一种呼吸道病毒核酸采样试剂盒及其应用
阅读说明：本技术 一种呼吸道病毒核酸采样试剂盒及其应用 (Respiratory virus nucleic acid sampling kit and application thereof ) 是由 李刚 尹天武 汪珂 于 2020-07-23 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种呼吸道病毒核酸采样试剂盒及其应用,该试剂盒包括鼻喷剂和样本保存液,鼻喷剂按照重量百分数的组成包括：0.9％-3％的氯化钠,0.1％-0.5％的丙酮酸钠,0.01％-0.1％的丙酮酸,0.01％-0.1％的吐温80,0.01％-0.1％的单硬脂酸甘油酯,余量为无菌水；所述样本保存液按照重量百分数的组成包括：0.08-0.12％的葡萄糖,0.02-0.03％的氯化钙,0.03-0.05％的氯化钾,0.01-0.015％的磷酸氢二钠,0.01-0.015％的异亮氨酸,0.01-0.015％的亮氨酸,0.01-0.015％的盐酸赖氨酸,余量为生理盐水。本发明可以有效提高呼吸道病毒核酸检出率。(The invention provides a respiratory virus nucleic acid sampling kit and application thereof, wherein the kit comprises a nasal spray and a sample preservation solution, and the nasal spray comprises the following components in percentage by weight: 0.9 to 3 percent of sodium chloride, 0.1 to 0.5 percent of sodium pyruvate, 0.01 to 0.1 percent of pyruvic acid, 0.01 to 0.1 percent of Tween 80, 0.01 to 0.1 percent of glycerin monostearate and the balance of sterile water; the sample preservation solution comprises the following components in percentage by weight: 0.08-0.12% of glucose, 0.02-0.03% of calcium chloride, 0.03-0.05% of potassium chloride, 0.01-0.015% of disodium hydrogen phosphate, 0.01-0.015% of isoleucine, 0.01-0.015% of leucine, 0.01-0.015% of lysine hydrochloride and the balance of physiological saline. The invention can effectively improve the detection rate of the nucleic acid of the respiratory virus.)
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种呼吸道病毒核酸采样试剂盒及其应用。
背景技术
呼吸道病毒感染是最容易引起大规模公共卫生事件的传染方式。“新冠”疫情持续给全世界带来巨大灾难。依据国家卫生健康委员会发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》，病毒核酸检测是主要的确诊标准。
