作为免疫调节剂的氘代化合物

文档序号：1131533 发布日期：2020-10-02 浏览：25次 >En<

阅读说明：本技术 作为免疫调节剂的氘代化合物 (Deuterated compounds as immunomodulators ) 是由樊平臣 R·M·路易 V·R·马里 R·辛格曾一斌张朋烈于 2018-10-29 设计创作，主要内容包括：提供化合物来调节C5a受体。这些化合物具有下式(I),包括其立体异构体及药学上可接受的盐,其中R1,R2和R3如本文所定义。还公开了与此类化合物的制备和使用有关的方法,以及包含此类化合物的药物组合物。<Image he="629" wi="669" file="DDA0002474404000000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>(Compounds are provided for modulating the C5a receptor. These compounds have the following formula (I), including stereoisomers and pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein R 1 ，R 2 And R 3 As defined herein. Also disclosed are methods relating to the preparation and use of such compounds, as well as pharmaceutical compositions comprising such compounds.)

作为免疫调节剂的氘代化合物

相关技术描述：

据报道，基于非肽的C5a受体拮抗剂可有效治疗大鼠的内毒素休克(Stracham,A.J等.,J.of Immunol.(2000),164(12):6560-6565)；以及在大鼠模型中治疗IBD(Woodruff,T.M等.,J of Immunol.,2003,171:5514-5520)。基于非肽的C5a受体调节剂也已经在以下专利文献中进行了描述：纽金公司(Neurogen Corporation)(例如，WO2004/043925，WO2004/018460，WO2005/007087，WO03/082826，WO03/08828，WO02/49993，WO03/084524)；Dompe S.P.A.(WO02/029187)；昆士兰大学(WO2004/100975)；和凯莫森特里克斯公司(ChemoCentryx)(WO2010/075257)。

文献中有大量实验证据表明，C5a水平升高与多种疾病和病症，尤其是自身免疫和炎性疾病和病症有关。因此，在本领域中仍然需要C5a受体(C5aR)的新的有机小分子调节剂，例如激动剂，优选拮抗剂，部分激动剂，其可用于抑制过敏毒素活性增加相关的致病性事件，例如趋化性。本发明满足了这个和其他需求。

一方面，本文提供具有式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

R¹选自CH₃，CH₂D，CHD₂或CD₃,或CD₂OH。

R²选自CH₃，CH₂D，CHD₂，CD₃，CH₂OH，CDHOH或CD₂OH。

R³为H或D；

R⁴为H或D；

m是0-6的整数；

n是0-3的整数；

o是0-4的整数；

p是0-9之间的整数；和

q是0-3的整数；

其中所述化合物具有至少一个氘原子，其存在量至少为80％。

除了本文提供的化合物之外，本发明还提供了包含一种或多种这些化合物的药物组合物，以及将所述化合物用于治疗的方法，主要用于治疗与C5a信号活性有关的疾病。

附图简要说明

不适用

本发明具体描述

I.缩写和定义

本发明中使用的术语“一”、“一个”或“该”不仅包括一个成员的诸方面，还包括多个成员的诸方面。例如的单数形式的“一”、“一个”和“该”包括复数对象，除非上下文另有明确规定。因此，例如，引用“一个细胞”还包括多个这样的细胞，而引用“这个药剂”还包括对本领域技术人员已知的一种或多种药剂，等等。

术语“大约”和“大概”通常是指由于给定测量方法的性质或精度的原因造成的一定范围内可接受的测量误差。典型的示例性误差程度在给定值或值范围的20％之内，较佳地在10％之内，更佳地在5％之内。或者，特别是在生物系统中，术语“大约”和“大概”可以表示在给定值的一个数量级内，优选地在5倍之内，更优选地在2倍之内的值。除非另有说明，否则本文给出的数值是近似的，这意味着当没有明确说明时，引用的是“大约”或“近似”。

术语“药学上可接受的盐”意指包括用相对无毒的酸或碱制备的活性化合物的盐，这取决于本文所述化合物上发现的特定取代基。当本发明的化合物含有相对碱性的官能团时，可以通过使这种化合物的中性形式与足够量的所需酸在纯净或合适的惰性溶剂中接触来获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括那些衍生自无机酸的盐，例如盐酸，氢溴酸，硝酸，碳酸，一氢碳酸，磷酸，一氢磷酸，二氢磷酸，硫酸，一氢硫酸，氢氟酸或亚磷酸等，以及衍生自相对无毒有机酸的盐，例如乙酸，丙酸，异丁酸，丙二酸，苯甲酸，琥珀酸，辛二酸，富马酸，扁桃酸，邻苯二甲酸，苯磺酸，对甲苯磺酸，柠檬酸，酒石酸，甲磺酸等。还包括衍生自氨基酸的盐，例如精氨酸盐等，以及有机酸的盐，例如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等(参见，例如，Berge，SM等，“药物盐”(Pharmaceutical Salts)，Journal of PharmaceuticalScience，1977，66，1-19)。

化合物的中性形式可以通过使盐与碱或酸接触并以常规方式分离母体化合物来再生。化合物的母体形式在某些物理性质(例如在极性溶剂中的溶解度)方面与各种盐形式不同，但是出于本发明的目的，这些盐等同于化合物的母体形式。

本发明的某些化合物可以存在非溶剂化物形式以及包括水合形式在内的溶剂化物形式。通常，溶剂化形式等同于非溶剂化形式，并包括在本发明的范围内。本发明的某些化合物可以存在多种结晶或无定形形式存在。通常，所有物理形式对于本发明预期的用途是等同的，并包括在本发明的范围内。

本发明的某些化合物具有不对称碳原子(光学中心)或双键；外消旋体，非对映异构体，几何异构体，区域异构体和单个异构体(例如，单独的对映异构体)均涵盖在本发明的范围内。

如本文中所用，画到环内部的线指的是在环上任何可用位置处的连接。

II.化合物

一方面，本发明提供具有式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

R¹选自CH₃，CH₂D，CHD₂或CD₃或CD₂OH；

R²选自CH₃，CH₂D，CHD₂，CD₃，CH₂OH，CDHOH或CD₂OH；

R³为H或D；

R⁴为H或D；

m是0-6的整数；

n是0-3的整数；

o是0-4的整数；

p是0-9的整数；和

q是0-3的整数；

其中所述化合物具有至少一个氘原子，其含量至少为80％。

在一些实施例中，提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹选自CH₃或CD₃。

在一些实施例中，提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中R²选自CH₃，CD₃，CH₂OH或CD₂OH。

在一些实施例中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中R³是D。

在一些实施例中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中R³和R⁴各自为H。

在一些实施例中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中下标n为0、1或2。

在一些实施例中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中下标o为0或1。

在一些实施例中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中下标q为0或1。

在一些实施例中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中下标p为0、1、4或9。

在一些实施例中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中下标m为0。

在一些实施例中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中下标m为0；下标n为0、1或2；下标o为0或1；下标p为0、1、4或9；下标q为0或1。

在一些实施方式中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有至少两个氘原子，对于每个氘代位置，所述氘原子的存在量至少为80％。在一些实施方式中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有至少三个氘原子，对于每个氘代位置，所述氘原子的存在量为至少80％。在一些实施方式中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有至少四个氘原子，对于每个氘代位置，所述氘原子的存在量为至少80％。在一些实施例中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有至少五个氘原子，对于每个氘代位置，所述氘原子的存在量为至少80％。

每个氘代位置的氘的相对量可以变化。在一些实施方式中，对于每个氘代位置，氘原子以至少80％，85％，90％，95％，97％或99％的量存在。在一些实施方式中，对于每个氘代位置，氘原子以至少85％的量存在。在一些实施方式中，对于每个氘代位置，氘原子以至少90％的量存在。在一些实施方式中，对于每个氘代位置，氘原子以至少95％的量存在。在一些实施方式中，对于每个氘代位置，氘原子以至少97％的量存在。在一些实施方式中，对于每个氘代位置，氘原子以至少99％的量存在。

除了以上提供的化合物外，还提供了所述化合物药学上可接受的盐。在一些实施方式中，药学上可接受的盐选自盐酸，碳酸，单氢碳酸，磷酸，单氢磷酸，二氢磷酸，乙酸，丙酸，异丁酸，丙二酸，苯甲酸，琥珀酸，辛二酸，富马酸，扁桃酸，邻苯二甲酸，苯磺酸，对甲苯磺酸，对甲苯磺酸，酒石酸，甲磺酸，精氨酸盐，葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸(的盐)。

III.药物组合物

除了以上提供的化合物，用于调节人和动物中C5a活性的组合物还典型地包含药物运载体或稀释剂。

如本文所用，术语“组合物”旨在涵盖包含指定量的指定成分的产品，以及直接或间接地由指定量的指定成分的组合产生的任何产品。“药学上可接受的”是指运载体，稀释剂或赋形剂必须与制剂的其他成分相容并且对其接受者无害。

用于施用本发明化合物的药物组合物可以方便地以单位剂型存在，并且可以通过药学和药物递送领域中众所周知的任何方法来制备。所有方法都包括使活性成分与构成一种或多种辅助成分的载体结合的步骤。通常，通过将活性成分与液体载体或细分的固体载体或者两种载体一起，均匀和紧密地结合在一起，然后如果需要，将产品制成所需形式来制备药物组合物。在药物组合物中，活性目标化合物的包含量在疾病的过程中足够产生期望效果。

包含活性成分的药物组合物可以是适合口服使用的形式，例如，如美国专利申请2002-0012680中所述的片剂，锭剂，锭剂，水性或油性悬浮液，可分散的粉剂或颗粒剂，乳剂和自乳化剂，硬或软胶囊，糖浆，e剂，溶液，颊贴，口服凝胶，口香糖，咀嚼片，泡腾粉和泡腾片。口服的组合物可以根据任何本领域已知的制造药物组合物的方法来制备，并且这种组合物可以包含一种或多种选自甜味剂，调味剂，着色剂，抗氧化剂和防腐剂的成分来制成药学上美观和可口的制剂。药片中含有活性成分与适于制造药片的无毒医学可接受辅料的混合物。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂，例如纤维素，二氧化硅，氧化铝，碳酸钙，碳酸钠，葡萄糖，甘露醇，山梨糖醇，乳糖，磷酸钙或磷酸钠；制粒和崩解剂，例如玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如PVP，纤维素，PEG，淀粉，明胶或***胶，以及润滑剂，例如硬脂酸镁，硬脂酸或滑石粉。片剂可以是未包衣的，也可以通过已知技术以肠溶或其他方式包衣，以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而在更长的时间内提供持续的作用。例如，可以使用延时材料，例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。它们也可以通过美国专利4,256,108；4,166,452和4,265,874中描述的技术进行涂覆,形成用于控制释放的渗透性治疗片。

