阅读说明：本技术 基于提取分离法测定大蓟炭化学成分的方法 (Method for determining chemical components of thistle charcoal based on extraction and separation method ) 是由 龚千锋 于欢 严丽萍 于 2019-11-12 设计创作，主要内容包括：本发明公开了基于提取分离法测定大蓟炭化学成分的方法,包括以下步骤：S1、制备浸膏：大蓟炭5kg,粉碎后70%乙醇回流提取3次,合并滤液减压浓缩,得浸膏800g；S2、浸膏分离；取浸膏800g溶解于8L蒸馏水中,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯分别萃取3次,回收溶剂后得石油醚部分87g、氯仿部分93g、乙酸乙酯部分56g、氯仿萃取部分90g；S3、洗脱合并：将浸膏分离获取成分经硅胶柱层析氯仿、甲醇梯度洗脱合并为8个部分,计为Fr1-Fr6。本发明通过大孔吸附树脂、正相硅胶柱色谱手段进行分离,通过对波谱学数据分析,确定化合物的成分,实现为大蓟和成分研究提供相关参考依据。(The invention discloses a method for determining chemical components of thistle carbon based on an extraction and separation method, which comprises the following steps: s1, preparing an extract: pulverizing 5kg of thistle charcoal, extracting with 70% ethanol under reflux for 3 times, mixing filtrates, and concentrating under reduced pressure to obtain 800g of extract; s2, separating the extract; dissolving 800g of the extract in 8L of distilled water, sequentially extracting with petroleum ether, chloroform and ethyl acetate for 3 times respectively, and recovering the solvent to obtain 87g of petroleum ether part, 93g of chloroform part, 56g of ethyl acetate part and 90g of chloroform extraction part; s3, elution and combination: separating the extract to obtain components, subjecting to silica gel column chromatography, gradient eluting with chloroform and methanol, and mixing into 8 parts, which are counted as Fr1-Fr 6. The method separates by means of macroporous adsorption resin and normal phase silica gel column chromatography, and determines the components of the compound by analyzing the data of the spectroscopy, thereby realizing the purpose of providing relevant reference basis for the research of the components of the Japanese thistle.)

基于提取分离法测定大蓟炭化学成分的方法

技术领域

本发明涉及大蓟技术领域，具体来说，涉及基于提取分离法测定大蓟炭化学成分的方法。

背景技术

大蓟为菊科植物蓟干燥地上部分或根，性凉，味甘、微苦，归心、肝两经，具有凉血止血、祛瘀消痈的功能，主治各种血证、带下、妇女崩漏、疮疡肿痛、瘰疬、湿疹、肝炎、肾炎疔疮等疾病，是中医临床的主要止血药物之一，使用历史悠久，疗效确切。大蓟饮片有大蓟和大蓟炭两个品种，目前止血多以炒炭为主。大蓟经炒炭后其药性、功用和外型等都发生了很大的变化，这种变化必然与其内在物质基础的变化有关。

目前从大蓟中分离得到的化合物主要有长链炔烯醇类化合物、三萜、甾体、黄酮和黄酮苷等。而对大蓟炭的化学成分的研究未见报道，因而，一定程度上制约了大蓟的生产与应用。

针对相关技术中的问题，目前尚未提出有效的解决方案。

发明内容

针对相关技术中的问题，本发明提出基于提取分离法测定大蓟炭化学成分的方法，以克服现有相关技术所存在的上述技术问题。

本发明的技术方案是这样实现的：

基于提取分离法测定大蓟炭化学成分的方法，包括以下步骤：

S1、制备浸膏：大蓟炭5kg，粉碎后70%乙醇回流提取3次，合并滤液减压浓缩，得浸膏800g；

S2、浸膏分离；取浸膏800g溶解于8L蒸馏水中，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯分别萃取3次，回收溶剂后得石油醚部分87g、氯仿部分93g、乙酸乙酯部分56g、氯仿萃取部分90g；

