烟酰胺腺嘌呤二核苷酸在治疗阿霉素诱导的心脏毒性中的应用
阅读说明：本技术 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸在治疗阿霉素诱导的心脏毒性中的应用 (Application of nicotinamide adenine dinucleotide in treatment of adriamycin-induced cardiotoxicity ) 是由 孙爱军 葛均波 章金延 蒋昊 于 2021-09-16 设计创作，主要内容包括：本发明公开了烟酰胺腺嘌呤二核苷酸在治疗阿霉素诱导的心脏毒性中的应用,属于生物医药技术领域。本发明通过动物实验,证明DOX+NAD组比DOX+Control组心功能有明显改善；本发明通过细胞实验,证明DOX+NAD组相比DOX+PBS组死亡细胞比例明显降低；本发明首次提出烟酰胺腺嘌呤二核苷酸在治疗阿霉素诱导的心脏毒性中的应用,通过采用NAD可以减少阿霉素引起的心肌细胞死亡,缓解阿霉素导致的心脏毒性,可以对抗阿霉素使用产生的副作用,扩大阿霉素的使用范围,改善临床上使用阿霉素的肿瘤患者的预后。(The invention discloses application of nicotinamide adenine dinucleotide in treating adriamycin-induced cardiotoxicity, and belongs to the technical field of biological medicines. Animal experiments prove that the heart function of the DOX + NAD group is obviously improved compared with that of the DOX + Control group; cell experiments prove that the ratio of dead cells of the DOX + NAD group is obviously reduced compared with the DOX + PBS group; the invention firstly provides the application of nicotinamide adenine dinucleotide in treating adriamycin-induced cardiotoxicity, can reduce myocardial cell death caused by adriamycin by adopting NAD, relieve the cardiotoxicity caused by adriamycin, resist side effects generated by adriamycin, enlarge the application range of adriamycin and improve the prognosis of tumor patients clinically using adriamycin.)
技术领域
本发明涉及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸在治疗阿霉素诱导的心脏毒性中的应用，属于生物医药技术领域。
背景技术
阿霉素(doxorubicin，DOX)是目前临床使用最为广泛的抗肿瘤药物之一，其主要机制是通过抑制DNA以及RNA合成，从而达到杀死肿瘤细胞的效果。然而，阿霉素导致的心脏毒性常常限制其临床应用。虽然目前通过脂质体包裹阿霉素等减轻其心脏毒性的技术已经取得了很大的进展，但仍旧无法完全预防阿霉素导致的心肌损伤。因此，亟需从新的视角去发现阿霉素导致的心脏毒性治疗的新靶点。
心肌能量代谢异常是阿霉素诱导的心肌损伤的重要病理基础，线粒体作为提供ATP的主要场所，在其中发挥着关键作用。有报道显示，阿霉素可以导致心肌细胞线粒体途径的凋亡增加，线粒体自噬稳态失调，三羧酸循环等代谢功能紊乱。因此改善线粒体功能，可以作为防止阿霉素诱导的心肌损伤的潜在靶点。
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)是维持线粒体代谢与功能所必须的辅酶。首先，NAD+可以作为电子受体，在脂肪酸氧化以及三羧酸循环等不同代谢途径中传递能量。其次，NAD+也是线粒体氧化磷酸化所必需的，NAD+缺乏将导致线粒体无法产生ATP。有研究显示，线粒体功能的异常通常伴随着NAD+的减少。而补充NAD+可以显著改善线粒体功能。目前，已有一些通过补充NAD+前体，提高NAD+水平以治疗代谢性疾病的临床研究展开。但是目前针对NAD+对阿霉素诱导的心脏毒性的治疗优势还没有被发掘。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：如何改善阿霉素诱导的心脏毒性。
