具体实施方式

以下结合附图对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1：抗体杂交瘤的生成

1.1免疫原的生成：合成编码PD-1和PD-L1的ECD的或二者全长的DNA并插入表达载体pcDNA3.3。大量制备质粒DNA并经测序验证插入的DNA序列。PD-1ECD和PD-L1ECD的融合蛋白包含多种标记，包括人源Fc、小鼠Fc和His标记，所述融合蛋白通过将人PD-1ECD基因转染进入CHO-S或HEK293细胞制备。5天后，将从所述瞬时转染的细胞培养中收获的上清液用于蛋白纯化。将所述融合蛋白纯化并定量以用于免疫和筛选。

1.2建立稳定细胞系。为了获得用于抗体筛选和验证的工具，建立了PD-1和PD-L1转染细胞系。简言之，根据厂商说明书使用Lipofectamine 2000转染试剂盒将含有全长PD-1或PD-L1的pCND3.3表达载体转染CHO-K1、293F或Ba/F3细胞。转染后48-72小时，在含有用于选择的杀稻瘟菌素(Blasticidin)或G418的培养基中培养所述转染细胞。一段时间后，会选择出在基因组DNA中稳定掺入了PD-1或PD-L1基因的细胞。同时，验证所述细胞是否具有目的基因PD-1和PD-L1的表达。一旦验证了所述表达，通过有限的稀释挑选目的单个克隆并放大到大容量。随后将建立的单克隆细胞系在含有低剂量抗生素杀稻瘟菌素(Blasticidin)或G418的培养基中维持。

1.3抗体杂交瘤的建立。

1.3.1免疫和细胞融合：使用8-10周龄OMT-大鼠(获自Open MonoclonalTechnology,Inc.,Palo Alto,US)用10μg TiterMax中的人源PD-1ECD蛋白在足垫上进行初次激发免疫，每3天用铝剂配置的PD-1ECD重复进行免疫。每2周对大鼠取血收集血清并通过ELISA或FACS测试测定抗体滴度。当所述抗体滴度达到足够高时，对大鼠给予最后的不含佐剂的激发(加入100μl 1XPBS替代)，按如下步骤进行细胞融合：将从免疫的OMT-大鼠的淋巴结中分离的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合(以1:1比例)。用5-10ml ECF溶液洗涤并悬浮细胞混合物。加入ECF溶液将浓度调整至2x10⁶细胞/ml。在细胞电融合后，将融合室中的细胞悬液立即转移进入含有更多体积培养基的无菌管中。在37℃培养超过24小时后，将所述细胞悬液混合并移液入96孔板(0.5x10⁶细胞/板)。在37℃、5％CO₂条件下培养细胞。当所述克隆足够大时，将100μl上清液从96孔板转移用于抗体筛选测试。

1.3.2杂交瘤上清液的第一轮和确认筛选：使用ELISA测试作为第一轮筛选方法以测试杂交瘤上清液与PD-1蛋白的结合。简言之，用1μg/ml的人源PD-1胞外结构域的可溶性蛋白在4℃包被平板过夜。在封闭和洗涤后，将所述杂交瘤上清液转移至所述包被的平板并在室温下孵育1小时。之后洗涤所述平板并随后用山羊抗大鼠IgG1HRP(Bethyl)和山羊抗大鼠IgG2b HRP(Bethyl)的二抗孵育45分钟。洗涤后，加入TMB底物并用2M HCl终止反应。使用酶标仪(Molecular Device)读取450nm处的吸收光值。为了确认PD-1抗体与在细胞膜上表达的构象PD-1分子的天然结合，在PD-1转染的CHO-S细胞系上进行FACS分析。以1x10⁶细胞/ml的浓度将表达PD-1的CHO-S细胞转移至96孔U形底平板(BD)。随后将所述杂交瘤上清液转移至所述平板并在4℃下孵育1小时。用1XPBS/1％BSA洗涤后，加入山羊抗大鼠FITC(Jackson Immunoresearch Lab)二抗并在4℃下与细胞避光孵育1小时。之后洗涤所述细胞并在1XPBS/1％BSA中重悬或在4％福尔马林中固定所述细胞，并以流式细胞仪(BD)分析。使用相同方法进行抗体与母本CHO-S细胞系的结合。

1.3.3杂交瘤亚克隆：一旦通过第一轮和确认筛选验证了特异性结合和阻断，可以使用所述阳性杂交瘤细胞系进行亚克隆。简言之，对于每个杂交瘤细胞系，将细胞进行计数并在克隆培养基中稀释至5细胞/孔、1细胞/孔和0.5细胞/孔。将200μl/孔铺板入96孔板，一个平板为5细胞/孔，一个平板为1细胞/孔和四个平板为0.5细胞/孔。将所有平板置于37℃、5％CO₂。孵育直至所有细胞系可以通过ELISA测试进行检查。