口服制剂也可以存在硬明胶胶囊的形式，其中活性成分与惰性固体稀释剂(例如碳酸钙，磷酸钙或高岭土)混合，或存在软明胶胶囊的形式，其中活性成分与水或油介质，例如花生油，液体石蜡或橄榄油混合。另外，可用非水混溶性成分如油，来制备并用表面活性剂如单甘油二酸酯，PEG酯等来稳定化乳液。

水性悬浮液含有活性物质，与适于制备水性悬浮液的辅料混合。这样的赋形剂是悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，藻酸钠，聚乙烯吡咯烷酮，黄岑胶和***胶；分散剂或湿润剂可以是天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或烯烃氧化物与脂肪酸的缩合产物，比如说聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，比如说庚二烯-乙烯氧基鲸蜡醇，或环氧乙烷与部分衍生自脂肪酸和己糖醇的酯的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合物，例如聚乙二醇脱水山梨糖醇单油酸酯。水性悬浮液还可包含一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂以及一种或多种甜味剂例如蔗糖或糖精。

油性悬浮液可通过将活性成分悬浮在植物油(例如花生油，橄榄油，芝麻油或椰子油)或矿物油(例如液体石蜡)中来配制。油性悬浮液可包含增稠剂，例如蜂蜡，硬石蜡或鲸蜡醇。可以添加诸如上述列出的甜味剂和调味剂以提供可口的口服制剂。这些组合物可以通过添加抗氧化剂例如抗坏血酸来保存。

适用于通过加水制备水性悬浮液的可分散粉末和颗粒提供与分散剂或湿润剂，助悬剂和一种或多种防腐剂混合在一起的活性成分。合适的分散剂或湿润剂和助悬剂由上面提到的那些例子说明。还存在其他赋形剂，例如甜味剂，调味剂和着色剂。

本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油(例如橄榄油或花生油)，或矿物油(例如液体石蜡)或这些油的混合物。合适的乳化剂可以是天然存在的树胶(例如***树胶或黄芪胶)，天然存在的磷脂(例如大豆，卵磷脂，以及衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，例如脱水山梨醇单油酸酯)，以及所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物(例如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯)。乳液还可以包含甜味剂和调味剂。

糖浆剂和酏剂可以与甜味剂例如甘油，丙二醇，山梨糖醇或蔗糖一起配制。这样的制剂还可以包含缓和剂，防腐剂以及调味剂和着色剂。口服溶液可以与例如环糊精，PEG和表面活性剂的混合来制备。

药物组合物可以是无菌可注射的水性或油性悬浮液的形式。这种悬浮液可以根据已知技术使用上面已经提到的那些合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂来配制。无菌注射制剂也可以是一种在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂(例如1，3-丁二醇)中的无菌注射溶液或悬浮液。可以使用的可接受的媒介物和溶剂是水，林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌的不挥发油通常用作溶剂或悬浮介质。为此，可以使用任何温和的不挥发性油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。另外，发现脂肪酸如油酸可用于注射剂的制备中。

本发明的化合物也可以栓剂的形式给药，用于直肠给药。这些组合物可以通过将药物与合适的无刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在常温下为固体，但在直肠温度下为液体，因此将在直肠中融化以释放出药物。这样的材料包括可可脂和聚乙二醇。另外，可以通过溶液或软膏剂通过眼部给药来施用化合物。更进一步，目标化合物的透皮递送可以借助于离子电泳法等来完成。对于局部使用，可以使用含有本发明化合物的乳膏，软膏，胶冻，溶液或悬浮液等。如本文所用，局部施用还旨在包括漱口水和含漱剂的使用。

本发明的化合物也可以与载体结合，该载体是作为靶向药物载体的合适聚合物。这样的聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮，吡喃共聚物，聚羟丙基-甲基丙烯酰胺-苯酚，聚羟乙基-天冬酰胺-苯酚或被棕榈酰基残基取代的聚环氧乙烷-聚赖氨酸。此外，本发明的化合物可以与运载体偶联，该载体是一类可生物降解的聚合物，可用于实现药物的受控释放，例如聚乳酸，聚乙醇酸，聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物，聚ε-己内酯，聚羟基丁酸，聚原酸酯，聚缩醛，聚二氢吡喃，聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲嵌段共聚物。聚合物和半渗透性聚合物基质可形成为塑形的制品，例如瓣膜，支架，管材，假体等。在本发明的一个实施方式中，本发明的化合物与用于制作支架或支架移植装置的聚合物或半透性聚合物基质偶联。

本公开的药物组合物可以与一种或多种其他治疗剂一起配制。一种或多种其他治疗剂可包括皮质类固醇，类固醇，免疫抑制剂或CD 20抑制剂。在一些实施方式中，一种或多种另外的治疗剂包括奥比妥珠单抗，利妥昔单抗，奥克珠单抗，环磷酰胺，***，氢化可的松，乙酸氢可的松，乙酸可的松，替考克多酚新戊酸酯，***龙，甲基***龙，曲安西松酮，丙酮酸，曲安奈德松醇，阿米松，氟西洛尼，氟轻松，氟西诺酮，倍他米松，倍他米松磷酸钠，***，***磷酸钠，氟考酮，氢化可的松17-戊酸酯，卤代米松，阿米替松，丙酸二丙酸酯，倍氯米松，倍他米松，倍他米松，倍他米松，倍他米松-17-丙酸，己酸氟果隆，新戊酸氟果隆，乙酸氟丁二烯，氢化可的松17-丁酸，氢化可的松17-乙酰甲酸酯，氢化可的松17-丁酸，环索奈德和泼尼甲酸盐，GB-0998，免疫球蛋白，贝格洛单抗，阿法赛特(alefacept)，白细胞素，格伐珠单抗，达克珠单抗，巴利昔单抗，伊利诺姆单抗，培米诺近(perperminogene perplasmid)，丝路库单抗(sirukumab)，托西利珠单抗(tocilizumab)，克拉杂可珠单抗(clazakizumab)，美珀利珠单抗(mepolizumab)，芬戈莫德(fingolimod)，帕比司他(panobinostat)，曲西立滨(triciribine)，尼罗替尼(nilotinib)，伊马替尼(imatinib)，托法替尼(tofacitinib)，莫没尔替尼(momelotinib)，裴非西替尼(peficitinib)，意它西替尼(itacitinib)，英弗利昔单抗(infliximab)，PEG-bHb-CO，依那西普(etanercept)，伊沙佐米(ixazomib)，硼替佐米(bortezomib)，木落莫单抗(muromonab)，奥昔珠单抗(otelixizumab)，胍立莫司(gusperimus)，本妥昔单抗(brentuximab vedotin)，珀尼西莫(Ponesimod)，KRP-203，FG-3019，恩利卡生(emricasan)，促肾上腺皮质激素，伊布鲁替尼(ibrutinib)，森吕泽(cinryze)，康他司他，甲氧基聚乙二醇-红细胞生成素β，贝利木单抗(belimumab)，布里西比莫德(blisibimod)，阿塞西普(atacicept)，赛利昔布(seliciclib)，内胡利珠单抗(neihulizumab)，依维莫司(Everolimus)，西罗莫司(sirolimus),地尼白介素-毒素连接物(denileukin diftitox)，LMB-2，那他珠单抗，卡替卡可，环孢菌素，他克莫司，沃罗孢素(voclosporin)，沃罗孢素(voclosporin)，卡纳基努单抗(canakinumab)，霉酚酸酯，咪唑啉碱，CE-1145，TK-DLI，阿巴西普，贝拉西普，奥美沙坦美多西米，斯帕森它努玛(sparsentanuma)，TXA-127，BIIB-023，阿利木图珠单抗(alemtuzumab)，喷司他丁(pentostatin)，伊特利珠单抗(itolizumab)，帕立非明(palifermin)，来氟米特，PRO-140，塞尼里维罗(cenicriviroc)，福斯塔马替尼(fostamatinib)，阿尼夫罗单抗(anifrolumab)，西伐木单抗(sifalimumab)，BAX-069，BG-00011，洛斯马皮莫德(losmapimod)，QPI-1002，志贺单抗(ShigamAbs)，TZ-101，F-652，瑞帕利辛(reparixin)，拉达里辛(ladarixin)，PTX-9908，阿加尼尔(aganir)，APH-7 03，索特拉斯托林(sotrastaurin)，索特拉斯托林(sotrastaurin)，米拉妥珠单抗，SM-101，T卫(T-Guard)，APG-101，DEX-M74，心肌营养素-1，蒂普雷斯塔特(tiprelestat)，ASKP-1240，BMS-986004，HPH-116，KD-025，OPN-305，TOL-101，去纤颤肽，波马来胺，胸腺球蛋白，拉喹莫德，雷米干细胞(remestemcel-L)，马抗胸腺细胞免疫球蛋白，斯坦普尔(Stempeucel)，LIV-γ，奥塔格(Octagam)10％，t2c-001、99mTc-甲氧基异丁基异腈(sestamibi)，克拉利(Clairyg)，普索巴(Prosorba)，泼利多巴(pomalidombide)，拉普利单抗索那肽，弗拉木单抗(foralumab)，ATIR-101，BPX-501，ACP-01，ALLO-ASC-DFU，厄贝沙坦+丙帕锗，Apo细胞(ApoCell)，***二酚，RGI-2001，乳清酸，抗CD3二价抗体-白喉毒素缀合物，NOX-100，LT-1951，OMS721，ALN-CC5，ACH-4471，AMY-101，Acthar凝胶和CD4+CD25+调节性T细胞，MEDI7814，P32，P59，CCX354，CCX721，CCX9588，CCX140，CCX872，CCX598，CCX6239，CCX587，CCX624，CCX282，CCX025，CCX507，CCX430，CCX765，CCX758，CCX771，CCX662，CCX650及其组合。在某些选定的实施方式中，所述另外的药物选自奥比妥单抗，利妥昔单抗，奥克利珠单抗，环磷酰胺，***，氢化可的松，乙酸氢可的松，乙酸可的松，替考克多酚新戊酸酯，***龙，甲基***龙，曲安西松酮，曲安奈德，曲安西松酮，安西奈德，莫米甜氟喹诺酮，氟轻松，氟西诺酮，倍他米松，倍他米松磷酸钠，***，***磷酸钠，氟考酮，氢化可的松17-戊酸酯，卤代米松，阿米松酮，二丙酸酯，倍氯米松，倍他米松酮，倍他米松17-丙酸酯，己酸氟甲龙，新戊酸氟甲龙，醋酸氟丁二烯，氢化可的松17-丁酸酯，氢化可的松17-乙酰甲酸酯，氢化可的松17-丁戊酸酯，环索奈德和泼尼甲酸盐。联合疗法的进一步讨论包含在本申请的“使用方法”部分。在一些实施方式中，另外的试剂单独配制和/或以“试剂盒”形式与本文提供的氘代化合物一起配制。

