一种用于1型糖尿病检测的试剂、生物标志物及其应用
阅读说明：本技术 一种用于1型糖尿病检测的试剂、生物标志物及其应用 (Reagent and biomarker for detecting type 1 diabetes and application of reagent and biomarker ) 是由 牟丽莎 蔡志明 曹梦涛 彭园征 陆赢 陈姣 蒲祖辉 梁樱莹 于 2020-12-30 设计创作，主要内容包括：本申请公开了一种用于1型糖尿病检测的试剂、生物标志物及其应用。本申请用于1型糖尿病检测的试剂为检测待测对象的肠道微生物群丰度的试剂；其中,肠道微生物群包括反刍球菌、臭杆菌、丁酸杆菌、颤杆菌、杜波氏菌和苏黎世杆菌。本申请用于1型糖尿病检测的试剂,通过对几种关键的肠道微生物群进行特异性的检测,能够有效的反映1型糖尿病的状态,从而为1型糖尿病的检测和治疗效果提供科学的参考依据。(The application discloses a reagent and a biomarker for detecting type 1 diabetes and application thereof. The reagent for detecting the type 1 diabetes mellitus is a reagent for detecting the abundance of intestinal microbiota of a to-be-detected object; wherein the gut microbiota comprises Peste des petits ruminants, Clerodendron, butyric acid bacilli, Oscillatoria, Dulbecco and Zuricobacter. The reagent for detecting the type 1 diabetes can effectively reflect the state of the type 1 diabetes by specifically detecting a plurality of key intestinal microbiota, thereby providing scientific reference basis for the detection and treatment effect of the type 1 diabetes.)
技术领域
本申请涉及糖尿病检测技术领域，具体涉及一种用于1型糖尿病检测的试剂、生物标志物及其应用。
背景技术
1型糖尿病(缩写T1DM)是一种慢性疾病，在这种疾病中，自身免疫将会破坏β细胞，导致很少或没有胰岛素产生。近几十年来，T1DM的发病率有所增加。然而，包括遗传和环境因素在内的多种因素在T1DM的病理生理学中都起着至关重要的作用。T1DM并不是近几十年来唯一发病率增加的自身免疫性疾病，其他免疫介导的疾病，包括炎症性肠病和过敏性疾病，也显示发病率增加。因此，这种发病率增加的现象不仅是由于遗传学的变化，环境因素也是其中一个重要影响因素，这些因素在触发免疫系统的不平衡和使个体容易自身免疫方面起着关键作用。
近几十年来，肠道微生物群发生了巨大的变化，这是由于生活条件的改变和抗生素的应用增加所致。来自人类和动物的证据表明T1DM与肠道微生物之间的密切联系。研究表明，与健康个体相比，T1DM患者肠道微生物群存在异常。虽然肠道微生物对粘膜免疫系统的发育很重要，但肠道微生物与T1DM的关系尚不清楚。
