阅读说明：本技术 一种基于co或co释放试剂的水产品保鲜剂及其应用 (Aquatic product preservative based on CO or CO release reagent and application thereof ) 是由 吴根福 于 2020-11-18 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种基于CO或CO释放试剂的水产品保鲜剂及其应用,所述的CO释放试剂为过渡金属羰基化合物。本发明还公开了利用所述水产品保鲜剂的保鲜方法,具体包括如下步骤：在水产品冷藏、冷冻前或者在冷藏、冷冻的同时,用所述的保鲜剂处理水产品。本发明所述保鲜剂的主要有效成分为一氧化碳,作用于水产品后,可抑制细菌活性,达到延长货架时间的效果。(The invention discloses an aquatic product preservative based on a CO or CO release reagent and application thereof, wherein the CO release reagent is a transition metal carbonyl compound. The invention also discloses a preservation method using the aquatic product preservative, which specifically comprises the following steps: before or during the refrigeration and freezing of the aquatic products, the aquatic products are treated by the preservative. The main effective component of the preservative is carbon monoxide, and after the preservative acts on aquatic products, the activity of bacteria can be inhibited, so that the effect of prolonging the shelf life is achieved.)

一种基于CO或CO释放试剂的水产品保鲜剂及其应用

技术领域

本发明涉及食品领域，具体涉及一种基于CO或CO释放试剂的水产品保鲜剂及其应用。

背景技术

水产品营养丰富，含水量高，在贮藏运输过程中极易发生腐败变质。统计表明，我国每年因腐败变质而丧失经济价值的水产品约占30％。水产品的腐败主要有三个原因：微生物作用、自身酶的作用以及环境氧化作用，这其中微生物的作用是主因(Ghaly AE etal.Fish spoilage mechanisms and preservation techniques[J].American Journalof Applied Sciences,2010,7(7):859-877)。微生物的生长繁殖不仅导致水产品腐烂变质，其代谢过程所中产生的腐胺、尸胺、醛类、硫化物等物质，还会散发出恶臭(Dalgaard Pet al.Biogenic amine formation and microbial spoilage in chilled garfish:effect of modified atmosphere packaging and previous frozen storage[J].Journal of Applied Microbiology,2006,101(1):80-95)。

一般认为,新鲜水产品，特别是海水产品中的腐败菌主要是希瓦氏菌(Shewanellasp.)。希瓦氏菌广泛分布于水体，特别是海洋中，其最适生长温度30℃，在低温下也能缓慢生长。既能通过有氧呼吸进行代谢，也能利用多种无机或有机电子受体进行厌氧呼吸。特别是能利用亚硫酸盐、硫代硫酸盐、二甲亚砜等有机或无机硫化物进行代谢，释放硫化氢或有机硫，散发出难闻的臭味，严重影响水产品质量(Wu GF et al.Endogenous generation ofhydrogen sulfide and its regulation in Shewanella oneidensis[J].,FrontMicrobiol.2015,6:374)。

为了延长水产品的货架时间，人们采用多种方法对其进行保鲜。水产品的保鲜主要通过控制微生物的生长繁殖，特别是控制腐败菌的数量来实现。常用的有低温保鲜、化学保鲜、气调保鲜和辐照保鲜等手段(励建荣.生鲜食品保鲜技术研究进展[J].中国食品学报,2010,10(3):1-12)。

低温是最常见，也是应用最广的一种保鲜手段。依据温度的不同，可分为冷藏保鲜(0～4℃)，冰温保鲜(0～-2℃)，微冻保鲜(-2～-4℃)及冷冻保鲜(-18～-40℃)等(Olafsdotrter G et al.Evaluation of shelf life of superchilled cod filletsand the influence of temperature fluctuations during storage on microbial andchemical quality indicators[J].Journal of Food Science,2010,71(2):S97-S109)。快速冷冻保鲜是一种有效的保鲜手段，但因需要大型的制冷设备，能量消耗大，成本高，很难在中小企业中推广普及。冷藏保鲜是最容易实现的手段，但对于体积稍大一点的水产品来说，其降温过程需2h以上，这期间会有一些腐败菌生长繁殖，再加上非结冰条件下，希瓦氏菌等耐寒腐败菌能缓慢生长代谢，使得冷藏保鲜的保质时间比较短。

