阅读说明：本技术 3-羟基氨基苯甲酸与索拉非尼联合用药*** (3-hydroxyaminobenzoic acid and sorafenib combined medicine for treating tumor ) 是由 糜军 甘桂芳 石兆鹏 张洁莹 袁园 于 2018-06-20 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种3-羟基氨基苯甲酸与索拉非尼联合用药治疗肿瘤。具体地,本发明提供一种组合物,所述组合物包括(a)治疗有效量的第一活性成分,所述第一活性成分3-羟基氨基苯甲酸或其药学上可接受的盐；和(b)治疗有效量的第二活性成分,所述第二活性成分为激酶抑制剂类抗癌药物。本发明所述的第一活性成分和第二活性成分能够产生协同作用,增强治疗癌症的效果,降低单个药物的用药剂量,降低药物的毒性。(The invention relates to a drug combination of 3-hydroxyaminobenzoic acid and sorafenib for treating tumors. Specifically, the present invention provides a composition comprising (a) a therapeutically effective amount of a first active ingredient, 3-hydroxyaminobenzoic acid or a pharmaceutically acceptable salt thereof; and (b) a therapeutically effective amount of a second active ingredient which is a kinase inhibitor anticancer drug. The first active ingredient and the second active ingredient can generate synergistic effect, enhance the effect of treating cancer, reduce the dosage of a single medicament and reduce the toxicity of the medicament.)

3-羟基氨基苯甲酸与索拉非尼联合用药***

技术领域

本发明涉及药物领域，具体地，本发明涉及一种3-羟基氨基苯甲酸与索拉非尼联合用药***。

背景技术

癌症是一种非常复杂和致命的疾病，是发达国家和发展中国家目前正在经历的一个巨大的健康危机。到2020年，世界范围内将有1500万多个新增癌症患者，这对任何国家的社会、经济和医疗都将带来严重的影响。

癌症治疗的临床结果普遍令人失望，在很大程度上归因于这种毁灭性疾病的异质性和复杂性。传统的手术和放疗仅用于局部疾病的治疗，而激素治疗、化疗、免疫治疗和靶向治疗用于单独治疗或与别的治疗方法联用。多年来，包括化疗在内的单一和组合疗法已经发展成为有效治疗方法。当然，联合治疗的临床效果并不像预期的那样好，通常都有更高的毒性，还受限于药物成分无法以自由分子形式达到所需时空分布，也就是说，在适当的时机将药物成分运送到正确的位置。除非使用有效的药物载体，否则药物成分之间的物理化学和药代动力学性质的固有差异会阻止这种情况的发生。目前，肿瘤化疗耐药性或多药耐药性的出现已经成为肿瘤化疗研究者面临的主要挑战。为了解决这一固有的问题和让协同药物到达同一靶细胞以克服外排转运体介导的多药耐药性，越来越多的科研工作者投入这项研究中。

因此，本领域需要开发新的药物，提高抗肿瘤效果，降低副作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种联合用药，提高抗肿瘤效果，降低副作用。

本发明的第一方面，提供一种组合物，所述组合物包括：

(a)治疗有效量的第一活性成分，所述第一活性成分3-羟基氨基苯甲酸或其药学上可接受的盐；和

(b)治疗有效量的第二活性成分，所述第二活性成分为激酶抑制剂类抗癌药物。

在另一优选例中，所述的激酶抑制剂为酪氨酸激酶抑制剂。

在另一优选例中，所述的激酶抑制剂包括raf酶抑制剂。

在另一优选例中，所述的激酶抑制剂包括多靶点激酶抑制剂类抗癌药物。

在另一优选例中，第一活性成分的含量范围为0.01％至99.99％，以组合物活性成分的总重量计；较佳地0.1％至99.9％；更佳地1％至99％；较佳地10％至99％；更佳地20％至99％；更佳地30-99％，更佳地40-99％。

在另一优选例中，第二活性成分的含量范围为0.01％至99.99％，以组合物活性成分的总重量计；较佳地0.1％至99.9％；更佳地1％至99％；更佳地1％至90％；更佳地1％至80％；更佳地1-70％，更佳地1-60％。

在另一优选例中，所述3-羟基氨基苯甲酸或其药学可接受的盐与激酶抑制剂类抗癌药物的重量比为1-50：0.5-15，较佳地1-30：0.5-10，更佳地1-20：0.5-5，最佳地5-15：0.5-5。