实施例2：抗体杂交瘤细胞测序和全人源抗体表征

2.1抗体杂交瘤细胞测序：用Trizol试剂从单克隆杂交瘤细胞中分离RNA。用以下方案扩增PD-1抗体的VH和VL：简言之，首先如本申请描述的使用反转录酶将RNA反转录成cDNA，反应系统(20μl)：

取10μl的PCR反应产物进行与pMD18-T载体的连接反应。用10μl的连接产物转化Top10感受态细胞并将所述混合物转移至按照标准方案预热的2-YT+Cab平板上，孵育过夜。使用M13-48和M13-47引物通过PCR检查阳性克隆，随后进行测序。

2.2全人源抗体分子构建：按上文的表述将PD-1抗体的VH和VL进行扩增。所述PCR反应产物通过PCR clean-up试剂盒进行纯化并用限制性酶Pme I和BssH II在37℃消化VL和pCI载体2小时。将所述反应产物在1％的琼脂糖凝胶中进行电泳并按照厂商说明书进行凝胶提取。用以下步骤连接经消化的VL和pCI载体：

在16℃下孵育所述混合物30分钟。用10μl反应产物进行转化和克隆增长。使用确认的克隆进行质粒pCI-VL DNA的提取。随后将所述pCI-VL载体和VH片段用Xbal和Sal I进行消化并用T4DNA连接酶在16℃下连接纯化的经消化的VH和载体30分钟。一旦经测序验证插入的VL和VH的序列，使用包含全人源PD-1抗体的整个IgG的表达载体进行瞬时转染和建立稳定细胞系。

实施例3：全人源抗体的表征

3.1表面等离子体共振(SPR)测定的全动力学结合亲和性：通过SPR法使用ProteOnXPR36(Bio-Rad)对抗体与PD-1的亲和性和结合动力学进行表征。将蛋白A蛋白(Sigma)通过胺偶联固定于GLM传感芯片上(Bio-Rad)。使纯化的抗体流过传感器芯片并被蛋白A捕获。将芯片旋转90°并用电泳缓冲液洗涤(1XPBS/0.01％Tween20,Bio-Rad)直至基线稳定。使5个浓度的人PD-1和电泳缓冲液以流速100μL/min流经所述抗体流动单元，先为结合相流动240s，随后解离相600s。在每次运行后用pH 1.7的H₃PO₄再生所述芯片。使用ProteOn软件将结合和解离曲线拟合至1:1的Langmiur结合模型。

3.2流式细胞仪(FACS)测定的PD-1抗体与细胞表面PD-1分子的结合亲和性：经FACS分析测试抗体与细胞表面PD-1的结合亲和性。以5x10⁵细胞/ml的浓度将表达PD-1的CHO-S细胞转移至96孔U形底平板(BD)。待测抗体用洗涤缓冲液以1:2系列稀释(1XPBS/1％BSA)并在4℃下孵育1小时。加入二抗山羊抗-人IgG Fc FITC(3.0摩尔FITC每摩尔IgG，(Jackson Immunoresearch Lab))并在4℃下避光孵育1小时。随后洗涤一次细胞并在1XPBS/1％BSA中重悬，使用流式细胞术(BD)分析。基于被定量的小珠(QuantumTM MESF Kit(Bangs Laboratories,Inc.)，将荧光强度转换为每个细胞上结合的分子。使用GraphpadPrism5计算K_D。

3.3人PD-1抗体对T细胞增殖的作用。使用同种异体反应测试PD-1抗体对T淋巴细胞增殖的作用。在96孔U底形组织培养板中在包含10％FCS和抗生素的200μl RPMI 1640中进行原代树突细胞(DC)-刺激的MLR。将DC与1X10⁵的同种异体总CD4⁺T细胞以1:10和1:100的DC:T细胞的比例混合。在存在或不存在中和mAb的条件下进行培养：人PD-1抗体和基准抗体A和B的使用浓度为10μg/ml。孵育测试5天，在最后16小时过程中加入1uCi/孔的[³H]胸苷。通过闪烁计数测定[³H]胸苷的掺入，用三复孔的平均[³H]胸苷掺入(每分钟计数)表示增殖反应。仅有DC的计数常规为<1000cpm。显示的结果是进行了最少5次试验的代表性的示例。

人树突细胞(DC)和以上同种异体MLR中使用的CD4⁺T、CD8⁺T和总细胞以如下步骤从PBMC中生成：通过使用人单核细胞浓缩试剂盒(human monocyte enrichment cocktailkit)根据厂商(StemCell Meylan)的说明书经负性筛选从PBMC中纯化人单核细胞。简言之，使用Ficoll-Paque梯度从健康的供体血液中分离PBMC。用PBS洗涤细胞两次，随后在分离缓冲液中以1X10⁸细胞/ml重悬，并用单核细胞浓缩Ab混合物在4℃下孵育30分钟。收集通过MACS柱的未标记的单核细胞。为生成iDC，将单核细胞在含有10％FCS和抗生素的RPMI 1640的培养基中与GM-CSF(PeproTech,Rocky Hill,NJ；800U/ml)和IL-4(PeproTech；500U/ml)培养，细胞浓度为2X10⁶细胞/ml。每天用含有GM-CSF和IL-4的培养基置换一半的培养基。在第5天用LPS(026:B6；Sigma-Aldrich,St.Louis,MO；1μg/ml)额外刺激iDC 24小时以生成成熟DC。通过根据厂商说明书(Stemsep)将PBMC与人CD4⁺T、CD8⁺T和总T细胞浓缩混合物和磁性胶体孵育进行负性选择，纯化CD4⁺T、CD8⁺T和总T细胞。