然而，目前新冠病毒核酸检测检出率率仅有30％—50％，这就意味着有50-70％的感染者被漏检，这些假阴性感染者，成为移动传染源，是疫情防控的重大隐患。常规鼻咽拭子、口咽拭子采样法，样本采集量不足，是造成漏检的关键因素。
发明内容
有鉴于此，有必要针对现有技术存在的问题，提供一种能够快速简便的提高病毒采样量的呼吸道病毒核酸检测用采样试剂盒及其应用。本发明的技术方案为：
第一个方面，本发明提供一种呼吸道病毒核酸检测用采样试剂盒，包括鼻喷剂和样本保存液一，所述鼻喷剂按照重量百分数的组成包括：0.9％-3％的氯化钠，0.1％-0.5％的丙酮酸钠，0.01％-0.1％的丙酮酸，0.01％-0.1％的吐温80，0.01％-0.1％的单硬脂酸甘油酯，余量为无菌水；所述样本保存液一按照重量百分数的组成包括：0.08-0.12％的葡萄糖，0.02-0.03％的氯化钙，0.03-0.05％的氯化钾，0.01-0.015％的磷酸氢二钠，0.01-0.015％的异亮氨酸，0.01-0.015％的亮氨酸，0.01-0.015％的盐酸赖氨酸，余量为无菌生理盐水。
进一步地，所述鼻喷剂的制备方法包括：按照上述鼻喷剂包括的重量百分数组成配料，将氯化钠、丙酮酸钠、丙酮酸、吐温80、单硬脂酸甘油酯溶解于无菌水中既得。
进一步地，所述样本保存液一的制备方法包括：按照上述样本保存液一包括的重量百分数组成配料，将葡萄糖、氯化钙、氯化钾、磷酸氢二钠、异亮氨酸、亮氨酸、盐酸赖氨酸溶解于无菌生理盐水中既得。
第二个方面，本发明还提供一种呼吸道病毒核酸检测用采样试剂盒，包括鼻喷剂和样本保存液二，所述鼻喷剂按照重量百分数的组成包括：0.9％-3％的氯化钠，0.1％-0.5％的丙酮酸钠，0.01％-0.1％的丙酮酸，0.01％-0.1％的吐温80，0.01％-0.1％的单硬脂酸甘油酯，余量为无菌水；所述样本保存液二的组分包括乙醇、异硫氰酸胍、DTT、乙二胺四乙酸、糖原和无菌水，并且在所述样本保存液二中乙醇的体积分数为50％-80％，异硫氰酸胍的浓度为0.2-2M，DTT的浓度为1-10mM，乙二胺四乙酸的浓度为1-10mM，糖原的浓度为10-100μg/ml。
进一步地，所述鼻喷剂的制备方法包括：按照上述鼻喷剂包括的重量百分数组成配料，将氯化钠、丙酮酸钠、丙酮酸、吐温80、单硬脂酸甘油酯溶解于无菌水中既得。
进一步地，所述样本保存液二的制备方法包括：按照上述样本保存液二包括的组分浓度配料，将乙醇、异硫氰酸胍、DTT、乙二胺四乙酸和糖原溶解于无菌水中既得。
第三个方面，本发明还提供一种呼吸道病毒核酸检测用采样方法，包括使用上述的两种采样试剂盒中的一种。
进一步的，所述采样方法具体包括：将鼻喷剂从鼻部连续喷入，直至带动鼻部分泌物流至口咽部；将口咽部的混合液体吐入样本保存液一或者样本保存液二中保存。
进一步地，当采用样本保存液一保存口咽部的混合液体时，还包括：将含有样本的保存液置于37℃、CO2浓度为5％的培养箱中，培养20～30h。
第四个方面，本发明提供上述采样试剂盒及上述采样方法在保存呼吸道病毒核酸中的用途。
第五个方面，本发明提供上述采样试剂盒及上述采样方法在辅助呼吸道病毒核酸检测中的用途。
本发明的有益效果是：
①本发明的鼻喷剂组分能够湿润鼻腔黏膜表面，稀释和液化鼻腔粘液，同时刺激鼻黏膜纤毛运动，有助于鼻腔内异物包括病毒的排出。
②本发明的样本保存液一可以保持样本细胞活性，病毒可以在活细胞上完成体外扩增，提高检测成功率。
③本发明的样本保存液二既能有效灭活病毒，又能够完整保存病毒核酸，便于病毒核酸的提取。
④本发明的采样方法的取样范围包括全部鼻腔部、咽部和口部，相对于目前主流的咽拭子和鼻拭子取样，取样范围更大，有利于提高采样的病毒含量，进而提高核酸检出率。
⑤本发明的取样方法简单，不同于如鼻拭子和咽拭子取样需要专业医护人员操作，患者可自主取样，一方面取样更便捷减少患者的取样不适感，另一方面避免医护人员的操作，从而降低医护人员感染风险。
附图说明
图1为本发明实施例5中采用实施例2的试剂盒采样后检测核酸扩增曲线。
图2为本发明本发明实施例5中采用鼻拭子采样后检测核酸扩增曲线。