IV.使用方法

本发明的化合物可以在体外和体内的多种情况下用作C5a受体的激动剂，(优选)拮抗剂，部分激动剂，反向激动剂。在一个实施方式中，本发明的化合物是C5aR拮抗剂，其可以用于体外或体内抑制C5a受体配体(例如，C5a)与C5a受体的结合。通常，此类方法包括以下步骤：在有C5a受体配体的水溶液存在下，以及在适合于配体与C5a受体结合的条件下，使C5a受体与足量的本文提供的一种或多种C5a受体调节剂接触。C5a受体可以存在于悬浮液中(例如，在分离的膜或细胞制剂中)，在培养的或分离的细胞中，或在组织或器官中。

优选地，与受体接触的C5a受体调节剂的量应足以抑制体外C5a与C5a受体的结合，如使用本文所述的放射性配体结合测定，钙动员测定或趋化测定所测量的。

在本发明的一个实施方式中，本发明的C5a调节剂用于调节，优选地用于抑制C5a受体的信号转导活性，例如在适合于调节剂与受体结合的条件下，通过使一种或多种本发明化合物与C5a受体接触(体外或体内)来调节。该受体可以存在于溶液或悬浮液中，在培养或分离的细胞制品中或在患者体内。信号转导活性的任何调节可通过检测对钙离子钙动员的作用或通过检测对C5a受体介导的细胞趋化作用来评估。通常，有效量的C5a调节剂是在钙动员测定中足以体外调节C5a受体信号转导活性或在迁移测定中足以调节C5a受体介导的细胞趋化性的量。

当本发明化合物用于抑制C5a受体介导的细胞趋化性，优选白细胞(例如，中性粒细胞)趋化性时，在体外趋化性测定中，此类方法包括将白细胞(尤其是灵长类白细胞，尤其是人白细胞)与一种或多种本发明的化合物接触。优选地，该浓度足以在体外趋化性测定中抑制白细胞的趋化性，从而如上所述，在对照测定中观察到的趋化性水平显著高于在其中已经添加了本发明的化合物的测定中观察到的趋化性水平。

在另一个实施方式中，本发明的化合物还可以用于治疗患有对C5a受体调节有响应的病症的患者。如本文所用，术语“治疗”或“治疗方法”涵盖疾病改善治疗和对症治疗两者，两者中任一种都是可以预防性的(即，在症状发作之前，以预防，延迟或减轻症状的严重性)或可以治疗的(即在症状发作后，以减轻症状的严重程度和/或持续时间)。如本文所用，如果对C5a受体活性的调节导致C5a受体的不适当活性减少，则认为该病症“对C5a受体调节有反应”。如本文所用，术语“患者”包括灵长类动物(特别是人)，驯养的伴生动物(例如狗，猫，马等)和家畜(例如牛，猪，羊等)，利用本文所述的剂量。

可以通过C5a调节治疗的疾病：

自身免疫性疾病-例如，类风湿性关节炎，系统性红斑狼疮，格林-巴利综合征，胰腺炎，狼疮肾炎，狼疮肾小球肾炎，牛皮癣，克罗恩病，血管炎，肠易激综合征，皮肌炎，多发性硬化症，支气管炎，沉积病，天疱疮，类天疱疮，硬皮病，重症肌无力，自身免疫性溶血和血小板减少症，古德帕斯丘综合征(以及相关的肾小球肾炎和肺出血)，C3肾小球病，C3肾小球肾炎，膜化增生性肾小球肾炎，川崎病，IGs肾病，免疫性血管炎，组织移植排斥反应，移植物抗宿主病，移植器官超急性排斥；等等。

炎症性疾病和相关病症-例如，中性粒细胞减少症，败血症，败血性休克，阿尔茨海默氏病，多发性硬化症，中性粒细胞增多症，中风，炎症性肠病(IBD)，与严重烧伤相关的炎症，肺损伤和局部缺血再灌注损伤，骨关节炎以及急性(成人)呼吸窘迫综合征(ARDS)，慢性肺阻塞性疾病(COPD)，全身性炎症反应综合征(SIRS)，特应性皮炎，牛皮癣，慢性荨麻疹和多器官功能障碍综合征(MODS)，溶血性***综合征，化脓性汗腺炎和非典型溶血性***综合征(aHUS)。还包括与以下相关的病理性后遗症：胰岛素依赖型糖尿病(包括糖尿病性视网膜病)，狼疮肾病，海曼肾炎，膜性肾炎和其他形式的肾小球肾炎，接触敏感性反应以及血液与可引起补体激活的人造表面接触引起的炎症，例如在体外血液循环期间发生(例如，血液透析期间或通过心肺机，例如与诸如冠状动脉旁路移植术或心脏瓣膜置换术等血管外科手术相关)，或者与其他人造血管或容器表面(例如心室辅助设备，人造心脏机器，输血管，血液存储袋，血浆置换，血小板置换等)的接触相关联。还包括与缺血/再灌注损伤有关的疾病，例如由包括实体器官移植在内的移植，以及诸如缺血再灌注损伤，缺血性结肠炎和心脏缺血等综合征引起的疾病。本发明的化合物还可用于治疗与年龄有关的黄斑变性(Hageman等，P.N.A.S.102:7227-7232,2005)).

心血管和脑血管疾病-例如，心肌梗塞，冠状动脉血栓形成，血管闭塞，手术后血管再闭塞，动脉粥样硬化，外伤性中枢神经系统损伤和局部缺血性心脏病。在一个实施方式中，可以将有效量的本发明化合物给予有心肌梗塞或血栓形成风险的患者(即，具有一种或多种公认的心肌梗塞或血栓形成危险因素，例如，但不限于肥胖，吸烟，高血压，高胆固醇血症，心肌梗塞或血栓形成的既往或遗传史)，以降低心肌梗塞或血栓形成的风险。

肿瘤性疾病或失调-例如，黑色素瘤，肺癌，淋巴瘤，肉瘤，癌，纤维肉瘤，脂肪肉瘤，软骨肉瘤，成骨肉瘤，血管肉瘤，***肉瘤，滑膜瘤，间皮瘤，脑膜瘤，白血病，淋巴瘤，淋巴瘤，白血病鳞状细胞癌，基底细胞癌，腺癌，***状癌，囊腺癌，支气管癌，肾细胞癌，肝细胞癌，移行细胞癌，绒毛膜癌，***瘤，胚胎癌，肾母细胞瘤，多形性腺瘤，肝细胞***状瘤，肾小管腺瘤，膀胱腺瘤，***状瘤，腺瘤，平滑肌瘤，横纹肌瘤，血管瘤，***瘤，骨瘤，软骨瘤，脂肪瘤和纤维瘤。

血管炎-血管性疾病的特征是血管发炎。白细胞的渗透导致血管壁的破坏，而补体途径被认为在引发白细胞迁移以及在炎症部位表现出的最终损害中起主要作用(血管炎，第二版，由Ball and Bridges编辑，牛津大学出版社，第47-53页，2008年)。本发明提供的化合物可用于治疗白细胞性血管炎，抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性血管炎，免疫性血管炎韦格纳肉芽肿病，显微性多血管炎，变应性肉芽肿性血管炎，过敏性紫癜性肾炎，结节性多发性肾炎，快速进展性肾小球炎(RPGN)，冰球蛋白血症，巨细胞动脉炎(GCA)，贝塞特氏病和高安动脉炎(TAK)。

HIV感染和艾滋病-本文提供的C5a受体调节剂可用于抑制HIV感染，延缓AIDS的进展或减轻症状或HIV感染和艾滋病的严重程度。

神经退行性疾病和相关疾病-在其他方面，本文提供的C5a拮抗剂可用于治疗与心肺旁路手术和相关程序有关的阿尔茨海默病，多发性硬化和认知功能下降。

在本发明的一个实施方式中，本发明的化合物可以用于治疗选自下组的疾病：败血症(和相关疾病)，COPD，类风湿性关节炎，狼疮性肾炎或多发性硬化症。

本文提供的治疗方法通常包括向患者施用有效量的一种或多种本文提供的化合物。合适的患者包括患有或易受(即，预防性治疗)本文所鉴定的病症或疾病的那些患者。如本文所述的用于治疗的典型患者包括哺乳动物，特别是灵长类动物，尤其是人类。其他合适的患者包括驯养的陪伴动物，例如狗，猫，马等，或家畜，例如牛，猪，绵羊等。

通常，本文提供的治疗方法包括向患者施用有效量的一种或多种本文提供的化合物。在一个优选的实施方式中，本发明的化合物优选经口服或局部施用于患者(例如，人)。有效量可以是足以调节C5a受体活性和/或足以降低或减轻患者出现的症状的量。优选地，所施用的量足以产生足够高的化合物血浆浓度(或其活性代谢产物，如果该化合物是前药)，从而可检测地体外抑制白细胞(中性粒细胞)的趋化性。治疗方案可能会具体取决于所使用的化合物和要治疗的特定疾病而有所不同；对于大多数疾病的治疗，优选每天给药4次或更少的频率。通常，更优选每天2次的给药方案，特别优选每天给药一次。但是，应当理解，任何特定患者的具体剂量水平和治疗方案将取决于多种因素，包括所用具体化合物的活性，年龄，体重，总体健康状况，性别，饮食，服用时间等，给药途径，***率，药物组合(即，向患者施用的其他药物)和正在治疗的特定疾病的严重程度，以及开药医生的判断。通常，优选使用足以提供有效治疗的最小剂量。通常可以使用适合于被治疗或预防的疾病的医学或兽医标准来监测患者的治疗效果。

每公斤体重每天约0.1mg至约140mg的剂量水平可用于治疗或预防涉及致病性C5a活性的疾病(每人每天约0.5mg至约7g)。可与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量将根据所治疗的宿主和特定的给药方式而变化。剂量单位形式通常将包含约1mg至约500mg的活性成分。对于口服，经皮，静脉内或皮下给药的化合物，优选施用足够量的化合物以达到5ng(毫微克)/mL-10μg(微克)/mL血清的化合物血清浓度，更优选地施用足够的化合物使得化合物血清浓度达到20ng-1μg/ml血清，最优选地，应给予足以使化合物血清浓度达到50ng/ml-200ng/ml血清的化合物。为了直接注射到滑膜中(用于治疗关节炎)，应给予足够的化合物以达到约1微摩尔的局部浓度。

给药频率还可以根据所用化合物和所治疗的特定疾病而变化。然而，对于大多数疾病的治疗，优选每天4次，每天3次或更少的剂量方案，特别优选每天一次或每天2次的剂量方案。然而，应理解，任何特定患者的具体剂量水平将取决于多种因素，包括所用具体化合物的活性，年龄，体重，总体健康，性别，饮食，给药时间，途径给药，***率，药物组合(即向患者施用的其他药物)，正在治疗的特定疾病的严重程度以及其他因素，包括开药医生的判断。

