具体实施方式

以下结合具体情况和实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。

本发明在具体实施中，可由以下实施例给出。

实施例1

本发明一种藏红花素配伍雷公藤甲素在制备内服药物中的应用，所述的内服药物为减毒内服药物，藏红花素配伍雷公藤甲素的质量比为80-600︰1。

实施例2

本发明一种藏红花素配伍雷公藤甲素在制备内服药物中的应用，所述的内服药物为减毒内服药物，藏红花素配伍雷公藤甲素的质量比为1000︰3。

实施例3

本发明一种藏红花素配伍雷公藤甲素在制备内服药物中的应用，所述的内服药物为减毒内服药物，藏红花素配伍雷公藤甲素的质量比为500︰3。

实施例4

本发明一种藏红花素配伍雷公藤甲素在制备内服药物中的应用，为制备内服缓解雷公藤甲素诱导脏器损伤药物中的应用。

实施例5

本发明一种藏红花素配伍雷公藤甲素在制备内服药物中的应用，为制备内服缓解雷公藤甲素诱导氧化应激反应药物中的应用。

实施例6

本发明一种藏红花素配伍雷公藤甲素在制备内服药物中的应用，为制备内服缓解雷公藤甲素诱导的肝肾功能损伤药物中的应用。

要指出的是，上述给出的仅是实施例，是用于说明本发明的具体实施方式，而不是用于限制本发明的保护范围，凡是采用等同、等效替换手段所作出的与本发明本质上相同的技术方案，均属于本发明的保护范围。

实践和实验证明，雷公藤甲素诱发多器官毒性和系统损伤，主要涉及生殖系统、消化系统及肝脏、肾脏、心脏的损伤。藏红花素配伍雷公藤甲素，能够保护雷公藤甲素引起的各脏器及系统损伤，病理显示，藏红花素能明显抑制雷公藤甲素诱导的各脏器损伤。说明藏红花素配伍雷公藤甲素具有开发成抗雷公藤甲素毒副作用的药物前景。并经实验，取得了非常满意的有益技术效果，有关实验资料如下：

一、实验材料

1、药物：雷公藤甲素，藏红花素，按实施例2、3给出的配伍量，均用0.9%的无菌生理盐水配制成等体积溶液混合在一起。

2、试剂：天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、肌酐（creatinine，CRE）、血尿素氮（blood ureanitrogen，BUN）、丙二醛（malondialdehyde，MAD）、总超氧化物歧化酶（total superoxidedismutase，T-SOD）等试剂盒均购自于南京建成生物科技有限公司。

3、动物：雄性健康昆明小鼠（SPF）40只，体重20g左右。

4、仪器：精密电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司 型号：AL204）；旋涡混合器（海门市其林贝尔仪器制造有限公司）；电子天平（上海浦春计量仪器有限公司）；4^。C微量冷冻离心机（Microfuge 型号：MRZ14-C015）；恒温培养箱（中科生命科技股份有限公司型号：PHW-165Q）；酶标仪（Thermo Fisher Scientific Oy 型号：1510-02820C）

二、实验方法

1、动物分组与给药：将40只雄性小鼠适应性喂养一周，随机分为5组，每组8只，分别为A、空白组（A、Normal），B、雷公藤甲素低剂量组（B、TPL），C、雷公藤甲素高剂量组（C、TPH），D、雷公藤甲素低剂量+藏红花素组（D、TPL+CR），E、雷公藤甲素高剂量+藏红花素组（E、TPH+CR），各小鼠体重差异无统计学意义（P＞0.05）。A空白组不给任何药物，只是按正常进水、进食，B雷公藤甲素低剂量组灌胃雷公藤甲素，给药剂量为300μg/kg，C雷公藤甲素高剂量组灌胃雷公藤甲素，给药剂量为600μg/kg，D雷公藤甲素低剂量+藏红花素组灌胃雷公藤甲素+藏红花素，给药剂量为300μg/kgTP+100mg/kgCR（600μg/kg雷公藤甲素与200mg/kg藏红花素等体积混合），E雷公藤甲素高剂量+藏红花素组灌胃雷公藤甲素+藏红花素，给药剂量为600μg/kgTP+100mg/kgCR（1200μg/kg雷公藤甲素与200mg/kg藏红花素等体积混合），连续给药7天，每天一次，给药体积为200μl/10g。每天观察小鼠大便性状，饮食，毛发，活动度及体重变化情况。

2、于第七天（灌胃最后一天）晚上禁食不禁水，第八天小鼠称重，摘眼球取血，血样于室温下静置1h，3000 rmp 4℃离心10min，取上清液（即血清），用酶标仪检测天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanineaminotransferase，ALT）、肌酐（creatinine，CRE）、血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）。肝、肾、心、睾丸称重，根据小鼠及各脏器体重计算其脏器系数（各脏器体重（g）/小鼠体重（g）×100%）。心，肝，肾，睾丸，子宫制作HE病理切片。

3、数据处理及分析

试验中所有数据均以平均值±标准差表示，采用SPSS21 .0软件，多组间比较采用单因素方差分析检验，组间两两比较采用q检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