图3为本发明本发明实施例11中采用实施例7的试剂盒采样后检测核酸扩增曲线。
具体实施方式
在本发明的描述中，需要说明的是，实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面结合附图和具体的实施例对本发明做进一步详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。
实施例1
本实施例提供一种呼吸道病毒核酸检测用采样试剂盒，包括鼻喷剂和样本保存液一，所述鼻喷剂按照重量百分数的组成包括：0.9％的氯化钠，0.5％的丙酮酸钠，0.01％的丙酮酸，0.1％的吐温80，0.01％的单硬脂酸甘油酯，余量为无菌水；所述样本保存液一按照重量百分数的组成包括：0.12％的葡萄糖，0.02％的氯化钙，0.05％的氯化钾，0.01％的磷酸氢二钠，0.015％的异亮氨酸，0.01％的亮氨酸，0.015％的盐酸赖氨酸，余量为无菌生理盐水。
实施例2
本实施例提供一种呼吸道病毒核酸检测用采样试剂盒，包括鼻喷剂和样本保存液一，所述鼻喷剂按照重量百分数的组成包括：3％的氯化钠，0.1％的丙酮酸钠，0.1％的丙酮酸，0.01％的吐温80，0.1％的单硬脂酸甘油酯，余量为无菌水；所述样本保存液一按照重量百分数的组成包括：0.08％的葡萄糖，0.03％的氯化钙，0.03％的氯化钾，0.015％的磷酸氢二钠，0.01％的异亮氨酸，0.015％的亮氨酸，0.01％的盐酸赖氨酸，余量为无菌生理盐水。
实施例3
本实施例提供一种呼吸道病毒核酸检测用采样试剂盒，包括鼻喷剂和样本保存液一，所述鼻喷剂按照重量百分数的组成包括：1.2％的氯化钠，0.3％的丙酮酸钠，0.05％的丙酮酸，0.05％的吐温80，0.05％的单硬脂酸甘油酯，余量为无菌水；所述样本保存液一按照重量百分数的组成包括：0.10％的葡萄糖，0.03％的氯化钙，0.04％的氯化钾，0.012％的磷酸氢二钠，0.013％的异亮氨酸，0.012％的亮氨酸，0.012％的盐酸赖氨酸，余量为无菌生理盐水。
实施例4
本实施例共选取30名上呼吸道病毒感染患者，随机分为两组，每组15人，分别进行咽拭子及实施例1的采样试剂盒进行采样并检测RSV病毒载量，具体采样及检测过程如下：
1.咽拭子采样方法：取市售的咽拭子棉签，专业采样人员左手持压舌板压住舌根，右手持咽拭子棉签尾部，将棉签深入到患者咽、腭弓、扁桃***置，用棉签部位轻轻刮擦7-8次，迅速将棉签深入到配套的保存管中保存。
2.采用实施例1的试剂盒的采样方法：将鼻喷剂装入喷瓶中上下颠倒摇匀，打开喷盖，握住瓶身，喷头伸入一侧鼻孔，连续按压3～5次，直至感到有液体流入口咽部为止，喷时鼻腔同时吸气将液体吸入口中。吸鼻数次，将分泌物吸入口腔后，打开装载样本保存液一的样品瓶瓶盖，将口中分泌物吐入瓶内。拧紧瓶盖置于37℃、CO2浓度为5％的培养箱中培养24h。在生物安全柜内将样本用100uM滤网过滤，收集滤液，滤渣用大约两倍样品体积无菌生理盐水冲洗，合并清洗液与滤液。15000rpm离心取沉淀备用。
3.按照天根(北京)核酸提取试剂盒说明书的要求进行核酸提取：a在步骤1和2获得的样本中加入等体积浓度为1ug/ul的Carrier RNA溶液，涡旋震荡15s使之充分反应。b在57℃孵育15min后加入等样本体积无水乙醇，涡旋震荡15s使之混匀。c将沉淀物和溶液全部转移至RNase-Free吸附柱CR2，8000rpm离心60s，弃去废液。d加入样本2倍样本体积缓冲液GD，8000rpm离心60s，弃去废液，继续加入2.5倍样本体积的漂洗液PW，静置2min后8000rpm离心60s，弃去废液，并重复缓冲液清洗步骤一次。继续加入2倍样本体积无水乙醇，8000rpm离心60s，弃去废液。e吸附柱放在收集管中12000rpm离心60s使吸附膜完全变干，弃去废液。f将吸附柱放入一个RNase-Free离心管(1.5ml)中，小心打开吸附柱的盖子，室温放置3min，使吸附膜完全变干。向吸附膜的中间部位悬空滴加20-150ul RNase-Free dH2O，盖上盖子，室温放置5min。12,000rpm离心1min。