在另一优选例中，所述的3-羟基氨基苯甲酸或其药学可接受的盐与激酶抑制剂类抗癌药物的摩尔比为1-150：1，较佳地1-100：1，更佳地1-70：1，最佳地5-50：1。

在另一优选例中，所述的激酶抑制剂类抗癌药物为索拉非尼或其药学上可接受的盐。

在另一优选例中，所述的激酶抑制剂类抗癌药物为甲苯磺酸索拉非尼。

本发明第二方面，提供一种药物组合物，所述的药物组合物包括如本发明第一方面所述的组合物；和药学上可接受的载体。

本发明第三方面，提供一种药盒，所述药盒包括：

(A)含有3-羟基氨基苯甲酸或其药学可接受的盐的第一制剂；

(B)含有激酶抑制剂类抗癌药物的第二制剂；和

(C)使用说明书。

在另一优选例中，所述的激酶抑制剂类抗癌药物为索拉非尼或其药学上可接受的盐。

在另一优选例中，所述3-羟基氨基苯甲酸或其药学可接受的盐与激酶抑制剂类抗癌药物的重量比为1-50：0.5-15，较佳地1-30：0.5-10，更佳地1-20：0.5-5，最佳地5-15：0.5-5。

在另一优选例中，所述的3-羟基氨基苯甲酸或其药学可接受的盐与激酶抑制剂类抗癌药物的摩尔比为1-150：1，较佳地1-100：1，更佳地1-70：1，最佳地5-50：1。

在另一优选例中，所述的使用说明书中注明将所述第一制剂、第二制剂进行联用，从而预防和/或治疗癌症。

在另一优选例中，所述的第一制剂、第二制剂在预防和/或治疗癌症中同时给药、分别给药或顺序给药。

在另一优选例中，所述的第一制剂和第二制剂是各自独立的。

在另一优选例中，所述的第一制剂和第二制剂是合并的。

本发明第四方面，提供一种活性成分组合，所述的活性成分组合包括以下组分：

(1)第一活性成分，所述第一活性为3-羟基氨基苯甲酸或其药学上可接受的盐；和

(2)第二活性成分，所述第二活性成分为激酶抑制剂类抗癌药物。

在另一优选例中，所述的活性成分组合中，至少有一种活性成分是独立的。

在另一优选例中，所述的激酶抑制剂类抗癌药物为索拉非尼或其药学上可接受的盐。

在另一优选例中，所述3-羟基氨基苯甲酸或其药学可接受的盐与激酶抑制剂类抗癌药物的重量比为1-50：0.5-15，较佳地1-30：0.5-10，更佳地1-20：0.5-5，最佳地5-15：0.5-5。

在另一优选例中，所述的3-羟基氨基苯甲酸或其药学可接受的盐与激酶抑制剂类抗癌药物的摩尔比为1-150：1，较佳地1-100：1，更佳地1-70：1，最佳地5-50：1。

本发明第五方面，提供一种如本发明第一方面所述的组合物，或如本发明第二方面所述的药物组合物，或如本发明第三方面所述的药盒，或如本发明第四方面所述的活性成分组合的用途，用于制备预防和/或治疗癌症的药物。

在另一优选例中，所述的癌症选自下组：肝癌、肾癌、白血病。

在另一优选例中，所述的癌症为肝癌。

本发明第六方面，提供一种体外非治疗性的抑制癌细胞生长的方法，所述的方法包括步骤：将癌细胞与如本发明第一方面所述的组合物，或本发明第二方面所述的药物组合物，或如本发明第四方面所述的活性成分组合接触，来抑制癌细胞的生长。

本发明第七方面，提供一种预防和/或治疗癌症的方法，所述的方法包括步骤：给所需的受试者如本发明第一方面所述的组合物，或如本发明第二方面所述的药物组合物，或如本发明第三方面所述的药盒，或如本发明第四方面所述的活性成分组合。

在另一优选例中，所述对象为人和非人哺乳动物。

较佳地，所述的对象为人。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附图说明

图1为3-HAA增强索拉非尼治疗肝癌的机制示意图

图2为实施例1中单用索拉非尼对肝癌细胞的抑制作用，其中IC50测定中，剂量梯度实验索拉非尼处理时间为4天(2A图)，时间梯度实验索拉非尼处理剂量为20μM(2B图)，通过CCK8检测细胞存活率。

