Tlr7激动剂
阅读说明：本技术 Tlr7激动剂 (TLR7 agonists ) 是由 S·E·韦伯 J·R·爱普曼 于 2019-05-24 设计创作，主要内容包括：本发明涉及式I的TLR7激动剂及其在疾病如癌症和感染性疾病的治疗中的用途。(The present invention relates to TLR7 agonists of formula I and their use in the treatment of diseases such as cancer and infectious diseases.)
技术领域
本发明提供TLR7激动剂及其在治疗应用中的使用。本发明提供使用TLR7激动剂治疗感染、免疫失调和癌症的方法。
背景技术
癌症免疫疗法的最终目标是通过免疫系统根除肿瘤细胞。免疫系统的先天臂和适应性臂都能够有助于消灭肿瘤细胞，其中自然杀伤(NK)细胞和T细胞分别是关键角色。对肿瘤细胞的适应性免疫应答的关键是CD8+细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的活化，其能够在识别肿瘤相关抗原(TAA)后利用它们对肿瘤细胞的细胞毒性潜力。原初CD8+细胞的活化通过抗原呈递细胞(APC)进行，而树突细胞(DC)被认为是最专门的APC。这些细胞捕获并处理TAA，将表位和组织相容性复合体(MHC)分子呈递在其膜上。基于危险信号的APC的成熟对以刺激性方式向T细胞的呈递而言是至关重要的。
尽管TAA特异性T细胞有消灭肿瘤细胞的潜力，但外周T细胞对TAA的耐受性防止了对肿瘤的有效免疫应答。打破T细胞对TAA的耐受性的方法可以分为两类：(a)主动特异性免疫疗法(也称为癌症疫苗)和(b)被动特异性免疫疗法(通过抗肿瘤T细胞的过继转移或通过单克隆抗体)。肿瘤细胞的低免疫原性也是癌症免疫疗法的潜在问题。该低免疫原性的原因是TAA主要是自体抗原，并且也由于人类白细胞抗原和肿瘤细胞膜上的共刺激分子的下调。而且，肿瘤细胞通过分泌干扰DC和T细胞功能的免疫抑制分子来主动抑制免疫系统。
Toll样受体(TLR)是一类在先天免疫系统中起关键作用的蛋白质。TLR是一种模式识别受体(PRR)，识别被病原体广泛共享但区别于宿主分子的分子，其统称为病原体相关分子模式(PAMP)。它们是单个的、跨膜的非催化受体，通常在前哨细胞如巨噬细胞和树突细胞上表达，其识别源自微生物的结构保守分子。
TLR 3、7、8、和9形成一组细胞内TLR，并识别细菌或病毒核酸。TLR7和TLR8的天然配体是富含鸟苷和/或尿苷的单链RNA。TLR7和TLR8也被某些小的合成化合物活化。咪唑并喹啉衍生物咪喹莫特(R837)和瑞喹莫德(resiquimod)(R848)被描述为小鼠中的TLR7配体(Hemmi等，2002,Nat.Immunol.3:196–200)。此外，鸟苷类似物洛索立宾(Loxoribine)为鉴定为TLR7配体(Heil等，2003，Eur.J.Immunol.33:2987–2997)。其他TLR7和/或TLR8配体包括CL097(3M-001)、852A和CL075。
尽管TLR7和TLR8在结构上相似，但它们的活化对先天免疫细胞和随后的细胞因子产生有明显的影响。据报道TLR8激动剂在诱导促炎性细胞因子和趋化因子(如外周血单核细胞(PBMC)中的肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-12和巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-1α)时比TLR7激动剂更有效。相反地，据报道TLR7激动剂活化浆细胞样树突细胞和诱导干扰素(IFN)-α的产生。
在发现了TLR7/8激动剂咪喹莫特保护豚鼠免受疱疹病毒感染的功效后，咪喹莫特也被证明对几种可移植的鼠类肿瘤有效。据报道，对咪喹莫特(乳膏)局部治疗的临床反应性对于原发性皮肤肿瘤和皮肤转移均有效。在这些报告中，未添加TAA，咪喹莫特的免疫增强作用足以引起抗肿瘤应答。据报道，咪喹莫特治疗还与部分或全部地与逆转恶变前光化性角化病中某些基因的异常表达有关，从而证明了咪喹莫特预防癌症发展的能力。
尽管在局部癌症中用TLR7激动剂进行治疗显示出良好的抗癌作用，但通过口服或全身途径施用这些激动剂仍具有挑战性。在一项针对丙型肝炎病毒感染患者的临床II期研究中，R848通过口服途径给药，对血浆肝炎病毒滴度显示出治疗效果，但具有剂量限制性毒性。在另一项研究中，在II期研究中对TLR7激动剂852A在患有转移性黑色素瘤的患者中进行了三周静脉内剂量测试。该研究表明，某些患者的疾病稳定时间延长，血清IFNα和IP-10升高，但是两名患者存在剂量限制性毒性。这些研究表明，由于治疗窗口狭窄，在患者中全身使用TLR7激动剂可能是一个挑战。
发明内容
本发明通常涉及用作TLR7激动剂的化合物、其组合物、其制备方法及其使用方法。
在一个实施方式中，本发明涉及根据式I的TLR7激动剂化合物：
其中
R1是–H、–OH、-O-C(O)-R6或–F，
R2是–H或–F，
R3独立地是–OH或–O-C(O)-R7，
R4是–(C1-C8)烷基、–(C1-C8)烯基、–(C1-C8)炔基、–(C1-C8)卤代烷基、–(CH2)n(环烷基)、–(CH2)n(杂环基)、–(CH2)n(芳基)、–(CH2)n(杂芳基)或–(CH2)nC(O)OR6，
R5是–H、–OH、-OCH3、–SH或–Cl，
R6和R7独立地为–(C1-C8)烷基或芳基，
n是1、2、3、4或5的整数，
其中每个烷基、环烷基、烯基、炔基、卤代烷基、芳基、杂芳基和杂环基独立地被CN、NO2、卤素、(C1-C3)烷基、(C1-C3)卤代烷基、芳基、杂芳基、OH、烯基、炔基、O-(C1-C3)烷基、O-(亚烃基)芳基、O-(亚烃基)杂芳基、C(O)R8、S(C1-C8)烷基、S(O)烷基、SO2烷基、C(O)OR8、C(O)NR8R8、C(O)NR8SO2烷基、NR8R8、NR8(CO)OR8、NH(CO)R8、NH(SO2)烷基或NH(SO2)NR8R8任选取代，并且R8独立地为-H、-OH、-(C1-C8)烷基、环烷基、杂环基，或C(O)NR8R8或NR8R8的两个R8与氮原子组合在一起以形成杂环；
或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在其他实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物可单独使用，或与其他另外的治疗剂和治疗程序结合使用，以治疗或预防需要这样的治疗或预防的对象的癌症或感染或传染性疾病。
在其他实施方式中，本发明提供包含以下的药物组合物：(i)治疗有效量的至少一种式I化合物或其立体异构体，互变异构体或药学上可接受的盐；(ii)与药学上可接受的运载体、稀释剂或赋形剂组合。包含药学上可接受的运载体、稀释剂、或赋形剂以及其他治疗剂的药物组合物也是本发明的一部分。
本发明的上述实施方式和其他方面在下面的发明详述中显而易见。为此，本文阐述了各种参考文献，其更详细地描述了某些背景信息、程序、化合物和/或组合物，并且各自通过引用整体并入本文。
发明详述
本发明提供作为TLR7激动剂的化合物。本发明包括在不实质性活化TLR8的情况下活化TLR7的TLR7激动剂。
定义
为了使本发明更容易理解，下面具体定义了某些技术术语。除非在本文的其他地方特别定义，否则本文使用的所有其他技术和科学术语具有本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义。
在以下描述中，为了提供对本发明各个实施方式的透彻理解，陈述了许多特定细节。然而，本领域技术人员将理解，可以在没有这些细节的情况下实践本发明。除非上下文另外要求，否则在本说明书和权利要求书中，词语“包括”及其变体如“含有”和“包含”应以开放的，包含性的含义来解释(即“包括但不限于”)。
说明书中提及的“一个实施方式”或“一种实施方式”表示连同实施方式描述的具体特征、结构或性质包括在本发明的至少一个实施方式中。因此，在说明书中各种地方出现的短语“在一个实施方式中”或“在实施方式中”不一定全部都涉及同一个实施方式。而且，具体的特征、结构、或性质可以任何合适的方式组合在一个或多个实施方式中。
如本文所用，包括所附权利要求，单词的单数形式如“一个”、“一种”和“这种”包括其对应的复数引用，除非上下文另外明确指出。
“施用”和“治疗”适用于动物、人、实验对象、细胞、组织、器官或生物液体，是指外源性药物、治疗剂、诊断剂或组合物与动物、人、实验对象、细胞、组织、器官或生物液体的接触。细胞的治疗包括试剂与细胞的接触以及试剂与液体的接触，其中液体与细胞是接触的。“施用”和“治疗”还指例如通过试剂、诊断、结合化合物或通过另一细胞对细胞进行的体外和离体治疗。
“治疗”或“处理”是指向具有一种或多种疾病症状或被怀疑患有疾病的对象或患者内部或外部给予具有治疗活性的治疗剂、如包含任意的本发明的抗体或抗原结合片段的组合物。典型地，所述治疗剂以有效减轻被治疗的对象或人群中一种或多种疾病症状的量被给予，无论是通过以任何临床可测量的程度诱导此类症状的消退还是对其进行抑制。有效减轻任何特定疾病症状的治疗剂的量可根据因素如患者的疾病状态、年龄和体重、以及药物在对象中引起所需反应的能力而变化。可以通过医师或其他熟练的医疗保健提供者通常用来评估该症状的严重性或进展状态的任何临床测量方法，来评估该疾病症状是否得到减轻。
“氨基”是指-NH2取代基。
“氨基羰基”是指–C(O)NH2取代基。
“羧基”是指–CO2H取代基。
“羰基”是指–C(O)-或–C(＝O)-基团。两种符号在说明书中可以互换使用。
“氰基”是指–C≡N取代基。
“乙酰基”是指–C(O)CH3取代基。
“羟基”是指-OH取代基。
“氧代”是指＝O取代基。
“硫醇”或“巯基”是指–SH取代基。
“烷基”是指仅由碳原子和氢原子组成的饱和的、直链或支链烃链基团，具有一至十二个碳原子(C1-C12烷基)、一至八个碳原子(C1-C8烷基)或一至六个碳原子(C1-C6烷基)，其通过单键连接到分子的其余部分。示例性的烷基包括甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、1,1-二甲基乙基(叔丁基)、3-甲基己基、2-甲基己基等。可以被烷基取代的部分选自但不限于：羟基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、硫代烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、硫酸酯/盐、膦酸、磷酸酯/盐或膦酸酯/盐，如本领域技术人员所知，可以是未保护的，也可以根据需要进行保护，例如，Greene等人在《有机合成中的保护基团》(Protective Groups in Organic Synthesis)(John Wiley and Sons，第二版，1991年)中所述。
“低级烷基”具有与以上定义的烷基相同的含义，但是具有一至三个碳原子(C1-C3烷基)。
“烯基”是指具有至少一个双键、和二至十二个碳原子(C2-C12烯基)、二至八个碳原子(C2-C8烯基)、或二至六个碳原子(C2-C6烯基)的不饱和烷基，且其通过单键连接至分子的其余部分，例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基等。
“炔基”是指具有至少一个三键、和二至十二个碳原子(C2-C12炔基)、二至十个碳原子(C2-C10炔基)、二至八个碳原子(C2-C8炔基)、或二至六个碳原子(C2-C6炔基)的不饱和烷基，且其通过单键连接至分子的其余部分，例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。
“亚烃基”或“亚烃基链”是指仅由碳和氢组成的、将分子的其余部分连接至基团的直链或支链二价烃(烷基)链。亚烃基可以具有一至十二个碳原子，例如亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚正丁基等。亚烃基链通过单键或双键连接到分子的其余部分。亚烃基链与分子其余部分的连接点可以通过链中的一个碳或任何两个碳。“任选取代的亚烃基”是指亚烃基或取代的亚烃基。
“烷氧基”是指式-ORa的基团，其中Ra是如上所定义的具有指定碳原子数的烷基。烷氧基的实例包括但不限于-O-甲基(甲氧基)、-O-乙基(乙氧基)、-O-丙基(丙氧基)、-O-异丙基(异丙氧基)等。
“芳基”是指包含氢、6至18个碳原子和至少一个芳族环的烃环系统基团。示例性的芳基是包含氢和6至9个碳原子和至少一个芳族环的烃环系统基团；包含氢和9至12个碳原子和至少一个芳环的烃环系统基团；包含氢和12至15个碳原子和至少一个芳环的烃环系统基团；或包含氢和15至18个碳原子和至少一个芳环的烃环系统基团。为了本发明的目的，芳基可以是单环，双环，三环或四环的环系统，其可以包括稠合或桥接的环系统。芳基包括但不限于衍生自醋蒽烯(aceanthrylene)、苊烯(acenaphthylene)、醋菲烯(acephenanthrylene)、蒽、柑菊环(azulene)、苯、(chrysene)、萤蒽(fluoranthene)、芴、不对称苯并二烯(as-indacene)、对称苯并二烯(s-indacene)、茚满(indane)、茚、萘、非那烯(phenalene)、菲、七曜烯(pleiadene)、芘和苯并菲(triphenylene)的芳基。“任选取代的芳基”是指芳基基团或取代的芳基基团。芳基基团可以被自但不限于羟基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、硫酸酯/盐、膦酸、磷酸酯/盐或膦酸酯/盐的一个或多个取代，如本领域技术人员所知，可以是未保护的，也可以根据需要进行保护，例如，Greene等人在《有机合成中的保护基团》(Protective Groups in Organic Synthesis)(John Wiley and Sons，第二版，1991年)中所述。
“环烷基”是指仅由碳和氢原子组成的稳定的非芳族单环或多环烃基，其中可能包括具有三至十五个碳原子、优选具有三至十个碳原子、三至九个碳原子、三至八个碳原子、三至七个碳原子、三至六个碳原子、三至五个碳原子的稠环或桥环系统，具有四个碳原子的环或具有三个碳原子的环。环烷基环可以是饱和的或不饱和的，并通过单键连接至分子的其余部分。单环基团包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和、环庚基、和环辛基。多环基团包括例如金刚烷基、降冰片基、十氢萘基、7,7-二甲基-双环[2.2.1]庚基等。
“稠合”是指本文所述的任何环结构与本发明的化合物的现有环结构稠合。当稠环为杂环基环或杂芳基环时，现有环结构上成为稠合杂环基环或稠合杂芳基环的一部分的任何碳原子可以被氮原子取代。
“卤素”或“卤代”是指溴、氯、氟或碘。
如本文所定义，“卤代烷基”是指具有指定数目的碳原子的烷基，其中烷基的一个或多个氢原子被如上文所定义的卤素(卤代基)取代。所述卤素原子可以相同或不同。示例性的卤代烷基是三氟甲基、二氟甲基、三氯甲基、2,2,2-三氟乙基、1,2-二氟乙基、3-溴-2-氟丙基、1,2-二溴乙基等。
“杂环基”或“杂环”是指稳定的3至18元饱和的或不饱和的基团，其由二至十二个碳原子和一至六个选自氮、氧和硫的杂原子组成，例如，一至五个杂原子、一至四个杂原子、一至三个杂原子、或一至二个杂原子。示例性的杂环包含但不限于：稳定的3-15元饱和的或不饱和的基团、稳定的3-12元饱和的或不饱和的基团、稳定的3-9元饱和的或不饱和的基团、稳定的8元饱和的或不饱和的基团、稳定的7元饱和的或不饱和的基团、稳定的6元饱和的或不饱和的基团、或稳定的5元饱和的或不饱和的基团。
除非说明书中另有明确说明，杂环基基团可以是单环，双环，三环或四环系统，其可能包括稠环或桥环系统；杂环基中的氮原子、碳原子或硫原子可任选地被氧化；氮原子可任选被季铵化；杂环基可以部分或完全饱和。非芳族杂环基基团的实例包括但不限于：氮杂环丁烷基、二氧戊环基、噻吩基[1,3]二噻吩基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑烷基、异恶唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、2-哌嗪基、2-哌啶基、2-吡咯烷基、噁唑烷基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑烷基、奎宁环基、噻唑烷基、四氢呋喃基、硫杂环丁基、三噻吩基、四氢吡喃基、硫代吗啉基、硫杂吗啉基(thiamorpholinyl)、1-氧代-硫代吗啉基、和1,1-二氧代-硫代吗啉基。杂环基包括本文所定义的杂芳基，并且在下文杂芳基的定义中列出了芳族烷基的实例。
“杂芳基”是指包含氢原子、一至十三个碳原子、一至六个杂原子和至少一个芳族环的5至14元环系统基团，所述杂原子选自氮、氧和硫。出于本发明的目的，杂芳基基团可以是稳定的5-12元环、稳定的5-10元环、稳定的5-9元环、稳定的5-8元环、稳定的5-7元环、或稳定的6元环，其包含至少1个杂原子、至少2个杂原子、至少3个杂原子、至少4个杂原子、至少5个杂原子或至少6个杂原子。杂芳基可以是单环、双环、三环或四环系统，其中可能包括稠环或桥环系统；杂芳基中的氮、碳或硫原子可以任选地被氧化；氮原子可任选被季铵化。杂原子可以是芳族或非芳族环的成员，但杂芳基中至少有一个环是芳族的。示例包括但不限于，氮杂基、吖啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并吲哚基、苯并二噁茂基、苯并呋喃基、苯并氧氮茂基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[b][1,4]二氧杂环庚三烯基(benzo[b][1,4]dioxepinyl)、1,4-苯并二噁烷基、苯并萘并呋喃基、苯并噁唑基、苯并二噁茂基、苯并二噁英基、苯并吡喃基、苯并吡喃酮基、苯并呋喃基、苯并呋喃酮基、苯并噻吩基(苯并硫代苯基)、苯并三唑基、苯并[4,6]咪唑并[1,2-a]吡啶基、咔唑基、噌啉基、二苯并呋喃基、二苯并硫代苯基、呋喃基、呋喃酮基、异噻唑基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、吲唑基、异吲哚基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、异喹啉基、吲嗪基、异噁唑基、萘啶基、噁二唑基、2-氧代氮杂基、噁唑基、环氧乙烷基、1-氧吡啶基、1-氧嘧啶基、1-氧吡嗪基、1-氧哒嗪基、1-苯基-1H-吡咯基、吩嗪基、吩噻嗪、吩噁嗪基、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、吡咯基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、喹啉基、奎宁环基、异喹啉基、四氢喹啉基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、三嗪基，和硫代苯基(即，噻吩基)。
本发明的化合物可能表现出互变异构现象。尽管式I不能明确表示所有可能的互变异构形式，但应理解，式I旨在代表所描绘化合物的任何互变异构形式，而不仅仅限于由式图描绘的特定化合物形式。例如，当R5为OH时，对于式I，应理解的是，无论取代基是否以如下所示的它们的烯醇或酮形式显示，它们代表相同的化合物。对于本领域技术人员显而易见的是，化合物如化合物1：
可以以如化合物1A和1B的互变异构形式存在：
“分离的核酸分子”或“分离的多核苷酸”是指基因组的DNA或RNA、mRNA、cDNA或其合成来源或某种组合，其与自然界中发现的分离的多核苷酸的全部或部分多核苷酸不相关，或与自然界中不相关的多核苷酸相关。为了本公开的目的，应当理解，“包含”特定核苷酸序列的核酸分子不包含完整的染色体。除特定序列外，“包含”特定核酸序列的分离的核酸分子可包括至多十个或至多二十个或更多其他蛋白质或其部分或片段的编码序列，或者可以包括控制所述核酸序列的编码区的表达的可操作地连接的调节序列，和/或可以包括载体序列。
短语“控制序列”是指在特定宿主生物中表达有效连接的编码序列所必需的DNA序列。适用于原核生物的控制序列例如包括启动子、任选的操纵子序列和核糖体结合位点。已知真核细胞使用启动子、聚腺苷酸化信号和增强子。
当将核酸置于与另一核酸序列的功能性关系中时，其是“可操作地连接”。例如，如果前体序列或分泌前导体的DNA表达为参与多肽分泌的前体蛋白质，则其与多肽的DNA可操作地连接；如果启动子或增强子影响编码序列的转录，则启动子或增强子与编码序列可操作地连接；或者如果核糖体结合位点被定位以便于翻译，则该核酸体结合位点与编码序列可操作地连接。通常但并不总是地，“可操作地连接”是指被连接的DNA序列是连续的，并且在分泌性前导序列的情况下是连续的且在阅读框中。但是，增强子不必是连续的。通过在方便的限制性位点进行连接来完成相连。如果不存在这样的位点，则根据常规实践使用合成的寡核苷酸衔接子或接头。
本文所用的术语“细胞”、“细胞系”和“细胞培养物”可互换使用，并且所有这样的名称包括子代。因此，词语“转化体”和“转化细胞”包括原代对象细胞和由其衍生的培养物，而不考虑传代的数量。还应理解，由于有意或偶然的突变，不是所有的后代的DNA内容都精确相同。包括功能或生物活性与在原始转化细胞中筛选的功能或生物活性相同的突变子代。如果打算使用不同的名称，则从上下文中可以清楚看出。
如本文所用，“种系序列”是指未重排的免疫球蛋白DNA序列的序列。可以使用未重组免疫球蛋白序列的任何合适来源。人种系序列可例如从美国国立卫生研究院(UnitedStates National Institutes of Health)的国立关节炎、肌肉骨骼和皮肤病研究所(National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin Diseases)的网站上的JOINSOLVER种系数据库获得。小鼠种系序列可以例如根据Giudicelli等(2005)Nucleic Acids Res.33：D256-D261中所述获得。
术语“与……结合”表示可以将本发明的方法中给予的组分配制成用于同时递送的单一组合物、或分别配制成两种或更多种组合物(例如，试剂盒)。每个组分可以在与其他组分不同的时间给予对象；例如，每次给予可以在给定的时间段内以几个间隔非同时地(例如，分别地或顺序地)提供。此外，可以通过相同或不同的途径将分离的组分给予对象。
如本文所用，术语“有效量”是指本发明的TLR7激动剂化合物的量，当单独或与另外的治疗剂组合给予细胞、组织或对象时，其有效地引起一种或多种疾病症状例如癌症或癌症进展的可测量的改善。有效剂量还指足以至少部分改善症状(例如肿瘤缩小或消除、肿瘤生长不足、存活时间延长)的化合物或其药物组合物的量。在涉及单独给予单个活性组分时，有效剂量仅指该组分。当应用于组合时，有效剂量是指导致治疗效果的活性成分的组合量，无论是组合、连续或同时施用。有效量的治疗将导致诊断措施或参数改善至少10％；通常至少增加20％；优选至少约30％；更优选至少40％，最优选至少50％。在使用主观指标评估疾病严重程度的情况下，有效量还可以改善主观指标。
“对象”可以是哺乳动物，如人、狗、猫、马、牛、小鼠、大鼠、猴(例如食蟹猴(cynomolgous monkey)，例如猕猴(Macaca fascicularis))或兔。在本发明的优选实施方式中，对象是人类对象。
TLR7激动剂
本发明的一个方面包括式I的TLR7激动剂化合物：
其中
R1是–H、–OH、-O-C(O)-R6或–F，
R2是–H或–F，
R3独立地是–OH或–O-C(O)-R7，
R4是–(C1-C8)烷基、–(C1-C8)烯基、–(C1-C8)炔基、–(C1-C8)卤代烷基、–(CH2)n(环烷基)、–(CH2)n(杂环基)、–(CH2)n(芳基)、–(CH2)n(杂芳基)或–(CH2)nC(O)OR6，
R5是–H、–OH、-OCH3、–SH或–Cl，
R6和R7独立地为–(C1-C8)烷基或芳基，
n是1、2、3、4或5的整数，
其中每个烷基、环烷基、烯基、炔基、卤代烷基、芳基、杂芳基和杂环基独立地被CN、NO2、卤素、(C1-C3)烷基、(C1-C3)卤代烷基、芳基、杂芳基、OH、烯基、炔基、O-(C1-C3)烷基、O-(亚烃基)芳基、O-(亚烃基)杂芳基、C(O)R8、S(C1-C8)烷基、S(O)烷基、SO2烷基、C(O)OR8、C(O)NR8R8、C(O)NR8SO2烷基、NR8R8、NR8(CO)OR8、NH(CO)R8、NH(SO2)烷基或NH(SO2)NR8R8任选取代，并且R8独立地为-H、-OH、-(C1-C8)烷基、环烷基、杂环基，或C(O)NR8R8或NR8R8的两个R8与氮原子组合在一起以形成杂环；
或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中R1是-H、-OH、或-F。
在一个实施方式中R1是-OH。
在一个实施方式中R1是-H。
在一个实施方式中R1是-F。
在一个实施方式中R2是-H或-F。
在一个实施方式中R2是-H。
在一个实施方式中R2是-F。
在一个实施方式中R3是-OH或-O-C(O)-CH3。
在一个实施方式中R3是–OH。
在一个实施方式中R3是-O-C(O)-CH3。
在一个实施方式中R1和R3独立地为-OH。
在一个实施方式中R1和R3独立地为-O-C(O)-CH3。
在一个实施方式中R4是-(CH2)(环丙基)、-CH2CCH、-(CH2)3CH3或-CH2CF3。
在一个实施方式中R4是-(CH2)(环丙基)。
在一个实施方式中R4是-CH2CCH。
在一个实施方式中R4是-(CH2)3CH3。
在一个实施方式中R4是-CH2CF3。
在一个实施方式中R5是-H或-OH。
在一个实施方式中R5是-H。
在一个实施方式中R5是-OH。
在一个实施方式中R7是-(C1-C8)烷基。
在一个实施方式中R7是-CH3。
在一个实施方式中R8是-H、-OH、-CH3、或-CH2CH3。
在一个实施方式中R8是-H。
在一个实施方式中R8是-OH。
在一个实施方式中R8是-CH3。
在一个实施方式中R8是-CH2CH3。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物1，其可称为2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)-四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在另一个实施方式中式I的化合物是化合物2，其可称为7-烯丙基-2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)-四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮；或7-烯丙基-2-氨基-9-(β-D-呋喃木糖基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物3，其可称为2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)-四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-嘌呤-8-酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物4，其可称为(2R,3R,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物27，其可称为2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物30，其可称为2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物29，其可称为((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)乙酸甲酯，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物26，其可称为2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物32，其可称为2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物31，其可称为((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)乙酸甲酯，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物28，其可称为2-氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物32S，其可称为2-氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物31S，其可称为((2R,3S,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)乙酸甲酯，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物135，其可称为2-氨基-7-丁基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物337，其可称为2-氨基-7-丁基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物336，其可称为((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-丁基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)乙酸甲酯，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物37，其可称为2-氨基-7-丁基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物225，其可称为2-氨基-7-丁基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物224，其可称为((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-丁基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)乙酸甲酯，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物138，其可称为2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物343，其可称为2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物342，其可称为((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)乙酸甲酯，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物80，其可称为2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物231，其可称为2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物230，其可称为((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)乙酸甲酯，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物134，其可称为2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物335，其可称为2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物334，其可称为((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)乙酸甲酯，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物77，其可称为2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物223，其可称为2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在一个实施方式中式I的化合物是化合物222，其可称为((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)乙酸甲酯，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物。
在另一个实施方式中式I的化合物选自表1，与洛索立宾(Loxoribine)进行比较。
表1.式I的化合物
一般实验
式I的化合物可通过下述一般方法制备。
在一种方法(方案1)中，合成制剂可以源自鸟苷核苷类似物II，其中R1可以是H、OH、F，并且R2是H或F并且R3是OH。鸟嘌呤碱基的C-8可以在Holmes等，JACS，1964，1242页和Sheu等，JACS，1995，6439页描述的条件下溴化，得到8-溴-鸟苷衍生物III。氧可通过Holmes等，JACS，1964，1242页和Sheu等，JACS，1995，6439页描述的苄醇的醇盐对III的溴进行SNAr置换而在C-8处被引入，得到8-苄氧基-鸟苷衍生物IV。在C-8处的氧脱苄基之前，需要保护N-1处的氮，以实现N-7的选择性烷基化。Broom等，JOC，1969，1025页描述了鸟苷N-1的氨基化，其本质上作为保护基团起作用。因此，中间体IV可以在碱性条件下暴露于羟胺-O-磺酸，得到N-1个氨基鸟苷衍生物V。然后可以在许多脱醚反应条件下，优选通过与钯金属的催化氢化，从C-8氧中除去苄基，得到环状脲中间体VI。中间体VI的N-7烷基化可以在碱性条件下用R4-Lv完成，得到N-7烷基中间体VII。R4是C1-C8烷基基团且Lv定义为离去基团如卤素原子、OSO2CH3(甲磺酸酯)、OSO2CF3(三氟甲磺酸酯)、或OSO2Ar其中Ar是4-甲基苯基(甲苯磺酸酯)。合成的最后步骤如美国专利5,093,318中所述，通过在水性酸性条件下与亚硝酸钠形成重氮盐，实现VII的N-1脱氨基反应，得到所需的式I化合物，其中R5为OH。
方案1
另一种方法(方案2)从中间体IV(如上所述)开始，其中酰胺氧通常可以用磷酰氯转化为6-氯嘌呤中间体VIII。然后可以通过催化氢化或用三卤化硼如BCl3选择性除去C-8处的苄基醚，得到中间体IX。中间体IX的N-7烷基化可以在碱性条件下用R4-Lv完成，得到式I的N-7烷基化合物。R4和Lv在方法A中定义。
