一种(s)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的高效液相拆分方法
阅读说明：本技术 一种(s)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的高效液相拆分方法 (High performance liquid phase resolution method of (S) -3-hydroxytetrahydrofuran enantiomer ) 是由 张洪飞 郭赛 王洁 黄治超 于 2020-11-06 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的高效液相拆分方法,该方法包括用衍生剂将(S)-3-羟基四氢呋喃样品衍生化,再用HPLC法进行测定,其中HPLC法中的流动相为体积比为45：55的水(A)和乙腈(B)。本发明提供了一种快捷、简便的(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的衍生以及拆分方法,具有测定方法操作简单、检测快速且准确、成本低、耗时短等优势,对(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的检测,可用于监测以(S)-3-羟基四氢呋喃为原料的恩格列净等原料药及制剂的质量。(The invention discloses a high performance liquid phase resolution method of (S) -3-hydroxytetrahydrofuran enantiomer, which comprises the steps of derivatizing an (S) -3-hydroxytetrahydrofuran sample by using a derivatizing agent and then measuring by using an HPLC method, wherein the mobile phase in the HPLC method is a compound with a volume ratio of 45: 55 of water (A) and acetonitrile (B). The invention provides a rapid, simple and convenient method for deriving and splitting an (S) -3-hydroxytetrahydrofuran enantiomer, which has the advantages of simple operation of a determination method, rapid and accurate detection, low cost, short time consumption and the like, and can be used for monitoring the quality of raw material medicines and preparations such as exellene taking the (S) -3-hydroxytetrahydrofuran as a raw material by detecting the (S) -3-hydroxytetrahydrofuran enantiomer.)
技术领域
本发明涉及药物检测分析领域，更具体地，涉及一种(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的高效液相拆分方法。
背景技术
(S)-3-羟基四氢呋喃，分子式为C4H8O2，是一种重要的医药化工中间体，可作为恩格列净、阿法替尼、安普那韦等原料药的原料，在抗癌药、降糖药、艾滋病药等药物合成中用途广泛。
现有的(S)-3-羟基四氢呋喃中往往会含有其对映异构体杂质(R)-3-羟基四氢呋喃，这必然导致以(S)-3-羟基四氢呋喃为原料制得的恩格列净等原料药、抗癌药等药物的品质下降，甚至引发用药安全问题，因此，控制(S)-3-羟基四氢呋喃的质量具有重要意义。
然而，(S)-3-羟基四氢呋喃和其对映异构体杂质(R)-3-羟基四氢呋喃非常难分离，且目前对(S)-3-羟基四氢呋喃进行质量控制的文献很少。如专利CN110618208A公开了一种(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体含量检测方法，该方法采用催化剂N,N-二甲基氨基吡啶、缚酸剂三乙胺、衍生剂乙酸酐对样品(S)-3-羟基四氢呋喃进行衍生化，再用气相色谱进行测定分析，该专利文件中披露了紫外扫描发现(S)-(+)-3-羟基四氢呋喃仅末端波长193nm处有吸收，因此，不能采用高效液相色谱法检测(S)-(+)-3-羟基四氢呋喃中的对映异构体杂质(R)-(+)-3-羟基四氢呋喃，因此该专利中采用的是气相色谱检测方法，然而，相比高效液相色谱，气相色谱的精密度判定标准通常为RSD小于10％，实验误差相对较大；运行时需要升温，进样口和检测器一般都不低于200℃，柱温箱有时也会高达近200℃；同时，配备FID的气相还需要氢气源来维持检测器火焰燃烧，氢气源不论是钢瓶和是发生器都具有一定危险性，且检测耗时比较久，实用价值有限，这些都很大程度上限制了此方法的应用。
因此，寻求一种操作简便，且能够快速、高效且操作简单的分离(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体杂质的方法迫在眉睫。
发明内容
本发明的目的是克服上述现有技术中的缺陷和不足，提供一种(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的高效液相拆分方法。
本发明上述目的通过以下技术方案实现：
一种(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的高效液相拆分方法，所述高效液相拆分方法包括采用衍生剂将(S)-3-羟基四氢呋喃样品衍生化，再用HPLC法进行测定，其中HPLC法中的流动相为体积比为45：55的水(A)和乙腈(B)。
本发明所述(S)-3-羟基四氢呋喃样品为市售产品，其中含有少量其对映异构体(R)-3-羟基四氢呋喃。
优选地，所述HPLC法的检测条件包括：色谱柱为大赛璐化学键合型手性色谱柱，柱温为30℃，流速为1.0ml/min，检测波长为254nm。
