本发明公开了一种CHO细胞表达的重组新型冠状病毒NCP-RBD蛋白的制备方法及其应用,包括以下步骤：(1)细胞复苏培养：取工作细胞株进行复苏培养,得到细胞复苏培养物；(2)细胞扩增培养：将细胞复苏培养物进行扩增,得到细胞扩增培养物；(3)罐培养：将细胞扩增培养物进行罐培养,得到细胞收获液；(4)纯化：对细胞收获液进行纯化,得到所需产物；其中,工作细胞株为表达重组新型冠状病毒NCP-RBD蛋白的重组CHO细胞株。采用本发明所述方法,可以将CHO细胞表达的重组新型冠状病毒NCP-RBD蛋白高效的分离和纯化,适用于规模化生产,同时能有效地用于生产新冠疫苗。

本发明公开了3种重组腺病毒以及SARS-CoV-2 Spike蛋白的RBD以及它们的应用。本发明提供了重组腺病毒：表达序列表的序列3所示蛋白质的重组腺病毒；表达序列表的序列5所示蛋白质的重组腺病毒；表达序列表的序列1所示蛋白质的重组腺病毒。序列表的序列1所示的蛋白质即全长SARS-CoV-2 Spike蛋白。序列表的序列3所示的蛋白质即具有膜锚定信号肽的SARS-CoV-2受体结合域RBD蛋白。序列表的序列5所示的蛋白质即具有分泌型信号肽的SARS-CoV-2受体结合域RBD蛋白。本发明研发的针对新型冠状病毒SARS-CoV-2的疫苗具有重要的理论指导价值和广泛的应用前景,为新型冠状病毒肺炎的根治提供了可能性。

本发明属于生物技术领域,具体涉及猪流行性腹泻病毒Nsp9蛋白、含该Nsp9蛋白的融合蛋白及其制备方法和应用。本发明将猪流行性腹泻病毒的Nsp9蛋白进行了原核表达,其蛋白产量相当高,另外,本发明首次证明重组Nsp9的原核表达可在小鼠体内诱导活跃的体液和细胞免疫,Nsp9蛋白免疫鼠产生的Nsp9抗体滴度达1:64000,MBP-Nsp9蛋白免疫鼠产生的Nsp9抗体滴度高达1:128000。同时证明了MBP可增强Nsp9的免疫诱导能力,上述结果表明,PEDV的Nsp9蛋白可用于制备PEDV诊断试剂和疫苗。

本发明属于生物技术领域,具体涉及猪流行性腹泻病毒nsp10蛋白、含该nsp10蛋白的融合蛋白及其制备方法和应用。本发明将猪流行性腹泻病毒的nsp10蛋白进行了原核表达,其蛋白产量相当高,另外,本发明首次证明重组nsp10的原核表达可在小鼠体内诱导活跃的体液和细胞免疫,nsp10蛋白免疫鼠产生的nsp10抗体滴度达1:13000,MBP-nsp10蛋白免疫鼠产生的nsp10抗体滴度高达1:42000。同时证明了MBP可增强nsp10的免疫诱导能力,上述结果表明,PEDV的nsp10蛋白可用于制备PEDV诊断试剂和疫苗。

本发明公开一种含有新型冠状病毒南非突变株COVID-19疫苗的抗原表位的融合蛋白,所述融合蛋白由新型冠状病毒南非突变株COVID-19疫苗的RBD抗原表位片段S1亚基中的RBD片段和SD1片段和免疫球蛋白Fc片段构成。本发明经过研究发现在新型冠状病毒南非突变株COVID-19的RBD融合SD1,获得的效果具有优异的效果,尤其是中和数据方面具有突出的效果,因而可以推广作为针对新型冠状病毒南非突变株COVID-19的疫苗。

本发明公开了SARS-CoV-2 Spike蛋白受体结合域二聚体及其应用,具体涉及SARS-CoV-2 RBD dimer(SARS-CoV-2 RBD二聚体)或SARS-CoV-2 RBD monomer(SARS-CoV-2 RBD单体)以及它们在中和SARS-CoV-2中的应用,其中SARS-CoV-2 RBD二聚体具有更加显著的活性。本发明提供了SARS-CoV-2 RBD的二聚体；序列表的序列1所示的蛋白质；序列表的序列3所示的蛋白质；序列表的序列3中第34-272位氨基酸残基所示的蛋白质。本发明对研发治疗和预防SARS-CoV-2的药物和疫苗等具有重要的价值和广泛的应用前景。

本发明提供了一种狐狸逆转录病毒毒株及其应用,该毒株的保藏编号为CGMCC No.21898,分类命名为γ逆转录病毒,该狐狸逆转录病毒毒株于2021年06月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址：北京市朝阳区北辰西路1号院,邮编：100101；将狐狸逆转录病毒毒株进行应用,具体为制成药物后应用和/或诊断制剂中的应用。通过将该毒株进行应用,使对由狐狸逆转录病毒引起的疾病的预防、治疗等更具目标性,提高检测效率、预防效果和治疗效果。

本发明涉及基因工程领域,更具体涉及一种CLD蛋白突变体及应用。所述的蛋白为SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.5所示的任一一个蛋白,申请人将原代CLD重组蛋白中的CD4 60位处的半胱氨酸突变为丝氨酸,获得的CLD蛋白突变体对测试的HIV-1毒株抑制能力提高2-3个数量级,显著提高了对病毒的中和能力,这种差异在测试的HIV-1 T/F(transmitter/founder)virus中更加显著,CLD蛋白能够大幅提高与HIV-1病毒的结合效率；CLD蛋白突变体或重组CLD蛋白与包膜蛋白形成的复合物可以作为一种免疫原,更好诱导出针对包膜蛋白V1V2区的抗体,表现出良好的应用前景。

本发明公开了一种鸡白细胞介素17B重组乳酸菌免疫制剂的制备和应用。本发明提供了特异蛋白的应用,为如下(a1)或(a2)：(a1)制备免疫促进剂；(a2)作为免疫促进剂；所述特异蛋白为如下(b1)或(b2)或(b3)：(b1)序列表的序列1中第28至199位氨基酸残基组成的蛋白质；(b2)序列表的序列1中第1至199位氨基酸残基组成的蛋白质；(b3)序列表的序列1所示的蛋白质。本发明还保护所述特异蛋白。本发明的特异蛋白可以促进淋巴细胞增殖,抑制致病微生物的生长,促进特异性抗体分泌,促进黏膜抗体分泌,提高动物的免疫能力与存活率。

用于在酵母细胞表面上异源表达SARS-CoV-2抗原的核酸构建体和相关多肽,重组酵母细胞,疫苗组合物,口服剂量制剂以及诱导对SARS-CoV-2的抗原特异性免疫反应的方法。