一种区分甲基***与n-异丙基苄胺的方法

文档序号：1489605 发布日期：2020-02-28 浏览：5次 >En<

阅读说明：本技术 一种区分甲基***与n-异丙基苄胺的方法 (Method for distinguishing methamphetamine from N-isopropylamine ) 是由罗奇志戴开金马安德罗阳旭杜娟于 2019-10-18 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种区分甲基苯丙胺与N-异丙基苄胺的方法,该方法特异性强、分离度高、精密度、稳定性、重现性好,回收率高、结果准确,可同时对这两种化合物进行定性定量分析,在涉及冰毒定性定量的实际案例分析中,能有效区分甲基苯丙胺及其同分异构体N-异丙基苄胺,对于案件性质的判定和量刑具有重要意义。(The invention discloses a method for distinguishing methamphetamine from N-isopropylamine, which has the advantages of strong specificity, high separation degree, high precision, stability, good reproducibility, high recovery rate and accurate result, can simultaneously carry out qualitative and quantitative analysis on the two compounds, can effectively distinguish the methamphetamine and the isomer N-isopropylamine thereof in the actual case analysis related to the qualitative and quantitative analysis of ice toxicity, and has important significance for judging and controlling case properties.)

一种区分甲基***与N-异丙基苄胺的方法

技术领域

本发明涉及一种区分甲基***与N-异丙基苄胺的方法，具体涉及一种甲基***和N-异丙基苄胺高效液相色谱串联质谱分析方法。

背景技术

甲基***(metianphetamine，MA)属国家严格管制的第一类***，具有中枢神经兴奋作用，有很强的成瘾性，分子式为C₁₀H₁₅N，分子量为149.23，常温下为无色油状液体，其盐酸盐为白色结晶或白色粉末，纯度不高时外观呈大块结晶状，与冰的形态相似，因此俗称为“***”，是目前毒品犯罪中最常查获的品种。N-异丙基苄胺(N-Isopropylbenzylamine，N-IBA)是甲基***的同分异构体，结构式如下：

常温下是一种无色或浅黄色透明液体，物理性质与甲基***非常接近，是工业中常用的有机碱和有机合成原料，主要用于有机中间体、防锈剂或药物前体。二者的盐酸盐外观非常相似，所以近几年N-异丙基苄胺盐酸盐常被用于“***”的掺假造假，俗称“假***”或稀释剂。目前研究未发现N-异丙基苄胺具有兴奋作用，不具成瘾性，因此不属于国家管制品种。根据《中华人民共和国刑法》及《最高人民法院关于审理毒品犯罪案件适用法律若干问题的解释》(2016.4.11日起实施)，在毒品犯罪案件中，毒品数量的多少与量刑有直接关系，而甲基***与N-异丙基苄胺一个为管制毒品，一个为非管制的化工原料，但在检测时又极易混淆，造成假阳性及增加样品含量，因此明确区分二者并进行定量分析，对于案件性质的判定及量刑具有重要意义。

从目前研究来看，红外光谱技术及***检测试纸等方法很难将甲基***和N-异丙基苄胺进行区分；气相色谱质谱法在较高浓度时，能对二者进行有效区分，但当样品基质复杂时，常存在较多干扰，使二者难以鉴别，此外在低浓度时，也很难进行鉴别；高效液相色谱法能有效分离甲基***和N-异丙基苄胺，但由于其定性能力不强，因此在法庭科学中作为证据图谱有所欠缺；高效液相色谱串联质谱法是法庭科学公认的定性定量分析手段，采用该法对甲基***和N-异丙基苄胺进行分离分析的报道较为少见。

发明内容

本发明的目的在于提供一种甲基***和N-异丙基苄胺高效液相色谱串联质谱分析方法，能对二者同时进行定性定量分析。

本发明所采取的技术方案是：

一种区分甲基***与N-异丙基苄胺的方法，所述方法包括如下步骤：

1)配制供试样品溶液；

2)将所述供试样品溶液注入高效液相色谱串联质谱仪进行测定，选定特征离子对和特征碎片离子，比较供试样品和标准样品色谱峰的保留时间、特征离子对、特征离子对丰度比和特征离子碎片进行定性，以峰面积外标法定量；

