一类磺酰脲类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用
阅读说明：本技术 一类磺酰脲类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用 (Application of sulfonylurea compounds in preparation of antitumor drugs ) 是由 周莎 吕鑫屹 郭宸辰 李正名 魏巍 于 2021-06-18 设计创作，主要内容包括：一类磺酰脲类化合物或者其可药用的盐在制备抗乳腺癌药物中的应用,其中磺酰脲类化合物的化学结构式如下通式所示：式中X是H,卤素,SCN,氰基,硝基；R-(1)是卤素,硝基,羟基,C-(1)-C-(6)烷基；R-(2)是卤素,H；R-(3)是H,C-(1)-C-(6)烷基,C-(2)-C-(6)链烯基,C-(2)-C-(6)炔基或C-(3)-C-(6)环烷基；Y是O或者S；M是O,S。实验结果表明：化合物H对乳腺癌和神经母瘤细胞表现明显的抑制作用,且肿瘤细胞的特异性选择较好,具有成为新一代抗乳腺癌药物的研发前景。(The application of a sulfonylurea compound or medicinal salt thereof in preparing anti-breast cancer medicaments is disclosed, wherein the chemical structural formula of the sulfonylurea compound is shown as the following general formula: wherein X is H, halogen, SCN, cyano, nitro; r 1 Is halogen, nitro, hydroxy, C 1 ‑C 6 An alkyl group; r 2 Is halogen, H; r 3 Is H, C 1 ‑C 6 Alkyl radical, C 2 ‑C 6 Alkenyl radical, C 2 ‑C 6 Alkynyl or C 3 ‑C 6 A cycloalkyl group; y is O or S; m is O, S. The experimental results show that: the compound H has obvious inhibition effect on breast cancer and neuroblastoma cells, has better specificity selection of tumor cells, and has research and development prospect of becoming a new generation of anti-breast cancer drugs.)
技术领域
本发明涉及一类磺酰脲类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用
背景技术
恶性肿瘤是世界上最可怕的疾病之一，随着医学领域取得的巨大进步，使致恶性肿瘤的 治愈率提高了很多，但是在全球癌症仍然是继心脏病之后的第二大死亡原因。治疗癌症的方 法有很多种，有手术治疗、放射治疗、生物治疗、基因治疗、化学治疗和中医药治疗，其中， 化学治疗是最重要的方法之一。目前虽然抗肿瘤药物的数量虽多，但是理想的药物却很少， 所以寻找疗效好，副作用小的抗肿瘤药物有着深远的意义。磺酰脲类化合物作为除草剂和降 糖药广泛的用于农药和医药领域，在对磺酰脲类降糖药的作用机制的研究过程中，人们发现 了第二代降糖药药物具有潜在的抑制肿瘤作用。随着大家的不断深入研究，发现更多的磺酰 脲类化合物表现很强的抗肿瘤活性，如对肺癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、胃癌等，至此， 一些磺酰脲类结构逐渐成为人们研制新一代抗肿瘤药物的焦点。积极寻找和设计具有抗癌作 用的新颖结构，具有非常重要的临床意义和广阔的应用前景。
发明内容
本发明的目的是提供了一类磺酰脲类化合物或者其可药用的盐在制备抗乳腺癌药物中 的应用，其中磺酰脲类化合物的化学结构式如下通式所示：
