舒洛地特在制备治疗脓毒症急性肾损伤药物中的应用

文档序号:604825 发布日期:2021-05-07 浏览:45次 >En<

阅读说明:本技术 舒洛地特在制备治疗脓毒症急性肾损伤药物中的应用 (Application of sulodexide in preparation of medicine for treating acute kidney injury caused by sepsis ) 是由 许艳芳 陈财铭 赖坤美 邹臻寰 李银霜 于 2021-02-07 设计创作,主要内容包括:本申请属于医药技术领域,具体涉及舒洛地特在制备治疗脓毒症急性肾损伤药物中的应用。舒洛地特减轻脓毒症急性肾损伤,降低血尿素氮和肌酐;舒洛地特减轻脓毒症肾小管病理损伤;舒洛地特减轻脓毒症炎症因子和组织因子的活性;舒洛地特减轻LPS刺激下的内皮细胞毒性;舒洛地特减轻LPS刺激下的内皮细胞焦亡调控蛋白GSDMD的剪切活性和IL-1β的分泌;从而能够治疗脓毒症急性肾损伤。(The application belongs to the technical field of medicines, and particularly relates to application of sulodexide in preparation of a medicine for treating acute kidney injury caused by sepsis. Sulodexide relieves acute kidney injury from sepsis, lowers blood urea nitrogen and creatinine; sulodexide reduces sepsis tubule disease management damage; sulodexide reduces the activity of sepsis inflammatory factors and tissue factors; sulodexide reduces endothelial cytotoxicity under LPS stimulation; sulodexide reduces the shearing activity of endothelial cell apoptosis regulatory protein GSDMD and the secretion of IL-1 beta under the stimulation of LPS; thereby being capable of treating acute kidney injury caused by sepsis.)

舒洛地特在制备治疗脓毒症急性肾损伤药物中的应用

技术领域

本申请属于医药技术领域,具体涉及舒洛地特在制备治疗脓毒症急性肾损伤药物中的应用。

背景技术

脓毒症又称全身炎症反应综合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS),是重症监护室位居第一的致死病症。其发病原因多病原微生物所引起的感染,并导致其进一步发展为系统性炎症反应。脓毒症状态下炎症反应,免疫系统紊乱,凝血功能障碍三者相互作用又可导致多器官功能障碍综合征(Multiple organ dysfunction syndrome,MODS),肾脏是其中最常见受损害的器官。脓毒症状态下内皮细胞系统受损害,是导致肾脏损伤最主要的病理机制。

舒洛地特商品名伟素,目前国内有进口的舒洛地特注射液和舒洛地特软胶囊上市,其适应症为用于有血栓形成危险的血管疾病。

专利US5686432,Use of some glycosaminoglycans for the manufacture of amedicament for the treatment of chronic renal failure公开了使用某些糖胺聚糖如舒洛地特,低分子量肝素和低分子量硫酸皮肤素以及通过胃肠外使用含有它们的药物来治疗患有慢性肾功能不全的腹膜透析患者。通过对肾切除的大鼠进行腹膜损伤的药理研究以及对患有慢性肾功能不全的CAPD并经腹膜内途径(ip)治疗的慢性肾功能不全患者进行的临床研究均显示了这种用法的有效性。已观察到尿素和肌酐的腹膜转运显著增加,并伴有腹膜流出物中蛋白质损失的明显减少。在研究过程中未观察到超滤能力和出血性凝血并发症的显着变化。该专利公开了包含舒洛地特的药物能够使尿素和肌酐的蛋白质损失显著降低,腹膜转运显著增加。但是,并未公开舒洛地特减轻脓毒症肾小管病理损伤,舒洛地特干预组肾小管细胞刷状缘脱落、细胞坏死程度明显减轻;舒洛地特减轻脓毒症炎症因子和组织因子(tissue factor,TF)的活性,使脓毒症小鼠外周血IL-1β水平和TF活性明显降低;舒洛地特减轻LPS刺激下的内皮细胞毒性,舒洛地特干预后,内皮细胞LDH水平明显降低、内皮通透性明显改善;舒洛地特减轻LPS刺激下的内皮细胞焦亡调控蛋白GSDMD的剪切活性和IL-1β的分泌,舒洛地特干预后,内皮细胞GSDMD-N表达明显降低、IL-1β水平明显下降这些舒洛地特治疗脓毒症急性肾损伤的药理表征,仅仅根据舒洛地特的药物能够使尿素和肌酐的蛋白质损失显著降低,腹膜转运显著增加并不能推断出舒洛地特可用于治疗脓毒症急性肾损伤。

专利US2002065233A1 Methods and compositions using sulodexide for thetreatment of diabetic nephropathy公开了使用舒洛地特治疗糖尿病肾病的方法和组合物,但是并未公开舒洛地特可用于治疗脓毒症急性肾损伤。

文献Effect of sulodexide on urinary biomarkers of kidney injury innormoalbuminuric type 2diabetes:a randomized controlled trial.;Journal ofDiabetes Research Volume 2015,Article ID172038,6pages 2015.3.20中公开了舒洛地特对正常白蛋白尿型2型糖尿病肾损伤尿生物标志物的影响,但是并未公开舒洛地特可用于治疗脓毒症急性肾损伤。

发明内容

本发明的目的是提供舒洛地特在制备治疗脓毒症急性肾损伤药物中的应用。

舒洛地特可以治疗脓毒症急性肾损伤具体表现在,所述舒洛地特减轻脓毒症急性肾损伤,降低血尿素氮和肌酐。所述舒洛地特减轻脓毒症肾小管病理损伤。所述舒洛地特减轻脓毒症炎症因子和组织因子的活性。所述舒洛地特减轻LPS刺激下的内皮细胞毒性。所述舒洛地特减轻LPS刺激下的内皮细胞焦亡调控蛋白GSDMD的剪切活性和IL-1β的分泌。

发明人研究发现,舒洛地特即葡糖醛酸基葡糖胺聚糖硫酸盐,通过抑制调控细胞焦亡的蛋白GSDMD的剪切活性,从而抑制脓毒症状态下对内皮细胞的毒性、抑制血管内皮渗透性增加、炎症因子TNFa和IL-1β等分泌、组织因子活性,从而保护脓毒症急性肾损伤。

本发明的目的另一目的是含有舒洛地特的组合物在制备治疗脓毒症急性肾损伤药物中的应用。

所述组合物是以舒洛地特作为活性成分,加上药学上可接受的辅料所制成的药物。.

