阅读说明：本技术 食品中胭脂虫红含量的高效液相色谱检测方法 (High performance liquid chromatography detection method for content of cochineal in food ) 是由 谢亚楠 李悦 俞涵 鲁瑶 尹亮 朱敬华 郭兴旺 于 2019-12-23 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种食品中胭脂虫红含量的高效液相色谱检测方法,其特征在于：该方法包括如下步骤：1)标准工作液的配制；2)样品工作液的配制：3)高效液相色谱法检测分析。本发明设计科学合理,能够对食品中的胭脂虫红含量进行准确的分析检测,使得分析前处理过程更简单快捷,成分检测分析更快速准确,节省时间,且检测灵敏度较高,检测数据准确,适用范围广,节约成本,提高检测效率。(The invention relates to a high performance liquid chromatography detection method for cochineal content in food, which is characterized by comprising the following steps: the method comprises the following steps: 1) preparing a standard working solution; 2) preparing a sample working solution: 3) and (4) detecting and analyzing by using a high performance liquid chromatography. The method is scientific and reasonable in design, can be used for accurately analyzing and detecting the content of the cochineal in the food, so that the pretreatment process of analysis is simpler and quicker, the component detection and analysis are quicker and more accurate, the time is saved, the detection sensitivity is higher, the detection data is accurate, the application range is wide, the cost is saved, and the detection efficiency is improved.)

食品中胭脂虫红含量的高效液相色谱检测方法

技术领域

本发明属于食品添加剂检测领域，涉及一种食品中胭脂虫红含量的高效液相色谱检测方法。

背景技术

胭脂虫红是生长在仙人掌上的胭脂虫体内提取的，其是一种蒽醌类天然色素，与其他天然色素不同，其理化性质非常稳定，被视作最安全的天然色素而用于食品、化妆品、药品及纺织品等生产。目前我国已允许其作为食品添加剂生产。由于胭脂虫红是一种天然色素，且颜色自然鲜艳，对比合成色素具有很大优势，目前一些大的食品厂商已开始用其替代合成色素。胭脂虫红作为一种天然色素添加剂，可用于饮料、肉类食品、糖果、开胃酒、苹果醋、酸牛奶、焙烤食品、果酱、果冻等，已被列入GB2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中，但没有规定其质量标准和检验方法。目前我国尚没有胭脂虫红的检测方法标准，但胭脂虫红超范围使用、超限量添加现象却存在。为了确保果汁饮料的质量安全，有必要尽快研究制定饮料中胭脂虫红检测方法。为此，建立高效液相色谱(HPLC)法快速测定果汁饮料中胭脂虫红含量的检测方法，对于果汁饮料质量安全有着重要的监督意义。

通过对公开专利文献的检索，并未发现对食品中胭脂虫红含量的高效液相色谱检验检测方法的公开专利文献，也未发现与本专利申请相同的公开专利文献。

发明内容

本发明的目的在于针对当前市场中需求日益增大的天然可食用色素-胭脂虫红，针对添加了胭脂虫红的不同种类的食品，克服现有技术的不足，提供一种检测操作简单、检测精度高、重复性好、检测准确高效的食品中胭脂虫红含量的高效液相色谱检验检测方法。

本发明解决其技术问题是通过以下技术方案实现的：

一种食品中胭脂虫红含量的高效液相色谱检验检测方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

1)标准工作液的配制：

称取适量胭脂红酸标准品，用甲醇溶解，转移至容量瓶并定容，配制成适当浓度的胭脂红酸标准工作液，备用；

2)样品工作液的配制：

准确称取0.3g～0.5g试样于50mL离心管中，加入10mL浓度为2mol/L的HCl提取液，涡旋，75℃超声30min，冷却至室温，加入15mL甲醇，振荡，冷却至室温，8000rpm离心3min，取上清液于45℃减压蒸至约7mL，过固相萃取小柱，收集流出液于45℃水浴下减压蒸至近干，用1mL流动相复溶，过膜后供HPLC分析；