联合疗法

本发明公开的化合物可以与一种或多种其他治疗剂组合使用，所述治疗剂用于治疗，预防，抑制或改善本发明的化合物和组合物有用的疾病或病状。可以通过其通常使用的途径和量来同时或相继地施用本发明的化合物或组合物与这样的一种或多种另外的治疗剂。当本发明的化合物或组合物与一种或多种其他药物同时使用时，除了本发明的化合物或组合物之外，还优选包含此类其他药物的药物组合物。因此，本发明的药物组合物包括除本发明的化合物或组合物之外还包含一种或多种其他活性成分或治疗剂的那些。

可以与本发明的化合物或组合物组合的一种或多种其他治疗剂的实例，其可以单独施用或以同一药物组合物施用，包括但不限于：皮质类固醇，类固醇，免疫抑制剂，免疫球蛋白G激动剂，二肽基肽酶IV抑制剂，淋巴细胞功能抗原3受体拮抗剂，白细胞介素2配体，白细胞介素1β配体抑制剂，IL-2受体α亚基抑制剂，HGF基因刺激剂，IL-6拮抗剂，IL-5拮抗剂，Alpha 1抗胰蛋白酶刺激剂，***素受体拮抗剂，组蛋白脱乙酰基酶抑制剂，AKT蛋白激酶抑制剂，CD20抑制剂，Abl酪氨酸激酶抑制剂，JAK酪氨酸激酶抑制剂，TNFα配体抑制剂，血红蛋白调节剂，TNF拮抗剂，蛋白酶体抑制剂，CD3调节剂，Hsp 70家族抑制剂，免疫球蛋白激动剂，CD30拮抗剂，微管蛋白拮抗剂，鞘氨醇-1-磷酸受体1激动剂，***生长因子配体抑制剂，胱天蛋白酶抑制剂，肾上腺皮质营养激素配体，Btk酪氨酸激酶抑制剂，补体C1s亚组分抑制剂，***受体激动剂，B淋巴细胞刺激素配体抑制剂，细胞周期蛋白依赖性激酶2抑制剂，P-选择素糖蛋白配体1刺激物，mTOR抑制剂，延伸因子2抑制剂，细胞粘附分子抑制剂，XIII因子激动剂，钙调神经磷酸酶抑制剂，免疫球蛋白G1激动剂，肌苷单磷酸脱氢酶抑制剂，补体C1s亚组分抑制剂，胸苷激酶调节剂，细胞毒性T淋巴细胞蛋白-4调节剂，血管紧张素II受体拮抗剂，血管紧张素II受体拮抗剂，TNF超家族受体12A拮抗剂，CD52拮抗剂，腺苷脱氨酶抑制剂，T细胞分化抗原CD6抑制剂，FGF-7配体，二氢乳清酸酯脱氢酶抑制剂，Syk酪氨酸激酶抑制剂，干扰素I型受体拮抗剂，干扰素α配体抑制剂，巨噬细胞迁移抑制因子抑制剂，整联蛋白α体抑制剂-6拮抗剂，半胱氨酸蛋白酶刺激剂，p38MAP激酶抑制剂，TP53基因抑制剂，志贺样毒素I抑制剂，岩藻糖基转移酶6刺激剂，白介素22配体，IRS1基因抑制剂，蛋白激酶C刺激物，蛋白激酶Cα抑制剂，CD74拮抗剂，免疫球蛋白γFc受体IIB拮抗剂，T细胞抗原CD7抑制剂，CD95拮抗剂，N乙酰甘露糖胺激酶刺激剂，心肌营养素1配体，白细胞弹性蛋白酶抑制剂，CD40配体受体拮抗剂，CD40配体调节剂，IL-17拮抗剂，TLR-2拮抗剂，甘露聚糖结合凝集素丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)抑制剂，B因子抑制剂，D因子抑制剂，C3aR调节剂，C5aR2调节剂，T细胞受体拮抗剂，趋化因子受体，尤其是CXCR1，CXCR2，CXCR3，CXCR4，CXCR7，CCR1，CCR2，CCR3，CCR4，CCR5，CCR7，CCR7，CCR9，CX3CR1和CXCR6的拮抗剂，及它们的组合。在一些实施方式中，其他试剂选自：(a)VLA-4拮抗剂，(b)类固醇和皮质类固醇，例如倍氯米松，倍他米松(包括倍他米松磷酸钠，倍他米松戊酸酯，倍他米松二丙酸酯)***，***龙，甲基***龙，莫米松，***(包括***钠)(包括***)氢化可的松(包括醋酸可的松)氢化可的松(包括醋酸氢化可的松，氢化氢化可的松17-戊酸酯，氢化氢化可的松17-丁酸酯，氢化可的松17-乙酰甲酸酯，氢化可的松17-丁酸酯)，布***，地松尼，氟西可尼德(包括氟轻松)，曲安奈德(包括曲安奈德和曲安奈德醇)，替考特洛尔(包括替考索特尔新戊酸酯)，氟可龙(包括氟可龙己酸酯和氟可龙新戊酸酯)，安西奈德，哈西奈德，卤米松，醋酸氟泼尼定，沙美特罗，沙美特罗，沙丁胺醇，环索奈德，福美特罗，阿氯米松(包括阿氯米松双丙酸酯)，泼尼卡酯特，氯倍他松(包括氯倍他酮17-丁酸酯)，氯倍他索(包括氯倍他索17-丁酸酯)；(c)免疫抑制剂，例如环孢菌素(环孢菌素A，)，他克莫司(FK-506，)，雷帕霉素(西罗莫司，

)和其他FK-506型免疫抑制剂，以及霉酚酸，例如霉酚酸酯(CellCept8)；(d)抗组胺药(H1-组胺拮抗剂)，如溴苯那敏，氯苯那敏，右氯苯那敏，三苯吡啶，氯马斯汀，苯海拉明，二苯并吡喃，三苯胺，羟嗪，甲哒嗪，异丙嗪，三甲泼拉嗪，阿扎他定，赛庚啶，蒽唑啉，非那明吡咯胺，阿司咪唑，特非那定，氯雷他定，西替利嗪，非索非那定，去甲乙氧基氯雷他定等；(e)非甾体类抗哮喘药(例如，特布他林，间苯肾上腺素，非诺特罗，异麻黄碱，沙丁胺醇，比妥特罗和吡伯特罗)，茶碱，克罗莫林钠，阿托品，异丙托溴铵，白三烯拮抗剂(例如，扎夫鲁司特，孟鲁司特，普鲁司特，普鲁司特，普鲁司特，SKB-106,203)，白三烯生物合成抑制剂(齐留通，BAY-1005)；(f)非甾类抗炎药(NSAID)，例如丙酸衍生物(例如，阿莫洛芬，苯诺沙普芬，布氯酸，卡普芬，芬布芬，芬诺洛芬，氟洛芬，氟比洛芬，布洛芬，吲哚洛芬，酮洛芬，尼洛芬，阿普森，丙戊芬，舒普洛芬，噻洛芬酸和替沙洛芬)，乙酸衍生物(例如吲哚美辛，阿西美辛，阿氯芬酸，克利达酸，双氯芬酸，芬氯芬酸，芬克唑酸，芬太尼，呋喃芬那酸，异丁芬酸，伊索克酸，奥克品酸(oxpinac)，舒林酸，硫平酸托美汀、齐多美辛和佐美哌酸钠)，芬那酸衍生物(例如氟芬那酸，甲氯芬那酸，甲芬那酸，硝氟那酸和托芬那酸)，联苯羧酸衍生物(例如二氟尼柳和氟苯柳)，昔康类(例如异昔康，吡罗昔康，苏多昔康和替诺昔康)，水杨酸盐(例如，乙酰水杨酸和柳氮磺吡啶)和吡唑啉酮(例如，阿帕酮，苯哌啶酮，非哌酮，莫非丁酮，氧苯丁酮和苯丁氮酮)；(g)环氧合酶2(COX-2)抑制剂，例如塞莱昔布和罗非昔布(h)IV型磷酸二酯酶抑制剂(PDE IV)；(i)金化合物，例如金诺芬和金硫葡糖，(j)依那西普(Enbre10)，(k)环磷酰胺，(l)抗体疗剂，例如莫罗单抗(OKT3)，达克珠单抗巴利昔单抗和英夫利昔单抗

(m)靶向CD20的抗体疗剂，例如奥滨尤妥珠单抗，利妥昔单抗或奥瑞珠单抗；(n)化疗药物，例如蒽环类药物(例如，柔红霉素(道诺霉素；红霉素)，阿霉素，表柔比星，伊达比星和缬卢比)，米托蒽醌和匹沙酮；铂基药物(例如，“顺铂，卡铂，奥沙利铂，沙特铂，吡铂，尼达铂，三铂和脂铂)；他莫昔芬及其代谢产物，例如4-羟基他莫昔芬(阿莫西芬)和N-去甲基-4-羟基他莫昔芬(内托芬)；紫杉烷类如紫杉醇(紫杉醇)和多西紫杉醇；烷基化剂(氮芥，例如甲氧乙胺(HN2)，环磷酰胺，异环磷酰胺，美法仑(L-肌溶素)和苯丁酸氮芥)；亚乙基亚胺和甲基三聚氰胺(例如六甲基三聚氰胺，硫替太巴，烷基磺酸盐(例如白消安)，亚硝基脲(例如卡马汀(BCNU)，洛莫司汀(CCNLJ)，司马汀(甲基-CCN-U)和链脲佐菌素(链脲霉素)和三氮烯，例如氮烯咪胺(DTIC；二甲基三氮烯咪唑-羧酰胺))；抗代谢物(例如叶酸类似物，例如甲氨蝶呤(甲虫蝶呤)，嘧啶类似物，例如氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶；5-FU)，氟尿苷(氟脱氧尿苷；FUdR)和阿糖胞苷(胞嘧啶***糖苷)，以及嘌呤类似物和相关药物抑制剂，例如巯基嘌呤(6-巯基嘌呤；6-MP)，硫代鸟嘌呤(6-硫代鸟嘌呤；6-TG)和喷司他丁(2-脱氧柯福霉素)；(o)趋化因子受体，尤其是CXCR1，CXCR2，CXCR3，CXCR4，CXCR7，CCR1，CCR2，CCR3，CCR4，CCR5，CCR7，CCR9，CX3CR1和CXCR6的其他拮抗剂。

在一些实施方式中，另外的治疗剂选自CCX354，CCX721，CCX9588，CCX140，CCX872，CCX598，CCX6239，CCX587，CCX624，CCX282，CCX025，CCX507，CCX430，CCX765，CCX758，CCX771，CCX662或CCX650及其组合。