本发明所述舒洛地特在治疗脓毒症急性肾损伤时,可以单独使用,也可以与其他药物配合同时使用,或者与其他药物一起制成复方制剂使用,都可以达到治疗脓毒症急性肾损伤的目的。

本发明所述药学上可接受的辅料,是指制备不同剂型时加入所需的各种常规辅料,例如稀释剂、黏合剂、崩解剂、助流剂、润滑剂、矫味剂、包合材料、吸附材料等以常规的制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂,例如可以是颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、丸剂、口服液、汤剂、滴丸剂等。

药理实验结果表明:

(1)舒洛地特减轻脓毒症急性肾损伤,舒洛地特干预组血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)都明显下降。

(2)舒洛地特减轻脓毒症肾小管病理损伤,舒洛地特干预组肾小管细胞刷状缘脱落、细胞坏死程度明显减轻。

(3)舒洛地特减轻脓毒症炎症因子和组织因子(tissue factor,TF)的活性,舒洛地特干预组脓毒症小鼠外周血IL-1β水平和TF活性明显降低。

(4)舒洛地特减轻LPS刺激下的内皮细胞毒性,舒洛地特干预后,内皮细胞LDH水平明显降低、内皮通透性明显改善。

(5)舒洛地特减轻LPS刺激下的内皮细胞焦亡调控蛋白GSDMD的剪切活性和IL-1β的分泌,舒洛地特干预后,内皮细胞GSDMD-N表达明显降低、IL-1β水平明显下降。

附图说明

图1为舒洛地特对脓毒症急性肾损伤肾功能的影响图;图中左图为BUN图;右图为Scr图。

图2为舒洛地特对脓毒症肾小管伤的影响图;图中自左向右分别为对照组PAS染色图;模型组PAS染色图;舒洛地特组PAS染色图;肾小管损伤评分图。

图3为舒洛地特对脓毒症症因子和组织因子的活性的影响图;图中左图为IL-1β图;右图为组织因子图。

图4为舒洛地特对LPS刺激下的内皮细胞毒性的影响图;图中上图自左向右(显微光镜下)分别为对照组图;模型组图;舒洛地特组图;下图左图为细胞毒性(%)图;右图为内皮细胞渗透性图。

图5为舒洛地特对LPS刺激下的内皮细胞GSDMD和IL-1β的活性影响图;图中1为对照组,2为LPS刺激组,3为舒洛地特+LPS刺激组。左图为(Western blot蛋白印迹图,);右图为ELSA方法检测的IL-1β图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式来对本申请作更进一步的说明,以便本领域的技术人员更了解本申请,但并不以此限制本发明。

舒洛地特治疗脓毒症急性肾损伤的药理实验资料

一、试验方法

盲肠结扎穿刺术(cecal ligation puncture,CLP)模型建立与实验分组:

CLP模型能很好模拟人类脓毒症-AKI,因此采用此模型。将麻醉小鼠并固定于手术板上;75%乙醇擦拭灭菌后,沿腹中线中间靠下位置纵向开口约1.5cm;纱布铺于开口处,穿过纱布中间将盲肠取出,置于湿润的纱布上;沿盲肠中间位置进行结扎,然后使用21G注射器针头将被结扎的盲肠刺穿;针头取出后,小心挤出1mm的盲肠内含物,将盲肠放回原位;将开口处缝合,皮下注射1ml生理盐水进行苏醒,防止术后脱水。对照组(sham)小鼠进行假手术,即进行除结扎和穿刺外的所有手术操作。手术结束后,小鼠48h处死。

实验分组:对照组、脓毒症(CLP)组、舒洛地特组。舒洛地特在造模前1小时,按舒洛地特60LSU/Kg/24h尾静脉注射注射。

二、结果:

(1)实验数据如下:BUN:对照组(8.16±1.32);脓毒症模型组(87.43±10.7);舒洛地特组(50.61±9.75);Scr:对照组(0.20±0.031);脓毒症模型组(0.91±0.14);舒洛地特组(0.37±0.66)。实验数据和图1结果显示:舒洛地特减轻脓毒症急性肾损伤,舒洛地特干预组血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)都明显下降(见图1)。

(2)舒洛地特减轻脓毒症肾小管病理损伤,舒洛地特干预组肾小管细胞刷状缘脱落、细胞坏死程度明显减轻(见图2)。

(3)舒洛地特减轻脓毒症炎症因子和组织因子(tissue factor,TF)的活性,舒洛地特干预组脓毒症小鼠外周血IL-1β水平和TF活性明显降低(见图3)。

(4)舒洛地特减轻LPS刺激下的内皮细胞毒性,舒洛地特干预后,内皮细胞LDH水平明显降低、内皮通透性明显改善(见图4)。

(5)舒洛地特减轻LPS刺激下的内皮细胞焦亡调控蛋白GSDMD的剪切活性和IL-1β的分泌,舒洛地特干预后,内皮细胞GSDMD-N表达明显降低、IL-1β水平明显下降(见图5)。

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