式中X是H，卤素，SCN，氰基，硝基，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，C3-C6环 烷基，C1-C6卤代烷基，C1-C4烷氧基烷基，C1-C4羟基烷基，C1-C4烷氧基，C1-C4卤代烷氧基， C1-C4烷硫基，C2-C6烷氧基羰基，C2-C6烷基羰基，C1-C4烷基磺酰基，C1-C4烷基亚磺酰基， C1-C4烷基亚磺酰基亚胺基，C1-C4烷硫基，C1-C4烷氨基，C2-C8二烷基氨基，C3-C6环烷基氨 基，C3-C6三烷基甲硅烷基，C2-C6烷基氨基羰基，C3-C8二烷基氨基羰基，苯基，苯氧基，苄 基，五元杂芳环或六元杂芳环任选的被1-3个取代基取代，这些取代基各自独立自卤素，SCN， CN，硝基，羟基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，C1-C6卤代烷基，C1-C4卤代烷氧基，C1-C4烷 硫基，C1-C4羟基烷基；
R1是H，卤素，SCN，CN，硝基，C1-C6烷基，C2-C6链烯基，C2-C6炔基或C3-C6环烷 基；
R2是卤素，H，C1-C6烷基，C2-C6链烯基，C2-C6链烯氧基，C2-C6炔基，C3-C6环烷基， C4-C7烷基环烷基，C1-C6卤代烷基，C1-C6卤代烷氧基，C2-C6卤链烯基，C2-C6卤炔基，C3-C6卤环烷基，C4-C7卤烷基环烷基，C2-C6烷氧羰基，C2-C6卤代烷氧羰基；
R3是H，C1-C6烷基，C2-C6链烯基，C2-C6炔基或C3-C6环烷基；
Y是O或者S；
M是O，S，NR4；
R4是H，卤素，氰基，硝基，硫氰酸基，C1-C6烷基，C2-C6链烯基，C2-C6链烯氧基， C2-C6炔基，C3-C6环烷基，C4-C7烷基环烷基，C1-C6卤代烷基，C1-C6卤代烷氧基，C2-C6卤 链烯基，C2-C6卤炔基，C3-C6卤环烷基，C2-C6烷基羰基，C2-C6烷氧羰基，C2-C6烷基氨基羰 基，C2-C6烷基硅基，苯基，五元杂芳环或者六元杂芳环任选的被1-3个取代基取代，这些取 代基各自独立自卤素，SCN，CN，硝基，羟基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，C1-C4卤代烷氧 基，C1-C4卤代烷基。
在上述化合物的定义中，所用术语不论单独使用还是用在复合词中，代表如下取代基：
卤素：氟、氯、溴或碘；
烷基：直链或支链烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基或者叔丁基；
卤代烷基：直链或者支链烷基，在这些烷基上的氢原子可部分或者全部被卤原子所取代，
例如，卤代烷基诸如氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、氟甲基、二氟甲基或者三氟甲基。
烯基：直链或支链并可在任何位置上存在有双键，例如乙烯基或烯丙基；
炔基：直链或支链并可在任何位置上存在有三键，例如乙炔基或炔丙基。
优选的技术方案中，其特征在于，R1为H，卤素，SCN，CN，硝基，羟基，甲基，乙基， 异丙基，叔丁基等；
优选的技术方案中，其特征在于，R2和R3分别选自H，卤素，SCN，CN，硝基，C1-C6烷基，C2-C6链烯基，C2-C6炔基或C3-C6环烷基等；
更优选的方案中，其特征在于，所述N-((5-溴-4-(噻吩-2-基)嘧啶-2-基)氨基甲酰基) -2-氯-5-乙烯基苯磺酰胺，2-氯-N-(((4-(呋喃-2-基)嘧啶-2-基)氨基甲酰基)-5-乙烯基苯 磺酰胺，N-((5-溴-4-(呋喃-2-基)嘧啶-2-基)氨基甲酰基)-2-氯-5-乙烯基苯磺酰胺，2-氯 -N-(((4-(噻吩-2-基)嘧啶-2-基)氨基甲酰基)-5-乙烯基苯磺酰胺，2-氯-N-(((4-甲氧基-6- (噻吩-2-基)嘧啶-2-基)氨基甲酰基)-5-乙烯基苯磺酰胺。
本发明对上述磺酰脲类衍生物进一步做了生物活性测定，结果表明在细胞水平上对乳腺 癌和神经母细胞瘤都有不同程度的抑制效果。
因此，本发明同时要求保护上述磺酰脲类化合物或其可用的盐对乳腺癌和神经母细胞瘤 的抑制作用，所述可用盐包含钾盐，钠盐，钙盐，镁盐等
本发明同时要求保护上述磺酰脲类化合物或其可用盐在制备抗乳腺癌和神经母细胞瘤 药物中的应用。