图3为实施例2中单用3-HAA对肝癌细胞的抑制作用，其中IC50测定中，剂量梯度实验3-HAA处理时间为4天(3A图)，时间梯度实验3-HAA处理剂量为100μM(3B图)，通过CCK8检测细胞存活率。

图4为实施例3中3-HAA与索拉非尼协同抑制肝癌细胞，其中IC50测定中，索拉非尼及3-HAA处理时间为4天，通过CCK8检测细胞存活率。

图5为实施例3中3-HAA与索拉非尼协同诱导肝癌细胞凋亡，其中凋亡检测中，索拉非尼及3-HAA处理时间为1天。

图6为实施例4中3-HAA与索拉非尼协同抑制SMMC-7721移植瘤，其中图6A为移植瘤体积生长情况；图6B为各组移植瘤重量，*:P<0.05，**:P<0.01。

图7为实施例5中3-HAA与索拉非尼协同抑制PDX移植瘤，其中，7A图为PDX模型1移植瘤体积生长情况；7B图为PDX模型2移植瘤体积生长情况。

具体实施方式

本发明人经过广泛而深入地研究，意外地发现了3-羟基氨基苯甲酸或其药学上可接受的盐和激酶抑制剂类抗癌药物可协同作用于预防和/或治疗癌症。协同治疗效果明显优于二者的单独使用，同时降低单个药物的用药剂量，降低药物的毒性。在此基础上，完成了本发明。

术语

除非另有定义,否则本文中所用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属领域普通技术人员普遍理解的含义相同。

如本文所用，术语“包含”、“包括”、“含有”可互换使用，不仅包括封闭式定义，还包括半封闭、和开放式的定义。换言之，所述术语包括了“由……构成”、“基本上由……构成”。

如本文所用，术语“药学上可接受的载体”的成分是指适用于人和/或动物而无过度不良副反应(如毒性、刺激和***反应)的，即有合理的效益/风险比的物质。

如本文所用，术语“治疗有效量”，是指对人和/或动物产生功能或活性的且可被人和/或动物所接受的量。本领域的普通技术人员应该理解，所述的“治疗有效量”可随着药物组合物的形式、给药途径、所用药物的辅料、疾病的严重程度以及与其他药物联合用药等情况的不同而有所不同。

本发明所述的“预防”和“治疗”包括延缓和终止疾病的进展，或消疾病，并不需要100％抑制、消灭和逆转。在一些实施方案中，与不存在本发明所述组合物或药物组合物时观察到的水平相比，本发明所述式组合物或哎药物组合物将癌症预防，减轻、抑制和/或逆转了例如至少约10％、至少约30％、至少约50％、或至少约80％。

第一活性成分

本发明中，第一活性成分为3-羟基氨基苯甲酸或其药学上可接受的盐。3-羟基氨基苯甲酸(3-HAA)或其药学上可接受的盐为AKT和ERK通路抑制剂。，所述AKT通路抑制剂为一种通过促进DUSP6表达以及抑制PDK1活性来抑制AKT通路的抑制剂。

3-羟基氨基苯甲酸是色氨酸的代谢中间产物，分子量为153.1，分子式为C7H7NO3，结构如下：

如本文所用，“3-羟基氨基苯甲酸”，是指式3-羟基氨基苯甲酸、或其药学上可接受的盐。应理解，该术语还包括上述组分的混合物。

第二活性成分

本发明所述的第二活性成分为激酶抑制剂类抗癌药物。

在另一优选例中，所述的激酶抑制剂为酪氨酸激酶抑制剂。

在另一优选例中，所述的激酶抑制剂包括raf酶抑制剂。

在另一优选例中，所述的激酶抑制剂包括多靶点激酶抑制剂类抗癌药物。

优选地，所述激酶抑制剂类抗癌药物为索拉非尼或其药学上可接受的盐。更优选地，所述激酶抑制剂类抗癌药物为甲苯磺酸索拉非尼。

如本文所用，“索拉非尼”，是指式索拉非尼、或其药学上可接受的盐。应理解，该术语还包括上述组分的混合物。

广谱酪氨酸激酶索拉非尼，是肝癌治疗的一线化疗药，但其疗效却差强人意，临床低应答及获得性耐药是导致其治疗失败的关键因素。

在本发明中，术语“药学上可接受的盐”指本发明化合物与酸或碱所形成的适合用作药物的盐。药学上可接受的盐包括无机盐和有机盐。一类优选的盐是本发明化合物与酸形成的盐。适合形成盐的酸包括但并不限于：甲苯磺酸、盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸，苯磺酸等有机酸；以及天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸。一类优选的盐是本发明化合物与碱形成的盐，适合形成盐的碱包括但并不限于：氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸钠等无机碱，氨水、三乙胺、二乙胺等有机碱。