对于部分的T1DM患者，他们不具备稳定控制血糖的能力，并伴有严重的低血糖发作和低血糖昏迷，而对其进行临床胰岛移植可以有效的控制糖尿病。超过1500名糖尿病患者在进行了临床胰岛移植后，表现出比胰腺移植更低的风险和更长久有效的结果。此外，胰腺移植还具有重大手术风险，且具有潜在的严重并发症和免疫抑制。三期临床多中心试验的结果也证明了临床胰岛移植的安全性和有效性。T1DM的个体表现出肠道微生物群异常，虽然胰腺或胰岛移植治疗能够有效的控制糖尿病；但是，胰腺或胰岛移植治疗是否能恢复异常的肠道微生物群尚不清楚。
综上所述，虽然有研究显示T1DM患者表现出肠道微生物群异常；但是，肠道微生物与T1DM的关系，以及糖尿病治疗对肠道微生物影响，都尚不清楚。
发明内容
本申请的目的是提供一种新的用于1型糖尿病检测的试剂、生物标志物及其应用。
为了实现上述目的，本申请采用了一下技术方案：
本申请的第一方面公开了一种用于1型糖尿病检测的试剂，该试剂为检测待测对象的肠道微生物群丰度的试剂；肠道微生物群包括反刍球菌(Ruminococcaceae)、臭杆菌(Odoribacter)、丁酸杆菌(Butyricicoccus)、颤杆菌(Oscillibacter)、杜波氏菌(Dubosiella)和苏黎世杆菌(Turicibacter)。
需要说明的是，本申请的试剂通过检测反刍球菌、臭杆菌、丁酸杆菌、颤杆菌、杜波氏菌和苏黎世杆菌这些肠道微生物的丰度，能够一定程度上反映1型糖尿病的状态，为1型糖尿病的诊断和治疗效果提供参考依据。
本申请的一种实现方式中，肠道微生物群还包括拟杆菌、厚壁菌和黑色素细菌。
需要说明的是，本申请研究发现反刍球菌、臭杆菌、丁酸杆菌、颤杆菌、杜波氏菌和苏黎世杆菌可以作为1型糖尿病的生物标志物；进一步的，拟杆菌、厚壁菌和黑色素细菌也可以作为1型糖尿病的生物标志物；因此，在1型糖尿病检测时，可以进一步的对拟杆菌、厚壁菌和黑色素细菌进行检测。
本申请的一种实现方式中，试剂包括检测待所述肠道微生物群丰度的核酸组合或多肽组合。其中，核酸组合可以是引物或者引物、探针的组合；多肽组合可以是特异性抗体或者多肽。
本申请的一种实现方式中，试剂包括检测待所述肠道微生物群丰度的培养基或培养基组合。其中，培养基或者培养基组合可以是常规的通过生物或化学反应实现的微生物定量检测。
需要说明的是，本申请的关键在于创造性的发现，反刍球菌、臭杆菌、丁酸杆菌、颤杆菌、杜波氏菌和苏黎世杆菌，以及拟杆菌、厚壁菌和黑色素细菌，可以作为1型糖尿病的生物标志物；至于具体的如何检测这些肠道微生物群的丰度，可以参考现有技术，例如设计特异性的引物、探针，或者设计特异性的抗体，又或者其它可以实现微生物定量检测的方法，在此不作具体限定。
本申请的第二方面公开了肠道微生物群作为1型糖尿病检测或糖尿病状态预测的生物标志物的应用，其中，肠道微生物群包括反刍球菌、臭杆菌、丁酸杆菌、颤杆菌、杜波氏菌和苏黎世杆菌。
优选的，本申请的应用中，肠道微生物群还包括拟杆菌、厚壁菌和黑色素细菌。
本申请的第三方面公开了一种用于1型糖尿病检测或糖尿病状态预测的生物标志物，该生物标志物为肠道微生物群，肠道微生物群包括反刍球菌、臭杆菌、丁酸杆菌、颤杆菌、杜波氏菌和苏黎世杆菌。
优选的，生物标志物中，肠道微生物群还包括拟杆菌、厚壁菌和黑色素细菌。
本申请的第四方面公开了本申请的生物标志物作为糖尿病治疗靶点的应用。
可以理解，本申请的肠道微生物群与糖尿病的状态密切相关，因此，这些肠道微生物群也可以作为治疗糖尿病的靶点。
本申请的第五方面公开了本申请的生物标志物在制备1型糖尿病检测试剂、制备糖尿病治疗药物或糖尿病治疗药物研发中的应用。
其中，在制备1型糖尿病检测试剂中的应用，主要是指针对这些作为生物标志物的肠道微生物群设计特异性的检测其丰度的检测试剂，例如引物、探针、多肽等。在制备糖尿病治疗药物中的应用，主要是指直接例如这些肠道微生物群作为靶点制备相应的药物。在糖尿病治疗药物研发中的应用，主要是指通过对比分析这些肠道微生物群在药物使用前后的丰度变化，评估药物对糖尿病的作用效果，为治疗效果提供参考，进而起到药物筛选和研发的作用。
