-uPA小鼠的肝细胞进行天狼星红染色(Sirius red staining)显示的纤维化水平。

图1B描绘了处于用BGP15处理或未处理的在HFD饮食下MUP-uPA小鼠的天狼星红染色。图2描绘了用BGP15处理或未处理的喂食Chow或HFD饮食的野生型(WT)和MUP-uPA小鼠(Mup)的ALT水平。

发明简述

如Nakagawa等人(2014)和Maurel等人(2014)所示，喂食高脂肪饮食(HFD)的MUP-uPA小鼠导致这些动物发展出重现NASH的人类特征的患病的肝。最重要地，这些小鼠显示更多的肝损伤、显著的肝部炎症，因此，显示出NASH且发展为典型脂肪性肝炎性(steatohepatitic)HCC。

用BGP15治疗喂食HFD的MUP-uPA小鼠导致所述病症的改善。

因此，在第一个实施方案中，提供治疗个体的NASH的方法，包括向所述个体施用式I的化合物、其互变异构体、对映异构体或可药用盐。

在第二个实施方案中，提供预防个体的NASH诱导的HCC的方法，包括向受NASH影响的个体施用式I的化合物、其互变异构体、对映异构体或可药用盐。

发明详述

如上所述，在第一个实施方案中，提供治疗个体的NASH的方法，包括向所述个体施用式I的化合物、其互变异构体、对映异构体或可药用盐。

如上所述，在第二个实施方案中，提供预防个体的NASH诱导的HCC的方法，包括向受NASH影响的个体施用式I的化合物、其互变异构体、对映异构体或可药用盐。

以前的研究已经证实，在喂食HFD的小鼠中通过抑制白细胞介素-6受体跨信号转导应答可以减少肝脏炎症(Kraakman等人2015)。

用gp130Fc(其是一种白细胞介素-6受体跨信号转导应答抑制剂)治疗可以通过使用过表达gp130蛋白的转基因小鼠来方便地模拟体内(Kraakman等人2015)。

用BGP15治疗喂食HFD的过表达gp130的MUP-uPA小鼠导致所述病症的改善。因此，在某些实施方案中，本发明的方法进一步包括向所述个体施用BGP15与白细胞介素-6受体跨信号转导应答的抑制剂的组合。

在一个特定的实施方案中，所述白细胞介素-6受体跨信号转导应答抑制剂为gp130Fc或其功能衍生物。

制剂

本文提供的组合物可以为以常规方式配制的片剂或锭剂的形式。例如，用于口服给药的片剂和胶囊可以含有常规赋形剂，包括但不限于粘合剂、填充剂、润滑剂、崩解剂和润湿剂。片剂可以根据本领域熟知的方法包衣。

本文提供的组合物也可以为液体制剂，包括但不限于水性或油性混悬剂、溶液剂、乳剂、糖浆剂和酏剂。所述组合物也可以配制为干燥产品，在使用之前与水或其它合适的载体重构。这样的液体制剂可以含有添加剂，包括但不限于助悬剂、乳化剂、非水性载体和防腐剂。

本文提供的组合物也可以配制成栓剂，其可以含有栓剂基质，包括但不限于可可脂或甘油酯。

本文提供的组合物也可配制用于吸入，其可以为包括但不限于下述的形式：溶液剂、混悬剂或乳剂，所述形式可以以干粉或以使用抛射剂如二氯二氟甲烷或三氯氟甲烷的气溶胶形式给药。

本文提供的组合物也可配制成包含水性或非水性载体的经皮制剂，包括但不限于霜剂、软膏剂、洗剂、糊剂、含药膏剂、贴剂或膜。

本文提供的组合物也可配制用于肠胃外给药，包括但不限于通过注射或连续输注给药。用于注射的制剂可以为在油性或水性载体中的混悬剂、溶液剂或乳剂的形式，并且可以含有配制试剂，包括但不限于助悬剂、稳定剂和分散剂。

给药

使用本文所述方法施用所述组合物可以为口服、肠胃外、舌下、经皮、直肠、经粘膜、局部、经吸入、经口颊给药、或其组合。肠胃外给药包括但不限于静脉内、动脉内、腹膜内、皮下、肌内、鞘内和关节内。