4.按照天根(北京)试剂盒说明书的要求进行逆转录：a将模板RNA在冰上解冻，5xFastKing-RT SuperMix和RNase-Free ddH2O在室温解冻，解冻后迅速置于冰上。b逆转录反应体系为：5XFastKing-RT SuperMix(4ul)，TotalRNA(50ng-2ng)，RNase-Free ddH2O补足到20ul。去除基因组及逆转录反应：42℃、15min；酶灭活：95℃，3min。
5.按照天根(北京)荧光定量检测试剂盒进行核酸扩增和检测：a将2xTalent qPCRPreMix，ROX Reference Dye，模板，引物和RNase-Free ddH2O在室温解冻并彻底混匀。b配制Real-time PCR反应液：2xTalent qPCR PreMix(10ul)，10uM正向引物(TTGCTCATGCAAAGCACACC)0.6ul，10uM反向引物(GCGATTGCAGATCCAACACC)0.6ul，RNase-Free ddH2O加至20ul。c反应程序设置：预变性：1循环，温度95℃，时间3min；变性：40循环，温度95℃，时间5s；退火/延伸：40循环，温度60℃。c将反应体系置于荧光定量PCR仪中，开始反应。记录数据如表1所示，设置cut off值为34。从下表记录的数据可以看出，采用实施例1的采样试剂盒及相关采样方法采样后阳性检出率远高于咽拭子采样。
表1采用实施例1的试剂盒与咽拭子采样后核酸检测结果对比
实施例5
本实施例共选取30名上呼吸道病毒感染患者，随机分为两组，每组15人，分别进行鼻拭子及实施例2的采样试剂盒进行采样并检测RSV病毒载量，具体采样及检测过程如下：
1.鼻拭子采样方法：取市售的鼻拭子棉签，由专业的取样人员左手扶住患者后脑勺，使患者头部保持略微上仰的姿势，右手将棉签从鼻孔缓缓伸入，待棉签接触到上鼻甲位置时停止，转动棉签使之刮擦上鼻甲粘膜5-6次后拔出，将棉签放置在配套的采样管中备用。
2.采用实施例2的试剂盒的采样方法：采样过程同实施例4。样本处理与PCR步骤与实施例4中相同，检测后记录数据如表2所示。从表中数据可以看出，采用实施例2的试剂盒及相关采样方法，RSV检出率要远高于鼻拭子采样方法。图1和图2分别提供了实施例2的试剂盒和鼻拭子采样后检测核酸扩增曲线。
表2采用实施例2的试剂盒与鼻拭子采样后核酸检测结果对比
实施例6
本实施例提供一种呼吸道病毒核酸检测用采样试剂盒，包括鼻喷剂和样本保存液二，所述鼻喷剂按照重量百分数的组成包括：0.9％的氯化钠，0.5％的丙酮酸钠，0.01％的丙酮酸，0.1％的吐温80，0.01％的单硬脂酸甘油酯，余量为无菌水；所述样本保存液二的组分包括乙醇、异硫氰酸胍、DTT、乙二胺四乙酸、糖原和无菌水；并且在所述样本保存液二中乙醇的体积分数为50％，异硫氰酸胍的浓度为2M，DTT的浓度为1mM，乙二胺四乙酸的浓度为10mM，糖原的浓度为10μg/ml。
实施例7
本实施例提供一种呼吸道病毒核酸检测用采样试剂盒，包括鼻喷剂和样本保存液二，所述鼻喷剂按照重量百分数的组成包括：3％的氯化钠，0.1％的丙酮酸钠，0.1％的丙酮酸，0.01％的吐温80，0.1％的单硬脂酸甘油酯，余量为无菌水；所述样本保存液二的组分包括乙醇、异硫氰酸胍、DTT、乙二胺四乙酸、糖原和无菌水；并且在所述样本保存液二中乙醇的体积分数为80％，异硫氰酸胍的浓度为0.2M，DTT的浓度为10mM，乙二胺四乙酸的浓度为1mM，糖原的浓度为100μg/ml。
实施例8