被治疗的疾病或病症将确定最适合与本发明化合物组合施用的其他一种或多种治疗剂–这种确定可以由本领域技术人员进行。

本发明化合物与第二活性成分的重量比可以变化，并且取决于每种成分的有效剂量。通常，将使用每种成分的有效剂量。因此，例如，当本发明的化合物与NSAID组合时，本发明的化合物与NSAID的重量比通常为约1000∶1至约1∶1000，优选约200∶1至约1：200。本发明化合物和其他活性成分的组合通常也将在上述范围内，但是在每种情况下，应使用每种活性成分的有效剂量。

非医药应用

在本发明的另一方面，本发明的化合物可以用于多种非药物的体外和体内应用中。例如，本发明的化合物可以被标记并用作用于检测和定位C5a受体的探针(细胞制品或组织切片样品)。本发明的化合物还可以用作C5a受体活性测定中的阳性对照，即确定候选试剂与C5a受体结合能力的标准，或用作正电子发射断层扫描(PET)成像的放射性示踪剂或用于单光子发射计算机断层扫描(SPECT)。此类方法可用于表征活体受试者中的C5a受体。例如，可使用多种众所周知的技术中的任何一种来标记C5a受体调节剂(例如，用放射性核素(例如氚)进行放射性标记)，并与样品一起孵育适当的孵育时间(首先测定结合的时间过程)。孵育后，去除未结合的化合物(例如，通过洗涤)，并使用适合于所用标记的任何方法检测结合的化合物(例如，放射自显影或闪烁计数放射性标记化合物的方法；可以使用光谱学方法检测发光基团和荧光基团)。作为对照，可以以相同的方式处理含有标记的化合物和更多(例如，大10倍)的未标记化合物的匹配样品。与对照相比，测试样品中残留的可检测标记物数量更多，表明样品中存在C5a受体。可以按照Kuhar在《药理学现行规程》(1998)JohnWiley&Sons，纽约，8.1.1至8.1.9节中的描述，进行检测分析，包括在培养的细胞或组织样品中C5a受体的放射自显影(受体定位)。

本文提供的化合物也可以在多种众所周知的细胞分离方法中使用。例如，调节剂可以与组织培养板或其他支持物的内表面连接，用作亲和配体，用于体外固定并由此分离C5a受体(例如，分离表达受体的细胞)。在一个优选的应用中，使与荧光标记物例如荧光素连接的调节剂与细胞接触，然后通过荧光激活细胞分选术(FACS)对其进行分析(或分离)。

V.实施例

提供以下实施例以举例说明，但不限制要求保护的发明。

下面使用的试剂和溶剂可以从商业渠道获得，例如奥尔德里奇化学公司(美国威斯康星州密尔沃基)。¹H-NMR光谱记录在Varian Mercury 400MHz NMR光谱仪上。相对于TMS提供了显著的峰，并按以下顺序列出：多重性(s，单峰；d，双峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰)和质子数。质谱结果报告为质量与电荷之比，然后是每个离子的相对丰度(在括号中)。在实施例中，报告了包含最常见原子同位素的M+H(或，如上所述，M-H)离子的单个m/e值。在所有情况下，同位素模式均符合预期的公式。使用HP1100HPLC在Hewlett-Packard MSD电喷雾质谱仪上进行电喷雾电离(ESI)质谱分析，以进行样品输送。通常，将分析物溶解在0.1mg/mL的甲醇中，并将其中的1微升和输送溶剂一起注入质谱仪中，质谱仪从100到1500道尔顿进行扫描。使用乙腈/水和1％甲酸作为输送溶剂，所有化合物可以在正ESI模式中分析。使用乙腈/水中的2mM NH₄OAc作为传输系统，下面提供的化合物也可以在阴性ESI模式下进行分析。

在实施例和整个说明书中使用了以下缩写：mL，毫升；毫摩尔；乙醇，乙醇；EtOAc，乙酸乙酯；EtON，乙醇钠；THF，四氢呋喃；TLC，薄层色谱法；MeOH，甲醇。

使用本领域技术人员已知的多种反应，本发明范围内的化合物可以如下所述合成。本领域技术人员还将认识到，可以采用替代方法来合成本发明的目标化合物，并且本文中描述的方法不是穷举性的，但是确实提供了广泛适用的和实用的目标化合物的途径。。

该专利要求保护的某些分子可以存在不同的对映体和非对映体形式，并且要求保护这些化合物的所有此类变体。

本文中对用于合成关键化合物的实验程序的详细描述使得分子被识别它们的物理数据以及与它们相关的结构描绘所描述。

本领域技术人员还将认识到，在有机化学的标准处理程序中，经常使用酸和碱。如果母体化合物的盐具有必要的固有酸度或碱性，则有时会在本专利中所述的实验步骤中产生母体化合物的盐。

一些起始原料和中间体根据WO 2010/075257和US20160090357中提供的方法来制备，其通过引用并入本文。

中间体：

2-氟-6-(甲基-d₃)-苯甲酰氯的合成

步骤a:在氮气下，向0℃的2-氨基-2-甲基-1-丙醇(10.1g，113.3mmol)的CH₂Cl₂(75mL)溶液中滴加2,6-二氟苯甲酰氯(10.0g，56.6mmol)的CH₂Cl₂(50mL)溶液。然后将反应混合物升温至室温并搅拌16小时。反应混合物用H₂O稀释，水相用CH₂Cl₂萃取，经Na₂SO₄干燥，并浓缩。将残余物通过用己烷研磨纯化，得到白色固体状的2,6-二氟-N-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-苯甲酰胺。

步骤b：在0℃下，向搅拌的2，6-二氟-N-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺(6.0g，26.2mmol)的CH₂Cl₂(30mL)溶液中加入SOCl₂(4.9g，41.9mmol)。使反应混合物升温至室温，并搅拌6小时。将反应混合物浓缩并将残余物用***研磨。将滤饼溶于H₂O中，并用6NNaOH水溶液碱化。混合物用CH₂Cl₂萃取。合并有机相，经Na₂SO₄干燥，浓缩，得到白色固体状的2-(2,6-二氟苯基)-4,5-二氢-4,4-二甲基恶唑。

步骤c：向冰浴冷却的2-(2,6-二氟苯基)-4,5-二氢-4,4-二甲基恶唑(1.5g，7.1mmol)的无水THF(30mL)溶液中，滴加1MCD₃MgI溶液在THF(20.6mL，20.6mmol)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌1h，然后除去冰浴，并将反应混合物在室温搅拌24h。反应完成后，将混合物用饱和NH₄Cl促灭，并用EtOAc萃取。有机层用H₂O，盐水洗涤，并经Na₂SO₄干燥。将溶液过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(在己烷中0至50％EtOAc)将残余物纯化，得到白色固体的2-(2-氟-6-(甲基-d₃)-苯基)-4,4-二甲基-4，5-二氢恶唑。

步骤d：搅拌2-(2-氟-6-(甲基-d₃)-苯基)-4,4-二甲基-4,5-二氢恶唑(700mg，3.31mmol)在乙腈(5mL)中的溶液，并加入碘甲烷(1.41g，9.93mmol)。将反应混合物加热回流6小时。搅拌反应混合物，使其冷却至室温过夜。浓缩反应混合物，残余物用***研磨，过滤。将固体溶于等份的20％NaOH和甲醇(5mL)中，加热回流6小时。将反应混合物冷却至室温，真空除去有机溶剂，并将水相用EtOAc萃取以除去副产物。然后将水层用2N HCl(pH＝1)酸化，并用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到2-氟-6-(甲基-d₃)-苯甲酸。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.25-7.37(m，1H)，7.03(dd，J＝0.8，7.4Hz，1H)，6.96-7.02(m，1H)MS：(ES)C₈H₄FD₃O₂[M+H]⁺计算的m/z为158.3，实测值为158.3。

步骤e：在0℃下向装有2-氟-6-(甲基-d ₃)苯甲酸(0.45g，2.84mmol)和无水二氯甲烷(15mL)的50mL圆底烧瓶中加入草酰氯(0.72g，滴加5.69mmol)，5分钟。将反应混合物在室温搅拌16小时。反应完成后，真空除去溶剂，得到2-氟-6-甲基苯甲酰氯，其无需进一步纯化即可直接用于下一步。

2-氟-6-甲基苯甲酰氯-4-d

步骤a：于室温下向4-溴-2-氟-6-甲基苯甲酸(0.5g，2.14mmol)和K₂CO₃(0.35g，2.57mmol)在D₂O(8mL)中的混合物中添加10％Pd-C(150mg，氘气气氛下，在CD₃OD中预洗涤)。将所得混合物在氘气氛围(气球压力)下搅拌过夜。通过硅藻土过滤反应混合物，首先用Et₂O萃取含水滤液，以除去副产物，然后用2N HCl酸化至pH 1。用EtOAc萃取水层，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物在真空下干燥2小时，以得到2-氟-6-(甲基苯甲酸-4--d)酸。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.04(br，s，1H)，6.97(d，J＝9.8Hz，1H)，2.4(s，3H)。MS:(ES)C₈H₆DFO₂[M+H]⁺计算的m/z为156.1，实测值为156.1

步骤b：在0℃下，向装有2-氟-6-(甲基苯甲酸-4-d)酸(0.27g，1.73mmol)和无水二氯甲烷(6mL)的50mL圆底烧瓶中，滴加草酰氯(0.54g，4.32mmol)，5分钟。将反应混合物在室温搅拌16小时。反应完成后，减压除去溶剂，并将残余物在真空下干燥20分钟，得到2-氟-6-甲基苯甲酰氯-4-d，将其直接用于实施例3而无需进一步纯化。

实施例1：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-羧酰胺

步骤a：在-10℃下，向(4-((2R，3S)-3-((4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)氨基甲酰基)哌啶-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁基酯(0.6g，1.25mmol)和的N，N-二异丙基乙胺(0.32g，2.51mmol)在CH₂Cl₂(10mL)中的搅拌溶液中加入2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰氯(220mg，1.25mmol)，并将混合物在室温下剧烈搅拌2h。完成后，将反应混合物用H₂O稀释并用CH₂Cl₂萃取。合并有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(10至60％EtOAc的己烷溶液)，得到叔丁基-(4-(((2R，3S)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰基)-3-((4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)氨基甲酰基)哌啶-2-基)苯基)氨基甲酸酯。MS:(ES)C₃₃H₃₂D₃F₄N₃O₄[M+H]⁺计算的m/z为617.3，实测值为617.3。

步骤b：向叔丁基-(4-((2R，3S)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰基)-3-((4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)氨甲酰)哌啶-2-基)苯基)氨基甲酸酯(0.40g，0.64mmol)在CH₂Cl₂(8mL)中的搅拌溶液中加入4N HCl在二恶烷(2.5mL，2.58mmol)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌3小时。完成后，将反应混合物用CH₂Cl₂稀释。有机层用饱和NaHCO₃洗涤，经Na₂SO₄,干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化(0-100％EtOAc的己烷溶液)，得到(2R，3S)-2-(4-氨基苯基)-1-(2-氟-6-甲基-d₃)-苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)-苯基)-哌啶-3-甲酰胺。MS:(ES)为C₂₈H₂₄D₃F₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z为517.2，实测值为517.2。