R5为氯的式I化合物可以进一步转化为R5为H、OH或OCH3的其他式I化合物。为了获得其中R5为H的式I化合物，可以利用加氢脱卤反应。通常可以在Pt的Pd或乙酸中的活化锌的氢化条件下进行该转化。可以在碱性水溶液或酸性条件下将C-6氯取代为羟基。该氯也可以用甲醇根阴离子置换以产生其中R5为OCH3的式I化合物。
方案2
又一种方法(方案3)从中间体IV(如上所述)开始，其中酰胺氧通常可以用五硫化二磷、拉韦松试剂(Lawesson’s reagent)或类似产品转化为6-硫代嘌呤中间体X。可以用拉尼镍(Raney nickel)还原硫基团，得到中间体XI。然后可以通过催化氢化或用三卤化硼如BCl3选择性除去C-8处的苄基醚，得到中间体XII。中间体XII的N-7烷基化可以在碱性条件下用R4-Lv完成，得到式I的N-7烷基化合物。R4和Lv如上所定义。
方案3
在另一种方法(方案4)中，6-氯-2,4-二氨基嘧啶[156-83-2]可用溴、N-溴琥珀酰亚胺或N-碘琥珀酰亚胺来卤化，以获得5-卤代-6-氯-2,4-二氨基嘧啶XIII。将中间体XⅢ暴露于烷基异氰酸酯可以形成相应的脲XⅣ。中间体XIV的分子内环化可在反应条件下，使用适当的Pd催化剂和膦配体，或通过在极性非质子溶剂中与碘化铜(I)与胺碱一起加热以提供式XV的2-氨基-6-氯-7-烷基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮来完成。然后可以将6-氯基团与氢和Pd或Pt金属加氢脱卤形成XVI，其中R5为H。为了形成其中R5为OH的6,8-二氧嘌呤XVII，可以将XV暴露于HCl水溶液或NaOH水溶液中。XV的6-氯基团也可以用甲醇根阴离子置换得到XVIII，其中R5为OCH3，或者用硫氢化钠置换得到XIX，其中R5是SH。通常，然后可以将嘌呤中间体XV-XIX在各种形成核苷的反应条件下暴露于糖衍生物XX，然后进行羟基脱保护得到式I的9-β-呋喃-嘌呤核苷类似物。有关形成核苷的合成条件的全面综述，请参见Romeo等，Chem.Rev.2010,110,3337-3370页。
方案4
以下概述了制备式XV的2-氨基-6-氯-7-烷基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮的另一种方法(方案5)。
方案5
从常见的中间体XIII开始，XXI可以在适当的钯催化剂和膦配体的反应条件下，由氨基甲酸叔丁烷基酯生成。该氨基甲酸酯中间体然后可以在热条件下经历分子内环化以形成式XV的嘌呤。
或者，可以通过类似的两步法，通过在适当的Pd催化剂和膦配体的反应条件下，由XIII和氨基甲酸叔丁酯形成XXII，来制备中间体XXI(方案6)。然后可以在碱性条件下用R4-Lv将氨基甲酸酯氮烷基化，生成XXI。
方案6
式XV的2-氨基-6-氯-7-烷基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮也可以通过XXI分两步合成，如下所示(方案7)。
方案7
将XXI暴露于三氟乙酸可以得到嘧啶XXIII，其可以进一步用羰基二咪唑或碳酸双(三氯甲基)酯或碳酸双(4-硝基苯基)酯或其他合适的脲形成试剂转化为XV。
下面示意性地描述了制备中间体XVII的替代方法(方案8)。嘧啶XIII的氯可以直接用苄醇的钠盐置换，形成XXIV。在与Pd催化剂、膦配体和烷基胺的适当反应条件下，可以形成6-(苄氧基)-N5-烷基取代的2,4,5-嘧啶XXV。XXVI可以由羰基二咪唑或碳酸双(三氯甲基)酯或碳酸双(4-硝基苯基)酯或其他合适的脲形成试剂产生。嘌呤中间体XXVI可以在催化氢化或其他醚裂解条件下反应形成XVII。
方案8
以下概述了制备式XXVI的2-氨基-6-苄氧基-7-烷基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮的第二种方法(方案9)。
方案9
使用适当的反应条件与Pd催化剂、膦配体和氨基甲酸叔丁酯烷基酯，可以形成中间体XXVII。该氨基甲酸酯中间体然后可以在热条件下经历分子内环化以形成式XXVI的嘌呤。
或者，将XXVII暴露于三氟乙酸可以得到嘧啶XXV，其可以随后用羰基二咪唑或碳酸双(三氯甲基)酯或碳酸双(4-硝基苯基)酯或其他合适的脲形成试剂转化为XXVI。
使用上述条件(方案4)使嘌呤碱基的N-9糖基化，XXVI和XX可用于产生XXVII(方案10)。苄基醚可通过催化氢化或用三卤化硼试剂相继除去，得到式I的化合物，其中R5为OH。
方案10
合成嘌呤中间体XXVI可能使用的另一种途径包括将中间体XXIV暴露于烷基异氰酸酯中，该烷基异氰酸酯可形成相应的脲XXVIII(方案11)。中间体XXVIII的分子内环化可在反应条件下，使用适当的Pd催化剂和膦配体，或通过在极性非质子溶剂中与碘化铜(I)与胺碱一起加热以提供式XXVI的2-氨基-6-苄氧基-7-烷基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮来完成。
方案11
在另一种方法中(方案12)，对称的4,6-二氯嘧啶-2,5-二胺[55583-59-0]的氯原子可以用苄胺如4-甲氧基苄胺置换成XXIX。将中间体XXIX暴露于光气或光气类似产品(如羰基二咪唑)可以形成相应的环状脲XXX。然后可以保护伯氨基以形成XXXI，其中P是保护基团如酰基或氨基甲酰基。中间体XXXI可以在酸性条件下与氢和Pd或Pt金属或活化的Zn加氢脱卤，形成XXXII。或者，可以用适当的醇、优选苄基醇取代XXXI的氯原子以形成XXXIII。N-保护的-N-9-苄基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮XXXI、XXXII和XXXIII可以在碱性条件下在N-7进一步用R4-Lv烷基化，分别得到N-7烷基化合物XXXIV、XXXV和XXXVI。R4和Lv在上文中定义。N-7烷基化后，XXXIV和XXXV的N-9可在适当条件下脱保护。根据伯胺上使用的保护基团，该基团也可以同时被除去。例如，在酸性条件下如三氟乙酸与三氟甲烷磺酸结合，可以分别由XXXIV和XXXV形成中间体XV和XVI。在类似的酸条件下，XVII可以由XXXVI形成。以类似的方式，可以使用方案12中描述的通用方法合成中间体XVIII和XIX。然后可以将嘌呤中间体XV-XIX在各种核苷形成反应条件下暴露于糖衍生物XX，然后如果需要得到式I的9-β-呋喃嘌呤嘌呤核苷类似物，则将羟基脱保护。同样，中间体XV-XVII的伯氨基可以被保护形成XXXVII-XLI，其中P是保护基，例如酰基或氨基甲酰基。然后可以将嘌呤中间体XXXVII-XLI在各种形成核苷的反应条件下暴露于糖衍生物XX，然后脱保护以得到式I的9-β-呋喃-嘌呤核苷类似物。
方案12
TLR7激动剂的治疗用途
先天免疫的TLR7活化主要通过浆细胞样树突细胞(pDC)介导。这些细胞是I型干扰素的主要生理产生者，高达其他任何细胞类型的1000倍。因此，TLR7的活化是整体诱导先天免疫反应的重要“守门人”。与其他TLR相比，TLR7作为治疗靶标具有显著优势。例如，它可以被能够口服的小分子活化。与其他几种TLR不同，TLR7的系统性活化可避免刺激TNF过度产生。
TLR7激动剂的直接或间接给予涉及多种抗肿瘤机制，包括：具有直接抗肿瘤活性的细胞因子和趋化因子的产生；控制癌症的先天免疫系统的主要效应细胞天然杀伤细胞(NK)的活化，其然后能够通过抗体依赖性(抗体依赖性细胞毒性或ADCC)和独立机制裂解肿瘤细胞；通过与pDC的直接细胞相互作用和通过pDC产生细胞因子和趋化因子，通过抗原呈递来活化T细胞并逆转T细胞衰竭，所有这些都导致T细胞介导的对肿瘤细胞的攻击增加；正常B细胞及其前体的增殖和成熟增加，可以增强具有抗肿瘤活性的抗体的内源性生产；通过活化这些细胞上的TLR7可以诱导异常B细胞的直接活性，从而诱导细胞凋亡和对化学疗法的超敏反应。
在一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物可单独使用，或与其他另外的治疗剂和治疗程序结合使用，以治疗或预防需要这样的治疗或预防的对象的癌症或感染或传染性疾病。
在一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物可单独使用或与肿瘤疫苗结合使用。
在一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物可单独使用或与化学治疗剂结合使用。
在一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物可单独使用或与放射疗法结合使用。
在一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物可单独使用或与靶向疗法结合使用。靶向疗法的实例包括：激素疗法，信号转导抑制剂(例如，EGFR抑制剂，如西妥昔单抗(cetuximab)(Erbitux)和厄洛替尼(erlotinib)(Tarceva))；HER2抑制剂(例如，曲妥珠单抗(trastuzumab)(Herceptin)和帕妥珠单抗(pertuzumab)(Perjeta))；BCR-ABL抑制剂(如伊马替尼(imatinib)(Gleevec)和达沙替尼(dasatinib)(Sprycel))；ALK抑制剂(如克唑替尼(crizotinib)(Xalkori)和赛立替尼(ceritinib)(Zykadia))；BRAF抑制剂(如威罗非尼(vemurafenib)(Zelboraf)和达拉非尼(dabrafenib)(Tafinlar))，基因表达调节剂，凋亡诱导剂(例如，硼替佐米(bortezomib)(Velcade)和卡非佐米(carfilzomib)(Kyprolis))，血管生成抑制剂(例如，贝伐单抗(bevacizumab)(Avastin)和雷莫昔单抗(ramucirumab)(Cyramza)，毒素附连的单克隆抗体(例如，维多地布伦妥昔单抗(brentuximab vedotin(Adcetris)和阿多曲妥珠单抗美坦新(ado-trastuzumab emtansine)(Kadcyla))。
在一个实施方案中，本发明的TLR7激动剂化合物可以与抗癌治疗剂、或免疫调节药物如免疫调节受体抑制剂、或与受体特异性结合的抗体或其抗原结合片段组合使用。
在一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物可以与免疫检查点抑制剂、OX40激动剂、4-1BB激动剂、ICOS激动剂、GITR激动剂或IL2-受体激动剂组合使用。
在一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物可以与PD-1、PD-L1、CTLA4、TIM3、LAG3、SIRPα、CD47、VISTA、BTLA或TIGIT的抑制剂或拮抗剂组合使用。
在一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物可以与至少部分通过ADCC介导的具有抗肿瘤活性的治疗性抗体组合使用。
在一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物可以与至少部分通过ADCC介导的具有抗肿瘤活性的治疗性抗体组合使用，包括利妥昔单抗(rituximab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)和阿仑单抗(alemtuzumab)。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与抗OX40抗体(包括MOXR0916和GSK3174998)或其他途径激动剂结合。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与抗4-1BB抗体(包括乌鲁单抗(urelumab)、乌托米鲁单抗(utomilumab))或其他途径激动剂结合。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与抗ICOS抗体或其他途径激动剂结合。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与抗GITR抗体或其他途径激动剂结合。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与IL-2-受体或其他途径激动剂结合。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与抗PD1或抗PDL1抗体、包括尼武单抗(nivlumab)(Opdivo)、派姆单抗(pembrolizumab)(Keytruda)、阿妥珠单抗(atezoluzimab)(Tecentriq)、德瓦鲁单抗(durvalumab)(Imfinzi)或阿维鲁单抗(avelumab)(Bavencio)结合。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与CTLA-4/CD80-CD86拮抗剂结合，包括伊匹单抗(ipilimumab)(Yervoy)。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与Tim-3途径拮抗剂结合，包括MBG453和TSR-022。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与LAG-3途径拮抗剂结合，包括BMS-986016、GSK2831781和IMP321。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与抗SIRPα抗体结合。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与抗CD47抗体结合。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与Vista途径拮抗剂结合。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与BTLA途径拮抗剂结合。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与TIGIT途径拮抗剂结合。
在另一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物提高免疫细胞的活性。免疫细胞的活性的提高可使用本领域公知的任意方法检测。在一个实施方式中，免疫细胞的活性的提高可通过测定免疫细胞的增殖来检测。例如，T细胞活性的提高可通过测定T细胞的增殖或信号转导事件(如免疫受体或下游激酶的酪氨酸磷酸化，将信号传递至转录调节子)来检测。在其他实施方式中，免疫细胞的活性的提高可通过测定特异性靶细胞上的CTL或NK细胞的细胞毒性或IFNγ细胞因子应答来检测，其与抗肿瘤免疫力的刺激有关。在其他实施方式中，免疫细胞的活性的提高可通过测定在源自对象的样品中离体测量T细胞活化来检测。
有益于提高细胞溶解性T细胞应答的其他试剂可以与本发明的TLR7激动剂化合物组合使用。这些包括但不限于：B7共刺激分子、白介素-2(例如，NKTR-214)、干扰素-γ、GM-CSF、CTLA-4拮抗剂、OX-40/OX-40配体、CD40/CD40配体、沙格司亭(sargramostim)、左旋咪唑、牛痘病毒、卡介苗(BCG)、脂质体、明矾、弗氏完全或不完全佐剂、解毒内毒素、矿物油、表面活性物质(如卵磷脂)、多元醇、聚阴离子、肽、以及油或烃乳液。
在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与一种或多种止吐药结合，包括但不限于：卡索匹坦(casopitant)(葛兰素史克(GlaxoSmithKline))、奈妥吡坦(Netupitant)(MGI-赫尔辛(Helsinn))和其他NK-1受体拮抗剂，帕洛诺司琼(palonosetron)(由MGI制药(MGI Pharma)作为Aloxi销售)，阿瑞匹坦(aprepitant)(由默克公司(Merck and Co.)作为Emend销售；新泽西州拉威)、苯海拉明(diphenhydramine)(由辉瑞(Pfizer)作为销售；纽约州纽约)、羟嗪(hydroxyzine)(由辉瑞作为销售；纽约州纽约)、甲氧氯普胺(由AH罗宾斯公司作为销售；弗吉尼亚州里士满)、劳拉西泮(lorazepam)(由惠氏作为销售；新泽西州麦迪逊)、阿普唑仑(alprazolam)(由辉瑞作为销售；纽约州纽约)、氟哌啶醇(由Ortho-McNeil作为销售；新泽西州力登)、氟哌利多屈大麻酚(由苏威制药有限公司(Solvay Pharmaceuticals，Inc.)作为销售；乔治亚州玛丽埃塔)、地塞米松(由默克公司作为销售；新泽西州拉威)、甲基泼尼松龙(由辉瑞作为销售；纽约州纽约)、氯丙嗪(由葛兰素史克作为销售；北卡罗来纳州三角研究园)、格拉司琼(由霍夫曼罗氏公司(Hoffmann-La Roche Inc.)作为销售；新泽西州纳特利)、恩丹西酮(葛兰素史克作为销售；北卡罗来纳州三角研究园)、多拉司琼(由赛诺菲-安万特(Sanofi-Aventis)作为销售；纽约州纽约)、托泼司琼(由诺华(Novartis)作为销售；新泽西州东汉诺威)。
癌症治疗的其他副作用包括红细胞和白细胞缺乏。因此，在本发明的一个实施方式中，TLR7激动剂化合物与治疗或预防这种缺乏症的药剂结合，包括非格司亭、PEG-非格司亭、促红细胞生成素、依泊汀(epoetin)α和达泊汀(darbepoetin)α。
在另一个实施方式中，本发明涉及包含一种或多种本发明的TLR7激动剂化合物和药学上可接受的运载体或稀释剂的组合物。这样的组合物可进一步包含一种或多种其他治疗活性成分如激动抗体或其抗原结合片段，或TNF受体蛋白、免疫球蛋白样蛋白、细胞因子受体、整联蛋白、信号传导淋巴细胞激活分子(SLAM蛋白)、OX40、4-1BB(CD137)、ICOS(CD278)、GITR、IL2R beta(CD122)和/或IL2Rγ的可溶性融合物。
本发明包含包括本发明的TLR7激动剂化合物和靶向PD-1/PD-L1相互作用或CTLA-4/CD80-CD86相互作用的一种或多种抗体的组合物。这样的抗体的非限制性实例包括：派姆单抗(pembrolizumab)、纳武单抗(nivolumab)、阿维鲁单抗(avelumab)、REGN2810、MEDI-0680、PDR-001、SHR-1210、BGB-A317、PF-06801591、TSR-042、阿妥珠单抗(atezoluzimab)、德瓦鲁单抗(durvalumab)、BMS-936559、伊匹单抗(ipilimumab)和特姆单抗(tremelimumab)。
尽管也可以使用刺激两种类型的应答的那些，但优选用于诱导相对于抗体应答优先刺激细胞溶解性T细胞应答的T细胞免疫应答的组合物。
在另一个实施方式中，包含一种或多种TLR7激动剂化合物的组合物可进一步包含一种或多种其他治疗活性成分，其为免疫检查点抑制剂、OX40激动剂、4-1BB激动剂、ICOS激动剂、GITR激动剂或IL2-受体激动剂。
在另一个实施方式中，包含一种或多种TLR7激动剂化合物的组合物可进一步包含一种或多种其他治疗活性成分，其为PD-1、PD-L1、CTLA4、TIM3、LAG3、SIRPα、CD47、VISTA、BTLA或TIGIT的抑制剂或拮抗剂。
在另一个实施方式中，包含一种或多种TLR7激动剂化合物的组合物可进一步包含一种或多种其他治疗活性成分，其为具有至少部分通过ADCC介导的抗肿瘤活性的治疗性抗体。
在另一个实施方式中，包含一种或多种TLR7激动剂化合物的组合物可进一步包含一种或多种其他治疗活性成分，其为具有至少部分通过ADCC介导的抗肿瘤活性的治疗性抗体，包括利妥昔单抗(rituximab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)和阿仑单抗(alemtuzumab)。
本发明还提供用本文公开的TLR7激动剂化合物在包括人类对象的对象中治疗或预防需要这样的治疗或预防的对象中的癌症或感染或传染性疾病的方法。在本发明的一个实施方式中，这样的对象患有癌症或癌前病症。在本发明的另一个实施方式中，这样的对象患有感染或传染性疾病。
在另一个实施方式中本发明还涉及人类对象中治疗或预防癌症的方法，其包括给予对象有效量的一种或多种本发明的TLR7激动剂化合物，任选地进一步与治疗剂或治疗程序结合；并且涉及治疗人类对象中感染或传染性疾病的方法，其包括给予对象有效量的一种或多种本发明的TLR7激动剂化合物，任选地进一步与治疗剂或治疗程序结合。
在又一个实施方式中，本发明还涉及提高免疫细胞的活性的方法，其包括给予对其有需要的对象有效量的一种或多种本发明的TLR7激动剂化合物以治疗或预防癌症；治疗感染或传染性疾病；用作疫苗佐剂；或提高免疫细胞活化。
在一个实施方式中，本发明提供使用本发明的TLR7激动剂化合物以治疗对象的方法，其中对象患有癌症或癌前病症。在一个实施方式中所述癌症例如是骨肉瘤、横纹肌肉瘤、神经母细胞瘤、肾癌、白血病、肾转移细胞癌、膀胱癌、威尔姆氏癌、卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、骨癌、肺癌(例如非小细胞肺癌)、胃癌、结肠直肠癌、子宫颈癌、滑膜肉瘤、头颈癌、鳞状细胞癌、多发性骨髓瘤、肾细胞癌、视网膜母细胞瘤、肝母细胞瘤、肝细胞癌、黑色素瘤、肾横纹肌瘤、尤因氏肉瘤、软骨肉瘤、脑癌、胶质母细胞瘤、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原始神经外胚层肿瘤、髓母细胞瘤、星形细胞瘤、间变性星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤、室管膜瘤、脉络丛乳头状瘤、真性红细胞增多症、血小板增多症、特发性骨髓纤维化、软组织肉瘤、甲状腺癌、子宫内膜癌、类癌或肝癌、乳腺癌或胃癌。在本发明的一个实施方式中，所述癌症是转移性癌症，例如上述的变种。
在一个实施方式中，本发明提供使用本发明的TLR7激动剂化合物以治疗对象的方法，其中对象患有病毒感染。在一个实施方式中，所述病毒感染选自以下的病毒感染：人类免疫缺陷病毒(HIV)、肝炎病毒(A、B或C)、疱疹病毒(例如VZV、HSV-1、HAV-6、HSV-II和CMV、爱泼斯坦巴尔病毒)、腺病毒、流感病毒、黄病毒、回声病毒、鼻病毒、柯萨奇病毒、冠状病毒、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、轮状病毒、麻疹病毒、风疹病毒、细小病毒、牛痘病毒、HTLV病毒、登革热病毒、乳头瘤病毒、软体动物病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病病毒、JC病毒或虫媒病毒性脑炎病毒。
在一个实施方式中，本发明提供使用本发明的TLR7激动剂化合物以治疗对象的方法，其中对象患有细菌感染。在一个实施方式中，所述细菌感染选自以下的细菌感染：衣原体(Chlamydia)、立氏菌(rickettsial bacteria)、分枝杆菌(mycobacteria)、葡萄球菌(staphylococci)、链球菌(streptococci)、肺炎球菌(pneumonococci)、脑膜炎球菌和淋球菌(meningococci and gonococci)、克雷伯菌(klebsiella)、变形杆菌(proteus)、锯齿状(serratia)、假单胞菌(pseudomonas)、军团菌(Legionella)、白喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheriae)、沙门氏菌(Salmonella)、杆菌(bacilli)、霍乱弧菌(Vibrio cholerae)、破伤风梭菌(Clostridium tetan)、肉毒梭状芽孢杆菌(Clostridiumbotulinum)、炭疽杆菌(Bacillus anthricis)、鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pestis)、麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)、麻风分枝杆菌(Mycobacterium lepromatosis)、和博氏杆菌(Borriella)。
在一个实施方式中，本发明提供使用本发明的TLR7激动剂化合物以治疗对象的方法，其中对象患有真菌感染。在一个实施方式中，所述真菌感染被选自以下的真菌感染：假丝酵母属(candida)(白色念珠菌(albicans)、克柔假丝酵母(krusei)、光滑念珠菌(glabrata)、热带念珠菌(tropicalis)等)、新隐球菌(Cryptococcus neoformans)、曲霉属(烟曲霉菌(fumigatus)、黑曲霉(niger)等)、毛霉菌目属(Genus Mucorales)(毛霉菌(mucor)、犁头霉(absidia)、根瘤菌(rhizopus))、申克氏孢子丝菌(Sporothrixschenkii)、皮炎芽生菌(Blastomyces dermatitidis)、巴西副球孢子菌(Paracoccidioides brasiliensis)、粗球孢子菌(Coccidioides immitis)和荚膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum)。
在一个实施方式中，本发明提供使用本发明的TLR7激动剂化合物以治疗对象的方法，其中对象患有寄生虫感染。在一个实施方式中，所述寄生虫感染选自以下的寄生虫感染：溶组织内阿米巴(Entamoeba histolytica)、结肠小袋绦虫(Balantidium coli)、福氏耐格里阿米巴(Naegleria fowleri)、棘阿米巴(Acanthamoeba)、兰伯氏贾第虫(Giardialambia)、隐孢子虫(Cryptosporidium)、卡氏肺孢子虫(Pneumocystis carinii)、间日疟原虫(Plasmodium vivax)、微小巴贝虫(Babesia microti)、布氏锥虫(Trypanosomabrucei)、克氏锥虫(Trypanosoma cruzi)、利什曼原虫(Leishmania donovani)、弓形虫(Toxoplasma gondii)和巴西日圆线虫(Nippostrongylus brasiliensis)。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物和一种或多种靶向对象的PD-1/PD-L1或CTLA-4/CD80-CD86相互作用的抗体。在本发明的一个实施方式中，本发明的TLR7激动剂化合物与抗PD1或抗PDL1抗体结合。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括与免疫检查点抑制剂、OX40激动剂、4-1BB激动剂、ICOS激动剂、GITR激动剂或IL2-受体激动剂联合给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括与PD-1、PD-L1、CTLA4、TIM3、LAG3、SIRPα、CD47、VISTA、BTLA或TIGIT的抑制剂或拮抗剂联合给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括与具有至少部分通过ADCC介导的抗肿瘤活性的治疗性抗体联合给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括与具有至少部分通过ADCC介导的抗肿瘤活性的治疗性抗体联合给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物，所述治疗性抗体包括利妥昔单抗(rituximab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)和阿仑单抗(alemtuzumab)。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与抗OX40抗体结合，包括MOXR0916和GSK3174998、或其他途径激动剂。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与抗4-1BB抗体结合，包括鲁单抗(urelumab)、乌托米鲁单抗(utomilumab)、或其他途径激动剂。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与抗ICOS抗体或或其他途径激动剂结合。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与抗GITR抗体或或其他途径激动剂结合。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与IL-2-受体或其他途径激动剂结合。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其中包括与抗PD1或抗PDL1抗体(包括尼武单抗(nivlumab)(Opdivo)、派姆单抗(pembrolizumab)(Keytruda)、阿妥珠单抗(atezoluzimab)(Tecentriq)、德瓦鲁单抗(durvalumab)(Imfinzi)或阿维鲁单抗(avelumab)(Bavencio))联合给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与CTLA-4/CD80-CD86拮抗剂(包括伊匹单抗(ipilimumab)(Yervoy))结合。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与Tim-3途径拮抗剂(包括MBG453和TSR-022)结合。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与LAG-3途径拮抗剂(包括BMS-986016、GSK2831781和IMP321)结合。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与抗SIRPα抗体结合。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与抗CD47抗体结合。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与Vista途径拮抗剂结合。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与BTLA途径拮抗剂结合。
本发明包含在对象中治疗或预防癌症的方法，其包括将给予有效量的本发明的TLR7激动剂化合物与TIGIT途径拮抗剂结合。
药物组合物和给药
本发明还提供了一种药物组合物，其包含：(i)治疗有效量的至少一种式I的化合物，或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐；(ii)与药学上可接受的运载体、稀释剂或赋形剂组合。包含药学上可接受的运载体、稀释剂、或赋形剂以及其他治疗剂的药物组合物也是本发明的一部分。
如本文所用，术语“药物”是指旨在用于缓解、治疗、或预防疾病的化学物质，其经过美国食品药品监督管理局(或非美国的其类似机构)批准的处方药或非处方药产品。此类组合物的配制和给药技术的详细信息可以在《雷明顿：药物科学与实践》(Remington：TheScience and Practice of Pharmacy)第21版(麦克出版公司(Mack Publishing Co.)，宾夕法尼亚州伊斯顿)以及Nielloud和Marti-Mestres的《药物乳剂和混悬剂》第2版(MarcelDekker公司(Marcel Dekker,Inc)，纽约)中找到。为了制备本发明的TLR7激动剂化合物的药物或无菌组合物，将所述化合物与药学上可接受的运载体或赋形剂混合。参见例如《雷明顿：药物科学与实践》麦克出版公司，宾夕法尼亚州伊斯顿(1984年)。
治疗剂和诊断剂的制剂可通过与例如冻干粉剂、浆剂、水溶液或混悬剂形式的可接受的运载体、赋形剂或稳定剂混合来制备(参见例如Hardman等(2001)《哥德曼和基尔曼的治疗的药理学基础》(Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis ofTherapeutics)，McGraw-Hill，纽约州纽约；Gennaro(2000)，《雷明顿：药学科学和实践》，Lippincott，Williams和Wilkins，纽约州纽约；Avis等编(1993)，《药物剂型：胃肠外药物》(Pharmaceutical Dosage Forms:Parenteral Medications)，Marcel Dekker，纽约州纽约；Lieberman等编(1990)，《药物剂型：片剂》(Pharmaceutical Dosage Forms:Tablets)，Marcel Dekker，纽约州纽约；Lieberman等编(1990)，《药物剂型：分散体系》(Pharmaceutical Dosage Forms:Disperse Systems)，Marcel Dekker，纽约州纽约；Weiner和Kotkoskie(2000)，《赋形剂的毒性与安全性》(Excipient Toxicity andSafety)，Marcel Dekker公司，纽约州纽约)。
单独或与另一种治疗剂联合给予的本发明化合物或组合物的毒性和治疗效力可用标准药物学方法在细胞培养物或实验动物中确定，例如确定LD50(对于50％群体的致死剂量)和ED50(对于50％群体有效的治疗剂量)。毒性和治疗效力之间的剂量比是治疗指数(LD50/ED50)。获自这些细胞培养实验和动物研究的数据可以用于配制对人的剂量范围。这样的化合物的剂量优选处于循环浓度范围内，所述循环浓度包括具有较少或不具有毒性的ED50。该剂量可根据剂型和给药途径在此范围内变化。
在又一个实施方式中，与本发明的TLR7激动剂化合物联合给予对象的又一种治疗剂根据《医师案头参考》(Physician's Desk Reference)2003年(汤姆森医疗保健(ThomsonHealthcare)；第57版(2002年11月1日))。
给予方式可以变化。出于本公开的目的，所述药物组合物可以通过多种方式给予，包括在含有药学上可接受的载体、佐剂和赋形剂的制剂中非胃肠外、胃肠外、通过吸入喷雾、局部或直肠给予。“非胃肠外给予”包括口服、颊、舌下、局部、透皮、眼、耳、鼻、直肠、宫颈、肺、粘膜和阴道途径。如本文所用，术语肠胃外包括但不限于通过各种输注技术进行的皮下、静脉内、肌内、动脉内、皮内、鞘内和硬膜外注射。如本文所用，动脉内和静脉内注射包括通过导管给予。还预期本发明的化合物在肿瘤内(直接进入肿瘤块)或肿瘤周围(在肿瘤块周围)给予。本文所用的术语口服包括但不限于口服摄取或通过舌下或颊途径递送。口服给予包括液体饮料、能量棒以及药丸制剂。