优选地，所述大赛璐化学键合型手性色谱柱型号为CHIRALPAK IA-3，色谱柱规格为4.6*250mm*3μm。
优选地，所述衍生剂为4-硝基苯磺酰氯。
优选地，所述衍生化在催化剂和吡啶的存在下进行。
优选地，所述催化剂为4-二甲氨基吡啶。
优选地，所述衍生化时间为30min。
优选地，所述高效液相拆分方法具体包括以下步骤：
(1)配制溶液：分别配制空白溶液、供试品溶液、对照品溶液、系统适用性溶液；其中所述供试品溶液中包括(S)-3-羟基四氢呋喃样品、吡啶、乙腈；
(2)HPLC测定：分别将配制的溶液注入色谱仪中，记录色谱图。
优选地，所述供试品溶液的配制方法为：向100g(S)-3-羟基四氢呋喃样品中加入0.5ml吡啶，再分别加入6mg催化剂、325mg衍生剂，补加吡啶至5ml，室温下衍生30min，衍生完成后取1ml置于10ml量瓶中，乙腈稀释至刻度，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
优选地，所述对照品溶液的配制方法为：向100mg(R)-3-羟基四氢呋喃样品中加入0.5ml吡啶，再分别加入6mg催化剂、325mg衍生剂，补加吡啶至5ml，室温下衍生30min，衍生完成后取1ml置于10ml量瓶中，乙腈稀释至刻度，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
所述系统适用性溶液的配制方法为：分别称取(S)-3-羟基四氢呋喃和(R)-3-羟基四氢呋喃各适量，加入0.5ml吡啶，再分别加入6mg催化剂、325mg衍生剂，补加吡啶至5ml，室温下衍生30min，衍生完成后取适量置于10ml量瓶中，乙腈稀释至刻度，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明首次提出了采用HPLC法分离(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体杂质的方法，该方法对(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的色谱峰分离度高达3.0，远大于1.5，同时该方法还具有较高的专属性和系统适用性。
本发明利用方便快捷的高效液相色谱法，具有测定方法操作简单、检测快速且准确、成本低、耗时短等优势，对(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的检测，可用于监测以(S)-3-羟基四氢呋喃为原料的恩格列净等原料药及制剂的质量。
附图说明
图1是实施例1中空白溶液的HPLC检测结果图。
图2是实施例1中系统适用性溶液的HPLC检测结果图。
图3是实施例1中供试品溶液的HPLC检测结果图。
图4是实施例1中对照品溶液的HPLC检测结果图。
具体实施方式
为了更清楚、完整的描述本发明的技术方案，以下通过具体实施例进一步详细说明本发明，应当理解，此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明，并不用于限定本发明，可以在本发明权利限定的范围内进行各种改变。
本发明所使用的(S)-3-羟基四氢呋喃样品均为市售产品，其中含有少量其对映异构体(R)-3-羟基四氢呋喃。
实施例1
一种(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的高效液相拆分方法，包括以下步骤：
(1)溶液的配制：
供试品溶液：向100g(S)-3-羟基四氢呋喃样品中加入0.5ml吡啶，再分别加入6mg催化剂4-二甲氨基吡啶、325mg衍生剂4-硝基苯磺酰氯，补加吡啶至5ml，室温下衍生30min，衍生完成后取1ml置于10ml量瓶中，乙腈稀释至刻度，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
空白溶液：取吡啶0.5ml，加入约6mg催化剂4-二甲氨基吡啶，325mg衍生剂4-硝基苯磺酰氯，补加吡啶至至5ml，摇匀，室温衍生30min，衍生完成后取1ml置于10ml量瓶中，乙腈稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为空白溶液；
对照品溶液：向100mg(R)-3-羟基四氢呋喃样品中加入0.5ml吡啶，再分别加入6mg催化剂4-二甲氨基吡啶、325mg衍生剂4-硝基苯磺酰氯，补加吡啶至5ml，室温下衍生30min，衍生完成后取1ml置于10ml量瓶中，乙腈稀释至刻度，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
系统适用性溶液配制：分别称取(S)-3-羟基四氢呋喃和(R)-3-羟基四氢呋喃各适量，加入0.5ml吡啶，再分别加入6mg催化剂4-二甲氨基吡啶、325mg衍生剂4-硝基苯磺酰氯，补加吡啶至5ml，室温下衍生30min，衍生完成后取适量置于10ml量瓶中，乙腈稀释至刻度，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)HPLC检测：
分别将供试品溶液、空白溶液、对照品溶液和系统适用性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，色谱条件如下：
色谱柱
CHIRALPAKIA-3，4.6*250mm*3μm
柱温
30℃
流速
1.0ml/min
检测波长
254nm
流动相
水(A)：乙腈(B)＝45：55
检测结果及分析：
空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液、对照品溶液的HPLC检测结果分别如图1～4所示，从图中可以看出，空白溶剂不干扰(S)-3-羟基四氢呋喃及其对映异构体(R)-3-羟基四氢呋喃的检测，该方法专属性较好。
附图2中从左到右分别为(R)-3-羟基四氢呋喃以及(S)-3-羟基四氢呋喃，从图中可以看出，其分离度达到3.0以上，远大于1.5，能够达到基线分离，说明本发明的方法能够很好的实现(R)-3-羟基四氢呋喃与(S)-3-羟基四氢呋喃的分离，完全能适用于(S)-3-羟基四氢呋喃对映异构体杂质的分离。
以上实施例使用具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些不偏离本发明主旨的修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，这些不偏离本发明主旨基础上所做的修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。