3)高效液相色谱检测分析：

将标准工作液与样品工作液分别注入到高效液相色谱仪中，进行色谱分析，以标准工作液的峰面积与样品工作液峰面积进行定量比较，保留时间定性，外标法进行定量计算，计算样品中胭脂虫红的含量。

而且，所述步骤3)中胭脂虫红的含量采用如下公式进行计算：

X_i＝(C×V×1000)/(m×1000)

其中：Xi为样品中待测物质中胭脂虫红含量，单位为mg/kg；

C为测定液中待测物质浓度，单位为μg/mL；

V为复溶体积，单位为mL；

m为取样量，单位为g；

1000-单位换算系数。

而且，所述的液相色谱条件为：

色谱柱：RP-C₁₈ 5μm 150mm×4.6mm；

流动相：A为0.1％甲酸溶液，B为乙腈，采用等梯度洗脱；

流速：0.4～1.5mL/min；

柱温：25～40℃；

进样量：2～20μL。

而且，所述液相色谱中，流动相的比例为A：B＝15：85。

本发明的优点和有益效果为：

1、本发明的食品中胭脂虫红含量的高效液相色谱检验检测方法，区别于目前市场上大部分胭脂虫红的检测方法，采用高效液相色谱法的分析方法能够更有针对性，更快速有效地对食品中胭脂虫红含量进行准确的分析检测，使得成分检测分析更快速，节省时间。

2、本发明的食品中胭脂虫红含量的高效液相色谱检验检测方法，获得的胭脂虫红的峰形和分离度都很好，且线性很好，可以有效和基质中其他杂质获得有效分离，避免其他物质的干扰，缩短了检测时间，检测提取更为精确。

3、本发明的食品中胭脂虫红含量的高效液相色谱检验检测方法，前处理方法过程简单，提取效率高，净化效果好，检测精度高，检测灵敏，检测时间较短，检测效率高。

附图说明

图1为本发明标准工作液及样品工作液的高效液相色谱图。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。

一种食品中胭脂虫红含量的高效液相色谱检验检测方法，其创新之处在于：该方法包括如下步骤：

1)标准工作液的配制：

称取适量胭脂红酸标准品，用甲醇溶解，转移至容量瓶并定容，配制成适当浓度的胭脂红酸标准工作液，备用；

2)样品工作液的配制：

准确称取0.3g～0.5g试样于50mL离心管中，加入10mL浓度为2mol/L的HCl提取液，涡旋，75℃超声30min，冷却至室温，加入15mL甲醇，振荡，冷却至室温，8000rpm离心3min，取上清液于45℃减压蒸至约7mL，过固相萃取小柱，收集流出液于45℃水浴下减压蒸至近干，用1mL流动相复溶，过膜后供HPLC分析；

3)高效液相色谱检测分析：

将标准工作液与样品工作液分别注入到高效液相色谱仪中，进行色谱分析，以标准工作液的峰面积与样品工作液峰面积进行定量比较，保留时间定性，外标法进行定量计算，计算样品中胭脂虫红的含量。

步骤3)中胭脂虫红的含量采用如下公式进行计算：

X_i＝(C×V×1000)/(m×1000)

其中：Xi-样品中待测物质中胭脂虫红含量，单位为mg/kg；

C-测定液中待测物质浓度，单位为μg/mL；

V-复溶体积，单位为mL；

m-取样量，单位为g；

1000-单位换算系数。

液相色谱条件为：

色谱柱：RP-C18 5μm 150mm×4.6mm；

流动相：A为0.1％甲酸溶液，B为乙腈，采用等梯度洗脱，流动相的比例为A：B＝15：85；

流速：0.4～1.5mL/min；

柱温：25～40℃；

进样量：2～20μL。

尽管为说明目的公开了本发明的实施例和附图，但是本领域的技术人员可以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例和附图所公开的内容。