在PD-1抗体1.7.3hAb、1.49.9hAb、1.103.11hAb、1.139.15hAb和1.153.7hAb存在或不存在的情况下，用同种异体DC刺激人CD4⁺T细胞。经[³H]胸苷的掺入评估CD4⁺T细胞的增殖。1.7.3hAb、1.49.9hAb、1.103.11hAb、1.139.15hAb和1.153.7hAb提高了浓度依赖的T细胞增殖。

3.5.2体外人源PD-1抗体对细胞因子IFNγ分泌的作用：为了评估人源PD-1抗体对细胞因子IFNγ的产生的阻断作用，我们在同种异体-MLR中进行了IFNγ的产生的实验。简言之，根据厂商的说明书用CD4⁺T细胞浓缩试剂盒(CD4⁺T cell enrichment cocktail kit)经负性筛选将人源CD4⁺T细胞从PBMC中纯化出来。在GM-CSF和IL-4中培养5天的单核细胞中生成未成熟DC，并用LPS以1μg/ml刺激过夜，分化成成熟的DC。将CD4⁺T细胞和iDC/mDC以10:1和100:1的T:DC比例混合。在存在或不存在人源PD-1抗体和基准抗体的情况下进行培养。5天后，收集每个培养物的上清液测定细胞因子IFNγ。上清液中的IFNγ水平通过ELISA测试测定。简言之，用在包被缓冲液中稀释的抗人IFNγmAb包被Maxisorp平板(0.75μg/ml；即稀释为1/1360)，50μl/孔(即对一个满的96孔板加入3.7μl的抗体至5ml的包被缓冲液中)并在4℃孵育过夜。加入200μl/孔的封闭缓冲液2小时，以封闭多余的蛋白结合能力。准备重组IFNγ稀释液作为标准液，用完全培养基从8000pg/ml进行两倍稀释直至125pg/ml，加上只有完全培养基的情况。洗涤平板，加入标准液和测试上清液(100μl/孔)，孵育2-4小时。加入在封闭缓冲液中的生物素化抗-IFNγmAb(1/1333)，之后加入额外亲和素过氧化物酶。加入TMB底物进行所述反应，用2M HCl终止反应。在450nm测定吸光值。

结果显示，存在或不存在1.7.3hAb、1.49.9hAb、1.103.11hAb、1.139.15hAb和1.153.7hAb抗体的情况下，用同种异体DC刺激人CD4⁺T细胞。用ELISA测定IFNγ水平。结果显示全人源PD-1抗体以剂量依赖的方式增加IFNγ的分泌。

3.5.3体外人源PD-1对白介素2(IL-2)的产生的作用：将CD4⁺T细胞和iDC/mDC以10:1和100:1的T:DC比例混合。在存在或不存在人源PD-1抗体和基准抗体的情况下进行培养。5天后，收集每个培养物的上清液测定细胞因子。上清液中的IL-2水平通过ELISA测试测定。

结果显示了在存在或不存在本申请的抗体或对照抗体的情况下，用同种异体DC刺激人CD4⁺T细胞。用ELISA测定IL-2水平。结果显示全人源PD-1抗体以剂量依赖的方式增加IFNγ的分泌。所述结果显示抗PD-1抗体以剂量依赖的方式增加IL-2的分泌。

3.5.4人源PD-1抗体通过自体抗原特异性免疫反应对细胞增殖和细胞因子的生产的作用：在本测定中，T细胞和DC细胞来自相同供体。简言之，从PBMC中纯化CD4⁺T细胞并在CMV pp65肽和低剂量的IL2(20U/ml)中培养，同时，从在GM-CSF和IL-4中的相同供体的PBMC中培养的单核细胞中生成DC。5天后，用将用CMV pp65肽处理的CD4⁺T细胞与DC共培养，所述DC在存在或不存在人源PD-1抗体和基准抗体(作为对照)的条件下脉冲式加入pp65肽。

在第5天，从每个培养物中取100μl的上清液用于测定细胞因子IFNγ和IL-2。通过ELISA测试检测IFNγ和IL-2的产生的水平。针对脉冲式加入CMV pp65肽的DC的特异性T细胞增殖通过[³H]胸苷的掺入测定。