步骤c：室温下，将(2R，3S)-2-(4-氨基苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)-苯基)哌啶-3-甲酰胺(150mg，0.29mmol)，环戊酮(73mg，0.87mmol)，NaBH(OAc)₃(183mg，0.72mmol)和HOAc(17mg，0.29mmol)的混合物在CH₂Cl₂(4mL)中搅拌6小时。然后将混合物用饱和NaHCO₃碱化，并用CH₂Cl₂萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化(0至60％EtOAc的己烷溶液)，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)-苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS:(ES)C₃₃H₃₂D₃F₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z为585.3，实测值为585.2。

实施例2：合成(2R，3S)-2-(4-((环戊基-3,3,4,4-d₄)氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-羧酰胺

使用环戊酮-d₄和(2R，3S)-2-(4-氨基苯基)-1-(2-氟-6-甲基-d3)-苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)-苯基)-哌啶-3-甲酰胺，类似于实施例1中所述的方法制备标题化合物。MS:(ES)C₃₃H₂₈D₇F₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z为589.3，实测值为589.2。

实施例3：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基-4-d)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)-苯基)-哌啶-3-甲酰胺

步骤a：在-10℃下，向叔丁基-(4-((2R，3S)-3-((4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-氨甲酰)哌啶-2-基)-苯基)氨基甲酸酯(0.4g,0.83mmo)和N，N-二异丙基乙胺(0.21g，1.67mmol)在CH₂Cl₂(8mL)中的搅拌溶液中加入2-氟-6-甲基苯甲酰氯-4-d(0.17g，1.00mmol)。将混合物在室温下剧烈搅拌3小时。完成后，将反应混合物用H₂O稀释并用CH₂Cl₂萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(10至50％EtOAc的己烷溶液)，得到叔丁基(4-((2R，3S)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基-4-d)-3-((4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)氨基甲酰基)哌啶-2-基)苯基)氨基甲酸酯。MS:(ES)C₃₃H₃₄DF₄N₃O₄[M+H]⁺计算的m/z为615.3，实测值为615.3。

步骤b：向叔丁基(4-((2R，3S)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基-4-d)-3-((4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)氨甲酰)哌啶-2-基)苯基)氨基甲酸酯(0.45g，0.65mmol)在CH₂Cl₂(5mL)中的搅拌溶液中加入二恶烷(0.65mL，2.60mmol)中的4N HCl。将反应混合物在室温搅拌3h，然后用CH₂Cl₂稀释。有机层用饱和NaHCO₃洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化(0至100％EtOAc的己烷溶液)，得到(2R，3S)-2-(4-氨基苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基-4-d)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)-苯基)-哌啶-3-甲酰胺。MS:(ES)C₂₈H₂₆DF₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z为515.2，实测值为515.3。

步骤c：在室温下，将(2R，3S)-2-(4-氨基苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基-4-d)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺(150mg，0.29mmol)，环戊酮(73mg，0.87mmol)，NaBH(OAc)₃(153mg，0.725mmol)和HOAc(17mg，21.2mmol)的混合物在CH₂Cl₂中(5mL)搅拌5h。然后将混合物用饱和的NaHCO₃碱化并用CH₂Cl₂萃取。有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化(0至100％EtOAc的己烷溶液)，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基-4-d)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)-苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS:(ES)C₃₃H₃₄DF₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z为583.3，实测值为583.2。

实施例4：合成(2R，3S)-2-(4-((环戊基-3,3,4,4-d₄)氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基-4-d)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺

使用环戊酮-d4和(2R，3S)-2-(4-氨基苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基-4-d)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-哌啶-3-甲酰胺，类似于实施例3中所述的方法制备标题化合物。MS:(ES)C₃₃H₃₀D₅F₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z为587.3，实测值为587.3。

实施例5：合成(2R，3S)-2-(4-(((环戊基-1-d)-氨基)-苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)-苯基)-哌啶-3-羧酰胺

向(2R，3S)-2-(4-氨基苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺(125mg，0.24mmol)，环戊酮(121mg，0.73mmol)在CDCl₃(120mL)中的混合物中加入NaBD₄(60mg，0.72mmol)和AcOD(50mg，0.243mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时。然后将混合物用饱和NaHCO₃碱化，并用CH₂Cl₂萃取。分离有机层，用盐水洗涤(50mL)，用无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过反相HPLC(MeCN/H₂O，具有0.1％TFA)纯化，得到(2R，3S)-2-(4-(((环戊基-1-d))氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS:(ES)C₃₃H₃₄DF₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z为583.3，实测值为583.2。

实施例6：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-(羟甲基-d₂)-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-羧酰胺

步骤a：向装有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸(250mg，0.58mmol)在8mLCH₂Cl₂中的溶液的烧瓶中加入N，N-二异丙基乙胺(120mg，0.93mmol)和甲磺酰氯(1.1mL，0.69mmol)。在0℃下搅拌1h后，加入甲基-3-(三氟甲基)苯胺(192mg，0.87mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌2h。将反应混合物用H₂O淬灭，并用CH₂Cl₂萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(10至60％EtOAc的己烷溶液)，得到甲基4-((2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酰胺基)-2-(三氟甲基)苯甲酸酯。MS:(ES)C₃₄H₃₅F₄N₃O₄[M+H]⁺626.3计算的m/z为626.3，实测值：626.3。

步骤b：0℃下，向包含LiAlD₄(28mg，0.67mmol)的烧瓶中加入无水THF(4mL)，并将其中物质在0℃下搅拌5分钟。保持温度在0-5℃之间，将甲基4-((2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-甲酰胺)-2-(三氟甲基)苯甲酸酯(140mg，0.22mmol)在THF(2mL)中的溶液缓慢地添加到烧瓶中。将反应混合物在0℃搅拌1h，并通过逐滴添加NaOH水溶液淬灭。将混合物搅拌10分钟，并用EtOAc萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过HPLC(MeCN/H₂O，具有0.1％TFA)纯化，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-(羟甲基-d₂)-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS:(ES)C₃₃H₃₃D₂F₄N₃O₃[M+H]⁺计算得出的m/z为600.3，实测值为600.2。

实施例7：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-(甲基-d₃)-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-羧酰胺

步骤a：向3-(三氟甲基)-4-碘苯胺(180mg，0.62mmol)，(甲基-d₃₎硼酸(120mg1.88mmol)和CsF(150mg，1.56mmol)在二恶烷(3ml)中的悬浮液中加入Pd(dppf)Cl₂与二氯甲烷(52mg，0.062mmol)的络合物。将反应混合物脱气(N₂)2分钟，并在80℃下搅拌48小时。将反应混合物用EtOAc稀释，通过硅藻土过滤，用盐水洗涤，并经Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶剂，并将残余物通过硅胶快速色谱法(0至20％EtOAc的己烷溶液)纯化，得到4-(甲基-d₃)-3-(三氟甲基)苯胺。MS:(ES)C₈H₅D₃F₃N[M+H]⁺计算的m/z为179.1，实测值为179.1。

步骤b：0℃下，向(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸(100mg，0.23mmol)在CH₂Cl₂(5mL)中的搅拌溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(48mg，0.37mmol)和甲磺酰氯(34mg，0.29mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌45分钟，然后加入4-(甲基-d₃)-3-(三氟甲基)苯胺(52mg，0.29mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液，室温下再搅拌2分钟。通过滴加饱和NaHCO₃淬灭反应混合物，并用CH₂Cl₂萃取。有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化(0至50％EtOAc的己烷溶液)，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-(甲基-d₃)-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS:(ES)C₃₃H₃₂D₃F₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z为585.3，实测值为585.3。

实施例8：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d3)苯甲酰基)-N-(4的合成-甲基-3-(三氟甲基)苯基-2,6-d2)哌啶-3-羧酰胺

步骤a：向装有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)哌啶-3-羧酸乙酯的L-DTTA盐(9.12g，8.4mmol)在MTBE(14.6mL)中的溶液的小瓶中，加入碳酸钾(3.65g，26.4mmol)在H₂O(14.6mL)中的溶液，然后加入2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰氯(1.46g，8.4mmol)。将混合物在室温搅拌3小时。完成后，将混合物用EtOAc萃取。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(40％EtOAc的己烷溶液)，得到乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6)-(甲基-d₃)苯甲酰基)哌啶-3-羧酸酯。

步骤b：向装有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰基)哌啶-3-羧酸乙酯(加入100mg，0.22mmol)在DCE(1mL)中的溶液的烧瓶中，加入4-甲基-3-(三氟甲基)苯-2,6-d₂-胺(70mg，0.39mmol)，然后加入2M AlMe₃(0.39mL，0.78mmol)。将其中物质在65℃加热2小时。通过缓慢加入NaOH水溶液淬灭反应。过滤混合物，并用CH₂Cl₂洗涤固体。分离有机层，水层用EtOAc萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。粗残余物通过硅胶柱色谱法(在己烷中的40％EtOAc)纯化，然后通过HPLC纯化，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基-2,6-d₂)哌啶-3-甲酰胺。MS：(ES)C₃₃H₃₀D₅F₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z为587.3，实测值为587.3。

实施例9：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d3)苯甲酰基)-N-(4-(甲基-d3)-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺

步骤a：70℃下，将(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d3)苯甲酰基)哌啶-3-羧酸乙酯(175mg，0.384mmol)分批加入含有5mL 1M H₂SO₄水溶液的烧瓶中。另外使用2mL 1M H₂SO₄从漏斗中冲洗掉固体。将悬浮液加热至85℃，并在该温度下搅拌16小时。将反应冷却至环境温度。向该混合物中加入3mL的1.7M NaOH水溶液，然后添加20mL的MTBE和2mL的1.7M NaOH水溶液。剧烈搅拌混合物直至所有固体溶解。用MTBE萃取混合物。将有机层真空浓缩，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d ₃)苯甲酰基)哌啶-3-羧酸。MS：(ES)C₂₅H₂₆D₃FN₂O₃[M+H]⁺计算的m/z为428.2，实测为428.3。

步骤b：标题化合物使用(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d3)苯甲酰基)哌啶-3-羧酸和4-(甲基-d3)-3-(三氟甲基)-苯胺，用类似于实施例7中所述的步骤制备。MS：(ES)C₃₃H₂₉D₆F₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z为588.3，实测588.3。

实施例10：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d3)苯甲酰基)-N-(4-(羟甲基-d2)-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺

使用(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d3)苯甲酰基)哌啶-3-羧酸和4-氨基-2-(三氟甲基)苯甲酸甲酯，按照类似于实施例6中所述的步骤制备标题化合物。MS：(ES)C₃₃H₃₀D₅F₄N₃O₃[M+H]⁺计算的m/z为603.3，实测为603.3。

实施例11：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d3)苯甲酰基)-N-(4-(羟甲基)-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺

步骤a：室温下，将2M AlMe₃的甲苯溶液(0.48mL，0.98mmo)缓慢添加至乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d3)苯甲酰基)哌啶-3-羧酸盐(150mg，0.32mmol)和4-氨基-2-(三氟甲基)苯基)甲醇(120mg，0.39mmol)在CH₂Cl₂(5mL)中的溶液。将混合物加热至35-45℃，保持30h。冷却至室温后，缓慢加入1NNaOH水溶液，保持温度在15-35℃之间。过滤混合物，固体用CH₂Cl₂洗涤。分离滤液的有机层，并经Na₂SO₄干燥并过滤。在减压下除去溶剂，并将残余物在真空下干燥30分钟，无需进一步纯化即可直接用于下一步。

步骤b：向上述粗化合物在无水THF(5mL)中的溶液里加入1M TBAF的THF(1.0mL，1mmol)溶液。将所得混合物在室温搅拌2小时，并用H₂O淬灭将混合物用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并过滤。减压除去溶剂。残余物通过HPLC(MeCN/H₂O，含0.1％TFA)纯化，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰基)-N-(4-(羟甲基)-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS：(ES)C₃₃H₃₂D₃F₄N₃O₃[M+H]⁺计算的m/z为601.3，实测为601.2。

实施例12：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基-4-d)-N-(4-(羟甲基-d2)-3-(三氟甲基)-苯基)-哌啶-3-甲酰胺

步骤a：向含有8mL水和碳酸钾(0.76g，1.37mmol)的100mL烧瓶中缓慢加入乙基(2R，3S)-2-(4-((叔-丁氧基羰基)氨基)苯基)-哌啶-3-羧酸L-DTTA盐(1.5g，1.37mmol)，然后加入40mL MTBE。将内含物在15-25℃之间搅拌直至形成溶液，然后加入2-氟-6-甲基苯甲酰氯-4-d(265mg，1.51mmol)，并将内容物在20℃剧烈搅拌3h。用MTBE萃取混合物，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(己烷配制的5至60％EtOAc)，得到乙基(2R，3S)-2-(4-((叔丁氧基羰基)-氨基)-苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-哌啶-3-羧酸酯。MS：(ES)为C₂₇H₃₂DFN₂O₃[M+H]⁺计算的m/z为453.3，实测：453.3.

步骤b：(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基-4-d)哌啶-3-羧酸的制备方法与实施例9中描述的过程类似。MS：(ES)为C₂₅H₂₈DFN₂O₃[M+H]⁺计算的m/z为426.2，实测为426.2

步骤c和d：(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基-4-d)-N-(4-(羟甲基-d₂)-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺用类似于实施例10中所述的步骤制备。MS：(ES)C₃₃H₃₃D₃F₄N₃O₃[M+H]⁺计算得出的m/z为600.3，实测为600.2。

实施例13：合成(2R，3S)-2-(4-((环戊基-d9)氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺

步骤a：使用前，用CH₃OD洗涤(2R，3S)-2-(4-氨基苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺并真空干燥。向包含2.3mL CH₂Cl₂中预处理的羧酰胺(200mg，0.39mmol)的小瓶中加入环戊酮-d₈(0.10mL，1.17mmol)和乙酸-d₄(0.02mL，0.39mmol)。将该溶液在室温搅拌15分钟。在另一个小瓶中，将乙酸-d₄(0.24mL，4.19mmol)添加到包含NaBD₄(59mg，1.41mmol)的1mL CH₂Cl₂溶液中。将混合物在环境温度下搅拌30分钟以形成NaBD(OAc)₃。将新形成的NaBD(OAc)₃的浆液添加到含有羧酰胺和环戊酮的小瓶中，并将混合物在室温下搅拌16小时。用D₂O淬灭反应，并用EtOAc萃取水层。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过HPLC(MeCN/H₂O，具有0.1％TFA)纯化，得到(2R，3S)-2-(4-((环戊基-d₉)氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺(包含约20％基于MS同位素的相应d₈化合物)。MS：(ES)C₃₃H₂₆D₉F₄N₃O₂[M+H]⁺计算得出的m/z值为591.3，实测值为591.3。

实施例14：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-d-3-甲酰胺

步骤a：向在20mL MeOD中含有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)哌啶-3-羧酸乙酯(250mg，0.79mmol)的小瓶里添加甲醇钠(1.5g，27.8mmol)。将该溶液在80℃下搅°拌4小时，然后用D₂O淬灭。将混合物真空浓缩以除去有机物，并将剩余的水层用EtOAc萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以提供油状的甲基和乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)哌啶-3-羧酸3-羧酸酯3-d的混合物。

步骤b：向装有甲基和乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)哌啶-3-羧酸酯-3-d(244mg，0.77mmol)在1.6mL MTBE中的混合物的小瓶中加入固体碳酸钾(430mg，3.11mmol)在1.6mL H₂O中的溶液，然后加入2-氟-6-甲基苯甲酰氯(0.11mL，0.77mmol)。将内容物在室温搅拌1小时。完成后，将混合物用EtOAc萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残留物通过硅胶柱色谱法纯化，得到甲基和乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸酯-3-d的混合物。

步骤c：向含有甲基和乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸酯-3-d(128mg，0.28mmol)在CH₂Cl₂(0.6mL)中的混合物的烧瓶中，加入4-甲基-3-(三氟甲基)苯胺(0.05mL，0.34mmol)，然后加入2M AlMe₃的甲苯溶液(0.42mL，0.85mmol)。将内容物在40℃加热20小时。通过缓慢加入NaOH水溶液淬灭反应。过滤混合物，并用CH₂Cl₂洗涤固体。分离有机层，水层用EtOAc萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过HPLC(MeCN/H₂O，含0.1％TFA)纯化，然后通过硅胶柱色谱法(己烷配制的50％EtOAc)纯化，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-d-3-羧酰胺(约含7％的基于NMR的反式异构体)。MS：(ES)C₃₃H₃₄DF₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z值为583.3，实测值为583.2。

实施例15：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺

步骤a：向装有乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)哌啶-3-羧酸酯的L-DTTA盐(17.2g，15.9mmol)在40mLEtOAc中溶液的烧瓶里加入碳酸钾(10.9g，79mmol)在H₂O(40mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌30分钟。分离有机层和水层，并用EtOAc萃取水层。合并有机层，用Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将粗物质溶解在80mL CH₂Cl₂中，并将Boc酸酐(3.6mL，15.9mmol)添加至溶液。将该溶液在室温搅拌2小时，然后真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化，得到1-(叔丁基)3-乙基(2R，3S)-2-(4-环戊基氨基)-苯基)哌啶-1,3-二羧酸酯。

步骤b：向装有1-(叔丁基)3-乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)哌啶-1,3-二羧酸酯(5.55g，13.3mmol)在84mL CHCl₃中的烧瓶里加入N-碘代琥珀酰亚胺(2.99g，13.3mmol)。将该溶液在室温搅拌2小时，然后真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，得到1-(叔丁基)3-乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)哌啶-1,3-二羧酸酯。

步骤c：到装有1-(叔丁基)3-乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)哌啶-1,3-二羧酸酯(500mg,0.92mL)在5mL二恶烷/H₂O(4：1)中的小瓶里，加入0.92mL的4.0N的HCl二恶烷溶液。将该溶液在80℃下搅拌6小时，然后用饱和NaHCO₃缓慢淬灭。用EtOAc萃取水层。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以产生(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)哌啶-3-羧酸乙酯。

步骤d：在装有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)哌啶-3-羧酸乙酯(130mg，0.29mmol)在1mL MTBE中的溶液的小瓶里，向其中加入碳酸钾(120mg，0.87mmol)在1mL H₂O中的溶液，然后加入2-氟-6-甲基苯甲酰氯(0.05g，0.29mmol)。将内容物在室温搅拌30分钟，然后将混合物用EtOAc萃取。合并有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(30％EtOAc的己烷溶液)纯化，得到乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸酯。

步骤e：向装有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸酯(125mg，0.22mmol)在2mL乙酸-d ₄中的溶液的小瓶里，加入锌粉(185mg，2.83mmol)。将混合物在室温搅拌5小时。将内容物过滤并将滤液浓缩。将残余物在硅胶柱色谱上纯化，得到乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸酯。

步骤f：向含有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸乙酯(80mg，0.18mmol)在1mLCH₂Cl₂中的烧瓶里，加入4-甲基-3-(三氟甲基)苯胺(31mg，0.21mmol)，然后再加入2M AlMe₃的甲苯溶液(0.26mL，0.52mmol)。将内容物在40℃加热20小时。通过缓慢加入NaOH水溶液淬灭反应。过滤混合物，并用CH₂Cl₂洗涤固体。分离有机层，水层用EtOAc萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过HPLC(MeCN/H₂O，含0.1％TFA)纯化，然后进行硅胶柱色谱法纯化，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS：(ES)C₃₃H₃₄DF₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z值为583.3，实测值为583.2。

实施例16：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺

步骤a：在装有1-(叔丁基)3-乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)哌啶-1,3-二羧酸酯(500mg,0.92mmol)在乙酸-d₁(9.2mL)中的溶液的小瓶里加入锌粉(800mg，12.2mmol)。将混合物在室温搅拌30分钟。将内容物过滤并将滤液浓缩。将残余物在硅胶柱色谱上纯化(40％EtOAc的己烷溶液)，得到1-(叔丁基)3-乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)哌啶-1,3-二羧酸酯。

步骤b：向装有1-(叔丁基)3-乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)哌啶-1,3-二羧酸酯(347mg，0.83mmol)在5mL二恶烷/H₂O(4：1)中的溶液的小瓶里添加0.83mL在二恶烷中的4.0N HCl。将该溶液在室温搅拌16小时，然后在60℃加热2小时。浓缩溶液，粗物质无需进一步纯化即可使用。

步骤c：向含有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)哌啶-3-羧酸乙酯的HCl盐(150mg，0.39mmol)在MTBE(1mL)中的溶液的小瓶里，加入碳酸钾(162mg，1.17mmol)在H₂O(1mL)中的溶液，然后加入2-氟-6-甲基苯甲酰氯(67mg，0.39mmol)。将混合物在室温搅拌2h，然后将混合物用EtOAc萃取。合并有机相，用Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(40％EtOAc的己烷溶液)，得到乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸酯。

步骤d：向含有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸乙酯(124mg，0.27mmol)在CH₂Cl₂(1mL)中的烧瓶里，加入4-甲基-3-(三氟甲基)苯-2,6-d₂-胺(49mg，0.33mmol)，然后再加入2M AlMe₃的甲苯溶液(0.42mL，0.84mmol)。将内容物在40℃加热20小时。通过缓慢加入NaOH水溶液淬灭反应。过滤混合物，并用CH₂Cl₂洗涤固体。分离有机层，水层用EtOAc萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过HPLC(MeCN/H₂O，含0.1％TFA)纯化，然后进行硅胶柱色谱法纯化，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS：(ES)C₃₃H₃₂D₃F₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z值为585.3，实测为585.2。