化学保鲜是借助化学品的杀菌及抗氧化作用来延长水产品保质期的一种保鲜方法，具有成本低，操作简便等特点。化学保鲜剂可分为防腐剂(抑菌剂)、杀菌剂和抗氧化剂几大类。其中应用较广的有亚硝酸盐、山梨酸盐、苯甲酸钠、双乙酸钠等(Yi S etal.Effect of tea polyphenols on microbiological and biochemical quality ofCollichthys fish ball[J].Journal of the Science of Food&Agriculture,2011,91(9):1591-1597)。随着人们环保健康意识的提升，对化学保鲜的要求也越来越严格，添加抗生素、防腐剂等化学品的保鲜手段逐渐被监管部门所禁止。

辐照保鲜技术指利用⁶⁰Co或¹³⁷Cs产生的γ射线或高能电子束对食品进行杀菌，从而延缓微生物生长繁殖的一种保鲜技术。辐照保鲜由于需要特殊的设备，处理要求严格(射线对人体有强烈副作用)，且对营养成分会有一定的破坏(Molins RA.Food irradiation:principles and applications[J].Food Irradiation Principles&Applications,2001,18(3):219)，在实践中较少使用。

气调保鲜是指通过改变食品包装内气体的成分或浓度，创造不利于微生物生长的环境，从而抑制微生物繁殖，减缓食品腐败的一类保鲜技术。常将CO₂、N₂等气体充入盛放有水产品的密闭袋内进行保存。该法对需氧菌具有较好的抑制作用，但对厌氧菌和兼性厌氧菌的保鲜效果不是很好(尹磊，谢晶.水产品气调保鲜技术研究进展[J].广东农业科学，2015，42(5)：92-97)。鉴于希瓦氏菌等水产腐败菌为兼性厌氧细菌，在厌氧下更易通过亚硫酸盐呼吸或硫代硫酸盐呼吸产生硫化物等代谢产物，使该法的应用受到一定局限。

公开号为CN107114461A的中国发明专利申请公开一种鱼肉冷鲜保存方法，包括如下步骤：(1)无损冷冻，(2)涂抹化学保鲜剂，(3)气调包装密封，(4)冷藏保存。该方法先将新鲜鱼肉宰杀分切后缓慢冷冻到零下20℃，然后急速解冻，再用化学保鲜剂涂抹鱼肉表面，并进行气调冷藏保鲜，保质期可达7天。该方法使用的化学保鲜剂由2％溶菌酶、2％丙酸钙、1％壳聚糖、5％维生素C、5％甘氨酸和5％甘油组成，气调保鲜的气体由氮气：氧气：CO以4：1：1混合而成。

该发明存在着以下问题：(1)只能用于经清洗、宰杀、分切后的鱼肉；(2)步骤繁杂，混合了化学保鲜、气调保鲜、冷冻保鲜多种处理程序，劳动强度大；(3)价格高昂，溶菌酶、维生素C、甘氨酸都是价格较贵的化学品，气调保鲜前抽真空需消耗大量电能，冷冻再解冻也需要花费大量电能，而且解冻过程中由于冰晶的破坏作用，鱼肉的细胞组织容易遭到损伤；(4)气调保存时CO浓度过高，达到16.7％，大量CO与鱼肉蛋白中的血红素分子结合，虽然改善了鱼肉的色泽，但过多摄入碳氧血红蛋白对人体的健康会产生不利影响。