结果显示，PD-1抗体提高了由装载了CMV pp65肽的自体DC所刺激的浓度依赖的CMV⁺-CD4⁺T细胞的增殖。

3.5.5人源PD-1抗体对调节性T细胞(Tregs)抑制功能的作用：Tregs是T细胞的一个亚群，其是关键的免疫调节子，在维持自体耐受中起到关键作用。

CD4⁺CD25⁺调节性T细胞与肿瘤相关，因为在多种癌症病人中发现了增加的Tregs数量，且其与较差的预后相关。为了直接评估人源PD-1抗体对免疫抑制响应的作用，我们进行了Tregs实验。使用特异性抗-CD25微珠(Miltenyi Biotec,Auburn,CA)和阳性或负性选择，分别分离CD4⁺CD25⁺和CD4⁺CD25^-T细胞。开始时，根据厂商说明书(Stemsep)，使用人CD4⁺T细胞浓缩混合物和磁性胶体孵育PBMC，经负性选择纯化CD4⁺T细胞。之后在MACS缓冲液中重悬CD4⁺T细胞，在冰上与CD25⁺微珠孵育30分钟，洗涤并装柱。从流出溶液中收集不与柱结合的CD4⁺CD25^-T细胞，并在使用前洗涤。随后从所述柱中恢复CD4⁺CD25⁺T细胞并在使用前洗涤。在存在或不存在10μg/ml浓度的人源PD-1抗体的条件下，将Tregs与CD4⁺CD25^-T细胞和DC(Treg:Teff比例为1:1)培养。不用抗体或使用同种型抗体作为阴性对照。在第5天取所述培养物的上清液用于ELISA检测细胞因子，通过以1uCi/孔的浓度加入[³H]胸苷并进一步培养18小时，检测细胞增殖。[³H]胸苷的掺入通过闪烁计数。结果显示所述PD-1抗体去除了Treg抑制性功能并恢复了响应的T细胞增殖和IFNγ分泌。

3.6ADCC/CDC测定：为了使健康的PD-1⁺细胞不需要的毒性降到最低，对选择的抗PD-1全人源抗体进行确认不含ADCC和CDC功能。

3.6.1ADCC：使用表达高水平细胞表面PD-1的活化T细胞作为靶细胞并用不同浓度的全人源抗体在96孔板中预孵育30分钟，随后以50:1的效应/靶细胞比例加入IL-2激活的PBMC(作为天然杀伤(NK)细胞源使用，即效应细胞)。[在37℃、5％CO₂的温箱中孵育所述平板6小时。经细胞毒性检测试剂盒(Roche)测定靶细胞裂解。通过Molecular DevicesSpectraMax M5e酶标仪测定光密度。结果显示，测试的全人源抗PD-1抗体不介导ADCC。

3.6.2CDC：将靶细胞(活化T细胞)、稀释的人血清补体(Quidel-A112)和不同浓度的全人源PD-1抗体在96孔板中混合。在37℃、5％CO₂的温箱中孵育所述平板4小时。经CellTiter glo(Promega-G7573)测定靶细胞裂解。Rituxan(Roche)和人B淋巴细胞细Raji(CD20阳性)作为阳性对照。数据显示PD-1抗体不介导CDC。

实施例4重组全人抗PD-1单克隆抗体治疗宫颈癌临床试验结果

使用本发明的重组全人抗PD-1单克隆抗体注射液(例如GLS-010注射液)，研究GLS-010在一线或以上含铂标准化疗后进展的复发或转移、PD-L1表达阳性(CPS≥1)宫颈癌患者治疗中的抗肿瘤疗效，GLS-010在一线或以上含铂标准化疗后进展的复发或转移、PD-L1表达阳性宫颈癌患者中的安全性和耐受性，研究GLS-010的药代动力学(PK)特点及暴露-反应关系；观察重组全人抗PD-1单克隆抗体注射液的免疫原性，初步评估微卫星不稳定性(MSI)/错配修复缺陷(dMMR)和/或肿瘤突变符合(TMB)与疗效的相关性，伴随诊断方法评估(PD-L1)。

1、给药方式：

所有受试者按240mg/次的剂量静脉输注GLS-010，每两周1次，直到发生确定的疾病进展或以下任何一种情况(以先发生者为准)为止：1)治疗期结束，2)死亡，3)出现不可耐受的毒副作用，4)受试者怀孕，5)研究者从受试者的最大利益出发判定应终止研究，6)受试者或其监护人要求退出研究，7)受试者失访，8)受试者依从性过差，无法遵从研究方案等。

治疗期最长时间为2年。用药满2年后，若经研究者评估受试者可继续获益，且无不可耐受的不良反应，依据受试者的意愿，经申办者批准，受试者可进入本研究延长治疗期(延长治疗期定义为用药满2年后的继续用药阶段)，继续接受研究药物治疗。

每次输液时间不少于45min，若输液过程中受试者出现头晕、寒战、皮疹等轻度过敏反应时可适当降低输液速度(由研究者判断)，输液时间可相应延长(由研究者判断)。

2、试验设计：

本研究入选人群为既往接受过一线或以上含铂标准化疗后进展的复发或转移且PD-L1表达阳性的宫颈癌患者。

I期临床研究表明抗PD-1单抗GLS-010在晚期肿瘤患者中具有良好的安全性和耐受性，并且显示出初步的抗肿瘤疗效。同类药物Pembrolizumab治疗晚期宫颈癌的单臂临床研究(KEYNOTE-158)结果显示一定比例的客观缓解率(ORR 14.3％)，91％的患者应答时间超过6个月。

