阅读说明：本技术 Nadh和/或nmn在制备肌肉增强或抑制肌肉量下降的药物或保健品中的应用 (Application of NADH and/or NMN in preparation of medicine or health-care product for strengthening muscle or inhibiting decrease of muscle mass ) 是由 *** 张波 于 2019-10-09 设计创作，主要内容包括：本发明实施例公开了一种NADH和/或NMN在制备增强肌肉或抑制肌肉量下降的药物或保健品中的应用,并公开了含NADH和/或NMN的增强肌肉或抑制肌肉量下降的药物组合物或保健品组合物,其以NADH和/或NMN为单一活性组分。所述NADH和/或NMN为肠内给药或肠外给药均可,用药途径广泛且方便。适用于运动不足人群及中老年人群,并可依据病情的严重程度,调整施药途径和施药量。可以长期服用,对人体无副作用。(The embodiment of the invention discloses an application of NADH and/or NMN in preparing a medicament or health-care product for strengthening muscle or inhibiting muscle mass reduction, and discloses a medicament composition or health-care product composition containing NADH and/or NMN for strengthening muscle or inhibiting muscle mass reduction, wherein NADH and/or NMN is used as a single active component. The NADH and/or NMN can be administrated enterally or parenterally, and the administration route is wide and convenient. Is suitable for people with hypokinesia and the middle-aged and the elderly people, and can adjust the application route and the application amount according to the severity of the illness state. Can be taken for a long time without side effect to human body.)

NADH和/或NMN在制备肌肉增强或抑制肌肉量下降的药物或保 健品中的应用

技术领域

本发明涉及药物或保健品技术领域，尤其涉及NADH和/或NMN在制备肌肉增强或抑制肌肉量下降的药物或保健品中的应用。

背景技术

在长期运动不足以及年长的人群中，会发生肌肉量的减少，对于老年人和长期久坐不动的中年人来说，进行足以增加肌肉量的运动是极其困难的。因此这类人群存在期望增加肌肉量或抑制肌肉量下降的情况。另外，运动员等相关人群也存在增强肌肉的需求，除了运动，还会借助于有效的营养保健品或药品，以求更快更高效地达到目的。目前，常用的肌肉增强剂一般为甾类和生长激素等，但这类药物属于***或激素类药物，对身体具有副作用，不能长期服用。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的技术目的之一在于提供NADH(Nicotinamideadenine dinucleotide，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)和/或NMN(β-NicotinamideMononucleotide，β-烟酰胺单核苷酸)在制备增强肌肉或抑制肌肉量下降的药物或保健品中的应用。

在本发明的其中一个实施例中，当同时使用NADH和NMN时，两者的摩尔比例为(1-10):(1-10)，优选为(1-3):(1-3)。

在本发明的其中一个实施例中，NADH和/或NMN为肠内给药或肠外给药均可，其中肠内给药主要为口服给药，相应地，所述肠内给药的剂型为片剂、粉剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、混悬剂、糖浆剂、合剂、散剂和滴丸中的任意一种或几种；肠外给药主要为注射给药、肺吸收或局部给药，相应地，所述肠外给药的剂型为注射剂、软膏剂、栓剂和吸入剂中的任意一种或几种。

在本发明的其中一个实施例中，肠内给药尤其是口服给药时NADH的单次剂量为0.1～10mg/kg，优选为0.1～4mg/kg。日次数为1～3次，日用量为0.1～30mg/kg，优选是0.1～12mg/kg，更优选0.4～2mg/kg。肠外给药尤其是静脉注射时NADH的单次剂量为0.1～2mg/kg，优选是0.1～1mg/kg。其中kg为对象个体的体重单位。

在本发明的其中一个实施例中，肠内给药尤其是口服给药时NMN的日用量为2～30mg/kg，优选是2～10mg/kg；肠外给药尤其是静脉注射时日剂量为5～10mg/Kg。其中kg为对象个体的体重单位。

在本发明的其中一个实施例中，所述NADH和/或NMN的应用范围包括但不限于增肌、塑肌、肌肉保持、治疗医学上诊断为肌肉萎缩及与其相关的病症。

本发明的技术方案中，利用NADH和/或NMN增加肌肉量或抑制肌肉量下降，是基于NADH或NMN在生物体内可以生成NAD+，而NAD+可以促进肌肉内的毛细血管密度增加，增加血流量，并且还可以引起了线粒体非折叠蛋白和抗增殖蛋白的表达，从而使肌肉干细胞恢复活力。