因此，有必要探究一种新的保鲜方法来解决上述问题。

发明内容

本发明提供了一种基于CO或CO释放试剂的水产品保鲜剂及其应用，操作简便，适用范围广，绿色环保，无残留，对冷藏食品无破坏作用，不会产生食用安全性问题。

本发明解决技术问题提供的技术方案为：

一种水产品保鲜剂，所述水产品保鲜剂由CO或CO释放试剂组成。

CO为气态物质，能自由穿过细胞膜进入细胞，使胞内的NADH脱氢酶失活；CO还能作用于呼吸链中的细胞色素传递蛋白和终端氧化酶，抑制好氧呼吸及厌氧呼吸的进行。研究发现，10-40μM的CO能显著抑制细菌的生长繁殖，而抑制真核细胞所需的浓度在100μM以上。

所述的水产品为淡水产品或海水产品。

所述的淡水产品为鲤鱼、鲢鱼、河虾或小龙虾；所述的海水产品为带鱼、金枪鱼、对虾或乌贼。

所述的CO释放试剂为由过渡金属、CO和辅助配体结合而成的过渡金属羰基化合物。

所述的过渡金属元素为钌、锰或钼。

本发明所述的水产保鲜剂的主要有效成分为CO，可以是气态、液态、固态制剂中的至少一种。

所述的过渡金属羰基化合物为三羰基二氯钌(II)二聚体(tricarbonyldichlororuthenium(II)dimer，CORM-2)，三羰基氯(甘氨酸)钌(II)(tricarbonylchloro(glycinato)ruthenium(II)，CORM-3)，含铁三羰基化合物(iron-containing carbonyls，CORM-F)，羰基硼钠化合物(sodiumboranocarbonate，CORM-A1)，溴(五羰基)锰化合物(bromo(pentacarbonyl)manganese，ALF 021)，五羰基溴化钼四乙基铵(tetraethyl ammonium molybdenum pentacarbonyl bromide，ALF 062)。

本发明还提供一种水产品的保鲜方法，包括如下步骤：在水产品冷藏或冷冻前或者冷藏或冷冻的同时，用本发明所述的保鲜剂处理水产品。

本发明发现CO对腐败菌、特别是希瓦氏菌具有强烈的抑制作用，预先用含有CO或能够释放CO的试剂(保鲜剂)处理水产品，再采取传统的保鲜措施，或在处理的同时进行低温保存，可显著提高水产品的货架时间。

所述保鲜剂处理水产品的具体方法为：将水产品放入密闭容器或保鲜袋内，向密闭容器或保鲜袋内充入水产品保鲜剂，使密闭容器或保鲜袋中CO的体积百分比为0.1～10％(v/v)；所述的水产品保鲜剂为气态保鲜剂。优先地，CO的体积百分比为1～2％(v/v)。

由于CO是气态化合物，能自由穿透细胞膜进入细胞内，与细胞色素中的二阶铁具有高度亲和性，极易结合成碳氧血红素分子，从而抑制多种酶的活性。由于腐败菌主要分布在鱼体的表面，原核生物(细菌)对CO的敏感性又比真核生物(鱼体细胞)高，所以密闭容器或保鲜袋中的CO优先与细菌中的血红素分子结合，达到抑制或杀灭细菌的目的。CO的浓度以1-2％为好，如果CO浓度过高，不但浪费材料，多余的CO还会与鱼体细胞的血红素分子结合，使鱼肉蛋白变性。

所述保鲜剂处理水产品的具体方法为：将水产品放入水箱中，向水箱内充入水产品保鲜剂，使水体中的CO有效浓度为0.01～1mmol/L；所述的水产品保鲜剂为气态保鲜剂、液态保鲜剂或固态保鲜剂。优先地，CO有效浓度为0.1～0.2mmol/L。

根据图1，溶解在水中的CO对腐败希瓦氏菌具有显著的抑制作用，20μM(0.02mmol/L)CORM-2处理30分钟后，死亡率可达到99.9％。考虑到水产保鲜时保鲜环境比较复杂，实际使用时以水体中含有0.1～0.2mmol/L的CO比较合适，既可起到抑制腐败菌的效果，又不至于对水产品品质造成影响。