美国FDA批准Pembrolizumab用于经治疗后疾病进展或无满意替代疗法的高度微卫星不稳定(MSI-H)或错配修复缺陷(dMMR)的实体瘤患者以及治疗PD-L1阳性(CPS≥1)化疗中或化疗后疾病进展的复发或转移宫颈癌患者。2018年NCCN指南推荐Pembrolizumab用于PD-L1阳性(CPS≥1)或MSI-H/dMMR复发或转移宫颈癌(2A类证据)的二线治疗。考虑到复发和转移宫颈癌患者大多数经过多线含铂方案化疗，出现铂类耐药后，可选择的方案非常有限，且治疗效果较差，同类抗PD-1单抗药物Pembrolizumab在临床试验中获得一定疗效；GLS-010Ia期研究中亦发现晚期宫颈癌患者的临床获益，预计受试者可能从本研究中获益，以安慰剂作为对照可能存在伦理问题。权衡科学性以及伦理考虑，单臂研究可以满足本发明的目的。

3、入选受试者条件如下，受试者情况见表1：

受试者必须满足以下所有入选标准才可入组本研究：

1)自愿参加临床研究；完全了解、知情本研究并签署知情同意书；愿意遵循并有能力完成所有试验程序；

2)女性，年龄18至75岁(含18岁和75岁)；

3)经组织学证实、PD-L1表达阳性(CPS≥1)的宫颈癌患者；

4)经影像学证实的经过一线或以上含铂标准化疗后进展的复发或转移宫颈癌患者；

5)按照RECIST 1.1标准至少存在一个可测量病灶，即根据CT横断面影像或MRI非淋巴结病灶长径≥10mm，或淋巴结病灶短径≥15mm；

6)美国东部肿瘤协作组(ECOG)体力状态评分为0至1分；

7)预计生存期不少于12周；

8)器官功能和造血功能必须符合以下要求：

·血红蛋白(HGB)≥90g/L；

·白细胞计数(WBC)≥3×10⁹/L；

·中性粒细胞绝对计数(ANC)≥1.5×10⁹/L；

·血小板计数(PLT)≥100×10⁹/L；

·总胆红素(TBIL)≤1.5×正常值上限(ULN)；

·天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)≤2.5×ULN；若肝功能异常是由于肿瘤肝转移所致，AST和ALT≤5×ULN；

·血清肌酐(Cr)≤1.5×ULN；或肌酐清除率(CrCl)≥50mL/min

·国际标准化比率(INR)或血浆凝血酶原时间(PT)≤1.5×ULN。

9)育龄期女性受试者必须同意在签署知情同意书后、研究期间及GLS-010最后一次给药后5个月内采取有效避孕措施。

10)受试者必须同意提供足够的肿瘤组织样本，用于PD-L1表达检测。包括存档的肿瘤样本(石蜡块或数量满足本研究所规定检测要求的未染色切片)；若没有存档的肿瘤组织样本，受试者同意接受肿瘤病灶再活检。

表1受试者分布情况

N为各阶段研究入组人数。

百分比以各阶段研究入组人数为分母并仅在分子不为0时计算。

4、试验结果如以下表格以及图2所示。

结果显示，PD-L1表达阳性的受试者均经过其他抗肿瘤药物治疗，包括顺铂、紫杉醇、多西他赛、卡铂、奈达铂、白蛋白紫杉醇、贝伐珠单抗，治疗后均复发或转移。

本发明的重组全人抗PD-1单克隆抗体整体数据展现出良好的安全性和抗肿瘤疗效，在一线或以上含铂标准化疗后进展的复发或转移、PD-L1表达阳性(CPS≥1)宫颈癌患者治疗中的抗肿瘤疗效显著，受试者研究者评估的客观缓解率和总生存期相对现有其他同类药物更优，总有效率可达22％以上，高于同类药物在该类患者中的治疗有效率，可显著延长患者的中位总生存期，从第一天用药开始至第一次评估为完全缓解或部分缓解之间的时间明显缩短，安全性和耐受性良好，治疗期受试者出现的不良事件较少。

表1受试者PD-L1表达情况

N为各阶段全分析集人数。

百分比以各阶段全分析集人数为分母并仅在分子不为0时计算。

BMI＝体重kg/身高²(m²)。

表2受试者既往肿瘤治疗史

N为各阶段全分析集人数。

百分比以各阶段全分析集人数为分母并仅在分子不为0时计算。

用WHODrug 201909和MedDRA编码字典(V 24.0)进行编码。

表3受试者研究者评估的客观缓解率*(FAS)

*客观缓解率是指根据RECIST1.1标准，总体疗效达到完全缓解(CR)或部分缓解(PR)的受试者百分比。第一阶段44例可评估受试者，第二阶段98例可评估受试者；