为了解决上述技术问题，本发明提供了烟酰胺腺嘌呤二核苷酸在制备治疗阿霉素诱导的心脏毒性的药物中的应用。
优选地，所述药物包括医学上可接受的载体和有效量的活性成分，所述活性成分为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
1.本发明通过动物实验，证明DOX+NAD组比DOX+Control组心功能有明显改善；本发明通过细胞实验，证明DOX+NAD组相比DOX+PBS组死亡细胞比例明显降低；
2.本发明首次提出烟酰胺腺嘌呤二核苷酸在治疗阿霉素诱导的心脏毒性中的应用，采用NAD可以减少阿霉素引起的心肌细胞死亡，缓解阿霉素导致的心脏毒性，可以对抗阿霉素使用产生的副作用，扩大阿霉素的使用范围，改善临床上使用阿霉素的肿瘤患者的预后。
附图说明
图1为检测小鼠模型的左室射血分数(LVEF)结果；
图2为检测小鼠模型的左室短轴收缩率(LVFS)结果；
图3为心肌细胞死活染色结果；其中，绿色代表活细胞(图中用点示出)，红色代表死细胞(图中用圈示出)；
图4为各组别死亡细胞比例；
其中，图中“NS”：表示not significant(没有统计学差异)；*：表示p<0.05；**：表示p<0.01；***：表示p<0.001。
具体实施方式
为使本发明更明显易懂，兹以优选实施例，并配合附图作详细说明如下。
实施例
本实施例通过动物体内实验验证了烟酰胺腺嘌呤二核苷酸在治疗阿霉素诱导的心脏毒性中的应用：
1)实验动物分组及动物模型制备：选用SPF级雄性C57BL/6小鼠(购自上海杰思捷实验动物有限公司)，周龄为8-10周，体重20-25g，分为四组(Sham+Control组；Sham+NAD组；DOX+Control组；DOX+NAD组)，Sham+NAD组以及DOX+NAD组连续7天腹腔注射NAD(50mg/kg/d,Selleck,S2518),Sham+Control组以及DOX+Control组注射等量生理盐水，第8天DOX+Control组，DOX+NAD组腹腔注射DOX(15mg/kg,Sigma,D1515)，随后Sham+NAD组以及DOX+NAD组继续每天腹腔注射NAD(50mg/kg/d,Selleck,S2518)，Sham+Control组以及DOX+Control组注射等量生理盐水，7天后查看小鼠心功能。
2)超声心动图评价小鼠心功能：于4周检测超声心动图，探头频率为30MHz。具体为异氟烷气麻动物后，当小鼠的心率保持在450-500次/分钟时记录M-mode图像。釆集胸骨旁长轴切面、心尖四腔切面B-Mode图像。取胸骨旁左室短轴，2D超声示左室短轴切面，在乳头肌水平应用M型超声记录左心室运动情况。功能学指标包括：左室射血分数(LVEF)、左室短轴收缩率(LVFS)。比较各组小鼠心脏形态及功能变化。所有测量值均为连续5个心动周期的平均值，由3名经验丰富的技术人员进行。结果显示：DOX组小鼠心功能指标明显低于Sham组，DOX组注射烟酰胺腺嘌呤二核苷酸后小鼠心功能改善，DOX+NAD组小鼠比DOX+Control组小鼠EF％高10.24％(P<0.05)；DOX+NAD组小鼠比DOX+Control组小鼠FS％高8.987％(P<0.05)；Sham组注射NAD后小鼠与生理盐水对照组小鼠相比，EF及FS无差异，如图1、2所示。
3)心肌细胞死活染色：选用SPF级雄性C57BL/6小鼠(购自上海杰思捷实验动物有限公司)，周龄为8-10周，体重20-25g，提取成年小鼠原代心肌细胞，分为4组(PBS组；NAD组；DOX+PBS组；DOX+NAD组)，干预条件如下：DOX+NAD组(DOX 1uM+NAD 500uM)，DOX+PBS组(DOX1uM+等量PBS)，NAD组(NAD 500uM)，PBS组(等量PBS),干预24小时候使用Calcein/PI细胞活性与细胞毒性检测试剂盒(beyotime，C2015S)对细胞进行死活染色，可以看到DOX干预后死细胞比例显著上升(P<0.001)，DOX+NAD组死细胞比例少于DOX+PBS组(P<0.001)，PBS组与NAD组相比死亡细胞比例无差异，如图3、4所示。
上述实施例仅为本发明的优选实施例，并非对本发明任何形式上和实质上的限制，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明的前提下，还将可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。