药物组合物可以是适合于预期给予方法的任何形式。当用于口服时，例如可以制备片剂、含片、锭剂、水性或油性悬浮液、可分散的粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、糖浆或酏剂。可以根据药物组合物制造商已知的任意方法来制备用于口服使用的组合物，所述组合物可以包含一种或多种试剂，所述试剂包括甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂，以提供可口的制备物。包含与适合于制造片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂混合的药物化合物的片剂是可接受的。这些赋形剂例如可以是惰性稀释剂，如碳酸钙或碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；成粒剂和崩解剂，如玉米淀粉或藻酸；粘合剂，如淀粉、明胶或阿拉伯胶；和润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可以是未包衣的、或者可以通过包括肠溶衣、结肠包衣或微囊化在内的已知技术进行包衣，以延迟在胃肠道中的崩解和吸收和/或在较长时间内提供持续作用。例如，可以使用延时材料、如单独或与蜡一起使用的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
本发明提供了包含一种或多种本发明化合物或其药物组合物的容器(例如，塑料或玻璃小瓶，例如具有盖或色谱柱、空心针或注射器筒)。本发明还提供包含一种或多种本发明化合物或其药物组合物的注射装置。注射装置是通过肠胃外途径例如肌肉内、皮下或静脉内将物质引入患者体内的装置。例如，注射装置可以是注射器(例如，预先填充药物组合物，如自动注射器)，例如其包括用于容纳要注射的流体的圆筒或针筒、用于穿刺皮肤和/或血管以注射流体(例如，一种或多种本发明的化合物或其药物组合物)的针；以及用于将流体推出气缸并通过针孔的柱塞。在本发明的一个实施方式中，包含一种或多种本发明的化合物或其药物组合物的注射装置是静脉内(IV)注射装置。这样的装置在插管或套管/针中包括一种或多种化合物，该插管或套管/针可以附接到导管上，该导管可以附接到容纳流体(例如，盐水；或包含NaCl、乳酸钠、KCl、CaCl2并任选包含葡萄糖的乳酸林格液)的袋或贮存器，流体通过插管或套管/针引入患者体内。在本发明的一个实施方式中，一旦将套管针和插管插入受试者的静脉中并将套管针从插入的插管中移除，就可以将本发明的一种或多种化合物或其药物组合物引入装置中。IV装置可以例如被插入到外周静脉中(例如，在手或手臂中)；上腔静脉或下腔静脉、或心脏右心房内(例如中枢静脉)；或进入锁骨下静脉、颈内静脉或股静脉、例如向心脏前进直至到达上腔静脉或右心房(例如，中央静脉线)。在本发明的一个实施方式中，注射装置是自动注射器；射流注射器或外部输液泵。射流注射器使用高压窄液体射流穿透表皮，将一种或多种本发明化合物或其药物组合物引入患者体内。外部输液泵是一种医疗装置，可将药物组合物以受控的量输送到患者体内。外部输液泵可以电动或机械方式供电。不同的泵以不同的方式运行，例如，注射泵将流体保存在注射器的贮存器中，活动活塞控制液体的输送，弹性泵将流体保存在可伸展的气球贮存器中，气囊弹性壁的压力驱动流体的输送。在蠕动泵中，一组滚子在一段挠性管上向下挤压，将流体向前推动。在多通道泵中，流体可以多种速率从多个贮存器中递送出来。
本文公开的化合物和药物组合物也可以与无针皮下注射装置一起施用；例如，美国专利第6,620,135；6,096,002；5,399,163；5,383,851；5,312,335；5,064,413；4,941,880；4,790,824或4,596,556号公开的无针皮下注射装置。这种包含药物组合物的无针装置也是本发明的一部分。本文公开的药物组合物也可以通过输注给予。用于给予药物组合物的众所周知的植入物和模块的实例包括在以下文献中公开的那些：美国专利第4,487,603号公开了一种可植入的微输注泵，用于以受控的速率分配药物；美国专利第4,447,233号公开了一种药物输注泵，用于以精确的输注速率输送药物；美国专利第4,447,224号公开了一种用于连续药物输送的可变流量植入式输注设备；美国专利第4,439,196号公开了一种具有多腔室的渗透药物输送系统。许多其他此类植入物、递送系统和模块对于本领域技术人员而言是众所周知的，并且包含本发明的药物组合物的那些植入物、递送系统和模块也在本发明的范围内。
或者，可以例如通过将化合物注射到肿瘤中以局部而非全身的方式给予本发明的TLR7激动剂化合物。此外，可以在靶向药物递送系统中、例如在用组织特异性抗体包被的脂质体中给予本发明的TLR7激动剂化合物，该脂质体靶向例如以免疫病理学为特征的肿瘤。脂质体将被靶向并被相应的组织选择性地吸收。这样的方法和脂质体是本发明的一部分。
当所公开的化合物或其盐通过结构命名或描绘时，应理解该化合物或其盐、包括其溶剂合物(特别是水合物)，可以以晶体形式、非晶体形式或其混合物存在。化合物或其盐或其溶剂合物(特别是水合物)也可表现出多态性(即以不同结晶形式出现的能力)。这些不同的晶体形式通常称为“多晶型物”。应当理解，当通过结构命名或描绘时，所公开的化合物或其溶剂合物(特别是水合物)也包括其所有多晶型物。多晶型物具有相同的化学组成，但在堆积、几何排列和结晶固态的其他描述性方面有所不同。多晶型物可具有不同的物理性质，例如密度、形状、硬度、稳定性和溶解性质。多晶型物通常表现出不同的熔点、IR光谱和X射线粉末衍射图，可用于鉴定。本领域普通技术人员将理解，例如可以通过改变或调节化合物结晶或重结晶期间使用的条件来产生不同的多晶型物。
对于本发明化合物或其盐的结晶形式的溶剂合物，本领域技术人员将理解，可以形成药学上可接受的溶剂合物，其中在结晶过程中将溶剂分子掺入到晶格中。溶剂合物可涉及非水溶剂如乙醇、异丙醇、二甲基亚砜、乙酸、乙醇胺和乙酸乙酯，或者它们可涉及作为结合到晶格中的溶剂的水。其中水是并入晶格中的溶剂的溶剂合物通常称为“水合物”。水合物包括化学计量的水合物以及包含可变量的水的组合物。本发明包括所有这些溶剂合物。
由于其在医学中的潜在用途，本发明化合物的盐优选是药学上可接受的。合适的药学上可接受的盐包括P.Heinrich Stahl和Camille G.Wermuth在《药用盐手册：属性，选择和使用》(Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use)第二版中(Wiley-VCH：2011)以及《雷明顿药物科学》，第18版(麦克出版社，宾夕法尼亚州伊斯顿，1990年)以及《雷明顿：药学的科学与实践》，第19版(麦克出版社，宾夕法尼亚州伊斯顿：1995)中描述的那些。
典型的药物上可接受的盐例如包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐、水溶性盐和水不溶性盐，例如乙酸盐、氨芪磺酸盐(4,4-二氨基芪-2,2-二磺酸盐)、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、丁酸盐、钙、依地酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、柠檬酸盐、克拉维酸盐(clavulariate)、二盐酸盐、依地酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯月桂硫酸盐(estolate)、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸基阿散酸盐(glycollylarsanilate)、六氟磷酸盐、己基间苯二酚盐(hexylresorcinate)、哈胺、氢溴酸盐、盐酸盐、羟基萘甲酸盐、碘酸盐、异硫代硫酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲溴化物、甲基硝酸盐、甲磺酸盐、粘液酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、N-甲基葡糖胺铵盐、3-羟基-2-萘甲酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐(1,1-亚甲基-双-2,2-羟基-3-萘甲酸盐，双羟萘酸盐(einbonate))、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、苦味酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、对甲苯磺酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、磺基水杨酸盐、苏拉酸盐(suramate)、鞣酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱盐(teoclate)、甲苯磺酸盐、三乙碘化物、三氟乙酸盐和戊酸盐。药学上可接受的盐可在结构中具有超过一个的带电原子。在该情况中，该药学上可接受的盐可具有多个抗衡离子。因此，药学上可接受的盐可具有一个或多个带电原子和/或一个或多个抗衡离子。
本发明的化合物的盐可以通过本领域已知的任何合适方法来制备，包括用无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，或用有机酸如乙酸、三氟乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、甲酸、海藻酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸，如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸等吡喃糖基酸，如柠檬酸或酒石酸等α羟基酸，如天冬氨酸或谷氨酸等氨基酸，如苯甲酸或肉桂酸等芳族酸，如对甲苯磺酸或乙磺酸等磺酸来处理游离碱。
可以用提供药学上可接受的阳离子的碱制备药学上可接受的盐，包括碱金属盐(尤其是钠和钾)，碱土金属盐(尤其是钙和镁)，铝盐和铵盐，锌，以及由生理学上可接受的有机碱如二乙胺、异丙胺、羟胺、苄星青霉素、苯乙胺、氨丁三醇(2-氨基-2-(羟甲基)丙烷-1,3-二醇)、吗啉、咯乙醇、哌啶、哌嗪、甲基吡啶、二环己胺、N,N'-二苄基乙二胺、2-羟乙基胺、三(2-羟乙基)胺、氯普鲁卡因、胆碱、丹醇(deanol)、咪唑、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基葡糖胺)、普鲁卡因、二苄基哌啶、脱氢松香胺、葡糖胺、三甲吡啶、奎宁、喹诺酮、特丁胺，和碱性氨基酸如赖氨酸和精氨酸。
如果含有碱性胺或其他碱性官能团的化合物以盐的形式分离出来，该化合物的相应游离碱形式可以通过本领域已知的任何合适方法来制备，包括用无机或有机碱处理该盐，合适地是具有比该化合物的游离碱形式更高的pKa的无机或有机碱。类似地，如果如果含有磷酸二酯、硫代磷酸二酯或其他酸性官能团的化合物以盐的形式分离出来，该化合物的相应的游离酸形式可以通过本领域已知的任何合适方法来制备，包括用无机或有机酸处理该盐，合适的是具有比该化合物的游离酸形式更低的pKa的无机或有机酸。
如本文所述，有效量的化合物或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物或药学上可接受的水合物针对特定患者的用药剂量可能因多种因素而异，如所治疗的疾病、患者的整体健康状况、给药途径和剂量以及副作用的严重程度。
“药学上可接受的前药”是在表现出其药理作用之前，可以在生理条件下或通过溶剂分解转化为指定化合物或此类化合物的药学上可接受的盐的化合物。通常，配制前药的目的是改善化学稳定性、改善患者的接受度和依从性、改善生物利用度、延长作用时间、改善器官选择性、改善制剂(例如增加水溶性)和/或减少副作用(例如毒性)。可以使用本领域已知的方法，例如由《汉堡医药化学和药物化学》(Burger's Medicinal Chemistry andDrug Chemistry)，1，172-178，949-982(1995)所述的方法，容易地由式I化合物制备前药。也参见Bertolini等，J.Med.Chem.1997,40,2011-2016；Shan等，J.Pharm.Sci.1997,86(7),765-767；Bagshawe,Drug Dev.Res.1995,34,220-230；Bodor,Adv.Drug Res.1984,13,224-331；Bundgaard，Design of Prodrugs(《前药设计》)(埃尔斯威尔出版社(ElsevierPress)，1985)；以及Larsen，Design and Application of Prodrugs(《前药设计与应用》)、Drug Design and Development(《药物设计与开发》)(Krogsgaard-Larsen等编，哈伍德学术出版公司(Harwood Academic Publishers)，1991)；Dear等J.Chromatogr.B(《色谱学杂志B》),748,281-293(2000)；Spraul等，J.Pharmaceutical&Biomedical Analysis(《药物与生物医学分析杂志》),10,601-605(1992)；和Prox等,Xenobiol.(《异源生物学》),3,103-112(1992)。
与另外的治疗剂共同给予的方法是本领域众所周知的(Hardman等编(2001)《哥德曼和基尔曼的治疗的药理学基础》(Goodman and Gilman's The Pharmacological Basisof Therapeutics)，第10版，McGraw-Hill，纽约州纽约；Poole和Peterson编(2001)《药物治疗实践进阶：实用方法》(Pharmacotherapeutics for Advanced Practice:A PracticalApproach)，Lippincott,Williams and Wilkins出版社，宾夕法尼亚州费城；Chabner和Longo编(2001)《癌症的化学疗法与生物疗法》(Cancer Chemotherapy and Biotherapy)，Lippincott,Williams and Wilkins出版社，宾夕法尼亚州费城)。通常，共同给予或一起给予表示用两种或更多种试剂治疗对象，其中可以同时或在不同时间给予试剂。例如，可以将这些试剂作为单独给予递送至单个对象，所述给予可以基本上在相同时间或不同时间进行，并且可以通过相同途径或不同给予途径进行。这样的试剂可以以相同的给予方式(例如相同的制剂)被递送给单个对象，使得它们可以通过相同的给予途径在相同的时间给予。
通常，本发明的化合物的每次给予在个体中约占10mg至约2000mg，例如，约10mg至约50mg、约50mg至约100mg、约100mg至约250mg、约250mg至约500mg、约500mg至约1000mg、约1000mg至约2000mg。
一般方法
除非在实施例中另有说明，否则所有合成化学均在标准实验室玻璃器皿中进行。商业试剂按原样使用。使用仪器软件在拜泰齐公司(Biotage)的Initiator中进行微波反应，以控制加热时间和压力。LC/MS分析是在安捷伦(Agilent)1290infinity，质量：6150SQD(ESI/APCI)或安捷伦1200系列，质量：6130SQD(ESI/APCI)上进行的；可变波长检测器和安捷伦6130单四极杆质谱仪，使用Chemistation软件交替进行正负离子扫描。从提取的220nmUV色谱图中确定保留时间。使用Empower软件在具有可变波长检测器的Waters 2695系统上进行HPLC。从提取的210nm和300nm UV色谱图中确定保留时间。使用Topspin软件在400MHz的Bruker Avance 400或500MHz的Bruker Avance DRX-500上进行1H NMR。对于复杂的分裂模式，将明显的分裂列出。在硅胶上进行分析型薄层色谱分析(Macherey-Nagel ALUGRAMXtra SIL G，0.2mm，UV254指示剂)，并在紫外光下可视化。手动进行硅胶色谱，或使用Grace自动色谱进行梯度洗脱。使用Büchi B-540熔点仪收集熔点。
分子生物学的标准方法描述于Sambrook、Fritsch和Maniatis(1982&1989第二版，2001第三版)《分子克隆：实验室手册》(Molecular Cloning:A Laboratory Manual)冷泉港出版社(Cold Spring Harbor Laboratory Press)，纽约州冷泉港；Sambrook和Russell(2001)《分子克隆》(Molecular Cloning)第三版，冷泉港出版社，纽约州冷泉港；Wu(1993)《重组DNA》(Recombinant DNA)217卷，学术出版社(Academic Press)，加利福尼亚圣地亚哥。标准方法也出现在Ausbel等(2001)《新编分子生物学实验指南》(Current Protocolsin Molecular Biology)，约翰威利父子出版公司(John Wiley&Sons,Inc.)，纽约州纽约市，其描述了细菌细胞的克隆和DNA诱变(卷1)、哺乳动物细胞和酵母的克隆(卷2)、糖偶联物和蛋白质表达(卷3)以及生物信息学(卷4)。
也描述了免疫系统组织学的标准方法(参见例如Muller-Harmelink编(1986)《人胸腺：组织病理学与病理学》(Human Thymus:Histopathology and Pathology)施普林格弗莱格公司(Springer Verlag)，纽约州纽约；Hiatt等(2000)《组织学彩色图谱》(ColorAtlas of Histology)Lippincott,Williams and Wilkins出版社，宾夕法尼亚州费城；Louis等(2002)《基本组织学：文本和图集》(Basic Histology:Text and Atlas)McGraw-Hill，纽约州纽约)。
可获得用于确定例如抗原片段、前导序列、蛋白质折叠、功能域、糖基化位点和序列比对的软件包和数据库(参见例如GenBank (Informax，Inc，马里兰州贝塞斯达)；GCG威斯康星州软件包(阿克赛勒里公司(Accelrys Inc.)，加利福尼亚州圣地亚哥)；(时代逻辑公司(TimeLogic Corp.)，内华达州水晶湾)；Menne等(2000)Bioinformatics 16：741-742；Menne等人(2000)Bioinformatics Applications Note 16：741-742；Wren等(2002)Comput.Methods Programs Biomed.68：177-181；von Heijne(1983)Eur.J.Biochem.133:17-21；von Heijne(1986)Nucleic Acids Res.14：4683-4690)。
实施例
实施例1：2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物1
化合物1是按照以下多步法制备的。
步骤1：2-氨基-8-溴-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(2)
在室温下，向根据Zou等Can.J.Chem.，1987，1436页和Robins等JOC，1996，9207页的步骤制备的搅拌的2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(1)[27462-39-1](15.0g，53mmol)在250mL水中的溶液中缓慢加入溴水溶液(4.5mL，1.5当量)。在密闭的圆底烧瓶中，将反应混合物在室温搅拌过夜。加入硫代硫酸钠水溶液以破坏过量的溴。将反应混合物过滤，并将滤液用水和丙酮洗涤。在真空下干燥固体，获得15.4g所需产物2-氨基-8-溴-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(2)，为灰白色固体，80％产率。
步骤2：2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(3)
在圆底烧瓶中，将钠碎片(6.0gm，260.9mmol)添加到60mL苯甲醇中。将混合物在室温搅拌0.5h，然后加热直至成为溶液。将2-氨基-8-溴-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(2)(15.4g，42mmol)在60mL DMSO中的溶液加入到以上获得的搅拌溶液中。将其搅拌10h。将冰醋酸添加到搅拌的反应混合物中以调节至中性。将该混合物用乙醚处理。倒出乙醚层，并用丙酮处理剩下的物质。过滤固体，并用水洗涤。粗产物用乙醇-水(1：1)重结晶，得到11.0g的2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(3)，为灰白色固体，67％产率。
步骤3：1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(4)
将2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(3)(11.0g，28mmol)溶于150mL 2N氢氧化钠水溶液中。加入羟胺-O-磺酸(9.35g，82mmol，3当量)。将反应混合物在室温搅拌过夜，并过滤。用丙酮洗涤固体，获得5.8g白色固体产物1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(4)，51％产率。
步骤4：1,2-二氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(5)
通过加热至90℃，将1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(4)(5.8g，14mmol)溶于氢化烧瓶中的200mL乙醇和200mL水中。加入1g的5％Pd/C。在帕尔反应器中，将反应混合物在氢气氛下在40-50psi下保持过夜。从反应器中抽出氢气，并将催化剂滤出并用热水洗涤。减压浓缩滤液，得到粗产物，将其从水中重结晶，以白色固体形式得到3.6g的1,2-二氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(5)，81％产率。
步骤5：1,2-二氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(6)
将1,2-二氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(5)(3.6g，11.4mmol，1.0当量)溶解在50mL无水DMF中。将NaH(0.5g，12.6mmol，1.1当量)加入到搅拌的溶液中，并进一步搅拌1小时。将环丙基甲基溴(1.70g，12.6mmol，1.1当量)加入反应混合物中，并在室温下继续搅拌过夜。减压浓缩该反应混合物。将残余物通过硅胶柱上的快速色谱纯化，使用二氯甲烷-甲醇(15：1)作为洗脱剂。得到1,2-二氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(6)(2.5g)，为白色固体，65％产率。
步骤6：2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物1
将1,2-二氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(6)(0.50g，1.4mmol)加入装有10mL DMF的烧瓶中。在0℃下加入浓盐酸(1.0mL)。在搅拌下加入亚硝酸钠(113mg，1.7mmol)在5mL水中的水溶液。搅拌30分钟后，加入乙酸钠(0.50g，6.3mmol)。将反应混合物搅拌25分钟并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱上的快速色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(10：1)作为洗脱剂，得到0.30g的产物2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物1，为白色固体，63％产率。HPLC纯度99.5％。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.03(s,1H),6.64(s,2H),5.69-5.77(m,2H),5.51(d,1H,J＝4Hz),4.63(t,1H,J＝8Hz),4.46-4.54(m,1H),3.83-3.94(m,2H),3.61-3.73(m,3H),3.51-3.60(m,1H),1.12-1.25(m,1H),0.31-0.46(m,4H).MS(ESI),m/z 354.3[M+H]+.
实施例2：7-烯丙基-2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物2
化合物2是按照以下多步法制备的。
步骤1：8-(烯丙氧基)-2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(7)
在搅拌下将小片钠金属(0.4g，17.4mmol)分批加入搅拌的烯丙醇(10mL，8.5g，146mmol)中，继续直至所有钠完全溶解并且不再放出氢气。加入无水DMSO(10mL)，然后加入2-氨基-8-溴-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(2)(实施例1)(1.0g，2.8mmol)。将反应混合物在搅拌下加热至65℃，并持续进行直到TLC显示二氯甲烷耗尽了8-溴嘌呤原料为止(二氯甲烷-甲醇：2∶1；Rf＝0.6)。减压浓缩溶剂，并将残余物用乙醚处理。倾析出乙醚层，残余物通过快速色谱在硅胶柱上纯化，用二氯甲烷-甲醇：8∶1作为洗脱剂，得到190mg的8-(烯丙氧基)-2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(7)，为灰白色固体，21％产率。
步骤2：7-烯丙基-2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物2
将8-(烯丙氧基)-2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(7)(190mg，0.6mmol)溶于15mL甲醇和150mL水中。将反应混合物加热至回流5h。减压浓缩溶剂，残余物通过快速色谱在硅胶柱上纯化，用二氯甲烷-甲醇：10∶1作为洗脱剂，得到134mg的7-烯丙基-2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物2，为灰白色泡沫，70.5％产率；
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ5.86-5.95(m,1H),5.67-5.74(m,2H),5.50(d,1H,J＝3.2Hz),5.02-5.12(m,2H),4.60-4.63(m,1H),4.41-4.50(m,3H),3.85-3.92(m,2H),3.64-3.69(m,1H),3.53-3.58(m,1H),MS(ESI),m/z 340.2
[M+H]+.
实施例3：(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯，化合物3
化合物3是按照以下多步法制备的。
步骤1：(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-8-(苄氧基)-6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(8)
将2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(3)(16.0g，41.1mmol)的无水吡啶(250mL)溶液用乙酸酐(15.5mL，164.4mmol，4.0当量)和催化量的DMAP(50mg，0.41mmol，0.01当量)处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜。通过TLC监测反应完成后，将反应混合物用乙酸乙酯(300mL)稀释并倒入500mL水中。分离各层，并将水层用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机层用饱和盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩。所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用二氯甲烷-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到10g的(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-8-(苄氧基)-6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(8)，为白色泡沫，47.2％产率；Rf＝0.30(二氯甲烷-甲醇＝18：1)。
步骤2：(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-6-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(9)
在烘干的烧瓶中，将(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-8-(苄氧基)-6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(8)(10g，19.4mmol)，苄基三乙基氯化铵(8.8g，38.8mmol，2.0当量)和N,N-二甲基苯胺(2.7mL，21.3mmol，1.1当量)溶于300mL无水MeCN中。然后在室温搅拌下加入磷酰氯(9.0mL，97mmol，5.0当量)。将反应混合物在室温搅拌1h或TLC显示起始原料(8)消失。此时，将反应混合物移至90℃的预热油浴中并加热3h。通过TLC监测反应完成后，将反应混合物真空浓缩。将所得残余物溶于乙酸乙酯(200mL)中，并倒入200mL饱和碳酸氢钠溶液中。将水层用乙酸乙酯萃取，并将合并的有机层用饱和盐水溶液洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。所得残余物通过柱色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(30∶1)作为洗脱剂，得到1.8g产物(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-6-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(9)，为白色泡沫，22％产率。Rf＝0.60(二氯甲烷-甲醇＝18：1)
步骤3：(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-6-氯-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(10)
将(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-6-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(9)(1.4g，3.2mmol，1.0当量)溶解于50mL无水DMF中。将K2CO3(655mg，4.7mmol，1.5当量)加入到搅拌的溶液中，并将其进一步搅拌10分钟。然后将环丙基甲基溴(0.37mL，3.84mmol，1.2当量)加入到反应混合物中，并在室温下继续搅拌过夜。通过TLC监测反应完成后，将反应混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释并用100mL水处理。将水层用乙酸乙酯萃取，并将合并的有机层用饱和盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。所得残余物通过柱色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(50∶1)作为洗脱剂，得到1.18g产物(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-6-氯-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(10)，为白色泡沫，75％产率。Rf＝0.70(二氯甲烷-甲醇＝30：1)
步骤4：(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯，化合物3
将(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-6-氯-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(10)(1.0g，2.0mmol)溶解在无水甲醇(50mL)和四氢呋喃(10mL)的混合物中。添加10％Pd/C(120mg)，并且将混合物在H2(50Psi)气氛下在室温搅拌5小时，2天。通过TLC监测反应完成后，通过硅藻土垫过滤除去催化剂。蒸发溶剂，并将粗产物通过硅胶柱上的快速色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(50：1)作为洗脱剂，作为白色固体提供650mg的(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯，化合物3，70％产率，98.2％HPLC纯度。Rf＝0.20(二氯甲烷-甲醇＝30：1)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.87(s,1H),6.41–6.46(m,1H),5.85(d,1H,J＝6.0Hz),5.48(t,1H,J＝4.8Hz),4.83(s,2H),4.50–4.56(m,2H),4.36–4.44(m,1H),3.64–3.69(m,1H),2.17(s,3H),2.03(s,3H),2.06(s,3H),1.08–1.19(m,1H),0.55–0.65(m,2H),0.35–0.41(m,2H)；MS(ESI),m/z 464.2[M+H]+.