所述保鲜剂处理水产品的时间为至少10分钟。优选地，保鲜剂处理水产品的时间为30～60分钟。

根据图1和图2，CO的处理浓度越高，处理时间越长，抑菌效果越好。为了节省成本，以低浓度长时间处理相对比较合理。但保鲜剂中的CO浓度也不能太低，在CO浓度为0.01mmol/L时，若处理时间小于10分钟，抑菌效果会比较差，所以保鲜剂处理水产品的时间为至少10分钟。

本发明还提供了所述水产品保鲜剂在制备抑菌剂中的应用，所述的抑菌剂为希瓦氏菌抑制剂。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明对已知化合物CO发掘了新的用途，开拓了一个新的应用领域。

(2)本发明的水产品保鲜剂采用CO或CO释放制剂作为主要或关键成分，释放的CO能迅速与细菌细胞的血红素分子结合，抑制NADH脱氢酶、细胞色素氧化酶等多种酶的活性，有效抑制或杀灭细菌，延长水产品的货架时间。

(3)本发明的水产品保鲜剂适用于整鱼，甚至是活鱼。用不着预先宰杀分切，更不用在鱼体表面涂抹化学防腐剂(保鲜剂)。由于抑制细菌所需的CO浓度大大低于抑制真核细胞(鱼体细胞)的浓度，用所述浓度的CO处理可有效抑制腐败细菌的生长繁殖，而对活鱼的影响较小。

(4)本发明的气调保鲜中CO浓度不大于10％(v/v)，优先地，为1～2％(v/v)。由于腐败细菌一般位于鱼体表面，因而能优先与CO结合。由于处理的鱼是整鱼，剩余的少量CO不会使鱼肉发生明显化学变化，安全性高。

(5)本发明提供的保鲜方法效果好，劳动强度小，成本低。

(6)本发明提供的保鲜剂可以工业化生产，减少抗生素和防腐剂的使用量，减小环境污染和对人体的可能副作用。

附图说明

图1为实施例1中CO对希瓦氏菌的抑制作用，其中，A为不同浓度的CORM-2处理后摇瓶培养时的生长状况；B为不同浓度的CORM-2处理后用活菌计数法测得的存活率，C为点种试验的照片；D为用10μM CORM-2处理不同时间时细菌的生长情况。

图2为实施例2中CO对希瓦氏菌生物膜形成的影响，其中，A为腐败希瓦氏菌经不同浓度的CORM-3处理后在室温静置下培养16小时，测得的悬浮细胞生物量；B为腐败希瓦氏菌经不同浓度的CORM-3处理后生物膜形成试验的俯视照片，左右是重复试验。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施案例对本发明做进一步的说明。

实施例1～2按下述方法处理：

腐败希瓦氏菌接入LB培养集中，30℃，200rpm培养至对数生长期，离心去上清液后，将细胞重悬于缓冲液中，用一定浓度的CO释放试剂处理一定时间后，测定腐败希瓦氏菌的存活率，藉以评判CO对希瓦氏菌的抑制或杀灭效果。

实施例1 CORM-2对腐败希瓦氏菌的抑制或杀灭作用

将腐败希瓦氏菌在LB培养基中培养至对数生长期(OD₆₀₀＝0.4)，吸1mL至离心管中，离心去上清液，用磷酸缓冲液离洗1次后，将细胞重悬于1mL磷酸缓冲液中，加一定浓度的CORM-2处理30分钟，然后吸0.2mL处理液接种在2.8mL LB培养基(OD管)中，30℃摇床培养，每隔1h测定菌体的生长量，结果见图1A。