实施例17：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-(甲基-d3)苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺

步骤a：向装有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)哌啶-3-羧酸乙酯(130mg，0.29mmol)在MTBE(1mL)中的溶液的小瓶里，加入碳酸钾(120mg，0.87mmol)在H₂O(1mL)中的溶液，然后加入2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰氯(0.10g，0.58mmol)。将内容物在室温搅拌30分钟，然后将混合物用EtOAc萃取。合并有机相，用Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(30％EtOAc的己烷溶液)，得到乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰基)哌啶-3-羧酸酯。

步骤b：向含有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰基)哌啶-3-羧酸酯(107mg，0.18mmol)在乙酸-d₄(2mL)中的小瓶里，加入锌(185mg，2.26mmol)。将混合物在室温搅拌5小时。将内容物过滤并将滤液浓缩。将残余物在硅胶柱色谱上纯化，得到乙基(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰基)哌啶-3-羧酸酯。

步骤c：向装有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-(甲基-d3)苯甲酰基)哌啶-3-羧酸乙酯(76mg，0.17mmol)在CH₂Cl₂(1mL)中的烧瓶里，加入4-甲基-3-(三氟甲基)苯胺(37mg，0.21mmol)，然后加入2M AlMe₃的甲苯溶液(0.26mL，0.52mmol)。将内容物在40℃°加热16小时。将另外的2M AlMe₃(0.05mL，0.1mmol)加入到溶液中，并将内容物在40℃加热16小时。将另一份2M AlMe₃(0.05mL，0.1mmol)加入溶液中，并将内容物在60℃再加热24小时。通过缓慢加入NaOH水溶液淬灭反应。过滤混合物，并用CH₂Cl₂洗涤固体。分离有机层，水层用EtOAc萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过HPLC(MeCN/H₂O，含0.1％TFA)纯化，然后进行硅胶柱色谱法纯化，以提供(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-(甲基-d₃)苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS：(ES)C₃₃H₃₁D₄F₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z值为586.3，实测值为586.2。

实施例18：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(3-羟基-4-(羟甲基-d2)苯基)哌啶-3-甲酰胺

步骤a：向装有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸(400mg，0.94mmol)在7mL的CHCl₃中的溶液的烧瓶里加入N-碘代琥珀酰亚胺(217mg，0.96mmol)。将该溶液在室温搅拌2h，然后真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(60％EtOAc的己烷溶液)，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸。

步骤b：向装有(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘代苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸(460mg，0.84mmol)在2mL CH₂Cl₂中的溶液的烧瓶里，加入4-氨基-2-羟基苯甲酸甲酯(220mg，1mmol)，然后加入N，N-二异丙基乙胺(0.23mL，1.3mmol)。将反应冷却至°0℃，并逐滴加入甲磺酰氯(0.8mL，1mmol)。在环境温度下搅拌1小时后，将内容物浓缩，并将粗物质通过硅胶柱色谱法(含55％EtOAc的己烷)纯化，得到甲基4-((2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-甲酰胺基)-2-羟基苯甲酸酯。

步骤c：向装有4-((2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)-3-碘代苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-甲酰胺基)-2-羟基苯甲酸酯(300mg，0.40mmol)在0.7mL乙酸-d₄中的溶液的小瓶中，加入锌(342mg，5.2mmol)。将混合物在室温搅拌3小时。将内容物过滤并将滤液浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以提供甲基4-((2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-甲酰胺基)-2-羟基苯甲酸酯。

步骤d：在0℃下，向装有4-((2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-甲酰胺基)-2-羟基苯甲酸甲酯(200mg，0.32mmol)在1.6mL THF中是溶液的小瓶里，加入LiAlD₄(28mg，0.66mmol)。将内容物在0℃下搅°拌1小时。完成后，将反应用饱和氯化铵淬灭。分离有机层和水层，并将水层进一步用EtOAc萃取。合并的有机层用Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。粗残余物通过硅胶柱色谱和HPLC(含0.1％TFA的MeCN/H₂O)纯化，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基-3-d)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(3-羟基-4-(羟甲基-d2)苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS：(ES)C₃₃H₃₂D₃F₄N₃O₃[M+H]⁺计算的m/z值为601.3，实测值为601.2。

实施例19：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基-2，6-d2)哌啶-3-甲酰胺

步骤a：向具有磁力搅拌棒的微波反应瓶中装入4-甲基-3-(三氟甲基)苯胺(500mg，2.85mmol)，D2O(4mL)和DC1(0.3mL，0.36mmol)。将小瓶加盖并密封，并在微波合成装置中在180℃下加热1h。将反应混合物用2N NaOH(5mL)处理并用EtOAc萃取。有机相用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，并过滤。减压除去溶剂，得到4-甲基-3-(三氟甲基)苯-2,6-d₂-胺，其无需进一步纯化即可直接用于下一步。MS：(ES)C₈H₇D₂F₃N[M+H]⁺178.1计算的m/z值为178.1，实测值为178.1。

步骤b：在0℃下，将甲磺酰氯(55L，0.5mmol)添加到((2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸(160mg，0.38mmol)和DIPEA(120L，0.68mmol)在CH₂Cl₂(10mL)中的溶液里。将该溶液再搅拌10分钟，然后向其中加入将4-甲基-3-(三氟甲基)苯-2,6-d₂-胺(90mg，0.5mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中溶液，再加入DIPEA(120L，0.68mmol)。在1小时的时间里使反应混合物升温至室温。将反应混合物用EtOAc稀释。有机层用NaHCO₃，盐水洗涤，经MgSO₄干燥并过滤。减压除去溶剂，并将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(5至50％EtOAc的己烷溶液)，然后通过HPLC(MeCN/H₂O，含0.1％TFA)纯化，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基-2,6-d₂)哌啶-3-甲酰胺。MS：(ES)C₃₃H₃₄D₂F₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z值584.3，实测值584.2。

实施例20：合成(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基-6-d)哌啶-3-甲酰胺

步骤a：向具有磁力搅拌棒的250mL烧瓶中加入4-甲基-3-(三氟甲基)苯胺(1.75g，10mmol)，硝酸银(1.7g，10mmol)，碘(2.54g，10mmol)和EtOH(40mL)。将反应混合物在室温搅拌1h，并通过硅藻土过滤。减压除去溶剂，并将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(2至30％EtOAc的己烷溶液)，得到2-碘-4-甲基-5-(三氟甲基)苯胺。MS：(ES)C₈H₈F₃IN[M+H]⁺301.9计算的m/z值为301.9，实测值为301.9。

步骤b：在环境温度下，将Me₃A1(0.4mL，0.8mmol，2M在甲苯中)加入2-碘-4-甲基-5-(三氟甲基)苯胺(150mg，0.5mmol)在无水二氯乙烷(2mL)中的溶液。搅拌20分钟后，加入(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-3-羧酸乙酯(100mg，0.23mmol)在无水二氯乙烷(2mL)中的溶液。将反应混合物在85℃下搅拌3小时并冷却至室温。将反应混合物用CH₂Cl₂稀释，用NaHCO₃，盐水洗涤，经MgSO₄干燥并过滤。减压除去溶剂，并将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(5至50％EtOAc的己烷溶液)，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(2-碘-4-甲基-5-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS：(ES)C₃₃H₃₅F₄IN₃O₂[M+H]⁺计算的m/z值为708.2，实测值为708.2。

步骤c：用D₂对CD₃OD(5mL)中的10％Pd/C(120mg)悬浮液脱气，然后装入D₂气球。在环境温度下搅拌1小时后，加入(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(2-碘-4-甲基-5-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺100mg，0.14mmol)在CD₃OD(5mL)中的溶液。将反应混合物在环境温度搅拌2小时，并通过硅藻土过滤。减压除去溶剂，并将残余物通过HPLC(含0.1％TFA的MeCN/H₂O)纯化，得到(2R，3S)-2-(4-(环戊基氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基-6-d)哌啶-3-甲酰胺。MS：(ES)C₃₃H₃₅DF₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z值为583.3，实测值为583.2。

实施例21：合成(2R，3S)-2-(4-((环戊基-3，3，4，4-d₄)氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺

在15分钟内，向装有苯胺(4.36g，8.5mmol)，环戊酮-3,3,4,4-d₄(2.25g，25.5mmol)和HOAc(0.49mL，8.5mmol)在CH₂Cl₂(50mL)中的溶液的烧瓶里，分批加入NaBH(OAc)₃(5.40g，25.5mmol)。将混合物在-15℃下搅拌1h。然后向混合物中添加HOAc(0.098mL，1.7mmol)，环戊酮-3,3,4,4-d₄(0.75g，8.5mmol)和NaBH(OAc)₃(0.54g，2.55mmol)。使混合物升温至室温，并再搅拌4小时。用NaHCO₃水溶液淬灭,并用CH₂Cl₂萃取。有机层经Na₂SO₄干燥，并真空浓缩。根据以下顺序纯化残留物：硅胶快速色谱法(0至90％EtOAc的己烷溶液)，从15％H₂O的EtOH中重结晶，硅胶快速色谱法(0-50％EtOAc在CH₂Cl₂中)和硅胶快速色谱法(0至90％EtOAc的己烷溶液)得到(2R，3S)-2-(4-((环戊基-3，3，4，4-d₄)氨基)苯基)-1-(2-氟-6-甲基苯甲酰基)-N-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-3-甲酰胺。MS：(ES)C₃₃H₃₁D₄F₄N₃O₂[M+H]⁺计算的m/z值为586.3，实测值为586.2。

生物实施例1

该实施例说明了与本发明特定化合物有关的生物活性的评价。

将C5aR化合物的系列稀释液或等体积的DMSO加入到新鲜抽取的人血中(EDTA作为抗凝剂)。分别地，用趋化性缓冲液稀释重组hC5a，然后将29μl稀释的趋化因子置于ChemoTX板(神经探针公司，盖瑟斯堡，马里兰州)的下部孔中。将3μm(孔径)的聚碳酸酯膜(神经探针公司，盖瑟斯堡，马里兰州)放在板上，然后将20μL的血液/化合物混合物转移到该膜的每个孔中。将板在37℃下孵化90-180分钟，然后除去聚碳酸酯膜，并将5μlDNA***剂CyQUANT(英杰公司，卡尔斯巴德，加利福尼亚州)加入下部孔中。使用Spectrafluor Plus读板仪(帝肯公司，加利福尼亚州圣何塞)测量与迁移细胞数量相对应的荧光量。

通过实施例中所述的方法制备表1中的化合物，并根据上述测定法进行评价。这些化合物的IC₅₀列于表1中：+++，IC₅₀≤100nM。

表格1

作为免疫调节剂的氘代化合物

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