实施例4：2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物4
根据以下步骤由化合物3制备化合物4。
将(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯，化合物3(400mg，0.86mmol)溶于NH3-MeOH(20mL)中。将混合物在室温搅拌过夜，然后在减压下浓缩。将残余物在硅胶柱上纯化，得到240mg的2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物4，为白色固体，82％产率，HPLC纯度97.9％；Rf＝0.30(二氯甲烷-甲醇＝10：1)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.14(s,1H),6.34(s,2H),5.72(d,1H,J＝4.8Hz),5.61–5.67(m,1H),5.57(d,1H,J＝4.0Hz),4.61–4.66(m,1H),4.57(t,1H,J＝5.6Hz),3.91–3.99(m,2H),3.55–3.75(m,4H),1.10–1.20(m,1H),0.45–0.53(m,2H),0.32–0.40(m,2H)；MS(ESI),m/z 338.4[M+H]+,360.4[M+Na]+.
实施例5：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物5
根据以下步骤，使用用于合成化合物1的改良方法制备化合物5。
步骤1：1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(4)
在0℃下，向搅拌的2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(3)(5.1g，13mmol)在100mL无水DMF中的溶液中添加NaH(0.7g，16.9mmol，1.3当量)。将反应混合物搅拌30分钟，并加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(4.5g，19.5mmol，1.5当量)。将反应混合物在室温下搅拌直至通过TLC(二氯甲烷-甲醇：3：1)监测完成。过滤沉淀物，并在真空下干燥，得到3.7g的1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(4)，为白色固体，70％产率。
步骤2：1,2-二氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(5)
通过加热至90℃，将1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(4)(3.7g，9.1mmol)溶于氢化烧瓶中的500mL乙醇和500mL水中。加入0.8g的5％Pd/C。在帕尔反应器中，将反应混合物在氢气氛下在40-50psi下保持过夜。从反应器中抽出氢气，并将催化剂滤出并用热水洗涤。减压浓缩滤液，得到粗产物，将其从水中重结晶，以白色固体形式得到2.1g的1,2-二氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(5)，72％产率。
步骤3：1,2-二氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(11)
将1,2-二氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(5)(850mg，2.7mmol，1.0当量)溶解在30mL无水DMF中。将K2CO3(410mg，3.8mmol，1.4当量)加入到搅拌的溶液中，并将其进一步搅拌30分钟。将3-溴-1-丙炔(453mg，4.8mmol，1.8当量)加入到反应混合物中，并将其在室温下搅拌过夜。减压浓缩该反应混合物。将残余物用甲醇吸收，并通过快速色谱在硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到610mg的1,2-二氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(11)，为白色固体，74％产率。
步骤4：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物5
将1,2-二氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(11)(610mg，1.7mmol)加入装有10mL DMF的烧瓶中。在0℃下加入浓盐酸(0.65mL)。在搅拌下加入亚硝酸钠(132mg，2.04mmol，1.2当量)在3mL水中的水溶液。在0℃下搅拌30分钟后，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱上的快速色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(10：1)作为洗脱剂，得到408mg的2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物5，为白色固体，71％产率；
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.33(s,1H),6.78(br,2H),5.73–5.76(m,2H),5.48–5.47(d,1H,J＝3.2Hz),4.62–4.63(m,2H),4.50(s,1H),3.9(s,2H),3.30–3.65(m,2H),3.25(s,1H).MS(ESI)m/z 338.1(M+H)+,360.1[M+Na]+.
使用与化合物1或5所述相同的方法完成化合物6-8、10-19和21-23的合成。化合物9和20最初是在最后的N-1-脱氨步骤中、在酸性条件下同时水解腈基而制备的。化合物10和21也可以分别由化合物9和20通过酯化制备。
实施例6：2-氨基-7-(丁-2-炔-1-基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物6
灰白色固体：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:7.02(s,2H),5.82-5.83(d,1H,J＝4.0Hz),5.66–5.68(d,1H,J＝8.0Hz),5.46-5.47(d,1H,J＝4.0Hz),4.66(t,1H),4.57(t,1H,J＝5.6Hz),4.56(m,1H),3.9(m,2H),3.11–3.37(m,2H),1.75(s,3H).MS(ESI)m/z 352.2(M+H)+,374.1[M+Na]+.
实施例7：2-氨基-7-((E)-丁-2-烯-1-基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物7
灰白色固体：MS(ESI)m/z 354.2(M+H)+,376.1[M+Na]+.
实施例8：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((E)-4-羟基丁-2-烯-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物8
灰白色固体：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ6.71(s,2H),5.75(d,1H,J＝4.8Hz),5.66–5.73(m,2H),5.46(m,1H),4.74(t,1H,J＝5.6Hz),4.62(t,1H,J＝5.6Hz),4.41–4.48(m,1H),4.40–4.41(m,2H),3.80–3.98(m,4H),3.51–3.70(m,2H),3.17(d,1H,J＝5.2Hz).MS(ESI)m/z 370.1(M+H)+,392.1[M+Na]+.
实施例9：(E)-4-(2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)丁-2-烯酸，化合物9
灰白色固体：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.15(s,1H),6.64–7.08(m,3H),5.59–5.69(m,1H),5.49(d,1H,J＝3.2Hz),4.48–4.68(m,3H),3.82–4.01(m,2H),3.49–3.74(m,2H).MS(ESI)m/z 384.1(M+H)+,422.0[M+K]+.
实施例10：(E)-4-(2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)丁-2-烯酸甲酯，化合物10
灰白色固体：MS(ESI)m/z 398.1(M+H)+,420.1[M+Na]+.
实施例11：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-羟基丁-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物11
灰白色固体：MS(ESI)m/z 368.1(M+H)+,390.1[M+Na]+.
实施例12：2-(2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)乙酸甲酯，化合物12
灰白色固体：MS(ESI)m/z 372.1(M+H)+.
实施例13：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物13
灰白色固体：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.09(s,1H),6.86(s,2H),5.78(d,1H,J＝4Hz),5.54(d,1H,J＝4Hz),5.48(d,1H,J＝4Hz),4.55-4.67(m,4H),3.90-3.92(m,2H),3.64-3.69(m,1H),3.54-3.60(m,1H).MS(ESI)m/z 382.1(M+H)+,404.2[M+Na]+.
实施例14：2-氨基-7-(2,2-二氟乙基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物14
灰白色固体：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.09(s,1H),6.67(s,2H),6.14-6.44(m,1H),5.74(d,1H,J＝4Hz),5.57(d,1H,J＝8Hz),5.48(d,1H,J＝4Hz),4.61(d,1H,J＝4Hz),4.53(s,1H),4.18-4.26(m,2H),3.88-3.93(m,2H),3.64-3.69(m,1H),3.53-3.59(m,1H).MS(ESI)m/z 386.0[M+Na]+.
实施例15：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-甲基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物15
灰白色固体：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.14(s,1H),6.79(s,2H),5.74-5.78(m,2H),5.51(d,1H,J＝4Hz),4.63(t,1H,J＝8Hz),4.48-4.52(m,1H),3.85-3.92(m,2H),3.63-3.69(m,1H),3.51-3.57(m,1H),3.36(s,3H).MS(ESI)m/z 314.1(M+H)+,336.0[M+Na]+.
实施例16：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-乙基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物16
灰白色固体：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.01(s,1H),6.61(s,2H),5.72-5.76(m,2H),5.51(d,1H,J＝4Hz),4.63(t,1H,J＝8Hz),4.47-4.49(m,1H),3.81-3.91(m,4H),3.64-3.69(m,1H),3.52-3.58(m,1H),1.20(t,3H,J＝8Hz).MS(ESI)m/z 328.1(M+H)+.
实施例17：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-丙基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物17
灰白色固体：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ10.95(s,1H),6.58(s,2H),5.71-5.74(m,2H),5.51(d,1H,J＝4Hz),4.63(t,1H,J＝8Hz),4.47-4.49(m,1H),3.84-3.92(m,2H),3.76(t,2H,J＝8Hz),3.64-3.69(m,1H),3.52-3.58(m,1H),1.60-1.69(m,2H),0.83(t,3H,J＝8Hz).MS(ESI)m/z 342.2(M+H)+,364.1[M+Na]+.
实施例18：2-氨基-7-丁基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物18
棕褐色固体：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.02(s,1H),6.58(s,2H),5.71-5.74(m,2H),5.51(d,1H,J＝4Hz),4.63(t,1H,J＝8Hz),4.47-4.49(m,1H),3.84-3.92(m,2H),3.76(t,2H,J＝8Hz),3.64-3.69(m,1H),3.52-3.58(m,1H),1.58-1.65(m,2H),1.21-1.30(m,2H),0.88(t,3H,J＝8Hz).MS(ESI)m/z 356.1(M+H)+,378.1[M+Na]+.
实施例19：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-羟丁基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物19
灰白色固体：MS(ESI)m/z 372.4(M+H)+,394.4[M+Na]+.
实施例20：4-(2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)丁酸，化合物20
灰白色固体：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.06(s,1H),6.69(bs,2H),5.50(d,1H J＝3.2Hz),5.48–4.65(b,3H),4.49(dd,1H,J＝3.0,1.8Hz),4.89(m,4H),3.85(ddd,1H,J＝10.4,6.4,4.8,1.6Hz),3.61(dd,1H,J＝6.4,4.8Hz),2.21(t,2H,J＝7.2Hz),1.88(m,2H).MS(ESI)m/z 386.1(M+H)+,324.1[M+K]+.
实施例21：4-(2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)丁酸甲酯，化合物21
灰白色固体：MS(ESI)m/z 400.2(M+H)+,422.1[M+Na]+.
实施例22：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2-甲氧基乙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物22
灰白色固体：MS(ESI)m/z 358.2(M+H)+.
实施例23：2-氨基-7-(2-二氟乙基)-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-盐酸二酮，化合物23
灰白色固体：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ5.63(s,1H,J＝4.0Hz),4.71(m,1H),4.13–4.21(m,4H),3.72–3.85(m,2H),3.25–3.33(m,2H).MS(ESI)m/z343.1(M+H)+.
实施例24：(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯，化合物24
根据以下合成方法由(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-6-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(9)制备化合物24。
步骤1：(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(12)
将(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-6-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(9)(6.0g，13.6mmol)溶解在无水甲醇(100mL)和四氢呋喃(10mL)的混合物中。加入催化剂Pd/C(150mg，10％)，并将混合物在室温在H2(50Psi)气氛下搅拌5h。通过硅藻土滤出催化剂。蒸发溶剂，将粗产物不经进一步纯化用于下一步。
步骤2：(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯，化合物24
将(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯(12)(13.6mmol)溶解于150mL无水DMF中。将碳酸钾(2.8g，20.4mmol，1.5当量)加入到搅拌的溶液中，并进一步搅拌5分钟。此时，将3-溴丙炔(1.9mg，16.32mmol，1.2当量)加入到反应混合物中，并在45℃下搅拌5h。减压浓缩混合物，并将所得残余物通过柱色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(70：1)作为洗脱剂，得到3.5g的(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯，化合物24，为白色泡沫，60％产率，分两步进行，HPLC纯度为98％。Rf＝0.50(二氯甲烷-甲醇＝30：1)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.01(s,1H),6.35–6.43(m,1H),5.83(d,1H,J＝5.6Hz),6.43–6.51(m,1H),4.91(s,2H),4.59(t,1H,J＝1.6Hz),4.46–4.56(m,2H),4.36–4.45(m,1H),2.37(t,1H,J＝2.4Hz),2.17(s,3H),2.07(s,3H),2.06(s,3H).MS(ESI)m/z 448.2[M+H]+,470.2[M+Na]+.
实施例25：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物25
使用概述的由化合物3制备化合物4的方法，由化合物24制备化合物25。
将(2R,3S,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3,4-二乙酸二酯，化合物24(600mg，1.3mmol)溶解于在MeOH(50mL)中的饱和NH3。将混合物在室温搅拌过夜，然后在减压下浓缩。将残余物在硅胶柱上纯化，得到300mg的2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物25，为白色固体，72％产率，HPLC纯度98.8％；Rf＝0.50(二氯甲烷-甲醇＝6：1)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.08(s,1H),6.44(s,2H),5.72(d,1H,J＝4.8Hz),5.49–5.60(m,2H),4.46–4.76(m,4H),3.92–4.03(m,2H),3.55–3.71(m,2H),3.41(t,1H,J＝2.4Hz).MS(ESI)m/z 322.1(M+H)+,344.1[M+Na]+.
实施例26：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物26
使用一般方法合成2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物5，如以下合成方案所示，从3’-脱氧-鸟苷[3608-58-0]及其对应的3’-脱氧-8-溴鸟苷[847649-68-7]开始制备2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物26。
步骤1：2-氨基-8-溴-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(12)
在0℃下，向3'-脱氧鸟苷(2g，7.49mmol，1当量)的H2O(20mL)溶液中添加NBS(2.6g，14.98mmol，2当量)，将反应混合物在0℃下搅拌1h。通过TLC监测反应。用水(50mL)稀释反应混合物，并用正丁醇(3×100ml)萃取；用乙酸乙酯萃取；用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤有机层，并浓缩。将残余物用乙醚研磨，过滤，减压干燥，得到1.7g的(65％)2-氨基-8-溴-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(12)，为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.81(brs,1H),6.53(s,2H),5.62(d,J＝3.2Hz,1H),5.54(s,1H),4.94(s,1H),4.80(s,1H),4.24–4.18(m,1H),3.50(d,J＝3.6Hz,2H),2.47–2.43(m,1H),1.91–1.86(m,1H).(ESI)m/z344.0,346.0(M-H)-.
步骤2：2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(13)
将金属钠(339mg，14.78mmol，3当量)溶解在苄醇(7.9g，73.91mmol，15当量)中并加热至65℃直到观察到澄清溶液。然后将反应混合物升至室温，并在室温下向其中滴加2-氨基-8-溴-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(1.7g，4.92mmol，1当量)在DMSO(8mL)中的溶液。然后将反应混合物在80℃下搅拌5h。通过TLC监测反应。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙醚(2×100mL)洗涤，将水层用正丁醇(3×100mL)萃取。用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤有机层，浓缩得到粗产物，将其用乙醚研磨，得到1.6g(87％)的2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(13)，为灰白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ11.65(brs,1H),7.48(d,J＝7Hz,2H),7.42–7.30(m,3H),6.31(brs,2H),5.54(d,J＝3.5Hz,1H),5.48(s,1H),5.39(d,,J＝4Hz,2H),5.31(brs,1H),4.75(s,1H),4.16–4.11(m,1H),3.45–3.43(m,2H),2.21–2.15(m,1H),1.85–1.80(m,1H).(ESI)m/z 374.1(M+H)+.
步骤3：1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(14)
在0℃下，向2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(1.6g，4.28mmol，1当量)在DMF(20mL)中的溶液中加入60％NaH(2.5mg，5.14mmol，1.2当量)。搅拌30分钟后，在相同温度下分批加入O-(二苯基磷酰基)羟胺(1.59g，6.86mmol，1.6当量)。将反应混合物在室温搅拌2h，并通过过滤除去形成的沉淀。用水(50mL)稀释滤液，并用正丁醇(3×100mL)萃取。用水(100mL)、盐水溶液(100mL)洗涤有机层，浓缩得到粗固体，将其用乙醚研磨，得到1.3g(78％)的1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(14)，为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.49(d,J＝8Hz,2H),7.43–7.35(m,3H),6.97(s,2H),5.58–5.56(m,2H),5.40(s,2H),5.38(s,2H),4.79–4.77(m,1H),4.72–4.71(m,1H),4.14–4.09(m,1H),3.39–3.35(m,2H),2.20–2.13(m,1H),1.80–1.75(m,1H).(ESI)m/z 389.1(M+H)+.
步骤4：1,2-二氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(15)
在Parr振荡器容器中，向1,2-二氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(1.3g，3.35mmol，1当量)在EtOH∶H2O(1∶1；60mL)的溶液中加入10％Pd/C(400mg)。在室温下，将反应混合物与氢(70psi)一起摇动2小时。通过TLC监测反应进程。原料耗尽后，将反应混合物通过硅藻土床过滤，并用乙醇洗涤。浓缩合并的滤液，并将残余物用乙醚研磨，得到1.2g(粗制)的1,2-二氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(15)，为灰白色固体。该产物可以原样使用或可以从水中重结晶。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.64(s,1H),7.04(s,2H),5.50(d,J＝4.4Hz,1H),5.41–5.36(m,1H),5.37(s,2H),4.82–4.80(m,1H),4.73(t,J＝5.6Hz,1H),4.13–4.12(m,1H),3.50–3.38(m,2H),2.40–2.32(m,1H),1.85–1.79(m,1H).(ESI)m/z 299.1(M+H)+.
步骤5：1,2-二氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(16)
将1,2-二氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(15)(650mg，2.18mmol，1.0当量)溶解在50mL无水DMF中。将K2CO3(402mg，3.05mmol，1.4当量)加入到搅拌的溶液中，并将其进一步搅拌30分钟。将3-溴-1-丙炔(458mg，3.92mmol，1.8当量)加入到反应混合物中，并将其在室温下搅拌过夜。减压浓缩反应混合物，剩余的残余物用甲醇吸收，并通过快速色谱在硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到505mg的1,2-二氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(16)，为白色固体，69％产率。MS(ESI)m/z 337.1(M+H)+.
步骤6：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物26
将1,2-二氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(16)(400mg，1.19mmol)加入装有10mL DMF的烧瓶中。在0℃下加入浓盐酸(0.44mL)。在搅拌下加入亚硝酸钠(98mg，0.98mmol，1.2当量)在2mL水中的水溶液。在0℃下搅拌30分钟。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱上的快速色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(10：1)作为洗脱剂，得到240mg的2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物26，为白色固体，67％产率；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.98(s,1H),6.55(s,2H),5.51(d,J＝3.6Hz,1H),5.39(d,J＝4.4Hz,1H),4.81–4.77(m,1H),4.68(t,J＝5.6Hz,1H),4.56(d,J＝2Hz,2H),4.16–4.12(m,1H),3.48–3.41(m,2H),3.22(s,1H),2.38–2.31(m,1H),1.85–1.79(m,1H).MS(ESI)m/z 322.1(M+H)+,344.1[M+Na]+.
实施例27：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物27
使用一般方法合成2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物5，如以下合成方案所示，从3’-脱氧-(3’S)-氟-鸟苷[123402-21-1]及其对应的3’-脱氧-(3’S)-氟-8-溴鸟苷[847649-50-7]开始制备2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物27。
步骤1：2-氨基-8-溴-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(17)
在通风橱中，在室温下，将溴水溶液(5.4mL，2当量)缓慢加入到3’-脱氧-(3’S)-氟-鸟苷[123402-21-1](15g，52.6mmol)在300mL中的搅拌溶液中。将反应混合物在密闭的圆底烧瓶中在室温下搅拌过夜，或者直到通过TLC监测完成为止。加入硫代硫酸钠水溶液以破坏过量的溴。将反应混合物过滤，并将滤液用水和丙酮洗涤。在真空下干燥固体，获得13g的2-氨基-8-溴-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(17)，为灰白色固体，68％产率。
步骤2：2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(18)
在圆底烧瓶中，将小片的钠(1.2g)添加到28mL苯甲醇中。将混合物在室温搅拌0.5h，然后加热至65℃，成为溶液。将2-氨基-8-溴-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(17)(7g，19.2mmol)在28mL DMSO中的溶液加入到以上获得的搅拌溶液中。将反应混合物搅拌5h直至通过TLC监测完成。将冰乙酸添加到搅拌的反应混合物中以将pH调节至7。在剧烈搅拌下将混合物倒入1L乙醚中。倒出上层醚层，并将剩余的物质在搅拌下加入到大量丙酮(800mL)中。过滤固体，并将粗产物用水洗涤。将粗产物在乙醇-水(1：1)的混合物中加热。将混合物冷却至室温。过滤沉淀物，并在真空下干燥，得到4g的2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(18)，为灰白色固体，53％产率。
步骤3：1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(19)
在0℃下，向搅拌的2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(18)(2g，5.1mmol)在40mL无水DMF中的溶液中缓慢添加NaH(0.24g，6.1mmol)。将混合物搅拌30分钟，并加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.9g，8.2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌直至TLC监测指示的起始原料消耗。将沉淀物过滤并在减压下干燥。将残余物通过硅胶柱上的快速色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(10：1)作为洗脱剂，得到1g的1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(19)，为白色固体，50％产率。
步骤4：1,2-二氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(20)
通过加热至90℃，将1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(19)(1g，2.5mmol)溶于1000mL乙醇和1000mL水，添加10％Pd/C(0.2g)。将反应混合物在1atm氢气气氛下氢化过夜。滤出催化剂并用热水洗涤。减压浓缩滤液，剩余的粗固体从水中重结晶，得到0.65g的1,2-二氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(20)，为白色固体，84％产率。
步骤5：1,2-二氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(21)
将1,2-二氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(20)(650mg，2mmol，1.0当量)溶解在20mL无水DMF中。加入K2CO3(414mg，3mmol，1.5当量)，并将其进一步搅拌30分钟。将3-溴丙炔(476mg，4mmol，2当量)加入到反应混合物中，并将其在室温下搅拌过夜。减压浓缩该反应混合物。将残余物用甲醇吸收，并通过快速色谱在硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷-甲醇(15∶1)作为洗脱剂，得到580mg的1,2-二氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(21)，为白色固体，79％产率。
步骤6：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物27
将1,2-二氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(21)(580mg，1.63mmol)加入装有10mL DMF的烧瓶中。在0℃下加入浓盐酸(0.6mL)。在搅拌下加入亚硝酸钠(135mg，1.96mmol，1.2当量)在5mL水中的水溶液。在0℃下继续搅拌30分钟，然后将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱上的快速色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(10：1)作为洗脱剂，得到465mg的2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物27，为白色固体，83％产率；HPLC纯度96.5％；1HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.07(s,1H),6.81(s,2H),5.81(d,1H,J＝4Hz),5.63(d,1H,J＝8Hz),5.19–5.11(m,1H),5.10-4.97(m,2H),4.60(s,2H),4.14–4.08(m,1H),3.59–3.52(m,2H),3.25(s,1H).ESI-MS m/z 340.1[M+H]+,362.1[M+Na]+.
实施例28：2-氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物28
使用一般方法合成2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物5，如以下合成方案所示，从3’-脱氧-(3’R)-氟-鸟苷[125291-15-8]开始制备2-氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物28。
步骤1：2-氨基-8-溴-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(22)
在通风橱中，在室温下，将溴水溶液(2.4mL，2当量)缓慢加入到3’-脱氧-(3’R)-氟-鸟苷[125291-15-8](6.7g，23mmol)在100mL水中的搅拌溶液中。将反应混合物密封在圆底烧瓶中，并在室温下搅拌过夜或直至完成，如TLC所示。加入硫代硫酸钠水溶液以破坏过量的溴，将反应混合物过滤并将滤液用水和丙酮洗涤。在真空下干燥固体，获得6.5g的2-氨基-8-溴-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(22)，为灰白色固体，76％产率。
步骤2：2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(23)
在圆底烧瓶中，将小片的钠(1.2g，3当量)添加到25mL苯甲醇中。将混合物在室温搅拌0.5h，然后加热至65℃，直至钠消失。将2-氨基-8-溴-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(22)(6.5g，17.8mmol)在30mLDMSO中的溶液加入到以上获得的搅拌醇钠溶液中。将其在65℃下搅拌10h，通过TLC测定直到(22)消耗。将冰乙酸添加到搅拌的反应混合物中以将pH调节至7。在剧烈搅拌下将混合物倒入1.5L乙醚中。过滤固体，并将粗产物用水洗涤。将粗产物在乙醇-水(1：1)的混合物中加热，然后冷却至室温。过滤沉淀物，并在真空下干燥，得到3.8g的2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(23)，为灰白色固体，54％产率。
步骤3：1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(24)
在0℃下，向搅拌的2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(23)(3.8g，9.7mmol)在80mL无水DMF中的溶液中缓慢添加NaH(0.46g，11.6mmol)。将反应混合物搅拌30分钟，并加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(3.3g，14.5mmol)，并继续在室温下搅拌直至通过TLC确定完成。将沉淀物过滤并在减压下干燥。将残余物通过硅胶柱上的快速色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(10：1)作为洗脱剂，得到2g的1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(24)，为白色固体，51％产率。
步骤4：1,2-二氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(25)
通过加热至90℃，将1,2-二氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(24)(2g，5mmol)溶于1200mL乙醇和1200mL水。添加0.4g的Pd/C催化剂(10％)。将反应混合物在1个大气压的氢气下保持过夜。通过硅藻土过滤催化剂，并用热水洗涤。减压浓缩滤液，得到固体，其从水中重结晶，得到1.3g的1,2-二氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(25)，为白色固体，为84％。
步骤5：1,2-二氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(26)
将1,2-二氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(25)(1.3g，4.1mmol，1.0当量)溶解在40mL无水DMF中。将K2CO3(854mg，6.1mmol，1.5当量)加入到搅拌的溶液中，并将其进一步搅拌30分钟。将3-溴丙炔(976mg，8.2mmol，2当量)加入到反应混合物中，并将其在室温下搅拌过夜。减压浓缩反应混合物，剩余的残余物用甲醇吸收，并通过快速色谱在硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷-甲醇(15∶1)作为洗脱剂，得到1.2g的1,2-二氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(26)，为白色固体，82％产率。
步骤6：2-氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物28
将1,2-二氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(26)(1.2g，3.39mmol)加入装有20mL DMF的烧瓶中。在0℃下加入浓盐酸(1.2mL)。在搅拌下加入亚硝酸钠(280mg，4.07mmol，1.2当量)在10mL水中的水溶液。在0℃下搅拌30分钟后，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱上的快速色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(10：1)作为洗脱剂，得到960mg的2-氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物28，为白色固体，83％产率；HPLC纯度96.3％；1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ10.98(s,1H),6.60(s,2H),5.95(s,1H),5.35–5.37(m,2H),4.74–5.08(m,2H),4.60(s,2H),4.00–4.08(m,1H),3.56–3.63(m,2H),3.24(t,1H,J＝4Hz).ESI-MS m/z 340.1[M+H]+,362.1[M+Na]+.
实施例29：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物29
化合物29是按照以下多步法制备的。
步骤1：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-(苄氧基)-6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(27)
用乙酸酐(12.3mL，129.7mmol，2.2当量)处理2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(13)(22g，58.9mmol)在含有三乙胺(40.8mL)的无水MeCN(300mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用二氯甲烷(800mL)稀释并倒入800mL水中。分离各层，并将水层用二氯甲烷萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥并减压浓缩。所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用二氯甲烷-甲醇(50∶1)作为洗脱剂，得到18.1g的((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-(苄氧基)-6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(28)，为黄色固体，67％产率；Rf＝0.5(二氯甲烷-甲醇＝10：1)。
步骤2：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(28)
在烘干的烧瓶中，将((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-(苄氧基)-6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(27)(18.1g，39.6mmol)溶解在200mL的干燥MeCN中。加入磷酰氯(3.6mL，39.6mmol，1.0当量)，并将其在室温搅拌1h。将反应混合物用二氯甲烷(800mL)稀释，倒入饱和碳酸氢钠水溶液中。用二氯甲烷萃取水层。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，得到的残余物通过柱色谱纯化，使用二氯甲烷-甲醇(30：1)作为洗脱剂，得到13g的((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(28)，为白色固体，89％产率，Rf＝0.40(二氯甲烷-甲醇＝10：1)。
步骤3：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(29)
在烘箱干燥的烧瓶中，将((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(28)(13g，35.4mmol)、苄基三乙基氯化铵(16.1g，70.8mmol)和N，N-二甲基苯胺(4.9mL，38.9mmol)溶解在400mL干燥的MeCN中。加入POCl3(16.2mL，177.0mmol)。将反应混合物在105℃下搅拌8h。将反应混合物真空浓缩。将得到的残余物溶解在二氯甲烷中，先后用水和5％NaHCO3水溶液洗涤。有机相通过无水Na2SO4干燥，并减压浓缩。通过柱色谱法纯化粗产物，使用二氯甲烷-甲醇(120∶1)作为洗脱剂，得到6.1g的((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(29)，为白色固体，45％产率。Rf＝0.60(二氯甲烷-甲醇＝40：1)
步骤4：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(30)
向溶解在THF(150mL)和三乙胺(2.2mL，15.8mmol)的混合物中的((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(29)(6.1g，15.8mmol)中加入10％Pd/C(610mg)。将混合物在室温下在氢气(50psi)气氛下搅拌5h。然后将催化剂通过硅藻土垫过滤，并将溶剂蒸发，得到粗产物，将其通过使用二氯甲烷-甲醇(60：1)作为洗脱剂的柱色谱法纯化。分离出((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(30)(3.2g)，为白色泡沫，57％产率。Rf＝0.4(二氯甲烷-甲醇＝20：1)。
步骤5：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物29
向溶于50mL无水DMF中的((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(30)(2.2g，6.3mmol)中加入K2CO3(1.3g，9.4mmol，1.5当量)。将反应混合物搅拌30分钟，并加入3-溴丙炔(0.98mL，12.6mmol，2当量)。将搅拌的反应混合物在45℃下保持3h。然后将混合物在减压下浓缩，并将所得残余物通过柱色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(160：1)作为洗脱剂，得到1.8g的((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物29，为白色泡沫，75％产率。HPLC纯度(98.2％)。Rf＝0.50(二氯甲烷-甲醇＝40：1)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.00(s,1H),5.98-5.99(d,1H,J＝1.6Hz),5.80-5.82(d,1H,J＝6.4Hz),4.91(s,2H),4.59(d,2H,J＝2.4Hz),4.44-4.51(m,2H),4.16-4.21(m,1H),2.39(t,1H,J＝2.4Hz),2.12(s,3H),2.07(s,3H).ESI-MS m/z 390.1[M+H]+,412.1[M+Na]+.