其中，液相色谱条件为：

色谱柱采用以十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱；

流动相由流动相A和流动相B组成；

采用含甲酸的乙酸铵水溶液或含甲酸的甲酸铵水溶液作为所述流动相A；

采用乙腈或甲醇作为所述流动相B；

洗脱方式为等度洗脱或梯度洗脱。

进一步地，填料粒径为1.7～5μm。

进一步地，所述填料粒径为1.7μm。

进一步地，流动相A采用含0.1％甲酸的5～20mmol/L乙酸铵水溶液或含0.1％甲酸的5～20mmol/L甲酸铵水溶液。

进一步地，洗脱方式为等度洗脱，流动相A和流动相B的体积比为20/80或30/70。

进一步地，流速为0.2～0.6mL/min，柱温30～45℃。

进一步地，所述质谱检测所采用的质谱条件为：

电喷雾正离子方式(ESI+)；

检测方式：多反应监测模式检测(MRM)；

特征离子对：甲基***以m/z150.1>119.1，m/z150.1>91.1两对离子作为特征离子对，

N-异丙基苄胺以m/z150.1>91.1，150.1>58.1两对离子作为特征离子对；

特征离子碎片：甲基***特征碎片离子为119.1、91.1及58.1，N-异丙基苄胺特征碎片离子为91.1及58.1；

气帘气(CurtainGas，CUR)15Psi；碰撞气(CollisionGas)Medium；喷雾电压(IonSprayVoltage，IS)5500V；雾化温度(Temperature，TEM)600℃；雾化气(IonSourceGas1)55Psi；辅助气(IonSourceGas2)65Psi；

MRM模式离子对参数：

。

进一步地，供试样品溶液的配制方法为：取供试样品，采用甲醇为溶剂超声溶解，过滤即得。

本发明的有益效果是：

本发明提供了一种区分甲基***与N-异丙基苄胺的方法，该方法特异性强、分离度高、精密度、稳定性、重现性好，回收率高、结果准确，可同时对这两种化合物进行定性定量分析，在涉及***定性定量的实际案例分析中，能有效区分甲基***及其同分异构体N-异丙基苄胺，对于案件性质的判定和量刑具有重要意义。

附图说明

图1为N-异丙基苄胺与甲基***HPLC-MS/MS分离图；

图2为N-异丙基苄胺结构解析图(A.一级质谱图，B.二级质谱图)；

图3为甲基***结构解析图(A.一级质谱图，B.二级质谱图)。

具体实施方式

本发明中提供了一种甲基***和N-异丙基苄胺高效液相色谱串联质谱分析方法。

发明人探索了PFP柱、C8柱及C18柱等进行分离分析。PFP柱是目前分析毒药物常用的色谱柱，但甲基***与N-异丙基苄胺在PFP柱中保留时间一致，无法有效分离，而且由于甲基***与N-异丙基苄胺有共同的m/z150.1>91.1、m/z150.1>57.3离子对，在进行液质联用分析时，无法对二者进行分辨，非常容易误判；试验过程中发现C8柱和C18柱能对二者进行有效分离，但C18柱的分离效果更优。

对比5μm、3.5μm、2.7μm及1.7μm粒径填料的C18柱，结果证明使用1.7μm及2.7μm粒径填料的色谱柱时，分离效果及检测灵敏度更佳。

流动相优化了甲醇/水、乙腈/水、甲醇/缓冲液、乙腈/缓冲液等体系，其中缓冲液体系试验了甲酸铵-甲酸及乙酸铵-甲酸体系，浓度分别为5mmol/L、10mmol/L、20mmol/L，最后确定采用含0.1％甲酸的20mmol/L乙酸铵水溶液/乙腈体系，体积比20/80等度洗脱，或梯度洗脱，具有最佳分离效果和检测灵敏度。

下面进一步列举实施例以详细说明本发明。同样应理解，以下实施例只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域技术人员根据本发明阐述的原理做出的一些非本质的改进和调整均属于本发明的保护范围。下述示例具体的工艺参数等也仅是合适范围中的一个示例，即本领域技术人员可以通过本文的说明做合适范围内的选择，而并非要限定于下文示例的具体数据。