**采用Clopper-Pearson精确法估计95％置信区间。

***二项精确法检验。

N为各阶段全分析集人数。

百分比以各阶段全分析集人数为分母并仅在分子不为0时计算。

表4受试者总生存期*(FAS)

*总生存期定义为自首次给药开始到任何原因引起死亡的时间。

**中位总生存期由Kaplan-Meier方法计算得出，其双侧95％置信区间采用Brookmeyer and Crowley法计算。

N为各阶段全分析集人数。

百分比以各阶段全分析集人数为分母并仅在分子不为0时计算。

表5受试者研究者评估的中位至缓解时间

*至缓解时间定义为从第一天用药开始至第一次评估为完全缓解或部分缓解之间的时间，以先出现者为准。只适用于取得完全缓解或部分缓解的受试者。

**中位至缓解时间由Kaplan-Meier方法计算得出，其双侧95％置信区间采用Brookmeyer and Crowley法计算。

N为各阶段全分析集人数。

表6受试者安全性和耐受性评价(受试者治疗中出现的不良事件(TEAE)概况(SS))

N为各阶段安全集人数。

百分比以各阶段安全集人数为分母并仅在分子不为0时计算。

例次为不良事件发生的次数。

除了AE分析例次，其他每行中对于同一例受试者只计算一次。

SAE：以据研究者评估为准。

使用MedDRA编码字典(V 24.0)进行编码。

表7器官分类、首选术语和最大严重程度分类的免疫相关的治疗期不良事件总结

表7-1

表7-2

表7-3

表7-4

N为各阶段安全集人数。

百分比以各阶段安全集人数为分母并仅在分子不为0时计算。

基线严重程度缺失，则默认为1级。

*每一行同一例受试者同一PT的严重程度只计算程度最重的一次。

同一列受试者在试验组中发生同一条AE多次，若严重程度全部缺失，则默认为3级，若严重程度至少缺失一次，只计算剩下程度最严重的一次。

使用MedDRA编码字典(V 24.0)进行编码。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

序列表

<110> 广州誉衡生物科技有限公司

<120> 抗-PD-1抗体及其在制备治疗宫颈癌患者的药物中的用途

<130> 018696-8001CN02

<160> 68

<170> PatentIn 3.5版

<210> 1

<211> 7

<212> PRT

<213> 智人

<400> 1

Ser Thr Thr Tyr Tyr Trp Val

1 5

<210> 2

<211> 21

<212> DNA

<213> 智人

<400> 2

agtactactt actactgggt c 21

<210> 3

<211> 16

<212> PRT

<213> 智人

<400> 3

Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 4

<211> 48

<212> DNA

<213> 智人

<400> 4

agtatctctt atagtgggaa cacctactac aatccgtccc tcaagagt 48

<210> 5

<211> 13

<212> PRT

<213> 智人

<400> 5

His Leu Gly Tyr Asn Gly Arg Tyr Leu Pro Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 6

<211> 39

<212> DNA

<213> 智人

<400> 6

catctagggt ataatgggag gtacctcccc tttgactac 39

<210> 7

<211> 14

<212> PRT

<213> 智人

<400> 7

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Phe Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 8

<211> 42

<212> DNA

<213> 智人

<400> 8

actggaacca gcagtgacgt tggtttttat aactatgtct cc 42

<210> 9

<211> 7

<212> PRT

<213> 智人

<400> 9

Asp Val Thr Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 10

<211> 21

<212> DNA

<213> 智人

<400> 10

gatgtcacta atcggccctc a 21

<210> 11

<211> 10

<212> PRT

<213> 智人

<400> 11

Ser Ser Tyr Thr Ser Ile Ser Thr Trp Val

1 5 10

<210> 12

<211> 30

<212> DNA

<213> 智人

<400> 12

agctcatata caagcatcag cacttgggtg 30

<210> 13

<211> 7

<212> PRT

<213> 智人

<400> 13

Ser Ser Thr Tyr Tyr Trp Gly

1 5

<210> 14

<211> 21

<212> DNA

<213> 智人

<400> 14

agtagtactt actactgggg c 21

<210> 15

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<212> PRT

<213> 智人

<400> 15

Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 16

<211> 48

<212> DNA

<213> 智人

<400> 16

agtatctctt atagtgggag cacctactac aatccgtccc tcaagagt 48

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<211> 7

<212> PRT

<213> 智人

<400> 17

Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

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<211> 21

<212> DNA

<213> 智人

<400> 18

gatgtcagta atcggccctc a 21

<210> 19

<211> 10

<212> PRT

<213> 智人

<400> 19

Ser Ser Tyr Thr Asn Ile Ser Thr Trp Val

1 5 10

<210> 20

<211> 30

<212> DNA

<213> 智人

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agctcatata caaacatcag cacttgggtg 30