实施例30：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-
基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物30
使用概述的由化合物3制备化合物4的方法，由化合物29制备化合物30。
用甲醇中的饱和氨处理((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物29(1.37g，3.52mmol)。密封烧瓶，并将反应混合物在40℃加热并搅拌过夜。减压蒸发挥发物，并将残余物通过柱色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(30：1)作为洗脱剂，以白色固体形式得到800mg的2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物30，75％产率，HPLC纯度为98.9％。Rf＝0.30(二氯甲烷-甲醇＝10：1)。1H NMR(DMSO,400MHz)δ8.01(s,1H),6.37(s,1H),5.61(d,1H,J＝2.8Hz),5.43-5.44(d,1H,J＝4.4Hz),4.84-4.88(m,1H),4.68-4.71(t,1H,J＝2Hz),4.62-4.63(d,2H,J＝2.4Hz),4.17-4.20(m,1H,),3.42-3.49(m,2H,),3.39-3.40(t,1H,J＝2Hz),2.37-2.44(m,1H),1.83-1.88(m,1H).ESI-MS m/z 306.1[M+H]+,328.1[M+Na]+.
实施例31：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物31
化合物31是按照以下多步法制备的。
步骤1：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-(苄氧基)-6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(31)
用乙酸酐(6.8mL，71.6mmol，2.5当量)处理2-氨基-8-(苄氧基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(18)(11.2g，28.6mmol)在含有三乙胺(15.9ml，4.0当量)的无水MeCN(150mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌过夜，用乙酸乙酯(500mL)稀释并倒入水中。分离各层，并将水层用乙酸乙酯萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥并减压浓缩。所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用二氯甲烷-甲醇(40∶1)作为洗脱剂，得到9.2g的((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-(苄氧基)-6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(31)，为白色泡沫，67.6％产率；Rf＝0.2(二氯甲烷-甲醇＝20：1)。
步骤2：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(32)
在搅拌下向溶解于100mL无水MeCN中的((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-(苄氧基)-6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(31)(8.5g，17.9mmol)中加入磷酰氯(1.7mL，17.9mmol，1.0当量)，并在室温下持续1h。将MeOH(10mL)和过量的固体NaHCO3加入反应混合物中。将混合物搅拌20分钟，然后真空浓缩。所得残余物通过柱色谱法纯化，用二氯甲烷-甲醇(30∶1)作为洗脱剂，得到5.7g的((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(32)，为白色泡沫，82％产率；Rf＝0.30(二氯甲烷-甲醇＝10：1)。
步骤3：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(33)
在烘干的烧瓶中，将((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(32)(5.7g，14.8mmol)溶解在60mL磷酰氯中。将反应混合物在75℃下搅拌过夜并真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到的残余物，使用二氯甲烷-甲醇(100∶1)作为洗脱剂，得到2.7g的((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(33)，为白色固体，45％产率。Rf＝0.60(二氯甲烷-甲醇＝30：1)。
步骤4：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(34)
向溶解在无水甲醇(30mL)和四氢呋喃(10mL)的混合物中的((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-6-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(33)(2.7g，6.7mmol)中加入10％Pd/C(270mg)。将混合物在室温下在氢气(50psi)气氛下搅拌5h。通过硅藻土滤出催化剂，蒸发溶剂，通过柱色谱法纯化粗产物，使用二氯甲烷-甲醇(40∶1)作为洗脱剂，得到1g的((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(34)，为白色泡沫，42％产率。Rf＝0.2(二氯甲烷-甲醇＝20：1)。
步骤5：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物31
边搅拌边向溶于20mL无水DMF中的((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(34)(1g，2.7mmol)中加入K2CO3(0.56g，4mmol，1.5当量)。将3-溴丙炔(0.43mL，5.4mmol，2当量)加入到反应混合物中，并在45℃下继续搅拌5h。减压浓缩混合物。通过柱色谱法纯化得到的残余物，使用二氯甲烷-甲醇(100∶1)作为洗脱剂，得到750mg的((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物31，为白色泡沫，70％产率，HPLC纯度为98.4％。Rf＝0.60(二氯甲烷-甲醇＝30：1)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.03(s,1H),6.10-6.15(m,2H),5.53-5.55(m,0.5H),5.40-5.42(m,0.5H),4.96(s,2H),4.60(d,2H,J＝4Hz),4.44-4.57(m,2H),4.29-4.33(m,1H),2.39(t,1H,J＝4Hz),2.15(s,3H),2.10(s,3H).ESI-MS m/z408.1[M+H]+,430.1[M+Na]+.
实施例32：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物32
使用概述的由化合物3制备化合物4的方法，由化合物31制备化合物32。
向((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物31(500mg，1.23mmol)中加入饱和甲醇氨溶液。将反应混合物加热至40℃并搅拌过夜。减压蒸发挥发物，并将固体残余物通过柱色谱法纯化，使用二氯甲烷-甲醇(40：1)作为洗脱剂，得到300mg的2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物32，为白色固体，76％产率，HPLC纯度为98.6％。Rf＝0.30(二氯甲烷-甲醇＝10：1)。1H NMR(DMSO,400MHz)δ8.06(s,1H),6.44(s,2H,NH2),5.85(d,1H,J＝4Hz,1’-H),5.71(d,1H,J＝4Hz,2’-OH),5.25-5.35(m,1H,2’-H),5.14-5.15(m,0.5H,4’-H),5.00-5.10(m,0.5H,half 4’-H),4.96(t,1H,J＝4Hz,5’-OH),4.65(d,2H,J＝4Hz,CH2),4.09-4.19(m,1H,3’-H),3.51-3.62(m,2H,5’-H),3.41(t,1H,J＝4Hz).ESI-MS m/z 324.1[M+H]+,346.1[M+Na]+.
化合物5、26和27的替代合成方法。
实施例5A：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物5
化合物5还按照以下替代多步法制备。
步骤-1：6-氯-N4-(4-甲氧基苄基)嘧啶-2,4,5-三胺(35)
在0℃下，将4-甲氧基苄基胺(114.8g，83.728mol)添加到4,6-二氯嘧啶-2,5-二胺[55583-59-0](100g，55.81mol)和TEA(169mL，167.45mol)在乙醇(1.0L)中的搅拌溶液混合物中，将得到的反应混合物在回流温度下搅拌18h。在减压下蒸发溶剂，将稠物质倒入冰冷的水中并搅拌30分钟。通过过滤收集沉淀的固体，用水洗涤并在真空下干燥以得到呈褐色固体的6-氯-N4-(4-甲氧基苄基)嘧啶-2,4,5-三胺(35)(100g，64％)。ES+,m/z 280.1[M+H]+；C12H14ClN5O；1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.25(d,J＝8.5Hz,2H),6.92(t,J＝6.0Hz,1H),7.87(d,J＝8.5Hz,2H),5.63(s,2H),4.47(d,J＝5.5Hz,2H),3.91(s,2H),3.72(s,3H).
步骤-2：2-氨基-6-氯-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(36)
将6-氯-N4-(4-甲氧基苄基)嘧啶-2,4,5-三胺(35)(50g，17.92mol)和1,1'-羰基二咪唑(100g，61.64mol)在乙腈(500mL)中的混合物在回流温度下搅拌18h。将反应混合物冷却至室温，并减压浓缩。向所得残余物中加入冰冷的水，并在室温下搅拌30分钟。过滤沉淀的固体，用水洗涤并干燥，得到褐色固体2-氨基-6-氯-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(36)(50g，91％)；C13H12ClN5O2；1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ11.31(s,1H),7.23(d,J＝9.0Hz,2H),6.88(d,J＝5.0Hz,2H),6.62(s,2H),4.80(s,2H),3.71(s,3H).
步骤-3：2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(37)
将氢氧化钠(9.967g，262.29mmol)加入到2-氨基-6-氯-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(36)(40g，131.14mmol)在苯甲醇(45.0mL)中的悬浮液中。将得到的反应混合物在120℃下搅拌18h。将反应混合物用冰水(200mL)淬灭，加入乙醚(150mL)，并搅拌15分钟。过滤得到的沉淀固体，用水洗涤并干燥，得到褐色固体2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(30g，60％)。ES+,m/z 378.1[M+H]+；C20H19N5O3；1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.81(s,1H),7.48(d,J＝7.2Hz,2H),7.40–7.36(t,J＝7.6Hz,2H),7.34–7.31(t,J＝5.2Hz,1H),7.21(d,J＝8.4Hz,2H),6.87(d,J＝8.4Hz,2H),6.27(s,2H),5.41(s,2H),4.78(s,2H),3.71(s,3H).
步骤-4：2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(38)
在0℃下，将溴丙炔(7.1ml，63.66mmol)添加到2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(37)(20g，53.05mmol)、K2CO3(10.98g，79.57mmol)在DMF(100mL)中的悬浮液中，并在室温下搅拌18h。将反应混合物用冰水(200mL)淬灭，加入乙醚(150mL)，并搅拌15分钟。过滤得到的沉淀固体，用水洗涤并干燥，得到褐色固体2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(20g，91％)。ES+,m/z 416.1[M+H]+；C23H21N5O3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.52(d,J＝7.2Hz,2H),7.38(t,J＝7.6Hz,2H),7.32(t,J＝5.2Hz,1H),7.22(d,J＝8.4Hz,2H),6.81(d,J＝8.4Hz,2H),6.27(s,2H),5.44(s,2H),4.82(s,2H),4.56(s,2H),3.71(s,3H),3.32-3.26(m,1H).
步骤-5：2-氨基-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(39)
在氩气气氛下，于0℃下将三氟甲磺酸(27g，180.72mmol)添加到2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(25g，60.24mmol)在三氟乙酸(21mL，180.72mmol)中的悬浮液中，并将得到的反应混合物在氩气气氛下于室温搅拌18h。用冰冷的水淬灭反应混合物，在剧烈搅拌下用饱和NaHCO3溶液碱化并过滤。将残余的固体溶于乙酸乙酯中，搅拌30分钟，过滤并干燥，得到2-氨基-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(12g，36％)，为棕色固体。ES+,m/z 206.1[M+H]+；C8H7N5O2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.32(s,1H),6.74(s,2H),4.53(s,2H),3.14(s,1H).
步骤-6：N-(6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(40)
在室温和氩气气氛下，将乙酸酐(4.85mL，47.56mmol)添加到2-氨基-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(6.5g，31.70mmol)在DMF(65mL)中的溶液中，将得到的反应混合物在氩气气氛下于室温搅拌18小时。将反应混合物冷却至0℃(在搅拌下形成固体)并搅拌30分钟。过滤产物，用乙醇洗涤，真空干燥，得到N-(6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(4g，51.2％)，为棕色固体。ES+,m/z 248.1[M+H]+；C10H9N5O3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.83(s,2H),4.61(s,2H),3.23(s,1H),2.16(s,3H).
步骤-6：(2R,3S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-2-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-3-基苯甲酸酯(41)
将N-(6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(400mg，1.61mmol)、(3R,4S,5R)-4-(苯甲酰氧基)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯(716mg，1.61mmol)[85026-60-4](参见M.Popsavin等，Bioorg.Med.Chem.Lett.，2012，22，6700页和G.Gosselin等，J.Het.Chem.，1982，19，597页)、BSA(983mg，4.85mmol)和MeCN(40mL)剧烈混合45分钟，直到获得均匀溶液为止。然后在反应物中加入TMSOTf(540mg，2.42mmol)，并置于75℃的预热油浴中。4小时后，将反应冷却至室温，并通过旋转蒸发除去溶剂。将所得固体溶于乙酸乙酯(100mL)中，并用饱和NaHCO3水溶液(2×30mL)萃取。用Na2SO4干燥有机相并浓缩。通过柱色谱法(SiO2，0-40％乙酸乙酯-石油醚)纯化粗产物，得到190mg(18.64％)的浅黄色固体(2R,3S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-2-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-3-基苯甲酸酯。ES+,m/z 630.1[M+H]+；C31H27N5O10；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.89(s,1H),8.02(d,J＝6.8Hz,2H),7.86(d,J＝7.2Hz,2H),7.68–7.61(m,2H),7.54–7.45(m,5H),6.48–6.46(m,1H),5.83–5.79(m,2H),4.76(d,J＝6.0Hz,1H),4.68(s,2H),4.64(d,J＝4.8Hz,1H),4.57–4.53(m,1H),3.29(s,1H),2.15(s,3H),2.07(s,3H).
步骤7：2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物5
将(2R,3S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-2-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-3-基苯甲酸酯(500mg，0.79mmol)溶解于甲醇(10mL)中。加入K2CO3(164mg，1.19mmol)，并将反应在室温搅拌16h。加入乙酸(96mg，1.58mmol)，并通过旋转蒸发浓缩反应。粗产物通过GRACE反相纯化(MeCN-0.01％的HCO2H的H2O溶液)纯化，得到120mg(45％)的2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物5，为灰白色固体。ES+,m/z 338.0[M+H]+；C13H15N5O6；1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ11.56(s,1H),6.94(s,2H),5.73(s,2H),5.47(d,J＝2.8Hz,1H),4.62(d,J＝2Hz,2H),4.50(s,2H),3.91–3.88(m,2H),3.68–3.65(m,1H),3.59–3.54(m,1H),3.25–3.24(m,1H).
实施例26A：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物26
使用与实施例5A所述相同的通用方法，还根据以下替代的多步方法合成了化合物26。
步骤-1：((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(42)
将N-(6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(1g，4.04mmol)、(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯[4613-71-2](参见P.J.Bolon等，Tetrahedron，1994，50，7747页)(1.30g，4.04mmol)和BSA(2.45g，12.14mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液在70℃下剧烈搅拌45分钟，直到形成均匀的溶液。将反应混合物冷却至室温，并在真空下浓缩。将粗浓缩物溶于MeCN(50mL)中，然后加入TMSOTf(1.35mL，6.07mmol)，并置于90℃的预热油浴中。16小时后，将反应冷却至室温，并旋转蒸发除去溶剂。将所得固体溶于EtOAc(200mL)中，并用饱和NaHCO3水溶液(2×50mL)萃取。用Na2SO4干燥有机相并浓缩。通过柱色谱法(SiO2，0-40％乙酸乙酯-石油醚)纯化粗产物，得到700mg(33.98％)的浅黄色固体((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯。ES+,m/z510.1[M+H]+；C24H23N5O8.
步骤2：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物26
向溶于甲醇(20mL)中的((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(1g，1.96mmol)中加入K2CO3(407mg，2.9mmol)。反应混合物在室温下搅拌16小时。加入乙酸(236mg，3.9mmol)，并将混合物通过旋转蒸发浓缩。粗产物通过GRACE反相纯化(MeCN-0.01％的HCO2H的H2O溶液)纯化，得到200mg(32％)的2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，为灰白色固体。ES+,m/z322.0[M+H]+；C13H15N5O5.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.03(s,1H),6.59(s,2H),5.51(d,J＝2.8Hz,1H),5.40(d,J＝4.0Hz,1H),4.80(d,J＝2.8Hz,1H)4.70(s,1H),4.58(d,J＝1.6Hz,2H),4.14(m,1H),3.45(m,2H),3.22(s,1H),2.34(m,1H),1.82(m,1H).
实施例27A：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物27
使用与实施例5A所述相同的通用方法，还根据以下替代的多步方法合成了化合物27。
步骤-1：((2R,3R,4S,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(43)
将N-(6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(500mg，2.042mmol)、(2S,3S,4R,5R)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯(参见R.F.Schinazi等，Het.Comm，2015，21，315页)(1.376g，4.04mmol)和BSA(331mg，2.2mmol)的1,2-二氯乙烷(50mL)溶液在70℃下剧烈搅拌45分钟，直到形成均匀溶液。将反应混合物冷却至室温，并在真空下浓缩。将粗浓缩物溶于MeCN(50mL)中，然后加入TMSOTf(0.186mL，0.81mmol)，并置于90℃的预热油浴中。16小时后，将反应冷却至室温，并旋转蒸发除去溶剂。将所得固体溶于乙酸乙酯(200mL)中，并用饱和NaHCO3水溶液(2×50mL)萃取。用Na2SO4干燥有机层并浓缩。通过柱色谱法(SiO2，0-40％乙酸乙酯-石油醚)纯化粗产物，得到200mg(18.25％)的浅黄色固体((2R,3R,4S,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯。ES+,m/z 528.1[M+H]+；C24H22FN5O8.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.80(s,1H),9.32(s,1H),8.03(d,J＝7.2Hz,2H),7.64–7.60(t,J＝7.2Hz,1H),7.49–7.45(t,J＝8.0Hz,2H),6.22(d,J＝5.6Hz,1H),5.93–5.87(m,1H),5.53–5.48(m,1H),5.14–5.09(m,1H),4.82(s,2H),4.75–4.69(m,1H),4.68–4.54(m,1H),2.33(s,3H),2.29(m,1H),2.14(s,3H).
步骤-2：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物27
向溶于MeOH(10mL)中的((2R,3R,4S,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(500mg，0.948mmol)中加入K2CO3(131mg，0.948mmol)。反应混合物在室温下搅拌16小时。加入乙酸(114mg，1.896mmol)，并将反应混合物通过旋转蒸发浓缩。粗产物通过GRACE反相纯化(MeCN-0.01％的HCO2H的H2O溶液)纯化，得到120mg(37.38％)的2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物27，为淡褐色固体。ES+,m/z 340.1[M+H]+；C13H14FN5O5.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.00(s,1H),6.59(s,2H),5.79(d,J＝6.4Hz,1H),5.62(d,J＝7.6Hz,1H),5.24–5.17(m,1H),5.09(d,J＝3.6Hz,1H),4.96–4.93(t,J＝6.8Hz,1H),4.60(s,2H),4.15–4.16(m,1H),3.59–3.50(m,2H),3.24(s,1H).
化合物32的替代合成方法。
实施例32A：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物32
化合物32还按照以下替代多步法制备。
步骤-1：N-(6-氯-9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(44)
在室温和氩气气氛下，将乙酸酐(13.04ml，85.224mmol)添加到2-氨基-6-氯-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(36)(13.0g，42.622mmol)的DMF(100mL)溶液中，将得到的反应混合物在140℃下搅拌18小时。将反应混合物冷却至0℃(在搅拌下形成固体)并搅拌30分钟。过滤产物，用水洗涤，真空干燥，得到N-(6-氯-9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(9.0g，51.2％)，为棕色固体；ES+,m/z 348.1[M+H]+,C15H14ClN5O3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.90(s,1H),10.55(s,1H),7.33(d,J＝8.8Hz,2H),6.87(d,J＝8.4Hz,2H),4.87(s,2H),3.71(s,3H),2.13(s,3H).
步骤-2：N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(45)
将10％Pd/C(3.5g)加入N-(6-氯-9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(15.0g，28.81mmol)的甲醇(200mL)和THF(400mL)溶液中。将反应混合物在Parr振荡瓶中在80psi的压力下用氢气在室温下氢化24小时。通过硅藻土垫过滤反应混合物，并将滤液蒸发，得到粗固体。将固体溶于乙醚中，搅拌15分钟，过滤并重复。将固体在真空下干燥成浅褐色固体，得到N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(10.5g，77.6％)。1H NMR和LC-MS表明乙酰化(37％)ES+,m/z 314.2[M+H]+；C15H15N5O3；和去乙酰化(43％)ES+,m/z 272.2[M+H]+；C13H13N5O2；化合物。粗混合物可用于下一步。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.55(s,1H),8.09(s,1H),7.33(d,J＝8.8Hz,2H),6.87(d,J＝8.8Hz,2H),4.93(s,2H),3.72(s,3H),2.24(s,3H).
步骤-3：N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(46)
在0℃下，将溴丙炔(6.0mL，40.255mmol)添加到N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(45)(10.5g，33.546mmol)、K2CO3(6.95g，50.319mmol)在DMF(50mL)中的悬浮液中，并在室温下搅拌18h。将反应混合物用冰水(200mL)淬灭，加入乙醚(150mL)，并搅拌15分钟。过滤得到的沉淀固体，用水洗涤并干燥，得到褐色固体N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(8.5g，72.21％)。ES+,m/z352.2[M+H]+；C18H17N5O3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.41(s,1H),8.32(s,1H),7.35(d,J＝8.4Hz,2H),6.88(d,J＝8.4Hz,2H),4.92(s,2H),4.73(s,2H),3.71(s,3H),3.42(s,1H),2.15(s,3H).
步骤-4：2-氨基-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(47)
在氩气气氛下，于0℃将三氟甲磺酸(4.5ml)加到N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(4.5g，12.82mmol)在三氟乙酸(4.5mL)中的悬浮液中，将得到的反应混合物在室温搅拌18小时。用冰冷的水淬灭反应混合物，在剧烈搅拌下用饱和NaHCO3溶液碱化并过滤。将残余的固体溶于乙酸乙酯中，搅拌30分钟，过滤并干燥，得到2-氨基-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(2.0g，82.64％)，为棕色固体。ES+,m/z 190.1[M+H]+；C8H7N5O2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.32(s,1H),7.57(s,1H),5.60(s,2H),4.46(s,2H),3.22(s,1H).
步骤-5：N-(8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(48)
在室温和氩气气氛下，将乙酸酐(7mL，68.78mmol)添加到2-氨基-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(6.5g，34.39mmol)的DMF(65mL)溶液中，将得到的反应混合物在140℃下搅拌18小时。将反应混合物冷却至0℃并搅拌30分钟，由此形成固体。过滤产物，用水洗涤，真空干燥，得到N-(8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(4g，50.34％)，为棕色固体；C10H9N5O3；1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ9.80(s,1H),7.76(s,1H),6.17(s,1H),4.53(s,2H),3.24(s,1H),2.11(s,3H).
步骤-6：((2R,3R,4S,5R)-5-(2-乙酰胺基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(49)
N-(8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺(2.0g，8.65mmol)、(2S,3S,4R,5R)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯(5.887g，17.316mmol)、BSA(5.283g，25.974mmol)和二氯乙烷(50mL)。将所得反应混合物在氩气下于80℃搅拌30分钟。将反应混合物在减压下浓缩，将残余物用ACN(100mL)稀释，然后加入TMSOTf(2.886g，12.987mmol)，并置于80℃的预热油浴中。18小时后，将反应冷却至室温，并通过旋转蒸发除去溶剂。将所得固体溶于乙酸乙酯(100mL)中，并用饱和NaHCO3水溶液(2×30mL)洗涤。用Na2SO4干燥有机相并浓缩。通过柱色谱法(SiO2，0-40％乙酸乙酯-石油醚)纯化粗产物，得到(2g，47.16％)的浅黄色固体((2R,3R,4S,5R)-5-(2-乙酰胺基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯。ES+,m/z 512.2[M+H]+；C24H22FN5O7；LC-MS显示83.5％的所需m/z，1H-NMR显示所需的信号以及一些溶剂残余物。下一步使用粗化合物，无需分离。
步骤7：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物32
将((2R,3R,4S,5R)-5-(2-乙酰胺基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(5.0g，11.13mmol)溶于密闭容器中的甲醇氨(7M)(500mL)中。将反应在室温下搅拌5天。通过旋转蒸发浓缩反应混合物，得到稠固体。将该固体溶于最小量的甲醇和乙腈(50mL)中，加入并搅拌2小时。过滤固体，得到(1.4g，38.93％)的2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物32，为浅棕色固体。ES+,m/z 324.1[M+H]+；C13H14N5O4；1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.05(s,1H),6.42(s,2H),5.84(d,J＝6Hz,1H),5.71(d,J＝7.5Hz,1H),5.32–5.27(m,1H),),5.12–5.01(m,1H),4.96–4.93(t,J＝6Hz,1H),4.65(s,2H),4.17–4.10(m,1H),3.63–3.51(m,2H),3.40(s,1H).
实施例33：2-氨基-7-苄基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物33
使用与实施例5A所述相同的通用方法，还根据以下的多步方法合成了化合物33。
步骤-1：2-氨基-7-苄基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(50)
在0℃下将苄基溴(1.36g，7.95mmol)添加到2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(2g，5.305mmol)和K2CO3(2.1g，15.91mmol)在DMF(20mL)中的悬浮液中，并在室温下搅拌18h。将反应混合物用冰水(120mL)淬灭，用乙醚(80mL)稀释并搅拌15分钟。过滤得到的沉淀固体，用水洗涤并干燥，得到灰白色固体2-氨基-7-苄基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(2.0g，83％)；ES+,m/z 468.2[M+H]+；C27H25N5O3:1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.32–7.20(m,10H),7.12–7.09(m,2H),6.87(d,J＝12Hz,2H),6.41(s,2H),5.34(s,2H),4.95(s,2H),4.85(s,2H),3.71(s,3H).
步骤-2：2-氨基-7-苄基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(51)
在氩气气氛下，于0℃将三氟甲烷磺酸(2.2mL，25.64mmol)添加到2-氨基-7-苄基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(2g，4.28mmol)在三氟乙酸(2.09mL，25.64mmol)中的悬浮液中，并将所得反应混合物缓慢温热至室温并搅拌3小时。用冰冷的水淬灭反应混合物，在剧烈搅拌下用饱和NaHCO3溶液碱化并过滤。将残余的固体溶于乙酸乙酯中，搅拌30分钟，过滤并干燥，得到2-氨基-7-苄基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(0.5g，45％)，为棕色固体。ES+,m/z 258.1[M+H]+；C12H11N5O2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):1H NMR:δ11.16(s,1H),10.64(s,1H),7.30–7.22(s,5H),6.37(s,2H),4.93(s,2H).
步骤-3：N-(7-苄基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(52)
在环境温度和氩气气氛下，将乙酸酐(0.28mL，5.36mmol)加入到DMF(5mL)中的溶液2-氨基-7-苄基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(0.500g，1.945mmol)中，将得到的反应混合物在氩气气氛下于130℃加热3小时。将反应混合物冷却至0℃(在搅拌下形成固体)并搅拌30分钟。过滤产物，用乙醇洗涤，真空干燥，得到N-(7-苄基-6,8-二氧代-6,7,8,9四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(0.3g，51％)，为棕色固体。该粗化合物直接用于下一步。C14H13N5O3:1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.01(s,1H),11.76(s,1H),11.65(s,1H),7.32–7.31(m,5H),5.01(s,2H),2.14(s,3H).
步骤-4：((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-苄基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(53)
将溶解于1,2-二氯乙烷(10mL)中的N-(7-苄基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(300mg，1.0mmol)、(3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯(387.6mg，1.204mmol)、BSA(0.76mL，3.010mmol)在氩气下于80℃搅拌30分钟。将反应混合物在减压下浓缩，残余物用无水乙腈(10mL)稀释，并向溶液中加入TMSOTf(0.12mL，0.707mmol)。将反应混合物置于80℃的预热油浴中并搅拌。3小时后，将反应混合物冷却至室温，并在减压下除去溶剂。将所得固体溶于乙酸乙酯(80mL)中，并将溶液与饱和NaHCO3水溶液(2×30mL)一起搅拌。分离有机相，用Na2SO4干燥并浓缩。通过柱色谱法(SiO2，0-60％乙酸乙酯-石油-醚)纯化粗化合物，得到((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-苄基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(100mg，17％)，为灰白色固体；
ES+,m/z 262.2[M+H]+；C28H27N5O8.