用不同CORM-2处理后的细胞，经稀释后涂平板，计算死亡率，结果见图1B。

取10倍稀释的处理细胞2.5微升，点种在LB平板上，培养后观察存活率，结果见图1C。

实验还发现，CO作用时间对细菌的生长也有很大影响，在0-30分钟内，随着处理时间的延长，细菌的存活率逐渐减小，如图1D所示。

从图1A～1D可以看出，CO对腐败希瓦氏菌具有显著的抑制作用，20μM CORM-2处理30分钟后，死亡率达到99.9％。说明CORM-2是一种有潜力的抑菌杀菌剂。

实施例2 CORM-3对腐败希瓦氏菌静止生长的抑制作用

将腐败希瓦氏菌在LB培养基中培养至对数期(OD₆₀₀＝0.4)，各吸1mL至离心管中，离心去上清液，用磷酸缓冲液离洗1次后，将细胞重悬于1mL磷酸缓冲液中，加一定浓度的CORM-3处理30分钟，然后吸0.2mL处理液接种在2.8mL LB培养基中，室温(25℃)静置培养，16h后测定悬浮细胞生长量和生物膜形成量，结果见图2A。生物膜形成情况(俯视图，培养在24孔培养板上)见图2B。从图2中可以明显看出，CORM-3能显著影响希瓦氏菌静置培养时的悬浮细胞量和生物膜生物量。

实施例3～5按下述方法处理：

新鲜水产品一式两份(大小一致，重量相等)，盛放于塑料袋内，其中一份充入CO气体，另一份不加处理，在相同条件下贮存一定时间后，加入相同体积的无菌生理盐水，150rpm摇床中震摇10min处理，将水产品中的细菌洗入生理盐水中，立即用稀释涂平板法将洗下的细菌涂布在LB平板上，30℃培养48小时后计数。

实施例3气态CO对鲤鱼保质期的影响

将新鲜鲤鱼装入密闭塑料袋(保鲜袋)中，一组在袋内充入CO，充入量为袋体积的10％，另一组不充入任何气体(原来的空气)，然后封口，贮存于4℃冰箱中，2天、7天、15天后，分别取一份，向袋内注入0.2V(袋体积)的生理盐水，150rpm摇床中震摇10min，测定生理盐水中的细菌总数，结果见表1。由表可见，CO处理后能显著延长保质期。

表1.CO气体鲤鱼保质期(活菌数)的影响(×10⁶cfu/mL)

实施例4气态CO对带鱼保质期的影响

将新鲜带鱼装入密闭塑料袋(保鲜袋)中，一组在袋内冲入CO，冲入量为袋容积的0.1％，另一组不充入任何气体(原来的空气)，然后封口，贮存于室温下(25℃)，1天、3天、7天后，分别取一份，注入0.2V体积的生理盐水，150rpm摇床中震摇10min，测定生理盐水中的细菌总数，结果见表2。由表可见，CO处理后能延长保质期。

表2.CO气体带鱼保质期(活菌数)的影响(×10⁶cfu/mL)

保存时间	0天(处理前)	1天	3天	7天
					CO处理	----	1.8±0.3	15.7±0.8	89±7.7
对照	0.15±0.06	3.7±0.4	38±4.5	243±26

实施例5气态CO对明虾保质期的影响

将新鲜明虾装入密闭塑料袋(保鲜袋)中，实验组在袋内充入CO，充入量为袋容积的0.5％，1％，2％和5％，对照组不充入任何气体(原来的空气)，然后封口，室温下(25℃)处理1小时后，取出明虾放入另一干净保鲜袋内，4℃冰箱保存，1天、3天、7天后，分别取一份，注入0.2V体积的生理盐水，150rpm摇床中震摇10min，测定生理盐水中的细菌总数，结果见表3。由表可见，CO处理后能显著延长保质期，以1-2％较为适宜，进一步提高CO浓度虽对细菌有一定抑制效果。但会增加成本，还有可能影响鱼肉品质(CO会与鱼肉细胞中的血红素反应生成碳氧血红素)。