本发明的技术目的之二在于提供一种增强肌肉或抑制肌肉量下降的药物组合物或保健品组合物，所述组合物中以NADH和/或NMN为单一活性组分。

在本发明的其中一个实施例中，上述组合物中同时包含NADH和NMN时，两者的摩尔比例为(1-10):(1-10)，优选为(1-3):(1-3)。

在本发明的其中一个实施例中，上述组合物还包括药学上或食品中可接受的辅料。

实施本发明实施例，将具有如下有益效果：

本发明公开了NADH和/或NMN在制备肌肉增强或抑制肌肉量下降的药物或保健品中的应用，服用含NADH和/或NMN的保健品或药物可有效地增强肌肉或防止肌肉量降低，适用于运动不足人群及中老年人群，希望保持肌肉量的情况，可依据病情的严重程度，调整施药途径和施药量。可以长期服用，对人体无副作用。

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

NADH和/或NMN的体外实验效果：

从6月龄的雄性SD大鼠摘出大腿部肌肉组织，将脂肪及***等去除或切碎后，在37℃下用1.25mg/mL蛋白酶水溶液处理1小时，通过差速离心分离将肌纤维碎片等去除，播种到涂布有聚赖氨酸及纤连蛋白的板上，在5％CO₂气氛中、37℃下进行24小时培养，之后用PBS进行清洗，由此分离出肌肉干细胞。培养基使用添加有10％马血清的DMEM(达尔伯克改良伊格尔培养基，Dulbecco’s Modified Eagle Medium)，将该培养基简记为“10％HS-DMEM”。

分别将NADH、NMN、NADH:NMN(1:1)的组合物溶解或悬浮于水中后，添加至10％HS-DMEM，制备包含NADH和/或NMN的10％HS-DMEM，NADH和/或NMN的浓度为2.5μg/mL。将分离肌肉干细胞的培养基更换为包含NADH和/或NMN的10％HS-DMEM，进行24小时培养，并使用水作为空白对照。

在自培养结束起2小时前，向培养基中添加溴脱氧尿苷(BrdU)以使终浓度成为10μM。培养结束后，使用经水冷的添加有0.1％H₂O₂的甲醇将经NADH和/或NMN处理的肌肉干细胞在4℃下固定10分钟。进一步使用2N盐酸在37℃下进行1小时DNA改性处理，再使用抗BrdU抗体作为一次抗体，使用HRP结合抗小鼠IgG抗体作为二次抗体，用二氨基联苯胺(DAB)使其显色，对BrdU阳性细胞进行检测。求出BrdU阳性细胞在总细胞数中所占的比例，为肌肉干细胞活化率。将结果示于表1。

表1.

如表1结果所示，与空白对照相比，NADH、NMN、NADH:NMN(1:1)组合物的干细胞活化率均高于空白对照组，并且在浓度相同的条件下，效果上NADH＞NADH:NMN(1:1)组合物＞NMN，这说明NADH在人体中NAD+的转化率要高于NMN。

实施例2

NADH和/或NMN的体内实验效果：

将14周龄的雄性SD大鼠以体重为基准、以每组6只分为对照组、NADH给药组、NMN给药组和NADH/NMN组合物给药组4组。对各组每只鼠按体重以500mg/kg的标准分别1天给药1次水、NADH、NMN和NADH/NMN组合物，进行4天口服给药。此外，在解剖2小时前以50mg/kg体重的比例腹腔内给药溴脱氧尿苷。

从上述大鼠摘出大腿部肌肉组织，将脂肪及***等去除或切碎后，在37℃下用1.25mg/mL蛋白酶水溶液处理1小时。通过差速离心分离将肌纤维碎片等去除后，播种到涂布有聚赖氨酸及纤连蛋白的板上，在5％CO₂气氛中37℃下进行24小时培养，用PBS进行清洗，分离出肌肉干细胞。作为培养基，使用上述实施例1中使用的10％HS-DMEM。

使用经水冷的添加有0.1％H₂O₂的甲醇将经分离的肌肉干细胞在4℃下固定10分钟。进一步使用2N盐酸在37℃下进行1小时DNA改性处理后，使用抗BrdU抗体作为一次抗体、使用HRP结合抗小鼠IgG抗体作为二次抗体，用二氨基联苯胺(DAB)使其显色，对BrdU阳性细胞进行检测。求出BrdU阳性细胞在总细胞数中所占的比例，作为肌肉干细胞活化率。此外，以对照组的肌肉干细胞活化率为基准，将各组的肌肉干细胞活化率的比作为肌肉干细胞活化率。将结果示于表2。

表2.

组别	肌肉干细胞活化率
		对照组	1.0±0.8
NADH给药组	2.5±0.3*
		NMN给药组	2.2±0.6*
NADH/NMN组合物给药组	2.4±0.1*

如表2所示的结果，与对照组相比，其他三组的肌肉干细胞活化效果分别为2.2～2.5倍，说明其相对于对照组具有显著的活化效果，说明NADH和/或NMN在肌肉增强或抑制肌肉量下降方面具有显著的作用。

以上所揭露的仅为本发明较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，因此依本发明权利要求所作的等同变化，仍属本发明所涵盖的范围。