步骤-5：2-氨基-7-苄基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物33
在室温下向((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-苄基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(0.1g，0.178mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中添加K2CO3(122.9mg，0.891mmol)，将反应混合物在室温搅拌16小时。通过LC-MS监测反应进程。起始原料完全消耗后，将反应混合物减压浓缩。粗产物通过使用甲醇和二氯甲烷的Grace快速色谱法纯化，通过LC-MS得到92％的40mg产物。将该化合物进一步溶于1mL甲醇中，并搅拌20分钟。通过过滤收集沉淀的化合物并干燥，得到2-氨基-7-苄基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物33(15mg，22％)，为灰白色固体。ES+,m/z 374.2[M+H]+；C17H19N5O5；1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ10.97(s,1H),7.32–7.31(s,5H),6.52(s,2H),5.52(d,J＝5Hz,1H),5.35(d,J＝5Hz,1H),4.98(s,2H),4.82–4.78(m 1H),4.69(t,J＝10Hz,1H),4.14–412(m,1H),3.48–3.41(m,2H),2.37–2.32(m,1H),1.84–1.79(m,1H).
实施例34：2-氨基-7-(3-氟苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物34
使用与实施例5A所述相同的通用方法，还根据以下的多步方法合成了化合物34。
步骤-1：2-氨基-6-(苄氧基)-7-(3-氟苄基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(54)
在0℃下将3-氟苄基溴(0.75ml，5.96mmol)添加到2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(2g，5.305mmol)和K2CO3(1.64g，11.93mmol)在DMF(20mL)中的悬浮液中，并在室温下搅拌18h。将反应混合物用冰水(120mL)淬灭，用乙醚(80mL)稀释并搅拌15分钟。过滤得到的沉淀固体，用水洗涤并干燥，得到灰白色固体2-氨基-6-(苄氧基)-7-(3-氟苄基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(1.7g，89％)；ES+,m/z486.1[M+H]+；C27H24FN5O3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.31–7.29(m 4H),7.26–7.21(m,4H),7.09–7.04(m 1H),6.93–6.87(m,4H),6.44(s,1H),5.33(s,2H),4.96(s,2H),4.86(s,2H),3.71(s,3H).
步骤-2：2-氨基-7-(3-氟苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(55)
在氩气气氛下，于0℃将三氟甲磺酸(1.85mL，21.03mmol)添加到2-氨基-6-(苄氧基)-7-(3-氟苄基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(1.7g，3.50mmol)在三氟乙酸(2.09mL，21.03mmol)中的悬浮液中，并将所得反应混合物缓慢温热至室温并搅拌3小时。用冰冷的水淬灭反应混合物，在剧烈搅拌下用饱和NaHCO3溶液碱化并过滤。将残余的固体溶于乙酸乙酯中，搅拌30分钟，过滤并干燥，得到2-氨基-7-(3-氟苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(0.7g，72％)，为棕色固体；ES+,m/z 276.1[M+H]+；C12H10FN5O2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.2(s,1H),10.67(s,1H),7.36–7.33(m,1H),7.13–7.05(m,4H),6.39(s,2H),4.94(s,2H).
步骤-3：N-(7-(3-氟苄基)-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(56)
在环境温度和氩气气氛下，将乙酸酐(0.76mL，7.63mmol)加入到2-氨基-7-(3-氟苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(0.7g，2.545mmol)在DMF(10mL)中的溶液中，将得到的反应混合物在氩气气氛下于130℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至0℃(在搅拌下形成固体)并搅拌30分钟。过滤产物，用乙醇洗涤，真空干燥，得到N-(7-(3-氟苄基)-6,8-二氧代-6,7,8,9四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(600mg，75％)，为棕色固体。该粗化合物直接用于下一步。ES-,m/z316.1[M-H]-；C14H12FN5O3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.02(s,1H),11.80(s,1H),11.66(s,1H),7.38–7.34(m,1H),7.16–7.07(m,4H),5.02(s,2H),2.14(s,3H).
步骤-4：((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-(3-氟苄基)-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(57)
将N-(7-3-氟苄基)-6,8-二氧代-6,7,8,9四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(440mg，1.338mmol)、(3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯(536mg，1.66mmol)、BSA(1.0mL，4.16mmol)溶解于1,2-二氯甲烷(10mL)，将得到的反应混合物在氩气下于80℃搅拌30分钟。将反应混合物在减压下浓缩，残余物用无水乙腈(10mL)稀释，并加入TMSOTf(0.17mL，0.97mmol)。将反应混合物置于80℃的预热油浴中并搅拌。3小时后，将反应混合物冷却至室温，并在减压下除去溶剂。将所得固体溶于乙酸乙酯(80mL)中，并将溶液与饱和NaHCO3水溶液(2×30mL)一起搅拌。分离有机相，用Na2SO4干燥并浓缩。通过柱色谱法(SiO2，0-60％乙酸乙酯-石油-醚)纯化粗化合物，得到((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-(3-氟苄基)-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(150mg，18％)，为灰白色固体；ES+,m/z 580.1[M+H]+；C28H26FN5O8；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.1(s,1H),11.55(s,1H),7.88(d,J＝8Hz,2H),7.64–7.60(m,2H),7.44(t,J＝8Hz,3H),7.16–7.07(m,3H),5.76–5.72(m,2H),5.05(S,2H),4.51(d,J＝8Hz,2H),4.40–4.36(m,1H),3.16(d,J＝4,1H),2.17(s,3H),2.15(s,3H).
步骤-5：2-氨基-7-(3-氟苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物34
在室温下向((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-(3-氟苄基)-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(150mg，0.259mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中添加K2CO3(177.4mg，1.295mmol)，将反应混合物在室温搅拌16小时。通过LC-MS监测反应进程。反应完成后，减压除去溶剂。所得粗化合物通过使用甲醇和二氯甲烷的GRACE快速色谱法纯化，得到50mg产物。LC-MS显示75％的产物。将不纯的产物溶于1mL甲醇中，搅拌20分钟，然后过滤并干燥，得到2-氨基-7-(3-氟苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(化合物34)(16mg，22％)，为灰白色固体；ES+,m/z 392.1[M+H]+；C17H18FN5O5；1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ10.87(s,1H),7.39–7.35(m,1H),7.15–7.08(m,3H),6.52(s,2H),5.52(d,J＝5Hz,1H),5.36(d,J＝5Hz,1H),4.99(s,2H),4.82–4.79(s,1H),4.67(t,J＝10Hz,1H),4.15–4.11(m,1H),3.48–3.39(m,2H),2.36–2.32(m,1H),1.84–1.80(m,1H).
实施例35：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物35
使用与实施例5A所述相同的通用方法，还根据以下的多步方法合成了化合物35。
步骤-1：2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(58)
在0℃下将1-(溴甲基)-4-(三氟甲基)苯(2.28g，9.54mmol)添加到2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(3g，7.95mmol)和K2CO3(1.64g，11.93mmol)在DMF(30mL)中的悬浮液中，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用冰水(120mL)淬灭，用乙醚(80mL)稀释并搅拌15分钟。过滤收集得到的沉淀物，用水洗涤并干燥，得到2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(3.8g，90％)，为灰白色固体；ES+,m/z 536.2[M+H]+；C28H24F3N5O3；1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.60(d,J＝8.4Hz,2H),7.31–7.21(m,7H),7.16(d,J＝6.4Hz,2H),6.89(d,J＝8.8Hz,2H),6.45(s,2H),5.31(s,2H),5.04(s,2H),4.87(s,2H),3.71(s,3H).
步骤-2：2-氨基-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(59)
在氩气气氛下，于0℃将三氟甲磺酸(1.97mL，22.42mmol)添加到2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(2g，3.73mmol)在三氟乙酸(1.7mL，3.73mmol)中的悬浮液中，并将所得反应混合物缓慢温热至室温并搅拌3小时。用冰冷的水淬灭反应混合物，在剧烈搅拌下用饱和NaHCO3溶液碱化并过滤。将残余的固体放入乙醚(100mL)中，搅拌30分钟，过滤并干燥，得到2-氨基-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(1g；83％)，为灰白色固体：ES+,m/z 326.1[M+H]+；C13H10F3N5O2:1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.24(s,1H),10.67(s,1H),7.69(d,J＝8.4Hz,2H),7.48(d,J＝8Hz,2H),6.40(s,2H),5.02(s,2H).
步骤-3：N-(6,8-二氧代-7-(4-(三氟甲基)苄基)-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(60)
在环境温度和氩气气氛下，将乙酸酐(2mL)添加到2-氨基-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(1.4g，4.30mmol)在DMF(20mL)中的溶液中，将得到的反应混合物在140℃加热3小时。在搅拌下将反应混合物冷却至0℃，由此形成固体。继续搅拌30分钟，将产物过滤，并真空干燥，得到N-(6,8-二氧代-7-(4-(三氟甲基)苄基)-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(1g，63％)，为灰白色固体：ES+,m/z 368.1[M+H]+；C15H12F3N5O3:1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.36(s,1H),11.44(s,1H),7.70(d,J＝8Hz,2H),7.57(d,J＝8.4Hz,2H),6.98(br s,1H),5.19(s,2H),2.17(s,3H).
步骤-4：((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(4-(三氟甲基)苄基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(61)
将N-(6,8-二氧代-7-(4-(三氟甲基)苄基)-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(350mg，0.953mmol)、(3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯(368mg，1.143mmol)、和BSA(0.72mL，2.859mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(10mL)，将得到的反应混合物在氩气下于80℃搅拌30分钟。使反应混合物冷却至室温，并加入TMSOTf(0.12mL，0.667mmol)。将反应混合物在80℃下保持3小时，然后冷却至室温，用水稀释并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并的有机层用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥并在减压下浓缩。通过快速色谱法(SiO2，0-60％EtOAc-石油-醚)纯化粗化合物，得到((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(4-(三氟甲基)苄基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(70mg，11％)，为灰白色固体：C29H26F3N5O8:LC-MS表明期望质量的84％；ES+,m/z 368.1[M+H]+.
步骤-5：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物35
在0℃下，向((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-6,8-二氧代-7-(4-(三氟甲基)苄基)-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(70mg，0.111mmol)的甲醇(5mL)溶液中添加K2CO3(61mg，0.445mmol)，将反应混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物通过RP快速色谱法直接纯化，并将制备的级分冻干，得到白色固体状的化合物2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(化合物35)(25mg，51％)；ES+,m/z 442.1[M+H]+；C18H18F3N5O5:1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ10.95(s,1H),7.70(d,J＝8.5Hz,2H),7.51(d,J＝8Hz,2H),6.58(s,2H),5.54(d,J＝3Hz,1H),5.37(d,J＝4.5Hz,1H),5.07(s,2H),4.82–4.80(m,1H),4.69–4.67(m,1H),4.15–4.13(m,1H),3.47–3.40(s,2H),2.38–2.32(m,1H),1.84–1.80(m,1H).
实施例36：7-烯丙基-2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物36
使用与实施例5A所述相同的通用方法，还根据以下的多步方法合成了化合物36。
步骤-1：7-烯丙基-2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(62)
在0℃下将烯丙基溴(0.767g，5.30mmol)添加到2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(2g，5.298mmol)和K2CO3(1.09g，7.95mmol)在DMF(20mL)中的悬浮液中，并在室温下搅拌18h。将反应混合物用冰水(120mL)淬灭，用乙醚(80mL)稀释并搅拌15分钟。过滤收集得到的沉淀固体，用水洗涤并干燥，得到7-烯丙基-2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(2.0g，76％)，为灰白色固体；ES+,m/z418.1[M+H]+；C23H23N5O3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.44(d,J＝7.5Hz,2H),7.40–7.36(m,2H),7.30(d,J＝4.5Hz,1H),7.21(d,J＝8.5Hz,2H),6.8(d,J＝8.5Hz,2H),6.40(s,2H),5.89–5.82(m,1H),5.37(s,2H),5.05(d,J＝10Hz,1H),5.04(d,J＝15Hz,1H),4.83(s,2H),4.37(d,J＝5Hz,2H),3.71(s,3H).
步骤-2：7-烯丙基-2-氨基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(63)
在氩气气氛下，于0℃将三氟甲磺酸(1.268mL，14.37mmol)添加到7-烯丙基-2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(2g，4.79mmol)在三氟乙酸(1.09mL，14.37mmol)中的悬浮液中，并将所得反应混合物缓慢温热至室温并搅拌3小时。用冰冷的水淬灭反应混合物，在剧烈搅拌下用饱和NaHCO3溶液碱化并过滤。将残余的固体溶于乙酸乙酯中，搅拌30分钟并过滤；干燥残余物，得到7-烯丙基-2-氨基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(0.54g，56％)，为棕色固体。ES+,m/z 208.1[M+H]+；C8H9N5O2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ11.15(s,1H),10.81(s,1H),6.36(s,2H),5.92–5.85(m,1H),5.07(d,J＝12.5Hz,1H),5.04(d,J＝478Hz,1H),4.33(d,J＝5.5Hz,2H).
步骤-3：N-(7-烯丙基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(64)
在环境温度和氩气气氛下，将乙酸酐(0.74mL)加入到7-烯丙基-2-氨基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(0.54g，7.82mmol)在DMF(5mL)中的溶液中，将得到的反应混合物在氩气气氛下于130℃加热3小时。将反应混合物冷却至0℃，在30分钟后搅拌下形成固体。通过过滤收集产物，用乙醇洗涤，真空干燥，得到N-(7-烯丙基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(0.50g，61％)，为棕色固体。该粗化合物直接用于下一步。ES+,m/z250.1[M+H]+；C10H11N5O3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.99(s,1H),11.74(s,1H),11.67(s,1H),5.96–5.87(m,1H),5.10(d,J＝1.6Hz,1H),5.04(d,J＝1.6Hz,1H),4.4(d,J＝5.6Hz,2H),2.19(s,3H).
步骤-4：((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-烯丙基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(65)
将N-(7-烯丙基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(500mg，2.01mmol)、(3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯(969mg，3.01mmol)、BSA(1.47mL，6.08mmol)溶解于ACN(10mL)中。将所得反应混合物在氩气下于80℃搅拌30分钟。将反应混合物在减压下浓缩，残余物用无水乙腈(9.5mL，1.40mmol)稀释，并加入TMSOTf(0.254mL，1.40mmol)。将反应混合物置于80℃的预热油浴中并搅拌。3小时后，将反应混合物冷却至室温，并在减压下除去溶剂。将所得固体溶于乙酸乙酯(80mL)中，并将溶液与饱和NaHCO3水溶液(2×30mL)一起摇动。分离有机相，用Na2SO4干燥并浓缩。通过柱色谱法(SiO2，0-60％EtOAc-石油-醚)纯化粗化合物，得到((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-烯丙基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(180mg，24％)，为灰白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ12.1(s,1H),11.51(s,1H),7.90(d,J＝10Hz,2H),7.65–7.61(m,1H),7.46(t,J＝8.5Hz,2H),5.87–5.75(m,1H),5.75–5.72(m,2H),5.11–5.01(m,2H),4.53(d,J＝5Hz,2H),4.46(d,J＝2.5Hz,2H),4.40–4.36(m,1H),2.92(m,1H),2.14(s,3H),2.10(m,1H),2.08(s,3H).
步骤-5：7-烯丙基-2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物36
在室温下搅拌在密封容器中得到的((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-烯丙基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(180mg，0.352mmol)在7M氨的甲醇(5mL)中的溶液。通过LC-MS监测反应进程。起始原料完全消耗后，将反应混合物减压浓缩。将所得的稠固体溶于最小量的甲醇中，并加入乙醚(10mL)，搅拌30分钟并过滤。干燥后，分离出灰白色固体状的7-烯丙基-2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(化合物36)(60mg，51％)。ES+,m/z324.1[M+H]+；C13H17N5O5；1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ10.91(s,1H),6.51(s,2H),5.90(m,1H),5.53(d,J＝2.5Hz,1H),5.37(d,J＝4Hz,1H),5.06(dd,J＝10Hz,2H),4.72(bs,2H),4.39(d,J＝4Hz,2H),4.14(s,1H),3.44(m,2H),2.35(m,1H),1.82(m,1H).m.p.＝199-203℃.
实施例37：2-氨基-7-丁基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物37
使用与实施例5A所述相同的通用方法，还根据以下的多步方法合成了化合物37。
步骤-1：2-氨基-6-(苄氧基)-7-丁基-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(66)
在0℃下将丁基溴(0.43ml，3.183mmol)添加到2-氨基-6-(苄氧基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(1g，2.65mmol)和K2CO3(0.548g，3.97mmol)在DMF(10mL)中的悬浮液中，并在室温下搅拌18h。将反应混合物用冰水(120mL)淬灭，用乙醚(80mL)稀释并搅拌15分钟。通过过滤收集得到的沉淀固体，用水洗涤并干燥，得到褐色固体2-氨基-6-(苄氧基)-7-丁基-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(0.80g，69％)；ES+,m/z433.1[M+H]+；C24H27N5O3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.4(d,J＝6.8Hz,2H),7.34–7.41(m,3H),7.20(d,J＝8Hz,2H),6.8(d,J＝8.8Hz,2H),6.4(s,2H),5.4(s,2H),4.8(s,2H),3.7(t,J＝15.6Hz,5H),1.5(t,J＝14.4Hz,2H),1.11–1.17(m,2H),0.76(t,J＝14.8Hz,3H).
步骤-2：2-氨基-7-丁基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(67)
在氩气气氛下，于0℃将三氟甲磺酸(1.03g，6.89mmol)加入2-氨基-6-(苄氧基)-7-丁基-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(1.0g，2.30mmol)在三氟乙酸(0.786mL，6.89mmol)中的悬浮液中。将反应混合物缓慢温热至室温，并搅拌3小时。将反应混合物用冰冷的水淬灭，并在剧烈搅拌下加入饱和NaHCO3溶液。过滤固体，将其溶于乙酸乙酯中，搅拌30分钟，过滤并干燥，得到2-氨基-7-丁基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(0.30g，58％)，为棕色固体。ES+,m/z 224.1[M+H]+；C9H13N5O2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.0(s,1H),10.6(s,1H),6.3(s,2H),3.7(t,J＝16Hz,2H),1.5–1.6(m,2H),1.25–1.20(m,2H),0.8(t,J＝12Hz,3H).
步骤-3：N-(7-丁基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(68)和N-乙酰基-N-(7-丁基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(68a)
在环境温度和氩气气氛下，将乙酸酐(0.20ml，2.01mmol)加入到2-氨基-7-丁基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(0.300g，1.345mmol)的DMF(5mL)溶液中。将得到的反应混合物在氩气气氛下在130℃搅拌3h。将反应混合物冷却至0℃(在搅拌下形成固体)并搅拌30分钟。过滤产物，用乙醇洗涤并真空干燥，得到N-(7-丁基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(68)和N-乙酰基-N-(7-丁基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(68a)(0.150g，42％)的混合物，为棕色固体。LC-MS表明20％的(68)；ES+,m/z 266.1[M+H]+；C11H15N5O3；和49％的(68a)；ES+,m/z 308.1[M+H]+；C13H17N5O4；该混合物直接用于下一步。
步骤-4：((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-丁基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(69)
将N-(7-丁基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(68)和N-乙酰基-N-(7-丁基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(68a)(1.433mmol)的混合物，(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯(0.692g，2.150mmol)和BSA(0.58g，2.86mmol)溶解在二氯乙烷(9.5mL)中，并在氩气下于80℃搅拌30分钟。将反应混合物在减压下浓缩，残余物用无水乙腈(9.5mL)稀释，并加入TMSOTf(0.2g，0.931mmol)。将反应混合物置于80℃的预热油浴中并搅拌。3小时后，将反应混合物冷却至室温，并在减压下除去溶剂。将所得固体溶于乙酸乙酯(80mL)中，并将溶液与饱和NaHCO3水溶液(2×30mL)一起摇动。用Na2SO4干燥有机相并浓缩。通过柱色谱法纯化粗化合物(SiO2，0-60％EtOAc-石油醚作为洗脱剂)，得到200mg(26％)浅黄色固体状的((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-丁基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(通过LC/MS纯度为78％)；ES+,m/z 528.2[M+H]+；C25H29N5O8.
步骤-5：2-氨基-7-丁基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物37
将((2S,4R,5R)-5-(2-乙酰胺基-7-丁基-6,8-二氧代-1,6,7,8-四氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(0.150g，0.285mmol)溶解在甲醇氨(10mL)中，并将反应混合物在室温搅拌18h。减压浓缩该反应混合物。粗产物通过GRACE反相纯化系统纯化(MeCN-0.01％的HCO2H的H2O溶液作为洗脱剂)，得到0.060g(62％)的2-氨基-7-丁基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(化合物37)，为白色固体。ES+,m/z 340.2[M+H]+,C14H21N5O5；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.87(s,1H),6.4(s,2H),5.5(d,J＝4Hz,1H),5.3(d,J＝4Hz,1H),4.70–4.8(m,1H),4.7(t,J＝12Hz,1H),4.1(t,J＝12Hz,1H),3.7(t,J＝16Hz,2H),3.3–3.4(m,2H),2.3–2.5(m,1H),1.7–1.8(m,1H),1.5–1.6(m,2H),1.21–1.27(m,2H),0.8(t,J＝16Hz 3H).
中间体(70)，(71)，(72)，(73)和(74)的制备
根据下面的多步骤方法合成中间体化合物(70-74)。
步骤-1：2-氨基-6-氯-7-(环丙基甲基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(70)
在0℃下将环丙基甲基溴(32.9g，24.39mol)添加到2-氨基-6-氯-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(36)(62g，20.32mol)、K2CO3(42g，30.49mol)在DMF(500mL)中的悬浮液中，然后在室温下搅拌18小时。将反应混合物倒入冰冷的水中，并在室温下搅拌30分钟。通过过滤收集沉淀的固体产物，并在真空下干燥，得到褐色固体2-氨基-6-氯-7-(环丙基甲基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(70)(60g，82％)。TLC：30％乙酸乙酯的己烷溶液；Rf:0.4；ES+,m/z 360.1[M+H]+；C17H18ClN5O2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.23(d,J＝8.4Hz,2H),6.89(d,J＝8.8Hz,2H),6.75(s,2H),4.86(s,2H),3.80(d,J＝6.8Hz,2H),3.71(s,3H),1.21-1.17(m,1H),0.50-0.46(m,2H),0.37-0.34(m,2H).
步骤-2：2-氨基-7-(环丙基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(71)
将10％Pd-C(5.0g)加入到2-氨基-6-氯-7-(环丙基甲基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(70)(20g，mmol)在甲醇(500mL)中的悬浮液中。将反应混合物在Parr振荡瓶中在80psi的压力下用氢气在室温下氢化24小时。通过硅藻土垫过滤反应混合物，并将滤液蒸发，得到粗产物。向粗化合物中加入乙腈，搅拌15分钟，过滤。重复该步骤，并将固体真空干燥，得到灰白色固体状的2-氨基-7-(环丙基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(71)(11g，64％)。TLC：70％乙酸乙酯的己烷溶液；Rf:0.2；ES+,m/z 206.2[M+H]+；C9H11N5O.1HNMR(500MHz,DMSO-d6):δ12.68(s,1H),8.11(s,1H),7.87(s,2H),3.60–3.59(d,J＝7.5Hz,2H),1.18–1.12(m,1H),0.50-0.46(m,2H),0.37-0.34(m,2H).m.p.245-249℃.
步骤-3：2-氨基-6-氯-7-(环丙基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(72)
在氩气气氛下于室温下将无水AlCl3粉末(25g，187mmol)添加到2-氨基-6-氯-7-(环丙基甲基)-9-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(70)(50g，139.2mmol)在1,2-二氯苯(250mL)中的搅拌溶液中，将得到的反应混合物在氩气气氛下于100℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温，并用冰冷的水淬灭，在剧烈搅拌下用饱和NaHCO3溶液碱化并过滤。将过滤的固体溶于二氯甲烷中的10％MeOH中，搅拌30分钟并过滤(重复三次，体积为1.0L溶剂)。使滤液通过硅藻土板，并在减压下浓缩。如此获得的固体用10％甲醇的二氯甲烷溶液洗涤两次并过滤。再次将过滤的固体用乙腈洗涤两次，过滤并干燥，得到褐色固体2-氨基-6-氯-7-(环丙基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(72)(12g，36％)。TLC：50％乙酸乙酯的己烷溶液；Rf:0.3；ES+,m/z 240.1[M+H]+；C9H10ClN5O.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ11.81(s,1H),6.58(s,2H),3.73-3.72(d,J＝7.0Hz,2H),1.21-1.17(m,1H),0.50-0.46(m,2H),0.37-0.34(m,2H).m.p.286-290℃.
步骤-4：2-氨基-6-(苄氧基)-7-(环丙基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(73)
将金属钠(1.43g，62.6mmol)添加到苯甲醇(25.0mL)中1小时(直到所有钠溶解)。将所得粘稠液体冷却至室温，并添加2-氨基-6-氯-7-(环丙基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(72)(5.0g，20.86mmol)。将得到的反应混合物在100℃下搅拌1h，并用冰水(200mL)淬灭。加入乙醚(150mL)并搅拌15分钟。过滤得到的沉淀的固体，用水洗涤并干燥。将固体溶解在15％甲醇-二氯甲烷(500mL)中，通过硅藻土垫过滤，用盐水洗涤并浓缩。所得固体用乙醚洗涤并过滤，得到灰白色固体2-氨基-6-(苄氧基)-7-(环丙基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(73)(3.5g，54％)。TLC：70％乙酸乙酯的石油醚溶液；Rf:0.6；ES+,m/z 312.2[M+H]+；C16H17N5O2.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ11.30(brs,1H),7.48-7.46(m,2H),7.41-7.38(m,2H),7.35–7.30(m,1H),6.15(s,2H),5.41(s,2H),3.56(d,J＝7.0Hz,2H),1.14-1.10(m,1H),0.36-0.32(m,2H),0.23-0.21(m,2H).m.p.238-242℃.
步骤-5：2-氨基-7-(环丙基甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(74)
将2-氨基-6-(苄氧基)-7-(环丙基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(73)(10.0g，32.15mmol)、无水LiBr(3.34g，38.58mmol)、氯三甲基硅烷(4.53g，108.6mmol)在乙腈(700mL)中的悬浮液在室温下搅拌16h。将甲醇(60mL)加入到反应混合物中，并搅拌30分钟。蒸出溶剂至减少约100mL的体积并过滤。滤饼用乙腈洗涤并干燥。将固体溶于饱和NaHCO3溶液(200mL)中，搅拌1h，过滤，用水洗涤并干燥。将固体在10％甲醇/二氯甲烷(50mL)中搅拌，过滤并干燥，得到浅褐色固体2-氨基-7-(环丙基甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮(74)(8.5g，80％)。TLC：10％甲醇的二氯甲烷溶液；Rf:0.4；ES+,m/z222.1[M+H]+；C9H11N5O2.1HNMR(500MHz,DMSO-d6):δ11.06(s,1H),10.68(s,1H),6.36(s,2H),3.58(d,J＝7.0Hz,2H),1.19-1.14(m,1H),0.40-0.36(m,2H),0.33-0.30(m,2H).m.p.364-368℃.
