本发明公开了一种CHO细胞表达的重组新型冠状病毒NCP-RBD蛋白的制备方法及其应用,包括以下步骤：(1)细胞复苏培养：取工作细胞株进行复苏培养,得到细胞复苏培养物；(2)细胞扩增培养：将细胞复苏培养物进行扩增,得到细胞扩增培养物；(3)罐培养：将细胞扩增培养物进行罐培养,得到细胞收获液；(4)纯化：对细胞收获液进行纯化,得到所需产物；其中,工作细胞株为表达重组新型冠状病毒NCP-RBD蛋白的重组CHO细胞株。采用本发明所述方法,可以将CHO细胞表达的重组新型冠状病毒NCP-RBD蛋白高效的分离和纯化,适用于规模化生产,同时能有效地用于生产新冠疫苗。

本发明公开了3种重组腺病毒以及SARS-CoV-2 Spike蛋白的RBD以及它们的应用。本发明提供了重组腺病毒：表达序列表的序列3所示蛋白质的重组腺病毒；表达序列表的序列5所示蛋白质的重组腺病毒；表达序列表的序列1所示蛋白质的重组腺病毒。序列表的序列1所示的蛋白质即全长SARS-CoV-2 Spike蛋白。序列表的序列3所示的蛋白质即具有膜锚定信号肽的SARS-CoV-2受体结合域RBD蛋白。序列表的序列5所示的蛋白质即具有分泌型信号肽的SARS-CoV-2受体结合域RBD蛋白。本发明研发的针对新型冠状病毒SARS-CoV-2的疫苗具有重要的理论指导价值和广泛的应用前景,为新型冠状病毒肺炎的根治提供了可能性。

本发明属于生物技术领域,具体涉及猪流行性腹泻病毒Nsp9蛋白、含该Nsp9蛋白的融合蛋白及其制备方法和应用。本发明将猪流行性腹泻病毒的Nsp9蛋白进行了原核表达,其蛋白产量相当高,另外,本发明首次证明重组Nsp9的原核表达可在小鼠体内诱导活跃的体液和细胞免疫,Nsp9蛋白免疫鼠产生的Nsp9抗体滴度达1:64000,MBP-Nsp9蛋白免疫鼠产生的Nsp9抗体滴度高达1:128000。同时证明了MBP可增强Nsp9的免疫诱导能力,上述结果表明,PEDV的Nsp9蛋白可用于制备PEDV诊断试剂和疫苗。

本发明属于生物技术领域,具体涉及猪流行性腹泻病毒nsp10蛋白、含该nsp10蛋白的融合蛋白及其制备方法和应用。本发明将猪流行性腹泻病毒的nsp10蛋白进行了原核表达,其蛋白产量相当高,另外,本发明首次证明重组nsp10的原核表达可在小鼠体内诱导活跃的体液和细胞免疫,nsp10蛋白免疫鼠产生的nsp10抗体滴度达1:13000,MBP-nsp10蛋白免疫鼠产生的nsp10抗体滴度高达1:42000。同时证明了MBP可增强nsp10的免疫诱导能力,上述结果表明,PEDV的nsp10蛋白可用于制备PEDV诊断试剂和疫苗。

本发明公开一种含有新型冠状病毒南非突变株COVID-19疫苗的抗原表位的融合蛋白,所述融合蛋白由新型冠状病毒南非突变株COVID-19疫苗的RBD抗原表位片段S1亚基中的RBD片段和SD1片段和免疫球蛋白Fc片段构成。本发明经过研究发现在新型冠状病毒南非突变株COVID-19的RBD融合SD1,获得的效果具有优异的效果,尤其是中和数据方面具有突出的效果,因而可以推广作为针对新型冠状病毒南非突变株COVID-19的疫苗。

本发明公开了SARS-CoV-2 Spike蛋白受体结合域二聚体及其应用,具体涉及SARS-CoV-2 RBD dimer(SARS-CoV-2 RBD二聚体)或SARS-CoV-2 RBD monomer(SARS-CoV-2 RBD单体)以及它们在中和SARS-CoV-2中的应用,其中SARS-CoV-2 RBD二聚体具有更加显著的活性。本发明提供了SARS-CoV-2 RBD的二聚体；序列表的序列1所示的蛋白质；序列表的序列3所示的蛋白质；序列表的序列3中第34-272位氨基酸残基所示的蛋白质。本发明对研发治疗和预防SARS-CoV-2的药物和疫苗等具有重要的价值和广泛的应用前景。

本发明公开了一种鸡白细胞介素17B重组乳酸菌免疫制剂的制备和应用。本发明提供了特异蛋白的应用,为如下(a1)或(a2)：(a1)制备免疫促进剂；(a2)作为免疫促进剂；所述特异蛋白为如下(b1)或(b2)或(b3)：(b1)序列表的序列1中第28至199位氨基酸残基组成的蛋白质；(b2)序列表的序列1中第1至199位氨基酸残基组成的蛋白质；(b3)序列表的序列1所示的蛋白质。本发明还保护所述特异蛋白。本发明的特异蛋白可以促进淋巴细胞增殖,抑制致病微生物的生长,促进特异性抗体分泌,促进黏膜抗体分泌,提高动物的免疫能力与存活率。

用于在酵母细胞表面上异源表达SARS-CoV-2抗原的核酸构建体和相关多肽,重组酵母细胞,疫苗组合物,口服剂量制剂以及诱导对SARS-CoV-2的抗原特异性免疫反应的方法。

本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供了一种编码新型冠状病毒B.1.351突变株抗原的DNA分子、DNA疫苗及应用。本发明提供的SEQ ID NO.1核酸序列在真核表达系统中能够高效转录和表达,而且具有免疫原性,表现在体液免疫和细胞免疫应答中,以此作为活性成分的核酸疫苗同样具有良好的免疫原性。

本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供了一种新型冠状病毒DNA疫苗。本发明提供的DNA分子组合中SEQ ID NO.1-4可以分别表达四种新冠突变株的S蛋白,优势在于在真核表达系统中可以高效转录和表达,同时具有良好的免疫原性。制备的疫苗可以有效预防和/或治疗新型冠状病毒感染和感染的相关疾病。