由于采用以上技术方案，本申请的有益效果在于：
本申请用于1型糖尿病检测的试剂，通过对几种关键的肠道微生物群进行特异性的检测，能够有效的反映1型糖尿病的状态，从而为1型糖尿病的检测和治疗效果提供科学的参考依据。
附图说明
图1为本申请实施例中五组小鼠收集粪便样本的时间表；
图2为本申请实施例中胰岛荧光素染色后的荧光显微镜观察结果图；
图3为本申请实施例中小鼠胰岛素ELISA测定的胰岛素浓度；
图4为本申请实施例中五组小鼠经处理后的血糖浓度测试结果；
图5为本申请实施例中五组小鼠经处理后的体重测试结果；
图6为本申请实施例中Homo-Tx组和Allo-Tx组移植的胰岛观察结果图；
图7为本申请实施例中糖尿病组和对照组小鼠的粪便微生物分析结果图；
图8为本申请实施例中糖尿病组和对照组小鼠的粪便中检测到的微生物种类数量分析图；
图9为本申请实施例中糖尿病组和对照组小鼠粪便微生物在门水平上的相对丰度分析结果图；
图10为本申请实施例糖尿病组和对照组小鼠粪便中拟杆菌和厚壁菌的丰度分析结果图；
图11为本申请实施例糖尿病组和对照组小鼠粪便中微生物丰度分析结果图；
图12为本申请实施例中五组小鼠粪便样本微生物分析结果图；
图13为本申请实施例五组小鼠粪便样本检测到的微生物种类数量分析图；
图14为本申请实施例中五组小鼠粪便样本微生物的相对丰度分析结果；
图15为本申请实施例中五组小鼠粪便样本中拟杆菌、厚壁菌和黑色素细菌的相对丰度分析结果；
图16为本申请实施例五组小鼠粪便样本中反刍球菌的相对丰度分析结果；
图17为本申请实施例中五组小鼠粪便样本中臭杆菌的相对丰度分析结果；
图18为本申请实施例五组小鼠粪便样本中丁酸杆菌的相对丰度分析结果；
图19为本申请实施例中五组小鼠粪便样本中颤杆菌的相对丰度分析结果；
图20为本申请实施例五组小鼠粪便样本中杜波氏菌的相对丰度分析结果；
图21为本申请实施例五组小鼠粪便样本苏黎世杆菌的相对丰度分析结果。
具体实施方式
现有的研究显示T1DM患者的肠道微生物群与健康人之间存在差异，但是，具体的，肠道微生物与T1DM的关系尚不清楚，糖尿病治疗对肠道微生物影响也不清楚。
本申请创造性的发现，一些特殊的肠道微生物群可以作为1型糖尿病的生物标志物，这些肠道微生物群包括反刍球菌、臭杆菌、丁酸杆菌、颤杆菌、杜波氏菌和苏黎世杆菌。进一步的，这些肠道微生物群还可以包括拟杆菌、厚壁菌和黑色素细菌。通过对以上肠道微生物群进行检测，可以一定程度上反映1型糖尿病的状态，为1型糖尿病的检测和治疗效果提供参考依据。
下面通过具体实施方式结合附图对本发明作进一步详细说明。以下实施例仅对本申请进行进一步说明，不应理解为对本申请的限制。除非特别说明，以下实施例中采用的仪器、材料都是实验室常规使用的器材。
实施例
一、材料和方法
1.供试动物
野生型雄性C57BL/6和Balb/c小鼠6-8周购自广东医学实验室动物中心。在这项研究中只使用雄性小鼠，因为葡萄糖刺激的胰岛素释放量与性别无关。所有小鼠均在北京大学深圳医院的无特定病原体(SPF)条件下饲养。动物实验方案经北京大学深圳医院机构生物医学研究伦理委员会批准。
2.小鼠糖尿病的诱导作用
将链脲霉素(STZ,西格玛，圣路易斯，密苏里州，美国)溶于0.5M柠檬酸钠缓冲液中，C57BL/6小鼠一次性腹腔注射剂量为250mg/kg。注射两天后，测定小鼠血糖水平，血糖水平高于16.8mmol/L并保持稳定5天的小鼠被定义为糖尿病小鼠。