<210> 21

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<212> PRT

<213> 智人

<400> 21

Ser Thr Thr Tyr Tyr Trp Gly

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<211> 21

<212> DNA

<213> 智人

<400> 22

agtactactt actactgggg c 21

<210> 23

<211> 16

<212> PRT

<213> 智人

<400> 23

Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 24

<211> 48

<212> DNA

<213> 智人

<400> 24

agtatctctt atagtgggac cacctactac aacccgtccc tcaagagt 48

<210> 25

<211> 13

<212> PRT

<213> 智人

<400> 25

His Leu Gly Tyr Asn Ser Asn Trp Tyr Pro Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 26

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<212> DNA

<213> 智人

<400> 26

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<211> 14

<212> PRT

<213> 智人

<400> 27

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ser Tyr Asn Arg Val Ser

1 5 10

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<211> 42

<212> DNA

<213> 智人

<400> 28

actggaacca gcagtgacgt tggtagttat aaccgtgtct cc 42

<210> 29

<211> 7

<212> PRT

<213> 智人

<400> 29

Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

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<211> 21

<212> DNA

<213> 智人

<400> 30

gaggtcagta atcggccctc a 21

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<212> PRT

<213> 智人

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Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Trp Val

1 5 10

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<211> 30

<212> DNA

<213> 智人

<400> 32

agctcatata caagcagcag cacttgggtg 30

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<212> PRT

<213> 智人

<400> 33

Ser His Ala Met Ser

1 5

<210> 34

<211> 15

<212> DNA

<213> 智人

<400> 34

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<211> 17

<212> PRT

<213> 智人

<400> 35

Thr Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 36

<211> 51

<212> DNA

<213> 智人

<400> 36

actattactg gtggtggtgg tagcatatac tacgcagact ccgtgaaggg c 51

<210> 37

<211> 10

<212> PRT

<213> 智人

<400> 37

Asn Arg Ala Gly Glu Gly Tyr Phe Asp Tyr

1 5 10

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<211> 30

<212> DNA

<213> 智人

<400> 38

aaccgcgctg gggagggtta ctttgactac 30

<210> 39

<211> 11

<212> PRT

<213> 智人

<400> 39

Gly Gly Asp Asn Ile Gly Asn Lys Asp Val His

1 5 10

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<211> 33

<212> DNA

<213> 智人

<400> 40

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<210> 41

<211> 7

<212> PRT

<213> 智人

<400> 41

Arg Asp Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 42

<211> 21

<212> DNA

<213> 智人

<400> 42

agggatagca accggccctc t 21

<210> 43

<211> 8

<212> PRT

<213> 智人

<400> 43

Gln Val Trp Asp Ser Ile Trp Val

1 5

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<211> 24

<212> DNA

<213> 智人

<400> 44

caggtgtggg acagcatttg ggtg 24

<210> 45

<211> 123

<212> PRT

<213> 智人

<400> 45

Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Asp Ser Ile Ser Ser Thr

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Thr Tyr Tyr Trp Val Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Ile Gly Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser

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Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn His Phe

65 70 75 80

Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Ala Ala Thr Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr

85 90 95

Cys Ala Arg His Leu Gly Tyr Asn Gly Arg Tyr Leu Pro Phe Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 46

<211> 369

<212> DNA

<213> 智人

<400> 46

cagctgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgaccctc 60

acctgcactg tctctggtga ctccatcagc agtactactt actactgggt ctggatccgc 120

cagcccccag ggaagggact ggagtggatt gggagtatct cttatagtgg gaacacctac 180

tacaatccgt ccctcaagag tcgagtcacc atatccgtag acacgtccaa gaaccacttc 240

tccctgaagc tgagttctgt ggccgccaca gacacggctc tatattactg tgcgagacat 300

ctagggtata atgggaggta cctccccttt gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360

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<210> 47

<211> 110

<212> PRT

<213> 智人

<400> 47

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Phe Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Glu Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ile

85 90 95

Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 48

<211> 330

<212> DNA

<213> 智人

<400> 48

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ttttataact atgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccga actcatgatt tatgatgtca ctaatcggcc ctcaggggtt 180

tctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcatcag cacttgggtg 300

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<210> 49

<211> 123

<212> PRT

<213> 智人

<400> 49

Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

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Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Ser

20 25 30

Thr Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu

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Trp Ile Gly Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser

50 55 60

Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe

65 70 75 80

Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Asp Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

85 90 95

Cys Ala Arg His Leu Gly Tyr Asn Gly Arg Tyr Leu Pro Phe Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 50

<211> 369

<212> DNA

<213> 智人

<400> 50

cagctgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60

acctgcactg tctctggtgg ctccatcagc agtagtactt actactgggg ctggatccgc 120

cagcccccag ggaagggact ggagtggatt gggagtatct cttatagtgg gagcacctac 180

tacaatccgt ccctcaagag tcgagtcacc atatccgtag acacgtccaa gaaccagttc 240

tccctgaagc tgagctctgt gaccgacgca gacacggctg tgtattactg tgcgagacat 300

ctagggtata atgggaggta cctccccttt gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360

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<211> 110

<212> PRT

<213> 智人

<400> 51

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Phe Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Glu Val