实施例31S：((2R,3S,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯(化合物31S)
化合物31S可以使用实施例31中所述的方法制备，用(23)代替(18)。
实施例32S：2-氨基-9-((2R,3S,4R,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(丙-2-炔-1-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物32S)
化合物32S可以使用实施例32中所述的方法由化合物31S制备。
实施例38：2-氨基-7-(4-氟苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物38
化合物38可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与4-氟苄基溴一起制备。
实施例39：2-氨基-7-(3,4-二氟苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物39
化合物39可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3,4-二氟苄基溴一起制备。
实施例40：2-氨基-7-(4-氯苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物40
化合物40可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与4-氯苄基溴一起制备。
实施例41：2-氨基-7-(3-氯苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物41
化合物41可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3-氯苄基溴一起制备。
实施例42：2-氨基-7-(3,4-二氯苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物42
化合物42可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3,4-二氯苄基溴一起制备。
实施例43：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苄腈，化合物43
化合物43可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与4-氰基苄基溴一起制备。
实施例44：3-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苄腈，化合物44
化合物44可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3-氰基苄基溴一起制备。
实施例45：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物45
化合物45可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与4-(溴甲基)苯甲酸甲酯一起制备。
实施例46：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物46
化合物46可以通过化合物45的酯水解来制备。
实施例47：3-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物47
化合物47可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3-(溴甲基)苯甲酸甲酯一起制备。
实施例48：3-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物48
化合物48可以通过化合物47的酯水解来制备。
实施例49：2-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物49
化合物49可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与2-(溴甲基)苯甲酸甲酯一起制备。
实施例50：2-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物50
化合物50可以通过化合物49的酯水解来制备。
实施例51：2-氨基-7-(E)-肉桂基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物51
化合物51可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与(E)-肉桂基溴化物一起制备。
实施例52：7-((1H-吡唑-5-基)甲基)-2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物52
化合物52可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与5-(溴甲基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯[1001096-27-0]或5-(溴甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑[1313409-97-0]或(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)甲醇[1823866-20-1]的甲磺酸酯一起制备。
实施例53：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物53化合物53可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3-(溴甲基)-1-甲基-1H-吡唑[102846-13-9]一起制备。
实施例54：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(噻吩-2-基甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物54
化合物54可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与2-(溴甲基)-噻吩一起制备。
实施例55：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(噻吩-3-基甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物55
化合物55可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3-(溴甲基)-噻吩一起制备。
实施例56：2-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)乙酸，化合物56
化合物56可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法用2-溴乙酸甲酯和随后的酯水解进行制备。
实施例57：2-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)乙醛，化合物57
化合物57可以根据实施例26中的方法用2-溴-1,1-二甲氧基乙烷制备。
实施例58：2-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)乙腈，化合物58
化合物58可以通过将醛转化为相应的肟并随后将其脱水而由化合物57制备。
实施例59：7-((1H-四唑-5-基)甲基)-2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物59
化合物59可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与5-(氯甲基)-1H-四唑[55408-11-2]一起制备。
实施例60：2-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)-N-(甲磺酰基)乙酰胺，化合物60化合物60可以由化合物56和甲磺酰胺制备。
实施例61：2-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)-N-羟基乙酰胺，化合物61
化合物61可以由化合物56和羟胺制备。
实施例62：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((3-羟基异噁唑-5-基)甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物62
化合物62可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与(3-((4-甲氧基苄基)氧基)异噁唑-5-基)甲醇的甲磺酸酯一起制备。
实施例63：5-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸甲酯，化合物63
化合物63可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与5-(溴甲基)噻吩-2-羧酸甲酯[108499-32-7]一起制备。
实施例64：5-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸，化合物64
化合物64可以由化合物63通过酯水解制备。
实施例65：5-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-3-羧酸乙酯，化合物65
化合物65可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与5-(溴甲基)噻吩-3-羧酸乙酯[206860-16-4]一起制备。
实施例66：5-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-3-羧酸，化合物66
化合物66可以由化合物65通过酯水解制备。
实施例67：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸甲酯，化合物67
化合物67可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与4-(溴甲基)噻吩-2-羧酸甲酯[54796-51-9]一起制备。
实施例68：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸，化合物68
化合物68可以由化合物67通过酯水解制备。
实施例69：(1R,2R)-2-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸，化合物69
化合物69可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法用(1R，2R)-2-(羟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯的甲磺酸酯然后进行酯水解来制备。
实施例70：7-((E)-3-(1H-四唑-5-基)烯丙基)-2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物70
化合物70可以由化合物36和5-乙烯基-1H-四唑[18755-47-0]制备。
实施例71：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲醛，化合物71
化合物71可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与甲基4-(溴甲基)苯甲醛一起制备。
实施例72：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物72
化合物72可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与4-甲氧基-苄基溴一起制备。
实施例73：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3-甲氧基苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物73
化合物73可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3-甲氧基-苄基溴一起制备。
实施例74：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3-羟基苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物74
化合物74可以通过用BBr3使化合物73脱甲基来制备。
实施例75：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(吡啶-3-基甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物75
化合物75可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3-溴甲基吡啶一起制备。
实施例76：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2-氧代-2-(吡咯烷-1-基)乙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物76化合物76可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与溴乙酰吡咯烷[90892-09-4]一起制备。
实施例77：2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物77
化合物77可以按照实施例1中的方法用3’-脱氧-鸟苷[3608-58-0]代替2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(1)[27462-39-1]或按照实施例26A中的方法用(74)代替(40)进行制备。
实施例78：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(甲氧基甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物78
化合物78可以根据实施例26中的方法用氯甲基甲基醚制备。
实施例79：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((甲硫基)甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物79
化合物79可以根据实施例26中的方法用氯甲基甲基硫醚制备。
实施例80：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物80
化合物80可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与2-溴-1,1,1-三氟乙烷[421-06-7]一起制备。
实施例81：2-氨基-7-(2,2-二氟乙基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物81
化合物81可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与2-溴-1,1-二氟乙烷[359-07-9]一起制备。
实施例82：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3,3,3-三氟丙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物82
化合物82可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3-溴-1,1,1-三氟丙烷[460-32-2]一起制备。
实施例83：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,3,3,3-五氟丙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物83
化合物83可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3-溴-1,1,1,2,2-五氟丙烷[422-01-5]或2,2,3,3,3-五氟丙基甲磺酸酯[813-31-0]一起制备。
实施例84：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4,4,4-三氟丁基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物84
化合物84可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与4-溴-1,1,1-三氟丁烷[406-81-5]一起制备。
实施例85：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物85
化合物85可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与1,1,1,2,2-五氟-4-溴丁烷[52671-70-2]一起制备。
实施例86：3-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)丙腈，化合物86
化合物86可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与3-溴丙腈[2417-90-5]一起制备。
实施例87：4-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)丁腈，化合物87
化合物87可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与4-溴丁腈[5332-06-9]一起制备。
实施例88：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-异丁基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物88
化合物88可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与1-溴-2-甲基丙烷一起制备。
实施例89：1-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-腈，化合物89
化合物89可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与1-(羟甲基)环丙烷-1-腈[98730-77-9]的甲磺酸酯一起制备。
实施例90：1-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸，化合物90化合物90可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与1-(羟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯[3697-68-5]的甲磺酸酯一起制备。
实施例91：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物91
化合物91可以根据实施例26或实施例5A和26A中的方法与(1-(三氟甲基)环丙基)甲醇[371917-17-8]的甲磺酸酯一起制备。
实施例92：2-氨基-7-苄基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物92
化合物92可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与苄基溴一起制备。
实施例93：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-氟苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物93
化合物93可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与4-氟苄基溴一起制备。
实施例94：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3-氟苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物94
化合物94可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与3-氟苄基溴一起制备。
实施例95：2-氨基-7-(3,4-二氟苄基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物95
化合物95可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与3,4-二氟苄基溴一起制备。
实施例96：2-氨基-7-(4-氯苄基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物96
化合物96可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与4-氯苄基溴一起制备。
实施例97：2-氨基-7-(3-氯苄基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物97
化合物97可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与3-氯苄基溴一起制备。
实施例98：2-氨基-7-(3,4-二氯苄基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物98
化合物98可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与3,4-二氯苄基溴一起制备。
实施例99：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苄腈，化合物99
化合物99可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与4-氰基苄基溴一起制备。
实施例100：3-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苄腈，化合物100化合物100可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与3-氰基苄基溴一起制备。
实施例101：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物101
化合物101可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与4-(溴甲基)苯甲酸甲酯一起制备。
实施例102：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物102化合物102可以通过化合物101的酯水解来制备。
实施例103：3-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物103
化合物103可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与3-(溴甲基)苯甲酸甲酯一起制备。
实施例104：3-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物104化合物104可以通过化合物103的酯水解来制备。
实施例105：2-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物104
化合物104可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与2-(溴甲基)苯甲酸甲酯一起制备。
实施例105：2-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物105化合物105可以通过化合物104的酯水解来制备。
实施例106：2-氨基-7-(E)-肉桂基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物106
化合物106可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与(E)-肉桂基溴化物一起制备。
实施例107：7-((1H-吡唑-5-基)甲基)-2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物107
化合物107可以根据实施例27或实施例5A和27A中的方法与5-(溴甲基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯[1001096-27-0]或5-(溴甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑[1313409-97-0]或(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)甲醇[1823866-20-1]的甲磺酸酯一起制备。
实施例108：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物108
化合物108可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与3-(溴甲基)-1-甲基-1H-吡唑[102846-13-9]一起制备。
实施例109：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(噻吩-2-基甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物109
化合物109可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与2-(溴甲基)-噻吩一起制备。
实施例110：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(噻吩-3-基甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物110
化合物110可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与3-(溴甲基)-噻吩一起制备。
实施例111：2-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)乙酸，化合物111
化合物111可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法用2-溴乙酸甲酯和随后的酯水解进行制备。
实施例112：2-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)乙醛，化合物112
化合物112可以根据实施例27中的方法用2-溴-1,1-二甲氧基乙烷制备。
实施例113：2-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)乙腈，化合物113
化合物113可以通过将醛转化为相应的肟并随后将其脱水而由化合物112制备。
实施例114：7-((1H-四唑-5-基)甲基)-2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物114
化合物114可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与5-(氯甲基)-1H-四唑[55408-11-2]一起制备。
实施例115：2-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)-N-(甲磺酰基)乙酰胺，化合物115
化合物115可以由化合物111和甲磺酰胺制备。
实施例116：2-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)-N-羟基乙酰胺，化合物116
化合物116可以由化合物111和羟胺制备。
实施例117：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((3-羟基异噁唑-5-基)甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物117
化合物117可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与(3-((4-甲氧基苄基)氧基)异噁唑-5-基)甲醇的甲磺酸酯一起制备。
实施例118：5-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸甲酯，化合物118
化合物118可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与5-(溴甲基)噻吩-2-羧酸甲酯[108499-32-7]一起制备。
实施例119：5-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸，化合物119
化合物119可以通过化合物118的酯水解来制备。
实施例120：5-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-3-羧酸乙酯，化合物120
化合物120可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与5-(溴甲基)噻吩-3-羧酸乙酯[206860-16-4]一起制备。
实施例121：5-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-3-羧酸，化合物121
化合物121可以通过化合物120的酯水解来制备。
实施例122：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸甲酯，化合物122
化合物122可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与4-(溴甲基)噻吩-2-羧酸甲酯[54796-51-9]一起制备。
实施例123：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸，化合物123
化合物123可以通过化合物122的酯水解来制备。
实施例124：(1R,2R)-2-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸，化合物124
化合物124可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法用(1R,2R)-2-(羟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯的甲磺酸酯然后进行酯水解来制备。
实施例125：7-((E)-3-(1H-四唑-5-基)烯丙基)-2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物125
化合物125可由7-烯丙基-2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮和5-乙烯基-1H-四唑[18755-47-0]制备。
实施例126：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲醛，化合物126化合物126可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与甲基4-(溴甲基)苯甲醛一起制备。
实施例127：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物127
化合物127可以根据实施例26或实施例5A和27A和26A中的方法与4-甲氧基-苄基溴一起制备。
实施例128：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3-甲氧基苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物128
化合物128可以根据实施例26或实施例5A和27A和26A中的方法与3-甲氧基-苄基溴一起制备。
实施例129：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3-羟基苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物129
化合物129可以通过用BBr3使化合物128脱甲基来制备。
实施例130：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物130
化合物130可使用与实施例35(化合物35)描述的相同的一般方法由2-氨基-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮和(2S,3S,4R,5R)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯制备。
实施例131：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(吡啶-3-基甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物131
化合物131可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与3-溴甲基吡啶一起制备。
实施例132：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2-氧代-2-(吡咯烷-1-基)乙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物132
化合物132可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与溴乙酰吡咯烷[90892-09-4]一起制备。
实施例133：7-烯丙基-2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物133
化合物133可使用与实施例36(化合物36)描述的相同的一般方法由N-(7-烯丙基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3S,4R,5R)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯制备。
实施例134：2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物134
化合物134可以按照实施例1中的方法用3’-脱氧-(3’S)-氟-鸟苷[123402-21-1]代替2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(1)[27462-39-1]或按照实施例27A中的方法用(74)代替(40)进行制备。
实施例135：2-氨基-7-丁基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物135
化合物135可使用与实施例37(化合物37)描述的相同的一般方法由N-(7-丁基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(68)和/或N-乙酰基-N-(7-丁基-6,8-二氧代-6,7,8,9-四氢-1H-嘌呤-2-基)乙酰胺(68a)和(2S,3S,4R,5R)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯制备。
实施例136：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(甲氧基甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物136
化合物136可以根据实施例27中的方法用氯甲基甲基醚制备。
实施例137：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((甲硫基)甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物137
化合物137可以根据实施例27中的方法用氯甲基甲基硫醚制备。
实施例138：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物138
化合物138可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与2-溴-1,1,1-三氟乙烷[421-06-7]一起制备。
实施例139：2-氨基-7-(2,2-二氟乙基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物139
化合物139可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与2-溴-1,1-二氟乙烷[359-07-9]一起制备。
实施例140：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3,3,3-三氟丙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物140
化合物140可以根据实施例26或实施例5A和27A和26A中的方法与3-溴-1,1,1-三氟丙烷[460-32-2]一起制备。
实施例141：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,3,3,3-五氟丙基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物141
化合物141可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与3-溴-1,1,1,2,2-五氟丙烷[422-01-5]或2,2,3,3,3-五氟丙基甲磺酸酯[813-31-0]一起制备。
实施例142：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4,4,4-三氟丁基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物142
化合物142可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与4-溴-1,1,1-三氟丁烷[406-81-5]一起制备。
实施例143：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物143
化合物143可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与1,1,1,2,2-五氟-4-溴丁烷[52671-70-2]一起制备。
实施例144：3-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)丙腈，化合物144
化合物144可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与3-溴丙腈[2417-90-5]一起制备。
实施例145：4-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)丁腈，化合物145
化合物145可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与3-溴丁腈[5332-06-9]一起制备。
实施例146：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-异丁基-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物146
化合物146可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与1-溴-2-甲基丙烷一起制备。
实施例147：1-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-腈，化合物147
化合物147可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与1-(羟甲基)环丙烷-1-腈[98730-77-9]的甲磺酸酯一起制备。
实施例148：1-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-6,8-二氧代-1,6,8,9-四氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸，化合物148
化合物148可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与1-(羟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯[3697-68-5]的甲磺酸酯一起制备。
实施例149：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-7,9-二氢-1H-嘌呤-6,8-二酮，化合物149
化合物149可以根据实施例27或实施例5A和27A和26A中的方法与(1-(三氟甲基)环丙基)甲醇[371917-17-8]一起制备。
实施例150：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-苄基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物150
化合物150可以根据实施例29中概述的方法，用苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例151：2-氨基-7-苄基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物151
化合物151可以根据实施例30中概述的方法通过化合物150的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例152：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(4-氟苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物152
化合物152可以根据实施例29中概述的方法，用4-氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例153：2-氨基-7-(4-氟苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物153
化合物153可以根据实施例30中概述的方法通过化合物150的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用4-氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例154：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-氟苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物154
化合物154可以根据实施例29中概述的方法，用3-氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例155：2-氨基-7-(3-氟苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物155
化合物155可以根据实施例30中概述的方法通过化合物154的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3-氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例156：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3,4-二氟苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物156
化合物156可以根据实施例29中概述的方法，用3,4-二氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例157：2-氨基-7-(3,4-二氟苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物157
化合物157可以根据实施例30中概述的方法通过化合物156的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3,4-二氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例158：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(4-氯苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物158
化合物158可以根据实施例29中概述的方法，用4-氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例159：2-氨基-7-(4-氯苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物159
化合物159可以根据实施例30中概述的方法通过化合物158的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用4-氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例160：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-氯苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物160
化合物160可以根据实施例29中概述的方法，用3-氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例161：2-氨基-7-(3-氯苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物161
化合物161可以根据实施例30中概述的方法通过化合物160的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3-氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例162：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3,4-二氯苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物162
化合物162可以根据实施例29中概述的方法，用3,4-二氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例163：2-氨基-7-(3,4-二氯苄基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物163
化合物163可以根据实施例30中概述的方法通过化合物162的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3,4-二氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例164：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(4-氰基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物164
化合物164可以根据实施例29中概述的方法，用4-氰基苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例165：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苄腈，化合物165
化合物165可以根据实施例30中概述的方法通过化合物164的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用4-氰基苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例166：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-氰基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物166
化合物166可以根据实施例29中概述的方法，用3-氰基苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例167：3-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苄腈，化合物167
化合物167可以根据实施例30中概述的方法通过化合物166的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3-氰基苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例168：4-((9-((2R,3R,5S)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物168化合物168可以根据实施例29中概述的方法，用4-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例168a：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物168a
化合物168a可以通过将化合物168暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例169：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物169
化合物169可以根据实施例30中概述的方法通过化合物168的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用4-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例170：3-((9-((2R,3R,5S)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物170
化合物170可以根据实施例29中概述的方法，用3-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例170a：3-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物170a
化合物170a可以通过将化合物170暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例171：3-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物171
化合物171可以根据实施例30中概述的方法通过化合物170的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例172：2-((9-((2R,3R,5S)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物172
化合物172可以根据实施例29中概述的方法，用2-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例172a：2-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物172a
化合物172a可以通过将化合物172暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例173：2-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物173
化合物173可以根据实施例30中概述的方法通过化合物172的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用2-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例174：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(E)-肉桂基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物174
化合物174可以根据实施例29中概述的方法，用(E)-肉桂基溴化物代替炔丙基溴来制备。
实施例175：2-氨基-7-(E)-肉桂基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物175
化合物175可以根据实施例30中概述的方法通过化合物174的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用(E)-肉桂基溴化物代替炔丙基溴来制备。
实施例176：((2S,4R,5R)-5-(7-((1H-吡唑-5-基)甲基)-2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物176
化合物176可以根据实施例29的方法，用5-(溴甲基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯[1001096-27-0]或5-(溴甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑[1313409-97-0]或(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)甲醇[1823866-20-1]的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例177：7-((1H-吡唑-5-基)甲基)-2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物177
化合物177可以根据实施例30中概述的方法通过化合物176的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用5-(溴甲基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯或5-(溴甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑或(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)甲醇的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例178：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物178
化合物178可以根据实施例29中概述的方法，用3-(溴甲基)-1-甲基-1H-吡唑[102846-13-9]代替炔丙基溴来制备。
实施例179：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物179
化合物179可以根据实施例30中概述的方法通过化合物178的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3-(溴甲基)-1-甲基-1H-吡唑代替炔丙基溴来制备。
实施例180：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(噻吩-2-基甲基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物180
化合物180可以根据实施例29中概述的方法，用2-(溴甲基)-噻吩代替炔丙基溴来制备。
实施例181：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(噻吩-2-基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物181
化合物181可以根据实施例30中概述的方法通过化合物180的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用2-(溴甲基)-噻吩代替炔丙基溴来制备。
实施例182：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(噻吩-2-基甲基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-3-基)甲基乙酸酯，化合物182
化合物182可以根据实施例29中概述的方法，用3-(溴甲基)-噻吩代替炔丙基溴来制备。
实施例183：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(噻吩-3-基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物183
化合物183可以根据实施例30中概述的方法通过化合物182的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(3S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用2-(溴甲基)-噻吩代替炔丙基溴来制备。
实施例184：2-(9-((2R,3R,5S)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)乙酸甲酯，化合物184
化合物184可以根据实施例29中概述的方法，用2-溴乙酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例184a：2-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)乙酸甲酯化合物184a
化合物184a可以通过将化合物184暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例185：2-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)乙酸，化合物185
化合物185可以使用实施例30中概述的改性方法通过在水性条件下化合物184的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用2-溴乙酸甲酯代替炔丙基溴和随后的酯水解来制备。
实施例186：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(2-氧乙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物186
化合物186可以根据实施例29中概述的一般方法，用2-溴-1,1-二甲氧基乙烷代替炔丙基溴，然后进行酸水溶液处理来制备。
实施例187：2-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)乙醛，化合物187
化合物187可以通过化合物186的碱水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用2-溴-1,1-二甲氧基乙烷代替炔丙基溴随后缩醛和酯水解来制备。
实施例188：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(氰基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物188
化合物188可以根据实施例29中概述的一般方法，用2-溴乙腈代替炔丙基溴来制备。
实施例189：2-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)乙腈，化合物189
化合物189可以通过将化合物188水解或从化合物187水解，通过将醛转化为相应的肟，然后将其脱水来制备。
实施例190：((2S,4R,5R)-5-(7-((1H-四唑-5-基)甲基)-2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物190
化合物190可以根据实施例29中概述的方法，用5-(氯甲基)-1H-四唑[55408-11-2]代替炔丙基溴来制备。
实施例191：7-((1H-四唑-5-基)甲基)-2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物191
化合物191可以根据实施例30中概述的方法通过化合物190的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用5-(氯甲基)-1H-四唑代替炔丙基溴来制备。
实施例192：2-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)-N-(甲磺酰基)乙酰胺，化合物192
化合物192可以由化合物185和甲磺酰胺制备。
实施例193：2-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)-N-羟基乙酰胺，化合物193
化合物193可以由化合物185和羟胺制备。
实施例194：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-((3-羟基异噁唑-5-基)甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物194
化合物194可以根据实施例29中概述的方法与(3-((4-甲氧基苄基)氧基)异噁唑-5-基)甲醇的甲磺酸酯一起制备。
实施例195：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((3-羟基异噁唑-5-基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物195
化合物195可以根据实施例30中概述的方法通过化合物194的酯水解来制备。
实施例196：5-((9-((2R,3R,5S)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸甲酯，化合物196
化合物196可以根据实施例29中概述的方法，用5-(溴甲基)噻吩-2-羧酸甲酯[108499-32-7]一起制备。
实施例196a：5-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸甲酯，化合物196a
化合物196a可以通过将化合物196暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例197：5-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸，化合物197
化合物197可以根据实施例30中概述的方法通过化合物196的酯水解来制备。
实施例198：5-((9-((2R,3R,5S)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-3-羧酸乙酯，化合物198
化合物198可以根据实施例29中概述的方法，用5-(溴甲基)噻吩-3-羧酸乙酯[206860-16-4]一起制备。
实施例198a：5-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-3-羧酸乙酯，化合物198a
化合物198a可以通过将化合物198暴露于干乙醇中的碳酸钾中来制备。
实施例199：5-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-3-羧酸，化合物199
化合物199可以根据实施例30中概述的方法通过化合物198的酯水解来制备。
实施例200：4-((9-((2R,3R,5S)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸甲酯，化合物200化合物200可以根据实施例29中概述的方法，用4-(溴甲基)噻吩-2-羧酸甲酯[54796-51-9]一起制备。
实施例200a：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸甲酯，化合物200a
化合物200a可以通过将化合物200暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例201：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸，化合物201
化合物201可以根据实施例30中概述的方法通过化合物200的酯水解来制备。
实施例202：(1R,2R)-2-((9-((2R,3R,5S)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯，化合物202
化合物202可根据实施例29中概述的方法，与(1R,2R)-2-(羟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯的甲磺酸酯一起制备。
实施例202a：(1R,2R)-2-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯，化合物202a
化合物202a可以通过将化合物202暴露于干乙醇中的碳酸钾中来制备。
实施例203：(1R,2R)-2-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸，化合物203
化合物203可以根据实施例30中概述的方法通过化合物202的酯水解来制备。
实施例204：((2S,4R,5R)-5-(7-((E)-3-(1H-四唑-5-基)烯丙基)-2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物204
化合物204可通过烯烃复分解型反应由((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(7-烯丙基-2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯和5-乙烯基-1H-四唑[18755-47-0]制备。
实施例205：7-((E)-3-(1H-四唑-5-基)烯丙基)-2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物205
化合物205可以根据实施例30中概述的方法通过化合物204的酯水解来制备。
实施例206：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(4-甲酰基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物206
化合物206可以根据实施例29中概述的方法，用4-(溴甲基)苯甲醛代替炔丙基溴来制备。
实施例207：4-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲醛，化合物207
化合物207可以根据实施例30中概述的方法通过化合物206的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(4S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用4-(溴甲基)苯甲醛代替炔丙基溴来制备。
实施例208：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物208
化合物208可以根据实施例29中概述的方法，用4-甲氧基-苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例209：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物209
化合物209可以根据实施例30中概述的方法通过化合物208的酯水解来制备。
实施例210：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-甲氧基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物210
化合物210可以根据实施例29中概述的方法，用3-甲氧基-苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例211：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物211
化合物211可以根据实施例30中概述的方法通过化合物210的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3-甲氧基-苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例212：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-羟基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物212
化合物212可以通过用BBr3使化合物211脱甲基来制备。
实施例213：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3-羟基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物213
化合物213可以根据实施例30中概述的方法通过化合物212的酯水解来制备。
实施例214：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物214
化合物214可以根据实施例29中概述的方法，用4-三氟甲基-苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例215：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-(三氟甲基)苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物215
化合物215可以根据实施例30中概述的方法通过化合物214的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用4-三氟甲基-苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例216：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(吡啶-3-基甲基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物216
化合物216可以根据实施例29中概述的方法，用3-(溴甲基)吡啶代替炔丙基溴来制备。
实施例217：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(吡啶-3-基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物217
化合物217可以根据实施例30中概述的方法通过化合物216的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(3S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3-(溴甲基)吡啶代替炔丙基溴来制备。
实施例218：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(2-氧代-2-(吡咯烷-1-基)乙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物218