实验分为五个组：(一)对照组(Ctrl group)，正常的C57BL/6小鼠，不加STZ处理；(二)糖尿病组(DM group)，STZ诱导糖尿病小鼠；(三)胰岛素治疗组(Insulin group)，STZ诱导糖尿病小鼠，每只注射0.8U胰岛素(万邦，江苏，中国)，每次胰岛素注射后半小时测试血糖。小鼠胰岛素注射后6小时内，血糖达到11.1mmol/L；(四)同基因移植组(Homo-Txgroup)，STZ诱导C57BL/6糖尿病小鼠移植C57BL/6小鼠胰岛；(五)同种异基因移植组(Allo-Tx group)，STZ诱导C57BL/6糖尿病小鼠移植Balb/c小鼠胰岛，不使用免疫抑制剂。
3.胰岛分离、纯化和培养
胰岛从麻醉后的C57BL/6或Balb/c供体小鼠中分离出来，通过胆总管原位灌注2mg/mL的胶原酶V型(Sigma-Aldrich，美国)到胰腺中。取出灌注后胰腺在水浴锅中37℃静置水浴中，用额外的2mg/mL的胶原酶V型进一步消化膨胀的胰腺。然后用涡旋振荡器短暂振荡，放置在冰上终止酶消化，然后洗涤。通过不连续梯度(密度为1.119，1.083和1.077g/mL)Histopaque细胞分离液(Sigma-Aldrich，美国)离心对胰岛进行纯化。在解剖显微镜下从消化的胰腺组织中手工挑选胰岛。然后胰岛放到37℃，95％空气和5％CO2的培养箱中进行培养，每皿(60mm培养皿)加入5mL的完全培养基，密度约为150个胰岛/皿。
4.胰岛细胞活力评估
荧光素二乙酸酯(FDA)(Sigma-Aldrich，美国)1μL和碘化丙化丙啶(PI)(Sigma-Aldrich，美国)10μL加入到1mL PBS中。与胰岛混合后用荧光显微镜检查胰岛。
5.葡萄糖刺激胰岛素分泌试验
在本实验中，手工挑选10个大小相似的胰岛，在37℃，95％空气和5％CO2的培养箱中进行培养。在30min的预孵育后，将胰岛与含低葡萄糖(2.8mM)或高葡萄糖(28mM)的Kreb's液孵育60min。用小鼠胰岛素ELISA(MercodiaAB，瑞典)测定胰岛培养液中的胰岛素浓度。
6.胰岛移植
将大约300个胰岛移植到每个糖尿病受体的肾被膜下。在肾脏的一端做一个小口袋。将胰岛吸入枪头尖端。尖端插入肾被膜和肾脏之间的空间，随着枪头的撤回，胰岛慢慢被排出。肾脏放回到腹腔内，然后缝合创口。
7.从粪便标本和16S rRNA序列中提取DNA
根据时间表收集各组小鼠粪便标本，如图1所示。总的来说，同种异体-移植组的粪便颗粒在胰岛移植后第2周收集，此时正发生排斥反应。其他组粪便颗粒均在胰岛移植后第4周收获。用粪便DNA提取试剂盒(天根生物技术，中国)，按标准程序分离粪便标本DNA。用以下引物PCR扩增细菌16S rRNA基因的V3-V4区域：338F 5′-条形码-ACCTAC GGAGGA GCAGCA-3′和806R 5′-GGACTACHVGGTWTC TAAT-3′，其中，条形码是每个样本特有的8碱基序列。采用IlluminaMiSeq平台进行测序。
8.组织学分析
用Balb/c小鼠胰岛移植的糖尿病小鼠在第2周被处死，所有其他小鼠在第4周被处死。取含移植物的肾脏，在4％多聚甲醛溶液中固定至少48h，4μm切取石蜡切片，用苏木精和伊红染色，测定移植物大小和包膜厚度。切片用于免疫组织化学染色，使用抗胰岛素的抗体(CST，美国)和AlexaFluor546标记的驴抗山羊IgG二抗(Jackson ImmunoResearch，美国)。切片用300nM DAPI(ThermoFisherScience，美国)在PBS中染色，孵育20min，用PBS洗涤三次，然后用LeicaFDM2500显微镜拍摄。
9.统计分析
本试验用GraphPad软件(第7版)进行双尾t测验分析组间的差异。统计学意义定义为P<0.05。*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
二、结果