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ile

85 90 95

Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 52

<211> 330

<212> DNA

<213> 智人

<400> 52

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ttttataact atgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccga agtcatgatt tatgatgtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180

tctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgactat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcatcag cacttgggtg 300

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<210> 53

<211> 123

<212> PRT

<213> 智人

<400> 53

Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Ala Asp Ser Ile Ser Ser Thr

20 25 30

Thr Tyr Tyr Trp Val Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu

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Trp Ile Gly Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser

50 55 60

Leu Lys Ser Arg Val Thr Val Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe

65 70 75 80

Ser Leu Lys Leu Asn Ser Val Ala Ala Thr Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr

85 90 95

Cys Ala Arg His Leu Gly Tyr Asn Gly Arg Tyr Leu Pro Phe Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 54

<211> 369

<212> DNA

<213> 智人

<400> 54

cagctgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgaccctc 60

acctgcactg tctctgctga ctccatcagc agtactactt actactgggt ctggatccgc 120

cagcccccag ggaagggact ggagtggatt gggagtatct cttatagtgg gagcacctac 180

tacaatccgt ccctcaagag tcgagtcacc gtatccgtag acacgtccaa gaaccagttc 240

tccctgaagc tgaactctgt ggccgccaca gacacggctc tatattactg tgcgagacat 300

ctagggtata atgggaggta cctccccttt gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360

gtctcctcc 369

<210> 55

<211> 110

<212> PRT

<213> 智人

<400> 55

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

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Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Phe Tyr

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Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Glu Leu

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Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe

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Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

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Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Asn Ile

85 90 95

Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 56

<211> 330

<212> DNA

<213> 智人

<400> 56

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ttttataact atgtctcctg gtaccaacag 120

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caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caaacatcag cacttgggtg 300

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<212> PRT

<213> 智人

<400> 57

Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

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Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Thr

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Thr Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu

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Trp Ile Gly Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser

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Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Pro Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Ile

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Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ser Leu Tyr Tyr

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Cys Ala Arg His Leu Gly Tyr Asn Ser Asn Trp Tyr Pro Phe Asp Tyr

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Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

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<210> 58

<211> 369

<212> DNA

<213> 智人

<400> 58

cagctgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cctcggagac cctgtccctc 60

acctgcactg tctctggtgg ctccatcagc agtactactt actactgggg ctggatccgc 120

cagcccccag ggaaggggct ggagtggatt gggagtatct cttatagtgg gaccacctac 180

tacaacccgt ccctcaagag tcgagtcacc atccccgtag acacgtccaa gaaccagatc 240

tccctgaaac tgagctctgt gaccgccgca gacacgtctt tgtattattg tgcgagacat 300

ctcgggtata acagcaactg gtaccctttt gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360

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<210> 59

<211> 110

<212> PRT

<213> 智人

<400> 59

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ser Tyr

20 25 30

Asn Arg Val Ser Trp Tyr Gln Gln Pro Pro Gly Thr Ala Pro Glu Val

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Ile Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

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Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

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Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 60

<211> 330

<212> DNA

<213> 智人

<400> 60

cagtcggccc tgactcagcc tccctccgtg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt agttataacc gtgtctcctg gtaccagcag 120

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cctgatcgct tctctgggtc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcagcag cacttgggtg 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330

<210> 61

<211> 119

<212> PRT

<213> 智人

<400> 61

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser His

20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

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Ser Thr Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

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Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Asn Arg Ala Gly Glu Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

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<210> 62

<211> 357

<212> DNA

<213> 智人

<400> 62

gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactg 60

tcctgcgcag cctctggatt cacctttagc agccatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaact attactggtg gtggtggtag catatactac 180

gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attattgtgc gaaaaaccgc 300

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<210> 63

<211> 105

<212> PRT

<213> 智人

<400> 63

Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Leu Ser Val Ser Val Ala Leu Gly Gln

1 5 10 15

Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asp Asn Ile Gly Asn Lys Asp Val

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His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr

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Arg Asp Ser Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Gly Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Ala Gln Ala Gly

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ile Trp Val Phe

85 90 95

Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105

<210> 64

<211> 315

<212> DNA

<213> 智人

<400> 64

tcctatgagc tgactcagcc actctcagtg tcagtggccc tgggacagac ggccaggatt 60

acctgtgggg gagacaacat tggaaataaa gatgtgcact ggtaccagca gaagccaggc 120

caggcccctg tgctggtcat ctatagggat agcaaccggc cctctgggat ccctgaggga 180

ttctctggct ccaactcggg gaacacggcc accctgacca tcagcagagc ccaagccggg 240

gatgaggctg actattactg tcaggtgtgg gacagcattt gggtgttcgg cggagggacc 300

aagctgaccg tccta 315

<210> 65

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 65

Ser Ser Tyr Thr Ser Ile Ser Thr Trp Val

1 5 10

<210> 66

<211> 30

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 66

agctcatata caagcatcag cacttgggtg 30

<210> 67

<211> 110

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 67

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Phe Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Glu Leu

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Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ile

85 90 95

Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 68

<211> 330

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 68

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ttttataact atgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccga actcatgatt tatgatgtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180

tctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcatcag cacttgggtg 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330