表3.CO气体明虾保质期(活菌数)的影响(×10⁶cfu/mL)

保存时间	0天(处理前)	1天	3天	7天
					对照	0.12±0.08	3.2±0.5	18.1±3.7	73.5±8.8
0.5％CO处理	----	2.1±0.6	14.5±0.6	58.1±8.3
					1％CO处理	----	0.9±0.2	5.5±0.6	24.0±4.9
2％CO处理	----	0.3±0.3	1.3±1.0	8.7±3.8
					5％CO处理	----	0.2±0.1	0.9±0.4	5.8±1.3

实施例6～10按下述方法处理：

新鲜水产品一式两份(大小一致，重量相等)，盛放于塑料盒内，加入无菌生理盐水，使水产品刚刚浸没在水中，其中一份充入CO或加入CO释放试剂，另一份不加处理，在相同条件下贮存一定时间后，用稀释涂平板法将生理盐水中的细菌涂布在LB平板上，30℃培养48小时后计数。

实施例6CO释放制剂CORM-2对河虾保质期的影响

将新鲜河虾装入塑料盒中，加无菌生理盐水，使虾刚刚浸没在水中。一组在塑料盒内加入CORM-2，使水中CO的浓度为20μM.，另一组不加，然后盖上盖子，贮存于室温中，1天、3天、7天后，分别取样测定水中的细菌总数，结果见表4。由表可见，CO处理后能显著延长河虾保质期。

表4.CORM-2河虾保质期(活菌数)的影响(×10⁶cfu/mL)

保存时间	0天(处理前)	1天	3天	7天
					CO处理	-----	0.4±0.1	1.3±0.5	8.6±1.2
对照	0.2±0.2	7.1±0.6	53±4.5	297±31

实施例7 CORM-3对对虾保质期的影响

将新鲜南美白对虾装入塑料箱中，加无菌生理盐水，使对虾浸没在水中。一组在塑料箱内加入CORM-3，使水中CO的浓度为1mM.，另一组不加，然后盖上盖子，贮存于4℃冰箱中，2天、7天、15天后，分别取样测定水中的细菌总数，结果见表5。由表可见，CO处理后能显著延长对虾保质期。

表5.CORM-3对南美白对虾保质期(活菌数)的影响(×10⁶cfu/mL)

保存时间	0天(处理前)	2天	7天	15天
					CO处理	----	0.2±0.1	1.2±0.8	7.3±0.7
对照	0.15±0.2	3.5±0.4	19±3.1	98±12

实施例8 ALF062和ALF021对金枪鱼保质期的影响

将新鲜金枪鱼装入塑料箱中，加无菌生理盐水，使金枪鱼刚刚浸没在水中。一组在塑料箱内加入ALF062和ALF021的2：1混合制剂，使水中CO的浓度为0.01mM.，另一组不加，然后盖上盖子，贮存于4℃冰箱中，2天、7天、15天后，分别取样测定水中的细菌总数，结果见表6。由表可见，CO处理后能显著延长金枪鱼保质期。

表6.ALF062和ALF021对金枪鱼保质期(活菌数)的影响(×10⁶cfu/mL)

保存时间	0天(处理前)	2天	7天	15天
					CO处理	-----	1.5±0.3	13±2.5	101±18
对照	0.08±0.12	2.4±0.8	28±4.3	756±88

实施例9 CORM-F3和CORM-A1对鲢鱼保质期的影响

将新鲜鲢鱼装入塑料箱中，加无菌生理盐水，使鲢鱼刚刚浸没在水中。实验组在塑料箱内加入CORM-F3和CORM-A1的1：1混合制剂，使水中CO的浓度为0.05mM、0.1mM.、0.2mM、0.5mM，另一组不加作为对照，贮藏于4℃冰箱中，1天、3天、7天后，测定生理盐水中的细菌总数，结果见表7。由表可见，CO处理后能显著抑制细菌的生长繁殖，浓度以0.1-0.2mM较为适宜，进一步提高CO浓度虽然对抑菌有一定效果，不但会增加成本，也有可能影响鱼肉品质(CO会与鱼肉细胞中的血红素反应生成碳氧血红素)。