三、实验结果

1、体内藏红花素对雷公藤甲素单体减毒作用验证

1.1对小鼠体重的影响

与正常组相比，雷公藤甲素低剂量和高剂量小鼠体重明显减小，呈剂量依赖型诱导小鼠体重下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；与雷公藤甲素高剂量组相比，雷公藤甲素与藏红花素配伍组小鼠体重明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），见图1。

1.2对小鼠脏器系数的影响

与正常组相比，雷公藤甲素低剂量组肝脏、心脏、睾丸系数均明显减小，雷

公藤甲素高剂量组肝脏、心脏、肾脏、睾丸系数均明显减小，差异有统计学意义

（P＜0.05），与雷公藤甲素低剂量组相比，低剂量配伍治疗组肝脏、心脏、睾丸脏器系数均显著升高，差异有统计学意义（P＜0.05），与雷公藤甲素高剂量组相比，高剂量配伍治疗组肝脏、肾脏、心脏、睾丸脏器系数均显著升高，差异有统计学意义（P＜0.05），见图2。

图2中，A为药物对小鼠肝脏指数的影响；B为药物对小鼠肾脏指数的影响；C为药物对小鼠心脏指数的影响；D为药物对小鼠睾丸指数的影响。

1.3对小鼠肝肾功能的影响

与正常组相比，雷公藤甲素低剂量肌酐、血尿素氮含量均明显升高，差异有

统计学意义（P＜0.05），雷公藤甲素高剂量组天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、肌酐（CRE）含量均明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），与雷公藤甲素低剂量相比，低剂量配伍治疗组天冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酐（CRE）、血尿素氮（BUN）含量均明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05），与雷公藤甲素高剂量相比，高剂量配伍治疗组丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酐（CRE）、血尿素氮（BUN）含量均明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05），见图3。

图3中，A为药物对小鼠丙氨酸氨基转移酶含量的影响；B为药物对小鼠天冬氨酸氨基转移酶含量的影响；C为药物对小鼠肌酐含量的影响；D为药物对小鼠血尿素氮含量的影响。

1.4对小鼠氧化应激反应的影响

与正常组相比，雷公藤甲素低剂量组、高剂量组总超氧化物歧化酶（SOD）含量显著降低、丙二醛（MDA）含量显著升高，差异有统计学意义（P＜0.05），与雷公藤甲素低剂量组相比，低剂量配伍组总超氧化物歧化酶（SOD）含量显著升高、丙二醛（MDA）含量显著降低，差异有统计学意义（P＜0.05），雷公藤甲素高剂量组相比，高剂量配伍组总超氧化物歧化酶（SOD）含量显著升高、丙二醛（MDA）含量显著降低，差异有统计学意义（P＜0.05），见图4。

图4中，A为药物对小鼠总超氧化物歧化酶的影响；B为药物对小鼠丙二醛的影响。

1.5对各脏器组织病理变化的影响

雷公藤甲素具有较强的毒性，呈剂量依赖型诱导小鼠各脏器的损伤；藏红花素具有保肝护肾、抗炎解毒的作用，与雷公藤甲素配伍能显著改善脏器病变，见图2。

在对实施例2、3配伍用量实验的同时，还对其他不同配伍用量进行了药理实验，均取得了相同或相近似的结果，这里不再一一列举。

四、结论

本实验通过对小鼠体重、活动度、毛发、饮食等的观察，发现雷公藤甲素的确能引起小鼠毒性反应，且呈剂量依赖性，使体重增长缓慢，活动度减弱，毛发粗糙，进食减少，脏器系数降低等。与雷公藤甲素组相比，配伍组小鼠体重增长具有明显恢复，活动度增强，毛发光滑，进食量及脏器系数增加。病理显示，藏红花素能抑制雷公藤甲素对小鼠多脏器及消化系统、生殖系统的损伤。说明藏红花素能缓解雷公藤甲素诱导的小鼠急性毒性损伤。

肝脏、肾脏是雷公藤甲素毒性损伤的最易感的靶器官。本实验发现雷公藤甲素导致肝肾功能指标均发生异常，说明导致了小鼠肝肾功能损伤。与雷公藤甲素组相比，藏红花素配伍组肝肾功能（AST、ALT、BUN、CRE）指标均有明显改善，说明藏红花素对雷公藤甲素诱导的肝肾损伤均有明显改善。

本实验发现雷公藤甲素能明显诱导氧化应激反应损伤，总超氧化物歧化酶及丙二醛含量均发生异常。与雷公藤甲素组相比，配伍组指标明显改善。发现藏红花素能明显改善雷公藤甲素诱导的氧化应激损伤。

因此，综合以上实验结果，可得出结论：藏红花素能改善雷公藤甲素诱导的体重下降及氧化应激反应，保护雷公藤甲素引起的各脏器损伤及消化系统、生殖系统的损伤，具有开发成抗雷公藤甲素毒副作用药物的前景，开拓了藏红花素配伍雷公藤甲素在制备内服药物中的应用，提高了藏红花素配伍雷公藤甲素在制备减毒的缓解雷公藤甲素诱导的脏器损伤的药物、诱导的氧化应激反应药物、诱导的肝肾功能损伤药物中的应用，原料丰富，易生产制备，开拓了制备内服减毒药物的新途径，提高了藏红花素和雷公藤甲素的药用价值和商业价值，有显著的经济和社会效益。