组合物、药盒、活性成分组合和药物组合物

本发明提供一种组合物，所述组合物包括：

(a)治疗有效量的第一活性成分，所述第一活性成分3-羟基氨基苯甲酸或其药学上可接受的盐；和

(b)治疗有效量的第二活性成分，所述第二活性成分为激酶抑制剂类抗癌药物。

在另一优选例中，第一活性成分的含量范围为0.01％至99.99％，以组合物活性成分的总重量计；较佳地0.1％至99.9％所述；更佳地1％至99％；较佳地10％至99％；更佳地20％至99％；更佳地30-99％，更佳地40-99％。

在另一优选例中，第二活性成分的含量范围为0.01％至99.99％，以组合物活性成分的总重量计；较佳地0.1％至99.9％；更佳地1％至99％；更佳地1％至90％；更佳地1％至80％；更佳地1-70％，更佳地1-60％。

在另一优选例中，其特征在于，所述3-羟基氨基苯甲酸或其药学可接受的盐与激酶抑制剂类抗癌药物的重量比为1-50：0.5-15，较佳地1-30：0.5-10，更佳地1-20：0.5-5，最佳地5-15：0.5-5。

在另一优选例中，所述的3-羟基氨基苯甲酸或其药学可接受的盐与激酶抑制剂类抗癌药物的摩尔比为1-150：1，较佳地1-100：1，更佳地1-70：1，最佳地5-50：1。

必要时，所述的组合物还可以包括药学上可接受的载体，制成药物组合物(药品)。

代表性地，所述的组合物还包括药学上可接受的载体，制成药物组合物，所述的药物组合物包括：

(a)治疗有效量的第一活性成分，所述第一活性成3-羟基氨基苯甲酸或其药学上可接受的盐；

(b)治疗有效量的第二活性成分，所述第二活性成分为激酶抑制剂类抗癌药物；和

(c)药学上可接受的载体。

本发明所述的含有第一活性成分和第二活性成分药物组合物，可以是适宜口服给药的各种剂型外，还可以是各种外用给药制剂或其它胃肠道外给药制剂。例如，本发明所述的外用给药制剂，还可以通过添加表面活性剂、透皮吸收促进剂、防腐剂、溶剂、抗氧剂、保湿剂、pH调节剂、着色剂、香料等辅料，进一步制备成(包括但不限于)：搽剂、酊剂、油剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、熨剂、贴膏、贴片、涂膜剂、膜剂、凝胶剂、巴布剂、穴位贴敷剂、喷雾剂、气雾剂、植入剂、乳剂等。对于癌症，优选的剂型包括：口服给药的各种剂型、植入剂、注射剂。

应理解，在本发明中，所述的载体没有特别的限制，为本领域常用材料，其种类、使用方法、来源为本领域技术人员所熟知。

药学可接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠等)、明胶、滑石粉、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油、等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如吐温)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、缓冲剂、螯合剂、增稠剂、pH调节剂、透皮促进剂、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、抑菌剂、无热原水等。