化合物218可以根据实施例29中概述的方法，用溴乙酰吡咯烷[90892-09-4]代替炔丙基溴来制备。
实施例219：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2-氧代-2-(吡咯烷-1-基)乙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物219
化合物219可以根据实施例30中概述的方法通过化合物218的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用溴乙酸吡咯烷代替炔丙基溴来制备。
实施例220：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(7-烯丙基-2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物220
化合物220可以根据实施例29中概述的方法，用烯丙基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例221：7-烯丙基-2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物221
化合物221可以根据实施例30中概述的方法通过化合物220的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用烯丙基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例222：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物222
化合物222可以根据实施例29中概述的方法，用(溴甲基)环丙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例223：2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物223
化合物223可以根据实施例30中概述的方法通过化合物222的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯并用(71)代替(45)来制备。
实施例224：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-丁基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物224
化合物224可以根据实施例29中概述的方法，用正丁基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例225：2-氨基-7-丁基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物225
化合物225可以根据实施例30中概述的方法通过化合物224的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用正丁基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例226：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(甲氧基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物226
化合物226可以根据实施例29中概述的方法，用氯甲基甲基醚代替炔丙基溴来制备。
实施例227：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(甲氧基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物227
化合物227可以根据实施例30中概述的方法通过化合物226的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用氯甲基甲基醚代替炔丙基溴来制备。
实施例228：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-((甲硫基)甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物228
化合物228可以根据实施例29中概述的方法，用氯甲基甲基硫醚代替炔丙基溴来制备。
实施例229：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((甲硫基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物229
化合物229可以根据实施例30中概述的方法通过化合物228的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用氯甲基甲基硫醚代替炔丙基溴来制备。
实施例230：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物230
化合物230可以根据实施例29中概述的一般方法，用2-溴-1,1,1-三氟乙烷[421-06-7]代替炔丙基溴来制备。
实施例231：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物231
化合物231可以根据实施例30中概述的方法通过化合物230的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用2-溴-1,1,1-三氟乙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例232：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(2,2-二氟乙基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物232
化合物232可以根据实施例29中概述的一般方法，用2-溴-1,1-二氟乙烷[359-07-9]代替炔丙基溴来制备。
实施例233：2-氨基-7-(2,2-二氟乙基)-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物233
化合物233可以根据实施例30中概述的方法通过化合物232的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用2-溴-1,1-二氟乙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例234：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(3,3,3-三氟丙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物234
化合物234可以根据实施例29中概述的一般方法，用3-溴-1,1,1-三氟丙烷[460-32-2]代替炔丙基溴来制备。
实施例235：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3,3,3-三氟丙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物235
化合物235可以根据实施例30中概述的方法通过化合物234的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(3S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3-溴-1,1,1-三氟丙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例236：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(2,2,3,3,3-五氟丙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物236
化合物236可以根据实施例29中概述的一般方法，用3-溴-1,1,1,2,2-五氟丙烷[422-01-5]或2,2,3,3,3-五氟丙基甲磺酸酯[813-31-0]代替炔丙基溴来制备。
实施例237：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,3,3,3-五氟丙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物237
化合物237可以根据实施例30中概述的方法通过化合物236的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(3S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3-溴-1,1,1,2,2-五氟丙烷或2,2,3,3,3-五氟丙基甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例238：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(4,4,4-三氟丁基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物238
化合物238可以根据实施例29中概述的一般方法，用4-溴-1,1,1-三氟丁烷[406-81-5]代替炔丙基溴来制备。
实施例239：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4,4,4-三氟丁基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物239
化合物239可以根据实施例30中概述的方法通过化合物238的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(4S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用4-溴-1,1,1-三氟丁烷代替炔丙基溴来制备。
实施例240：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯化合物240
化合物240可以根据实施例29中概述的方法，用1,1,1,2,2-五氟-4-溴丁烷[52671-70-2]代替炔丙基溴来制备。
实施例241：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物241
化合物241可以根据实施例30中概述的方法通过化合物240的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用1,1,1,2,2-五氟-4-溴丁烷代替炔丙基溴来制备。
实施例242：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(2-氰基乙基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物242
化合物242可以根据实施例29中概述的方法，用3-溴丙腈[2417-90-5]代替炔丙基溴来制备。
实施例243：3-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)丙腈，化合物243
化合物243可以根据实施例30中概述的方法通过化合物242的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用3-溴丙腈代替炔丙基溴来制备。
实施例244：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-氰基丙基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物244
化合物244可以根据实施例29中概述的方法，用4-溴丁腈[5332-06-9]代替炔丙基溴来制备。
实施例245：4-(2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)丁腈，化合物245
化合物245可以根据实施例30中概述的方法通过化合物244的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用4-溴丁腈代替炔丙基溴来制备。
实施例246：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-异丁基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物246
化合物246可以根据实施例29中概述的方法，用1-溴-2-甲基丙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例247：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-异丁基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物247
化合物247可以根据实施例30中概述的方法通过化合物246的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(1S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用1-溴-2-甲基丙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例248：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-((1-氰基环丙基)甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物248
化合物248可以根据实施例29中概述的方法，用1-(羟甲基)环丙烷-1-腈[98730-77-9]的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例249：1-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-腈，化合物249
化合物249可以根据实施例30中概述的方法通过化合物248的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用1-(羟甲基)环丙烷-1-腈的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例250：1-((9-((2R,3R,5S)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯，化合物250
化合物250可根据实施例29中概述的方法，与1-(羟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯[3697-68-5]的甲磺酸酯一起制备。
实施例250a：1-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯，化合物250a
化合物250a可以通过将化合物250暴露于干乙醇中的碳酸钾中来制备。
实施例251：1-((2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸，化合物251
化合物251可以根据实施例30中概述的方法通过化合物250的酯水解来制备。
实施例252：((2S,4R,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物252
化合物252可以根据实施例29中概述的方法，用(1-(三氟甲基)环丙基)甲醇[371917-17-8]的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例253：2-氨基-9-((2R,3R,5S)-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物253
化合物253可以根据实施例30中概述的方法通过化合物252的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺和(2S,3R,5S)-5-((苯甲酰氧基)甲基)四氢呋喃-2,3-二乙酸二酯，用(1-(三氟甲基)环丙基)甲醇的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例254：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-苄基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物254
化合物254可以根据实施例31中概述的方法，用苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例255：2-氨基-7-苄基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物255
化合物255可以根据实施例32中概述的方法通过化合物254的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例256：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(4-氟苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物256
化合物256可以根据实施例31中概述的方法，用4-氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例257：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-氟苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物257
化合物257可以根据实施例32中概述的方法通过化合物256的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用4-氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例258：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-氟苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物258
化合物258可以根据实施例31中概述的方法，用3-氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例259：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3-氟苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物259
化合物259可以根据实施例32中概述的方法通过化合物258的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3-氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例260：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3,4-二氟苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物260
化合物260可以根据实施例31中概述的方法，用3,4-二氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例261：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3,4-二氟苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物261
化合物261可以根据实施例32中概述的方法通过化合物260的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3,4-二氟苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例262：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(4-氯苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物262
化合物262可以根据实施例31中概述的方法，用4-氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例263：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-氯苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物263
化合物263可以根据实施例32中概述的方法通过化合物262的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用4-氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例264：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-氯苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物264
化合物264可以根据实施例31中概述的方法，用3-氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例265：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3-氯苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物265
化合物265可以根据实施例32中概述的方法通过化合物264的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3-氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例266：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3,4-二氯苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物266化合物266可以根据实施例31中概述的方法，用3,4-二氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例267：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3,4-二氯苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物267
化合物267可以根据实施例32中概述的方法通过化合物266的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3,4-二氯苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例268：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(4-氰基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物268
化合物268可以根据实施例31中概述的方法，用4-氰基苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例269：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苄腈，化合物269
化合物269可以根据实施例32中概述的方法通过化合物268的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用4-氰基苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例270：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-氰基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物270
化合物270可以根据实施例31中概述的方法，用3-氰基苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例271：3-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苄腈，化合物271
化合物271可以根据实施例32中概述的方法通过化合物270的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3-氰基苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例272：4-((9-((2R,3S,4R,5R)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)-4-氟四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物272
化合物272可以根据实施例31中概述的方法，用4-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例273：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物273
化合物273可以通过将化合物272暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例274：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物274
化合物274可以根据实施例32中概述的方法通过化合物272的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用4-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例275：3-((9-((2R,3S,4R,5R)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)-4-氟四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物275
化合物275可以根据实施例31中概述的方法，用3-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例276：3-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物276
化合物276可以通过将化合物275暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例277：3-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物277
化合物277可以根据实施例32中概述的方法通过化合物275的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例278：2-((9-((2R,3S,4R,5R)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)-4-氟四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物278
化合物278可以根据实施例31中概述的方法，用2-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例279：2-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物279
化合物279可以通过将化合物278暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例280：2-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物280
化合物280可以根据实施例32中概述的方法通过化合物278的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用2-溴甲基苯甲酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例281：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(E)-肉桂基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物281
化合物281可以根据实施例31中概述的方法，用(E)-肉桂基溴化物代替炔丙基溴来制备。
实施例282：2-氨基-7-(E)-肉桂基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物282
化合物282可以根据实施例32中概述的方法通过化合物281的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用(E)-肉桂基溴化物代替炔丙基溴来制备。
实施例283：((2R,3R,4S,5R)-5-(7-((1H-吡唑-5-基)甲基)-2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物283
化合物283可以根据实施例31的方法，用5-(溴甲基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯[1001096-27-0]或5-(溴甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑[1313409-97-0]或(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)甲醇[1823866-20-1]的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例284：7-((1H-吡唑-5-基)甲基)-2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物284
化合物284可以根据实施例32中概述的方法通过化合物283的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用5-(溴甲基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯或5-(溴甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑或(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)甲醇的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例285：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物285
化合物285可以根据实施例31中概述的方法，用3-(溴甲基)-1-甲基-1H-吡唑[102846-13-9]代替炔丙基溴来制备。
实施例286：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物286
化合物286可以根据实施例32中概述的方法通过化合物285的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3-(溴甲基)-1-甲基-1H-吡唑代替炔丙基溴来制备。
实施例287：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(噻吩-2-基甲基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物287
化合物287可以根据实施例31中概述的方法，用2-(溴甲基)-噻吩代替炔丙基溴来制备。
实施例288：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(噻吩-2-基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物288
化合物288可以根据实施例32中概述的方法通过化合物287的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用2-(溴甲基)-噻吩代替炔丙基溴来制备。
实施例289：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(噻吩-3-基甲基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物289
化合物289可以根据实施例31中概述的方法，用3-(溴甲基)-噻吩代替炔丙基溴来制备。
实施例290：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(噻吩-3-基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物290
化合物290可以根据实施例32中概述的方法通过化合物289的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3-(溴甲基)-噻吩代替炔丙基溴来制备。
实施例291：2-(9-((2R,3S,4R,5R)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)-4-氟四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)乙酸甲酯，化合物291
化合物291可以根据实施例31中概述的方法，用2-溴乙酸甲酯代替炔丙基溴来制备。
实施例292：2-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)乙酸甲酯，化合物292
化合物292可以通过将化合物291暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例293：2-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)乙酸，化合物293
化合物293可以使用实施例32中概述的改性方法，通过在水性条件下化合物291的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用2-溴乙酸甲酯代替炔丙基溴和随后的酯水解来制备。
实施例294：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(2-氧乙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物294
化合物294可以根据实施例31中概述的一般方法，用2-溴-1,1-二甲氧基乙烷代替炔丙基溴，然后进行酸水溶液处理来制备。
实施例295：2-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)乙醛，化合物295
化合物295可以通过化合物294的碱水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用2-溴-1,1-二甲氧基乙烷代替炔丙基溴随后缩醛和酯水解来制备。
实施例296：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(氰基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物296
化合物296可以根据实施例31中概述的一般方法，用2-溴乙腈代替炔丙基溴来制备。
实施例297：2-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)乙腈，化合物297
化合物297可以通过将化合物296水解，或由化合物295通过将醛转化为相应的肟，然后将其脱水来制备。
实施例298：((2R,3R,4S,5R)-5-(7-((1H-四唑-5-基)甲基)-2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物298
化合物298可以根据实施例31中概述的方法，用5-(氯甲基)-1H-四唑[55408-11-2]代替炔丙基溴来制备。
实施例299：7-((1H-四唑-5-基)甲基)-2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物299
化合物299可以根据实施例32中概述的方法通过化合物298的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用5-(氯甲基)-1H-四唑代替炔丙基溴来制备。
实施例300：2-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)-N-(甲磺酰基)乙酰胺，化合物300
化合物300可以由化合物293和甲磺酰胺制备。
实施例301：2-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)-N-羟基乙酰胺，化合物301
化合物301可以由化合物293和羟胺制备。
实施例302：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-((3-羟基异噁唑-5-基)甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物302
化合物298可以根据实施例31中概述的方法，用(3-((4-甲氧基苄基)氧基)异噁唑-5-基)甲醇的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例303：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((3-羟基异噁唑-5-基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物303
化合物303可以根据实施例32中概述的方法通过化合物302的酯水解来制备。
实施例304：2-((9-((2R,3S,4R,5R)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)-4-氟四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物304
化合物304可以根据实施例31中概述的方法，用5-(溴甲基)噻吩-2-羧酸甲酯[108499-32-7]代替炔丙基溴来制备。
实施例305：2-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸甲酯，化合物305
化合物305可以通过将化合物304暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例306：2-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲酸，化合物306
化合物306可以根据实施例32中概述的方法通过化合物304的酯水解来制备。
实施例307：5-((9-((2R,3S,4R,5R)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)-4-氟四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-3-羧酸乙酯，化合物307
化合物307可以根据实施例31中概述的方法，用5-(溴甲基)噻吩-3-羧酸乙酯[206860-16-4]代替炔丙基溴来制备。
实施例308：5-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-3-羧酸乙酯，化合物308
化合物308可以通过将化合物307暴露于干乙醇中的碳酸钾中来制备。
实施例309：5-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-3-羧酸，化合物309
化合物309可以根据实施例32中概述的方法通过化合物307的酯水解来制备。
实施例310：4-((9-((2R,3S,4R,5R)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)-4-氟四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸甲酯，化合物310
化合物310可以根据实施例31中概述的方法，用4-(溴甲基)噻吩-2-羧酸甲酯[54796-51-9]代替炔丙基溴来制备。
实施例311：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸甲酯，化合物311
化合物311可以通过将化合物310暴露于无水甲醇中的碳酸钾中来制备。
实施例312：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)噻吩-2-羧酸，化合物312
化合物312可以根据实施例32中概述的方法通过化合物310的酯水解来制备。
实施例313：(1R,2R)-2-((9-((2R,3S,4R,5R)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)-4-氟四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯，化合物313
化合物313可根据实施例31中概述的方法，用(1R,2R)-2-(羟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例314：(1R,2R)-2-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯，化合物314
化合物314可以通过将化合物313暴露于干乙醇中的碳酸钾中来制备。
实施例315：(1R,2R)-2-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸，化合物315
化合物315可以根据实施例32中概述的方法通过化合物313的酯水解来制备。
实施例316：((2R,3R,4S,5R)-5-(7-((E)-3-(1H-四唑-5-基)烯丙基)-2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-4-乙酰氧基-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物316
化合物316可通过烯烃复分解型反应由((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(7-烯丙基-2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯和5-乙烯基-1H-四唑[18755-47-0]制备。
实施例317：7-((E)-3-(1H-四唑-5-基)烯丙基)-2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物317
化合物317可以根据实施例32中概述的方法通过化合物316的酯水解来制备。
实施例318：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(4-甲酰基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物318化合物318可以根据实施例31中概述的方法，用4-(溴甲基)苯甲醛代替炔丙基溴来制备。
实施例319：4-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)苯甲醛，化合物319
化合物319可以根据实施例32中概述的方法通过化合物318的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用4-(溴甲基)苯甲醛代替炔丙基溴来制备。
实施例320：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物320
化合物320可根据实施例31中概述的方法，用4-甲氧基苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例321：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物321
化合物321可以根据实施例32中概述的方法通过化合物320的酯水解来制备。
实施例322：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-甲氧基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物322
化合物322可根据实施例31中概述的方法，用3-甲氧基苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例323：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3-甲氧基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物323
化合物323可以根据实施例32中概述的方法通过化合物322的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3-甲氧基苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例324：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-羟基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物324
化合物324可以通过用BBr3使化合物322脱甲基来制备。
实施例325：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3-羟基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物325
化合物325可以根据实施例32中概述的方法通过化合物324的酯水解来制备。
实施例326：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(4-三氟甲基苄基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物326
化合物326可以根据实施例31中概述的方法，用4-三氟甲基-苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例327：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4-三氟甲基苄基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物327
化合物327可以根据实施例32中概述的方法通过化合物326的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用4-三氟甲基-苄基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例328：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(吡啶-3-基甲基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物328
化合物328可以根据实施例31中概述的方法，用3-(溴甲基)吡啶代替炔丙基溴来制备。
实施例329：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(吡啶-3-基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物329
化合物329可以根据实施例32中概述的方法通过化合物328的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3-(溴甲基)吡啶代替炔丙基溴来制备。
实施例330：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(2-氧代-2-(吡咯烷-1-基)乙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物330
化合物330可以根据实施例31中概述的方法，用溴乙酰吡咯烷[90892-09-4]代替炔丙基溴来制备。
实施例331：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2-氧代-2-(吡咯烷-1-基)乙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物331
化合物331可以根据实施例32中概述的方法通过化合物330的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用溴乙酸吡咯烷代替炔丙基溴来制备。
实施例332：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(7-烯丙基-2-氨基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物332
化合物332可以根据实施例31中概述的方法，用烯丙基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例333：7-烯丙基-2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物333
化合物333可以根据实施例32中概述的方法通过化合物332的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用烯丙基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例334：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(环丙基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物334
化合物334可以根据实施例29中概述的方法，用(溴甲基)环丙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例335：2-氨基-7-(环丙基甲基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物335
化合物334可以根据实施例32中概述的方法通过化合物334的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法，用(71)代替(45)来制备。
实施例336：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-丁基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物336
化合物336可以根据实施例31中概述的方法，用正丁基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例337：2-氨基-7-丁基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物337
化合物337可以根据实施例32中概述的方法通过化合物336的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用正丁基溴代替炔丙基溴来制备。
实施例338：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(甲氧基甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物338
化合物338可以根据实施例31中概述的方法，用氯甲基甲基醚代替炔丙基溴来制备。
实施例339：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(甲氧基甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物339
化合物339可以根据实施例32中概述的方法通过化合物338的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用氯甲基甲基醚代替炔丙基溴来制备。
实施例340：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-((甲硫基)甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物340
化合物340可以根据实施例31中概述的方法，用氯甲基甲基硫醚代替炔丙基溴来制备。
实施例341：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((甲硫基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物341
化合物341可以根据实施例32中概述的方法通过化合物340的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用氯甲基甲基硫醚代替炔丙基溴来制备。
实施例342：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物342
化合物342可以根据实施例31中概述的一般方法，用2-溴-1,1,1-三氟乙烷[421-06-7]代替炔丙基溴来制备。
实施例343：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物343
化合物343可以根据实施例32中概述的方法通过化合物342的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用2-溴-1,1,1-三氟乙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例344：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(2,2-二氟乙基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物344
化合物344可以根据实施例31中概述的一般方法，用2-溴-1,1-二氟乙烷[359-07-9]代替炔丙基溴来制备。
实施例345：2-氨基-7-(2,2-二氟乙基)-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物345
化合物345可以根据实施例32中概述的方法通过化合物344的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用2-溴-1,1-二氟乙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例346：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(3,3,3-三氟丙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物346
化合物346可以根据实施例31中概述的一般方法，用3-溴-1,1,1-三氟丙烷[460-32-2]代替炔丙基溴来制备。
实施例347：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3,3,3-三氟丙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物347
化合物347可以根据实施例32中概述的方法通过化合物346的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3-溴-1,1,1-三氟丙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例348：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(2,2,3,3,3-五氟丙基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物348
化合物348可以根据实施例31中概述的一般方法，用3-溴-1,1,1,2,2-五氟丙烷[422-01-5]或2,2,3,3,3-五氟丙基甲磺酸酯[813-31-0]代替炔丙基溴来制备。
实施例349：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(2,2,3,3,3-五氟丙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物349
化合物349可以根据实施例32中概述的方法通过化合物348的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3-溴-1,1,1,2,2-五氟丙烷或2,2,3,3,3-五氟丙基甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例350：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(4,4,4-三氟丁基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物350
化合物350可以根据实施例31中概述的一般方法，用4-溴-1,1,1-三氟丁烷[406-81-5]代替炔丙基溴来制备。
实施例351：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(4,4,4-三氟丁基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物351
化合物351可以根据实施例32中概述的方法通过化合物350的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用4-溴-1,1,1-三氟丁烷代替炔丙基溴来制备。
实施例352：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物352
化合物352可以根据实施例31中概述的方法，用1,1,1,2,2-五氟-4-溴丁烷[52671-70-2]代替炔丙基溴来制备。
实施例353：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物353
化合物353可以根据实施例32中概述的方法通过化合物352的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用1,1,1,2,2-五氟-4-溴丁烷代替炔丙基溴来制备。
实施例354：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(2-氰基乙基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物354
化合物354可以根据实施例31中概述的方法，用3-溴丙腈[2417-90-5]代替炔丙基溴来制备。
实施例355：3-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)丙腈，化合物355
化合物355可以根据实施例32中概述的方法通过化合物354的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用3-溴丙腈代替炔丙基溴来制备。
实施例356：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-(3-氰基丙基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物356
化合物356可以根据实施例31中概述的方法，用4-溴丁腈[5332-06-9]代替炔丙基溴来制备。
实施例357：4-(2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)丁腈，化合物357
化合物357可以根据实施例32中概述的方法通过化合物356的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用4-溴丁腈代替炔丙基溴来制备。
实施例358：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-异丁基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物358
化合物358可以根据实施例31中概述的方法，用1-溴-2-甲基丙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例359：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-异丁基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物359
化合物359可以根据实施例32中概述的方法通过化合物358的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用1-溴-2-甲基丙烷代替炔丙基溴来制备。
实施例360：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-7-((1-氰基环丙基)甲基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物360
化合物360可以根据实施例31中概述的方法，用1-(羟甲基)环丙烷-1-腈[98730-77-9]的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例361：1-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-腈，化合物361
化合物361可以根据实施例32中概述的方法通过化合物360的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用1-(羟甲基)环丙烷-1-腈的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例362：1-((9-((2R,3S,4R,5R)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)-4-氟四氢呋喃-2-基)-2-氨基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯，化合物362
化合物362可以根据实施例31中概述的方法，用1-(羟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯[3697-68-5]的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例363：1-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯，化合物363
化合物363可以通过将化合物362暴露于干乙醇中的碳酸钾中来制备。
实施例364：1-((2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-7-基)甲基)环丙烷-1-羧酸，化合物364
化合物364可以根据实施例32中概述的方法通过化合物362的酯水解来制备。
实施例365：((2R,3R,4S,5R)-4-乙酰氧基-5-(2-氨基-8-氧代-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙酸酯，化合物365
化合物365可以根据实施例31中概述的方法，用(1-(三氟甲基)环丙基)甲醇[371917-17-8]的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例366：2-氨基-9-((2R,3S,4S,5R)-4-氟-3-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮，化合物366
化合物366可以根据实施例32中概述的方法通过化合物365的酯水解，或使用实施例32A中所述的方法由N-(9-(4-甲氧基苄基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)乙酰胺，用(1-(三氟甲基)环丙基)甲醇的甲磺酸酯代替炔丙基溴来制备。
实施例367.如在报告细胞测定中所测量的化合物作为TLR7和TLR8激动剂的活性。
同源配体与TLR的结合触发下游信号级联反应，导致NF-κB和其他转录因子的活化，从而引发各种免疫调节作用。人类胚胎肾细胞系HEK293本质上对TLR激动剂无反应，但这些细胞中TLRs的异位表达使同源激动剂可以使内源性NF-κB活化。因此，使用HEK293-TLR-NF-κB诱导型报告基因系统分析TLR激动剂。稳定表达人TLR7或TLR8以及NF-κB驱动的分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告基因的HEK293细胞系在英韦沃基公司(InvivoGen)(美国加利福尼亚州圣地亚哥)发明，并被用于评估本发明化合物的TLR7和TLR8激动剂活性。将细胞以2-5×104个细胞/孔的密度接种在96孔板(200μl/孔)中，并用各种浓度的化合物(10μl)处理15-24小时。SEAP活性是通过测量650nm的OD来确定的；用于培养细胞系的培养基含有SEAP检测所需的试剂。表2中的EC50值是通过将每种化合物的测量SEAP活性的剂量应答与以下公式拟合而得出的：Y＝ymax*cnh/(EC50 nh+cnh)+空白，其中Y是在浓度为c的情况下实验测得的OD650，空白是在没有TLR7激动剂的情况下观察到的OD650，ymax是在存在28.5μM瑞喹莫德(resiquimod)或1.675μM CL307的情况下测得的OD650之差，以及通过非线性最小二乘法确定空白和EC50和nh的值。
表2列出了在TLR7报告物细胞中选择的化合物的测试结果。
表2.TLR7报告物测定
化合物
TLR7报告物EC<sub>50</sub>(μM)
洛索立宾
322
1
188
2
298
5
292
6
835
7
535
8
413
9
15
10
248
11
249
12
407
13
151
14
180
15
>500*
16
534
17
337
18
330
19
491
20
79
21
520
22
567
23
>>500*
26
519
27
376
28
470
33
688
34
512
35
1155
36
1208
37
564
*在500μM下，使用化合物15可观察到高于基线的活性，但小于<10％的ymax。在化合物23相同的浓度下未观察到活性。对于所有其他化合物，在500μM下的活性至少是ymax的15％。
在最高浓度至500μM的TLR8报告物细胞测定中，表2中所列的化合物均未显示出显著的活性(在28.5μM瑞喹莫德(resiquimod)测定时，对于TLR8，≥2.5％的ymax)。在与瑞喹莫德一起温育时观察到在TLR8报道物细胞测定中SEAP产生的实质性诱导，瑞喹莫德是TLR7和TLR8的已知激动剂。
实施例368.诱导hPBMC(人外周血单核细胞)中干扰素α的产生。
用TLR7激动剂处理hPBMC通常会诱导大量产生干扰素-α，以及少量其他多种细胞因子和趋化因子。一个典型的实验使用的是从健康供体中分离的hPBMC，并将其放置在复制细胞培养孔中；通常在每个孔中放置1.0–7.5×106个细胞。加入测试化合物，并在添加后在含5％CO2的潮湿气氛中于37℃将细胞培养24小时；包括未经处理的对照。采用luminex方法，使用多亚型干扰素-αELISA试剂盒(如PBL Assay Sciences的试剂盒)，或特异地将IFNα2a作为多种细胞因子和趋化因子的一部分，以此测量分泌的干扰素-α的生产。最小有效浓度(MEC)是剂量响应曲线中的最小浓度，其中在基线以上观察到干扰素-γ产生显著增加(通常至少20pg/ml)。确定至少三个供体的每种化合物的MEC值。每个化合物的加权MEC是所有供体中所有单个MEC的几何平均值。测试的浓度通常由100μM开始的两倍稀释系列组成。在加权MEC的计算中，任何＞100μM的值都可以任意设置为200μM，除非化合物的所有MEC都超过100μM。
当用本发明的TLR7激动剂和洛索立宾(Loxoribine)处理hPBMC时，几种诱导的干扰素-α产生如表3所示。化合物5、18、26、27、28和34的加权MEC值均小于或等于40μM，且所有单个MEC值均小于100μM，这些都是特别令人感兴趣的。
表3.与TLR7激动剂一起孵育后，来自hPBMC的干扰素-α产生的加权MEC值
*对于洛索立宾(Loxoribine)，9个单独的MEC值中有5个超过100μM。对于化合物1，15个单独的MEC值中有1个超过100μM。对于化合物13，5个单独的MEC值中有1个超过100μM。对于化合物14、33和35，3个单独的MEC值中有1个超过100μM。对于化合物17，6个单独的MEC值中有2个超过100μM。对于化合物8、9、10、12、16、19、20、21和22，所有单独的MEC值均超过100μM。
实施例369.食蟹猴的口服生物利用度。
将2至4只雄性或雌性食蟹猴用于动物测试研究。将研究化合物配制在适于动物口服或静脉内给予的运载体中(例如50mM磷酸盐缓冲盐水，pH 7.4)。通过静脉内给予以1mg/kg给予母体化合物1、5、26和27，而相应化合物的前药以2mg/kg给予。给药后，通常在给药后0.083、0.33、1、2、4、6、8、12和24小时(静脉给药)、或在给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8、12和24小时(口服给药)采集0.5mL血样。从血液中分离血浆，并通过众所周知的LC-MS技术分析活性激动剂。在0-24小时的时间段内计算曲线下面积(AUC)值，并针对施用剂量进行归一化。由口服前药给予的母体剂量标准化的AUC与静脉内给予母体剂量标准化的母体AUC的比例计算出以前药形式口服给予时化合物的生物利用度百分比(F％)，并在表4中进行了报告。
前药对化合物1、26和27的全身递送作用显著大于洛索立宾，无论是作为洛索立宾本身还是作为前药口服给予，如表4所述。这至少部分是基础激动剂结构的功能，因为与7-烯丙基-2-氨基-9-β-D-呋喃核糖基-7,9-二氢嘌呤-8-酮一起使用的前药方法与本文中与前药4、25、30和32的方法相同。
表4.作为前药给予的TLR7激动剂的生物利用度百分比(重量/重量基准)
a来自美国专利第7,575,068B2的表23的值
b食蟹猴中洛索立宾的固有生物利用度。
实施例370.啮齿动物模型的抗肿瘤活性。
在同基因模型中，将B16-F10啮齿动物黑色素瘤肿瘤细胞注入32只小鼠的腹侧面。将小鼠分为四个处理组，每组八只动物：(i)对照组(未治疗)；(ii)化合物5(40mg/kg，通过尾静脉静脉注射，BID连续五天，每天给药，每个给药日的剂量间隔约8小时；共10剂)；(iii)化合物5(40mg/kg，通过尾静脉静脉注射，BID，隔日一次，每个给药日的剂量相隔约8小时；共10剂)；(iv)溴匹立明(bropirimine)(40mg/kg，经口管饲，BID连续5天，每天给药，每个给药日的剂量间隔约8小时，共10剂)。当平均肿瘤体积为约100mm3(实际平均值为99mm3；最小值为60mm3；最大尺寸为150mm3)时，将动物随机分组。次日开始给予药物。监测肿瘤体积两周。与对照组相比，组(ii)、(iii)和(iv)随机分配两周后平均肿瘤生长抑制率(％TGI)分别为40％、64％和61％。平均％TGI由以下公式计算得出：平均％TGI＝[1-(T-T0)/(C-C0)]*100％，其中T＝在D14处的平均组肿瘤体积，T0＝在D0处的平均组肿瘤体积，C＝在D14处的对照组平均肿瘤体积，C0＝在D0处的对照组平均肿瘤体积。在研究过程中动物体重增加是正常的，没有观察到不良事件。
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