在本发明的某些实施方案中，BGP15与一种或多种其它药物活性剂组合给药。如本文使用的短语“组合”指向个体同时施用的活性剂。应当理解，每当个体同时暴露于两种(或更多种)活性剂时，所述两种或更多种活性剂被认为是“组合”给药。所述两种或更多种活性剂中的每种都可以根据不同方案给药；不需要同时或以同一组合物施用各自剂量的不同活性剂。相反，只要两种(或更多钟)活性剂保持在个体体内，它们就被认为是“组合”给药。

剂量

所述方法可包括向需要其的患者施用治疗有效量的所述组合物。用于疗法所需的治疗有效量随待治疗病症的性质、期望造血干细胞增加到血流中的持续时间、以及患者的年龄/状况而变化。然而，通常，用于成年人治疗的剂量典型地在每天0.001mg/kg至约200mg/kg的范围内。所述剂量可以为每天约1μg/kg至约100μg/kg。期望的剂量可以方便地以单剂量给药，或者以合适的间隔以多剂量给药，例如每天两个、三个、四个或更多个亚剂量。可能期望或需要多剂量。

所述剂量可以为任何剂量，包括但不限于约0.1μg/kg、0.2μg/kg、0.3μg/kg、0.4μg/kg、0.5μg/kg、0.6μg/kg、0.7μg/kg、0.8μg/kg、0.9μg/kg、1μg/kg、25μg/kg、50μg/kg、75μg/kg、100μg/kg、125μg/kg、150μg/kg、175μg/kg、200μg/kg、225μg/kg、250μg/kg、275μg/kg、300μg/kg、325μg/kg、350μg/kg、375μg/kg、400μg/kg、425μg/kg、450μg/kg、475μg/kg、500μg/kg、525μg/kg、550μg/kg、575μg/kg、600μg/kg、625μg/kg、650μg/kg、675μg/kg、700μg/kg、725μg/kg、750μg/kg、775μg/kg、800μg/kg、825μg/kg、850μg/kg、875μg/kg、900μg/kg、925μg/kg、950μg/kg、975μg/kg或1mg/kg。

实施例

现在，本发明将借助于非限制性的实施例来阐述。

实施例1：用BGP15治疗经受HFD的MUP-uPA小鼠

向处于HFD饮食下的MUP-uPA小鼠喂食含BGP15的水，以便获得在200至400ng/mL之间的BGP15血清水平，在该浓度下，所述化合物具有活性。为了测定BGP15在治愈NASH和预防NASH诱导的HCC中的功效，使用12组的每组10只这样的小鼠。

从约6周龄的群组得到无肿瘤肝样品、血样品和尿样品，用于确定基准量度，并且与已发展为NASH和纤维化但不是肿瘤时的约24个月龄采集的类似样品以及已发展为肿瘤时的约32个月龄采集的样品进行比较。如之前Kraakman等人2015和Umemura等人2016所述，通过RNAseq分析采集的样品。NASH的标记物为血清天冬氨酸氨基转移酶(ALT)水平和血清丙氨酸转氨酶(AST)水平、用于细胞凋亡的TUNEL染色、用于细胞浸润的H&E染色、用于纤维化的天狼星红染色、用于细胞增殖和角蛋白的Ki67和K19染色。

作为对照，可以使用喂食Chow饮食(其为一种低脂饮食)的小鼠。

如图1A和1B中所示，用BGP15处理18周或未处理的24个月龄的处于HFD饮食下的MUP-uPA小鼠的天狼星红染色，并且其中在图1B中，深色区域指示纤维变性区域，用BGP15处理显著减少了纤维化。

如图2中所示，用BGP15处理喂食HFD的小鼠引起ALT水平降低。

实施例2：用BGP15治疗MUP-uPA*sgp130小鼠

对MUP-uPA小鼠进行与上述实施例1中描述相同的程序，所述MUP-uPA小鼠已经与Kraakman等人2015描述的sgp130 Tg小鼠杂交(crossbread)以获得MUP-uPA＊sgp130小鼠，并测定组合使用sgp130和BGP15在治愈NASH和预防NASH诱导的HCC中的功效。

参考文献

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