1.胰岛移植移植和胰岛素治疗可使STZ诱导的糖尿病小鼠高血糖正常化
为了研究糖尿病小鼠肠道微生物的变化，以及胰岛素或胰岛治疗高血糖是否影响肠道微生物，本试验设计了五个实验组：(i)控制组(Ctrl group)，即对照组，正常C57BL/6小鼠，不进行STZ处理；(ii)糖尿病组(DM group)，STZ诱导糖尿病小鼠；(iii)胰岛素组(Insulin group)，STZ诱导糖尿病小鼠，每只小鼠注射0.8U进行胰岛素(江苏万邦，中国)，每次注射半小时后血糖测试。小鼠在胰岛素注射后6小时内达到葡萄糖水平<11.1mmol/L；(iv)同种移植(Homo-Tx)组(Homo-Tx group)，STZ诱导C57BL/6糖尿病小鼠移植C57BL/6胰岛；(v)同种异体移植(Allo-Tx group)，STZ诱导C57BL/6糖尿病小鼠移植Balb/c小鼠胰岛不受免疫抑制，如图1所示。胰岛活力95％以上，刺激指数2以上，用于胰岛移植，如图2和图3所示。糖尿病小鼠血糖水平升高，高于30mmol/L，胰岛素和胰岛移植均表现出将血糖降低到正常水平的能力，如图4所示。与对照小鼠相比，糖尿病小鼠的体重明显下降。然而，胰岛素或胰岛治疗可以消除体重的下降，如图5所示。这些结果表明，胰岛移植或胰岛素治疗可以纠正STZ引起的高血糖。本试验还进行了免疫组织化学，发现移植的胰岛在肾脏中保持形态完整，并表达分泌胰岛素，如图6所示。
2.糖尿病小鼠表现出与非糖尿病小鼠相似的细菌多样性
本试验根据时间表从上述五组收集粪便标本，如图1所示，用TIANamp Stool DNA试剂盒分离细菌DNA，并进行16S rRNA测序，分析共生微生物区系。结果表明，糖尿病小鼠与对照非糖尿病小鼠相比，粪便细菌组成不同，特别是相对比例不同，如图7所示；但两组粪便细菌种类相似，如图8所示。粪便微生物在门水平上的相对丰度显示出两组之间的差异，如图9所示。与对照小鼠相比，糖尿病小鼠的类细菌显著减少，而厚壁菌显著增加，如图10所示。本试验的发现与T1DM患者的厚壁菌与拟杆菌比值的变化相一致。通过更深入的分析，本试验发现糖尿病小鼠中的许多属细菌与非糖尿病对照组相比发生了变化，这进一步表明肠道微生物群失调程度较高，如图11所示。前十个属细菌的变化如下：异位丙酸杆菌，乳杆菌，阿氏杆菌，未识别链霉菌，臭杆菌，拟杆菌，未识别反刍球菌，幽门螺杆菌，脱硫弧菌，杜波氏菌。
3.胰岛移植和胰岛素治疗对微生物群的影响
大量的证据表明，肠道微生物群在糖尿病发展中的组成具有相关的特征；然而，以前的研究没有研究糖尿病小鼠微生物群与胰岛移植之间的关系。因此，本试验进行了16SrRNA测序来分析这些变化。结果表明，胰岛移植至少能部分恢复糖尿病小鼠中发现的失调的微生物组成，如图12所示。观察到的物种在组间没有差异，如图13所示。胰岛素或胰岛治疗部分挽救了拟杆菌的减少，胰岛素或胰岛治疗也减轻了厚壁菌和黑色素细菌的增加，如图14和图15所示。本试验的数据表明，胰岛素或胰岛移植治疗可以部分恢复失调的细菌，然而，共生细菌仍然与对照小鼠的有不同。
4.共生菌群可作为STZ诱导糖尿病预后的生物标志物
进一步的分析是基于16S rRNA测序在属水平上进行的，这表明许多来自不同门的细菌在糖尿病小鼠中显著增加，并在糖尿病小鼠接受每日胰岛素治疗或胰岛移植治疗后恢复。本试验对反刍球菌、臭杆菌、丁酸杆菌、颤杆菌、杜波氏菌和苏黎世杆菌进行了分析，分析了它们在处理组中与未处理组相比的相对丰度，如图16至图21所示。因此，这些共生细菌可以作为STZ诱导糖尿病预后的一个有价值的生物标志物。
三、讨论和结论