由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：
本发明首次报道了这类磺酰脲类化合物及其可用盐对乳腺癌细胞和神经母细胞瘤的增 殖具有明显的抑制作用，可以作为制备抗乳腺癌和抗神经母细胞瘤的药物。
附图说明
图1实施例一中抑制剂化合物N-((5-溴-4-(噻吩-2-基)嘧啶-2-基)氨基甲酰基)-2- 氯-5-乙烯基苯磺酰胺(H)对MDA-231细胞的抑制效果(磺酰脲类化合物H浓度梯度对MCF-7细胞系生存活力的影响，结果显示三次生物学重复)
图2实施例一中抑制剂化合物N-((5-溴-4-(噻吩-2-基)嘧啶-2-基)氨基甲酰基)-2- 氯-5-乙烯基苯磺酰胺(H)对MCF-7细胞的抑制效果(磺酰脲类化合物H浓度梯度对 MDA-MB-231细胞系的生存活力的影响，结果显示三次生物学重复)
图3实施例一中抑制剂化合物N-((5-溴-4-(噻吩-2-基)嘧啶-2-基)氨基甲酰基)-2- 氯-5-乙烯基苯磺酰胺(H)对SH-SY5Y细胞的抑制效果(磺酰脲类化合物H浓度梯度对SH-SY5Y细胞系的生存活力的影响，结果显示三次生物学重复)
具体实施方式
下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述：
实施例一：分析化合物H N-((5-溴-4-(噻吩-2-基)嘧啶-2-基)氨基甲酰基)-2-氯-5- 乙烯基苯磺酰胺对乳腺癌细胞和神经母细胞瘤细胞的抑制作用。
实验方法
化合物配置
(1)称取适量的新型化合物放入1.5mL的无酶无菌EP管中，并且将化合物的名称在EP管侧壁标记好，根据化合物的相对分子质量，计算加入DMSO的体积，使其终浓度为10 mM。
(2)在细胞房超净台中用移液枪加入对应体积的DMSO，并且吹打混合均匀，使化合物能够完全溶解。
(3)将1.5mL EP管放入95度金属浴中加热10分钟，之后将化合物溶液分装到小管中 备用。
(4)将化合物溶液放到冰箱-20中保存。
MTT溶液的配制
(1)在超净台中取出一个50mL的离心管，向其中加入已经灭菌的20mL PBS。
(2)将100mg包装的MTT打开，从50mL离心管中吸1mLPBS加入装有MTT固体 的EP管中，吹打均匀，将所有液体转移到50mL离心管中，震荡混匀。此过程需要重复数 次，使得EP管中不再残留MTT固体。
(3)此时50mL离心管中的MTT溶液浓度为5mg/mL，将其分装至新的1.5mL EP管 中，标记好MTT溶液的浓度，配制时间和配制人。
(4)将分装好的MTT溶液-20冰箱中避光保存。
注意：由于MTT在光下是不稳定的，所以上述配置过程应该全程避光进行，使用的时 候也是如此，如果发现MTT溶液由黄色变为灰绿色，此时不可使用，应该及时更换。
MTT法测定细胞生存活力实验
(1)观察12孔板里细胞的生长情况，当生长到适当密度时将其中一孔进行消化，终止 消化后将细胞悬液转移到1.5mL EP管中。
(2)细胞计数，确定细胞悬液的密度，将其转移到15mL的离心管中，用培养基进行稀释，稀释至浓度为50000个/mL。
(3)取出96孔板放置于超净台进行细胞种植，种植细胞的操作为：将15mL离心管中的细胞吹打均匀，然后96孔板中每孔加入100μL体积的细胞悬液(每孔约5000个细胞)， 放置于37度培养箱中，过夜。
(4)第二天细胞贴壁后，换液，方法为将每孔的培养基吸去，加入新的对照培养基或 者相应化合物浓度的培养基，放入37度培养箱中进行培养。
(5)在进行化合物处理过程中，需要每天进行换液，即每天都要进行更换含有相应浓 度化合物的培养基，确保化合物的处理持续发挥作用。
(6)在化合物处理相应时间后，每孔加入15μL的5mg/mL的MTT溶液，在37度细 胞培养箱中避光孵育4小时。
(7)将96孔板取出至超净台，在避光条件下，将每孔中的培养液吸出，然后每孔加入 150μL的DMSO进行溶解甲瓒，在摇床上中速摇晃10分钟。
(8)预约酶标仪，在490nm波长处检测96孔板每孔的吸光值。
实验结果表明：化合物H对乳腺癌和神经母瘤细胞表现明显的抑制作用(图1至图3)， 其EC50值如表1所示。且肿瘤细胞的特异性选择较好，具有成为新一代抗乳腺癌药物的研发 前景。
表1 化合物H在三种肿瘤细胞抑制作用的IC50(μM)