在另一优选例中，在所述的药物组合物中，所述的第一活性成分和第二活性成分含量范围，以及第一活性成分和第二活性成分的质量比如上文所述组合物中描述。

本发明还提供一种活性成分组合物，所述的活性成分组合包括以下组分：

(a)治疗有效量的第一活性成分，所述第一活性成分3-羟基氨基苯甲酸或其药学上可接受的盐；

(b)治疗有效量的第二活性成分，所述第二活性成分为激酶抑制剂类抗癌药物。

在另一优选例中，在所述的药物成分组合中，所述的第一活性成分和第二活性成分含量范围，以及第一活性成分和第二活性成分的质量比如上文所述组合物中描述。

本发明还提供一种药盒，所述药盒包括：

(A)含有3-羟基氨基苯甲酸或其药学上可接受的盐的第一制剂；

(B)含有激酶抑制剂类抗癌药物的第二制剂；和

(C)使用说明书。

所述的使用说明书中注明将所述第一制剂和第二制剂进行联用，从而预防和/或治疗癌症。

在联用本发明的药盒中的第一制剂和第二制剂时，第一制剂和第二制剂可以同时给药、分别给药或顺序给药。

本发明的组合物、活性成分组合、药物组合物、药盒、食品和保健品均可采用常规方法和设备进行制备。

用途和给药方式

本发明提供了一种本文所述组合物、活性成分组合物、药物组合物在制备用于预防和/或治疗癌症的药物中的用途。

本发明所述的组合物、活性成分组合物、药物组合物以及药盒中的第一活性成分和第二活性成分可对肝癌、肾癌、白血病的预防和治疗产生协同作用，增强治疗癌症的效果，降低单个药物的用药剂量，降低药物的毒性。典型地，3-HAA和索拉非尼联合应用协同增强治疗肝癌效果的示意图如图1所示。

在使用本发明的组合物、活性成分组合、药物组合物以及药盒之前、同时或之后，可配合使用其他治疗癌症的活性物质(例如托泊甙、5-氟尿嘧啶、等抗癌活性物质、甲磺酸伊马替尼)、实施针对癌症的外科手术或给予针对癌症的放射性治疗，或与基因治疗联合使用，或与生物调节剂联合使用。

在联合用药过程中，药物的相互作用根据药物共同使用时的效应分为加合作用、协同作用、拮抗作用，协同作用是指联合用药的药物共同使用时的效应要比单独使用大很多倍，加和作用是指联合用药的药物共同使用时的效应要与单独使用相当，拮抗作用是指联合用药的药物共同使用时的效应要比单独使用小。在本发明中，首次发现第一活性成分和第二活性成分联合使用具有协同作用。

在抑制癌细胞生长或预防和治疗癌症时，本发明的给药方式包括先后依次施用第一活性成分和第二活性成分，或同时施用第一活性成分和第二活性成分。

药物制剂应与给药方式相匹配，使用药物组合物或制剂时，是将安全有效量的药物施用于所需对象(如人或非人哺乳动物)，其中，第一活性成分的安全有效日使用剂量通常至少约0.1mg，而且在大多数情况下不超过约2000mg。较佳地，该剂量是1mg-500mg；第二活性成分的安全有效量通常至少约0.01mg，而且在大多数情况下不超过1500mg。较佳地，该剂量范围是0.1mg至1500mg。(其中，第一活性成分的安全有效量通常不超过约2000毫克/千克体重。较佳地，该剂量是约100微克/千克体重至约1000毫克/千克体重；第二活性成分的安全有效量通常不超过约2000毫克/千克体重。较佳地，该剂量是约10微克/千克体重至约1000毫克/千克体重。)当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是在熟练医师技能范围之内的。当先后依次施用第一活性成分和第二活性成分时，施用的间隔时间无特别要求。本发明的组合物、活性成分组合、药物组合物以及药盒中的第一活性成分和第二活性成分分别以相同或不同的途径同时或相继给药，其中包括但并不限于：口服给药、注射给药、瘤内给药、植入给药、腔内给药、***给药、透皮给药、内外敷；

优选的注射给药包括：静脉注射、肌肉注射、皮下注射、腔内注射。

体外非治疗性的抑制癌细胞生长的方法

本发明还提供一种体外非治疗性的抑制癌细胞生长的方法，所述的方法包括步骤：将癌细胞与本发明所述的组合物或所述活性成分组合接触，来抑制癌细胞的生长。

预防和/或癌症的方法

本发明还提供了一种预防和/或治疗癌症癌症的方法，所述的方法包括步骤：给所需的受试者施用如本发明所述的组合物、活性成分组合、药物组合物或药盒。

在抑制癌细胞生长或预防和治疗癌症时，本发明的施用方式包括先后依次施用第一活性成分和第二活性成分，或同时施用第一活性成分和第二活性成分。

在另一优选例中，所述对象为人和非人哺乳动物。代表性地，所述的非人哺乳动物包括(但并不限于)：宠物(如狗、猫)、家畜(如牛、羊、马、猪)、各种动物园动物(熊猫、大象、虎)等。

本发明的优点主要包括：

1、本发明所述组合中，第一活性成分和第二活性成分能够产生协同作用，增强治疗癌症的效果，降低单个药物的用药剂量，降低药物的毒性。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。