本实施例提供一种呼吸道病毒核酸检测用采样试剂盒，包括鼻喷剂和样本保存液二，所述鼻喷剂按照重量百分数的组成包括：2％的氯化钠，0.4％的丙酮酸钠，0.06％的丙酮酸，0.04％的吐温80，0.07％的单硬脂酸甘油酯，余量为无菌水；所述样本保存液二的组分包括乙醇、异硫氰酸胍、DTT、乙二胺四乙酸、糖原和无菌水；并且在所述样本保存液二中乙醇的体积分数为65％，异硫氰酸胍的浓度为1.0M，DTT的浓度为5mM，乙二胺四乙酸的浓度为4mM，糖原的浓度为40μg/ml。
实施例9
本实施例提供一种呼吸道病毒核酸检测用采样试剂盒，包括鼻喷剂和样本保存液二，所述鼻喷剂按照重量百分数的组成包括：1.5％的氯化钠，0.2％的丙酮酸钠，0.08％的丙酮酸，0.06％的吐温80，0.03％的单硬脂酸甘油酯，余量为无菌水；所述样本保存液二的组分包括乙醇、异硫氰酸胍、DTT、乙二胺四乙酸、糖原和无菌水；并且在所述样本保存液二中乙醇的体积分数为70％，异硫氰酸胍的浓度为0.5M，DTT的浓度为3mM，乙二胺四乙酸的浓度为7mM，糖原的浓度为65μg/ml。
实施例10
本实施例共选取30名上呼吸道病毒感染患者，随机分为两组，每组15人，分别进行咽拭子及实施例6列出的采样试剂盒进行采样并检测RSV病毒载量，具体采样及检测过程如下：
1.咽拭子采样方法：取市售的咽拭子棉签，专业的采样人员左手持压舌板压住舌根，右手持咽拭子棉签尾部，将棉签深入到患者咽、腭弓、扁桃***置，用棉签部位轻轻刮擦7-8次，迅速将棉签深入到配套的保存管中保存。
2.采用实施例6的试剂盒的采样方法：将鼻喷剂装入喷瓶中上下颠倒摇匀，打开喷盖，握住瓶身，喷头伸入一侧鼻孔，连续按压3～5次，直至感到有液体流入口咽部为止，喷时鼻腔同时吸气将液体吸入口中。吸鼻数次，将分泌物吸入口腔后，打开装载样本保存液一的样品瓶瓶盖，将口中分泌物吐入瓶内，拧紧瓶盖。在生物安全柜内将样本用100uM滤网过滤，收集滤液，滤渣用大约两倍样品体积无菌生理盐水冲洗，合并清洗液与滤液。15000rpm离心取沉淀备用。
3.按照天根(北京)核酸提取试剂盒说明书的要求进行核酸提取：a在步骤1和2获得的样本中加入等体积浓度为1ug/ul的Carrier RNA溶液，涡旋震荡15s使之充分反应。b在57℃孵育15min后加入等样本体积无水乙醇，涡旋震荡15s使之混匀。c将沉淀物和溶液全部转移至RNase-Free吸附柱CR2，8000rpm离心60s，弃去废液。d加入样本2倍样本体积缓冲液GD，8000rpm离心60s，弃去废液，继续加入2.5倍样本体积的漂洗液PW，静置2min后8000rpm离心60s，弃去废液，并重复缓冲液清洗步骤一次。继续加入2倍样本体积无水乙醇，8000rpm离心60s，弃去废液。e吸附柱放在收集管中12000rpm离心60s使吸附膜完全变干，弃去废液。f将吸附柱放入一个RNase-Free离心管(1.5ml)中，小心打开吸附柱的盖子，室温放置3min，使吸附膜完全变干。向吸附膜的中间部位悬空滴加20-150ul RNase-Free dH2O，盖上盖子，室温放置5min。12,000rpm离心1min。
4.按照天根(北京)试剂盒说明书的要求进行逆转录：a将模板RNA在冰上解冻，5xFastKing-RT SuperMix和RNase-Free ddH2O在室温解冻，解冻后迅速置于冰上。b逆转录反应体系为：5XFastKing-RT SuperMix(4ul)，TotalRNA(50ng-2ng)，RNase-Free ddH2O补足到20ul。去除基因组及逆转录反应：42℃、15min；酶灭活：95℃，3min。
5.按照天根(北京)荧光定量检测试剂盒进行核酸扩增和检测：a将2xTalent qPCRPreMix，ROX Reference Dye，模板，引物和RNase-Free ddH2O在室温解冻并彻底混匀。b配制Real-time PCR反应液：2xTalent qPCR PreMix(10ul)，10uM正向引物(TTGCTCATGCAAAGCACACC)0.6ul，10uM反向引物(GCGATTGCAGATCCAACACC)0.6ul，RNase-Free ddH2O加至20ul。c反应程序设置：预变性：1循环，温度95℃，时间3min；变性：40循环，温度95℃，时间5s；退火/延伸：40循环，温度60℃。d将反应体系置于荧光定量PCR仪中，开始反应。设置cut off值为34，记录数据结果如表3所示。由表3的结果可以看出，采用实施例6的试剂盒及相关采样方法，核酸检出阳性率要高于传统咽拭子采样方法。