肠道微生物群对人类和动物都是非常重要的，它们参与疾病的发生并影响其发展。目前还没有关于胰岛素或胰岛移植治疗的糖尿病小鼠肠道微生物群变化的研究。在本试验的研究中，本试验从用胰岛素或胰岛移植处理的糖尿病小鼠中分离出肠道微生物群的DNA，并用16S rRNA进行测序。结果表明，糖尿病小鼠确实存在肠道微生物异常，包括厚壁菌的增加和拟杆菌的减少等，这与T1DM患者和糖尿病大鼠的情况相同。胰岛素或胰岛移植治疗可部分恢复异常的微生物，有利于肠道微生物的恢复。胰岛移植组的黑色素细菌丰度低于胰岛素组。本试验还发现，一些特定的细菌，包括反刍球菌、臭杆菌、丁酸杆菌、颤杆菌、杜波氏菌和苏黎世杆菌，可以作为STZ诱导糖尿病的生物标志物，模拟人类糖尿病。
为了研究微生物区系的变化，本试验用C57BL/6小鼠或Balb/c小鼠的胰岛对糖尿病小鼠进行了移植。Balb/c小鼠的胰岛移植在C57BL/6受体小鼠免疫系统排斥前可以维持正常血糖2周。虽然C57BL/6或Balb/c小鼠移植组之间的样本收集时间不同，但胰岛胰岛后的糖尿病小鼠的肠道微生物区系相似，这与用胰岛素处理的糖尿病小鼠不同。这一结果表明，移植器官或细胞的免疫排斥不会干扰肠道微生物。胰岛移植到受体体内除了分泌胰岛素外，还可能以其他方式影响肠道微生物群。然而，恢复血糖水平不足以完全挽救异常的肠道微生物。
由于在本研究中观察到肠道微生物群与STZ诱导的糖尿病发展的相关性，本试验认为拟杆菌、厚壁菌和黑色素细菌也可以是生物标志物。先前的研究表明，厚壁菌和拟杆菌与肥胖和糖尿病有关。厚壁菌被定义为“脂肪细菌”，拟杆菌被定义为“瘦细菌”。随着厚壁菌/拟杆菌比例的增加，炎症反应和BMI水平升高，更容易发生胰岛素抵抗，最终将导致糖尿病的发生。以前的研究没有报导过黑色素细菌与糖尿病的相关性。
本试验还发现了一组与对照和胰岛素/移植组分离的共生微生物群，包括反刍球菌、臭杆菌、丁酸球菌、颤杆菌、杜波氏菌和苏黎世杆菌。在这些特定的细菌中，反刍动物科被证明与糖尿病呈正相关，这可能与感染和炎症有关。由于丁酸球菌可分泌丁酸和提高胰岛素敏感性，它们与低密度脂蛋白(LDL)、血糖(GLU)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、身体质量指数(BMI)和糖尿病(DM)呈负相关。其他细菌包括苏黎世杆菌、臭杆菌和颤杆菌没有报告与糖尿病有关。对于苏黎世杆菌，先前的研究表明，它可以降低沙门氏菌感染的易感性。在基于炎症的肿瘤发生模型的研究中，检测到丰富的臭味菌。在心房颤动患者中，颤杆菌急剧减少。
在上述细菌中，一些特定的细菌在糖尿病小鼠中显著增加，包括拟杆菌、臭杆菌、丁酸球菌。然而，胰岛素或胰岛移植可以使这些细菌恢复到正常水平。本试验还发现，一些细菌在糖尿病小鼠中减少，其中含有杜波氏菌和苏黎世杆菌。同样，胰岛素或胰岛移植恢复了这些减少的细菌的丰度。因此，这些细菌是监测胰岛移植功能或胰岛素治疗有效性的生物标志物。
本研究表明，STZ诱导的糖尿病小鼠肠道微生物群发生了明显的变化，胰岛素和胰岛移植治疗可以部分纠正失调的微生物群。在STZ诱导的糖尿病小鼠中，一些细菌的丰度上调，包括臭杆菌，丁酸杆菌；而其他细菌的丰度下调，包括杜波氏菌和苏黎世杆菌。然而，胰岛素或胰岛移植使这些细菌恢复到正常水平。因此，这些肠道微生物群也可以是治疗糖尿病的靶点。本试验认为，针对糖尿病患者的微生物群可以进一步增强通过胰岛素治疗或胰岛移植获得的有益代谢效应。因此，这些特定的细菌可以作为糖尿病小鼠预测糖尿病状态的生物标志物。
综上所述，反刍球菌、臭杆菌、丁酸杆菌、颤杆菌、杜波氏菌、苏黎世杆菌、拟杆菌、厚壁菌和黑色素细菌，这些肠道微生物群能够作为1型糖尿病的生物标志物，通过检测这些肠道微生物群的丰度，能够对1型糖尿病的状态进行检测，从而为1型糖尿病的检测和治疗效果提供参考依据。
以上应用了具体个例对本发明进行阐述，只是用于帮助理解本发明，并不用以限制本发明。对于本发明所属技术领域的技术人员，依据本发明的思想，还可以做出若干简单推演、变形或替换。