实施例1

单用索拉非尼对肝癌细胞的抑制作用

实验方法

4株肝癌细胞(PLC8024、SMMC-7721、HepG2和Hep3B)加入剂量梯度(剂量分别为：0、1.25、2.5、5、10、20和40μM)及时间梯度(时间分别为：0、1、2、3和4天)的索拉非尼处理，通过CCK8实验计算索拉非尼对4株肝癌细胞的半数抑制浓度(50％Inhibition concentration,IC50)。

实验结果

如图2所述，4株肝癌细胞的IC50分别为：PLC8024 8.4μM；SMMC-7721:15.3μM；HepG2:2.6μM；Hep3B：3.2μM。其中PLC8024及SMMC-7721对索拉非尼治疗应答明显低于HepG2和Hep3B。

实施例2

单用3-HAA对肝癌细胞的抑制作用

通过CCK8实验计算3-HAA(3-羟基氨基苯甲酸)对4株肝癌细胞(PLC8024、SMMC-7721、HepG2和Hep3B)的半数抑制浓度(50％Inhibition concentration,IC50)。

实验结果

如图3所示，4株肝癌细胞的IC50分别为：PLC8024:147.7μM；SMMC-7721:165.4μM；HepG2:73.2μM；Hep3B:101.5μM。其中PLC8024及SMMC-7721对3-HAA治疗应答明显低于HepG2和Hep3B。

实施例3

3-HAA与索拉非尼协同抑制肝癌细胞

因此，我们设想3-HAA能否作为索拉非尼的辅助用药，增强索拉非尼的治疗敏感性。针对这个猜想，首先

实验方法

通过CCK8实验，检测单用索拉非尼或3-HAA和索拉非尼联合使用时，低应答的SMMC-7721及PLC8024细胞的存活率。

实验结果

从图4中可以看出，3-HAA可以明显增强索拉非尼的治疗敏感性。联用3-HAA(30μM)，SMMC7721及PLC8024的IC50分别从14.5μM和8.1μM下降至4.9μM和2.4μM。单用5μM索拉非尼，两株细胞存活率分别为88.4±1.6％和76.3±4.7％，联合50μM的3-HAA之后，两株细胞存活率分别下降至43.8±2.1％及23.5±2.3％。图5的凋亡检测进一步证实两者连用具有协同作用。

实施例4

3-HAA与索拉非尼协同抑制SMMC-7721移植瘤

实验方法

构建SMMC-7721细胞的裸鼠移植瘤模型。4组移植瘤裸鼠分别作为对照组(给予DMSO)、3-HAA给药组(100mg/kg.day)、索拉非尼给药组(10mg/kg.day)和3-HAA和索拉非尼联合给药组(3-HAA和索拉非尼的给药量分别为100mg/kg.day和10mg/kg.day)，给药方式为腹腔注射给药，每天给药。连续8天。

实验结果

从图6中可以看出，在对荷瘤小鼠体重无明显影响的情况下，索拉非尼和3-HAA联用可以发挥协同抑制SMMC-7721细胞移植瘤的生长。腹腔注射10mg/Kg.day的索拉非尼，对索拉非尼低应答肝癌细胞肿瘤生长曲线抑制作用不明显，当联合100mg/Kg.day的3-HAA，肿瘤生长得到了明显的抑制(图6A)。肿瘤重量也有类似的结果，联合使用索拉非尼和3-HAA，肿瘤平均重量为0.15±0.05g，仅为对照组(0.41±0.08g)的27％(图6B)。

实施例5

3-HAA与索拉非尼协同抑制PDX(病人来源的移植瘤)移植瘤

实验方法

在2个索拉非尼耐药临床病人的PDX模型上验证3-HAA与索拉非尼协同抑制肿瘤作用，分别设立对照组(给予DMSO)、3-HAA给药组(100mg/kg.day)、索拉非尼给药组(30mg/kg.day)和3-HAA和索拉非尼联合给药组(3-HAA和索拉非尼的给药量分别为100mg/kg.day和30mg/kg.day)。

实验结果

结果如图7所示，可以看出，3-HAA亦可增强索拉非尼对临床耐药肝癌PDX模型的治疗敏感性。本研究构建的PDX模型对30mg/Kg.day的索拉非尼仍呈现治疗抵抗，结果显示单独注射30mg/Kg.day的索拉非尼或100mg/Kg.day的3-HAA，对PDX移植瘤生长曲线抑制作用不明显，两者联合后，肿瘤生长得到了明显的抑制(图7A-B)。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。