实施例1

仪器

ABSCIEX公司4000QTRAPLC/MS/MSSystem质谱仪，配有ESI&Turbspray离子源以及Analyze1.5.2数据处理系统；岛津公司CBM-20A高效液相色谱。

试剂

甲醇：色谱纯级；去离子水；乙酸铵色谱纯级>99.9％(AladdinIndustrialCorporation,ShanghaiChina)；甲酸色谱纯级(天津市科密欧化学试剂有限公司)；甲醇色谱纯级(MerckKGaA,64271Darmstadt,Germany,USA)；乙腈色谱纯级(MerckKGaA,64271Darmstadt,Germany)；甲基***(CerilliantSIGMA-ALDRICHCompany)；N-异丙基苄胺标准品(安耐吉化学，纯度＞98％)；供试样品来自于多个贩毒案件。

液相色谱质谱联用条件

HPLC条件：色谱柱：AgilentPoroshell120SB-C18(4.6×100mm,2.7μm)，配IdecHealthandSciencePrecolumnFilter(2um)预柱；流动相：含0.1％甲酸的20mmol乙酸铵水溶液/乙腈(20/80，v/v)；流速为0.4mL/min，柱温40℃。

MS条件：电喷雾正离子方式(ESI⁺)；气帘气(CurtainGas，CUR)15Psi；碰撞气(CollisionGas)Medium；喷雾电压(IonSprayVoltage，IS)5500V；雾化温度(Temperature，TEM)600℃；雾化气(IonSourceGas1)55Psi；辅助气(IonSourceGas2)65Psi。具体见表1。

表1 MRM模式离子对参数

在上述分析条件下，甲基***与N-异丙基苄胺能得到有效分离，其中甲基***保留时间为5.86min，N-异丙基苄胺保留时间为4.36min，甲基***两对特征离子对丰度比为100:47.37，N-异丙基苄胺两对特征离子对丰度比为61.38:1.20。

准确称取甲基***盐酸盐标准品适量，置于棕色容量瓶，用甲醇稀释至刻度，得到甲基***储备液；准确称取N-异丙基苄胺盐酸盐标准品适量，同上操作得到N-异丙基苄胺储备液。

空白对照样品：以不含甲基***和N-异丙基苄胺的空白溶剂配制。

阳性对照样品：以含甲基***和N-异丙基苄胺的混合标准品配制，建议浓度在10.0ng/mL～500.0ng/mL之间(更低的浓度下限或更高的浓度上限均可用于本实验，但考虑到对液质联用仪的信号残留及检测图谱的辨别性，建议采用本浓度范围)。

供试样品处理方法：取供试样品适量，用适量甲醇超声溶解，配制成1mg/mL的溶液，0.45μm或0.22μm滤膜过滤，然后以10倍的稀释比例，逐级稀释成10¹～10⁶系列浓度点。

筛查试验

取10μL供试样品溶液上高效液相色谱串联质谱仪进行分析，先取最低浓度点进行测试，根据测试结果再逐步增加供试样品浓度，获得最佳的进样浓度。同时进行空白对照样品和阳性对照样品检测。若空白样品中未出现甲基***或N-异丙基苄胺的特征离子对，阳性对照样品中出现甲基***和N-异丙基苄胺的特征离子对，供试样品中未出现甲基***或N-异丙基苄胺的特征离子对，可判定供试样品中不含有这两种化合物；若供试样品中出现甲基***或(和)N-异丙基苄胺的特征离子对，则可以初步判定样品中含有甲基***或N-异丙基苄胺，或同时含有这两种化合物。

定性确认试验

筛查完成后，可进一步进行定性确认试验，具体如下：配制甲基***与N-异丙基苄胺的单标及混合标准品，采用两种化合物的标准品进样，分别对比两种化合物的标准品与供试样品中特征离子峰的保留时间、两对特征离子对以及两对特征离子对的丰度比，若供试样品中特征离子峰与标准品特征离子峰保留时间一致(RSD<2.5％)，两对特征离子对一致，两对特征离子对的丰度比符合表2的误差要求，则可确认供试样品中含有该化合物。

表2相对离子对丰度比的最大允许相对误差(％)