S3、洗脱合并：将浸膏分离获取成分经硅胶柱层析氯仿、甲醇梯度洗脱合并为8个部分，计为Fr1-Fr6；

S4、分离：分别取Fr1（5g）柱层析分离纯化得到化合物1（780mg）、取Fr2（2g）柱层析分离纯化得到化合物3（200mg）、取Fr3（6g）经硅胶柱层析分离，环己烷-丙酮梯度洗脱，丙酮重结晶纯化得到化合物7（110mg）、取Fr4（3.6g）柱层析分离纯化得到化合物5（30mg）和化合物8（7mg）、取乙酸乙酯部分50g溶于500ml蒸馏水中后，上于D101大孔树脂，以不同含量的乙醇进行梯度洗脱，30%乙醇洗脱部分18.9g柱层析分离后，上ODS柱甲醇水梯度洗脱得到化合物2（30mg）和4（23mg）、取70%乙醇洗脱部分3.9g柱层析分离得到化合物6（45mg）

进一步的，化合物1为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阴性，为柳穿鱼黄素。

进一步的，化合物2为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish呈阳性，为柳穿鱼苷。

进一步的，化合物3为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阴性，为刺槐素。

进一步的，化合物4为淡黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阳性，为刺槐苷。

进一步的，化合物5为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阴性，为香叶木素。

进一步的，化合物6为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阴性，为槲皮素。

进一步的，化合物7为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阴性，为三羟基-二甲氧基黄酮。

进一步的，化合物8为白色针晶，为邻苯二酚。

本发明的有益效果：本发明通过大孔吸附树脂、正相硅胶柱色谱手段进行分离，通过对波谱学数据分析，确定化合物的成分，实现为大蓟和成分研究提供相关参考依据。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是根据本发明实施例的基于提取分离法测定大蓟炭化学成分的方法的流程示意图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

根据本发明的实施例，提供了基于提取分离法测定大蓟炭化学成分的方法。

如图1所示，根据本发明实施例的基于提取分离法测定大蓟炭化学成分的方法，包括以下步骤：

包括以下步骤：

S1、制备浸膏：大蓟炭5kg，粉碎后70%乙醇回流提取3次，合并滤液减压浓缩，得浸膏800g；

S2、浸膏分离；取浸膏800g溶解于8L蒸馏水中，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯分别萃取3次，回收溶剂后得石油醚部分87g、氯仿部分93g、乙酸乙酯部分56g、氯仿萃取部分90g；

S3、洗脱合并：将浸膏分离获取成分经硅胶柱层析氯仿、甲醇梯度洗脱合并为8个部分，计为Fr1-Fr6；

S4、分离：分别取Fr1（5g）柱层析分离纯化得到化合物1（780mg）、取Fr2（2g）柱层析分离纯化得到化合物3（200mg）、取Fr3（6g）经硅胶柱层析分离，环己烷-丙酮梯度洗脱，丙酮重结晶纯化得到化合物7（110mg）、取Fr4（3.6g）柱层析分离纯化得到化合物5（30mg）和化合物8（7mg）、取乙酸乙酯部分50g溶于500ml蒸馏水中后，上于D101大孔树脂，以不同含量的乙醇进行梯度洗脱，30%乙醇洗脱部分18.9g柱层析分离后，上ODS柱甲醇水梯度洗脱得到化合物2（30mg）和4（23mg）、取70%乙醇洗脱部分3.9g柱层析分离得到化合物6（45mg）。

其中，化合物1为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阴性，为柳穿鱼黄素。

其中，化合物2为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish呈阳性，为柳穿鱼苷。

其中，化合物3为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阴性，为刺槐素。

其中，化合物4为淡黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阳性，为刺槐苷。

其中，化合物5为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阴性，为香叶木素。

其中，化合物6为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阴性，为槲皮素。

其中，化合物7为黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性，Molish反应呈阴性，为三羟基-二甲氧基黄酮。

其中，化合物8为白色针晶，为邻苯二酚。

综上所述，借助于本发明的上述技术方案，通过大孔吸附树脂、正相硅胶柱色谱手段进行分离，通过对波谱学数据分析，确定化合物的成分，实现为大蓟和成分研究提供相关参考依据。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。