表3采用实施例6的试剂盒与咽拭子采样后核酸检测结果对比
实施例11
本实施例共选取30名上呼吸道病毒感染患者，随机分为两组，每组15人，分别进行鼻拭子及实施例7的采样试剂盒进行采样并检测RSV病毒载量，具体采样及检测过程如下：
1.鼻拭子采样方法：取市售的鼻拭子棉签，由专业的取样人员左手扶住患者后脑勺，使患者头部保持略微上仰的姿势，右手将棉签从鼻孔缓缓伸入，待棉签接触到上鼻甲位置时停止，转动棉签使之刮擦上鼻甲粘膜5-6次后拔出，将棉签放置在配套的采样管中备用。
2.采用实施例7的试剂盒的采样方法：采样过程同实施例10。样本处理与PCR步骤与实施例10中相同，设置cut off值为34，记录数据结果如表4所示。表4数据显示，采用实施例7的试剂盒及相关采样方法，核酸阳性检出率远高于传统鼻拭子采样法。图3提供了实施例7的试剂盒采样后检测核酸扩增曲线。
表4采用实施例7的试剂盒与鼻拭子采样后核酸检测结果对比
对比例1
本对比例的采样试剂盒与实施例1的区别在于：鼻喷剂中未加吐温80，其他同实施例1。然后依照实施例4的采样及检测方法对15名呼吸道感染患者进行采样，采样后进行核酸检测，结果如表5所示。
表5采用对比例1的试剂盒采样后核酸检测结果
通过表5的数据，可以看出来对比例1所用的采样配方采样后核酸检出阳性率明显低于实施例1。
对比例2
本对比例的采样试剂盒与实施例2的区别在于：样本保存液一中未加入葡萄糖，其他同实施例2。然后依照实施例5的采样及检测方法对15名呼吸道感染患者进行采样，采样后进行核酸检测，结果如表6所示。可以看出来对比例2所用的采样配方采样后核酸检出阳性率是低于实施例2的。
表6采用对比例2的试剂盒采样后核酸检测结果
通过表6的数据，可以看出来对比例2所用的采样配方采样后核酸检出阳性率明显低于实施例2。
对比例3
本对比例的采样试剂盒与实施例6的区别在于：鼻喷剂中未加吐温80，其他同实施例6。然后依照实施例10的采样及检测方法对15名呼吸道感染患者进行采样，采样后进行核酸检测，结果如表7所示。
表7采用对比例1的试剂盒采样后核酸检测结果
通过表7的数据，可以看出来对比例3所用的采样配方采样后核酸检出阳性率低于实施例6。
对比例4
本对比例的采样试剂盒与实施例7的区别在于：样本保存液二中未加入异硫氰酸胍，其他同实施例7。选用6个RSV病毒样本，分别用实施例7与对比例4的样本保存液保存，在0h，24h，48h，72h检测，三个重复保证数据准确，稳定性考察结果如表8所示。
表8对比例4与实施例7的样本保存液保存RSV核酸样本稳定性对比结果
从表8的数据可以看出，实施例7的保存液保存RSV病毒核酸时，RSV病毒核酸在72h内基本保持稳定，保存效果明显优于对比例4的样本保存液保存效果。
对比例5
本对比例取市售的友康牌病毒采样套装中的样本保存液，与本采样套装的实施例7中的样本保存液保存效果做对比。选用6个RSV病毒样本，分别用实施例7与对比例5的样本保存液保存，在0h，24h，48h，72h检测，三个重复保证数据准确，稳定性考察结果如表9所示。
表9对比例5与实施例7的样本保存液保存RSV核酸样本稳定性对比结果
从表9的数据可以看出，实施例7的保存液保存RSV病毒核酸时，RSV病毒核酸在72h内基本保持稳定，保存效果明显优于对比例5的样本保存液保存效果。
综上，本发明的采样方法的取样范围包括全部鼻腔部、咽部和口部，相对于目前主流的咽拭子和鼻拭子取样，取样范围更大，有利于提高采样的病毒含量，进而提高核酸检出率。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。