表7.CORM-F3和CORM-A1鲢鱼保质期(活菌数)的影响(×10⁶cfu/mL)

保存时间	0天(处理前)	1天	3天	7天
					对照	0.15±0.3	2.3±0.7	37±2.5	189±23
0.05mM.CO处理	-----	2.1±0.6	26±2.9	120±11
					0.1mM.CO处理	-----	1.3±0.5	9.8±2.7	50±5.8
0.2mM.CO处理	-----	0.4±0.2	1.5±0.6	7.8±1.4
					0.5mM.CO处理	-----	0.3±0.2	1.3±0.4	4.5±0.5

实施例10气态CO对小龙虾保质期的影响

将新鲜小龙虾装入塑料箱中，加无菌生理盐水，使小龙虾刚刚浸没在水中。一组在塑料箱内充入CO气体，使其达到饱和(25℃时CO在水中的饱和浓度为1mM)，另一组不加，然后盖上盖子，贮存于4℃冰箱中，2天、7天、15天后，分别取样测定水中的细菌总数，结果见表8。由表可见，CO处理后能显著延长小龙虾保质期。

表8.CO气体小龙虾保质期(活菌数)的影响(×10⁶cfu/mL)

保存时间	0天(处理前)	2天	7天	15天
					CO处理	-----	6.5±0.7	18±2.2	52±4.0
对照	3.7±0.6	23±0.8	189±32	765±64

实施例11～12按下述方法处理：

新鲜水产品一式两份(大小一致，重量相等)，盛放于塑料盒内，加入无菌生理盐水，使水产品浸没在水中，其中一份充入CO或加入CO释放试剂，另一份不加处理，在相同条件下处理一定时间后取出，放于保鲜袋内，用常规法保存，保存一定时间后，注入0.2V(保鲜袋体积)的生理盐水，150rpm摇床中震摇10min，用稀释涂平板法将生理盐水中的细菌涂布在LB平板上，30℃培养48小时后计数。

实施例11 ALF021对明虾保质期的影响

将新鲜明虾装入塑料箱中，加无菌生理盐水，使明虾浸没在水中。一组在塑料箱加入CO释放制剂ALF021，使水中的CO浓度为1mM.，另一组不加。处理10分钟后，将明虾捞出，放于保鲜袋内，贮存于4℃冰箱中，2天、7天、15天后，分别取一份，注入0.2V体积(保鲜袋体积)的生理盐水，150rpm摇床中震摇10min，测定生理盐水中的细菌总数，结果见表9。

表9.ALF021对明虾保质期(活菌数)的影响(×10⁶cfu/mL)

保存时间	0天(处理前)	2天	7天	15天
					CO处理	-----	0.9±0.4	4.0±1.5	16±2.2
对照	0.2±0.1	1.7±0.5	27±3.2	106±15

实施例12气体CO对鱿鱼保质期的影响

将新鲜鱿鱼装入塑料箱中，加无菌生理盐水，一组在塑料箱内充入气体CO，使水中CO的浓度为0.2mM.，另一组不加。将鱿鱼分别浸没在水中，处理60分钟后，将两组中的鱿鱼捞起，分别放入保鲜袋中，密闭贮存于4℃冰箱，2天、7天、15天后，分别取一份，注入0.2V体积(保鲜袋体积)的生理盐水，150rpm摇床中震摇10min，测定生理盐水中的细菌总数，结果见表10。

表10.CO气体对鱿鱼保质期(活菌数)的影响(×10⁶cfu/mL)

保存时间	0天(处理前)	2天	7天	15天
					CO处理	------	0.7±0.2	6.6±2.1	47±9.0
对照	0.15±0.2	2.5±0.8	38±3.1	157±38